CN109608559A - 一种从海藻中提取活性多糖的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种从海藻中提取活性多糖的方法，包括海藻清洗、海藻粉碎处理、海藻脱脂处理、酶解处理、超生提取、浓缩、去蛋白处理、脱色处理、醇沉等步骤，本发明一种从海藻中提取活性多糖的方法，先对海藻进行超微粉碎，再采用微波辅助酶解和超生提取结合的方式对海藻的多糖进行提取，达到良好的细胞破壁效果，有效的提高了多糖的浸出率，大大的提高了提取效率，工艺路线简单，生产成本低。本发明的提取方法简单可行，多糖的提取转化率和纯度均较高，易于工业化生产，安全性更高，大大提高海藻的经济价值。本发明的提取方法去蛋白和脱色过程温和，缩短了工艺流程，降低了能耗，减少了有机溶剂用量，更适合大规模生产与应用。
Description
技术领域
本发明涉及海藻多糖提取技术领域，具体是一种从海藻中提取活性多糖的方法。
背景技术
近年来，数量庞大，种类繁多的海洋生物在食品、药物、化妆品和生物材料等领域得到广泛应用，从海洋生物中提取分离生物活性物质己成为天然产物研究的热点。海洋生物最引人注目的是其丰富的药用资源，科学家已从海洋生物中分离和鉴定出多种海洋天然活性物质，其中许多具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤和抗凝血等生物活性作用，为研制开发海洋新药奠定基础。与蛋白质、脂肪、核酸等其他生物大分子相比，糖类具有更强的亲水性。海洋生物通过合成多糖类物质，以保持体内生命活动所需要的自由水分，来适应海洋这个特殊的环境。多糖广泛参与细胞识别、细胞生长、分化、代谢、胚胎发育、细胞癌变、病毒感染和免疫应答等各项生命活动，具有抗病毒、抗凝血、抗肿瘤、抗突变、抗溃疡、抗氧化、降血糖和降血脂等生物活性，成为现代医学和功能食品工作者共同关注的焦点。海藻多糖是海藻所含的各种高分子碳水化合物，占干重的20、70％，是海藻的主要成分。20世纪60年代以来，人们逐渐发现海藻多糖具有多方面的生物活性，如抗病毒、抗肿瘤、免疫调节、活血化癖、抗衰老和保护肌体细胞等，且多数无毒，在开发成为海洋药物方面有较大的潜力。
但是，由于人体内缺乏相应的分解酶，通过食用海藻，人体无法直接吸收海藻多糖，因此需要从海藻中提取海藻多糖。但是，现在的提取方法，不能保证提取的纯度和效果，且提取效率低，得到的产品不能满足社会的需求，存在产品质量差的问题，同时也不能使得被人体很好的吸收，最后海藻多糖的保健效果不能很好的保证。
发明内容
本发明的目的在于提供一种从海藻中提取活性多糖的方法，以解决上述背景技术中提出的问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
一种从海藻中提取活性多糖的方法，具体包括以下步骤：
S1、海藻清洗：取新鲜海藻，洗净晾干后将海藻切碎；
S2、海藻粉碎处理：将切碎后的海藻先后置于粉碎机和超微粉碎机中进行粉碎，得到粒径为10-30μm海藻超微粉；
S3、海藻脱脂处理：将超微海藻粉利用石油醚进行脱脂处理得到脱脂海藻粉；
S4、酶解处理：将脱脂海藻粉加入蒸馏水和复合酶，辅助微波进行酶解，酶解结束后灭酶，过滤得沉淀物和过滤液；
S5、超生提取：往步骤S4得到的沉淀物中加入10-12倍沉淀物质量的蒸馏水，进行超声提取，提取结束后离心，取上清液；
S6、浓缩：合并步骤S4中的过滤液和步骤S5中的上清液，进行减压浓缩，得浓缩液；
S7、去蛋白处理：往浓缩液中加入去蛋白处理剂，搅拌均匀后静置一段时间，离心去除沉淀得上清液；
S8、脱色处理：往步骤S7得到的上清液中脱色剂进行脱色处理，脱色处理后进行固液分离，收集滤液；
S9、醇沉：往步骤S8得到的滤液加入3-5倍体积的乙醇，搅拌均匀后于0-5℃下冷藏静置15-25h，离心处理去上清液得到沉淀；
S10、真空干燥：对步骤S9得到的沉淀进行真空干燥，得到海藻活性多糖。
进一步的：所述步骤S1中，先将海藻置于碱水池中漂洗10-15min，后将海藻捞出置于清水池中清洗2-4次，每次清洗时间为5-10min，清洗完成后将海藻取出置于切片机中进行剪切得海藻碎料。
