CN109620837A - 人参皂苷Rg3在制备预防和/或治疗重症急性胰腺炎药物中的应用 - Google Patents
人参皂苷Rg3在制备预防和/或治疗重症急性胰腺炎药物中的应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明提供了人参皂苷Rg3在制备预防和/或治疗重症急性胰腺炎药物中的应用,属于医药技术领域。通过雨蛙素联合脂多糖诱发的大鼠重症急性胰腺炎模型,验证人参皂苷Rg3对胰腺病理改变的影响和人参皂苷Rg3对NF‑κB p65表达的影响,证明人参皂苷Rg3能够明显改善大鼠重症急性胰腺炎病理现象,降低NF‑κB p65的阳性表达。可见,人参皂苷Rg3具有显著的抗胰腺炎效果,并且,这种效果体现在治疗与预防两个方面。
Description
技术领域
本发明涉及重症急性胰腺炎预防和治疗技术领域,尤其涉及人参皂苷Rg3在制备预防和/或治疗重症急性胰腺炎药物中的应用。
背景技术
重症急性胰腺炎(SevereAcute Pancreatitis,SAP)是一类发病急骤、病死率高且发病机制复杂多样的临床常见重症疾病,在发病过程中,由于胰酶异常激活,导致胰腺自身腺泡损伤的同时,激活相关细胞合成并释放大量炎性因子,如IL-1β、TNF-α和IL-6等。为了缓解炎症和全身中毒症状,临床上在重症胰腺炎的急性期往往采用***进行病情控制,但由于***可能造成消化道出血、免疫抑制等并发症,在临床应用中存在一定局限性。
人参(Panax ginseng C.A.Mey)是我国传统名贵中药材,具有大补元气、复脉固脱、补脾益肺、生津安神等功效。现代研究发现,人参生理活性的主要物质基础是人参皂苷(ginsenosides),其中Rg3是人参皂苷中重要的一种,具有抗肿瘤、降低化疗药物的心脏毒性和肾毒性、保护中枢神经***和心血管***、抗疲劳、降血糖、修复创面等多种药理活性。
目前已有研究发现人参皂苷Rg3可用于急性肺损伤炎症(程治强.人参皂苷Rg3对LPS诱导急性肺损伤小鼠的保护作用与机制的研究[D].郑州大学,2016.)及感冒炎症(李刚.人参皂苷Rg3的抗炎及解热药效学研究[D].吉林大学,2006.)的治疗,但未见其对重症急性胰腺炎治疗的有关报道。
发明内容
本发明的目的在于提供人参皂苷Rg3在制备治疗和预防重症急性胰腺炎药物中的应用。
为了实现上述发明目的,本发明提供以下技术方案:
本发明提供了人参皂苷Rg3在制备预防和/或治疗重症急性胰腺炎药物中的应用。
优选的,所述药物还包括药学上可接受的载体或辅料。
优选的,所述药物的剂型包括片剂、胶囊剂、滴丸剂、注射液、冻干粉针剂和注射用乳剂。
优选的,以单次口服药物计,所述药物中人参皂苷Rg3的质量为10~1500mg。
优选的,以单次口服药物计,所述药物中人参皂苷Rg3的质量为25~500mg。
优选的,以单次注射药物计,所述药物中人参皂苷Rg3的质量为5~1000mg。
优选的,以单次注射药物计,所述药物中人参皂苷Rg3的质量为10~250mg。
本发明的有益效果:本发明提供了人参皂苷Rg3在制备预防和/或治疗重症急性胰腺炎药物中的应用。通过雨蛙素联合脂多糖诱发的大鼠重症急性胰腺炎模型,验证人参皂苷Rg3对胰腺病理改变的影响和人参皂苷Rg3对NF-κB p65表达的影响,证明人参皂苷Rg3能够明显改善大鼠重症急性胰腺炎病理现象,降低NF-κB p65的阳性表达。可见,人参皂苷Rg3具有显著的抗胰腺炎效果,并且,这种效果体现在治疗与预防两个方面。
附图说明
图1表示人参皂苷Rg3对胰腺病理改变的影响,其中A表示正常饲养的空白正常组,B表示预先给药的空白对照组,C表示正常SAP模型组,D表示预先给药后建模的人参皂苷Rg3组,E表示醋酸***组,F表示人参皂苷Rg3组;
图2表示人参皂苷Rg3对NF-κB p65表达的影响,其中A表示正常饲养的空白正常组,B表示预先给药的空白对照组,C表示正常SAP模型组,D表示预先给药后建模的人参皂苷Rg3组,E表示醋酸***组,F表示人参皂苷Rg3组。
具体实施方式
本发明提供了人参皂苷Rg3在制备预防和/或治疗重症急性胰腺炎药物中的应用。
本发明中,所述药物优选的还包括药学上可接受的载体或辅料。
本发明中,所述药物的剂型优选的包括片剂、胶囊剂、滴丸剂、注射液、冻干粉针剂和注射用乳剂,更优选为片剂、滴丸剂或注射用乳剂。
本发明中,以单次口服药物计,所述药物中人参皂苷Rg3的质量优选为10~1500mg,更优选为25~500mg,最优选为50~200mg。
