CN109761970B - 一种蛋白靶向降解嵌合分子、制备方法及应用 - Google Patents

一种蛋白靶向降解嵌合分子、制备方法及应用 Download PDF

Info

Publication number
CN109761970B
CN109761970B CN201910076670.4A CN201910076670A CN109761970B CN 109761970 B CN109761970 B CN 109761970B CN 201910076670 A CN201910076670 A CN 201910076670A CN 109761970 B CN109761970 B CN 109761970B
Authority
CN
China
Prior art keywords
abl
bcr
protein
compound
chimeric molecule
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201910076670.4A
Other languages
English (en)
Other versions
CN109761970A (zh
Inventor
尤启冬
姜正羽
汪艳
金雨辉
陆朦辰
徐晓莉
郭小可
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
China Pharmaceutical University
Original Assignee
China Pharmaceutical University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by China Pharmaceutical University filed Critical China Pharmaceutical University
Priority to CN201910076670.4A priority Critical patent/CN109761970B/zh
Publication of CN109761970A publication Critical patent/CN109761970A/zh
Priority to US15/734,960 priority patent/US11504385B2/en
Priority to PCT/CN2019/104300 priority patent/WO2020151229A1/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN109761970B publication Critical patent/CN109761970B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/655—Azo (—N=N—), diazo (=N2), azoxy (>N—O—N< or N(=O)—N<), azido (—N3) or diazoamino (—N=N—N<) compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K41/00—Medicinal preparations obtained by treating materials with wave energy or particle radiation ; Therapies using these preparations
    • A61K41/0023—Agression treatment or altering
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
    • A61K47/545—Heterocyclic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
    • A61K47/55—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound the modifying agent being also a pharmacologically or therapeutically active agent, i.e. the entire conjugate being a codrug, i.e. a dimer, oligomer or polymer of pharmacologically or therapeutically active compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing three or more hetero rings

Abstract

本发明公开了一种蛋白靶向降解嵌合分子、制备方法及应用。本发明提供的蛋白靶向降解嵌合分子可不同程度地抑制BCR‑ABL和/或CRBN阳性的白血病K562细胞中BCR‑ABL和/或CRBN蛋白的表达，因而可以用于制备治疗BCR‑ABL和/或CRBN阳性的白血病的药物，其中，n＝3的蛋白靶向降解嵌合分子具有优异的光致异构化活性，可以用于制备光照调控降解BCR‑ABL和/或CRBN蛋白的试剂或药物；本发明还提供了一种合成该系列蛋白靶向降解嵌合分子的方法。