进一步的：所述步骤S3中，超微海藻粉与石油醚的质量比为1:3.5-5.5，在温度为50-60℃下浸提3-4次进行脱脂处理，浸提结束后离心，沉淀物质在50-80℃下干燥，得到脱脂海藻粉。
进一步的：所述步骤S4中，脱脂海藻粉与蒸馏水的质量比为1:6-8，复合酶为纤维素酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶的混合物，复合酶的添加量为沉淀物质量的0.8-1.2％，酶解过程中控制pH为6.5-7.5，酶解温度为45-55℃，酶解时间为2-3h；所述微波的功率为400-600W，频率为700-1000MHZ。
进一步的：所述步骤S5中，超生提取的功率为200-300W，超生提取温度为70-80℃，超生提取时间为70-100min。
进一步的：所述步骤S6中，浓缩为减压浓缩，即在0.1-0.5MPa真空度，55-85℃条件下将过滤液和上清液浓缩至原体积的1/5-1/10。
进一步的：所述步骤S7中，所述去蛋白处理剂为三氯乙酸，使浓缩液中的三氯乙酸浓度为1-2g/mL，搅拌均匀后静置12-24h，离心除去蛋白质沉淀。
进一步的：所述步骤S8中，脱色剂为活性炭、活性白土和β-环糊精的混合物，其中活性炭、活性白土和β-环糊精的质量比为14-18:10-14:5-7；脱色剂的添加量为步骤S7得到的上清液质量的3-5％。
进一步的：所述步骤S9中，加入的乙醇浓度为93-95％。
进一步的：所述步骤S10中，真空干燥的温度为60-80℃，压力为5-10Pa。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
本发明一种从海藻中提取活性多糖的方法，先对海藻进行超微粉碎，再采用微波辅助酶解和超生提取结合的方式对海藻的多糖进行提取，达到良好的细胞破壁效果，有效的提高了多糖的浸出率，进而缩短提取时间，大大的提高了提取效率，工艺路线简单，生产成本低。
本发明的提取方法简单可行，多糖的提取转化率和纯度均较高，易于工业化生产，安全性更高，大大提高海藻的经济价值。
本发明的提取方法去蛋白和脱色过程温和，缩短了工艺流程，降低了能耗，减少了有机溶剂用量，同时离子液体可以得到有效的回收再利用，降低了物耗，更适合大规模生产与应用。
本发明提取方法得到的海藻多糖能增强机体的免疫力，能有效杀伤肿瘤细胞达到抗肿瘤的目的，能够影响细胞生化代谢、抑制肿瘤细胞周期和抑制肿瘤组织中SOD活性，同时具有清除自由基、提高抗氧化酶活性和抑制脂质过氧化的活性，起到保护生物膜和延缓衰老的作用。
具体实施方式
为了加深对本发明的理解，下面将结合实施例对本发明作进一步详述，以下实施例仅用于解释本发明，并不构成对本发明保护范围的限定。
实施例1
一种从海藻中提取活性多糖的方法，具体包括以下步骤：
S1、海藻清洗：取新鲜海藻，先将海藻置于碱水池中漂洗10min，后将海藻捞出置于清水池中清洗2次，每次清洗时间为5min，清洗完成后将海藻取出置于切片机中进行剪切得海藻碎料；
S2、海藻粉碎处理：将切碎后的海藻先后置于粉碎机和超微粉碎机中进行粉碎，得到粒径为10μm海藻超微粉；
S3、海藻脱脂处理：将超微海藻粉利用石油醚进行脱脂处理得到脱脂海藻粉；其中超微海藻粉与石油醚的质量比为1:3.5，在温度为50℃下浸提3次进行脱脂处理，浸提结束后离心，沉淀物质在50℃下干燥，得到脱脂海藻粉，
S4、酶解处理：将脱脂海藻粉加入蒸馏水和复合酶，辅助微波进行酶解，酶解结束后灭酶，过滤得沉淀物和过滤液；其中脱脂海藻粉与蒸馏水的质量比为1:6，复合酶为纤维素酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶的混合物，复合酶的添加量为沉淀物质量的0.8％，酶解过程中控制pH为6.5，酶解温度为45℃，酶解时间为2h；所述微波的功率为400W，频率为700MHZ。
S5、超生提取：往步骤S4得到的沉淀物中加入10倍沉淀物质量的蒸馏水，进行超声提取，提取结束后离心，取上清液；其中超生提取的功率为200W，超生提取温度为70℃，超生提取时间为70min。
