CN111170995A

CN111170995A - Ask1抑制剂及其应用

Info

Publication number: CN111170995A
Application number: CN201811328668.3A
Authority: CN
Inventors: 王听中; 刘斌
Original assignee: Xuanzhu Pharma Co Ltd
Current assignee: Shandong Xuanzhu Pharma Co Ltd
Priority date: 2018-11-09
Filing date: 2018-11-09
Publication date: 2020-05-19

Abstract

本发明涉及医药技术领域，具体涉及如式(I)所示的化合物、其药学上可接受的盐、其酯或其立体异构体，含有所述化合物、其药学上可接受的盐、其酯或异构体的药物组合物及制剂，制备所述化合物、其药学上可接受的盐、其酯或异构体的方法，以及所述化合物、其药学上可接受的盐、其酯或异构体在制备治疗和/或预防由ASK1介导的疾病及相关疾病中的应用。

Description

ASK1抑制剂及其应用

技术领域

背景技术

丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)以依次活化的MAPKKK，MAPKK，MAPK的方式存在。环境信号影响MAPKKK，依次使MAPKK磷酸化，特定的MAPK磷酸化，然后MAPK通过使细胞基质磷酸化而介导细胞响应，包括细胞生长，分化，凋亡和发炎等。

细胞凋亡信号调节激酶1(ASK1)是MAPKKK家族中的一员，是C螺旋区相连的类低聚物，N螺旋区连接硫氧还原酶(Trx)，Trx抑制ASK1的激活。在氧化应激，内质网压力，分子内钙浓度和GPCR信号等刺激条件下，ASK1的硫氧还原酶会解离下来，ASK1自身的氨基酸(人：Thr838，小鼠：Thr845)发生自磷酸化，使MAPKK(如MAPKK3/MAPKK6，MAPKK4/MAPKK7)磷酸化；近而使下游的p38和JNK磷酸化并活化。该通路的激活与肿瘤的生长，代谢类疾病和神经***疾病息息相关。

ASK1抑制剂的作用机制为抑制ASK1的磷酸化，阻断下游通路的激活，从而达到对肿瘤疾病，代谢类疾病和神经退行性疾病的治疗作用。

目前，国际上在研的ASK1抑制剂只有Gilead的GS-4997处于临床阶段，正在开展PhaseIII(III期)，已经完成糖尿病肾病，肺动脉高压和非酒精性脂肪肝炎的PhaseII(II期)研究，通过PhaseII的验证，证明该靶点的有效性和安全性。

发明内容

本发明的目的在于提供一种结构新颖的ASK1抑制剂及其应用，该类化合物在体内外具有较好的生物活性，能够有效用于治疗由ASK1介导的相关性疾病。

具体技术方案如下：

本发明首先提供了通式(I)所示的化合物、其药学上可接受的盐、酯或其立体异构体：

其中，

X₁、X₂、X₃独立选自C-R₆或N；

X₄选自C-R₇或N；

R₆、R₇分别独立的选自氢，羟基，氨基，羧基，硝基，卤素，或被0-3个Q₁取代的如下基团：C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、3-12元环烷基、3-12元杂环基、6-12元螺杂环基或6-12元桥杂环基；其中，每个Q₁独立的选自羟基、氨基、羧基、硝基、卤素、C_1-6烷基或C_1-6烷氧基；

R₁选自氢，羟基，氨基，卤素，或被0-3个Q₂取代的如下基团：C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_1-6烷基羰基、C_1-6烷氧基羰基、C_1-6烷基氨酰基、C_1-6烷基磺酰基、6-12元芳基、5-12元杂芳基、3-12元环烷基或3-12元杂环基；其中，每个Q₂独立的选自羟基、氨基、羧基、硝基、卤素、C_1-6烷氧基、C_1-6烷基、6-12元芳基、5-12元杂芳基、3-12元环烷基或3-12元杂环基；

或者R₁和X₃形成任选被0-3个Q₃取代的杂环或杂芳环，每个Q₃独立的选自羟基、氨基、羧基、硝基、卤素、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、卤代C_1-6烷基或卤代C_1-6烷氧基；

R₂选自氢，羟基，氨基，羧基，硝基，卤素，或被0-3个Q₄取代的如下基团：C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_1-6烷基氨基、(C_1-6烷基)₂氨基、C_1-6烷基酰氨基、C_1-6烷基氨酰基、C_1-6烷基磺酰基、C_1-6烷基磺酰氨基、C_1-6烷基磺酰氧基、C_1-6烷基羰基氧基、6-10元芳基、5-10元杂芳基、3-12元环烷基或3-12元杂环基；其中，每个Q₄独立的选自羟基、氨基、羧基、硝基、卤素、C_1-6烷基或C_1-6烷氧基；

R₃选自氢，羟基，氨基，或被0-3个Q₅取代的如下基团：C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_1-6烷基氨酰基、C_1-6烷基磺酰基、6-12元芳基、5-12元杂芳基、3-12元环烷基或3-12元杂环基；其中，每个Q₅独立的选自羟基、氨基、羧基、硝基、卤素、C_1-6烷基或C_1-6烷氧基；

R₄选自羟基，氨基，羧基，硝基，卤素，或被0-3个Q₆取代的如下基团：C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_1-6烷基氨基、C_1-6烷基酰氨基、C_1-6烷基氨酰基、C_1-6烷基磺酰基、C_1-6烷基磺酰氨基、C_1-6烷基磺酰氧基、C_1-6烷基羰基氧基、6-10元芳基、5-10元杂芳基、3-12元环烷基或3-12元杂环基；其中，每个Q₆独立的选自羟基、氨基、羧基、硝基、卤素、C_1-6烷基或C_1-6烷氧基；

R₅选自氢，羟基，氨基，羧基，硝基，卤素，或被0-3个Q₇取代的如下基团：C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_1-6烷基氨基、C_1-6烷基酰氨基、C_1-6烷基氨酰基、C_1-6烷基磺酰基、C_1-6烷基磺酰氨基、C_1-6烷基磺酰氧基、C_1-6烷基羰基氧基、6-12元芳基、5-12元杂芳基、3-12元环烷基或3-12元杂环基；其中，每个Q₇独立的选自羟基、氨基、羧基、硝基、卤素、C_1-6烷基或C_1-6烷氧基；

n可选自0，1，2，3或4，当n选自2，3或4时，R₄可以相同也可以不同。

本发明的一些实施方式涉及前述通式(I)所示的化合物、其药学上可接受的盐、酯或其立体异构体，其中，

X₁、X₂、X₃独立选自C-R₆或N；

X₄选自C-R₇或N；

R₆、R₇分别独立的选自氢，羟基，氨基或被0-2个Q₁取代的如下基团：C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、3-10元环烷基、3-10元杂环基；其中，每个Q₁独立的选自羟基、氨基、羧基、硝基、卤素、C_1-6烷基或C_1-6烷氧基；

R₁选自氢，羟基，氨基，或被0-2个Q₂取代的如下基团：C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_1-6烷基羰基、C_1-6烷氧基羰基、6-10元芳基、5-10元杂芳基、3-10元环烷基或3-10元杂环基；其中，每个Q₂独立的选自羟基、氨基、羧基、硝基、卤素、C_1-6烷氧基或C_1-6烷基；

或者R₁和X₃形成任选被0-2个Q₃取代的5-8元杂环或5-8元杂芳环，每个Q₃独立的选自羟基、氨基、羧基、硝基、卤素、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、卤代C_1-6烷基或卤代C_1-6烷氧基；

R₂选自氢，羟基、氨基、羧基、硝基、卤素，或被0-2个Q₄取代的如下基团：C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_1-6烷基氨基、(C_1-6烷基)₂氨基、6-10元芳基、5-10元杂芳基、3-10元环烷基或3-10元杂环基；其中，每个Q₄独立的选自羟基、氨基、羧基、硝基、卤素、C_1-6烷基或C_1-6烷氧基；

R₃选自氢，羟基，氨基，或被0-2个Q₅取代的如下基团：C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、3-10元环烷基或3-10元杂环基；其中，每个Q₅独立的选自羟基、氨基、羧基、硝基、卤素、C_1-6烷基或C_1-6烷氧基；

R₄选自羟基，氨基，羧基，硝基，卤素，或被0-2个Q₆的取代如下基团：C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_1-6烷基氨基、3-10元环烷基或3-10元杂环基；其中，每个Q₆独立的选自羟基、氨基、羧基、硝基、卤素、C_1-6烷基或C_1-6烷氧基；n选自1或2，当n＝2时，R₄可以相同也可以不同；

R₅选自氢，羟基，氨基，羧基，卤素，或被0-2个Q₇取代的如下基团：C_1-5烷基、C_1-5烷氧基、C_1-5烷基氨基、3-10元环烷基或3-10元杂环基；其中，每个Q₇独立的选自羟基、氨基、羧基、硝基、卤素、C_1-5烷基或C_1-5烷氧基。

本发明的一些实施方式涉及前述的化合物、其药学上可接受的盐、酯或其立体异构体，其中，

X₁、X₂、X₃独立选自C-R₆或N；

X₄选自C-R₇或N；

R₆、R₇分别独立的选自氢，羟基，氨基，或被0-1个Q₁取代的如下基团：C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、3-6元环烷基、3-6元单环杂环基；其中，Q₁选自羟基、氨基、羧基、硝基、卤素、C_1-4烷基或C_1-4烷氧基；