Description

一种蛋白靶向降解嵌合分子、制备方法及应用
技术领域
本发明属于化学领域，具体涉及一种蛋白靶向降解嵌合分子、制备方法及应用。
背景技术
蛋白靶向降解嵌合(PROTAC)是一项新兴技术，该技术能够利用泛素-蛋白酶体***，通过招募特定蛋白的E3泛素连接酶诱导某一蛋白的泛素化降解，进而调节该蛋白的浓度。相比于传统的小分子抑制剂，PROTAC技术能够更有效的作用于那些非成药性蛋白。
临床研究表明，BCR-ABL融合蛋白普遍存在于慢性粒细胞白血病(CML)病例中。同时， ABL和BCR-ABL蛋白也是最早用于PROTAC研究的靶标之一。2016年，CREWS课题组率先利用PROTAC策略成功下调了K562白血病细胞中BCR-ABL融合蛋白的表达水平，他们设计的PROTAC小分子能够在低浓度下同时降解BCR-ABL和ABL蛋白。
然而，相关研究表明，ABL参与生长因子与细胞因子应答，同时与细胞粘附，DNA损伤，氧化应激等多条信号通路有关。ABL被激活以刺激细胞增殖或分化，存活或死亡，撤回或迁移，ABL基因的敲除会导致细胞周期功能异常。
但是，如何调控PROTAC分子才能避免ABL蛋白的过度降解呢？这就亟需解决一个技术难题，即如何调控PROTAC分子介导的目标蛋白降解过程。
发明内容
本发明旨在克服现有技术的不足，提供一种可调节的PROTAC分子，以可逆、迅速、简易地利用PROTAC策略下调K562白血病细胞中BCR-ABL和ABL蛋白的表达水平；同时，本发明还旨在提供一种合成制备该PROTAC分子的可行方法。
本发明上述目的通过如下技术方案实现：
一种蛋白靶向降解嵌合分子，化学结构式如下：
Figure BDA0001959062970000011
其中，n为1～5中任一自然数。
优选地，n＝3。
上述蛋白靶向降解嵌合分子的合成方法，合成路线如下：
Figure BDA0001959062970000021
其中，n为1～5中任一自然数。
上述蛋白靶向降解嵌合分子在制备治疗BCR-ABL和/或CRBN阳性的白血病的药物中的应用。
上述n＝3的蛋白靶向降解嵌合分子在制备光照调控降解BCR-ABL和/或CRBN蛋白的试剂或药物方面的应用。
有益效果：
本发明提供的蛋白靶向降解嵌合分子可不同程度地抑制BCR-ABL和/或CRBN阳性的白血病K562细胞中BCR-ABL和/或CRBN蛋白的表达，因而可以用于制备治疗BCR-ABL和/或CRBN阳性的白血病的药物，其中，n＝3的蛋白靶向降解嵌合分子具有优异的光致异构化活性，可以用于制备光照调控降解BCR-ABL和/或CRBN蛋白的试剂或药物；本发明还提供了一种合成该系列蛋白靶向降解嵌合分子的方法。
附图说明
图1：化合物4C的光致异构化示意图；
图2：化合物2C～6C的化学结构及对BCR-ABL和CRBN阳性K562细胞株中ABL和 BCR-ABL蛋白降解活性的免疫印迹检测图；
图3：A)化合物4C-trans和cis构型的紫外-可见吸收光谱；B)化合物4C在周期实验，经UV-C照射后在λ＝361nm处检测吸光度；C)化合物4C-trans经紫外照射后紫外-可见吸收光谱随时间的变化；D)化合物4C-cis经白光照射后紫外-可见吸收光谱随时间的变化；
图4：A)化合物4C-trans对K562细胞系的抗细胞增殖活性测定；B)化合物4C-trans对A549、HCT116、MCF-7和K562细胞系的细胞活力测定；C)250nM浓度下化合物4C-trans 免疫印迹的时效实验；D)给药24小时后，化合物4C-trans免疫印迹的量效实验；
图5：A)孵育24小时后，化合物4C-trans的免疫印迹-量效实验B)250nM浓度下化合物4C-trans的免疫印迹-时效实验；C)孵育24小时后，化合物4C-cis的免疫印迹-量效实验；D) 250nM浓度下化合物4C-cis的免疫印迹-时效实验；
图6为化合物4C-trans处理过的K562细胞分别在黑暗(VIS组)和紫外光照条件(每4 小时照射一次)下，BCR-ABL蛋白浓度随时间的变化；
图7为不同浓度化合物4C-trans对ABL基因表达的影响；
图8为500nM浓度的化合物4C-trans对ABL基因表达影响随时间变化曲线。
具体实施方式
下面结合附图和实施例具体介绍本发明实质性内容，但并不以此限定本发明的保护范围。实施例中，提到的室温或代表室温的缩写rt均指常温。
实施例1：PROTAC分子的合成和结构确证
合成路线：
Figure BDA0001959062970000031
(E)-4-((4-羟基苯基)二氮烯基)苯甲酸甲酯(3)
Figure BDA0001959062970000041
将化合物2(11.54g，76.1mmol)溶于水(135ml)中，加入HCl(15.8ml，190mmol)，冰浴下冷却至5℃。向反应液中缓慢滴加预冷的亚硝酸钠(5.03g，79.8mmol)水溶液(35ml)，5℃下搅拌1小时。将苯酚(1)(7.52g，79.9mmol)，K2CO3(15.0g，108.5mmol)的水溶液(120ml)滴加到反应液中(10min滴完)，室温下搅拌3小时。用稀醋酸调节至pH＝4，有大量棕黄色固体析出。抽滤，滤饼依次用水和甲醇洗涤，得到棕色固体3(15.65g，80.3％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.57(s,1H),8.18–8.09(m,2H),7.96–7.80(m,4H),6.97(d,J＝8.4Hz,2H),3.89(s,3H).
Figure BDA0001959062970000042
将化合物3(2.56g，10mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(20ml)中，加入1-溴-2-氯乙烷(1.03ml， 12mmol)和碳酸钾(4.14g，30mmol)，室温反应20h。向反应液中加入200mL水，大量棕黄色固体析出。抽滤，滤饼用10ml水洗涤3次，干燥后得到橘黄色固体4。
Figure BDA0001959062970000043
(E)-4-((4-(2-氯乙氧基)苯基)二氮烯基)苯甲酸甲酯(4a)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.22–8.06(m,2H),7.98–7.81(m,4H),7.29–7.09(m,2H),4.38(t,J＝11.2Hz,2H),4.08–3.94(m,2H),3.90(s,3H).
Figure BDA0001959062970000044
(E)-4-((4-(3-氯丙氧基)苯基)二氮烯基)苯甲酸甲酯(4b)
1H NMR(300MHz,Chloroform-d)δ8.24–8.12(m,2H),8.01–7.86(m,4H),7.09–6.97(m,2H),4.21(t,J＝5.8Hz,2H),3.95(s,3H),3.77(t,J＝6.2Hz,2H),2.28(p,J＝6.0Hz,2H).
Figure BDA0001959062970000045
(E)-4-((4-(4-氯丁氧基)苯基)二氮烯基)苯甲酸甲酯(4c)
1H NMR(300MHz,Chloroform-d)δ8.17(d,J＝8.3Hz,2H),7.92(dd,J＝11.4,8.5Hz,4H), 7.01(d,J＝8.5Hz,2H),4.09(d,J＝5.2Hz,2H),3.95(s,3H),3.63(d,J＝5.9Hz,2H),2.01(p,J＝ 2.9Hz,4H).
Figure BDA0001959062970000051
(E)-4-((4-((5-氯戊基)氧基)苯基)二氮烯基)苯甲酸甲酯(4d)