S6、浓缩：合并步骤S4中的过滤液和步骤S5中的上清液，进行减压浓缩，得浓缩液；其中浓缩为减压浓缩，即在0.1MPa真空度，55℃条件下将过滤液和上清液浓缩至原体积的1/5。
S7、去蛋白处理：往浓缩液中加入去蛋白处理剂，搅拌均匀后静置一段时间，离心去除沉淀得上清液；其中所述去蛋白处理剂为三氯乙酸，使浓缩液中的三氯乙酸浓度为1g/mL，搅拌均匀后静置12h，离心除去蛋白质沉淀。
S8、脱色处理：往步骤S7得到的上清液中脱色剂进行脱色处理，脱色处理后进行固液分离，收集滤液；其中脱色剂为活性炭、活性白土和β-环糊精的混合物，其中活性炭、活性白土和β-环糊精的质量比为14:10:5；脱色剂的添加量为步骤S7得到的上清液质量的3％。
S9、醇沉：往步骤S8得到的滤液加入3倍体积的乙醇，搅拌均匀后于0℃下冷藏静置15h，离心处理去上清液得到沉淀；其中加入的乙醇浓度为93％。
S10、真空干燥：对步骤S9得到的沉淀进行真空干燥，得到海藻活性多糖；其中真空干燥的温度为60℃，压力为5Pa。
实施例2
一种从海藻中提取活性多糖的方法，具体包括以下步骤：
S1、海藻清洗：取新鲜海藻，先将海藻置于碱水池中漂洗10min，后将海藻捞出置于清水池中清洗3次，每次清洗时间为5min，清洗完成后将海藻取出置于切片机中进行剪切得海藻碎料；
S2、海藻粉碎处理：将切碎后的海藻先后置于粉碎机和超微粉碎机中进行粉碎，得到粒径为15μm海藻超微粉；
S3、海藻脱脂处理：将超微海藻粉利用石油醚进行脱脂处理得到脱脂海藻粉；其中超微海藻粉与石油醚的质量比为1:4，在温度为50℃下浸提3次进行脱脂处理，浸提结束后离心，沉淀物质在55℃下干燥，得到脱脂海藻粉，
S4、酶解处理：将脱脂海藻粉加入蒸馏水和复合酶，辅助微波进行酶解，酶解结束后灭酶，过滤得沉淀物和过滤液；其中脱脂海藻粉与蒸馏水的质量比为1:6.5，复合酶为纤维素酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶的混合物，复合酶的添加量为沉淀物质量的0.9％，酶解过程中控制pH为6.5，酶解温度为45℃，酶解时间为2.5h；所述微波的功率为450W，频率为750MHZ。
S5、超生提取：往步骤S4得到的沉淀物中加入10.5倍沉淀物质量的蒸馏水，进行超声提取，提取结束后离心，取上清液；其中超生提取的功率为200W，超生提取温度为70℃，超生提取时间为75min。
S6、浓缩：合并步骤S4中的过滤液和步骤S5中的上清液，进行减压浓缩，得浓缩液；其中浓缩为减压浓缩，即在0.2MPa真空度，55-85℃条件下将过滤液和上清液浓缩至原体积的1/5-1/10。
S7、去蛋白处理：往浓缩液中加入去蛋白处理剂，搅拌均匀后静置一段时间，离心去除沉淀得上清液；其中所述去蛋白处理剂为三氯乙酸，使浓缩液中的三氯乙酸浓度为1.2g/mL，搅拌均匀后静置14h，离心除去蛋白质沉淀。
S8、脱色处理：往步骤S7得到的上清液中脱色剂进行脱色处理，脱色处理后进行固液分离，收集滤液；其中脱色剂为活性炭、活性白土和β-环糊精的混合物，其中活性炭、活性白土和β-环糊精的质量比为15:11:5.5；脱色剂的添加量为步骤S7得到的上清液质量的3.5％。
S9、醇沉：往步骤S8得到的滤液加入3.5倍体积的乙醇，搅拌均匀后于1℃下冷藏静置18h，离心处理去上清液得到沉淀；其中加入的乙醇浓度为93.5％。
S10、真空干燥：对步骤S9得到的沉淀进行真空干燥，得到海藻活性多糖；其中真空干燥的温度为65℃，压力为6Pa。
实施例3
一种从海藻中提取活性多糖的方法，具体包括以下步骤：
S1、海藻清洗：取新鲜海藻，先将海藻置于碱水池中漂洗10min，后将海藻捞出置于清水池中清洗3次，每次清洗时间为7min，清洗完成后将海藻取出置于切片机中进行剪切得海藻碎料；
S2、海藻粉碎处理：将切碎后的海藻先后置于粉碎机和超微粉碎机中进行粉碎，得到粒径为20μm海藻超微粉；
S3、海藻脱脂处理：将超微海藻粉利用石油醚进行脱脂处理得到脱脂海藻粉；其中超微海藻粉与石油醚的质量比为1:4.5，在温度为55℃下浸提3次进行脱脂处理，浸提结束后离心，沉淀物质在60℃下干燥，得到脱脂海藻粉，
