CN109954009A - 一种从辣木叶中提取sod和总黄酮的联产工艺 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了从辣木叶中提取SOD和总黄酮的联产工艺。是以新鲜辣木叶为原料,经过烘干、浸提、压滤后得到滤液和滤渣,滤液经离心、分级沉淀、冷冻干燥后制得辣木叶SOD;滤渣经干燥、超声辅助乙醇提取制取辣木叶总黄酮。本发明利用等电点沉淀、乙醇分级沉淀、超声辅助提取等现代加工技术,制定出辣木叶SOD和总黄酮的联产工艺,实现了辣木叶的综合利用和高值化开发,无浪费,无污染,生产周期短,适合工业化生产。
Description
技术领域
本发明涉及生物技术领域,特别涉及到一种从辣木叶中提取SOD和总黄酮的联产工艺。
背景技术
辣木为多年生木本植物,原产于印度北部喜马拉雅山地区,是一种具有很高食用和药用价值的热带植物。大量研究证明,辣木叶含有丰富的蛋白质、总黄酮以及超氧化物歧化酶(SOD)等多种功效成分。辣木叶所含的超氧化物歧化酶(SOD)具有清除自由基、调节甲状腺素和肝脂过氧化作用。黄酮类化合物的生理活性较为广泛,具有清除自由基、抗氧化、抗癌防癌、治疗心血管病、降血糖等作用,受到医药界广泛的重视。近年来,辣木在我国广东、云南和海南等地都广为引种栽培,其相关产品的开发成为热点。但是,国内对于辣木的研究主要集中在栽培技术和营养成分分析方面,至今未见有关从辣木叶中同步提取SOD和总黄酮工艺的专利报道。
发明内容
本发明的目的正是基于上述状况而提出的一种从辣木叶中提取SOD和总黄酮的联产工艺,该工艺以丰富的辣木叶为原料,应用现代加工技术,在同一生产工艺流程中,生产出具有高附加值、高生物活性的SOD和黄酮,工艺简单,成本低,易于实施。
为实现上述目的,本发明采用以下技术方案来实现的:一种从辣木叶中提取SOD和总黄酮的联产工艺,其工艺步骤如下:
(1)取新鲜辣木叶洗净,风干后于50℃烘干,粉碎过80目,得干燥辣木叶粉,备用;
(2)取干燥辣木叶粉,加入干粉重量20倍的去离子水,在50~55℃不断搅拌,浸提3小时,压滤,分别收集滤液和滤渣;
(3)将步骤(2)所得滤液进行高速离心分离,收集上清液(Ⅰ);
(4)取步骤(3)所得上清液(Ⅰ),调整其PH值至5.0~5.2,加入其体积40-50%的预冷的95%乙醇,搅拌3分钟后,于0-4℃下静置30分钟后,高速离心,收集上清液(Ⅱ);
(5)往步骤(4)所得上清液(Ⅱ)中继续添加预冷的95%乙醇,直至达到初始上清液(Ⅰ)体积的1倍,搅拌3分钟后,于0-4℃静置30分钟,高速离心,收集沉淀物,再用去离子水溶解沉淀物,离心,收集上清液,冷冻干燥,得SOD冻干粉;
(6)取步骤(2)所得滤渣,烘干至水份含量≤15%后,加95%乙醇,在70℃超声辅助提取两次,超声频率为10-15kHz,其中一次按渣液比1:20加95%乙醇提取2小时,另一次按渣液比1:10加95%乙醇提取1小时,过滤得滤液,合并滤液,回收乙醇,减压浓缩,在50℃-60℃下真空干燥,粉碎成粉末,得辣木叶总黄酮粉。
上述步骤(3)中的高速离心分离是采用管式离心机离心,转速15000r/min,离心30min。
上述步骤(4)中的高速离心分离是采用管式离心机离心,转速10000r/min,离心30min。
上述步骤(5)中的高速离心分离是采用管式离心机离心,转速10000r/min,离心30min。
本发明的优点在于:
(1) 本发明以丰富的辣木叶为原料,应用现代加工技术,在同一生产工艺流程中,制定出联合提取辣木SOD和总黄酮的联产工艺,该联产工艺未见同类专利报道。
(2) 本发明采用等电点沉淀和乙醇分级沉淀法,将SOD从辣木叶蛋白中分离提取出来,不使用氯仿、丙酮等有毒有机溶剂,避免了环境污染和产品中有毒溶剂残留,具有生产周期短、成本低、适合工业化规模生产的特点。
(3) 本发明采用超声辅助乙醇浸提法提取辣木总黄酮,提取效率高,乙醇无毒性易回收。
(4) 本发明所获得的SOD活性高,单位酶活达到3000U/mg以上,可用于保健食品、化妆品和医药工业原料。