1H NMR(300MHz,Chloroform-d)δ8.17(d,J＝8.4Hz,2H),7.99–7.85(m,4H),7.06–6.96(m,2H),4.07(t,J＝6.3Hz,2H),3.95(s,3H),3.59(t,J＝6.6Hz,2H),1.95–1.80(m,4H), 1.66(ddt,J＝14.5,9.7,5.7Hz,2H).
Figure BDA0001959062970000052
(E)-4-((4-((6-氯己基)氧基)苯基)二氮烯基)苯甲酸甲酯(4e)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.15(d,J＝8.0Hz,2H),7.93(d,J＝8.2Hz,4H),7.15(d,J ＝8.4Hz,2H),4.17–4.05(m,2H),3.90(s,3H),3.65(s,2H),1.84-1.66(m,4H),1.56-1.38(m, 4H).
Figure BDA0001959062970000053
将化合物4(5mmol)溶于10ml四氢呋喃中，缓慢加入10ml氢氧化锂(600mg，25mmol)水溶液，室温下搅拌过夜。反应完成后在搅拌下向反应液中加入200mL水，用稀盐酸调节体系至pH＝2，有大量橙色固体析出。抽滤得粗品，滤饼用水洗涤3次，干燥后得到橙色固体5。
Figure BDA0001959062970000054
(E)-4-((4-(2-氯乙氧基)苯基)二氮烯基)苯甲酸(5a)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ13.40–12.80(s,1H),8.32–8.10(m,2H),8.06–7.81(m,4H),7.29–7.09(m,2H),4.38(t,J＝10.8Hz,2H),4.12–3.92(m,2H).
Figure BDA0001959062970000061
(E)-4-((4-(2-氯丙氧基)苯基)二氮烯基)苯甲酸(5b)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.06(d,J＝8.1Hz,2H),7.90(d,J＝8.5Hz,2H),7.78(d,J ＝8.1Hz,2H),7.16(d,J＝8.5Hz,2H),5.76(s,2H),4.21(t,J＝6.1Hz,2H),3.82(t,J＝6.5Hz, 2H),2.22(p,J＝6.4Hz,2H).
Figure BDA0001959062970000062
(E)-4-((4-(2-氯丁氧基)苯基)二氮烯基)苯甲酸(5c)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.04(d,J＝8.0Hz,2H),7.90(d,J＝8.6Hz,2H),7.78(d,J ＝8.1Hz,2H),7.14(d,J＝8.5Hz,2H),4.13(d,J＝5.2Hz,2H),1.97–1.77(m,4H).
Figure BDA0001959062970000063
(E)-4-((4-(2-氯戊氧基)苯基)二氮烯基)苯甲酸(5d)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.09(d,J＝8.0Hz,2H),7.86(dd,J＝25.2,8.2Hz,4H),7.13(d,J＝8.5Hz,2H),4.10(t,J＝6.4Hz,2H),3.68(d,J＝13.2Hz,2H),1.79(dq,J＝12.5,5.6 Hz,4H),1.57(q,J＝7.9Hz,2H).
Figure BDA0001959062970000064
(E)-4-((4-(2-氯己氧基)苯基)二氮烯基)苯甲酸(5e)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.04(d,J＝7.9Hz,2H),7.88(d,J＝8.4Hz,2H),7.77(d,J ＝7.9Hz,2H),7.12(d,J＝8.5Hz,2H),4.07(d,J＝6.6Hz,2H),3.64(t,J＝6.7Hz,2H),1.75(s, 4H),1.46(s,4H).
Figure BDA0001959062970000065
将化合物5(2.0mmol)溶于无水四氢呋喃(10ml)中，加入草酰氯(338ul，4.0mmol)，加1滴 N，N-二甲基甲酰胺，室温下搅拌30分钟。减压蒸馏后，将体系溶于无水四氢呋喃(5ml)中，冰浴下逐滴加入来那度胺(518.5mg，2.0mmol)和DIEA(992ul，6.0mmol)的四氢呋喃(20ml)溶液，室温下搅拌过夜。反应完全后，减压蒸馏获得棕色固体，粗品用甲醇重结晶，得到化合物6，为橙色固体。
Figure BDA0001959062970000071
(E)-4-((4-(2-氯乙氧基)苯基)二氮烯基)-N-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚-4-基)苯甲酰胺(6a)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.96(s,1H),10.48(s,1H),8.18(d,J＝8.2Hz,2H),7.96 (dt,J＝8.9,4.2Hz,4H),7.76(d,J＝7.5Hz,1H),7.65–7.55(m,2H),7.26–7.14(m,2H),5.15 (dd,J＝13.2,5.2Hz,1H),4.47(d,J＝2.6Hz,2H),4.40(t,J＝5.1Hz,2H),4.00(t,J＝5.1Hz,2H), 2.99–2.81(m,1H),2.67–2.54(m,1H),2.45–2.27(m,1H),2.07–1.93(m,1H).
Figure BDA0001959062970000072
(E)-4-((4-(2-氯丙氧基)苯基)二氮烯基)-N-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚-4-基)苯甲酰胺(6b)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.99(s,1H),10.51(s,1H),8.19(d,J＝8.2Hz,2H),7.97 (dd,J＝8.4,5.8Hz,4H),7.77(d,J＝7.5Hz,1H),7.60(dt,J＝15.2,7.5Hz,2H),7.19(d,J＝8.6 Hz,2H),5.17(dd,J＝13.2,5.0Hz,1H),4.54–4.38(m,2H),4.23(t,J＝6.0Hz,2H),3.83(t,J＝ 6.5Hz,2H),2.99–2.82(m,1H),2.64–2.54(m,1H),2.45–2.34(m,1H),2.23(p,J＝6.5Hz,2H), 2.04–1.97(m,1H).
Figure BDA0001959062970000073
(E)-4-((4-(2-氯丁氧基)苯基)二氮烯基)-N-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚-4-基)苯甲酰胺(6c)
1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ11.01(s,1H),10.53(s,1H),8.15(dd,J＝18.7,8.2Hz,2H),7.94(dd,J＝11.3,8.3Hz,4H),7.77(d,J＝7.4Hz,1H),7.60(dt,J＝14.9,7.4Hz,2H),7.16 (dd,J＝9.2,2.8Hz,2H),5.17(dd,J＝13.5,4.9Hz,1H),4.47(s,2H),4.15(s,2H),3.73(d,J＝6.5 Hz,2H),2.99–2.85(m,1H),2.66–2.55(m,1H),2.48–2.33(m,1H),2.07–1.98(m,1H),1.96– 1.79(m,4H).