S4、酶解处理：将脱脂海藻粉加入蒸馏水和复合酶，辅助微波进行酶解，酶解结束后灭酶，过滤得沉淀物和过滤液；其中脱脂海藻粉与蒸馏水的质量比为1:7，复合酶为纤维素酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶的混合物，复合酶的添加量为沉淀物质量的1.0％，酶解过程中控制pH为7.0，酶解温度为50℃，酶解时间为2.5h；所述微波的功率为500W，频率为850MHZ。
S5、超生提取：往步骤S4得到的沉淀物中加入11倍沉淀物质量的蒸馏水，进行超声提取，提取结束后离心，取上清液；其中超生提取的功率为250W，超生提取温度为75℃，超生提取时间为85min。
S6、浓缩：合并步骤S4中的过滤液和步骤S5中的上清液，进行减压浓缩，得浓缩液；其中浓缩为减压浓缩，即在0.3MPa真空度，70℃条件下将过滤液和上清液浓缩至原体积的1/7。
S7、去蛋白处理：往浓缩液中加入去蛋白处理剂，搅拌均匀后静置一段时间，离心去除沉淀得上清液；其中所述去蛋白处理剂为三氯乙酸，使浓缩液中的三氯乙酸浓度为1.5g/mL，搅拌均匀后静置20h，离心除去蛋白质沉淀。
S8、脱色处理：往步骤S7得到的上清液中脱色剂进行脱色处理，脱色处理后进行固液分离，收集滤液；其中脱色剂为活性炭、活性白土和β-环糊精的混合物，其中活性炭、活性白土和β-环糊精的质量比为16:12:6；脱色剂的添加量为步骤S7得到的上清液质量的4。
S9、醇沉：往步骤S8得到的滤液加入4倍体积的乙醇，搅拌均匀后于3℃下冷藏静置20h，离心处理去上清液得到沉淀；其中加入的乙醇浓度为94％。
S10、真空干燥：对步骤S9得到的沉淀进行真空干燥，得到海藻活性多糖；其中真空干燥的温度为70℃，压力为8Pa。
实施例4
一种从海藻中提取活性多糖的方法，具体包括以下步骤：
S1、海藻清洗：取新鲜海藻，先将海藻置于碱水池中漂洗12min，后将海藻捞出置于清水池中清洗3次，每次清洗时间为8min，清洗完成后将海藻取出置于切片机中进行剪切得海藻碎料；
S2、海藻粉碎处理：将切碎后的海藻先后置于粉碎机和超微粉碎机中进行粉碎，得到粒径为25μm海藻超微粉；
S3、海藻脱脂处理：将超微海藻粉利用石油醚进行脱脂处理得到脱脂海藻粉；其中超微海藻粉与石油醚的质量比为1:5，在温度为55℃下浸提4次进行脱脂处理，浸提结束后离心，沉淀物质在70℃下干燥，得到脱脂海藻粉，
S4、酶解处理：将脱脂海藻粉加入蒸馏水和复合酶，辅助微波进行酶解，酶解结束后灭酶，过滤得沉淀物和过滤液；其中脱脂海藻粉与蒸馏水的质量比为1:7.5，复合酶为纤维素酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶的混合物，复合酶的添加量为沉淀物质量的1.1％，酶解过程中控制pH为7.0，酶解温度为55℃，酶解时间为2.5h；所述微波的功率为550W，频率为900MHZ。
S5、超生提取：往步骤S4得到的沉淀物中加入11.5倍沉淀物质量的蒸馏水，进行超声提取，提取结束后离心，取上清液；其中超生提取的功率为250W，超生提取温度为78℃，超生提取时间为90min。
S6、浓缩：合并步骤S4中的过滤液和步骤S5中的上清液，进行减压浓缩，得浓缩液；其中浓缩为减压浓缩，即在0.4MPa真空度，75℃条件下将过滤液和上清液浓缩至原体积的1/8。
S7、去蛋白处理：往浓缩液中加入去蛋白处理剂，搅拌均匀后静置一段时间，离心去除沉淀得上清液；其中所述去蛋白处理剂为三氯乙酸，使浓缩液中的三氯乙酸浓度为1.8g/mL，搅拌均匀后静置22h，离心除去蛋白质沉淀。
S8、脱色处理：往步骤S7得到的上清液中脱色剂进行脱色处理，脱色处理后进行固液分离，收集滤液；其中脱色剂为活性炭、活性白土和β-环糊精的混合物，其中活性炭、活性白土和β-环糊精的质量比为17:13:6.5；脱色剂的添加量为步骤S7得到的上清液质量的4.5％。
S9、醇沉：往步骤S8得到的滤液加入4.5倍体积的乙醇，搅拌均匀后于4℃下冷藏静置20h，离心处理去上清液得到沉淀；其中加入的乙醇浓度为94.5％。