R₁选自氢，或被0-2个Q₂取代的如下基团：C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、3-6元环烷基或3-6元杂环基；其中，每个Q₂独立的选自羟基、氨基、卤素、C_1-4烷氧基或C_1-4烷基；

或者R₁和X₃形成任选被0-1个Q₃取代的5-6元杂环或5-6元杂芳环，Q₃选自羟基、氨基、羧基、硝基、卤素、C_1-4烷基或C_1-4烷氧基；

R₂选自氢，羟基，氨基，羧基，硝基，卤素，或被0-1个Q₄取代的如下基团：C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、C_1-4烷基氨基、(C_1-4烷基)₂氨基；其中，Q₄选自选自羟基、氨基、羧基、卤素、C_1-4烷基或C_1-4烷氧基；

R₃选自氢，羟基，氨基，或被0-1个Q₅取代的如下基团：C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、3-6元环烷基或5-8元杂环基；其中，Q₅选自羟基、氨基、羧基、卤素、C_1-4烷基或C_1-4烷氧基；

R₄选自羟基，氨基，羧基，硝基，卤素，或被0-2个Q₆取代的如下基团：C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、C_1-4烷基氨基、3-6元环烷基或3-6元杂环基；其中，每个Q₆独立的选自羟基、氨基、羧基、硝基、卤素、C_1-4烷基或C_1-4烷氧基；

n选自1或2，当n＝2时，R₄可以相同也可以不同；

R₅选自氢，羟基，氨基，羧基，卤素，或被0-1个Q₇取代的如下基团：C_1-4烷基、C_1-4烷氧基C_1-4烷基氨基、3-6元环烷基或3-6元杂环基；其中，Q₇选自羟基、氨基、羧基、硝基、卤素、C_1-4烷基或C_1-4烷氧基；

优选的，R₅位于咪唑环中与环A相连的N原子的邻位。

R₁选自氢，羟基，氨基，或被0-2个Q₂取代的如下基团：C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、3-6元饱和环烷基或3-6元饱和杂环基；优选为3-5元饱和环烷基或3-5元饱和杂环基；其中，每个Q₂独立的选自羟基、氨基、卤素、C_1-4烷氧基或C_1-4烷基；

R₅选自氢，羟基，氨基，羧基，卤素，或被0-1个Q₇取代的如下基团：C_1-4烷基、C_1-4烷氧基C_1-4烷基氨基、3-6元饱和环烷基或3-6元饱和杂环基；优选为3-5元饱和环烷基或3-5元饱和杂环基；其中，Q₇选自羟基、氨基、羧基、硝基、卤素、C_1-4烷基或C_1-4烷氧基。

X₁、X₂选自N；

X₃选自C-R₆；

X₄选自CH或N；

R₆选自氢、羟基、氨基、甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基或叔丁氧基；

R₁选自任选被0-2个Q₂取代的甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、环丙基、环丁基、环戊基或环己基，其中，每个Q₂独立的选自羟基、氨基、氟、溴、氯、碘、甲基、乙基、丙基、异丙基、甲氧基、乙氧基、丙氧基或异丙氧基；

R₂选自氢、羟基、氨基、硝基、氟、溴、氯、碘、甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、叔丁氧基；

R₃选自氢，或被0-1个Q₅取代的如下基团：甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基，其中，Q₅选自羟基、氨基、卤素、甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基或叔丁氧基；

R₄选自、羟基、氨基、硝基、氟、溴、氯、碘或被0-1个Q₆取代的如下基团：甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、叔丁氧基；其中，Q₆选自羟基、氨基、卤素、甲基、乙基、甲氧基或乙氧基；

R₅选自氢、羟基、氨基、羧基、氟、溴、氯、碘或被0-1个Q₇取代的如下基团：甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、叔丁氧基、环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环氧丙基、氮杂环丙基、氧杂环丁基、氮杂环丁基、吡咯烷基、四氢呋喃基、哌啶基或吗啉基；Q₇选自羟基、氨基、卤素、甲基、乙基、甲氧基或乙氧基；

优选的，R₅位于咪唑环中与环A相连的N原子的邻位。

X₁、X₂选自N；

R₁和X₃形成任选被0-1个Q₃取代的5-6元饱和杂环或5-6元杂芳环，Q₃选自羟基、氨基、羧基、硝基、卤素、甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基或叔丁氧基；

R₂选自氢、羟基、氨基、硝基、羧基、氟、溴、氯、碘、甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基或叔丁氧基；

R₃选自氢，或被0-1个Q₅取代的如下基团：甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基，其中，Q₅选自羟基、氨基、卤素、甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、叔丁氧基；

R₄选自羟基、氨基、硝基、羧基、氟、溴、氯、碘或被0-1个Q₆的取代如下基团：甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、叔丁氧基；其中，Q₆选自羟基、氨基、卤素、甲氧基或乙氧基；

n选自1或2，当n＝2时，R₄可以相同也可以不同；

R₅选自氢、羟基、氨基、羧基，氟、溴、氯、碘或被0-1个Q₇取代的如下基团：甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、叔丁氧基、环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环氧丙基、氮杂环丙基、氧杂环丁基、氮杂环丁基、吡咯烷基、四氢呋喃基、哌啶基或吗啉基；Q₇选自羟基、氨基、卤素、甲氧基或乙氧基。

R₁和X₃形成任选被0-1个Q₃取代的如下环状结构：吡咯烷、噁唑烷、异噁唑烷、咪唑烷、噻唑烷、异噻唑烷、哌嗪、吗啉、咪唑、噁唑、异噁唑、噻唑、异噻唑、吡啶、嘧啶、哒嗪或吡嗪、吡唑、***，Q₃选自氨基、羧基、硝基、卤素、甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基或叔丁氧基；

上述各实施方案之间以及各实施方案所涉及的各特征之间可以任意组合，所得到的新的技术方案均属于本发明的技术方案。

本发明的一些实施方式中，前述通式(I)所述的化合物、其药学上可接受的盐、酯或其立体异构体的结构见表1：

表1

本发明所述的“药学上可接受的盐”指化合物中存在的酸性官能团(例如-COOH、-OH、-SO₃H等)与适当的无机或者有机阳离子(碱)形成的盐，包括与碱金属或碱土金属形成的盐、铵盐，以及与含氮有机碱形成的盐；以及化合物中存在的碱性官能团(例如-NH₂等)与适当的无机或者有机阴离子(酸)形成的盐，包括与无机酸或有机酸(例如羧酸等)形成的盐。适合的酸盐由可形成无毒性盐的酸所形成，其实例包括但不限于乙酸盐、门冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、碳氢酸盐、碳酸盐、硫氰酸盐、硫酸盐、硼酸盐、樟脑磺酸盐、柠檬酸盐、乙二磺酸盐、乙磺酸盐、甲酸盐、反丁烯二酸盐、葡庚糖酸盐、葡萄糖酸盐、葡萄糖醛酸盐、六氟磷酸盐、海苯酸盐、氢氯酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、羟乙磺酸盐、乳酸盐、苹果酸盐、顺丁烯二酸盐、丙二酸盐、甲磺酸盐、硫酸甲酯盐、萘酸盐、2-萘磺酸盐、烟碱酸盐、硝酸盐、乳清酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、双羟萘酸盐、磷酸盐、磷酸氢盐、葡萄糖二酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、甲苯磺酸盐、或三氟乙酸盐等。适合的碱盐由可形成无毒性盐的碱所形成，其实例包括但不限于钾盐、钠盐、铝盐、镁盐、钙盐、锌盐、精氨酸盐、N,N’-二苄基乙二胺盐、胆碱盐、乙二胺盐、二醇胺盐、甘氨酸盐、酪氨酸盐、葡甲胺盐、醇胺盐、三羟甲基甲胺盐等。

如本文所述的“酯”是指化合物(I)存在羧基时，与醇发生酯化反应而形成的酯，当化合物(I)存在羟基时，与有机酸、无机酸、有机酸盐等发生酯化反应而形成的酯。酯在酸或者碱存在的条件下，可发生水解反应生成相应的酸或醇。

本发明通式(I)所示的化合物的“立体异构体”是指当式(I)化合物存在不对称碳原子时，产生的对映异构体；当化合物存在碳碳双键或环状结构时，产生的顺反异构体；当化合物存在酮或肟时，产生的互变异构体，本发明的一些实施方式中，立体异构体包括但不限于：对映异构体、非对映异构体、消旋异构体、顺反异构体、互变异构体、几何异构体、差向异构体及其混合物。

本发明还提供了前述的通式(I)所示的化合物的合成方法，其中所述方法包括：

通式(I-1)所示的中间体化合物与通式(I-2)所示的中间体化合物反应，得到通式(I)所示的化合物；

其中，Y表示离去基团，例如羟基或卤素，以上反应方程式中的R₁、R₂、R₄、R₅、X₁、X₂、X₃、X₄、n如前文所定义。一些必需的起始原料，例如用于合成中间体的原料，可以按照有机化学手册中所描述的类似的步骤和方法来合成，本发明在此不再另行限定。