Figure BDA0001959062970000081
(E)-4-((4-(2-氯戊氧基)苯基)二氮烯基)-N-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚-4-基)苯甲酰胺(6d)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.90(s,1H),10.42(s,1H),8.09(d,J＝8.2Hz,2H),7.87 (t,J＝7.9Hz,4H),7.67(d,J＝7.5Hz,1H),7.51(dt,J＝15.1,7.5Hz,2H),7.07(d,J＝8.5Hz,2H), 5.07(dd,J＝13.1,5.2Hz,1H),4.43–4.33(m,2H),4.03(t,J＝6.3Hz,2H),3.59(t,J＝6.5Hz, 2H),2.90–2.80(m,1H),2.62–2.48(m,1H),2.46–2.32(m,1H),1.99–1.87(m,1H),1.70(d,J ＝9.7Hz,4H),1.47(t,J＝7.8Hz,2H).
Figure BDA0001959062970000082
(E)-4-((4-(2-氯己氧基)苯基)二氮烯基)-N-(2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-氧代异吲哚-4-基)苯甲酰胺(6e)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ11.00(s,1H),10.52(s,1H),8.18(d,J＝8.3Hz,2H),7.95 (t,J＝8.2Hz,4H),7.76(d,J＝7.4Hz,1H),7.60(dt,J＝15.0,7.4Hz,2H),7.15(d,J＝8.6Hz,2H), 5.16(dd,J＝13.1,5.1Hz,1H),4.54–4.40(m,2H),4.10(t,J＝6.5Hz,2H),3.65(t,J＝6.6Hz, 2H),2.96–2.84(m,1H),2.68–2.52(m,1H),2.46–2.33(m,1H),2.04–1.98(m,1H),1.88– 1.62(m,4H),1.47(d,J＝7.1Hz,4H).
Figure BDA0001959062970000083
N-(2-氯-6-甲基苯基)-2-(2-甲基-6-(哌嗪-1-基)嘧啶-4-基氨基)噻唑-5-甲酰胺(8)
将2-(6-氯-2-甲基嘧啶-4-基氨基)-N-(2-氯-6-甲基苯基)噻唑-5-甲酰胺，7(1.00g，2.54mmol)，哌嗪(2.19g，25.4mmol)、N，N-二异丙基乙胺(0.84mL，5.07mmol)溶于无水1,4-二氧六环(30ml) 中，回流12小时。减压蒸馏所得的油状物依次用水/甲醇、甲醇/醚洗涤，得灰白色固体，粗品用***重结晶得到化合物8(0.82g，73％)。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.88(s,1H),8.21(s,1H),7.40(d,J＝7.3Hz,1H),7.26(d, J＝8.2Hz,2H),6.02(s,1H),3.44(s,4H),2.74(s,4H),2.40(d,J＝3.0Hz,3H),2.23(d,J＝2.9Hz, 3H).
Figure BDA0001959062970000091
向中间体6(0.11mmol)的丙酮(10ml)溶液中加入碘化钠(83mg，0.55mmol)，回流24小时，减压蒸馏得橘黄色固体。将固体溶于DMF(20ml)中，并依次加入化合物8(43mg，0.10mmol) 和DIEA(96μL，0.57mmol)，80℃下搅拌16小时。将反应液冷却至室温，加入200mL水，有大量橙黄色固体析出，抽滤后粗品经TLC纯化(MeOH/DCM，1/50至1/25)，得到化合物9，橙色固体。
Figure BDA0001959062970000092
(E)-N-(2-氯-6-甲基苯基)-2-((6-(4-(2-(4-((4-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-oxoisoindolin-4-基) 氨甲酰基)苯基)二氮烯基)苯氧基)乙基)哌嗪-1-基)-2-甲基嘧啶-4-基)氨基)噻唑-5-甲酰胺(9a)
1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ11.47(s,1H),10.99(s,1H),10.51(s,1H),9.87(s,1H),8.26–8.13(m,3H),8.06–7.85(m,4H),7.75(d,J＝7.4Hz,1H),7.68–7.46(m,2H),7.38(d,J＝ 7.4Hz,1H),7.32–7.15(m,4H),6.05(s,1H),5.15(dd,J＝13.2,5.2Hz,1H),4.43(d,J＝16.4Hz, 2H),4.25(d,J＝5.1Hz,2H),3.59–3.46(m,4H),2.99–2.88(m,1H),2.77–2.67(m,1H),2.63– 2.53(m,4H),2.40(s,3H),2.36–2.30(m,1H),2.22(s,3H),2.06–1.91(m,1H).MS(ESI):calcd for C48H45ClN12O6S,952.30；m/z:[M]+＝953.3036
Figure BDA0001959062970000093
(E)-N-(2-氯-6-甲基苯基)-2-((6-(4-(3-(4-((4-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-oxoisoindolin-4-基) 氨甲酰基)苯基)二氮烯基)苯氧基)丙基)哌嗪-1-基)-2-甲基嘧啶-4-基)氨基)噻唑-5-甲酰胺(9b)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)11.47(s,1H),10.99(s,1H),10.51(s,1H),9.87(s,1H),8.25 –8.11(m,3H),7.95(dd,J＝8.5,5.9Hz,4H),7.75(d,J＝7.4Hz,1H),7.60(dd,J＝13.7,7.4Hz, 2H),7.38(dd,J＝7.3,2.1Hz,1H),7.31–7.12(m,4H),6.04(s,1H),5.15(dd,J＝13.2,5.2Hz, 1H),4.46(s,2H),4.23–4.12(m,2H),3.59–3.46(m,4H),2.96–2.85(m,1H),2.63–2.60(m, 1H),2.57–2.49(m,4H),2.39(s,3H),2.32–2.25(m,1H),2.22(s,3H),2.07–1.88(m,3H). MS(ESI):calcd for C49H47ClN12O6S,966.32；m/z[M]+:967.3325
Figure BDA0001959062970000101
(E)-N-(2-氯-6-甲基苯基)-2-((6-(4-(4-(4-((4-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-oxoisoindolin-4-基) 氨甲酰基)苯基)二氮烯基)苯氧基)丁基)哌嗪-1-基)-2-甲基嘧啶-4-基)氨基)噻唑-5-甲酰胺(9c)