S10、真空干燥：对步骤S9得到的沉淀进行真空干燥，得到海藻活性多糖；其中真空干燥的温度为75℃，压力为9Pa。
实施例5
一种从海藻中提取活性多糖的方法，具体包括以下步骤：
S1、海藻清洗：取新鲜海藻，先将海藻置于碱水池中漂洗15min，后将海藻捞出置于清水池中清洗4次，每次清洗时间为5min，清洗完成后将海藻取出置于切片机中进行剪切得海藻碎料；
S2、海藻粉碎处理：将切碎后的海藻先后置于粉碎机和超微粉碎机中进行粉碎，得到粒径为30μm海藻超微粉；
S3、海藻脱脂处理：将超微海藻粉利用石油醚进行脱脂处理得到脱脂海藻粉；其中超微海藻粉与石油醚的质量比为1:5.5，在温度为60℃下浸提4次进行脱脂处理，浸提结束后离心，沉淀物质在80℃下干燥，得到脱脂海藻粉，
S4、酶解处理：将脱脂海藻粉加入蒸馏水和复合酶，辅助微波进行酶解，酶解结束后灭酶，过滤得沉淀物和过滤液；其中脱脂海藻粉与蒸馏水的质量比为1:8，复合酶为纤维素酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶的混合物，复合酶的添加量为沉淀物质量的1.2％，酶解过程中控制pH为7.5，酶解温度为55℃，酶解时间为3h；所述微波的功率为600W，频率为1000MHZ。
S5、超生提取：往步骤S4得到的沉淀物中加入12倍沉淀物质量的蒸馏水，进行超声提取，提取结束后离心，取上清液；其中超生提取的功率为300W，超生提取温度为80℃，超生提取时间为100min。
S6、浓缩：合并步骤S4中的过滤液和步骤S5中的上清液，进行减压浓缩，得浓缩液；其中浓缩为减压浓缩，即在0.5MPa真空度，85℃条件下将过滤液和上清液浓缩至原体积的1/10。
S7、去蛋白处理：往浓缩液中加入去蛋白处理剂，搅拌均匀后静置一段时间，离心去除沉淀得上清液；其中所述去蛋白处理剂为三氯乙酸，使浓缩液中的三氯乙酸浓度为2g/mL，搅拌均匀后静置24h，离心除去蛋白质沉淀。
S8、脱色处理：往步骤S7得到的上清液中脱色剂进行脱色处理，脱色处理后进行固液分离，收集滤液；其中脱色剂为活性炭、活性白土和β-环糊精的混合物，其中活性炭、活性白土和β-环糊精的质量比为18:14:7；脱色剂的添加量为步骤S7得到的上清液质量的5％。
S9、醇沉：往步骤S8得到的滤液加入5倍体积的乙醇，搅拌均匀后于5℃下冷藏静置25h，离心处理去上清液得到沉淀；其中加入的乙醇浓度为95％。
S10、真空干燥：对步骤S9得到的沉淀进行真空干燥，得到海藻活性多糖；其中真空干燥的温度为80℃，压力为10Pa。
以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明的范围内。本发明要求的保护范围由所附的权利要求书及其等同物界定。
Claims (10)
1.一种从海藻中提取活性多糖的方法，其特征在于，具体包括以下步骤：
S1、海藻清洗：取新鲜海藻，洗净晾干后将海藻切碎；
S2、海藻粉碎处理：将切碎后的海藻先后置于粉碎机和超微粉碎机中进行粉碎，得到粒径为10-30μm海藻超微粉；
S3、海藻脱脂处理：将超微海藻粉利用石油醚进行脱脂处理得到脱脂海藻粉；
S4、酶解处理：将脱脂海藻粉加入蒸馏水和复合酶，辅助微波进行酶解，酶解结束后灭酶，过滤得沉淀物和过滤液；
S5、超生提取：往步骤S4得到的沉淀物中加入10-12倍沉淀物质量的蒸馏水，进行超声提取，提取结束后离心，取上清液；
S6、浓缩：合并步骤S4中的过滤液和步骤S5中的上清液，进行减压浓缩，得浓缩液；
S7、去蛋白处理：往浓缩液中加入去蛋白处理剂，搅拌均匀后静置一段时间，离心去除沉淀得上清液；
S8、脱色处理：往步骤S7得到的上清液中脱色剂进行脱色处理，脱色处理后进行固液分离，收集滤液；
S9、醇沉：往步骤S8得到的滤液加入3-5倍体积的乙醇，搅拌均匀后于0-5℃下冷藏静置15-25h，离心处理去上清液得到沉淀；
S10、真空干燥：对步骤S9得到的沉淀进行真空干燥，得到海藻活性多糖。
2.根据权利要求1所述的一种从海藻中提取活性多糖的方法，其特征在于，所述步骤S1中，先将海藻置于碱水池中漂洗10-15min，后将海藻捞出置于清水池中清洗2-4次，每次清洗时间为5-10min，清洗完成后将海藻取出置于切片机中进行剪切得海藻碎料。