本发明中,以单次注射药物计,所述药物中人参皂苷Rg3的质量优选为5~1000mg,更优选为10~250mg,最优选为20~150mg。
本发明具体实施过程中,当药物的剂型为片剂时,所述片剂优选的包括以下质量的原料:人参皂苷Rg310~40g、糖粉20~30g、乳糖30~40g、羧甲基淀粉钠40~60g、重量百分含量为3%的PVPK30水溶液5~50g和硬脂酸镁10~20g;更优选的,所述片剂优选的包括以下质量的原料:人参皂苷Rg315~25g、糖粉25g、乳糖35g、羧甲基淀粉钠50g、重量百分含量为3%的PVPK30水溶液10~35g和硬脂酸镁10~20g。
本发明对所述片剂的制备方法没有特殊限定,采用本领域常规片剂制备方法即可,本发明具体实施过程中,所述片剂优选的采用以下方法制备获得:
1)将人参皂苷Rg3、糖粉、乳糖和羧甲基淀粉钠混合,过筛,得到细粉;
2)将步骤1)所述细粉和重量百分含量为3%的PVPK30水溶液混合,
进行制粒,干燥和整粒,得到颗粒;
3)将步骤2)所述颗粒和硬脂酸镁混合,进行压片,得到片剂。
本发明首先将人参皂苷Rg3、糖粉、乳糖和羧甲基淀粉钠混合,过筛,得到细粉;所述过筛的筛网孔径优选为80~120目,更优选为100目。
本发明在得到细粉后,将细粉和重量百分含量为3%的PVPK30水溶液混合,进行制粒,干燥和整粒,得到颗粒;所述制粒的方式优选为过筛制粒;所述过筛的筛网孔径优选为10~30目,更优选为20目;所述干燥的温度优选为50~70℃,更优选为60℃;所述干燥的时间优选为2~4h,更优选为3h;所述整粒的方式优选为过筛整粒;所述过筛的筛网孔径优选为15~25目,更优选为18目。
本发明在得到颗粒后,将颗粒和硬脂酸镁混合,进行压片,得到片剂;所述压片的方式优选为浅凹冲压片;所述压片后优选的包括调节片重;所述片重优选为120~180mg,更优选为150mg。
本发明具体实施过程中,当药物的剂型为滴丸剂时,所述滴丸剂优选的包括以下质量的原料:人参皂苷Rg310~40g、PEG4005~15g、PEG400010~20g、羧甲基淀粉钠0.5~1.5g、聚维酮K300.003~0.008g;更优选的,所述滴丸剂优选的包括以下质量的原料:人参皂苷Rg315~25g、PEG40010g、PEG400015g、羧甲基淀粉钠1g、聚维酮K300.005g。
本发明对所述滴丸剂的制备方法没有特殊限定,采用本领域常规滴丸剂制备方法即可,本发明具体实施过程中,所述滴丸剂优选的采用以下方法制备获得:
A)将PEG400、PEG4000、羧甲基淀粉钠和聚维酮K30混合,进行熔融,得到熔融药料;
B)将人参皂苷Rg3加入到步骤A)所述熔融药料中进行混合,得到的混合药料滴加至液体石蜡中,进行冷凝,干燥,得到滴丸。
本发明首先将PEG400、PEG4000、羧甲基淀粉钠和聚维酮K30混合,进行熔融,得到熔融药料;所述熔融的温度优选为90~100℃,更优选为95℃;所述熔融的设备优选为滴丸机。
本发明在得到熔融药料后,将人参皂苷Rg3加入到熔融药料中进行混合,得到的混合药料滴加至液体石蜡中,进行冷凝,干燥,得到滴丸;所述混合的过程优选的伴随搅拌;所述混合药料的温度优选为80~90℃,更优选为85℃;所述滴加的滴距优选为15~25cm,更优选为20cm;所述滴加的低速优选为25~30滴.min-1,更优选为28滴.min-1;所述冷凝的温度优选为8~15℃,更优选为10℃;本发明对所述冷凝的时间没有特殊限制,以滴丸固化为准。
本发明具体实施过程中,当药物的剂型为注射用乳剂时,所述注射用乳剂优选的包括以下质量的原料:人参皂苷Rg3120~180g、大豆油200~300g、磷酯40~60g、油酸5~15g、泊洛沙姆5~15g、甘油80~120g和注射用水适量;更优选的,所述注射用乳剂优选的包括以下质量的原料:人参皂苷Rg3150g、大豆油250g、磷酯50g、油酸10g、泊洛沙姆10g、甘油100g和注射用水适量。
本发明具体实施过程中,注射用水的用量根据灌装前药液的浓度和生产时采用的西林瓶的规格计算。
本发明对所述注射用乳剂的制备方法没有特殊限定,采用本领域常规注射用乳剂制备方法即可,本发明具体实施过程中,所述注射用乳剂优选的采用以下方法制备获得:
a)将甘油和部分注射用水混合,得到水相;
b)将磷脂、泊洛沙姆和大豆油混合,得到油相;
c)将油酸和人参皂苷Rg3加入油相,进行混合,混合后的物料加入至水相中,进行高速剪切,得到初乳;
d)将步骤c)所述初乳与其余注射用水混合,进行均质,得到脂质微球,过滤,得到注射用乳剂;