1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ11.41(s,1H),10.96(s,1H),10.44(d,J＝15.3Hz,1H),9.83 (s,1H),8.30–8.09(m,3H),7.95(t,J＝7.4Hz,4H),7.80(dd,J＝18.2,7.5Hz,1H),7.58(h,J＝ 8.5,7.9Hz,3H),7.38(d,J＝7.4Hz,1H),7.25(d,J＝8.2Hz,2H),7.16(d,J＝8.8Hz,2H),6.05(d, J＝6.7Hz,1H),5.15(dd,J＝13.6,5.2Hz,1H),4.50(d,J＝17.5Hz,2H),4.13(d,J＝6.6Hz,2H), 3.55–3.49(m,4H),3.05–2.79(m,1H),2.66–2.54(m,1H),2.44(s,3H),2.43–2.33(m,4H), 2.32–2.26(m,1H),2.25–2.19(s,3H),2.10–1.95(m,1H),1.89–1.71(m,2H),1.63(t,J＝7.9 Hz,2H).MS(ESI):calcd for C50H49ClN12O6S,980.33；m/z:[M]+＝981.33728
Figure BDA0001959062970000102
(E)-N-(2-氯-6-甲基苯基)-2-((6-(4-(5-(4-((4-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-oxoisoindolin-4-基) 氨甲酰基)苯基)二氮烯基)苯氧基)戊基)哌嗪-1-基)-2-甲基嘧啶-4-基)氨基)噻唑-5-甲酰胺(9d)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ11.46(s,1H),10.99(s,1H),10.51(s,1H),9.86(s,1H),8.25 –8.12(m,3H),7.95(t,J＝7.7Hz,4H),7.75(d,J＝7.4Hz,1H),7.60(dd,J＝13.6,7.2Hz,2H), 7.38(d,J＝7.4Hz,1H),7.25(d,J＝7.9Hz,2H),7.15(d,J＝8.6Hz,2H),6.03(s,1H),5.15(dd,J ＝12.2,5.2Hz,1H),4.50–4.37(m,2H),4.09(d,J＝6.7Hz,2H),3.60–3.41(m,4H),2.98–2.82 (m,1H),2.64–2.53(m,1H),2.42(s,3H),2.41–2.34(m,4H),2.33–2.27(m,1H),2.22(s,3H), 2.01–1.94(m,1H),1.85–1.70(m,2H),1.57–1.43(s,4H).MS(ESI):calcd for C51H51ClN12O6S 994.35；m/z:[M]+＝995.3535
Figure BDA0001959062970000103
(E)-N-(2-氯-6-甲基苯基)-2-((6-(4-(6-(4-((4-((2-(2,6-二氧代哌啶-3-基)-1-oxoisoindolin-4- 基)氨甲酰基)苯基)二氮烯基)苯氧基)己基)哌嗪-1-基)-2-甲基嘧啶-4-基)氨基)噻唑-5-甲酰胺(9e)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ11.39(s,1H),10.92(s,1H),10.41(s,1H),9.80(s,1H),8.25 –8.02(m,3H),7.90(t,J＝8.1Hz,4H),7.73(p,J＝10.2,8.7Hz,1H),7.54(dt,J＝15.6,7.8Hz, 2H),7.34(d,J＝7.3Hz,1H),7.20(d,J＝8.3Hz,2H),7.09(d,J＝8.6Hz,2H),6.00(s,1H),5.11 (dd,J＝13.1,5.2Hz,1H),4.50–4.34(m,2H),4.04(t,J＝6.4Hz,2H),3.46(d,J＝6.7Hz,4H), 2.96–2.78(m,1H),2.61–2.53(m,1H),2.41–2.31(m,4H),2.26(s,3H),2.21–2.11(m,4H), 2.01–1.87(m,1H),1.79–1.64(m,2H),1.42(q,J＝7.1Hz,4H),1.34(d,J＝9.6Hz,2H).MS (ESI):calcd for C52H53ClN12O6S1008.36；m/z:[M]+＝1009.36956
实施例2：效果实施例
最初，研究人员合成了2C化合物(图2中的 A)，这是连接链最短(n＝1)的小分子，并使用BCR-ABL和CRBN阳性的K562细胞株，通过免疫印迹测试化合物在细胞中对ABL和BCR-ABL蛋白的降解情况。给药36小时后，WB结果显示化合物2C能够剂量依赖性地下调BCR-ABL蛋白的水平，在100nM浓度下的ABL蛋白和BCR-ABL融合蛋白水平的显着降低 (图2中的 B)。随后，研究人员尝试延长连接链(提高n值)。结果表明，随着接头延伸直至4 个碳原子时，化合物的降解活性持续提高，但链长进一步延伸后活性逐渐降低。在这些 PROTAC分子中，化合物4C降解BCR-ABL融合蛋白显示出最佳活性(图2中的 C)。图2中的 D为 3C化合物对K562细胞株中ABL和BCR-ABL蛋白降解作用的量效关系；图2中的 E为4C化合物对K562细胞株中ABL和BCR-ABL蛋白降解作用的量效关系；图2中的 F为5C化合物对K562 细胞株中ABL和BCR-ABL蛋白降解作用的量效关系；图2中的 G为6C化合物对K562细胞株中 ABL和BCR-ABL蛋白降解作用的量效关系。
上述试验表明，蛋白靶向降解嵌合分子2C、3C、4C、5C、6C均可不同程度地抑制BCR-ABL 和/或CRBN阳性的白血病K562细胞中BCR-ABL和/或CRBN蛋白的表达，因而可以用于制备治疗BCR-ABL和/或CRBN阳性的白血病的药物。
实施例3：效果实施例
研究发现，化合物4C具有良好的光致异构化活性。化合物4C经200-275nM紫外光(UV-C)照射后，在345-425nm间trans-偶氮苯基团的特征吸收峰消失，这表明化合物由trans 构型转变为cis构型(图3中的 A)。随后，我们通过紫外-可见吸收光谱探究了化合物4C的光动力学特征。结果显示：在361nm是化合物4C-trans中偶氮基团的最大吸收(λmax)。经紫外照射后，361nm处的峰逐渐降低，这表明该化合物逐渐由trans构型转为cis构型。361nm处的吸光度-时间的曲线图表明：经紫外照射1小时，化合物基本完全转化为cis构型(图3中的 B)。cis构型的化合物4C经白光照射，逐渐转化为trans构型(图3中的 C)。此外，由于化合物4C是T型光开关，cis构型在黑暗条件下经自发热弛豫转化为trans构型，在25℃时T1/2约为10 小时。随后，我们测试了光敏开关的可逆性，结果表明：化合物4C在经紫外和白光轮流照射5次后依然相对稳定。
研究人员进一步评价了化合物4C的细胞活性。在抗K562细胞增殖活性测试中，化合物 4C的半数抑制浓度(IC50)为68nM(图4中的 A)；在细胞活力测试中，化合物4C的半数有效浓度(EC50)为28nM(图4中的 B)；此外，化合物4C基本不影响非BCR-ABL依赖的肿瘤细胞系，如A549，HCT116，HEK293T和MCF-7乳腺癌(图4中的 B)。由此可见，化合物4C对 BCR-ABL依赖的K562细胞系有着良好的选择性。
其中，抗K562细胞增殖活性测试的操作方法如下：
在96孔板中配制100μL的K562细胞悬液及10μL不同浓度的待测化合物。将培养板放在培养箱孵育48小时(37℃，5％CO2)。向每孔加入10μL CCK-8溶液。将培养板在培养箱内孵育1-4小时。用酶标仪测定在450nm处的吸光度。
细胞毒性活力(％)＝[A(加药)-A(空白)]/[A(0加药)-A(空白)]×100，其中：
A(加药)：具有细胞、CCK-8溶液和药物溶液的孔的吸光度
A(空白)：具有培养基和CCK-8溶液而没有细胞的孔的吸光度
A(0加药)：具有细胞、CCK-8溶液而没有药物溶液的孔的吸光度
其中，K562细胞活力测试的操作方法如下：