本发明还提供了用于合成通式(I)所示化合物的中间体，其具有以下结构式：

其中，Y表示氢或卤素，以上反应方程式中的R₁、R₂、R₄、R₅、X₁、X₂、X₃、X₄、n如前文所定义。

本发明还提供了一种药物组合物，其含有前述的化合物、其药学上可接受的盐、酯或其立体异构体，及任选的一种或多种第二治疗活性剂。

所述的第二治疗活性剂可与ASK1组合用于缓解或治疗由其介导的相关性疾病，如心血管疾病、肺部疾病、代谢性疾病、外周血管疾病、胃肠疾病；

所述的心血管疾病包括不限于心绞痛、心律不齐、间歇性跛行、心肌梗塞、心力衰竭或复发性局部缺血等。适于组合治疗心血管相关疾病的治疗活性剂包括但不限于抗心绞痛剂、抗心力衰竭剂、抗血栓形成剂、抗心律失常剂、抗高血压剂、以及降脂剂。抗心绞痛剂包括但不限于β-阻断剂、钙通道阻断剂以及硝酸盐等；用于治疗心力衰竭的药剂包括利尿剂、ACE抑制剂、血管扩张剂以及强心苷等；抗血栓形成剂包括但不限于血小板抑制剂、抗凝血剂以及血栓溶解剂等；抗心律失常药包括但不限于钠通道阻滞药、β-受体阻滞药、钙通道阻滞药、延长动作电位时程药以及腺苷等。抗高血压剂包括但不限于α-1-肾上腺素拮抗剂、β-肾上腺素拮抗剂、中心α-肾上腺素受体促效剂、组合的α/β-肾上腺素拮抗剂、肾上腺素神经元阻断剂、中枢神经***作用抗高血压剂、抗血管紧张素II药剂、ACE抑制剂、血管紧张素-II受体拮抗剂、钙通道阻滞剂、血管扩张剂、钾通道活化剂等；降脂剂包括但不限于他汀类、贝特类、烟酸类、胆酸螯合剂、胆固醇吸收抑制等。

所述的肺部疾病是指与肺脏相关的任何疾病，包括但不限于哮喘、慢性阻塞性肺病、支气管炎及肺气肿。适于组合治疗肺部疾病的治疗活性剂包括但不限于支气管扩张剂，包括β2促效剂、抗胆碱激导性剂、皮质类固醇以及电解质补充剂。

所述的代谢性疾病包括但不限于糖尿病、代谢综合征、血脂异常、肥胖症、葡萄糖不耐、高血压、高血清胆固醇以及较高甘油三酯等。适于组合治疗代谢性疾病的活性剂包括但不限于抗高血压剂和降脂药。

所述的外周血管疾病包括但限于外周动脉疾病。

所述的胃肠疾病包括但不限于胃食道逆流病、炎性肠病、肠胃炎、胃炎、和消化性溃疡疾病以及胰脏炎等。适于组合治疗胃肠疾病的活性剂包括但不限于质子泵抑制剂、H2阻断剂、***素、硫酸铝及解酸剂等。

利用ASK1抑制剂治疗急性心血管疾病的患者，可同时利用抗生素、止痛药和/或抗焦虑药治疗相关病症。

在本发明一些具体实施方式中，所述药物组合物还包含一种或多种药用载体和/或稀释剂。

本发明还提供了一种药物制剂，其含有前述的化合物、其药学上可接受的盐、酯或其立体异构体，及一种或多种药用载体和/或稀释剂；所述药物制剂为临床上或药学上可接受的任一剂型。

在本发明的一些实施方式中，上述药物制剂可以以口服、肠胃外、直肠或经肺给药等方式施用于需要这种治疗的患者或受试者。用于口服给药时，所述药物组合物可制成口服制剂，例如可以制成常规的口服固体制剂，如片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂等；也可制成口服液体制剂，如口服溶液剂、口服混悬剂、糖浆剂等。制成口服制剂时，可以加入适宜的填充剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂等。用于肠胃外给药时，上述药物制剂也可制成注射剂、包括注射液、注射用无菌粉末与注射用浓溶液。制成注射剂时，可采用现有制药领域中的常规方法生产，配置注射剂时，可以不加入附加剂，也可以根据药物的性质加入适宜的附加剂。用于直肠给药时，所述药物组合物可制成栓剂等。用于经肺给药时，所述药物组合物可制成吸入剂或喷雾剂等。

本发明的药物组合物或药物制剂中可用的药用载体和/或稀释剂可以是药物制剂领域中任何常规的载体和/或稀释剂，特定载体和/或稀释剂的选择将取决于用于治疗特定患者的给药方式或疾病类型和状态。用于特定给药模式的合适药物组合物的制备方法完全在药物领域技术人员的知识范围内。例如，药用载体和/或稀释剂可以包括药学领域常规的溶剂、稀释剂、分散剂、助悬剂、表面活性剂、等渗剂、增稠剂、乳化剂、粘合剂、润滑剂、稳定剂、水合剂、乳化加速剂、缓冲剂、吸收剂、着色剂、离子交换剂、脱模剂、涂布剂、矫味剂、和抗氧化剂等。必要时，还可以在药物组合物中加入香味剂、防腐剂和甜味剂等。

在本发明的一种具体实施方式中，前述的药物制剂可以进一步包含一种或多种第二治疗活性剂。

本发明还提供了前述的化合物、其药学上可接受的盐、酯或其立体异构体，前述的药物组合物、前述的药物制剂在制备用于治疗和/或预防ASK1介导的疾病及相关疾病的药物中的用途。

在本发明的一些实施方式中，所述ASK1介导的疾病及相关疾病选自非酒精性脂肪肝、自身免疫病症、糖尿病及其并发症、心-肾疾病、纤维化疾病、呼吸道疾病、肺动脉高压、多发性硬化症、代谢性疾病、动脉粥样硬化、胆汁酸紊乱、原发性硬化性胆管炎、胆固醇结石、脂肪肝、肝硬化、肝炎、肝脏衰竭、胆汁郁积、胆结石病、心肌梗塞、中风、血栓、肿瘤和神经退行性疾病；优选地，所述糖尿病及其并发症包括糖尿病肾病；所述呼吸道疾病包括：慢性阻塞性肺病、特发性肺纤维化、急性肺损伤；所述肿瘤疾病包括胃癌、肝癌、息肉病、结肠癌、乳腺癌、胰腺癌、食管癌等过度增殖性疾病。

本发明还提供了前述的化合物、其药学上可接受的盐、酯或其立体异构、前述的药物制剂或前述的药物组合物在治疗/或预防疾病中的应用。

本发明还提供了前述的化合物、其药学上可接受的盐、酯或其立体异构体、前述的药物制剂或前述的药物组合物在治疗/或预防ASK1介导的疾病及相关疾病中的应用；所述ASK1介导的疾病及相关疾病选自非酒精性脂肪肝、自身免疫病症、糖尿病及其并发症、心-肾疾病、纤维化疾病、呼吸道疾病、肺动脉高压、多发性硬化症、代谢性疾病、动脉粥样硬化、胆汁酸紊乱、原发性硬化性胆管炎、胆固醇结石、脂肪肝、肝硬化、肝炎、肝脏衰竭、胆汁郁积、胆结石病、心肌梗塞、中风、血栓、肿瘤和神经退行性疾病；优选地，所述糖尿病及其并发症包括糖尿病肾病；所述呼吸道疾病包括：慢性阻塞性肺病、特发性肺纤维化、急性肺损伤；所述肿瘤疾病包括胃癌、肝癌、息肉病、结肠癌、乳腺癌、胰腺癌、食管癌等过度增殖性疾病。

本发明还提供了一种治疗疾病的方法，该方法包括向有需要的患者给药治疗有效量的前述的化合物、其药学上可接受的盐、酯或其立体异构体、前述的药物制剂或前述的药物组合物，其中，所述疾病为ASK1介导的疾病及相关疾病；所述ASK1介导的疾病及相关疾病选自非酒精性脂肪肝、自身免疫病症、糖尿病及其并发症、心-肾疾病、纤维化疾病、呼吸道疾病、肺动脉高压、多发性硬化症、代谢性疾病、动脉粥样硬化、胆汁酸紊乱、原发性硬化性胆管炎、胆固醇结石、脂肪肝、肝硬化、肝炎、肝脏衰竭、胆汁郁积、胆结石病、心肌梗塞、中风、血栓、肿瘤和神经退行性疾病；优选地，所述糖尿病及其并发症包括糖尿病肾病；所述呼吸道疾病包括：慢性阻塞性肺病、特发性肺纤维化、急性肺损伤；所述肿瘤疾病包括胃癌、肝癌、息肉病、结肠癌、乳腺癌、胰腺癌、食管癌等过度增殖性疾病。

定义

本发明所述的“卤素”是指氟、氯、溴和碘，优选氟和氯。

本发明所述的“氧代”是指取代基结构中的任一C原子可被氧化为“-C(O)-”；若含有杂原子，其杂原子可形成氧化物，如

可被氧化成

S任选被氧化为S(O)或S(O)₂。

本发明所述的“卤代”是指取代基中的任一氢可被一个或多个相同或不同的卤素取代。“卤素”如前文所定义。

本发明所述“C_1-6烷基”指含有1-6个碳原子的烃部分去除一个氢衍生的直链或支链的烷基，如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、2-甲基丁基、新戊基、1-乙基丙基、正己基、异己基、4-甲基戊基、3-甲基戊基、2-甲基戊基、1-甲基戊基、3,3-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2,3-二甲基丁基、2-乙基丁基和1-甲基-2-甲基丙基等。所述“C_1-6烷基”指含有1-6个碳原子的上述实例。

本发明所述的“C_1-6烷氧基”是指前文所定义的“C_1-6烷基”通过氧原子与母体连接的基团，即“C_1-6烷基-O-”基团，如甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、叔丁氧基、正戊氧基、新戊氧基和正己氧基等。