所述步骤a)和步骤b)没有时间顺序限制。
本发明将甘油和部分注射用水混合,得到水相;所述水相的温度优选为50~60℃,更优选为55℃。
本发明将磷脂、泊洛沙姆和大豆油混合,得到油相;所述混合的过程优选的伴随搅拌;所述混合的温度优选为50~70℃,更优选为60℃。
本发明在得到油相和水相后,将油酸和人参皂苷Rg3加入油相,进行混合,混合后的物料加入至水相中,进行高速剪切,得到初乳;所述混合的过程优选的伴随搅拌;所述混合后的物料加入至水相的过程伴随剪切。
本发明在得到初乳后,将初乳与其余注射用水混合,进行均质,得到脂质微球,过滤,得到注射用乳剂;所述脂质微球的粒径优选为160~280nm,更优选为200~240nm;所述过滤的方式优选为滤膜过滤;所述滤膜的孔径优选为0.22μm。
下面结合实施例对本发明提供的技术方案进行详细的说明,但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。
实施例1人参皂苷Rg3片的制备
处方:
制备方法:称取处方量的人参皂苷Rg3、糖粉、乳糖和羧甲基淀粉钠,充分混合均匀后过100目筛,加入3%PVPk30水溶液适量制软材,20目筛制粒,60℃干燥3h,18目筛整粒,加入处方量的硬脂酸镁,混合均匀后浅凹冲压片,调节片重150mg,即得。
实施例2人参皂苷Rg3滴丸的制备
处方:
制备方法:称取处方量的PEG400、PEG4000、羧甲基淀粉钠、聚维酮K30,加入滴丸机95℃熔融,边搅拌边加入处方量的人参皂苷Rg3,充分混匀,药料温度为85℃,药料以滴距20cm、按28滴.min-1的滴速滴入液体石蜡中,10℃冷凝,固化,形成滴丸后,取出、干燥,即得。
实施例3人参皂苷Rg3注射乳剂的制备
处方:
操作:称取处方量的甘油,加注射用水适量,使溶解,配成甘油水溶液,在50℃保温,作为水相;称取处方量的磷脂、泊洛沙姆与大豆油,混合,在50℃搅拌溶解,作为油相;将油酸和人参皂苷Rg3加入油相,搅拌使混合均匀,边剪切边加入到水相中,高速剪切形成均匀初乳,以注射用水定容到5000mL,过均质机,制得粒径均一、平均粒径在160nm的脂质微球;将制得的液体用0.22μm的膜过滤、充氮气、灌装,125℃流通蒸汽旋转灭菌5分钟,即得。
实施例4人参皂苷Rg3对大鼠重症急性胰腺炎的作用
1材料
1.1实验动物 清洁级SD大鼠,雌雄各半,体重(200±25)g,由济南鹏悦实验动物繁育有限公司提供,动物合格证号:SCXK(鲁)20140007。
1.2药品与试剂 人参皂苷Rg3注射用乳剂(实施例3制备获得);醋酸***片(浙江仙琚制药股份有限公司);雨蛙素(上海源叶生物科技有限公司);脂多糖(上海阿拉丁生化科技股份有限公司);核转录因子-κB(NF-κB)p65多克隆抗体(山羊抗兔/兔抗大鼠,武汉艾美捷科技有限公司);中性树胶(中国上海懿洋仪器有限公司)。其他试剂均为分析纯,国药集团化学试剂有限公司生产。
1.3仪器 SpectraMax iD3多功能酶标仪(美国MolecularDevices公司);血生化仪(朗普PUZS-300);全自动组织脱水仪与包埋仪(天津爱华医疗器械有限公司);病理切片机(德国SLEE);光学显微镜(上海佑科仪器仪表有限公司);电子天平(梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司);101-3A型电热鼓风干燥箱(天津市泰斯特仪器有限公司)。
2方法
2.1样品溶液制备 取人参皂苷Rg3注射乳液及研磨成粉末的醋酸***适量,分别加入5%羧甲基纤维素钠溶液,超声混匀,制成浓度分别为1.0mg.mL-1的人参皂苷Rg3混悬液以及浓度为0.15mg.mL-1的醋酸***混悬液。精密称取雨蛙素和脂多糖适量,用无菌生理盐水分别配制为浓度为10μg.mL-1的雨蛙素溶液和浓度为1mg.mL-1的脂多糖溶液。
2.2动物建模与分组取健康清洁级SD大鼠60只,雌雄各半,进入实验前动物适应性喂养1周,按体重随机分成6组,分别为:
A组(正常饲养的空白对照组);
B组(预先给药的空白对照组,实验前6h、3h、1h预先灌胃给予人参皂苷Rg3混悬液,每次4mL);
C组(正常SAP模型组);
D组(预给药后建模的人参皂苷Rg3组,建模前6h、3h、1h预先灌胃给予人参皂苷Rg3混悬液,每次4mL);
E组(醋酸***组);
F组(人参皂苷Rg3组)。
实验前18h禁食,自由饮水。C~F组动物每h腹腔注射一次雨蛙素溶液1mL(50μg.kg-1),连续6次,并于末次给药后立即腹腔注射脂多糖溶液2mL(10mg.kg-1)。腹腔注射脂多糖溶液后的1h、3h、6h,E组灌胃给予***混悬液,F组灌胃给予人参皂苷Rg3混悬液,每次4mL。A~D组每次灌胃同等体积的5%的羧甲基纤维素钠溶液。
2.3组织病理学观察 造模24h后,颈椎脱臼法处死各组大鼠,摘取胰腺,并将血液于10000rpm.min-1离心5min,取血清。取部分胰腺组织经10%甲醛固定,乙醇梯度脱水并二甲苯透明后,常规石蜡包埋,5μm切片,脱蜡复水后HE染色,二甲苯透明,以中性树胶封片,光学显微镜下观察胰腺组织的病理变化。
2.4免疫组化检测 取石蜡包埋的胰腺组织,二甲苯脱蜡复水后,用Tris-EDTA/柠檬酸盐缓冲液高温高压进行抗原修复;分别用3%H2O2室温及5%BSA(PBS稀释)37℃孵育处理以封闭内源性过氧化物酶;然后依次用一抗(按1:1000的比例用PBS稀释)及经辣根过氧化酶标记的二抗处理,DAB显色,苏木素复染,乙醇梯度脱水,二甲苯透明,中性树胶封片,光学显微镜下观察NF-κB p65的表达。
3结果
3.1人参皂苷Rg3对胰腺病理改变的影响见图1。与A组相比,B组未见明显变化,说明人参皂苷Rg3对胰腺组织没有明显毒性;C~F组的胰腺组织均出现明显的充血现象,说明造模成功,且与C组相比,D~F组的胰腺组织的充血现象均有明显改善,说明醋酸***、人参皂苷Rg3对大鼠重症急性胰腺炎病理现象均有所改善,而D、F组的结果同时说明人参皂苷Rg3不但有治疗作用,也有预防作用。
3.2人参皂苷Rg3对NF-κB p65表达的影响见图2。从图中可以看出,与A、B两空白对照组相比,大鼠造模后NF-κB p65均有明显的阳性表达,而Rg3组(D组、F组)NF-κB p65的阳性表达又明显低于C组(SAP模型组),说明无论是建模前还是建模后给药,人参皂苷Rg3均可降低NF-κB p65的阳性表达。
上述研究结果表明,人参皂苷Rg3在雨蛙素联合脂多糖介导构建的SAP模型上表现出了显著的抗胰腺炎效果,这种效果体现在治疗与预防两个方面。
以上所述仅是本发明的优选实施方式,应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明原理的前提下,还可以做出若干改进和润饰,这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (7)
1.人参皂苷Rg3在制备预防和/或治疗重症急性胰腺炎药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述药物还包括药学上可接受的载体或辅料。
3.根据权利要求1或2所述的应用,其特征在于,所述药物的剂型包括片剂、胶囊剂、滴丸剂、注射液、冻干粉针剂和注射用乳剂。
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,以单次口服药物计,所述药物中人参皂苷Rg3的质量为10~1500mg。
5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,以单次口服药物计,所述药物中人参皂苷Rg3的质量为25~500mg。
6.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,以单次注射药物计,所述药物中人参皂苷Rg3的质量为5~1000mg。
7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,以单次注射药物计,所述药物中人参皂苷Rg3的质量为10~250mg。
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Legal Events
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---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
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SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
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Application publication date: 20190416 |