将50uL的K562，MCF-7，HCT116和A549的细胞悬液加入96孔板上孵育12小时，将10uL化合物加入孔中，孵育48小时后。按CellTiter-
Figure BDA0001959062970000121
发光细胞活力测定试剂盒(Promega) 操作。使用GraphPadPrism 6中的非线性回归分析数据。
为测试化合物4C对K562细胞中c-ABL和BCR-ABL蛋白的降解效果，研究人员进行了免疫印迹实验。时效实验显示：经250nM化合物4C孵育4小时后ABL明显降低，10小时后BCR-ABL和c-ABL蛋白均显着降解，32小时后ABL和BCR-ABL的达到最大降解，48 小时后，K562细胞出现明显凋亡。为了排除化合物4C影响ABL基因产生假阳性的可能，研究人员在K562细胞中使用RT-qPCR研究了ABL基因的表达。结果如图7、图8所示。量效实验显示：与对照组相比，经不同浓度的化合物4C处理36小时后的K562细胞中，ABL基因的mRNA水平没有显着变化；时效实验显示，K562细胞经500nM的化合物4C孵育48小时中未观察到ABL基因的mRNA水平有显着降低。
免疫印迹实验的操作方法如下：
A.溶液和试剂
使用反渗透去离子水(RODI)或同等级别的水制备溶液。
1*PBS：加入50ml 20*PBS至950ml dH2O并混合。
1*TBS：加入100ml 10*TBS至900ml dH2O并混合。
1*电泳缓冲液：添加100ml 10*电泳缓冲液至900ml dH2O中并混合。
1*转移缓冲液：将100ml 10*转移缓冲液添加至100ml甲醇+800ml dH2O中，并混合。
1*TBST：将100ml 10X TBST添加至900ml dH2O中并混合。
封闭缓冲液：含5％w/v脱脂奶粉的1*TBST；
洗涤缓冲液：1*BST。
一抗稀释缓冲液：含5％脱脂奶粉的1*TBST；要制备20ml，添加1.0g脱脂奶粉至20ml 1*TBST，然后充分混匀。
HRP偶联二抗：Anti-rabbit IgG、HRP-linkedAntibody(#7074)。
检测试剂：SignalFireTMECLReagent(#6883)。
B.蛋白质印迹
制备样品：
给药后的K562细胞孵育24小时处理。
从培养物中吸出培养基；用1*PBS洗涤细胞；吸出。
加入弱效RIPA裂解液(100μl)来裂解细胞，裂解40min。
13000rpm、4℃、15min离心，取80μl上清液并加入20μl上样缓冲液，并在100℃下加热8分钟；放在冰上冷却。
上样10μL到10％的SDS-PAGE凝胶上。湿法转至PVDF膜上。
C.膜封闭和抗体孵育
I.膜封闭
将膜置于25ml封闭缓冲液中，在室温下封闭1小时。
用15ml TBST洗涤三次，每次5分钟。
II.一抗孵育
将膜和一抗(按照产品说明书中建议的适当稀释度和稀释液)置于10ml一抗稀释缓冲液中在4℃下孵育过夜并不时轻轻晃动。
用15ml TBST洗涤三次，每次5分钟。
使用10ml封闭缓冲液稀释Anti-rabbit IgG,HRP-linkedAntibody(#7074，按1:2000的比例)和anti-biotin,HRP-linkedAntibody(#7075，按1:1000-1:3000的比例)用以检测生物素化蛋白标准品。将膜与稀释液一起孵育，在室温下轻轻摇晃孵育1小时。
用15mlTBST洗涤三次，每次5分钟。
继续进行检测(D部分)。
D.蛋白质检测
使用说明：
在TBST中清洗与膜结合的HRP(Antibody Conjugate)三次，持续5分钟。
将显色液与膜一起孵育1分钟，倒掉多余溶液(膜将保持湿润)并曝光。
RT-qPCR实验的操作方法如下：
根据NCBI数据库中的相关基因信息，选择编码序列，委托金斯瑞生物科技有限公司设计合成引物，序列如下：
Figure BDA0001959062970000141
收集于1.5mL离心管中的的K 562细胞重悬液短暂离心，吸去培养上清后加入适量Trizol 试剂并反复吹打以裂解细胞，室温静置5min；向上述裂解液中加入0.2倍体积的氯仿，涡旋 15s后，于室温静置3min；12000rpm、4℃离心15min，从离心机中小心取出离心管，吸取上层水相转移至新的离心管中；加入等体积的异丙醇，混匀后室温静置10min；12000rpm、4℃离心15min此时试管底部出现白色的RNA沉淀；小心弃去上清，加入1mL的75％乙醇(0.1％， DEPC水配制)，上下颠倒均匀；10min；12000rpm、4℃离心15min，为了RNA沉淀尽快在空气中干燥加入可500μL无水乙醇除水；待白色状核酸刚好消失时，加入适量的0.1％DEPC 水重悬，混匀后，用分光光度计检测所提取RNA样品的纯度和浓度，RNA溶液的A260/A280 的比值即为RNA纯度，比值范围1.8到2.1。
按下表配置cDNA，轻弹管底将溶液混合，6000rpm短暂离心。混合液在加入逆转录酶 MMLV之前先70℃干浴3分钟，取出后立即冰水浴至管内外温度一致，然后加逆转录酶0.5ul， 37℃水浴60分钟。取出后立即95℃干浴3分钟，得到逆转录终溶液即为cDNA溶液，保存于-80℃待用。
取0.2ml薄壁PCR管,分别编号。向各管中加入2×qPCR TaqMix12.5ul,10uM各基因正反向引物混合物0.5ul,对应的cDNA各1ul。一管中不加模板用作阴性对照。各管补加水至25ul。混匀,置于SLAN荧光定量PCR仪中。95℃5min预变性后,95℃15s→65℃35s(荧光检测),40 cycles。
Figure BDA0001959062970000142
Figure BDA0001959062970000151
接下来，我们测试了化合物4C的不同构型对ABL和BCR-ABL蛋白降解活性的差异。免疫印迹的结果表明：trans构型的4C化合物在25nM浓度下能够轻微降解BCR-ABL融合蛋白，500nM浓度下超过80％的BCR-ABL和几乎所有ABL蛋白被降解(图5中的 A)。在相同条件下，cis构型的4C化合物在250nM浓度下对BCR-ABL蛋白没有明显降解(图5中的 C)。时效实验显示：trans构型的化合物4C在250nM浓度下，4小时后观察到BCR-ABL略微减少， 10小时后BCR-ABL融合蛋白明显减少，32小时后超过90％BCR-ABL融合蛋白被降解(图 5中的 B)；相同条件下的cis构型化合物4C在孵育32小时后没有观察到BCR-ABL的显着减少 (图5中的D)。以上结果均证明化合物4C的trans和cis构型在降解活性上有很大差异，仅有trans 构型能有效降解BCR-ABL蛋白。免疫印迹实验的操作方法同前述。
为模拟光控过程，研究人员用化合物4C-trans处理K562细胞24小时，然后将这些细胞移至新鲜培养基中并分成2组：一组置于暗室中(VIS组)，另一组分别在孵育0、4、8、12、16、24后小时经紫外照射，以此模拟光致异构化过程(UV组)。结果显示：黑暗组中，BCR-ABL融合蛋白维持在低水平，ABL几乎消失(图6-VIS组 )，而在UV组中，ABL和BCR-ABL水平随时间推移而增加(图6-UV组 )。这些结果均证明：经紫外照射变构后的4C化合物失去了降解活性，通过紫外照射，我们可以随时终止PROTAC降解过程。
模拟光控的具体操作方法如下：
将终浓度100nM化合物4C-trans加入K562细胞中，37℃孵育24小时；洗去培养基并用 1*PBS洗涤2次，后将细胞转移至新鲜的1640培养基中(10％FBS，1*谷氨酰胺)培养，并分成两组：一组置于暗室中，另一组每4小时用UV-C灯照射30min；分别在转移并孵育0、 4、8、16、24小时后收集细胞，细胞后处理与免疫印迹相同。
上述实施例的作用在于具体介绍本发明的实质性内容，但本领域技术人员应当知道，不应将本发明的保护范围局限于该具体实施例。