与“C_1-6烷氧基”类似的，“氨基C_1-6烷基”是指H₂N-C_1-6烷基-，其C_1-6烷基上的一个氢被氨基取代；“羟基C_1-6烷基”是指HO-C_1-6烷基-，其C_1-6烷基上的一个氢被羟基取代；“羧基C_1-6烷基”是指HO(O)C-C_1-6烷基-，其C_1-6烷基上的一个氢被羧基取代；“C_1-6烷基氨基”是指C_1-6烷基-NH-；“C_1-6烷基酰氨基”是指C_1-6烷基-C(O)-NH-；“C_1-6烷基氨酰基”是指C_1-6烷基-NH-C(O)-；“C_1-6烷基磺酰基”是指C_1-6烷基-S(O)₂-；“C_1-6烷基磺酰氨基”是指C_1-6烷基-S(O)₂-NH-；“C_1-6烷基磺酰氧基”是指C_1-6烷基-S(O)₂-O-；“C_1-6烷基羰基氧基”是指C_1-6烷基-C(O)-O-；“C_1-6烷氧基C_1-6烷基”是指C_1-6烷基-O-C_1-6烷基-，“羧基C_1-6烷氧基”是指HO(O)C-C_1-6烷基-O-。

本文中，术语“卤代C_1-6烷基”、“卤代C_1-6烷氧基”是指该基团的C_1-6烷基中的氢被一个或多个卤素取代；所述“卤素”如前文所定义。

本发明所述的“环烷基”、“芳基”、“杂环基”及“杂芳基”，包括单环***和稠环***(双环***或者多环***)，单环是指仅以一个环的形式存在，稠环是指两个及两个以上环以并、螺、桥的连接方式所形成的多环系结构。所述的并环是指由两个或两个以上环状结构彼此共用两个相邻的环原子(即共用一个键)所形成的稠环结构。所述的桥环是指由两个或两个以上环状结构彼此共用两个非相邻的环原子所形成的稠环结构。所述的螺环是指由两个或两个以上环状结构彼此共用一个环原子所形成的稠环结构。本发明以原子个数所限定的环烷基、芳基、杂环基、杂芳基，在不特别指明的情况下，包括所能够形成的单环和稠环结构。

本发明所述的“环烷基”，是指单环环烷基或稠环环烷基。这些基团可以饱和或不饱和、但不是芳族。单环环烷基可以为3-10元环烷基、5-10元环烷基、3-8元环烷基、3-6元环烷基、5-8元环烷基等，实例包括但不限于：环丙烷基、环丁烷基、环戊烷基、环己烷基、环庚烷基、环辛烷基、环丁烯基、环戊烯基、环己烯基、1,4-环己二烯基、环庚烯基、1,4-环庚二烯基、环辛烯基、1,5-环辛二烯基等。稠环环烷基是指由两个或两个以上的环状基团共用两个相邻的环状原子所形成的双环或多环环状基团，可以为6-12元稠环环烷基、7-10元稠环环烷基，其代表性实例包括但不限于双环[3.1.1]庚烷、双环[2.2.1]庚烷、双环[2.2.2]辛烷、双环[3.2.2]壬烷、双环[3.3.1]壬烷和双环[4.2.1]壬烷。

本发明所述的“3-12元环烷基”在不特别指明的情况下，包括所能够形成的单环和稠环结构。

本发明所述的螺环环烷基是指由两个或两个以上的环状基团共用一个环碳原子所形成的双环或多环环状基团，可以为6-12元螺环基、7-11元螺环基等，其实例包括但不限于：

本发明所述的桥环环烷基是指由两个或两个以上的环状基团共用两个不相邻的环状原子所形成的双环或多环环状基团，可以为6-12元桥环基、7-11元桥环基等，其实例包括但不限于：

本发明所述的“杂环基”是指至少一个环碳原子被选自O、S、N的杂原子替代的非芳香性的环状基团，优选1-3个杂原子，其中环碳原子、氮原子和硫原子任选被氧代。

“杂环基”，是指单环杂环基、稠杂环基***，包括饱和、部分饱和的杂环基，但不包括芳环，例如3-12元杂环基等；更为具体地，单杂环基可以为3-10元杂环基、3-8元饱和杂环基、3-6元杂环基、4-7元杂环基、5-7元杂环基、5-6元杂环基、5-6元含氧杂环基、5-6元含氮杂环基、5-6元饱和杂环基等。饱和单杂环基的实例包括但不限于氮杂环丙烷基、氧杂环丙烷基、硫杂环丙烷基、氮杂环丁烷基、氧杂杂环丁烷基、硫杂环丁烷基、四氢呋喃基、四氢吡咯基、四氢噻吩基、咪唑烷基、吡唑烷基、1,2-噁唑烷基、1,3-噁唑烷基、1,2-噻唑烷基、1,3-噻唑烷基、四氢-2H-吡喃基、四氢-2H-噻喃基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、1,4-二氧杂环己烷基、1,4-氧硫杂环己烷基；部分饱和单杂环基的实例包括但不限于4,5-二氢异噁唑基、4,5-二氢噁唑基、2,5-二氢噁唑基、2,3-二氢噁唑基、3,4-二氢-2H-吡咯基、2,3-二氢-1H-吡咯基、2,5-二氢-1H-咪唑基、4,5-二氢-1H-咪唑基、4,5-二氢-1H-吡唑基、4,5-二氢-3H-吡唑基、4,5-二氢噻唑基、2,5-二氢噻唑基、2H-吡喃基、4H-吡喃基、2H-噻喃基、4H-噻喃基、2,3,4,5-四氢吡啶基、1,2-异噁嗪基、1,4-异噁嗪基或6H-1,3-噁嗪基等。

所述的稠杂环基是指由两个或两个以上的环状基团共用两个相邻的环状原子所形成的双环或多环环状基团，其中至少一个环含有O、S和/或N等杂原子，可以为6-12元稠环基、7-11元稠并环基、6-10元稠环基、6-12元饱和稠环基、7-11元饱和稠环基，其实例包括但不限于：3-氮杂双环[3.10.]己烷基、3,6-二氮杂双环[3.2.0]庚烷、3,8-二氮杂双环[4.2.0]辛烷基、3,7-二氮杂双环[4.2.0]辛烷基、八氢吡咯并[3,4-c]吡咯、八氢吡咯并[3,4-b]吡咯、八氢吡咯并[3,4-b][1,4]噁嗪基、八氢-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶、2,3-二氢苯并呋喃-2-基、2,3-二氢苯并呋喃基-3-基、二氢吲哚-1-基、二氢吲哚-2-基、二氢吲哚-3-基、2,3-二氢苯并噻吩-2-基、八氢-1H-吲哚基、八氢苯并呋喃基。

优选地，稠杂环基是由5元或6元单环杂环基环稠合到苯环、5元或6元的单环环烷基、5元或6元单环环烯基、5元或6元单环杂环基或5元或6元单环杂芳基所形成的环状基团。

本发明所述的3-12元杂环基、5-12元杂环基、5-10元杂环基、3-8元杂环基、4-6元杂环基，在不特别指明的情况下，包括所有的单环和稠环结构。

本发明所述的螺杂环基是指由两个或两个以上的环状基团共用一个环碳原子所形成的双环或多环环状基团，且其中至少一个环含有O、S和/或N等杂原子；可以为6-12元螺杂环基、7-11元螺杂环基、7-11元饱和螺杂环基、6-12元饱和螺环基，其实例包括但不限于：

本发明所述的桥杂环基是指由两个或两个以上的环状基团共用两个不相邻的环状原子所形成的双环或多环环状基团，且其中至少一个环含有O、S和/或N等杂原子；可以为6-12元桥杂环基、7-11元桥杂环基、6-12元饱和桥环基、7-11元饱和桥杂环基的实例包括但不限于：

本发明所述的芳基，是指芳香性的环状基团，包括指单环***、双环***或多环***，可以为6-12元芳基、6-10元芳基，包括“6-8元单环芳基”，例如苯基等；包括“8-12元稠环芳基”，例如萘等。

本文所用的术语“杂芳基”是指至少一个环碳原子被选自O、S、N的杂原子替代的芳香性的环状基团，优选1-3个杂原子，其环碳原子、硫原子、氮原子任选被氧代，即例如碳原子被C(O)替代。杂芳基包括单(环)杂芳基和稠(环)杂芳基。单杂芳基可以是5-12元杂芳基、5-10元杂芳基、5-8元杂芳基、5-6元杂芳基，单杂芳基的代表性实例包括但不仅限于呋喃基、咪唑基、异恶唑基、噻唑基、异噻唑基、恶二唑基、恶唑基、异恶唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、吡唑基、吡咯基、四唑基、噻二唑基、噻唑基、噻吩基、***基和三嗪基。稠杂芳基是指两个或两个以上的芳香环共用两个相邻的环原子所形成的具有芳香性的双环或多环基团，其中至少一个环含有O、S和/或N杂原子。稠杂芳基可以为8-12元杂芳基、8-10元杂芳基、9-10元杂芳基，代表性例子包括但不限于苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并噻吩基、苯并恶二唑基、苯并噻唑基、噌啉基、吲唑基、吲哚基、异喹啉基、萘啶基、嘌呤基或喹啉基。在某些实施例中，优选的，稠杂芳基是由5元或6元单环杂芳基与苯环或5元或6元单环杂芳基稠合的基团。

本发明所述的5-12元杂芳基、5-10元杂芳基、5-8元杂芳基、5-6元杂芳基，在不特别指明的情况下，包括所能够形成的单环和稠环结构。

本发明所述的“脂肪环”是指成环原子均为碳原子的非芳香性环，其具体结构参见环烷基的环结构；“脂肪杂环”是指至少一个成环碳原子被选自O、S、N的杂原子替代的脂肪环，其具体结构参见杂环基的环结构；“杂芳环”指至少一个成环碳原子被选自O、S、N的杂原子替代的芳香性环，其具体结构参见杂芳基的环结构。

本发明所述的“治疗有效量”是指当给药到患者时至少能够减轻患者病症的症状的前述化合物、药物制剂、药物组合物的量。包含“治疗有效量”的实际量会根据多种情况而变化，多种情况包括但不限于所治疗的特定病症、病症的严重程度、患者的体格和健康状况以及给药途径。熟练的医疗从业者可容易地使用医疗领域中已知的方法确定合适的量。

本发明提供的通式(I)所示的化合物、其药学上可接受的盐、酯或其立体异构体，其能够有效抑制ASK1的氨基酸磷酸化，抑制ASK1的激活；因此能够治疗和/或预防ASK1介导的疾病及相关疾病。

发明的有益效果

(1)本发明化合物、其药学上可接受的盐、酯或其立体异构体具有优异的ASK1抑制活性，能够治疗和/或预防ASK1介导的疾病及相关疾病；

(2)本发明化合物、其药学上可接受的盐、酯或其立体异构体具有良好的药代动力学性质，作用更持久，生物利用度高；

(3)本发明化合物制备工艺简单，药品纯度高，质量稳定，易于进行大规模工业生产。

具体实施方式

下面将结合具体实施例对本发明的技术方案进行描述，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

下述实验中所用缩写代表的含义如下：

PE：石油醚；EA：乙酸乙酯；DCM：二氯甲烷；MeOH：甲醇；DMF-DMA：N,N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛；DIEA：N,N-二异丙基乙胺；THF：四氢呋喃；Pd₂(dba)₃：三(二亚苄基丙酮)二钯；X-antphos：(4,5-双(二苯基膦)-9,9-二甲基氧杂蒽；DMF:N,N-二甲基甲酰胺；TEA：三乙胺；EDCI：碳二亚胺；Pd(PPh₃)₂Cl₂：二氯二(三苯基磷)合钯

实施例1 6-(4-环戊基-4H-1,2,4-***-3-基)-N-(5-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-2-氟-4-甲基苯基)吡啶甲酰胺的制备(化合物1)

1.1、6-溴吡啶甲酰肼的制备

将6-溴吡啶甲酸甲酯(4.3g,20mmol)，溶解到甲醇(50mL)中，加入水合肼(2.0g,40mmol)，65℃反应16小时。冷却至20℃，析出固体颗粒，抽滤得标题化合物(3.72g,产率86.5％)。

1.2、(E)-N'-(6-溴吡啶甲酰基)-N,N-二甲基甲酰腙酰胺的制备

将6-溴吡啶甲酰肼(2.15g,10mmol)加入甲苯(15mL)，甲醇(15mL),加入DMF-DMA(9.52g,80mmol)。86℃搅拌反应3小时，浓缩，加入乙酸乙酯(10mL)搅拌1小时，抽滤，固体干燥得标题化合物(2.56g,产率94.5％)。

1.3、2-溴-6-(4-环戊基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶的制备

将(E)-N'-(6-溴吡啶甲酰基)-N,N-二甲基甲酰腙酰胺(1.05g,3.89mmol)和醋酸(8mL)加入到乙腈(24mL)，滴加环戊胺(1.65g,19.45mmol)升温至80℃反应16小时，浓缩完全，加入乙酸乙酯(25mL)和饱和碳酸氢钠溶液(20mL)，萃取，乙酸乙酯相浓缩得油状物，加入甲醇(3mL)及石油醚(15mL)，析出固体，抽滤得到标题化合物(820mg，产率72.2％)。

1.4、6-(4-环戊基-4H-1,2,4-***-3-基)-2-氰基吡啶的制备

将2-溴-6-(4-环戊基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶(450mg,1.54mmol)，氰化锌(108mg,0.92mmol)，四(三苯基膦)钯(177.9mg,0.154mmol)加入DMF(8mL)中，氮气保护，微波100℃反应3h，加入乙酸乙酯(15mL)及水(15mL)萃取，有机相用饱和氯化钠水溶液(15mL)洗涤2次，有机相浓缩，得到标题化合物(340mg，产率92.3％)。

1.5、6-(4-环戊基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶甲酸的制备

将6-(4-环戊基-4H-1,2,4-***-3-基)-2-氰基吡啶(340mg,1.42mmol)加入水(5mL)中，0℃下滴加浓硫酸(20mL)，然后升温到90℃反应4h，降至25℃后，0℃下滴加2M的氢氧化钠溶液，调节PH至4，析出白色固体，抽滤，得标题化合物(170mg，产率46.4％)。

1.6、6-(4-环戊基-4H-1,2,4-***-3-基)-N-(5-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-2-氟-4-甲基苯基)吡啶甲酰胺的制备

将6-(4-环戊基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶甲酸(140mg,0.54mmol)，5-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-2-氟-4-甲基苯胺(124.37mg,0.54mmol)，EDCI(碳二亚胺207mg,1.08mmol)加入到吡啶(8mL)中，25℃下反应4h，浓缩，加入乙酸乙酯(4mL),抽滤，少量乙酸乙酯洗涤抽滤得标题化合物(170mg，产率66.8％)。

分子式：C₂₆H₂₆FN₇O分子量：471.5LC-MS(M/e)：472.1(M+H⁺)

¹H NMR(CD₃OD)δ:9.90(s,1H),8.57-8.51(m,2H),8.39-8.34(m,2H),8.12-8.08(m,1H),7.44(s,1H),7.13-7.10(d,1H),6.79(s,1H),5.62-5.58(m,1H),2.36-2.21(m,2H),2.18(s,3H),2.00-1.88(m,5H),1.87-1.83(m,2H),0.91-0.86(m,2H),0.86-0.80(m,2H).

实施例2 6–([1,2,4]***并[4,3-a]吡啶-3-基)-N-(5-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-2-氟-4-甲基苯基)吡啶甲酰胺的制备(化合物2)

2.1、2-肼基吡啶的制备

将2-氯吡啶(10g,88.1mmol)溶于水合肼(20mL)，加热至100℃，反应16小时，加入水(30ml)，用二氯甲烷萃取(100mL×3)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干，得化合物3.0g，产率：31.2％。

2.2、[1,2,4]***并[4,3-a]吡啶的制备

将2-肼基吡啶(2.6g,23.8mmol)溶于原甲酸三乙酯(25mL)中，加热至140℃，反应3小时，降至120℃，反应16小时，将溶剂旋干，柱层析(二氯甲烷:甲醇:NH3.H2O＝50:1:0.5)，得化合物2.5g，产率：83.3％。

2.3、6–([1,2,4]***并[4,3-a]吡啶-3-基)吡啶甲酸甲酯的制备

[1,2,4]***并[4,3-a]吡啶(400mg,3.4mmol)，6-溴吡啶甲酸甲酯(720mg，3.3mmol)溶于二氧六环(30mL)中，加入碳酸铯(2.2g,6.8mmol)，二氯二三苯基膦钯(240mg,0.34mmol)，加热至110℃，反应16小时，过滤，旋干，柱层析(二氯甲烷:甲醇＝40:1)，得化合物550mg，产率64.7％。

2.4、6–([1,2,4]***并[4,3-a]吡啶-3-基)吡啶甲酸的制备

将6–([1,2,4]***并[4,3-a]吡啶-3-基)吡啶甲酸甲酯(550mg,2.2mmol)溶于甲醇(10mL)中，四氢呋喃(10mL)，加入2M氢氧化钠(10ml,20mmol)，加热至40℃,反应3小时，盐酸调PH＝3-4，旋干，加入混合溶剂(100ml，甲醇:二氯甲烷＝10:1)，过滤，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干，剩余物直接用于下一步。

2.5、6–([1,2,4]***并[4,3-a]吡啶-3-基)-N-(5-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-2-氟-4-甲基苯基)吡啶甲酰胺的制备

将6–([1,2,4]***并[4,3-a]吡啶-3-基)吡啶甲酸(150mg,0.62mmol)，5-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-2-氟-4-甲基苯胺(140mg,0.61mmol)溶于吡啶(10mL)中，加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(240mg,1.25mmol)，25℃，反应4小时。旋干，加入水(10ml)，过滤，固体用甲基叔丁基醚(10ml)洗涤，中压制备分离(甲醇:水＝50:50)，得化合物75mg，产率:26.5％。

分子式:C₂₅H₂₀FN₇O分子量:453.5LC-MS(M/e):454.2(M+H+)

¹H-NMR(400MHz,d-DMSO)δ:10.34(s,1H),9.62(d,J＝6.8Hz,1H),8.60(d,J＝8.0Hz,1H),8.30(t,J＝8.0Hz,1H),8.21(d,J＝6.8Hz,1H),8.04(d,J＝6.8Hz,1H),7.98(d,J＝6.8Hz,1H),7.68(s,1H),7.55-7.59(m,1H),7.46(d,J＝11.2Hz,1H),7.19(t,J＝6.8Hz,1H),7.14(s,1H),2.16(s,3H),1.83-1.85(m,1H),0.77-0.81(m,2H),0.69-0.74(m,2H)。

实施例3 N-(5-(2-环丙基-1H-咪唑-1-基)-2-氟-4-甲基苯基)-6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶甲酰胺的制备(化合物3)

3.1、6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶甲酸的制备

将2-氯-6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶(2.2g,0.01mol)，Pd(dppf)Cl₂(0.73g,1.0mmol)，碳酸铯(6.5g，0.02mol)加到乙醇(20mL)中，CO气氛中，80℃搅拌24小时，冷却，浓缩，然后加入乙酸乙酯过滤，滤液加水萃取，水相用稀盐酸调节pH＝3，析出白色固体，抽滤，滤饼干燥得到产物624mg，收率：26.1％。

3.2、5-(2-环丙基-1H-咪唑-1-基)-2-氟-4-甲基苯甲酸的制备

将2-氟-5-碘-4-甲基苯甲酸(1.4g,0.005mol)，2-环丙基-1H-咪唑(0.65g,0.006mol)，氧化亚铜(72mg，0.5mmol)，磷酸钾(3.2g，0.015mol)，8-羟基喹啉(145mg，1.0mmol)加到DMSO(20mL)中,N₂气氛下，100℃搅拌10小时，冷却，过滤，滤液加水和乙酸乙酯萃取，水相用稀盐酸调节pH＝3，析出固体，抽滤，得到产物463mg，收率：35.6％。

3.3、(5-(2-环丙基-1H-咪唑-1-基)-2-氟-4-甲基苯基)氨基甲酸叔丁酯的制备

将5-(2-环丙基-1H-咪唑-1-基)-2-氟-4-甲基苯甲酸(463mg,1.78mmol)，三乙胺(360mg，3.56mmol)，DPPA(734mg，2.67mmol)溶于叔丁醇(20mL)中，90℃反应10小时，冷却，浓缩，倒入水中，乙酸乙酯萃取，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，经硅胶柱层析分离(石油醚：乙酸乙酯＝3:1)，得到产物174mg，收率:29.6％。

3.4、5-(2-环丙基-1H-咪唑-1-基)-2-氟-4-甲基苯胺的制备

将(5-(2-环丙基-1H-咪唑-1-基)-2-氟-4-甲基苯基)氨基甲酸叔丁酯(174mg,0.53mmol)，三氟乙酸(2mL)溶于DCM(6mL)中，25℃下搅拌3小时，浓缩，加入甲基叔丁基醚，析出白色固体，抽滤得到产物91mg，收率:75.1％。

3.5、N-(5-(2-环丙基-1H-咪唑-1-基)-2-氟-4-甲基苯基)-6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶甲酰胺的制备

将6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶甲酸(135mg,0.58mmol)溶于20mL DCM中，向反应液中缓慢滴加草酰氯(74mg,0.58mmol)，然后向其中加入DMF(2滴)中，25℃反应2小时，浓缩得到6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶甲酰氯备用。

将5-(2-环丙基-1H-咪唑-1-基)-2-氟-4-甲基苯胺(91mg，0.39mmol)，三乙胺(121mg，1.2mmol)，溶于DCM(10mL)中，25℃下向其中缓慢滴加上述制备的6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶甲酰氯的DCM溶液(10mL)，滴加完成后继续搅拌2小时，浓缩，硅胶柱层析分离(二氯甲烷：甲醇＝15:1)得到目标产物16mg，收率：6.1％。

分子式:C₂₄H₂₄FN₇O 分子量:445.2 LC-MS(M/e):446.1(M+H⁺)

¹H-NMR(400MHz,MeOD)δ:8.91(s,1H),8.40(d,J＝7.2Hz,1H),8.38-8.35(m,2H),8.30-8.24(m,1H),7.36(d,J＝11.6Hz,1H),7.06(d,J＝1.1Hz,1H),6.98(s,1H),5.56-5.47(m,1H),2.10(s,3H),1.66(s,3H),1.64(s,3H),1.61-1.52(m,1H),1.00-0.92(m,2H),0.92-0.84(m,2H).

实施例4N-(3-(2-环丙基-1H-咪唑-1-基)-4-甲基苯基)-3-氟-6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶甲酰胺的制备(化合物4)

4.1、3-(2-环丙基-1H-咪唑-1-基)-4-甲基苯甲酸的制备

将化合物3-碘-4-甲基苯甲酸(2.5g，9.5mmol),2-环丙基-1H-咪唑(1.5g，14.2mmol)，氧化亚铜(68mg，0.475mmol)，磷酸钾(10.1g，47.5mmol)和8-羟基喹啉溶于50ml二甲基亚砜中，氮气保护，于100℃下反应30小时。抽滤，滤液备用。滤液经进一步成酯化后再水解得产品370mg，产率16％

4.2、(3-(2-环丙基-1H-咪唑-1-基)-4-甲基苯基)氨基甲酸叔丁酯的制备

将化合物3-(2-环丙基-1H-咪唑-1-基)-4-甲基苯甲酸(300mg，1.24mmol)溶于10ml叔丁醇中，25℃下依次加入三乙胺(188mg，1.86mmol)和叠氮磷酸二苯酯(512mg，1.86mmol)，氮气保护，25℃反应3小时，90℃继续反应15小时。反应液浓缩，残留物经硅胶柱层析(乙酸乙酯：石油醚＝1:5)得产品100mg，产率25.7％。

4.3、3-(2-环丙基-1H-咪唑-1-基)-4-甲基苯胺的制备

将化合物(3-(2-环丙基-1H-咪唑-1-基)-4-甲基苯基)氨基甲酸叔丁酯(100mg，1.24mmol)溶于10ml二氯甲烷，加入3ml三氟乙酸，25℃下反应15小时。反应液浓缩，残留物备用。

4.4、N-(3-(2-环丙基-1H-咪唑-1-基)-4-甲基苯基)-3-氟-6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶甲酰胺的制备

将化合物3-氟-6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-甲酸(60mg，0.24mmol)溶于3ml二氯甲烷中，滴加1滴N,N-二甲基甲酰胺，草酰氯(152mg，1.2mmol)的二氯甲烷溶液(2ml)缓慢滴加，25℃反应1小时。反应液浓缩，残留物备用。在另一茄形瓶中依次加入上步所得3-(2-环丙基-1H-咪唑-1-基)-4-甲基苯胺粗品，三乙胺(73mg，0.72mmol)和3ml二氯甲挖，将先前所得酰氯的二氯甲烷(2ml)溶液加入其中，25℃反应1小时。反应液浓缩，残留物经硅胶柱层析(二氯甲烷：甲醇＝1:20)得产品粗品，再经甲基叔丁基醚和甲醇混合溶剂(10ml：0.1ml)打浆、抽滤、干燥得产品(50mg，产率46.7％)。

分子式：C24H24FN7O 分子量：445.5 LC-MS(M/e):446.1(M+H)

1H-NMR(400MHz,MeOD)δ:8.89(s,1H),8.33(dd,J＝5.34,J＝3.35,1H),8.00(t,J＝9.72Hz,1H),7.96(d,J＝1.87Hz,1H),8.33(dd,J＝6.17,J＝2.23,1H),7.48(d,J＝8.46Hz,1H),7.24(s,1H),7.17(s,1H),5.36-5.44(m,1H),2.12(s,3H),1.66-1.74(m,1H),1.59(d,J＝8.0Hz,6H),0.97-1.07(m,4H).

实施例5 N-(3-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-4-甲基苯基)-3-氟-6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶甲酰胺的制备(化合物5)

5.1、6-氯-5-氟-2-吡啶甲酸甲酯的制备

将化合物6-溴-5-氟吡啶甲酸(7.0g，32.0mmol)溶于100ml甲醇中，25℃下缓慢加入氯化亚砜(10ml)，滴加完毕于25℃下反应15小时。待反应结束，反应液浓缩，缓慢加入100ml冰水淬灭反应，二氯甲烷萃取三次(100ml×3)，有机相干燥浓缩得产物5.4g，产率89.4％。

5.2、6-氯-5-氟-2-吡啶酰肼的制备

将化合物6-氯-5-氟-2-吡啶甲酸甲酯(7.0g，32.0mmol)，水合肼(1.95g，31.2mmol)溶于50ml甲醇中，25℃下反应24小时。加入100ml水，二氯甲烷萃取三次(100ml×3)，有机相干燥浓缩，残留物经硅胶柱层析(乙酸乙酯：石油醚＝1:2)得产品4.3g，产率79.5％。

5.3、N'-(6-氯-5-氟吡啶甲酰基)-N,N-二甲基甲酰腙酰胺的制备

将化合物6-氯-5-氟-2-吡啶酰肼(4.3g，22.7mmol)溶于50ml甲苯中，加入N,N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛(21.6g，181.6mmol)，80℃反应1小时，待反应结束，反应液浓缩得产物5.3g，产率95.7％。

5.4、2-氯-3-氟-6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶的制备

将化合物N'-(6-氯-5-氟吡啶甲酰基)-N,N-二甲基甲酰腙酰胺(2.5g，10.2mmol)和异丙胺(3.0g，51.0mmol)溶于40ml乙腈和10ml醋酸中，95℃反应3小时。待反应结束，加入，反应液浓缩，加入100ml水，二氯甲烷萃取三次(100ml×3)，有机相干燥浓缩，残留物经硅胶柱层析(乙酸乙酯：石油醚＝1:1)得产品1.65g，产率67.4％。