具体实施方式
下面例举实施例,将具体操作步骤做进一步描述:
(1)称取经过烘干、粉碎的辣木叶粉10公斤,加入200公斤的去离子水,升温至52℃,保温不断搅拌浸提,浸提3小时后将料液经板框压滤机压榨过滤(滤布100目、过滤压力0.15MPa),得到滤液167L,滤渣25公斤;
(3)将步骤(1)所得滤液用转速15000r/min的管式离心机离心30min,去沉淀物,收集上清液(Ⅰ)145 L;
(4)调整步骤(3)所得上清液(Ⅰ)PH值至5.2,加入65L经预冷的95%乙醇,搅拌3分钟后,于0-4℃下静置30分钟后,10000r/min离心30min,收集上清液(Ⅱ);
(5)往步骤(4)所得上清液(Ⅱ)中继续添加80L预冷的95%乙醇,继续搅拌3分钟后,于0-4℃静置30分钟,10000r/min离心30min,收集沉淀物,再用去离子水溶解沉淀物,3000r/min离心10分钟,收集上清液,冷冻干燥,得SOD冻干粉1.32g。经采用微量邻苯三酚法(325nm法)检测活性,SOD单位酶活性为3260U/mg;
(6)将步骤(2)所得滤渣烘干,得干渣8.6公斤,加170升95%乙醇,在70℃超声辅助提取2小时,过滤得滤液,滤渣再加90L 95%乙醇,在70℃超声辅助提取1小时,过滤得滤液,合并两次滤液,回收乙醇,减压浓缩,在50℃-60℃下真空干燥,粉碎成粉末,得辣木叶总黄酮416g,干燥辣木叶的总黄酮收得率为4.16%。
Claims (5)
1.一种从辣木叶中提取SOD和总黄酮的联产工艺,其特征在于:包括以下工艺步骤:
(1)取新鲜辣木叶洗净,风干后于50℃烘干,粉碎过80目,得干燥辣木叶粉,备用;
(2)取干燥辣木叶粉,加入干粉重量20倍的去离子水,在50~55℃不断搅拌,浸提3小时,压滤,分别收集滤液和滤渣;
(3)将步骤(2)所得滤液进行高速离心分离,收集上清液(Ⅰ);
(4)取步骤(3)所得上清液(Ⅰ),调整其PH值至5.0~5.2,加入其体积40-50%的预冷的95%乙醇,搅拌3分钟后,于0-4℃下静置30分钟后,高速离心,收集上清液(Ⅱ);
(5)往步骤(4)所得上清液(Ⅱ)中继续添加预冷的95%乙醇,直至达到初始上清液(Ⅰ)体积的1倍,搅拌3分钟后,于0-4℃静置30分钟,高速离心,收集沉淀物,再用去离子水溶解沉淀物,离心,收集上清液,冷冻干燥,得SOD冻干粉;
(6)取步骤(2)所得滤渣,烘干至水份含量≤15%后,加95%乙醇,在70℃超声辅助提取两次,超声频率为10-15kHz,其中一次按渣液比1:20加95%乙醇提取2小时,另一次按渣液比1:10加95%乙醇提取1小时,过滤得滤液,合并滤液,回收乙醇,减压浓缩,在50℃-60℃下真空干燥,粉碎成粉末,得辣木叶总黄酮粉。
2.根据权利要求1所述的联产工艺,其特征在于:步骤(3)中的高速离心分离为采用管式离心机离心,转速15000r/min,离心30min。
3.根据权利要求1所述的联产工艺,其特征在于:步骤(4)中的高速离心分离为采用管式离心机离心,转速10000r/min,离心30min。
4.根据权利要求1所述的联产工艺,其特征在于:步骤(5)中的高速离心分离为采用管式离心机离心,转速10000r/min,离心30min。
5.根据权利要求1所述的联产工艺,其特征在于:步骤(1)中所述新鲜辣木叶为采摘后3小时内的辣木枝叶。
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Cited By (2)
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CN110721134A (zh) * | 2019-11-29 | 2020-01-24 | 广州环亚化妆品科技有限公司 | 一种从辣木籽中提取酪氨酸酶抑制剂的方法、由其制得的酪氨酸酶抑制剂及其应用 |
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