Claims (5)

1.一种蛋白靶向降解嵌合分子，其特征在于，化学结构式如下：
Figure FDA0001959062960000011
其中，n为1～5任一自然数。
2.根据权利要求1所述的蛋白靶向降解嵌合分子，其特征在于：n＝3。
3.权利要求1所述蛋白靶向降解嵌合分子的合成方法，其特征在于，合成路线如下：
Figure FDA0001959062960000012
其中，n为1～5中任一自然数。
4.权利要求1所述的蛋白靶向降解嵌合分子在制备治疗BCR-ABL和/或CRBN阳性的白血病的药物中的应用。
5.权利要求2所述的蛋白靶向降解嵌合分子在制备光照调控降解BCR-ABL和/或CRBN蛋白的试剂或药物方面的应用。
CN201910076670.4A 2019-01-26 2019-01-26 一种蛋白靶向降解嵌合分子、制备方法及应用 Active CN109761970B (zh)

Priority Applications (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910076670.4A CN109761970B (zh) 2019-01-26 2019-01-26 一种蛋白靶向降解嵌合分子、制备方法及应用
US15/734,960 US11504385B2 (en) 2019-01-26 2019-09-04 Proteolysis targeting chimeric molecule, preparation method, and application
PCT/CN2019/104300 WO2020151229A1 (zh) 2019-01-26 2019-09-04 一种蛋白靶向降解嵌合分子、制备方法及应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910076670.4A CN109761970B (zh) 2019-01-26 2019-01-26 一种蛋白靶向降解嵌合分子、制备方法及应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN109761970A CN109761970A (zh) 2019-05-17
CN109761970B true CN109761970B (zh) 2020-06-09

Family

ID=66455414

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201910076670.4A Active CN109761970B (zh) 2019-01-26 2019-01-26 一种蛋白靶向降解嵌合分子、制备方法及应用

Country Status (3)