5.5、3-氟-6-(4-异丙胺-4H-1,2,4-***-3-基)-2-氰基吡啶的制备

将化合物2-氯-3-氟-6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶(800mg，3.3mmol)，氰化锌(233mg，2.0mmol)，四三苯基磷钯(400mg，50％)溶于32ml N,N-二甲基甲酰胺中，氮气鼓泡，微波130℃反应70分钟。待反应结束，反应液过滤，滤液经中压制备柱层析(0％-45％甲醇)得产品180mg，产率23.2％。

5.6、3-氟-6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-甲酸的制备

将化合物3-氟-6-(4-异丙胺-4H-1,2,4-***-3-基)-2-氰基吡啶(160mg,0.69mmol)溶于4ml浓硫酸和1ml水中，90℃反应15小时。饱和氢氧化钠溶液中和至pH＝3-4，抽滤，滤饼水洗，干燥得产品130mg，产率75.4％。

5.7、2-((5-溴-2-甲基苯基)氨基)-1-环丙基甲基-1-酮的制备

将化合物5-溴-2-甲基苯胺(3.0g，16.1mmol)，Α-溴代环丙乙酮(2.9g，17.7mmol)和N,N-二异丙基乙胺(4.2g，32.2mmol)溶于100ml甲苯中，100℃反应15小时。待反应结束，反应液浓缩，残留物经硅胶柱层析(乙酸乙酯:石油醚＝1:30)得产品3.37g，产率78.4％。

5.8、N-(5-溴-2-甲基苯基)-N-(2-环丙基-2-氧代乙基)甲酰胺的制备

0℃下向10ml甲酸中缓慢滴加乙酸酐(2.45g，24.0mmol)，滴加完毕反应30分钟。将化合物2-((5-溴-2-甲基苯基)氨基)-1-环丙基甲基-1-酮(1.6g，6.0mmol)的二氯甲烷溶液(10ml)缓慢滴加到上述混酐溶液中，0℃反应2小时。待反应结束，用饱和氢氧化钠溶液调节pH＝8-9，再加入100ml水，二氯甲烷萃取三次(100ml×3)，有机相干燥浓缩，残留物备用。

5.9、1-(5-溴-2-甲基苯基)-4-环丙基-1H-咪唑的制备

将上步所得N-(5-溴-2-甲基苯基)-N-(2-环丙基-2-氧代乙基)甲酰胺粗品加入到40ml乙酸中，加入醋酸铵(1.85g，24.0mmol)，110℃反应50小时。待反应结束，反应液浓缩吧，饱和氢氧化钠溶液调节PH＝8-9，加入100ml水，二氯甲烷萃取三次(100ml×3)，有机相干燥浓缩，残留物经硅胶柱层析(乙酸乙酯：正庚烷＝1:20)得产品1.0g，两步产率60.4％。

5.10、3-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-4-甲基苯胺的制备

将化合物1-(5-溴-2-甲基苯基)-4-环丙基-1H-咪唑(414mg,1.5mmol)，氧化亚铜(21mg，0.15mmol)和氨水(1.0ml)溶于5.0ml N-甲基吡咯烷酮中，氮气鼓泡，于微波条件下150℃反应10小时。抽滤，滤液中加入20ml水，二氯甲烷萃取三次(20ml×3)，有机相干燥浓缩，残留物经硅胶柱层析(乙酸乙酯：石油醚＝1:3)得产品280mg，产率87.6％。

5.11、N-(3-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-4-甲基苯基)-3-氟-6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶甲酰胺的制备

将化合物3-氟-6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶-2-甲酸(60mg，0.24mmol)溶于3ml二氯甲烷中，滴加1滴N,N-二甲基甲酰胺，草酰氯(152mg，1.2mmol)的二氯甲烷溶液(2ml)缓慢滴加，25℃反应1小时。反应液浓缩，残留物备用。在另一茄形瓶中依次加入3-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-4-甲基苯胺(51mg，0.24mmol)，三乙胺(73mg，0.72mmol)和3ml二氯甲挖，将先前所得酰氯的二氯甲烷(2ml)溶液加入其中，25℃反应1小时。反应液浓缩，残留物经中压制备反向柱层析(0-45％甲醇，梯度洗脱)得产品粗品，再经乙酸乙酯洗涤得产品39mg，产率37.0％。

分子式：C24H24FN7O 分子量：445.5 LC-MS(M/e):446.1(M+H)

1H-NMR(400MHz,MeOD)δ:9.10(s,1H),8.96(s,1H),8.30-8.50(m,1H),8.10(s,1H),8.01(t,J＝9.41Hz,1H),7.67(d,J＝7.6Hz,1H),7.58(s,1H),7.50(d,J＝8.14Hz,1H),5.30-5.50(m,1H),2.22(s,3H),1.80-1.92(m,1H),1.66(d,J＝7.2Hz,6H),1.06-1.16(m,2H),0.84-0.94(m,2H).

实施例6 N-(6-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-3-氟吡啶-2-基)-6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶甲酰胺的制备(化合物6)

7.1、(6-溴-5-氟吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯的制备

将6-溴-5-氟吡啶甲酸(6g,30mmol)和三乙胺(4.6g,45mmol)溶于叔丁醇(100mL)中，加入DPPA(12.4g,45mmol)，80℃下反应6h，浓缩得粗品直接用于下步反应。

7.2、6-溴-5-氟吡啶-2-胺的制备

向(6-溴-5-氟吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯(粗品)中加入三氟乙酸(15mL)和二氯甲烷(50mL)，25℃反应16小时，浓缩，反相柱层析(MeOH/H₂O＝0-50％)，得到产物1.78g，两步产率31％。

7.3、2((6-溴-5-氟吡啶-2-基)氨基)-1-环丙基-1-酮的制备

6-溴-5-氟吡啶-2-胺(200mg,1mmol)，2-溴-1-环丙基乙酮(204mg,1.26mmol)，DIEA(423mg,3.15mmol)加入到甲苯(10mL)中，100℃反应16小时。浓缩得到粗品直接用于下步反应。

7.4、N-(6-溴-5-氟吡啶-2-基)-N-(2-环丙基-2-氧代乙基)甲酰胺的制备

0℃，乙酸酐(643mg,6.3mmol)滴入甲酸(5mL)中，0.5小时后，再将2((6-溴-5-氟吡啶-2-基)氨基)-1-环丙基-1-酮(粗品)的二氯甲烷溶液(5mL)滴入到反应体系中，25℃反应16小时。用NaOH(1M)调节pH＝7，二氯甲烷萃取，浓缩得粗品直接进行下步反应。

7.5、2-溴-6-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-3-氟吡啶的制备

N-(6-溴-5-氟吡啶-2-基)-N-(2-环丙基-2-氧代乙基)甲酰胺(粗品)、乙酸铵(320mg,4.2mmol)加入乙酸(5mL)中，110℃微波反应2小时，降至0℃，用NaOH(2M)调节pH＝8，乙酸乙酯(50mLx2)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩得粗品130mg，三步产率45％。

7.6、6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶甲酰胺的制备

6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶甲酸(850mg,3.6mmol)溶于二氯甲烷(20mL)中，加入草酰氯(930mg,7.3mmol)，25℃反应5小时。加入氨水(20mL)，25℃反应10小时，过滤得到产物(300mg,35％)。

7.7、N-(6-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-3-氟吡啶-2-基)-6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶甲酰胺的制备

将6-(4-异丙基-4H-1,2,4-***-3-基)吡啶甲酰胺(82mg,0.35mmol)，2-溴-6-(4-环丙基-1H-咪唑-1-基)-3-氟吡啶(100mg,0.35mmol)，碳酸铯(250mg,0.71mmol)，Pd₂(dba)₃(32mg,0.035mmol)，Xant-phos(20mg,0.035mmol)依次加入到二氧六环(5mL)中，微波110℃反应1小时。浓缩经制备板分离(二氯甲烷/甲醇＝10/1)得产品30mg，产率:20％。

分子式:C₂₂H₂₁FN₈O 分子量:432.1 LC-MS(M/e):433.1(M+H⁺)

¹H-NMR(400MHz,CDCl₃)δ:9.96(s,1H),8.57(d,J＝7.6Hz,1H),8.45-8.41(m,2H),8.13(m,2H),7.63(t,J＝8.8Hz,1H),7.32(s,1H),7.13(d,J＝7.6Hz,1H),5.52(m,1H),1.9(m,1H),1.7(m,6H),0.87(m,4H)。

以下通过体外酶学抑制活性实验进一步阐述本发明化合物有益效果，但不应将此理解为本发明化合物仅具有下列有益效果。

生物学实验例

以下通过生物学实验进一步阐述本发明化合物有益效果，但不应将此理解为本发明化合物仅具有下列有益效果。

实验例1：本发明化合物的体外酶学活性

供试品：本发明实施例合成的化合物，其结构式见表1。

实验材料：

试剂配制：

1.kinase detection buffer(激酶检测缓冲液)

a.解冻kinase detection buffer至室温，并观察沉淀是否存在；

b.如果沉淀存在，则在37℃孵育kinase detection buffer，并涡旋15min，溶解沉淀，或从kinase detection buffer中移除沉淀。

2.kinase detection reagent(激酶检测试剂)

a.平衡kinase detection buffer和kinase detection substrate(激酶检测底物)至室温；

b.转移所有体积kinase detection buffer至kinase detection substrate，形成kinase detection reagent；

c.涡旋，混匀，形成均一溶液，kinase detection substrate进入溶液中至少1min。

实验方法：

1、化合物稀释

1)使用DMSO稀释Staurosporine至1mM，本发明化合物至1mM，作为储备液。

2)将Staurosporine及本发明化合物储备液1000倍稀释至1μM。

3)使用TECAN EVO2000***，3倍梯度稀释Staursporine至11个浓度，最高浓度为1μM，3倍梯度稀释本发明化合物至11个浓度，最高浓度为1μM。

4)使用Echo550分别转移20nLStaurosporine、本发明化合物至384孔板。

2、酶反应实验

1)按表2配制1.3×酶反应体系，该体系中包含激酶，底物以及反应所需因子。

2)向反应孔中加入15μL 1.3×酶反应体系后于室温孵育30分钟。

表2. 1.3×酶反应体系

3)向每孔中加入5μL 4×ATP溶液(见表3)启动酶反应。

表3. 4×ATP溶液

4)将反应体系置于25℃反应90分钟后，加入20μL ADP-Glo^TM Reagent孵育40分钟。

5)加入40μL Kinase Detection Regent孵育35分钟，EnSpire^TM酶标仪读荧光值。

3、数据分析

使用如下公式计算剩余酶活(％Remaining Activity)：

Remaining Activity(％)＝100％×(Lum_cpd-Lum_LC)/(Lum_HC-Lum_LC)

其中，Lum_HC表示：High control(反应体系含有和化合物检测相同浓度的DMSO)的发光信号强度；

Lum_LC表示：Low control(Staursporine 1μM)的发光信号强度；

Lum_cpd表示：表示供试品化合物的发光信号强度；

采用XLFIT软件进行曲线拟合，得出IC₅₀。

实验结果：

结果可以看出，本发明制备的化合物，其能够有效抑制ASK1的氨基酸磷酸化，抑制ASK1的激活，是有效的ASK1抑制剂。

另外，现有技术已经报道，ASK1抑制剂对ASK1介导的疾病及相关疾病有预防和/或治疗作用；所说的ASK1介导的疾病及相关疾病选自心血管疾病，包括但不限于肺动脉高压、多发性硬化症、动脉粥样硬化、心绞痛、间歇性跛行综合征、心肌梗死、心力衰竭；选自肺部疾病，包括但不限于哮喘、慢性阻塞性肺病、支气管炎及肺气肿；选自代谢性疾病，包括但不限于糖尿病及其并发症、代谢综合征、血脂异常、肥胖症、葡萄糖不耐、高血压、高血清胆固醇以及较高甘油三酯；肝胆肾疾病，包括但不限于糖尿病肾病、非酒精性脂肪肝、胆汁酸紊乱、原发性硬化性胆管炎、胆固醇结石、脂肪肝、肝硬化、肝炎、肝脏衰竭、胆汁郁积、胆结石病；过度增殖性疾病包括但不限于胃癌、肝癌、息肉病、结肠癌、乳腺癌、胰腺癌、食管癌；其他疾病，包括神经退行性疾病、纤维化相关疾病、中风、炎性肠道疾病、自身免疫病症。

综上，本发明提供的通式(I)所示的化合物能够预防和/或治疗上述的ASK1介导的疾病及相关疾病，是高效、低毒、且稳定性较好的ASK1抑制剂。

以上对本发明所提供的并环类ASK1抑制剂及其应用进行了详细介绍。本文中应用了具体实施例对本发明的原理及实施方式进行了阐述，以上实施例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其中心思想。应当指出，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以对本发明进行若干改进和修饰，这些改进和修饰也落入本发明权利要求的保护。

Claims

1.通式(I)所示的化合物、其药学上可接受的盐、酯或其立体异构体：

其中，

X₁、X₂、X₃独立选自C-R₆或N；

X₄选自C-R₇或N；

2.如权利要求1所述的化合物、其药学上可接受的盐、酯或其立体异构体，其中，

X₁、X₂、X₃独立选自C-R₆或N；

X₄选自C-R₇或N；

R₃选自氢，羟基，氨基，或被0-2个Q₅取代的如下基团：C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、3-10 元环烷基或3-10元杂环基；其中，每个Q₅独立的选自羟基、氨基、羧基、硝基、卤素、C_1-6烷基或C_1-6烷氧基；

R₄选自羟基，氨基，羧基，硝基，卤素，或被0-2个Q₆取代的如下基团：C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_1-6烷基氨基、3-10元环烷基或3-10元杂环基；其中，每个Q₆独立的选自羟基、氨基、羧基、硝基、卤素、C_1-6烷基或C_1-6烷氧基；

n选自1或2，当n＝2时，R₄可以相同也可以不同；

3.如权利要求1-2所述的化合物、其药学上可接受的盐、酯或其立体异构体，其中，

X₁、X₂、X₃独立选自C-R₆或N；

X₄选自C-R₇或N；

n选自1或2，当n＝2时，R₄可以相同也可以不同；

R₅选自氢，羟基，氨基，羧基，卤素，或被0-1个Q₇取代的如下基团：C_1-4烷基、C_1-4烷氧基、C_1-4烷基氨基、3-6元环烷基或3-6元杂环基；其中，Q₇选自羟基、氨基、羧基、硝基、卤素、C_1-4烷基或C_1-4烷氧基；

优选的，R₅位于咪唑环中与环A相连的N原子的邻位。

4.如权利要求3所述的化合物、其药学上可接受的盐、酯或其立体异构体，其中；

X₁、X₂选自N；

X₃选自C-R₆；

X₄选自CH或N；

R₄选自羟基、氨基、硝基、氟、溴、氯、碘或被0-1个Q₆取代的如下基团：甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、叔丁氧基；其中，Q₆选自羟基、氨基、卤素、甲基、乙基、甲氧基或乙氧基；

优选的，R₅位于咪唑环中与环A相连的N原子的邻位。

5.如权利要求1-3任一项所述的化合物、其药学上可接受的盐、酯或其立体异构体，

其中，

X₁、X₂选自N；

R₄选自羟基、氨基、硝基、羧基、氟、溴、氯、碘或被0-1个Q₆取代的如下基团：甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、叔丁氧基；其中，Q₆选自羟基、氨基、卤素、甲氧基或乙氧基；

n选自1或2，当n＝2时，R₄可以相同也可以不同；

R₅选自氢、羟基、氨基、羧基、氟、溴、氯、碘或被0-1个Q₇取代的如下基团：甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、叔丁氧基、环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环氧丙基、氮杂环丙基、氧杂环丁基、氮杂环丁基、吡咯烷基、四氢呋喃基、哌啶基或吗啉基；Q₇选自羟基、氨基、卤素、甲氧基或乙氧基。

6.如权利要求5所述的化合物、其药学上可接受的盐、酯或其立体异构体，其中，

R₁和X₃形成任选被0-1个Q₃取代的如下环状结构：吡咯烷、噁唑烷、异噁唑烷、咪唑烷、噻唑烷、异噻唑烷、哌嗪、吗啉、咪唑、噁唑、异噁唑、噻唑、异噻唑、吡啶、嘧啶、哒嗪或吡嗪，Q₃选自氨基、羧基、硝基、卤素、甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基或叔丁氧基。

7.如权利要求1-6中任一项所述的化合物、其药学上可接受的盐、酯或其立体异构体，选自：

8.通式(I)所示化合物的制备方法，其中所述方法包括：

其中，R₁、R₂、R₄、R₅、X₁、、X₂、X₃、X₄、n的定义如权利要求1-7中任一项所述，取代基Y选自离去基团：例如羟基或卤素。

9.通式(I-1)或(I-2)所示的化合物，

其中，R₁、R₂、R₄、R₅、X₁、、X₂、X₃、X₄、n的定义如权利要求1-7中任一项所述，取代基Y选自羟基或卤素。

10.一种药物组合物，其含有权利要求1-7中任一项所述的化合物、其药学上可接受的盐、酯或其立体异构体，及任选的一种或多种第二治疗活性剂；优选地，所述药物组合物还包含一种或多种药用载体和/或稀释剂。

11.一种药物制剂，其含有权利要求1-7中任一项所述的化合物、其药学上可接受的盐、酯或其立体异构体及一种或多种药用载体和/或稀释剂；所述药物制剂为临床上或药学上可接受的任一剂型，优选为口服制剂或注射剂；更优选地，所述药物制剂还包含一种或多种第二治疗活性剂。

12.权利要求1-7任一项所述的化合物、其药学上可接受的盐、酯或其立体异构体，或权利要求10所述的药物组合物、或权利要求11所述的药物制剂在制备用于治疗和/或预防ASK1介导的疾病及相关疾病的药物中的用途。

13.如权利要求12所述的用途，所述ASK1介导的疾病及相关疾病选自心血管疾病，包括但不限于肺动脉高压、多发性硬化症、动脉粥样硬化、心绞痛、间歇性跛行综合征、心肌梗死、心力衰竭；选自肺部疾病，包括但不限于哮喘、慢性阻塞性肺病、支气管炎及肺气肿；选自代谢性疾病，包括但不限于糖尿病及其并发症、代谢综合征、血脂异常、肥胖症、葡萄糖不耐、高血压、高血清胆固醇以及较高甘油三酯；肝胆肾疾病，包括但不限于糖尿病肾病、非酒精性脂肪肝、胆汁酸紊乱、原发性硬化性胆管炎、胆固醇结石、脂肪肝、肝硬化、肝炎、肝脏衰竭、胆汁郁积、胆结石病；过度增殖性疾病包括但不限于胃癌、肝癌、息肉病、结肠癌、乳腺癌、胰腺癌、食管癌；其他疾病，包括神经退行性疾病、纤维化相关疾病、中风、炎性肠道疾病、自身免疫病症。