3.根据权利要求1所述的一种从海藻中提取活性多糖的方法，其特征在于，所述步骤S3中，超微海藻粉与石油醚的质量比为1:3.5-5.5，在温度为50-60℃下浸提3-4次进行脱脂处理，浸提结束后离心，沉淀物质在50-80℃下干燥，得到脱脂海藻粉。
4.根据权利要求1所述的一种从海藻中提取活性多糖的方法，其特征在于，所述步骤S4中，脱脂海藻粉与蒸馏水的质量比为1:6-8，复合酶为纤维素酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶的混合物，复合酶的添加量为沉淀物质量的0.8-1.2％，酶解过程中控制pH为6.5-7.5，酶解温度为45-55℃，酶解时间为2-3h；所述微波的功率为400-600W，频率为700-1000MHZ。
5.根据权利要求1所述的一种从海藻中提取活性多糖的方法，其特征在于，所述步骤S5中，超生提取的功率为200-300W，超生提取温度为70-80℃，超生提取时间为70-100min。
6.根据权利要求1所述的一种从海藻中提取活性多糖的方法，其特征在于，所述步骤S6中，浓缩为减压浓缩，即在0.1-0.5MPa真空度，55-85℃条件下将过滤液和上清液浓缩至原体积的1/5-1/10。
7.根据权利要求1所述的一种从海藻中提取活性多糖的方法，其特征在于，所述步骤S7中，所述去蛋白处理剂为三氯乙酸，使浓缩液中的三氯乙酸浓度为1-2g/mL，搅拌均匀后静置12-24h，离心除去蛋白质沉淀。
8.根据权利要求1所述的一种从海藻中提取活性多糖的方法，其特征在于，所述步骤S8中，脱色剂为活性炭、活性白土和β-环糊精的混合物，其中活性炭、活性白土和β-环糊精的质量比为14-18:10-14:5-7；脱色剂的添加量为步骤S7得到的上清液质量的3-5％。
9.根据权利要求1所述的一种从海藻中提取活性多糖的方法，其特征在于，所述步骤S9中，加入的乙醇浓度为93-95％。
10.根据权利要求1所述的一种从海藻中提取活性多糖的方法，其特征在于，所述步骤S10中，真空干燥的温度为60-80℃，压力为5-10Pa。
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|---|---|
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Cited By (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110101620A (zh) * | 2019-05-30 | 2019-08-09 | 汕头大学 | 一种吸收紫外线的组合物及其应用 |
| CN110183544A (zh) * | 2019-06-06 | 2019-08-30 | 山东天易科技有限公司 | 一种海藻多糖的制备方法 |
| CN110179683A (zh) * | 2019-05-30 | 2019-08-30 | 汕头大学 | 一种含有天然防晒物质的化妆品 |
| CN110627863A (zh) * | 2019-10-09 | 2019-12-31 | 广东丸美生物技术股份有限公司 | 蛋白多糖提取方法、提取物及其应用和化妆品 |
| CN110742964A (zh) * | 2019-11-06 | 2020-02-04 | 国泰振兴科技发展有限公司 | 一种治疗肺癌的药物组合物及其制备方法 |
| CN111253185A (zh) * | 2020-03-11 | 2020-06-09 | 青岛明月蓝海生物科技有限公司 | 一种以泡叶藻为原料制备叶面肥的方法及叶面肥 |
| CN111318050A (zh) * | 2020-03-05 | 2020-06-23 | 广西科学院 | 一种从海藻中综合提取多不饱和脂肪酸和多糖的方法 |
| CN113186026A (zh) * | 2021-04-25 | 2021-07-30 | 成都红旗油脂有限公司 | 一种浓香玉米油的制备工艺及制得的玉米油 |
| CN113584102A (zh) * | 2021-07-06 | 2021-11-02 | 济宁学院 | 具有抗氧化活性的微拟球藻多糖的制备方法 |
| CN113788722A (zh) * | 2021-09-23 | 2021-12-14 | 山东爱果者生物技术有限公司 | 一种生物刺激素及其制备方法 |
Citations (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101134783A (zh) * | 2007-10-19 | 2008-03-05 | 大连工业大学 | 一种海带多糖的制备方法 |
| CN102134285A (zh) * | 2011-04-29 | 2011-07-27 | 汕头大学 | 一种残次坛紫菜多糖的制备方法 |
| CN102268101A (zh) * | 2011-08-31 | 2011-12-07 | 南京财经大学 | 一种高纯度紫菜多糖的酶辅助提取方法 |
| CN103044570A (zh) * | 2013-01-25 | 2013-04-17 | 福建海兴保健食品有限公司 | 一种高效提取浒苔多糖的提取工艺 |
| CN103724675A (zh) * | 2013-11-30 | 2014-04-16 | 青岛海之林生物科技开发有限公司 | 一种藻类中提取多糖的提取方法 |
| CN104448023A (zh) * | 2014-12-19 | 2015-03-25 | 桂林市和胤祥新型材料有限公司 | 一种从海带中提取多糖硫酸酯的方法 |
| CN104650252A (zh) * | 2015-03-04 | 2015-05-27 | 广州市白云联佳精细化工厂 | 一种石莼多糖的高效提取方法 |
| CN106832030A (zh) * | 2017-01-22 | 2017-06-13 | 嵊州市派特普科技开发有限公司 | 从海藻中提取活性多糖的方法 |
| CN107722129A (zh) * | 2017-09-18 | 2018-02-23 | 赵方铭 | 一种利用超声波从海带中提取褐藻糖胶的方法 |
| CN108976306A (zh) * | 2017-06-02 | 2018-12-11 | 天津科技大学 | 一种从海带中提取分离多糖的方法 |
-
2019
- 2019-01-15 CN CN201910037147.0A patent/CN109608559A/zh active Pending
Patent Citations (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101134783A (zh) * | 2007-10-19 | 2008-03-05 | 大连工业大学 | 一种海带多糖的制备方法 |
| CN102134285A (zh) * | 2011-04-29 | 2011-07-27 | 汕头大学 | 一种残次坛紫菜多糖的制备方法 |
| CN102268101A (zh) * | 2011-08-31 | 2011-12-07 | 南京财经大学 | 一种高纯度紫菜多糖的酶辅助提取方法 |
| CN103044570A (zh) * | 2013-01-25 | 2013-04-17 | 福建海兴保健食品有限公司 | 一种高效提取浒苔多糖的提取工艺 |
| CN103724675A (zh) * | 2013-11-30 | 2014-04-16 | 青岛海之林生物科技开发有限公司 | 一种藻类中提取多糖的提取方法 |
| CN104448023A (zh) * | 2014-12-19 | 2015-03-25 | 桂林市和胤祥新型材料有限公司 | 一种从海带中提取多糖硫酸酯的方法 |
| CN104650252A (zh) * | 2015-03-04 | 2015-05-27 | 广州市白云联佳精细化工厂 | 一种石莼多糖的高效提取方法 |
| CN106832030A (zh) * | 2017-01-22 | 2017-06-13 | 嵊州市派特普科技开发有限公司 | 从海藻中提取活性多糖的方法 |
| CN108976306A (zh) * | 2017-06-02 | 2018-12-11 | 天津科技大学 | 一种从海带中提取分离多糖的方法 |
| CN107722129A (zh) * | 2017-09-18 | 2018-02-23 | 赵方铭 | 一种利用超声波从海带中提取褐藻糖胶的方法 |
Non-Patent Citations (7)
| Title |
|---|
| 张龙 等: "《绿色化学》", 31 August 2014, 华中科技大学出版社 * |
| 李来好: "《水产品保鲜与加工》", 30 November 2004, 广东科技出版社 * |
| 王广慧: "《食药用真菌中的生物活性物质及其应用研究》", 30 June 2015, 黑龙江大学出版社 * |
| 秦松: "《海岸带生物活性物质》", 28 February 2018, 山东科学技术出版社 * |
| 蔡光先: "《超微中药的临床应用与实验研究》", 30 April 2011, 中国中医药出版社 * |
| 颜晓琳 等: "双波辅助提取结合双水相萃取分离纯化龙须菜多糖研究", 《汕头大学学报（自然科学版）》 * |
| 马同江 等: "《新编食品添加剂》", 31 December 1989, 农村读物出版社 * |
Cited By (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110101620A (zh) * | 2019-05-30 | 2019-08-09 | 汕头大学 | 一种吸收紫外线的组合物及其应用 |
| CN110179683A (zh) * | 2019-05-30 | 2019-08-30 | 汕头大学 | 一种含有天然防晒物质的化妆品 |
| CN110183544A (zh) * | 2019-06-06 | 2019-08-30 | 山东天易科技有限公司 | 一种海藻多糖的制备方法 |
| CN110627863A (zh) * | 2019-10-09 | 2019-12-31 | 广东丸美生物技术股份有限公司 | 蛋白多糖提取方法、提取物及其应用和化妆品 |
| CN110627863B (zh) * | 2019-10-09 | 2021-07-06 | 广东丸美生物技术股份有限公司 | 蛋白多糖提取方法、提取物及其应用和化妆品 |
| CN110742964A (zh) * | 2019-11-06 | 2020-02-04 | 国泰振兴科技发展有限公司 | 一种治疗肺癌的药物组合物及其制备方法 |
| CN111318050A (zh) * | 2020-03-05 | 2020-06-23 | 广西科学院 | 一种从海藻中综合提取多不饱和脂肪酸和多糖的方法 |
| CN111318050B (zh) * | 2020-03-05 | 2022-07-01 | 广西科学院 | 一种从海藻中综合提取多不饱和脂肪酸和多糖的方法 |
| CN111253185A (zh) * | 2020-03-11 | 2020-06-09 | 青岛明月蓝海生物科技有限公司 | 一种以泡叶藻为原料制备叶面肥的方法及叶面肥 |
| CN113186026A (zh) * | 2021-04-25 | 2021-07-30 | 成都红旗油脂有限公司 | 一种浓香玉米油的制备工艺及制得的玉米油 |
| CN113584102A (zh) * | 2021-07-06 | 2021-11-02 | 济宁学院 | 具有抗氧化活性的微拟球藻多糖的制备方法 |
| CN113788722A (zh) * | 2021-09-23 | 2021-12-14 | 山东爱果者生物技术有限公司 | 一种生物刺激素及其制备方法 |
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