Country Link
US (1) US11504385B2 (zh)
CN (1) CN109761970B (zh)
WO (1) WO2020151229A1 (zh)

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109761970B (zh) * 2019-01-26 2020-06-09 中国药科大学 一种蛋白靶向降解嵌合分子、制备方法及应用
CN114044775B (zh) * 2021-08-30 2023-04-07 杭州医学院 一种靶向泛素化诱导bcr-abl蛋白降解的化合物及其应用
CN115109047B (zh) * 2021-09-08 2024-02-20 中国科学院化学研究所 一种基于protac设计的铁死亡诱导剂
CN114349739A (zh) * 2021-12-14 2022-04-15 杭州医学院 一种降解微管蛋白的偶氮类化合物及其合成方法和应用
CN115991880B (zh) * 2022-12-08 2024-03-19 中国药科大学 一种树状大分子pamam-g5-tco及其制备方法与应用

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB0201508D0 (en) * 2002-01-23 2002-03-13 Novartis Ag Organic compounds
BR112017027246A2 (pt) * 2015-06-19 2018-08-28 Miyamoto Etsuko marcador de indução de degradação de proteína e uso do mesmo
CN107540608B (zh) * 2017-07-17 2021-10-19 大连理工大学 4-取代萘酰亚胺类化合物及其应用
CN107382862A (zh) * 2017-07-17 2017-11-24 大连理工大学 硫/氧代萘酰亚胺类化合物及其应用
CN108610295B (zh) * 2018-04-04 2023-01-10 大连医科大学附属第一医院 嘧啶类化合物，组合物及其在治疗淋巴瘤白血病中的用途
CN109761970B (zh) * 2019-01-26 2020-06-09 中国药科大学 一种蛋白靶向降解嵌合分子、制备方法及应用

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Ashton C. Lai，等.Modular PROTAC Design for the Degradation of Oncogenic BCR-ABL.《Angew.Chem.Int.Ed.》.2015,第55卷第807-810页. *
Daniel Hoersch.Let there be light: how to use photoswitchable cross-linker to reprogram proteins.《Biochem ical Society Transactions》.2017,第45卷第831-837页. *
Let there be light: how to use photoswitchable cross-linker to reprogram proteins;Daniel Hoersch;《Biochem ical Society Transactions》;20170615;第45卷;第831-837页 *
Modular PROTAC Design for the Degradation of Oncogenic BCR-ABL;Ashton C. Lai，等;《Angew.Chem.Int.Ed.》;20151123;第55卷;第807-810页 *

Also Published As

Publication number Publication date
US20210338695A1 (en) 2021-11-04
CN109761970A (zh) 2019-05-17
WO2020151229A1 (zh) 2020-07-30
US11504385B2 (en) 2022-11-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN109761970B (zh) 一种蛋白靶向降解嵌合分子、制备方法及应用
ES2912567T3 (es) Uso de paneles de genes mutantes de FGFR en la identificación de pacientes con cáncer que serán responsable al tratamiento con un inhibidor de FGFR
Liu et al. Design, synthesis and biological evaluation of novel thieno [3, 2-d] pyrimidine derivatives possessing diaryl semicarbazone scaffolds as potent antitumor agents
WO2014203959A1 (ja) ＰＨＬＤＡ１又はＰＩＫ３Ｃ２Ｂの発現に基づくＰＩ３Ｋ／ＡＫＴ／ｍＴＯＲ阻害剤の治療効果の予測方法
JP2022521866A (ja) 第三級アミン置換クマリン化合物およびそれらの蛍光標識としての使用
CN108239083B (zh) 芳香烃受体调节剂
CN104829597B (zh) 1h-吲哚-2-碳酰肼衍生物及其制备方法和用途
Igarashi et al. VEGF-C and TGF-β reciprocally regulate mesenchymal stem cell commitment to differentiation into lymphatic endothelial or osteoblastic phenotypes
Peng et al. Design, synthesis, and evaluation of novel p-(Methylthio) styryl substituted quindoline derivatives as neuroblastoma RAS (NRAS) repressors via specific stabilizing the RNA G-Quadruplex
He et al. UBA2 promotes proliferation of colorectal cancer
CN108101926B (zh) 含喹啉酮的嘧啶并五元杂环类化合物、制备方法及其应用
CN114409681A (zh) 用于治疗dna损伤修复缺陷肿瘤的喹诺酮类似物及其应用
Zhou et al. Small molecules inhibit STAT3 activation, autophagy, and cancer cell anchorage-independent growth
CN107417598B (zh) 可用于G-四链体DNAs检测的荧光探针及其制备方法
CN111247137A (zh) 一种嘧啶类化合物、其制备方法及其医药用途
EP3959200B1 (en) New triazole and triazolothiadiazine derivatives exerting cytotoxic and apoptotic effects on a549 cells through akt inhibition
CN110183439B (zh) 一种小檗碱-Pyridostatin偶联物及其制备方法和应用
CN108794398A (zh) 具有荧光的选择性组蛋白去乙酰化酶抑制剂及其制备方法和应用
US20210246128A1 (en) Bicycle topoisomerase i inhibiting compounds, process for preparation and use thereof
CN112209888A (zh) 一种4-芳巯基喹唑啉类化合物、制备方法和医药用途
WO2009014941A1 (en) 3-(4-amidopyrrol-2-ylmethlidene)-2-indolinone derivatives as multi-target protein kinase inhibitors and histone deacetylase inhibitors
CN111533735A (zh) 氧代二氢哒嗪噻唑类衍生物及其在抗肿瘤药物中的应用
Amer et al. Synthesis, reactions and antitumor activity of certain 1, 3-diphenylpyrazole-4-carboxaldehyde derivatives
CN110684022A (zh) Set8赖氨酸甲基转移酶抑制剂及其中间体、制备方法和用途
Chekler et al. Synthesis and evaluation of heteroaryl-ketone derivatives as a novel class of VEGFR-2 inhibitors

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant