CN109562063A

CN109562063A - 包含人胰高血糖素和末端接枝的共聚氨基酸的可注射水溶液形式的组合物

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Publication number: CN109562063A
Application number: CN201780047755.9A
Authority: CN
Inventors: 亚历山大·盖斯勒; 塞戈莱纳·拉格; 里夏尔·沙尔韦; 奥利维耶·索拉; 大卫·杜拉克; 格雷戈里·梅弗朗
Original assignee: Adocia SAS
Current assignee: Adocia SAS
Priority date: 2016-06-07
Filing date: 2017-06-07
Publication date: 2019-04-02
Also published as: EP3463295A1; AU2017277590A1; EP3463294B1; JP2019517560A; US10485851B2; CA3026802A1; EP3463294A1; EP3463295B1; SG11201810901VA; CA3027238A1; CN109562064A; JP2019521107A; MX2018015069A; US10383918B2; WO2017211918A1; SG11201810939PA; KR20190026748A; WO2017211917A1; US20170348394A1; US20170348395A1

Abstract

本发明涉及呈可注射水溶液形式的物理上稳定的组合物，其pH值介于6.0和8.0之间，至少包含：a)人胰高血糖素，和b)具有羧酸根电荷和疏水基团Hy的共聚氨基酸，在一个实施方案中，根据本发明的组合物还包含胃肠激素。

Description

包含人胰高血糖素和末端接枝的共聚氨基酸的可注射水溶液形式的组合物

人胰高血糖素是一种短效高血糖激素，其可使血糖过多增加，从而纠正可由胰岛素过量导致的低血糖水平。其使得能够通过刺激肝糖原分解释放葡萄糖，并且其具有胰岛素拮抗性质(低血糖)。当检测到低血糖症时，人胰高血糖素通常由胰腺中的郎格罕氏岛(islets of Langerhans)的α细胞分泌。

人胰高血糖素用于治疗目的，诸如严重低血糖症的紧急治疗(也称为“拯救”)，但也用于进行体格检查的诊断情形中，例如，以抑制胃肠蠕动。还考虑了人胰高血糖素的其它应用，特别是其在双激素血糖过多调节***(也称为人工胰腺)中以及先天性高胰岛素血症(其为以非常高的胰岛素水平为特征的罕见病)中的用途。

由于人胰高血糖素在开发具有治疗意图的稳定药品方面具有一些不利性质，其临床应用受到限制。实际上，由于人胰高血糖素在大的pH范围内形成原纤维的倾向性，其在生理pH下具有极低的溶解度和高的物理不稳定性。这就是为什么唯一的基于人胰高血糖素的商业产品(NOVO NORDISK和注射用胰高血糖素，ELI LILLY)呈冻干形式，以便即时复原的原因。

Onoue等(Pharm.Res.2004，21(7)，1274-83)的研究已显示这些原纤维的潜在危险特征：原纤化的人胰高血糖素在培养的哺乳动物细胞中具有细胞毒性。

除了其物理不稳定性外，人胰高血糖素还经历各种类型的化学降解。在水溶液中，其迅速降解形成几种降解产物。Kirsh等(International Journal of Pharmaceutics，2000，203，115-125)已鉴定出至少16种人胰高血糖素的降解产物。因此，这种人胰高血糖素的化学降解是快速和复杂的。

人体胰高血糖素在溶液中的化学和物理稳定性差，已导致制药公司诸如NOVONORDISK、ELI LILLY和最近FRESENIUS KABI以冻干产物的形式销售这种人胰高血糖素，在即将注射时将其在酸性pH(pH＜3)下复原。冻干形式的人胰高血糖素更稳定，并且在即将使用时在酸性pH下制备制剂，使得可能获得澄清的溶液。然而，一旦将产品复原，其必须被快速使用，因为其在酸性复原缓冲液(reconstitution buffer)中经历极快的化学和物理降解，其中在组合物重原和/或胶凝化后24小时内出现人胰高血糖素原纤维。然而，该产品的这种呈现是不令人满意的，因为需要非常快速地使用该制剂。这种不稳定性不仅使其不可能在泵中使用其，而且其还在诊断用途中呈现导致大量产品损失的不利方面。事实上，由于这种类型的组合物在其制备后几小时不再可用，这导致浪费。

最后，即使在糖尿病患者的胰岛素治疗期间可能发生的严重低血糖反应的紧急治疗应用中，待复原的制剂也不理想，因为其涉及长而复杂的制备，例如的包装说明书描述了注射推荐剂量的5步骤程序。此外，LOCEMIA公司的一项研究表明，在紧急情况下应该进行复原的极少数人(约10％的参与者)能够递送适当的剂量。最后，人胰高血糖素溶液的酸性pH可在患者注射时产生疼痛。

因此，需要即用型人胰高血糖素溶液。现今，从临床上来讲使得能够递送人高血糖素的最先进的解决方案以不同的方式避开人胰高血糖素在水溶液中的稳定性问题。

LOCEMIA公司已开发了一种冻干的人胰高血糖素喷雾剂，其目前正在进行3期临床研究，意欲通过鼻内途径施用。该喷雾剂适用于所谓的“挽救”用途，即在严重低血糖的情况下，因为其是即用型的并因此而易于使用，与需要复原的溶液相反。然而，该产品不适用于泵或需要精确控制人胰高血糖素递送量的用途。

至于XERIS，其开发了一种基于极性非质子溶剂(诸如DMSO)的人胰高血糖素液体制剂，目前正在临床研究中进行测试。然而，尽管可以考虑注射用于“挽救”用途的有机溶剂的溶液，但对于长期使用，最好优选使用人胰高血糖素水溶液。已经考虑了包含与其它肽(特别是胰岛淀粉样多肽(amylin)或GLP-1 RA(胰高血糖素样肽-1受体激动剂))的组合的组合物。

最后，面对人胰高血糖素配制的困难，人胰高血糖素的类似物正在由大型制药公司诸如NOVO NORDISK、SANOFI或ELILILLY开发，以获得具有与药物用途相容的稳定性的制剂。然而，与人源肽相比，其一级序列已被修饰的这些肽可给患者带来安全风险。

因此，在溶液中存在一个主要有利方面，所述有利方面使得可能改善人胰高血糖素在pH接近生理pH(也即6.0至8.0)的水溶液中的溶解和稳定性(化学和物理两个方面)。这可能使得患者在紧急情况下更容易使用的药品，但其也可开辟人胰高血糖素的新的治疗应用领域，例如，诸如其在双激素人工胰腺中的用途。

现有技术提出了解决方案以试图解决该问题。

一些文献建议使用碱性pH。例如，US2015291680教导了通过使用8.8至9.4的pH并通过使用阿魏酸或四氢姜黄素来以1mg/mL溶解人胰高血糖素。然而，除了使用碱性pH的事实之外，该解决方案还呈现导致人胰高血糖素随时间推移而产生相当有限的稳定性的不利方面。Jackson等的论文(Curr.Diab.Rep.，2012，12，705-710)提出在碱性pH(约10)下配制人胰高血糖素，以限制原纤维形成。然而，该解决方案不能防止人胰高血糖素的快速化学降解。

另一方面，申请WO2014096440(NOVOZYME)考虑在白蛋白和聚山梨醇酯存在的情况下使用微酸性pH(约5.5)，以通过降低原纤维形成速率来改善稳定性。然而，该解决方案提供了稳定性的有限改善。现有技术中描述的使得可能获得人胰高血糖素的澄清溶液并防止人胰高血糖素的聚集、胶凝化或沉淀的大多数解决方案涉及使用表面活性剂、去垢剂或其它已知的增溶剂。

例如，Matilainen等(J.Pharm.Sci.，2008，97，2720-2729和Eur.J.Pharm.Sci.，2009，36，412-420)描述了使用环糊精以限制人胰高血糖素的原纤维形成速率。然而，所提供的改善似乎不足以考虑在泵中使用。

所提出的解决方案包括亲水性表面活性剂：

-GB1202607(NOVO NORDISK)描述了使用阴离子或阳离子洗涤剂。

-US6384016(NOVO NORDISK)和US2011097386(BIODEL)使用溶血磷脂(或溶血卵磷脂)。

-WO2015095389(AEGIS)描述了非离子表面活性剂诸如十二烷基麦芽糖苷，用于改善治疗剂的生物利用度，在通过施用于粘膜或表皮进行递送的情况下，特别是在眼、鼻、口服或鼻泪管分娩的情况下。该文献描述了烷基糖苷的存在导致人胰高血糖素在眼部位的吸收的改善，

-申请WO2012059764(ARECOR)描述了阳离子表面活性剂，更准确地说，芳族氯化铵。

上述文献中指出的表面活性剂对于皮下途径的长期使用可能毒性或刺激性太大。例如，已知溶血磷脂(或溶血卵磷脂)由于其溶血特性而裂解红细胞。在皮下注射中，这可导致组织的局部损伤和注射部位的疼痛。在通过泵连续注射的情况下，这可导致针***部位的疼痛和/或刺激。国际申请WO2011138802(Sun Pharma)描述了在聚乙二醇化脂质(聚乙二醇化二硬脂酰磷脂酰乙醇胺)存在的情况下，在pH 5-7.5的胶束水溶液中的人胰高血糖素的即用型溶液。然而，Garay等(Expert Opin Drug Deliv(2012)9，1319-1323)教导聚乙二醇既具有免疫原性又具有抗原性。这可能对具有抗PEG抗体的患者有害。此外，Ganson等(J.Allergy Clin.Immunol.(2015)doi：10.1016/j.jaci.2015.10.034)描述了关于与40kDa甲氧基聚乙二醇(mPEG)偶联的pegnivacogin的临床研究在640名患者中的3名中导致了始于第一剂pegnivacogin的炎症反应。在这三名患者中，两名患者符合过敏反应标准，一名患者具有孤立的皮肤反应；每个事件都被认为是严重的，并且一名甚至被认为对患者有生命危险。这些不良事件导致临床试验停止并引起聚乙二醇化化合物的副作用问题。

文献WO2013101749(LATITUDE)描述了人胰高血糖素的纳米乳剂。然而，就化学稳定性而言，要求相对适中的性能，即，组合物在37℃下3-7天后包含至少75％的初始浓度。

另外，应该注意，到目前为止，据申请人所知，在临床研究中没有测试呈水溶液形式的包含人胰高血糖素的药物制剂。

因此，仍然需要pH接近生理pH(6.0至8.0)的液体水性制剂，所述水性制剂使得能够溶解和获得令人满意的人胰高血糖素稳定性(在物理稳定性和化学稳定性方面)。更特别地，需要这样的制剂，其可用于双激素泵(胰岛素/人胰高血糖素)。

对于Tan等(Diabetes，2013，62，1131-138)，该需要是特别清楚的，所述文献显示将人胰高血糖素与GLP-1 RA组合是治疗肥胖和糖尿病的有吸引力的提议。然而，能够在pH接近生理pH(6.0至8.0)的水溶液中以稳定的方式配制人胰高血糖素，允许更有利的条件，以能够改善对酸性或碱性条件敏感的GLP-1 RA的稳定性。

根据本发明的具有羧酸根电荷和疏水基团Hy的共聚氨基酸表现出优异的抗水解性。这尤其可以在加速条件下(例如在碱性pH(pH 12)下的水解试验中)观察到。

另外，例如Fenton氧化型的强制氧化试验表明，具有羧酸根电荷和疏水基团Hy的共聚氨基酸具有良好的抗氧化性。

因此，本发明涉及呈可注射水溶液形式的物理稳定的组合物，其pH值为6.0-8.0，至少包含：

a)人体胰高血糖素，和

b)具有羧酸根电荷和疏水基团Hy的共聚氨基酸，所述共聚氨基酸由谷氨酸或天冬氨酸单元组成，并且所述疏水基团Hy为下式I的基团：

其中

-GpR为式II或式II’的基团：

-GpA为式III或III’的基团：

-GpC为式IV的基团：

-*表示不同基团的连接位点；

-a为等于0或1的整数；

-b为等于0或1的整数；以及

-p为等于1或2的整数；以及

○如果p等于1，则a等于0或1并且GpA为式III’的基团，以及

○如果p等于2，则a等于1并且GpA为式III的基团；

-c为等于0或1的整数，并且如果c等于0，则d等于1或2；

-d为等于0、1或2的整数；

-r为等于0或1的整数；以及

○如果r等于0，则式I的疏水基团通过疏水基团的羰基与共聚氨基酸的N-末端位置处的氮原子之间的共价键与共聚氨基酸键合，从而形成源自共聚氨基酸前体的N-末端位置处的胺官能团与疏水基团前体所具有的酸官能团的反应的酰胺官能团，以及

○如果r等于1，则式I的疏水基团：

■通过疏水基团的氮原子与共聚氨基酸的羰基之间的共价键与共聚氨基酸键合，从而形成源自疏水基团的前体的胺官能团与由共聚氨基酸的前体所具有的酸官能团之间的反应的酰胺官能团，或者

■通过疏水基团的羰基与共聚氨基酸的N-末端位置处的氮原子之间的共价键与共聚氨基酸键合，从而形成源自疏水基团的前体的酸官能团与由共聚氨基酸的前体所具有的N末端位置处的胺官能团的反应的酰胺官能团；

-R为选自由以下组成的组的基团：

○直链或支链二价烷基，如果GpR为式II的基团，则其包含2至12个碳原子，或者如果GpR是式II’的基团，则其包含1至11个碳原子；

○直链或支链二价烷基，如果GpR为式II的基团，则其包含2至11个碳原子，或者如果GpR是式II’的基团，则其包含1至11个碳原子，所述烷基具有一个或多个-CONH₂官能团，以及

○未取代的醚或聚醚基团，其包含4至14个碳原子以及1至5个氧原子；

-A为含有1至6个碳原子的直链或支链烷基；

-B为直链或支链烷基，任选地包含芳环，包含1至9个碳原子；

-C_x为直链或支链单价烷基，其中x表示碳原子数目；以及：

○如果p等于1，则x为11至25(11≤x≤25)；

○如果p等于2，则x为9至15(9≤x≤15)；

-疏水基团数目与谷氨酸或天冬氨酸单元数目之间的比率i为0＜i≤0.5；

-当共聚氨基酸具有几个疏水基团时，它们是相同的或不同的，

-谷氨酸或天冬氨酸单元中的聚合度DP为5至250；

-游离酸官能团以选自由Na⁺和K⁺组成的组的碱性阳离子的盐形式存在。

在一个实施方案中，GpR为式II的基团：

在一个实施方案中，所述组合物的特征在于pH为6.6至7.8.

在一个实施方案中，所述组合物的特征在于pH为7.0至7.8.

在一个实施方案中，所述组合物的特征在于pH为6.8至7.4.

在一个实施方案中，组合物的特征在于所述疏水基团选自式I的疏水基团，其中p等于1，并且如果x小于或等于14(x≤14)，则r＝0或r＝1。

在一个实施方案中，组合物的特征在于所述疏水基团选自式I的疏水基团，其中p等于1，并且如果x为15至16(15≤x≤16)，则r＝1。

在一个实施方案中，组合物的特征在于所述疏水基团选自式I的疏水基团，其中p等于1，并且如果x大于17(17≤x)，则r＝1并且R为醚或聚醚基团。

在一个实施方案中，组合物的特征在于所述疏水基团选自式I的疏水基团，其中如果p等于1，则x为17至25(17≤x≤25)。

在一个实施方案中，组合物的特征在于所述疏水基团选自其中p等于1的式I的疏水基团(由下式V表示)：

GpR、GpA、GpC、r和a具有上文中给出的定义。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式V的基团，其中r等于1(r＝1)，并且a等于0(a＝0)。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式V的基团，其中r等于1(r＝1)，并且a等于1(a＝1)。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式V的基团，其中GpR为式II的基团。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式V的基团，其中GpR为式II的基团，其中R为包含2至12个碳原子的二价直链烷基。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式V的基团，其中GpR为式II的基团，其中R为包含2至6个碳原子的二价烷基。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式V的基团，其中GpR为式II的基团，其中R为包含2至6个碳原子的二价直链烷基。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式V的基团，其中GpR为式II的基团，其中R为包含2至4个碳原子的二价烷基。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式V的基团，其中GpR为式II的基团，其中R为包含2至4个碳原子的二价直链烷基。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式V的基团，其中GpR为式II的基团，其中R为包含2个碳原子的二价烷基。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式V的基团，其中GpR为式II’的基团。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式V的基团，其中GpR为式II’的基团，其中R为包含1至11个碳原子的二价直链烷基。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式V的基团，其中GpR为式II’的基团，其中R为包含1至6个碳原子的二价烷基。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水为团为式V的基团，其中GpR为式II或式II’的基团，其中R为包含2至5个碳原子并且具有一个或多个酰胺官能团(-CONH₂)的二价烷基。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水为团为式V的基团，其中GpR为式II或式II’的基团，其中R为包含2至5个碳原子并且具有一个或多个酰胺官能团(-CONH₂)的二价直链烷基。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式V的基团，其中GpR为式II或式II’的基团，其中R为选自由下式所表示的基团组成的组的基团：

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式V的基团，其中GpR为式II或式II’的基团，其中R为式X1的基团。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式V的基团，其中GpR为式II或式II’的基团，其中R为式X2的基团。

在一个实施方案中，组合物的特征在于基团R通过相对于酰胺官能团(-CONH₂)的δ或ε位(或位置4或5处)的碳所具有的酰胺官能团与共聚氨基酸键合。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式V的基团，其中GpR为式II或式II’的基团，其中R为包含4至14个碳原子和1至5个氧原子的未取代的直链醚或聚醚基团。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式V的基团，其中GpR为式II或式II’的基团，其中R为醚基团。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式V的基团，其中GpR为式II或式II’的基团，其中R为包含4至6个碳原子的醚基团。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于疏水基团为式V的基团，其中GpR为式II的基团，其中R为包含6个碳原子的二价烷基。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式V的基团，其中GpR为式II或式II’的基团，其中R为由式表示的醚基团。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式V的基团，其中GpR为式II或式II’的基团，其中R为聚醚基团。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式V的基团，其中GpR为式II或式II’的基团，其中R为包含6至10个碳原子和2至3个氧原子的直链聚醚基团。

在一个实施方案中，组合物的特征在于式V的疏水基团，其中GpR为式II或式II’的基团，其中R为选自由下式所示的基团组成的组的聚醚基团：

在一个实施方案中，组合物的特征在于式V的疏水基团，其中GpR为式II或式II’的基团，其中R为式X3的基团。

在一个实施方案中，组合物的特征在于式V的疏水基团，其中GpR为式II或式II’的基团，其中R为式X4的基团。

在一个实施方案中，组合物的特征在于式V的疏水基团，其中GpR为式II或式II’的基团，其中R为式X5的基团。

在一个实施方案中，组合物的特征在于式V的疏水基团，其中GpR为式II或式II’的基团，其中R为式X6的基团。

在一个实施方案中，组合物的特征在于式V的疏水基团，其中GpR为式II的基团，其中R为选自由下式X5和X6所表示的基团组成的组的聚醚基团：

在一个实施方案中，组合物的特征在于式V的疏水基团，其中GpR为式II的基团，其中R为式X5的聚醚基团。

在一个实施方案中，组合物的特征在于式V的疏水基团，其中GpR为式II的基团，其中R为式X6的聚醚基团。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式V的基团，其中a等于0(a＝0)，并且r等于0(r＝0)。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式V的基团，其中a等于1(a＝1)，并且式III’的基团GpA选自由下式所示的基团组成的组：

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式V的基团，其中a等于1(a＝1)，并且式III’的基团GpA为式Y1的基团。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式V的基团，其中a等于1(a＝1)，并且式III’的基团GpA为式Y2的基团。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式V的基团，其中a等于1(a＝1)，并且式III’的基团GpA为式Y3的基团。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式V的基团，其中a等于1(a＝1)，并且式III’的基团GpA为式Y4的基团。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式V的基团，其中a等于1(a＝1)，并且式III’的基团GpA为式Y5的基团。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式V的基团，其中a等于1(a＝1)，并且式III’的基团GpA为式Y6的基团。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式V的基团，其中a等于1(a＝1)，并且式III’的基团GpA为式Y7的基团。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式V的基团，其中a等于1(a＝1)，并且式III’的基团GpA为式Y8的基团。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式V的基团，其中式IV的基团GpC选自由下文中所表示的式IVa、IVb或IVc的基团组成的组：

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式V的基团，其中GpC具有式IVa。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式V的基团，其中式IV的基团GpC选自由其中b等于0的式IVa、IVb或IVc的基团(分别具有下文中所表示的式IVd、IVe或IVf)组成的组：

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式V的基团，其中GpC对应于其中b＝0的式IV或IVa，以及对应于式IVd。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式V的基团，其中式IV(其中b＝1)的基团GpC选自由其中B为氨基酸残基的基团组成的组，所述氨基酸残疾选自由下式所表示的基团组成的组：

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式V的基团，其中式的基团GpC对应于其中b＝1的式IV或IVa，选自由其中B为氨基酸残基的基团组成的组，所述氨基酸残基选自由下式所示的基团组成的组：

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团是式V的基团，其中式IV的基团GpC选自由以下基团组成的组，在所述基团中Cx选自由直链烷基组成的组。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团是式V的基团，其中式IV的基团GpC选自由以下基团组成的组，在所述基团中Cx选自由支链烷基组成的组。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团是式V的基团，其中式IV的基团GpC选自由以下基团组成的组，在所述基团中Cx选自由包含11至14个碳原子的烷基组成的组。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团是式V的基团，其中式IV的基团GpC选自由以下基团组成的组，在所述基团中Cx选自由下式所表示的基团组成的组：

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团是式V的基团，其中式IV的基团GpC选自由以下基团组成的组，在所述基团中Cx选自由包含15至16个碳原子的烷基组成的组。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团是式V的基团，其中式IV的基团GpC选自由以下基团组成的组，在所述基团中Cx选自由包含17至25个碳原子的烷基组成的组。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团是式V的基团，其中式IV的基团GpC选自由以下基团组成的组，在所述基团中Cx选自由包含17至18个碳原子的烷基组成的组。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团是式V的基团，其中式IV的基团GpC选自由以下基团组成的组，在所述基团中Cx选自由下式所表示的烷基组成的组：

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团是式V的基团，其中式IV的基团GpC选自由以下基团组成的组，在所述基团中Cx选自由包含18至25个碳原子的烷基组成的组。

在一个实施方案中，组合物的特征在于式I的疏水基团选自其中a＝1并且p＝2的式I的疏水基团，由下式VI所表示：

其中

GpR、GpA、GpC、r和a具有上文中给出的定义。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式VI的基团，其中GpR为式II的基团。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式VI的基团，其中GpR为式II的基团，其中R为包含2至12个碳原子的二价直链烷基。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式VI的基团，其中GpR为式II的基团，其中R为包含2至6个碳原子的二价烷基。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式VI的基团，其中GpR为式II的基团，其中R为包含2至6个碳原子的二价直链烷基。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式VI的基团，其中GpR为式II的基团，其中R为包含2至4个碳原子的烷基。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式VI的基团，其中GpR为式II的基团，其中R为包含2至4个碳原子的二价直链烷基。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式VI的基团，其中GpR为式II的基团，其中R为包含2个碳原子的二价直链烷基。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式VI的基团，其中GpR为式II’的基团。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式VI的基团，其中GpR为式II’的基团，其中R为包含1至11个碳原子的二价直链烷基。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式VI的基团，其中GpR为式II’的基团，其中R为包含1至6个碳原子的二价烷基。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水为团为式VI的基团，其中GpR为式II或式II’的基团，其中R为包含2至5个碳原子并且具有一个或多个酰胺官能团(-CONH2)的二价烷基。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水为团为式VI的基团，其中GpR为式II或式II’的基团，其中R为包含2至5个碳原子并且具有一个或多个酰胺官能团(-CONH2)的二价直链烷基。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式VI的基团，其中GpR为式II或式II’的基团，其中R为选自由下式所表示的基团组成的组的基团：

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式VI的基团，其中参与将所述GpR基团与共聚氨基酸键合的酰胺官能团的形成的GpR基团的胺官能团由相对于酰胺官能团(-CONH2)的δ或ε位(或位置4或5处)的碳所具有。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式VI的基团，其中GpR为式II或式II’的基团，其中R为包含4至14个碳原子和1至5个氧原子的未取代的直链醚或聚醚基团。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式VI的基团，其中GpR为式II或式II’的基团，其中R为醚基团。

在一个实施方案中，组合物的特征在于所述醚基团是R含4至6个碳原子的基团。

在一个实施方案中，组合物的特征在于所述醚基团为

在一个实施方案中，所述组合物的特征在于疏水基团是式VI的基团，其中GpR是式II或式II’的基团，其中R是聚醚基团。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式VI的基团，其中GpR为式II或式II’的基团，其中R为包含6至10个碳原子和2至3个氧原子的直链聚醚基团。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式VI的基团，其中GpR为式II或式II’的基团，其中R为选自由下式所表示的基团组成的组的直链聚醚基团：

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式VI的基团，其中GpR为式II或式II’的基团，其中R为式X3的直链聚醚基团。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式VI的基团，其中GpR为式II或式II’的基团，其中R为式X4的直链聚醚基团。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式VI的基团，其中GpR为式II或式II’的基团，其中R为式X5的直链聚醚基团。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式VI的基团，其中GpR为式II或式II’的基团，其中R为式X6的直链聚醚基团。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式VI的基团，其中式III的基团GpA选自由下文所表示的式IIIa、IIIb和IIIc的基团组成的组：

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式VI的基团，其中式III的基团GpA为下文中所表示的式IIIb的基团：

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于疏水基团为式VI的基团，其中式III的基团GpA为式IIIc的基团。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式VI的基团，其中式IV的基团GpC选自由下文中所表示的式IVa、IVb或IVc的基团组成的组：

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式VI的基团，其中基团GpC具有式IVa。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式VI的基团，其中式IV的基团GpC选自由其中b等于0的式IVa、IVb或IVc的基团(分别对应于由下文中所表示的式IVd、IVe或IVf)组成的组：

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式VI的基团，其中基团GpC对应于其中b＝0的式IV或IVa，并且其对应于式IVd。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式VI的基团，其中式IV的基团GpC选自由以下基团组成的组，在所述基团中Cx选自由包含9至15个碳原子的直链烷基组成的组。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式VI的基团，其中式IV的基团GpC选自由以下基团组成的组，在所述基团中Cx选自由包含9至15个碳原子的支链烷基组成的组。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式VI的基团，其中式IV的基团GpC选自由以下基团组成的组，在所述基团中Cx选自由包含9或10个碳原子的烷基组成的组。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式VI的基团，其中式IV的基团GpC选自由以下基团组成的组，在所述基团中Cx选自由包含11至15个碳原子的烷基组成的组。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式VI的基团，其中式IV的基团GpC选自由以下基团组成的组，在所述基团中Cx选自由包含11至13个碳原子的烷基组成的组。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团是式VI的基团，其中式IV的基团GpC选自由以下基团组成的组，在所述基团中Cx选自由下式所表示的烷基组成的组：

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团为式VI的基团，其中式IV的基团GpC选自由以下基团组成的组，在所述基团中Cx选自由包含14或15个碳原子的烷基组成的组。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团是式VI的基团，其中式IV的基团GpC选自由以下基团组成的组，在所述基团中Cx选自由下式所表示的基团组成的组：

在一个实施方案中，组合物的特征在于具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自下式VII的共聚氨基酸：

其中，

●D独立地表示-CH₂-基团(天冬氨酸单元)或-CH₂-CH₂-基团(谷氨酸单元)，

●Hy为选自式I、V或VI的疏水基团的疏水基团，其中r＝1且GpR是式II的基团，

●R₁为选自式I、V或VI的疏水基团的疏水基团，其中r＝0或r＝1且GpR为式II’的基团，或选自由H、C2至C10直链酰基、C3至C10支链酰基、苄基、末端“氨基酸”单元和焦谷氨酸酯组成的组的基团，

●R₂为选自式I、V或VI的疏水基团的疏水基团，其中r＝1，并且GpR为式II的基团，或-NR’R”基团，相同或不同的R’和R”选自由H、C2至C10直链或支链或环状烷基、苄基组成的组，并且所述烷基R’和R”一起任选地形成一个或多个饱和、不饱和和/或芳族碳环和/或任选地包含选自由O、N或S组成的组的杂原子；

●X表示H或选自包含金属阳离子的组的阳离子实体；

●n+m表示共聚氨基酸的聚合度DP，也即每共聚氨基酸链的单体单元的平均数，并且5≤n+m≤250。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自下式VII的共聚氨基酸：

其中，

●D独立地表示-CH₂-式团(天冬氨酸单元)或-CH₂-CH₂-基团(谷氨酸单元)，

●R₁为选自式I、V或VI的疏水基团的疏水基团，其中r＝0或r＝1，并且GpR为式II’的基团，或选自由H、C2至C10直链酰基、C3至C10支链酰基、苄基、末端“氨基酸”单元和焦谷氨酸酯组成的组的基团，

●R₂为选自式I、V或VI的疏水基团的疏水基团，其中r＝1，并且GpR为式II的基团，或-NR’R”基团，相同或不同的R’和R”选自由H、C2至C10直链或支链或环状烷基、苄基组成的组，并且所述烷基R’和R”一起任选地形成一个或多个饱和、不饱和和/或芳族碳环和/或任选地包含选自由O、N和S组成的组的杂原子；

●R₁或R₂中的至少一个为如上定义的疏水基团，

●X表示H或选自包含金属阳离子的组的阳离子实体；

●n+m表示共聚氨基酸的聚合度DP，即每条共聚氨基酸链的单体单元的平均数，并且5≤n+m≤250。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自式VII的共聚氨基酸，其中R₁或R₂中的至少一个为式I、V或V1的疏水基团。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自式VII的共聚氨基酸，其中R₁或R₂中的至少一个为式VI的疏水基团。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自式VII的共聚氨基酸，其中R₁或R₂中的至少一个为式VI的疏水基团；并且Hy为式VI的基团，其中r＝1。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自式VII的共聚氨基酸，其中R₁或R₂中的至少一个为式VI的疏水基团，其中r＝1，并且对于GpC，b＝0。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自式VII的共聚氨基酸，其中R₁为式VI的疏水基团。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自式VII的共聚氨基酸，其中R₁为式VI的疏水基团并且R₂为-NR’R”基团，R’和R”如上所定义。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自式VII的共聚氨基酸，其中R₁为式VI的疏水基团并且R₂为-NR’R”基团，R’和R”如上所定义；并且Hy为式VI的基团，其中r＝1。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自式VII的共聚氨基酸。在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自式VII的共聚氨基酸，其中R₁为式VI的疏水基团并且R₂为-NR’R”基团，R’和R”如上所定义；并且Hy为式VI的基团，其中r＝1，并且对于CpC，b＝0。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自式VII的共聚氨基酸，其中R₂为式I、V或VI的疏水基团。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自式VII的共聚氨基酸，其中R₂为式VI的疏水基团。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自式VII的共聚氨基酸，其中R₂为式VI的疏水基团并且R₁为-NR’R”基团，R’和R”如上所定义。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自式VII的共聚氨基酸，其中R₂为式VI的疏水基团并且R₁为-NR’R”基团，R’和R”如上所定义；并且Hy为式VI的基团，其中r＝1。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自式VII的共聚氨基酸，其中R₂为式VI的疏水基团并且R₁为-NR’R”基团，R’和R”如上所定义；并且Hy为式VI的基团，其中r＝1，并且对于GpC，b＝0。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自式VII的共聚氨基酸，其中R₁和R₂为式I、V或VI的疏水基团。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自式VII的共聚氨基酸，其中R₁和R₂为式VI的疏水基团。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自式VII的共聚氨基酸，其中R₁和R₂为式VI的疏水基团；并且Hy为式VI的基团，其中r＝1。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自式VII的共聚氨基酸，其中R₁和R₂为式VI的疏水基团；并且Hy为式VI的基团，其中r＝1，并且对于GpC，b＝0。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自式VII的共聚氨基酸，其中R₂为式I、V或VI的疏水基团，其中r＝1；GpR具有式II。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自式VII的共聚氨基酸，其中R₂为式VI的疏水基团，其中r＝1；并且GpR具有式II。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自式VII的共聚氨基酸，其中R₂为式VI的疏水基团，其中r＝1；GpR具有式II；并且GpC具有式IV，其中b＝0，c＝0并且d＝1。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自式VII的共聚氨基酸，其中R₂为式VI的疏水基团，其中r＝1；GpR具有式II；并且GpC具有式IV，其中b＝0，c＝0，d＝1并且x＝13。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于当共聚氨基酸包含天冬氨酸单元时，则共聚氨基酸可以另外地包含式VIII和/或VIII’的单体单元：

其中，

●Hy为选自式I、V或VI的疏水基团的疏水基团，其中r＝1且GpR为式II的基团，

●R₁或R₂中的至少一个为如上定义的疏水基团，

●X表示选自包含碱性阳离子的组的阳离子实体；

●n≥1并且n+m表示共聚氨基酸的聚合度DP，即每条共聚氨基酸链的单体单元的平均数，并且5≤n+m≤250。

具有羧酸根电荷和至少一个式I的疏水基团的共聚氨基酸在本说明书中也可称为“共聚氨基酸”。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自式VII的共聚氨基酸，其中n≥1并且R1或R2中的至少一个为式I、V或VI的疏水基团。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自式VII的共聚氨基酸，其中n≥1并且R1为式I、V或VI的疏水基团。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自式VII的共聚氨基酸，其中n≥1并且R2为式I、V或VI的疏水基团。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自式VII的共聚氨基酸，其中n≥1；R1为式I、V或VI的疏水基团，其中r＝0。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自式VII的共聚氨基酸，其中n≥1；R2为式I、V或VI的疏水基团，其中r＝1；并且GpR具有式II。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自式VII的共聚氨基酸，其中n≥1；R2为式VI的疏水基团，其中r＝1；并且GpR具有式II。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自式VII的共聚氨基酸，其中n≥1，R2为式VI的疏水基团，其中r＝1；GpR具有式II并且GpC具有式IV。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自式VII的共聚氨基酸，其中n≥1；R2为式VI的疏水基团，其中r＝1；GpR具有式II并且GpC具有式IV，其中b＝0，c＝0并且d＝1。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自式VII的共聚氨基酸，其中n≥1；R2为式VI的疏水基团，其中r＝1；GpR具有式II并且GpA具有式IV，其中b＝0，c＝0，d＝1并且x＝13。

在一个实施方案中，组合物的特征在于具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自式VIIb的共聚氨基酸，其中R1为式VI的疏水基团，其中r＝0。

在一个实施方案中，组合物的特征在于具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自式VIIb的共聚氨基酸，其中R1为式VI的疏水基团，其中r＝0；并且GpC具有式IV。

在一个实施方案中，组合物的特征在于具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自式VIIb的共聚氨基酸，其中R1为式VI的疏水基团，其中r＝0；并且GpC具有式IV，其中b＝0，c＝0并且d＝1。

在一个实施方案中，组合物的特征在于具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自式VIIb的共聚氨基酸，其中R1为式VI的疏水基团，其中r＝0；并且GpC具有式IV，其中b＝0，c＝0，d＝1并且x＝13。

“定义的共聚氨基酸”应理解为是指具有羧酸根电荷和至少一种疏水基团的共聚氨基酸，即式VIIb的共聚氨基酸。

在一个实施方案中，组合物的特征在于具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自式VII的共聚氨基酸(其中下式VIIb的n＝0)：

其中m、X、D、R₁和R₂具有如上所定义的定义并且R₁或R₂中的至少一个为式I、V或VI的疏水基团。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自式VII的共聚氨基酸(其中式VIIb的n＝0)，并且R1或R2为式I、V或VI的疏水基团。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自式VIIb的共聚氨基酸，其中R1或R2中的至少一个为式VI的疏水基团。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自式VIIb的共聚氨基酸，其中R1为式VI的疏水基团。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自式VIIb的共聚氨基酸，其中R₁为式VI的疏水基团并且R₂为-NR’R”基团，R’和R”如上所定义。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自式VII的共聚氨基酸，其中R₁为式VI的疏水基团，其中r＝1；并且对于GpC，b＝0；并且R₂为-NR’R”基团，R’和R”如上所定义。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自式VIIb的共聚氨基酸，其中R₂为式I、V或VI的疏水基团。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自式VIIb的共聚氨基酸，其中R₂为式VI的疏水基团。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自式VII的共聚氨基酸，其中R₂为式VI的疏水基团并且R₁为选自由H、C2至C10直链酰基、C3至C10支链酰基、苄基、末端“氨基酸”单元和焦谷氨酸酯组成的组的基团。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自式VIIb的共聚氨基酸，其中R₂为式VI的疏水基团，其中r＝0；并且R₁为选自由H、C2至C10直链酰基、C3至C10支链酰基、苄基、末端“氨基酸”单元和焦谷氨酸酯组成的组的基团。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自式VIIb的共聚氨基酸，其中R₂和Hy为式VI的疏水基团，其中r＝0；并且对于GpC，b＝0；并且R₁为选自由H、C2至C10直链酰基、C3至C10支链酰基、苄基、末端“氨基酸”单元和焦谷氨酸酯组成的组的基团。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自式VII的共聚氨基酸，其中R₁和R₂为式VI的疏水基团，其中对于R₂，r＝1并且GpR具有式II，并且对于R₁，r＝0。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自式VII的共聚氨基酸，其中R₁和R₂为式VI的疏水基团，GPA＝0并且b＝0，其中对于R₂，r＝1并且GpR具有式II，并且对于R₁，r＝0。

在一个实施方案中，根组合物的特征在于具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自式VIIb的共聚氨基酸，其中R₁为式I、V或VI的疏水基团，其中r＝0或r＝1，并且GpR具有式II’。

在一个实施方案中，组合物的特征在于具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自式VIIb的共聚氨基酸，其中R₂为式I、V或VI的疏水基团，其中r＝1并且GpR具有式II。

在一个实施方案中，组合物的特征在于具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自式VII(其中R₂为疏水基团，特别地n≥1)或VIIb(其中R1为选自由C2至C10直链酰基、C3至C10支链酰基、苄基、末端“氨基酸”单元和焦谷氨酸酯组成的组的基团)的共聚氨基酸。

在一个实施方案中，组合物的特征在于具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自式VII(其中R₂为疏水基团，特别地n≥1)或VIIb(其中R₁为选自由C2至C10直链酰基或C3至C10支链酰基组成的组的基团)的共聚氨基酸。

在一个实施方案中，组合物的特征在于具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自式VII(其中R₁或R₂中的至少一种为疏水基团，特别地n≥1)或VIIb(其中基团D为基团-CH2-(天冬酰胺单元))的共聚氨基酸。

在一个实施方案中，组合物的特征在于具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自式VII(其中R₁或R₂中的至少一种为疏水基团，特别地n≥1)或VIIb(其中基团D为基团-CH₂-CH₂-(谷氨酰胺单元))的共聚氨基酸。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团数目与谷氨酸或天冬酰胺单元数目之间的比率i为0.007至0.3。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团数目与谷氨酸或天冬氨酸单元数目之间的比率i为0.01至0.3。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团数目与谷氨酸或天冬氨酸单元数目之间的比率i为0.03至0.3。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团数目与谷氨酸或天冬氨酸单元数目之间的比率i为0.02至0.2。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团对应于式VI并且疏水基团数目与谷氨酸或天冬氨酸单元数目之间的比率i为0.007至0.3。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团对应于式VI并且疏水基团数目与谷氨酸或天冬氨酸单元数目之间的比率i为0.03至0.3。在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团对应于式VI并且疏水基团数目与谷氨酸或天冬氨酸单元数目之间的比率i为0.05至0.2。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团对应于式VI并且疏水基团数目与谷氨酸或天冬氨酸单元数目之间的比率i为0.007至0.15。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团对应于式VI并且疏水基团数目与谷氨酸或天冬氨酸单元数目之间的比率i为0.01至0.1。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团对应于式VI并且疏水基团数目与谷氨酸或天冬氨酸单元数目之间的比率i为0.02至0.08。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团对应于式VI，其中基团Cx包含9至10个碳原子，并且疏水基团数目与谷氨酸或天冬氨酸单元数目之间的比率i为0.05至0.3。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团对应于式VI，其中基团Cx包含9至10个碳原子，并且疏水基团数目与谷氨酸或天冬氨酸单元数目之间的比率i为0.03至0.15。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团对应于式VI，其中基团Cx包含11至12个碳原子，并且疏水基团数目与谷氨酸或天冬氨酸单元数目之间的比率i为0.05至0.2。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团对应于式VI，其中基团Cx包含11至12个碳原子，并且疏水基团数目与谷氨酸或天冬氨酸单元数目之间的比率i为0.03至0.2。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团对应于式VI，其中基团Cx包含11至12个碳原子，并且疏水基团数目与谷氨酸或天冬氨酸单元数目之间的比率i为0.015至0.1。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团对应于式VI，其中基团Cx包含11至12个碳原子，并且疏水基团数目与谷氨酸或天冬氨酸单元数目之间的比率i为0.02至0.08。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团对应于式VI，其中基团Cx包含13至15个碳原子，并且疏水基团数目与谷氨酸或天冬氨酸单元数目之间的比率i为0.03至0.15。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团对应于式VI，其中基团Cx包含13至15个碳原子，并且疏水基团数目与谷氨酸或天冬氨酸单元数目之间的比率i为0.01至0.1。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团对应于式VI，其中基团Cx包含13至15个碳原子，并且疏水基团数目与谷氨酸或天冬氨酸单元数目之间的比率i为0.01至0.06。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团对应于式V，并且疏水基团数目与谷氨酸或天冬氨酸单元数目之间的比率i为0.007至0.3。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团对应于式V，并且疏水基团数目与谷氨酸或天冬氨酸单元数目之间的比率i为0.01至0.3。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团对应于式V，并且疏水基团数目与谷氨酸或天冬氨酸单元数目之间的比率i为0.05至0.3。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团对应于式V，并且疏水基团数目与谷氨酸或天冬氨酸单元数目之间的比率i为0.1至0.3.

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团对应于式V，并且疏水基团数目与谷氨酸或天冬氨酸单元数目之间的比率i为0.015至0.2。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团对应于式V，其中基团Cx包含11至14个碳原子，并且疏水基团数目与谷氨酸或天冬氨酸单元数目之间的比率i为0.1至0.3。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团对应于式V，其中基团Cx包含11至14个碳原子，并且疏水基团数目与谷氨酸或天冬氨酸单元数目之间的比率i为0.1至0.2。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团对应于式V，其中基团Cx包含15至16个碳原子，并且疏水基团数目与谷氨酸或天冬氨酸单元数目之间的比率i为0.04至0.2。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团对应于式V，其中基团Cx包含15至16个碳原子，并且疏水基团数目与谷氨酸或天冬氨酸单元数目之间的比率i为0.06至0.2。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团对应于式V，其中基团Cx包含15至16个碳原子，并且疏水基团数目与谷氨酸或天冬氨酸单元数目之间的比率i为0.04至0.15。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团对应于式V，其中基团Cx包含17至18个碳原子，并且疏水基团数目与谷氨酸或天冬氨酸单元数目之间的比率i为0.02至0.2。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团对应于式V，其中基团Cx包含17至18个碳原子，并且疏水基团数目与谷氨酸或天冬氨酸单元数目之间的比率i为0.02至0.15。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团对应于式V，其中基团Cx包含17至18个碳原子，并且疏水基团数目与谷氨酸或天冬氨酸单元数目之间的比率i为0.02至0.06。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团对应于式V，其中基团Cx包含19至25个碳原子，并且疏水基团数目与谷氨酸或天冬氨酸单元数目之间的比率i为0.01至0.1。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团对应于式V，其中基团Cx包含19至25个碳原子，并且疏水基团数目与谷氨酸或天冬氨酸单元数目之间的比率i为0.01至0.06。

在一个实施方案中，组合物的特征在于疏水基团对应于式V，其中基团Cx包含19至25个碳原子，并且疏水基团数目与谷氨酸或天冬氨酸单元数目之间的比率i为0.01至0.05。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于n+m为10至250。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于n+m为10至200。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于n+m为10至100。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于n+m为10至50。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于n+m为15至150。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于n+m为15至100。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于n+m为15至80。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于n+m为15至65。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于n+m为20至60。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于n+m为20至50。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于n+m为20至40。

本发明还涉及具有羧酸根电荷和式I的疏水基团以及所述疏水基团的前体的所述共聚氨基酸。

具有羧酸根电荷和式I的疏水基团的共聚氨基酸在6至8的pH、25℃的温度下可溶于蒸馏水中，浓度低于100mg/mL。

在一个实施方案中，本发明还涉及所述式I’、V’和VI’的疏水基团的前体：

GpR、GpA、GpC、r、a、p具有上文中给出的定义。

本发明还涉及用于制备稳定的可注射组合物的方法。

“可溶的”应理解为意指能够在25℃在蒸馏水中制备浓度小于100mg/mL的澄清无颗粒溶液。

“溶液”应理解为意指使用根据药典EP8.0(根据2.9.20条款)和US<790>的程序产生的不含可见颗粒的液体组合物。

“物理稳定的组合物”应理解为意指在某一温度下一定的储存时间后满足欧洲、美国和国际药典中描述的目视检查标准的组合物，即澄清且不含可见颗粒以及也无色的组合物。

“化学稳定的组合物”应理解为意指在某一温度下一定的储存时间后，呈现活性成分的最低恢复并且符合适用于药品的规格的组合物。

用于测量蛋白质或肽的稳定性的常规方法在于借助于硫磺素T(也称为ThT)测量原纤维的形成。该方法使得可能在使得能够加速该现象加速的温度和搅拌条件下通过测量荧光的增加来测量原纤维形成之前的滞后时间。根据本发明的组合物在原纤维形成之前具有滞后时间，其明显大于胰高血糖素在目标pH下的滞后时间。

“可注射水溶液”应理解为意指满足EP和US药典的条件并且足可以注射的液体的水基溶液。

“由谷氨酸或天冬氨酸单元组成的共聚氨基酸”应理解为意指通过肽键键合在一起的谷氨酸或天冬氨酸单元的非环状直链，所述链具有对应于链的一个末端的羧酸的C-末端部分和对应于链的另一末端的胺的N-末端部分。

“烷基”应理解为是指不包含杂原子的直链或支链碳链。

共聚氨基酸是统计或嵌段共聚氨基酸。

共聚氨基酸是谷氨酸和/或天冬氨酸单元链中的统计共聚氨基酸。

在式中，*表示不同的所表示元素的连接位点；

在式I、V和VI中，*表示疏水基团与共聚氨基酸的连接位点。基团Hy通过酰胺官能团与聚氨基酸连接。

在式II和II’中，*从左至右分别表示GpR与以下部分的连接位点：

-与共聚氨基酸以及

-如果a＝1则与GpA，或者如果a＝0则与GPC。

在式III和III’中，*从左到右分别表示GpA与以下部分的连接位点：

-如果r＝1则与GpR，或者如果r＝0则与共聚氨基酸，以及

-与GpC。

在式IV中，*表示GpC与以下部分的连接位点：

-如果a＝1则与GpA，如果r＝1且a＝0则与GpR，或者如果r＝0且a＝0则与共聚氨基酸。

不同的基团GpR、GpA和GpC之间的所有连接为酰胺官能团。

基团Hy、GpR、GpA、GpC和D各自独立地与下一个单体单元相同或不同。

当共聚氨基酸包含一个或多个天冬氨酸单元时，其(它们)可进行结构重排。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于所获得的共聚氨基酸另外地包含式VIII和/或VIII’的单体单元：

在一个实施方案中，至少一种式I的疏水基团选自式I的基团，其中r＝1，a＝0，p＝1；GpR对应于式II，其中R为-CH2-CH2-；GpC对应于式IVd，其中x＝15并且Cx为

在一个实施方案中，至少一种式I的疏水基团选自式I的基团，其中r＝1，a＝0，p＝1；GpR对应于式II，其中R为-CH2-CH2-；GpC对应于式IVd，其中x＝16并且Cx为

在一个实施方案中，至少一种式I的疏水基团选自式I的基团，其中r＝1，a＝0，p＝1；GpR对应于式II，其中R为GpC对应于式IVd，其中x＝15并且Cx为

在一个实施方案中，至少一种式I的疏水基团选自式I的基团，其中r＝1，a＝0，p＝1；GpR对应于式II，其中R为GpC对应于式IVd，其中x＝17并且Cx为

在一个实施方案中，至少一种式I的疏水基团选自式I的基团，其中r＝1，a＝0，p＝1；GpR对应于式II，其中R为GpC对应于式IVd，其中x＝19并且Cx为

在一个实施方案中，至少一种式I的疏水基团选自式I的基团，其中r＝1，a＝0，p＝1；GpR对应于式II，其中R为-CH2-CH2-；GpC对应于式IVa，其中b＝1，B为x＝15并Cx为

在一个实施方案中，至少一种式I的疏水基团选自式I的基团，其中r＝1，a＝0，p＝1；GpR对应于式II，其中R为-CH2-CH2-；GpC对应于式IVa，其中b＝1，B为x＝11并且Cx为

在一个实施方案中，至少一种式I的疏水基团选自式I的基团，其中r＝1，a＝0，p＝1；GpR对应于式II，其中R为GpC对应于式IVf，其中x＝19并且Cx为

在一个实施方案中，至少一种式I的疏水基团选自式I的基团，其中r＝1，a＝0，p＝1；GpR对应于式II，其中R为-CH2-CH2-；GpC对应于式IVd，其中x＝13并且Cx为

在一个实施方案中，至少一种式I的疏水基团选自式I的基团，其中r＝1，a＝1，p＝2；GpR对应于式II，其中R为-CH2-CH2-；GpA对应于式IIIb，GpC对应于式IVd，其中x＝9并且Cx为

在一个实施方案中，至少一种式I的疏水基团选自式I的基团，其中r＝1，a＝1，p＝2；GpR对应于式II，其中R为-CH2-CH2-；GpA对应于式IIIb；GpC对应于式IVd，其中x＝11并且Cx为

在一个实施方案中，至少一种式I的疏水基团选自式I的基团，其中r＝1，a＝1，p＝2；GpR对应于式II，其中R为-CH2-CH2-；GpA对应于式IIIb；GpC对应于式IVd，其中x＝13并Cx为

在一个实施方案中，至少一种式I的疏水基团选自式I的基团，其中r＝1，a＝1，p＝2；GpR对应于式II，其中R为GpA对应于式IIIb；GpC对应于式IVd，其中x＝13并Cx为

在一个实施方案中，至少一种式I的疏水基团选自式I的基团，其中r＝1，a＝1，p＝2；GpR对应于式II，其中R为-CH2-CH2-；GpA对应于式IIIb；GpC对应于式IVd，其中x＝15并且Cx为

在一个实施方案中，至少一种式I的疏水基团选自式I的基团，其中r＝1，a＝1，p＝2；GpR对应于式II，其中R为-CH2-CH2-；GpA对应于式IIIa；GpC对应于式IVd，其中x＝13并且Cx为

在一个实施方案中，至少一种式I的疏水基团选自式I的基团，其中r＝1，a＝1，p＝2；GpR对应于式II，其中R为-(CH2)6；GpA对应于式IIIb；GpC对应于式IVd，其中x＝15并且Cx为

通过比较源自疏水基团的信号的积分与源自共聚氨基酸主链的信号的积分，通过D2O中的1H NMR估计聚合度DP和比率i的值。

在一个实施方案中，具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸为式VII或VIIb的共聚氨基酸，其中DP＝25+/-5，0.033≤i≤0.05，并且式I的疏水基团选自式I的基团，其中r＝1，a＝0，p＝1；GpR对应于式II，其中R为-CH2-CH2-；GpC对应于式IVd，其中x＝15并且Cx为

在一个实施方案中，具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸为式VII或VIIb的共聚氨基酸，其中DP＝30+/-5，0.028≤i≤0.04，并且至少一个式I的疏水基团选自式I的基团，其中r＝1，a＝0，p＝1；GpR对应于式II，其中R为GpC对应于式IVd，其中x＝17并且Cx为

在一个实施方案中，具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸为式VII或VIIb的共聚氨基酸，其中DP＝45+/-10，0.018≤i≤0.028，并且至少一个式I的疏水基团选自式I的基团，其中r＝1，a＝0，p＝1；GpR对应于式II，其中R为GpC对应于式IVd其中x＝17并且Cx为

在一个实施方案中，具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸为式VII或VIIb的共聚氨基酸，其中DP＝60+/-10，0.014≤i≤0.02，并且至少一个式I的疏水基团选自式I的基团，其中r＝1，a＝0，p＝1；GpR对应于式II，其中R为GpC对应于式IVd，其中x＝17并且Cx为

在一个实施方案中，具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸为式VII或VIIb的共聚氨基酸，其中DP＝25+/-5，0.033≤i≤0.05，并且式I的疏水基团选自式I的基团，其中r＝1，a＝0，p＝1；GpR对应于式II，其中R为GpC对应于式IVd，其中x＝19并且Cx为

在一个实施方案中，具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸为式VII或VIIb的共聚氨基酸，其中DP＝25+/-5，0.025≤i≤0.07，并且至少一个式I的疏水基团选自式I的基团，其中r＝1，a＝0，p＝1；GpR对应于式II，其中R为GpC对应于式IVd，其中x＝19并且Cx为

在一个实施方案中，具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸为式VII或VIIb的共聚氨基酸，其中DP＝27+/-5，0.031≤i≤0.045，并且至少一个式I的疏水基团选自式I的基团，其中r＝1，a＝1，p＝2；GpR对应于式II，其中R为-CH2-CH2-；GpA对应于式IIIb；GpC对应于式IVd，其中x＝11并且Cx为

在一个实施方案中，具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸为式VII或VIIb的共聚氨基酸，其中DP＝22+/-5，0.037≤i≤0.055，并且至少一个式I的疏水基团选自式I的基团，其中r＝1，a＝1，p＝2；GpR对应于式II，其中R为-CH2-CH2-；GpA对应于式IIIb；GpC对应于式IVd，其中x＝13并且Cx为

在一个实施方案中，具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸为式VII或VIIb的共聚氨基酸，其中DP＝22+/-5，0.037≤i≤0.055，并且至少一个式I的疏水基团选自式I的基团，其中r＝1，a＝1，p＝2；GpR对应于式II，其中R为GpA对应于式IIIb；GpC对应于式IVd，其中x＝13并且Cx为

在一个实施方案中，具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸为式VII或VIIb的共聚氨基酸，其中DP＝60+/-10，0.014≤i≤0.02，并且至少一个式I的疏水基团选自式I的基团，其中r＝1，a＝1，p＝2；GpR对应于式II，其中R为-CH2-CH2-；GpA对应于式IIIb；GpC对应于式IVd，其中x＝13并且Cx为

在一个实施方案中，具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸为式VII或VIIb的共聚氨基酸，其中DP＝40+/-5，0.022≤i≤0.029，并且至少一个式I的疏水基团选自式I的基团，其中r＝1，a＝1，p＝2；GpR对应于式II，其中R为-CH2-CH2-；GpA对应于式IIIb；GpC对应于式IVd，其中x＝13并且Cx为

在一个实施方案中，具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸为式VII或VIIb的共聚氨基酸，其中DP＝25+/-5，0.02≤i≤0.06，并且至少一个式I的疏水基团选自式I的基团，其中r＝1，a＝1，p＝2；GpR对应于式II，其中R为-CH2-CH2-；GpA对应于式IIIb；GpC对应于式IVd，其中x＝13并且Cx为

在一个实施方案中，具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸为式VII或VIIb的共聚氨基酸，其中DP＝17+/-4，0.04≤i≤0.1，并且至少一个式I的疏水基团选自式I的基团，其中r＝1，a＝1，p＝2；GpR对应于式II，其中R为-CH2-CH2-；GpA对应于式IIIb；GpC对应于式IVd，其中x＝13并且Cx为

在一个实施方案中，具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸为式VII或VIIb的共聚氨基酸，其中DP＝9+/-2，0.09≤i≤0.2，并且至少一个式I的疏水基团选自式I的基团，其中r＝1，a＝1，p＝2；GpR对应于式II，其中R为-CH2-CH2-；GpA对应于式IIIb；GpC对应于式IVd，其中x＝13并且Cx为

在一个实施方案中，具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸为式VII或VIIb的共聚氨基酸，其中DP＝20+/-5，0.04≤i≤0.08，并且至少一个式I的疏水基团选自式I的基团，其中r＝1，a＝1，p＝2；GpR对应于式II，其中R为-CH2-CH2-；GpA对应于式IIIb；GpC对应于式IVd，其中x＝13并Cx为

在一个实施方案中，具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸为式VII或VIIb的共聚氨基酸，其中DP＝23+/-5，0.035≤i≤0.08，并且至少一个式I的疏水基团选自式I的基团，其中r＝1，a＝1，p＝2；GpR对应于式II，其中R为-CH2-CH2-；GpA对应于式IIIb；GpC对应于式IVd，其中x＝15并Cx为

在一个实施方案中，具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸为式VII或VIIb的共聚氨基酸，其中DP＝20+/-5，0.04≤i≤0.08，并且至少一个式I的疏水基团选自式I的基团，其中r＝1，a＝1，p＝2；GpR对应于式II，其中R为-CH2-CH2-；GpA对应于式IIIc；GpC对应于式IVd，其中x＝13并且Cx为

在一个实施方案中，具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸为式VII或VIIb的共聚氨基酸，其中DP＝20+/-5，0.04≤i≤0.08，并且Hy以及R1和/或R2为选自式I的基团的式I的疏水基团，其中r＝1，a＝1，p＝2；GpR对应于式II，其中R为-CH2-CH2-；GpA对应于式IIIb；GpC对应于式IVd，其中x＝13并且Cx为

在一个实施方案中，具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸为式VII或VIIb的共聚氨基酸，其中DP＝20+/-5，0.04≤i≤0.08，并且至少一个式I的疏水基团选自式I的基团，其中r＝0，a＝1，p＝2；GpR对应于式II，其中R为-CH2-CH2-；GpA对应于式IIIb；GpC对应于式IVd，其中x＝13并且Cx为

在一个实施方案中，具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸为式VII或VIIb的共聚氨基酸，其中DP＝20+/-5，0.08≤i≤0.20，并且R1为选自式I的基团的式I的疏水基团，其中r＝0，a＝1，p＝2；GpR对应于式II，其中R为-CH2-CH2-；GpA对应于式IIIb；GpC对应于式IVd，其中x＝13并且Cx为并且R2为选自式I的基团的式I的疏水基团，其中r＝1，a＝1，p＝2；GpR对应于式II，其中R为-CH2-CH2-；GpA对应于式IIIb；GpC对应于式IVd，其中x＝13并且Cx为

在一个实施方案中，具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸为式VII或VIIb的共聚氨基酸，其中DP＝25+/-5，0.035≤i≤0.08，并且至少一个式I的疏水基团选自式I的基团，其中r＝1，a＝1，p＝2；GpR对应于式II，其中R为-(CH2)6；GpA对应于式IIIb；GpC对应于式IVd，其中x＝14并且Cx为

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于共聚氨基酸源自通过聚合获得的聚氨基酸。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于共聚氨基酸源自通过谷氨酸N-羧酸酐衍生物或天冬氨酸N-羧酸酐衍生物的开环聚合获得的聚氨基酸。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于共聚氨基酸源自通过如综述论文Adv.Polym.Sci.2006，202，1-18(Deming，T.J.)中所述的谷氨酸N-羧酸酐衍生物或天冬氨酸N-羧酸酐衍生物的聚合获得的聚氨基酸。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于共聚氨基酸源自通过谷氨酸N-羧酸酐衍生物的聚合获得的聚氨基酸。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于共聚氨基酸源自通过谷氨酸N-羧酸酐衍生物的聚合获得的聚氨基酸，所述谷氨酸N-羧酸酐衍生物选自谷氨酸甲酯N-羧酸酐(GluOMe-NCA)、谷氨酸苄酯N-羧酸酐(GluOBzl-NCA)和谷氨酸叔丁酯N-羧酸酐(GluOtBu-NCA)。

在一个实施方案中，谷氨酸N-羧酸酐衍生物为L-谷氨酸甲酯N-羧酸酐(L-GluOMe-NCA)。

在一个实施方案中，谷氨酸N-羧酸酐衍生物为L-谷氨酸苄酯N-羧酸酐(L-GluOBzl-NCA)。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于共聚氨基酸源自通过如出版物Nature 1997，390，386-389(Deming，T.J.)中所述，使用过渡金属的有机金属复合物作为引发剂(initiator)，通过谷氨酸N-羧酸酐衍生物或天冬氨酸N-羧酸酐衍生物的聚合获得的聚氨基酸。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于共聚氨基酸源自通过如专利FR 2,801,226(Touraud，F.等)以及该专利中所引用的参考文献中所述，使用氨或伯胺作为引发剂，通过谷氨酸N-羧酸酐衍生物或天冬氨酸N-羧酸酐衍生物的聚合获得的聚氨基酸。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于共聚氨基酸源自通过如出版物J.Am.Chem.Soc.2007，129，14114-14115(Lu H.等)所述使用六甲基二硅氮烷作为引发剂或如出版物J.Am.Chem.Soc.2008，130，12562-12563(Lu H.等)中所述使用甲烷硅基化胺作为引发剂，通过谷氨酸N-羧酸酐衍生物或天冬氨酸N-羧酸酐衍生物的聚合获得的聚氨基酸。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于用于合成共聚氨基酸所源自的通过谷氨酸N-羧酸酐衍生物或天冬氨酸N-羧酸酐衍生物的聚合获得的聚氨基酸的方法包括酯官能团水解的步骤。

在一个实施方案中，酯官能团的该水解步骤可由酸性介质中的水解或碱性介质中的水解组成，或其可通过氢化来进行。

在一个实施方案中，酯基团的该水解步骤是酸性介质中的水解。

在一个实施方案中，通过氢化进行酯基团的该水解步骤。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于共聚氨基酸源自通过具有较高分子量的聚氨基酸的解聚获得的聚氨基酸。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于共聚氨基酸源自通过具有较高分子量的聚氨基酸的酶促解聚获得的聚氨基酸。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于共聚氨基酸源自通过具有较高分子量的聚氨基酸的化学解聚获得的聚氨基酸。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于共聚氨基酸源自通过具有较高分子量的聚氨基酸的酶促和化学解聚获得的聚氨基酸。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于共聚氨基酸源自通过选自由聚谷氨酸钠和聚天冬氨酸钠组成的组的具有较高分子量的聚氨基酸的解聚获得的聚氨基酸。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于共聚氨基酸源自通过具有较高分子量的聚谷氨酸钠的解聚获得的聚氨基酸。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于共聚氨基酸源自通过具有较高分子量的聚天冬氨酸钠的解聚获得的聚氨基酸。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于共聚氨基酸是通过使用用于形成酰胺键的方法将疏水基团接枝到聚-L-谷氨酸或聚-L-天冬氨酸上而获得的，所述方法是本领域技术人员所公知的。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于共聚氨基酸是通过使用用于形成酰胺键(用于肽合成)的方法将疏水基团接枝到聚-L-谷氨酸或聚-L-天冬氨酸上而获得的。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物的特征在于共聚氨基酸是通过如专利FR2,840,614(Chan，Y.P.；等)中所述将疏水基团接枝到聚-L-谷氨酸或聚-L-天冬氨酸上而获得的。

在一个实施方案中，具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸的浓度至多为40mg/mL。

在一个实施方案中，具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸的浓度至多为30mg/mL。

在一个实施方案中，具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸的浓度至多为20mg/mL。

在一个实施方案中，具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸的浓度至多为10mg/mL。

在一个实施方案中，具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸的浓度至多为5mg/mL。

在一个实施方案中，具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸的浓度至多为2.5mg/mL。

在一个实施方案中，具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸的浓度至多为1mg/mL。

在一个实施方案中，具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸的浓度至多为0.5mg/mL。

在一个实施方案中，具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸相对于胰高血糖素的重量比为1.5至25。

在一个实施方案中，具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸相对于胰高血糖素的重量比为2至20。

在一个实施方案中，具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸相对于胰高血糖素的重量比为2.5至15。

在一个实施方案中，具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸相对于胰高血糖素的重量比为2至10。

在一个实施方案中，具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸相对于胰高血糖素的重量比为2至7。

人胰高血糖素的使用剂量根据应用而变化。

在低血糖症的急诊治疗中，推荐剂量为1mg，通过肌内或静脉内途径(如果体重小于25kg，则为0.5mg)。该施用使用浓度为1mg/mL的人胰高血糖素溶液进行。

在泵中，考虑的日剂量约为0.5mg；因此，溶液可包含0.25mg/mL至5mg/mL的人胰高血糖素。

在一个实施方案中，溶液可包含0.5mg/mL至3mg/mL的人胰高血糖素。

在肥胖症的治疗中，考虑的日剂量约为0.5mg，因此，溶液可包含0.25mg/mL至5mg/mL的人胰高血糖素。

在一个实施方案中，人胰高血糖素的浓度为0.25mg/mL至5mg/mL。

在一个实施方案中，人胰高血糖素的浓度为0.5mg/mL至4mg/mL。

在一个实施方案中，人胰高血糖素的浓度为0.75mg/mL至3mg/mL。

在一个实施方案中，人胰高血糖素的浓度为0.75mg/mL至2.5mg/mL。

在一个实施方案中，人胰高血糖素的浓度为0.75mg/mL至2mg/mL。

在一个实施方案中，人胰高血糖素的浓度为1mg/mL至2mg/mL。

在一个实施方案中，[疏水基团]/[人胰高血糖素]的摩尔比小于20。

在一个实施方案中，[疏水基团]/[人胰高血糖素]的摩尔比小于15。

在一个实施方案中，[疏水基团]/[人胰高血糖素]的摩尔比小于10。

在一个实施方案中，[疏水基团]/[人胰高血糖素]的摩尔比小于5。

在一个实施方案中，[疏水基团]/[人胰高血糖素]的摩尔比小于2.5。

在一个实施方案中，[疏水基团]/[人胰高血糖素]的摩尔比小于1.5。

在一个实施方案中，[具有羧酸根电荷和疏水基团Hy的共聚氨基酸]/[人胰高血糖素]的摩尔比小于20。

在一个实施方案中，[具有羧酸根电荷和疏水基团Hy的共聚氨基酸]/[人胰高血糖素]的摩尔比小于15。

在一个实施方案中，[具有羧酸根电荷和疏水基团Hy的共聚氨基酸]/[人胰高血糖素]的摩尔比小于10。

在一个实施方案中，[具有羧酸根电荷和疏水基团Hy的共聚氨基酸]/[人胰高血糖素]的摩尔比小于5。

在一个实施方案中，[具有羧酸根电荷和疏水基团Hy的共聚氨基酸]/[人胰高血糖素]的摩尔比小于2.5。

在一个实施方案中，[具有羧酸根电荷和疏水基团Hy的共聚氨基酸]/[人胰高血糖素]的摩尔比小于1.5。

人胰高血糖素是高度保守的多肽，其包含具有以下序列的29个氨基酸残基的简单链：H-His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Ser-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Met-Asn-Thr-OH。

其可通过重组肽合成以不同方式获得。

人胰高血糖素可从许多来源获得。例如，由Bachem通过肽合成产生的人胰高血糖素可以特别地根据参考407473获得。

在一个实施方案中，组合物另外包含烟碱化合物或其衍生物之一。

在一个实施方案中，组合物包含烟酰胺。

在一个实施方案中，烟酰胺的浓度为10mM至160mM。

在一个实施方案中，烟酰胺的浓度为20mM至150mM。

在一个实施方案中，烟酰胺的浓度为40mM至120mM。

在一个实施方案中，烟酰胺的浓度为60mM至100mM。

在一个实施方案中，组合物另外包含聚阴离子化合物。

在一个实施方案中，聚阴离子化合物选自由羧酸多元酸及其Na⁺、K⁺、Ca²⁺或Mg²⁺盐组成的组。

在一个实施方案中，羧酸选自由柠檬酸、酒石酸及其Na⁺、K⁺、Ca²⁺或Mg²⁺盐组成的组。

在一个实施方案中，聚阴离子化合物选自由磷酸多元酸及其Na⁺、K⁺、Ca²⁺或Mg²⁺盐组成的组。

在一个实施方案中，磷酸多元酸为三磷酸盐及其Na⁺、K⁺、Ca²⁺或Mg²⁺盐。

在一个实施方案中，聚阴离子化合物为柠檬酸及其Na⁺、K⁺、Ca²⁺或Mg²⁺盐。

在一个实施方案中，聚阴离子化合物为酒石酸及其Na⁺、K⁺、Ca²⁺或Mg²⁺盐。

在一个实施方案中，聚阴离子化合物为三磷酸及其Na⁺、K⁺、Ca²⁺或Mg²⁺盐。

在一个实施方案中，聚阴离子化合物的浓度为1mM至20mM。

在一个实施方案中，聚阴离子化合物的浓度为2mM至15mM。

在一个实施方案中，聚阴离子化合物的浓度为3mM至12mM。

在一个实施方案中，聚阴离子化合物的浓度为10mM。

在一个实施方案中，聚阴离子化合物的浓度为5mM。

在一个实施方案中，对于0.5mg/mL至3mg/mL的胰高血糖素浓度，聚阴离子化合物的浓度为10mM。

在一个实施方案中，对于0.5mg/mL至2mg/mL的胰高血糖素浓度，聚阴离子化合物的浓度为10mM。

在一个实施方案中，对于1mg/mL至2mg/mL的胰高血糖素浓度，聚阴离子化合物的浓度为10mM。

在一个实施方案中，对于0.5mg/mL至3mg/mL的胰高血糖素浓度，聚阴离子化合物的浓度为5mM。

在一个实施方案中，对于0.5mg/mL至2mg/mL的胰高血糖素浓度，聚阴离子化合物的浓度为5mM。

在一个实施方案中，对于1mg/mL至2mg/mL的胰高血糖素浓度，聚阴离子化合物的浓度为5mM。

在一个实施方案中，柠檬酸及其Na⁺、K⁺、Ca²⁺或Mg²⁺盐的浓度为1mM至20mM。

在一个实施方案中，柠檬酸及其Na⁺、K⁺、Ca²⁺或Mg²⁺盐的浓度为2mM至15mM。

在一个实施方案中，柠檬酸及其Na⁺、K⁺、Ca²⁺或Mg²⁺盐的浓度为3mM至12mM。

在一个实施方案中，柠檬酸及其Na⁺、K⁺、Ca²⁺或Mg²⁺盐的浓度为10mM。

在一个实施方案中，柠檬酸及其Na⁺、K⁺、Ca²⁺或Mg²⁺盐的浓度为5mM。

在一个实施方案中，对于0.5mg/mL至3mg/mL的胰高血糖素浓度，柠檬酸及其Na⁺、K⁺、Ca²⁺或Mg²⁺盐的浓度为10mM。

在一个实施方案中，对于0.5mg/mL至2mg/mL的胰高血糖素浓度，柠檬酸及其Na⁺、K⁺、Ca²⁺或Mg²⁺盐的浓度为10mM。

在一个实施方案中，对于1mg/mL至2mg/mL的胰高血糖素浓度，柠檬酸及其Na⁺、K⁺、Ca²⁺或Mg²⁺盐的浓度为10mM。

在一个实施方案中，对于0.5mg/mL至3mg/mL的胰高血糖素浓度，柠檬酸及其Na⁺、K⁺、Ca²⁺或Mg²⁺盐的浓度为5mM。

在一个实施方案中，对于0.5mg/mL至2mg/mL的胰高血糖素浓度，柠檬酸及其Na⁺、K⁺、Ca²⁺或Mg²⁺盐的浓度为5mM。

在一个实施方案中，对于1mg/mL至2mg/mL的胰高血糖素浓度，柠檬酸及其Na⁺、K⁺、Ca²⁺或Mg²⁺盐的浓度为5mM。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物另外包含胃肠激素。

“胃肠激素”应理解为意指选自由以下组成的组的激素：GLP-1 RA，其为人胰高血糖素样肽-1受体的激动剂(胰高血糖素样肽-1受体激动剂)胰高血糖素样)，以及GIP(葡萄糖-依赖性促胰岛素肽)、胃泌酸调节素(人胰高血糖素原的衍生物)、肽YY、胰岛淀粉样多肽、缩胆囊素、胰多肽(PP)、胃饥饿素和肠抑素、其类似物或衍生物和/或其药学上可接受的盐。

在一个实施方案中，胃肠激素为选自由艾塞那肽或(ASTRA-ZENECA)、利拉鲁肽或(NOVO NORDISK)、利西拉肽或(SANOFI)、阿必鲁肽或(GSK)或度拉糖肽或(ELILILLY&Co)、其类似物或衍生物及其药学上可接受的盐组成的组的GLP-1 RA(胰高血糖素样肽-1受体激动剂)的类似物或衍生物。

在一个实施方案中，胃肠激素为普兰林肽或(ASTRA-ZENECA)。

在一个实施方案中，胃肠激素为艾塞那肽或其类似物或衍生物及其药学上可接受的盐。

在一个实施方案中，胃肠激素为利拉鲁肽或其类似物或衍生物及其药学上可接受的盐。

在一个实施方案中，胃肠激素为利西拉肽或其类似物或衍生物及其药学上可接受的盐。

在一个实施方案中，胃肠激素为阿必鲁肽或其类似物或衍生物及其药学上可接受的盐。

在一个实施方案中，胃肠激素为度拉糖肽或其类似物或衍生物及其药学上可接受的盐。

在一个实施方案中，胃肠激素为普兰林肽或其类似物或衍生物及其药学上可接受的盐。

当用于指肽或蛋白质时，“类似物”应理解为意指其中一个或多个氨基酸的组成残基被其它氨基酸残基取代和/或其中已消除了一个或多个氨基酸的组成残基和/或其中已添加了一个或多个氨基酸的组成残基的肽或蛋白质。对于类似物的本定义，可容许的同源性百分比为50％。

当用于指肽或蛋白质时，“衍生物”应理解为意指已被不存在于参照的肽或蛋白质或类似物中的取代基化学修饰的肽或蛋白质或类似物，即已通过生成共价键以引入取代基而被修饰的肽或蛋白质。

在一个实施方案中，取代基选自由脂肪链组成的组。

在一个实施方案中，胃肠激素的浓度在0.01mg/mL至10mg/mL的范围内。

在一个实施方案中，艾塞那肽、其类似物或衍生物及其药学上可接受的盐的浓度在0.04mg/mL至0.5mg/mL的范围内。

在一个实施方案中，利拉鲁肽、其类似物或衍生物及其药学上可接受的盐的浓度在1mg/mL至10mg/mL的范围内。

在一个实施方案中，利西拉肽、其类似物或衍生物及其药学上可接受的盐的浓度在0.01mg/mL至1mg/mL的范围内。

在一个实施方案中，普兰林肽、其类似物或衍生物及其药学上可接受的盐的浓度在0.1mg/mL至5mg/mL的范围内。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物通过混合通过复原冻干物获得的人胰高血糖素溶液以及GLP-1 RA(胰高血糖素样肽-1受体激动剂)GLP-1 RA的溶液、GLP-1 RA的类似物或衍生物来产生，所述GLP-1 RA溶液是商购可得的或由冻干物复原的。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物另外包含缓冲剂。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含浓度为0mM至100mM的缓冲剂。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含浓度为15mM至50mM的缓冲剂。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物包含选自由磷酸盐缓冲剂、三(三羟甲基氨基甲烷)或柠檬酸钠组成的组的缓冲剂。

在一个实施方案中，缓冲剂是磷酸钠。

在一个实施方案中，缓冲剂是三(三羟甲基氨基甲烷)。

在一个实施方案中，缓冲剂是柠檬酸钠。

在一个实施方案中，组合物另外包含锌盐，特别是氯化锌。

在一个实施方案中，锌盐的浓度为50至5000μM。

在一个实施方案中，锌盐的浓度为100至2000μM。

在一个实施方案中，锌盐的浓度为200至1500μM。

在一个实施方案中，锌盐的浓度为200至1000μM。

在一个实施方案中，锌浓度使得[锌]/[胰高血糖素]的摩尔比为0.1至2.5。

在一个实施方案中，锌浓度使得[锌]/[胰高血糖素]的摩尔比为0.2至2。

在一个实施方案中，锌浓度使得[锌]/[胰高血糖素]的摩尔比为0.5至1.5。

在一个实施方案中，锌浓度使得[锌]/[胰高血糖素]的摩尔比为1。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物另外包含防腐剂。

在一个实施方案中，防腐剂选自由单独的或混合的间甲酚和苯酚组成的组。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物另外包含抗氧化剂。

在一个实施方案中，抗氧化剂选自甲硫氨酸。

在一个实施方案中，防腐剂的浓度为10mM至50mM。

在一个实施方案中，防腐剂的浓度为10mM至40mM。

在一个实施方案中，根据本发明的组合物另外包含表面活性剂。

在一个实施方案中，表面活性剂选自由丙二醇或聚山梨醇酯组成的组。

根据本发明的组合物可以另外包含添加剂诸如张力剂。

在一个实施方案中，张力剂选自由以下组成的组：氯化钠、甘露醇、蔗糖、山梨糖醇和甘油。

根据本发明的组合物可以另外包含根据药典且与以常规浓度使用的人胰高血糖素和胃肠激素(特别是GLP-1 RA)相容的所有赋形剂。

本发明还涉及根据本发明的药物组合物，其特征在于其通过干燥和/或冻干获得。

在局部和全身性释放的情况下，考虑的施用方式是通过静脉内、皮下、皮内或肌内途径。

还考虑了透皮、口服、鼻、***、眼、颊部、肺部施用途径。

本发明还涉及pH为6.6至7.8的单剂量制剂，其包含人胰高血糖素。

本发明还涉及pH为6.6至7.8的单剂量制剂，其包含人胰高血糖素和胃肠激素(如上定义的)。

在一个实施方案中，单剂量制剂另外包含如上定义的取代的共聚氨基酸。

在一个实施方案中，制剂呈可注射溶液的形式。在一个实施方案中，GLP-1 RA、GLP-1 RA的类似物或衍生物选自包括以下的组：艾塞那肽利拉鲁肽利西拉肽阿必鲁肽度拉糖肽或其衍生物之一。

在一个实施方案中，胃肠激素是艾塞那肽。

在一个实施方案中，胃肠激素是利拉鲁肽。

在一个实施方案中，胃肠激素是利西拉肽。

在一个实施方案中，胃肠激素是阿必鲁肽。

在一个实施方案中，胃肠激素是度拉糖肽。

此外并且同样重要的是，本申请人能够在具有羧酸根电荷和至少一种根据本发明的疏水基团的共聚氨基酸存在下验证人胰高血糖素保持其作用(无论是单独还是与胃肠激素组合)。

根据本发明的组合物的制备具有以下有利方面：其可通过将人胰高血糖素溶液、GLP-1 RA溶液、GLP-1 RA的类似物或衍生物溶液和具有羧酸根电荷和至少一种根据本发明的疏水基团的共聚氨基酸溶液在水溶液中或以冻干形式简单混合来进行。如果需要，将制剂的pH调节至pH 7。

在一个实施方案中，在与GLP-1 RA、GLP-1 RA的类似物或衍生物在水溶液中和以冻干形式混合之前，通过超滤浓缩人胰高血糖素和取代的共聚氨基酸的混合物。

如果需要，在赋形剂诸如甘油、间甲酚和聚山梨醇酯方面通过在混合物中加入这些赋形剂的浓缩溶液来调节混合物的组成。如果需要，将pH调节至7。

图1的描述：

由相对于基础水平的葡萄糖差异表示的血糖过多的中值药效学曲线示于图1中。该图在横坐标上表示注射后时间，在纵坐标上以百分比表示葡萄糖水平。

表示用实施例CB1e的组合物获得的结果的曲线用空心方块表示，表示的组合物的结果的曲线用实心圆圈表示。

部分A

AA：其中p＝1的疏水分子的合成

在下表中疏水基团由接枝至共聚氨基酸上之前的相应疏水分子表示。

表1A：根据本发明合成的疏水分子的列表和结构。

实施例AA1：分子AA1

分子A1：通过棕榈酰氯与L-脯氨酸之间的反应获得的产物。

将棕榈酰氯(23.0g，83.7mmol)在丙酮((167mL)中的溶液在90分钟内滴加到L-脯氨酸(10.6g，92.1mmol)在1N含水氢氧化钠(230mL；230mmol)中的溶液中。于室温下搅拌14h后，将非均相混合物冷却至0℃，然后通过烧结过滤器过滤，得到白色固体，将其用水(2x100mL)洗涤，然后用二异丙基醚(100mL)洗涤。将固体减压干燥。然后将固体在回流下溶解于200mL水中，然后加入8mL37％的盐酸溶液直至获得pH＝1。然后将乳白色反应混合物冷却至0℃。将得到的沉淀物通过烧结过滤器过滤，然后用水(5x 50mL)洗涤，直至获得具有6.0至8.0的生理pH值的滤液，随后在50℃的烘箱中真空干燥过夜。通过在二异丙基醚中重结晶纯化产物。得到白色固体。

收率：22.7g(77％)。

¹H NMR(CDCl₃，ppm)：0.88(3H)；1.19-1.45(24H)；1.58-1.74(2H)；1.88-2.14(3H)；2.15-2.54(3H)；3.47(1H)；3.58(1H)；4.41(0.1H)；4.61(0.9H)6.60-8.60(1H)。

分子A2：通过分子A1与Boc-乙二胺之间的反应获得的产物。

将N，N-二异丙基乙胺(DIPEA)(68.8g，532.3mmol)、1-羟基苯并***(HOBt)(37.1g，274.6mmol)，然后N-(3-二甲基氨基丙基)-N’-乙基碳二亚胺(EDC)(53.1g，277.0mmol)在室温下依次加入到分子A1(75.1g，212.4mmol)在1500mL氯仿中的溶液中。在室温下搅拌15min后，加入Boc-乙二胺(Boc-乙二胺)(37.6g，234.7mmol)在35mL氯仿中的溶液。在室温下搅拌18h后，加入0.1N HCl溶液(2.1L)，然后加入饱和NaCl溶液(1L)。分离各相，然后依次用0.1N HCl/饱和NaCl溶液(2.1L/1L)、饱和NaCl溶液(2L)、饱和NaHCO3溶液(2L)，然后饱和NaCl溶液(2L)洗涤有机相。将有机相经无水硫酸钠干燥，过滤，然后减压浓缩。通过在二异丙基醚(3x 400mL)中研磨来纯化所得的固体，在40℃下真空干燥后得到固体。

收率：90.4g(86％)。

¹H NMR(CDCl₃，ppm)：0.88(3H)；1.20-1.37(24H)；1.44(9H)；1.54-1.70(2H)；1.79-1.92(1H)；1.92-2.04(1H)；2.03-2.17(1H)；2.17-2.44(3H)；3.14-3.36(4H)；3.43(1H)；3.56(1H)；4.29(0.1H)；4.51(0.9H)；4.82(0.1H)；5.02(0.9H)；6.84(0.1H)；7.22(0.9H)。

分子AA1

将4M盐酸在二噁烷(100mL，400mmol)中的溶液于0℃下滴加到分子A2(20.1g，40.5mmol)在330mL二氯甲烷中的溶液中。在室温下搅拌3h后，将溶液减压浓缩。通过快速色谱法(甲醇、二氯甲烷)纯化残余物，得到为盐酸盐的分子AA1的白色固体。

收率：16.3g(93％)。

¹H NMR(CDCl₃，ppm)：0.88(3H)；1.07-1.40(24H)；1.49-1.63(2H)；1.77-2.18(4H)；2.18-2.45(2H)；3.14-3.32(2H)；3.42-3.63(2H)；3.63-3.84(2H)；4.37(0.1H)；4.48(0.9H)；6.81-8.81(4H)。

LC/MS(ESI)：396.5；(计算的([M+H]⁺)：396.4)。

实施例AA2：分子AA2

分子A3：15-甲基十六烷-1-醇。

将呈芯片形式的镁(9.46g，389mmol)在氩气下引入三颈烧瓶中。用无水THF(40mL)覆盖镁，在室温下加入几滴1-溴-3-甲基丁烷以引发反应。在观察到放热反应和介质的轻微混浊之后，在90min内滴加剩余的1-溴-3-甲基丁烷(53.87g，357mmol)，同时介质的温度保持稳定在50℃至60℃。然后将反应介质在70℃下加热2h。

在0℃下，将12-溴-1-十二烷醇(43g，162.1mmol)在THF(60mL)中的溶液滴加到充有氩气的三颈烧瓶中的溶解在NMP(62mL)中的CuCl(482mg，4.86mmol)溶液中。然后以使介质的温度保持在20℃以下的方式将临时制备的热有机镁溶液的溶液滴加到该溶液中。然后将混合物在室温下搅拌16h。将介质冷却至0℃并通过加入1N HCl水溶液直至pH为1来终止反应，并用乙酸乙酯萃取介质。用饱和NaCl溶液洗涤有机相并经Na₂SO₄干燥后，过滤溶液并真空浓缩，得到油状物。在用DCVC于硅胶(环己烷、乙酸乙酯)上纯化后，得到在室温下结晶的油状物。

收率：32.8g(74％)

¹H NMR(CDCl₃，ppm)：0.87(6H)；1.14(2H)；1.20-1.35(22H)；1.50-1.55(3H)；3.64(2H)。

分子A4：15-甲基十六烷酸。

在室温下将高锰酸钾(38.2g，241.5mmol)以小份加入到分子A3(20.65g，80.5mmol)和四丁基溴化铵(14.02g，42.5mmol)在乙酸/二氯乙烷/水(124/400/320mL)的混合物中的溶液中。在回流下搅拌5h并回到室温后，通过逐渐加入5N HCl来将介质在pH 1下进行酸化。然后逐渐加入Na₂SO₃(44.6g，354.3mmol)直至介质变色。水相用二氯甲烷萃取，并将合并的有机相经Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩。通过色谱法在硅胶(环己烷、乙酸乙酯、乙酸)上纯化后，得到白色固体。

收率：19.1g(定量)

¹H NMR(CDCl₃，ppm)：0.87(6H)；1.14(2H)；1.22-1.38(20H)；1.51(1H)；1.63(2H)；2.35(2H)。

分子A5：通过分子A4与L-脯氨酸之间的反应获得的产物。

在0℃下，将二环己基碳二亚胺(DCC)(8.01g，38.8mmol)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)(4.47g，38.8mmol)依次加入到分子A4(10g，37mmol)在THF(360mL)中的溶液中。在室温下搅拌17h后，将介质冷却至0℃持续20min，通过烧结过滤器过滤。将L-脯氨酸(4g，37.7mmol)、三甲基胺(34mL)和水(30mL)加入滤液中。在室温下搅拌20h后，将介质用1N HCl水溶液处理直至pH为1。用二氯甲烷(2x 125ml)萃取水相。将合并的有机相用1N HCl水溶液(2x 100ml)、水(100mL)，然后饱和NaCl水溶液(100mL)进行洗涤。在经Na₂SO₄干燥后，过滤有机相，真空浓缩，然后通过色谱法在硅胶(环己烷、乙酸乙酯、乙酸)上纯化残余物。

收率：9.2g(72％)

¹H NMR(CDCl₃，ppm)：0.86(6H)；1.14(2H)；1.22-1.38(20H)；1.50(1H)；1.67(2H)；1.95-2.10(3H)；2.34(2H)；2.49(1H)；3.47(1H)；3.56(1H)；4.61(1H)。

LC/MS(ESI)：368.3；(计算的([M+H]⁺)：368.6)。

分子A6：通过分子A5与Boc-乙二胺之间的反应获得的产物。

在室温下将三乙基胺(TEA)(5.23mL)和2-(1H-苯并***-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲四氟硼酸盐(TBTU)加入到分子A5(9.22g，25.08mmol)在THF/DMF(200/50mL)的混合物中的溶液中。搅拌10min后，加入Boc-乙二胺(4.42g，27.6mmol)。在室温下搅拌17h后，将混合物在0℃下用水(300mL)稀释并冷搅拌20min。将形成的沉淀物通过烧结过滤器过滤，滤液用乙酸乙酯萃取。合并的有机相用饱和NaHCO₃溶液洗涤，用Na₂SO₄洗涤，过滤，真空浓缩，并通过快速色谱(乙酸乙酯、甲醇)纯化残余物。

收率：6.9g(54％)

¹H NMR(CDCl₃，ppm)：0.86(6H)；1.15(2H)；1.22-1.38(20H)；1.43(9H)；1.50(1H)；1.64(4H)；1.85(1H)；1.95(1H)；2.10(1H)；2.31(2H)；3.20-3.35(3H)；3.45(1H)；3.56(1H)；4.51(1H)；5.05(1H)；7.24(1H)。

LC/MS(ESI)：510.6；(计算的([M+H]⁺)：510.8)。

分子AA2

在0℃下，将4N HCl的二噁烷溶液(13mL)加入到分子A6(5.3g，10.40mmol)在二氯甲烷(50mL)中的溶液中。在0℃搅拌5h后，将介质真空浓缩，溶解于水中并冻干，得到为盐酸盐的分子AA2的白色固体。

收率：4.6g(99％)

¹H NMR(D₂O，ppm)：0.91(6H)；1.22(2H)；1.22-1.50(20H)；1.63(3H)；1.98(1H)；2.10(2H)；2.26(1H)；2.39(1H)；2.43(1H)；3.22(2H)；3.45-3.60(3H)；3.78(1H)；4.42(1H)。

LC/MS(ESI)：410.4；(计算的([M+H]⁺)：410.7)。

实施例AA3：分子AA3

分子A7：通过分子Al与Boc-三(乙二醇)二胺之间的反应获得的产物。

通过对分子A1(4.0g，11.3mmol)和Boc-三(乙二醇)二胺(3.1g，12.4mmol)应用与用于制备分子A2的方法类似的方法，在通过快速色谱(甲醇、甲苯)纯化后得到无色油状物。

收率：5.5g(84％)。

¹H NMR(CDCl₃，ppm)：0.88(3H)；1.09-1.39(24H)；1.44(9H)；1.64(2H)；1.79-2.01(2H)；2.06-2.43(4H)；3.23-3.68(14H)；4.33(0.2H)；4.56(0.8H)；5.25(1H)；6.49(0.2H)；7.13-7.50(0.8H)

分子AA3

通过对分子A7(5.5g，9.4mmol)应用与用于制备分子AA1的方法类似的方法，在通过快速色谱(甲醇、二氯甲烷)纯化后得到为盐酸盐的分子AA3的白色固体。

收率：4.3g(92％)。

¹H NMR(DMSO-d6，ppm)：0.85(3H)；1.08-1.40(24H)；1.40-1.52(2H)；1.71-2.02(4H)；2.02-2.31(2H)；2.90-2.98(2H)；3.15-3.47(5H)；3.50-3.66(7H)；4.24(0.6H)；4.32(0.4H)；7.83(0.6H)；7.95(3H)；8.17(0.4H)。

LC/MS(ESI)：484.6；(计算的([M+H]⁺)：484.4)。

实施例AA4：分子AA4

分子A8：通过分子A1与Boc-1-氨基-4，7，10-三氧杂-13-十三烷胺之间的反应获得的产物。

通过对分子A1(4.5g，12.7mmol)和Boc-1-氨基-4，7，10-三氧杂-13-十三烷胺(4.5g，14.0mmol)应用与用于制备分子A2的方法类似的方法，在通过快速色谱(甲醇、二氯甲烷)纯化后得到黄色油状物。

收率：7.7g(92％)

¹H NMR(CDCl₃，ppm)：0.88(3H)；1.22-1.37(24H)；1.44(9H)；1.59-1.67(2H)；1.67-2.00(6H)；2.06-2.45(4H)；3.18-3.76(18H)；4.28(0.2H)；4.52(0.8H)；4.69-5.04(1H)；6.77(0.2H)；7.20(0.8H)。

分子AA4

通过对分子A8(7.7g，11.8mmol)应用与用于制备分子AA1的方法类似的方法，在通过快速色谱(甲醇、二氯甲烷)纯化后得到黄色油状物。用二异丙基醚共蒸发使得可能获得为盐酸盐的呈白色固体的分子AA4，将其在50℃下真空干燥。

收率：5.4g(76％)

¹H NMR(CDCl₃，ppm)：0.88(3H)；1.08-1.40(24H)；1.49-1.65(2H)；1.76-2.39(10H)；3.07-3.28(3H)；3.34-3.80(15H)；4.34(0.05H)；4.64(0.95H)；7.35(0.05H)；7.66-8.58(3.95H)。

LC/MS(ESI)：556.7；(计算的([M+H]⁺)：556.5)。

实施例AA5：分子AA5

分子A9：通过分子A1与N-Boc-L-赖氨酸甲酯之间的反应获得的产物

通过对分子A1(4g，11.3mmol)和N-Boc-L-赖氨酸甲酯(3.2g，12.4mmol)应用与用于制备分子A2的方法类似的方法，在通过快速色谱(甲醇、二氯甲烷)纯化后得到无色油状物。

收率：4.9g(73％)

¹H NMR(CDCl₃，ppm)：0.88(3H)；0.99-1.54(37H)；1.54-1.75(3H)；1.75-2.04(3H)；2.04-2.41(4H)；2.94-3.19(2H)；3.19-3.81(5H)；4.28-4.64(2H)；4.94(1H)；6.45(0.1H)；7.36(0.9H)。

LC/MS(ESI)：596.7；(计算的([M+H]⁺)：596.5)。

分子A10：通过用氨处理分子A9获得的产物。

将320mL的7N氨的甲醇溶液加入到分子A9(4.9g，8.2mmol)在10mL甲醇中的悬浮液中。在室温下于封闭的气氛中搅拌19h后，再加入100mL氨溶液。在室温下于封闭的气氛中搅拌24h后，将反应介质减压浓缩。通过在回流下于二异丙基醚(100mL)中研磨来纯化残余物，得到白色固体，将其在50℃下真空干燥。

收率：4.1g(85％)

¹H NMR(CDCl₃，ppm)：0.88(3H)；1.06-1.57(37H)；1.57-1.79(3H)；1.88-2.41(7H)；3.09(2H)；3.49(1H)；3.62(1H)；4.34(1H)；4.51(1H)；4.69-4.81(1H)；5.43(0.95H)；5.57(0.05H)；6.25(0.05H)；6.52(0.95H)；6.83(0.05H)；7.11(0.95H)。

分子AA5

通过对分子A10(388mg，0.67mmol)应用与用于制备分子AA1的方法类似的方法，在通过二异丙基醚中研磨纯化后得到为盐酸盐的分子AA5的白色固体。

收率：292mg(85％)

¹H NMR(DMSO-d6，ppm)：0.85(3H)；1.06-2.34(38H)；2.61-2.81(2H)；3.29-3.68(2H)；4.05-4.17(1.7H)；4.42(0.3H)；7.00(1H)；7.16(0.7H)；7.43(0.3H)；7.73-8.04(3.7H)；8.16(0.3H)。

LC/MS(ESI)：481.6；(计算的([M+H]⁺)：481.4)。

实施例AA6：分子AA6

分子A11：通过硬脂酰氯与L-脯氨酸之间的反应获得的产物。

通过对分子L-脯氨酸(5.0g，43.4mmol)和硬脂酰氯(12.0g，39.6mmol)应用与用于制备分子A1的方法类似的方法，在通过快速色谱(甲醇、二氯甲烷)纯化后得到白色固体。

收率：5.37g(36％)

¹H NMR(CDCl₃，ppm)：0.88(3H)；1.26-1.37(28H)；1.64-1.70(2H)；1.88-2.10(3H)；2.36(2H)；2.54-2.58(1H)。；3.46(1H)；3.56(1H)；4.62(1H)。

LC/MS(ESI)：382.6；(计算的([M+H]⁺)：382.3)。

分子A12：通过分子A11与Boc-三(乙二醇)二胺之间的反应获得的产物

使用DIPEA代替TEA，通过对分子A11(33.81g，88.6mmol)和THF中的Boc-三(乙二醇)二胺(26.4g，106.3mmol)应用与用于制备分子A6的方法类似的方法，在通过快速色谱(乙酸乙酯、甲醇)纯化后得到白色固体。

收率：43.3g(80％)

¹H NMR(CDCl₃，ppm)：0.87(3H)；1.24(30H)；1.43(9H)；1.61(2H)；1.82(1H)；1.96(1H)；2.25-2.45(2H)；3.25-3.65(14H)；4.30(0.15H)；4.53(0.85H)；5.25(1H)；6.43(0.15H)；7.25(0.85H)。

LC/MS(ESI)：612.6；(计算的([M+H]⁺)：612.9)。

分子AA6

通过对分子A12(43g，70.3mmol)应用与用于制备分子AA2的方法类似的方法，将在真空浓缩后得的残余物在乙腈中进行研磨。过滤悬浮液，用乙腈洗涤固体，然后用丙酮洗涤。真空干燥后，得到为盐酸盐的分子AA6的白色固体。

收率：31.2g(81％)

¹H NMR(DMSO-d₆，ppm)：0.85(3H)；1.23(28H)；1.45(2H)；1.70-2.05(4H)；2.13(1H)；2.24(1H)；2.95(2H)；3.10-3.25(2H)；3.30-3.65(10H)；4.20-4.45(1H)；7.85-8.25(4H)。

LC/MS(ESI)：512.4；(计算的([M+H]⁺)：512.8)。

实施例AA7：分子AA7

分子A13：通过花生四烯酸与L-脯氨酸之间的反应获得的产物

通过使用DIPEA代替TEA，对花生四烯酸(15.51g，49.63mmol)和L-脯氨酸(6g，52.11mmol)应用与用于制备分子A5的方法类似的方法，在通过柱色谱在硅胶(环己烷、乙酸乙酯、乙酸)上纯化后得到白色固体。

收率：12.9g(63％)

¹H NMR(CDCl₃，ppm)：0.88(3H)；1.28(34H)；1.66(2H)；1.95-2.15(2H)；2.34(2H)；2.45(1H)；3.47(1H)；3.56(1H)；4.60(1H)。

LC/MS(ESI)：410.4；(计算的([M+H]⁺)：410.6)。

分子A14：通过分子A13与Boc-1-氨基-4，7，10-三氧杂-13-十三烷胺之间的反应获得的产物。

通过对分子A13(10.96g，26.75mmol)和Boc-1-氨基-4，7，10-三氧杂-13-十三烷胺(10.29g，32.11mmol)应用与用于制备分子A12的方法类似的方法，在通过柱色谱在硅胶(环己烷、乙酸乙酯、甲醇)上纯化后得到固体。

收率：14.2g(75％)

¹H NMR(CDCl₃，ppm)：0.88(3H)；1.24(32H)；1.43(9H)；1.57-2.00(8H)；2.10-2.45(4H)；3.20-3.75(18H)；4.30(0.20H)；4.55(0.80H)；5.03(1H)；6.75(0.20H)；7.20(0.80H)。

LC/MS(ESI)：712.8；(计算的([M+H]⁺)：713.1)。

分子AA7

在对分子A14(14.25g，20.01mmol)应用与用于制备分子AA2的方法类似的方法后，将在反应介质真空浓缩后获得的残余物溶解在甲醇中，并减压蒸发，将操作重复4次，得到作为盐酸盐的分子AA7的白色固体。

收率：12.7g(98％)

¹H NMR(DMSO-d₆，ppm)：0.85(3H)；1.23(32H)；1.45(2H)；1.64(2H)；1.70-2.05(6H)；2.10-2.30(2H)；2.82(2H)；3.08(2H)；3.30-3.60(14H)；4.15-4.30(1H)；7.73-8.13(4H)。

LC/MS(ESI)：612.7；(计算的([M+H]⁺)：612.9)。

实施例AA8：分子AA8

分子A15：通过L-亮氨酸与棕榈酰氯之间的反应获得的产物

通过对L-亮氨酸(15.0g，114.4mmol)和棕榈酰氯(34.5g，125mmol)应用与用于制备分子A1的方法类似的方法，通过在二异丙基醚中研磨获得白色固体。

收率：13.0g(31％)

¹H NMR(CDCl₃，ppm)：0.88(3H)；0.96(6H)；1.16-1.35(24H)；1.55-1.77(5H)；2.23(2H)；4.55-4.60(1H)；5.88(1H)。

分子A16：通过分子A15与L-脯氨酸甲酯之间的反应获得的产物。

通过对分子A15(6.00g，16.2mmol)和L-脯氨酸甲酯(3.23g，19.5mmol)应用与用于制备分子A2的方法类似的方法，在通过快速色谱(甲醇、二氯甲烷)纯化后得到淡黄色油状物。

收率：5.8g(74％)

¹H NMR(CDCl₃，ppm)：0.83-1.00(9H)；1.18-1.32(24H)；1.40-1.73(5H)；1.84-2.33(6H)；3.47-3.89(2H)；3.70(1.14H)；3.71(1.21H)；3.74(0.53H)；3.76(0.12H)；4.40-4.56(1H)；4.63-4.67(0.04H)；4.84(0.38)；4.90(0.40)；5.06(0.18)；5.99(0.18H)；6.08-6.21(0.82)。

LC/MS(ESI)：481.6；(计算的([M+H]⁺)：481.4)。

分子A17：通过对分子A16的甲酯进行皂化获得的产物。

将1N氢氧化钠(13.5mL，13.5mmol)加入到分子A16(5.8g，12.06mmol)在30mL甲醇中的溶液中。在室温下搅拌20h后，将溶液用水稀释，然后在0℃下用20mL 1N盐酸酸化。过滤沉淀物，然后用水(50mL)漂洗，然后将其溶解在50mL二氯甲烷中。将有机相经Na2SO4干燥，过滤，然后减压浓缩，得到无色油状物。

收率：4.5g(80％)

¹H NMR(CDCl₃，ppm)：0.85-0.99(9H)；1.14-1.41(24H)；1.43-1.72(5H)；1.87-2.47(7H)；3.48-3.55(0.6H)；3.56-3.62(0.4H)；3.83-3.90(0.4H)；3.90-3.96(0.6H)；4.52-4.56(0.6H)；4.56-4.59(0.4H)；4.80-4.86(0.4H)；4.86-4.91(0.6H)；6.05(0.4H)；6.11(0.6H)。

LC/MS(ESI)：467.6；(计算的([M+H]⁺)：467.4)。

分子A18：通过Boc-乙二胺与分子A17之间的反应获得的产物

通过对A17(4.5g，9.64mmol)和Boc-乙二胺(1.70g，10.61mmol)应用与用于制备分子A2的方法类似的方法，在通过快速色谱(甲醇、二氯甲烷)纯化后得到无色油状物。

收率：2.0g(34％)

¹H NMR(CDCl₃，ppm)：0.83-0.99(9H)；1.19-1.32(24H)；1.44(9H)；1.48-2.37(14H)；3.09-3.99(4H)；4.28-5.01(2H)；5.64-6.04(1H)；6.87-7.06(1H)。

LC/MS(ESI)：609.7；(计算的([M+H]⁺)：609.5)。

分子AA8

通过对分子A18(2g，3.28mmol)应用与用于制备分子AA1的方法类似的方法，在通过快速色谱(甲醇、二氯甲烷)纯化后得到为盐酸盐的分子AA8的固体。

收率：1.5g(90％)

¹H NMR(CDCl₃，ppm)：0.83-1.00(9H)；1.18-1.32(24H)；1.37-1.77(5H)；1.93-2.41(6H)；3.07-3.97(6H)；4.44-4.77(2H)；7.66-8.21(2H)。

LC/MS(ESI)：509.6；(计算的([M+H]⁺)：509.4)。

实施例AA9：分子AA9

分子A19：通过月桂酸与L-笨丙氨酸之间的反应获得的产物。

通过对月桂酸(8.10g，40.45mmol)和L-苯丙氨酸(7g，42.38mmol)应用与用于制备分子A5的方法类似的方法，获到白色固体。

收率：12.7g(98％)

¹H NMR(DMSO-d₆，ppm)：0.86(3H)；1.10-1.30(16H)；1.36(2H)；2.02(2H)；2.82(1H)；3.05(1H)；4.42(1H)；7.15-7.30(5H)；8.05(1H)；12.61(1H)。

LC/MS(ESI)：348.2；(计算的([M+H]⁺)：348.5)。

分子A20：通过分子A19与L-脯氨酸的甲酯的盐酸盐之间的反应获得的产物。

通过对分子A19(9.98g，28.72mmol)和L-脯氨酸的甲酯的盐酸盐(5.23g，31.59mmol)应用与用于制备分子A6的方法类似的方法，在通过柱色谱在硅胶(环己烷、乙酸乙酯)上纯化后得无色油状物。

收率：5.75g(44％)

¹H NMR(CDCl₃，ppm)：0.88(3H)；1.10-1.30(16H)；1.50-1.75(3H)；1.80-2.02(3H)；2.17(2H)；2.65(0.5H)；2.95(1H)；3.05-3.20(1.5H)；3.50-3.65(1H)；3.75(3H)；4.29(0.5H)；4.46(0.5H)；4.70(0.1H)；4.95(0.9H)；6.20-6.30(1H)；7.15-7.30(5H)。

LC/MS(ESI)：459.2；(计算的([M+H]⁺)：459.6)。

分子A21：通过对分子A20进行皂化获得的产物。

在0℃下，将氢氧化锂(LiOH)(600.49mg，25.07mmol)加入到分子A20(5.75g，12.54mmol)在THF/甲醇/水(40/40/40mL)的混合物中的溶液中，然后将混合物在室温下搅拌20h。在真空中蒸发有机溶剂后，将水相在水中稀释，用1N HCl水溶液酸化直至pH为1。然后用乙酸乙酯萃取产物。将合并的有机相用饱和NaCl水溶液洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩，得到无色油状物。

收率：5.7g(定量)

¹H NMR(CDCl₃，ppm)：0.88(3H)；1.10-1.30(16H)；1.50-1.80(3H)；1.67-2.02(2H)；2.20(2H)；2.25(0.4H)；2.60(0.6H)；2.85-3.10(2.6H)；3.55-3.65(1.4H)；4.35(0.6H)；4.55(0.4H)；4.94(1H)；6.28(0.4H)；6.38(0.6H)；7.20-7.30(5H)。

LC/MS(ESI)：445.2；(计算的([M+H]⁺)：445.6)。

分子A22：通过Boc-乙二胺与分子A21之间的反应获得的产物

通过对A21(5.67g，12.75mmol)和Boc-乙二胺(2.25g，14.03mmol)应用与用于制备分子A6的方法类似的方法，在通过柱色谱硅在胶(二氯甲烷、甲醇)上纯化后得到无色油状物。

收率：5.7g(76％)

¹H NMR(CDCl₃，ppm)：0.88(3H)；1.25(16H)；1.43(9H)；1.58(2.6H)；1.75-1.95(1.4H)；2.15-2.30(3H)；2.64(0.5H)；2.95-3.10(2.5H)；3.20-3.40(4H)；3.45(0.5H)；3.55(0.2H)；3.66(1H)；4.44(1H)；4.50(0.2H)；4.60(0.6H)；4.99(0.7H)；5.54(0.5H)；5.95(0.2H)；6.17(1H)；6.60(0.5H)；7.07(0.5H)；7.20-7.40(5H)。

LC/MS(ESI)：587.4；(计算的([M+H]⁺)：587.8)。

分子AA9

在对分子A22(5.66g，9.65mmol)应用与用于制备分子AA2的方法类似的方法后，将在反应介质真空浓缩后获得的残余物溶解在甲醇中，并减压蒸发，将操作重复4次，得到作为盐酸盐的分子AA9的白色泡沫。

收率：4.9g(97％)

¹H NMR(DMSO-d₆，120℃，ppm)：0.89(3H)；1.26(16H)；1.43(2H)；1.68(0.6H)；1.75-2.00(3H)；2.05-2.25(2.4H)；2.82-3.05(5H)；3.38(2H)；3.50-3.70(1.4H)；4.25(0.6H)；4.63(0.4H)；4.77(0.6H)；7.25-7.50(5H)；7.55-8.20(4H)。

LC/MS(ESD：487.4；(计算的([M+H]⁺)：487.7)。

实施例AA10：分子AA10

分子A23：通过哌啶甲酸与花生四烯酸之间的反应获得的产物

通过对花生四烯酸(2.30g，7.37mmol)和哌啶甲酸(1.00g，7.74mmol)应用与用于制备分子A5的方法类似的方法，在过滤酸化直至pH为1的水相，并用水，然后用二氯甲烷洗涤固体后获得白色固体。

收率：1.65g(53％)

1H NMR(CDCl₃，ppm)：0.88(3H)；1.07-1.88(37H)；2.10(1H)；2.28-2.45(2H)；2.52(1H)；2.91-3.17(1.5H)；3.42(0.5H)；3.72(0.5H)；3.84(0.5H)；4.08(0.5H)；4.56(0.5H)。

LC/MS(ESI)：424.4；848.0；(计算的([M+H]⁺)：424.4；([2M+H]⁺)：847.8)。

分子A24：通过分子A23与Boc-1-氨基-4，7，10-三氧杂-13-十三烷胺之间的反应获得的产物。

在室温下将DIPEA(1.01g，7.79mmol)和TBTU(1.31g，4.09mmol)依次加入分子A23(1.65g，3.89mmol)在20mL THF中的悬浮液中。搅拌30分钟后，加入Boc-1-氨基-4，7，10-三氧杂-13-十三烷胺(1.37g，4.28mmol)，将反应介质在室温下搅拌18h。减压蒸发溶剂后，残余物用乙酸乙酯(100mL)稀释，将有机相依次用饱和NaHCO₃水溶液、1N HCl水溶液、饱和NaCl水溶液洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩。通过快速色谱法(环己烷、乙酸乙酯、甲醇)纯化后得到白色固体。

收率：1.97g(70％)

¹H NMR(CDCl₃，ppm)：0.88(3H)；1.15-2.70(54H)；3.10-3.46(6H)；3.46-3.71(12.6H)；3.92(0.4H)；4.17(0.6H)；4.49(0.4H)；4.80-5.16(1H)；6.35-6.76(1H)。

LC/MS(ESI)：726.8；(计算的([M+H]⁺)：726.6)。

分子AA10

通过对分子A24(1.97g，2.71mmol)应用与用于制备分子AA1的方法类似的方法，在蒸发溶剂，于丙酮中研磨，过滤和用丙酮洗涤，然后在50℃下减压干燥后，得到分子AA10的白色固体。

收率：1.66g(92％)

¹H NMR(DMSO-d₆，ppm)：0.86(3H)；1.09-1.90(42H)；2.05-2.68(5H)；2.45-2.68(1H)；2.78-3.19(6H)；3.36-3.44(2H)；3.44-3.60(10H)；3.69-3.87(1H)；4.20(0.4H)；4.35(0.6H)。

LC/MS(ESI)：626.7；(计算的([M+H]⁺)：626.5)。

实施例AA12：分子AA12

分子A26：通过肉豆蔻酰氯与L-脯氨酸之间的反应获得的产生(1646-22-CNI)

在0℃下，将肉豆蔻酰氯(322g，1.30mol)在二氯甲烷(1.63L)中的溶液在1h内缓慢加入到L-脯氨酸(300.40g，2.61mol)在2N氢氧化钠水溶液(1.63L)中的溶液中。在添加结束时，将反应介质的温度在2h内恢复至20℃，然后再搅拌2h。将混合物冷却至0℃，然后在15分钟内加入37％HCl溶液(215mL)。将反应介质在0℃下搅拌10min，然后在0℃至20℃下搅拌1h。分离有机相，将其用10％HCl溶液(3x 430mL)、饱和NaCl水溶液(430mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，通过棉花过滤，然后减压浓缩。将残余物溶解在庚烷(315mL)中，然后在机械搅拌下加入戊烷(1.6L)。在通过烧结过滤器过滤并减压干燥后获得白色固体。

收率：410.6g(97％)

¹H NMR(CDCl₃，ppm)：0.88(3H)；1.28(20H)；1.70(2H)；1.90-2.10(3H)；2.36(2H)；2.51(1H)；3.47(1H)；3.56(1H)；4.61(1H)。

LC/MS(ESI)：326.4；651.7；(计算的([M+H]⁺)：326.3；([2M+H]⁺)：651.6)。

分子A27：通过分子A26与Boc-乙二胺之间的反应获得的产物

在室温下，将HOBt(1.83g，11.98mmol)，然后将Boc-乙二胺(1.62g，10.14mmol)依次加入到分子A26(3.00g，9.21mmol)在甲基-THF(50mL)的溶液中，并将介质冷却至0℃。加入EDC(2.29g，11.98mmol)，然后将混合物在0℃与室温之间搅拌17h。然后将反应介质用饱和NH₄Cl水溶液(50mL)、饱和NaHCO₃水溶液(50mL)，然后饱和NaCl水溶液(50mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩。在于甲醇中重结晶后获得白色固体。

收率：2.34g(49％)

¹H NMR(CDCl₃，ppm)：0.88(3H)；1.16-1.38(20H)；1.44(9H)；1.56-1.71(2H)；1.78-2.45(6H)；3.11-3.72(6H)；4.30(0.1H)；4.51(0.9H)；4.87(0.1H)；5.04(0.9H)；6.87(0.1H)；7.23(0.9H)。

LC/MS(ESI)：468.0；(计算的([M+H]⁺)：468.4)。

分子AA12

通过对分子A27(2.34g，5.00mmol)应用与用于制备分子AA1的方法类似的方法，在溶剂蒸发和在二异丙基醚中研磨后得到分子AA12的白色固体。

收率：1.5g(74％)

¹H NMR(MeOD-d4，ppm)：0.90(3H)；1.21-1.43(20H)；1.54-1.66(2H)；1.85-2.28(4H)；2.39(2H)；3.00-3.17(2H)；3.30-3.40(1H)；3.43-3.71(3H)；4.29(0.94H)；4.48(0.06H)。

LC/MS(ESI)：368.2；(计算的([M+H]⁺)：368.3)。

实施例AA14：分子AA14

树脂AA14-1：通过4，7，10-三氧杂-1，13-十三烷二胺与树脂2-Cl-三苯甲基氯化物之间的反应获得的产物

在室温下将DIPEA(8.64mL，49.60mmol)加入到4，7，10-三氧杂-1，13-十三烷二胺(10.87mL，49.60mmol)在二氯甲烷(50mL)中的溶液中。将该溶液倒在适于在固体支持物上合成肽的反应器中的预先用二氯甲烷(100-200目，1％DVB，1.24mmol/g)(4.00g，4.96mmol)洗涤的树脂2-Cl-三苯甲基氯化物上。在室温下搅拌2h后，加入HPLC级甲醇(0.8mL/g树脂，3.2mL)，并将混合物在室温下搅拌15min。将树脂进行过滤，依次用二氯甲烷(3x 50mL)、DMF(2x 50mL)、二氯甲烷(2x 50mL)、异丙醇(1x 50mL)和二氯甲烷(3x 50mL)洗涤。

树脂AA14-2：通过树脂AA14-1与Fmoc-甘氨酸之间的反应获得的产物。

将DIPEA(5.18mL，29.76mmol)加入到Fmoc-甘氨酸(4.42g，14.88mmol)和1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1，2，3-***并[4，5-b]吡啶3-氧化物-六氟磷酸盐(HATU，5.66g，14.88mmol)在DMF/氯甲烷1∶1(60mL)的混合物中的悬浮液中。完全溶解后，将所得溶液倒在树脂AA14-1上。在室温下搅拌2h后，将树脂进行过滤，依次用DMF(3x 60mL)、异丙醇(1x60ml)和二氯甲烷(3x 60mL)洗涤。

树脂AA14-3：通过树脂AA14-2与DMF/哌啶80∶20的混合物之间的反应获得的产物。用DMF/哌啶80∶20(50mL)的混合物处理树脂AA14-2。在室温下搅拌30分钟后，将树脂进行过滤，依次用DMF(3x 50mL)、异丙醇(1x 50ml)和二氯甲烷(3x 50mL)洗涤。

树脂AA14-4：通过树脂AA14-3与Fmoc-脯氨酸之间的反应获得的产物。

通过对DMF(50mL)中的树脂AA14-3和Fmoc-脯氨酸(5.02g，14.88mmol)应用与用于树脂AA14-2的方法类似的方法，得到树脂AA14-4。

树脂AA14-5：通过树脂AA14-4与DMF/哌啶80∶20的混合物之间的反应获得的产物。

通过对树脂AA14-4和DMF/哌啶80∶20的混合物(50mL)应用与用于树脂AA14-3的方法类似的方法，得到树脂AA14-5。

树脂AA14-6：通过树脂AA14-5与棕榈酸之间的反应获得的产物。

通过对树脂AA14-5和棕榈酸(3.82g，14.88mmol)应用与用于树脂AA14-4的方法类似的方法，得到树脂AA14-6。

分子AA14(1843-04-CBU)用TFA/二氯甲烷1∶1(50mL)的混合物处理树脂AA14-6。在室温下搅拌30分钟后，将树脂进行过滤，并用二氯甲烷(3x 50mL)洗涤。真空蒸除溶剂。然后用二氯甲烷(50mL)，接着用二异丙基醚(50mL)对残余物进行两次共蒸发。将残余物溶解在二氯甲烷(50mL)中，并将有机相用1N NaOH水溶液(1x 50mL)洗涤，然后用饱和NaCl溶液(2x50mL)洗涤。在经Na2SO4干燥后，对有机相进行过滤，真空浓缩，然后通过色谱法在硅胶(二氯甲烷、甲醇、NH4OH)上纯化残余物。

收率：1.65g(经7个步骤总体收率为54％)

¹H NMR(CDCl₃，ppm)：0.88(3H)；1.18-2.39(38H)；2.79(2H)；3.23-3.44(2H)；3.47-3.69(14H)；3.76(0.92H)；3.82(0.08H)；3.98(0.08H)；4.03(0.92H)；4.34(0.08H)；4.39(0.92H)；7.00-7.40(2H)。

LC/MS(ESI)：613.7；(计算的([M+H]⁺)：613.5)。

表1b

式VII或VIIb的定义的共聚氨基酸

表1c：根据本发明合成的共聚氨基酸的列表

部分AB：共聚氨基酸的合成

实施例AB14：共聚氨基酸AB14-在其一个末端被分子AA1修饰并且数均分子量(Mn)为3400g/mol的聚L-谷氨酸钠

将分子AA1的盐酸盐(2.03g，4.70mmol)、氯仿(5mL)、分子筛(1.3g)以及Amberlite IRN 150离子交换树脂(1.3g)依次加入合适的容器中。在辊上搅拌1h后，过滤介质并用氯仿漂洗树脂。蒸发混合物，然后与甲苯共蒸发。将残余物溶解在无水DMF(30mL)中，直接用于聚合反应。

将L-谷氨酸γ-苄酯N-羧酸酐(25.59g，97.2mmol)在于烘箱中干燥的圆底烧瓶中真空放置30min，然后引入无水DMF(140mL)。将混合物在氩气下搅拌直至溶解完成，冷却至4℃，然后快速引入如上所述制备的分子AA1的溶液。将混合物在4℃与室温之间搅拌2天，然后在65℃下加热2h。然后将反应混合物冷却至室温，然后在搅拌下滴加到二异丙基醚(1.7L)中。通过过滤回收白色沉淀，用二异丙基醚(140mL)洗涤两次，然后在30℃下真空干燥，得到白色固体。将固体在TFA(160mL)中稀释，然后在0℃下滴加33％氢溴酸(HBr)在乙酸中的溶液(62mL，354mmol)。将溶液在室温下搅拌2h，然后在搅拌的条件下滴加至二异丙基醚/水的1∶1(v/v)混合物(1.9L)中。搅拌2h后，使非均相混合物静置过夜。通过过滤回收白色沉淀，依次用二异丙基醚和水的1∶1(v/v)混合物(280mL)洗涤，然后用水(140mL)洗涤。通过加入10N氢氧化钠水溶液将pH调节至7，将所得固体溶解于水(530mL)中。溶解后，通过加入水直至获得800mL的终体积，将理论浓度调节至理论浓度20g/L。将混合物通过0.45μm过滤器过滤，然后通过针对0.9％NaCl溶液，随后针对水进行超滤直至渗透物的导电率小于50μS/cm来进行纯化。然后将共聚氨基酸溶液浓缩至约30g/L的理论值并将pH调节至7.0。将水溶液通过0.2μm过滤器过滤并在4℃下储存。

干提取物：24.1mg/g

DP(通过¹H NMR估计的)＝25，从而i＝0.04。

共聚氨基酸AB14的计算平均分子量为3378g/mol。

HPLC-含水SEC(校准物PEG)：Mn＝3400g/mol。

实施例AB15：共聚氨基酸AB15-在其一个末端被分子AA6修饰并且数均分子量(Mn)为4100g/mol的聚L-谷氨酸钠

通过对分子AA6(2.16g，3.94mmol)的盐酸盐和25.58g(97.2mmol)L-谷氨酸γ-苄酯N-羧酸酐应用与用于制备共聚氨基酸AB14的方法类似的方法，得到其一端被分子AA6修饰的聚-L-谷氨酸钠。

干提取物：45.5mg/g

DP(通过¹H NMR估计的)＝30，从而i＝0.033。

共聚氨基酸AB15的计算平均分子量为5005g/mol。

HPLC-含水SEC(校准物PEG)：Mn＝4100g/mol。

实施例AB16：共聚氨基酸AB16-在其一个末端被分子AA6修饰并且数均分子量(Mn)为6500g/mol的聚L-谷氨酸钠

通过对分子AA6的盐酸盐(2.39g，4.36mmol)和50.0g(189.9mmol)L-谷氨酸γ-苄酯N-羧酸酐应用与用于制备共聚氨基酸AB14的方法类似的方法，得到其一端被分子AA6修饰的聚-L-谷氨酸钠。

干提取物：28.5mg/g

DP(通过¹H NMR估计的)＝48，从而i＝0.021。

共聚氨基酸AB16的计算平均分子量为7725g/mol。

HPLC-含水SEC(校准物PEG)：Mn＝6500g/mol。

实施例AB17：共聚氨基酸AB17-在其一个末端被分子AA7修饰并且数均分子量(Mn)为3500g/mol的聚L-谷氨酸钠

通过对分子AA7的盐酸盐(2.80g，4.32mmol)和25.0g(94.9mmol)L-谷氨酸γ-苄酯N-羧酸酐应用与用于制备共聚氨基酸AB14的方法类似的方法，得到其一端被分子AA7修饰的聚-L-谷氨酸钠。

干提取物：25.2mg/g

DP(通过¹H NMR估计的)＝26，从而i＝0.038。

共聚氨基酸AB17的计算平均分子量为4500g/mol。

HPLC-含水SEC(校准物PEG)：Mn＝3500g/mol。

实施例AB18：共聚氨基酸AB18-在其一个末端被分子AA7修饰并且数均分子量(Mn)为3700g/mol的聚L-谷氨酸钠

根据专利申请FR-A-2 801 226中所述的方法，通过使用分子AA7的盐酸盐(2.80g，4.32mmol)作为引发剂来聚合谷氨酸γ-甲基N-羧酸酐(25.0g，133.6mmol)并通过使用37％盐酸溶液对甲酯进行脱保护来获得其一个末端被分子AA7修饰的聚-L-谷氨酸钠。

干提取物：44.3mg/g

DP(通过¹H NMR估计的)＝22，从而i＝0.045。

共聚氨基酸AB18的计算平均分子量为3896g/mol。

HPLC-含水SEC(校准物PEG)：Mn＝3700g/mol。

实施例AB19：共聚氨基酸AB19-在其一个末端被分子AA6修饰并且数均分子量(Mn)为10500g/mol的聚L-谷氨酸钠

通过对分子AA6的盐酸盐(1.64g，2.99mmol)和L-谷氨酸γ-苄酯N-羧酸酐(49.3g，187mmol)应用与用于制备共聚氨基酸AB14的方法类似的方法，得到其一端被分子AA6修饰的聚-L-谷氨酸钠。

干提取物：23.4mg/g

DP(通过¹H NMR估计的)＝65，从而i＝0.015。

共聚氨基酸AB19的计算平均分子量为10293g/mol。

HPLC-含水SEC(校准物PEG)：Mn＝10500g/mol。

实施例AB20：共聚氨基酸AB20-在其一个末端处被乙酰基团修饰并且在其一个末端处被分子AA6修饰以及数均分子量(Mn)为10400g/mol的聚L-谷氨酸钠

将分子AA6的盐酸盐(0.545g，1.00mmol)、氯仿(10mL)、分子筛(3g)以及Amberlite IRN 150离子交换树脂(3g)依次加入合适的容器中。在辊上搅拌1h后，过滤介质并用氯仿漂洗树脂。蒸发混合物，然后与甲苯共蒸发。将残余物溶解在无水DMF(10mL)中，直接用于聚合反应。

将L-谷氨酸γ-苄酯N-羧酸酐(17.0g，64.6mmol)在预先于烘箱中干燥的圆底烧瓶中真空放置30min，然后加入无水DMF(30mL)。将混合物在氩气下搅拌直至溶解完成，冷却至4℃，然后快速引入如上所述制备的分子AA6的溶液。将混合物在4℃与室温之间搅拌2天，然后在二异丙基醚(0.6L)中沉淀。通过过滤回收沉淀，用二异丙基醚(40mL)洗涤两次，然后干燥，得到白色固体，将其溶解于80mL THF中。依次向该溶液中加入DIPEA(1.7mL，9.8mmol)，然后加入乙酸酐(0.9mL，9.5mmol)。在室温下搅拌一夜后，在搅拌的条件下将溶液缓慢倒入二异丙基醚(480mL)中，持续30min。搅拌1h后，过滤沉淀物，用二异丙基醚(80mL)洗涤两次，然后在30℃下真空干燥，得到呈白色固体形式的在其一个末端处被乙酰基团封端并且在其另一个末端处被分子AA6修饰的聚(γ-苄基-L-谷氨酸)酸。

将固体在TFA(65mL)中稀释，然后在4℃下滴加33％氢溴酸溶液(HBr)在乙酸中的溶液(45mL，257.0mmol)。将溶液在室温下搅拌2h，然后在搅拌的条件下逐滴倒入至二异丙基醚/水的1∶1(v/v)混合物(780mL)中。搅拌2h后，使非均相混合物静置过夜。通过过滤回收白色沉淀，依次用二异丙基醚和水的混合物1∶1(v/v)(70mL)洗涤，然后用水(70mL)洗涤。通过加入10N氢氧化钠水溶液，然后加入1N氢氧化钠水溶液将pH调节至7，将所得固体溶于水(300mL)中。溶解后，通过加入水直至获得440mL的终体积，将理论浓度调节至20g/L的理论值。将混合物通过0.45μm过滤器过滤，然后通过针对0.9％NaCl溶液，随后针对水进行超滤直至渗透物的导电率小于50μS/cm来进行纯化。然后将共聚氨基酸溶液浓缩至约30g/L的理论值并将pH调节至7。将水溶液通过0.2μm过滤器过滤并在4℃下储存。

干提取物：21.5mg/g

DP(通过¹H NMR估计的)＝60，从而i＝0.017。

共聚氨基酸AB20的计算平均分子量为9619g/mol。

HPLC-含水SEC(校准物PEG)：Mn＝10,400g/mol。

实施例AB21’：

共聚氨基酸AB21’-在其一个末端处被分子AA10修饰并且数均分子量(Mn)为3478g/mol的聚L-谷氨酸钠

通过对分子AA10的盐酸盐(0.916g，1.38mmol)和L-谷氨酸γ-苄酯N-羧酸酐(7.19g，27.3mmol)应用与用于制备共聚氨基酸AB14的方法类似的方法，得到在其一个末端处被分子AA10修饰的聚-L-谷氨酸钠。

干提取物：14.8mg/g

DP(通过¹H NMR估计的)＝25，从而i＝0.04。

共聚氨基酸AB21’的计算平均分子量为4364g/mol。

HPLC-含水SEC(校准物PEG)：Mn＝3478g/mol。

实施例AB23：

共聚氨基酸AB23-在其一个末端处被分子AA14修饰并且数均分子量(Mn)为3600g/mol的聚L-谷氨酸钠

通过对呈游离胺形式的分子AA14(0.820g，1.34mmol)和L-谷氨酸γ-苄酯N-羧酸酐(7.75g，29.4mmol)应用与用于制备共聚氨基酸AB14的方法类似的方法，得到在其一个末端处被分子AA14修饰的聚-L-谷氨酸钠。

干提取物：16.8mg/g

DP(通过¹H NMR估计的)＝22，从而i＝0.045。

共聚氨基酸AB23的计算平均分子量为3897g/mol。

HPLC-含水SEC(校准物PEG)：Mn＝3600g/mol。

部分B：

BB：其中p＝2的疏水分子的合成

在下表中由接枝到共聚氨基酸上之前的相应疏水分子提供基团。

表1d：根据本发明合成的疏水分子的列表。

部分BA：其中p＝2的疏水分子的合成

实施例BA1：分子BA1

分子B1：通过癸酸与L-脯氨酸之间的反应获得的产物。

在0℃下，将二环己基碳二亚胺(DCC)(16.29g，78.96mmol)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)(9.09g，78.96mmol)依次加入到癸酸(14.28g，82.91mmol)在THF(520mL)中的溶液中。在室温下搅拌60h后，将混合物冷却至0℃持续20min，通过烧结过滤器过滤。将L-脯氨酸(10g，86.86mmol)、二异丙基乙胺(DIPEA)(68.8mL)和水(60mL)加入滤液中。在室温下搅拌24h后，用水(300mL)稀释介质。水相用乙酸乙酯(2x 250mL)洗涤，用1N HCl水溶液酸化至pH约1，然后用二氯甲烷(3x 150mL)萃取。将合并的有机相经Na₂SO₄干燥，过滤，真空浓缩，并通过色谱法在硅胶(环己烷、乙酸乙酯)上纯化残余物。

收率：14.6g(69％)

¹H NMR(CDCl₃，ppm)：0.87(3H)；1.26(12H)；1.65(2H)；2.02(3H)；2.34(2H)；2.41(1H)；3.48(1H)；3.56(1H)；4.58(1H)。

LC/MS(ESI)：270.2；(计算的([M+H]⁺)：270.4)。

分子B2：通过分子B1与L-赖氨酸之间的反应获得的产物。

通过对分子B1(14.57g，54.07mmol)和L-赖氨酸(4.15g，28.39mmol)应用与用于制备分子B1的方法类似的方法，得到黄色固体。

收率：16.4g(93％)

¹H NMR(CDCl₃，ppm)：0.88(6H)；1.26(24H)；1.35-1.65(8H)；1.85-2.35(12H)；2.53(0.2H)；2.90(0.8H)；3.45-3.75(5H)；4.50-4.70(3H)；7.82(1H)。

LC/MS(ESI)：649.6；(计算的([M+H]⁺)：649.9)。

分子B3：通过分子B2与Boc-乙二胺之间的反应获得的产物

在室温下将DIPEA(8.80mL)和2-(1H-苯并***-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲四氟硼酸盐(TBTU，8.52g，26.54mmol)加入到分子B2(16.4g，25.27mmol)在THF(170mL)的溶液中。搅拌30min后，加入Boc-乙二胺(4.45g，27.8mmol)。在室温下搅拌2h后，减压蒸发溶剂，并将残余物用乙酸乙酯(400mL)稀释。将有机相用水(250mL)、饱和NaHCO3水溶液(250mL)、1NHCl水溶液(250mL)、饱和NaCl水溶液(250mL)洗涤，并经Na₂SO₄干燥。过滤并真空浓缩后，得到的残余物经色谱法在硅胶(乙酸乙酯、甲醇)上纯化，得到无色油状物。

收率：12.8g(64％)

¹H NMR(CDCl₃，ppm)：0.87(6H)；1.25-1.60(42H)；1.80-2.05(4H)；2.15-2.45(9H)；3.10-3.75(10H)；4.30(1H)；4.50(2H)；5.50(0.6H)；5.89(0.2H)；6.15(0.2H)；7.03(1H)；7.47(1H)。

LC/MS(ESI)：791.8；(计算的([M+H]⁺)：792.1)。

分子BA1

在5℃下，将4N HCl的二噁烷溶液(20.2mL)加入到B3(12.78g，16.15mmol)在二氯甲烷(110ml)中的溶液中。在5℃下搅拌20h后，将介质真空浓缩。将所得的残余物溶于甲醇并真空蒸发，重复该操作4次，得到为盐酸盐的分子BA1的白色固体。

收率：11.4g(97％)

¹H NMR(DMSO-d₆，ppm)：0.85(6H)；1.25-1.50(33H)；1.57(1H)；1.70-2.40(12H)；2.82(2H)；3.00(2H)；3.25-3.70(6H)；4.05-4.50(3H)；7.75-8.45(6H)。

LC/MS(ESI)：691.6；(计算的([M+H]⁺)：692.0)。

实施例BA2：分子BA2

分子B4：通过月桂酸与L-脯氨酸之间的反应获得的产物。

通过对月桂酸(31.83g，157.9mmol)和L-脯氨酸(20g，173.7mmol)应用与用于制备分子B1的方法类似的方法，得到黄色油状物。

收率：34.3g(73％)

¹H NMR(CDCl₃，ppm)：0.87(3H)；1.26(16H)；1.70(2H)；1.90-2.10(3H)；2.35(2H)；2.49(1H)；3.48(1H)；3.56(1H)；4.60(1H)。

LC/MS(ESI)：298.2；(计算的([M+H]⁺)：298.4)。

分子B5：通过分子B4与L-赖氨酸之间的反应获得的产物。

通过对分子B4(33.72g，113.36mmol)和L-赖氨酸(8.70g，59.51mmol)应用与用于制备分子B1的方法类似的方法，得到白色固体。

收率：26.2g(66％)

¹H NMR(CDCl₃，ppm)：0.88(6H)；1.26(32H)；1.35-1.65(8H)；1.85-2.35(15H)；2.87(1H)；3.40-3.75(5H)；4.50-4.75(3H)；7.87(1H)。

LC/MS(ESI)：705.6；(计算的([M+H]⁺)：706.0)。

分子B6：通过Boc-乙二胺与分子B5之间的反应获得的产物

通过对分子B5(25.74g，36.51mmol)和Boc-乙二胺(6.43g，40.16mmol)应用与用于制备分子B3的方法类似的方法，得到无色油状物。

收率：30.9g(定量)

¹H NMR(CDCl₃，ppm)：0.88(6H)；1.35-1.65(50H)；1.85-2.35(13H)；3.05-3.75(10H)；4.25-4.65(3H)；5.50(0.4H)；5.88(0.2H)；6.16(0.2H)；7.08(1H)；7.26(1H)；7.49(0.2H)

LC/MS(ESI)：847.8；(计算的([M+H]⁺)：848.2)。

分子BA2

在对分子B6(30.9g，36.47mmol)应用与用于制备分子BA1的方法类似的方法后，将在真空浓缩后获得的残余物溶解在甲醇中，并在真空下蒸发，将该操作重复4次，在减压干燥后得到作为盐酸盐的分子BA2的白色固体。

收率：27.65g(97％)

¹H NMR(DMSO-d₆，ppm)：0.85(6H)；1.10-2.40(54H)；2.75-3.15(4H)；3.25-3.60(6H)；4.05-4.50(3H)；7.50-8.50(6H)。

LC/MS(ESI)：747.6；(计算的([M+H]⁺)：748.1)。

实施例BA3：分子BA3

分子B7：通过肉豆蔻酸与L-脯氨酸之间的反应获得的产物。

通过对肉豆蔻酸(18.93g，82.91mmol)和L-脯氨酸(10g，86.86mmol)应用与用于制备分子B1的方法类似的方法，得到淡黄色油状物。

收率：20g(78％)

LC/MS(ESI)：326.2；(计算的([M+H]⁺)：326.6)。

分子B8：通过分子B7与L-赖氨酸之间的反应获得的产物。

通过对分子B7(20.02g，61.5mmol)和L-赖氨酸(4.72g，32.29mmol)应用与用于制备分子B1的方法类似的方法，得到白色固体。

收率：12.3g(53％)

¹H NMR(DMSO-d₆，ppm)：0.85(6H)；1.26(40H)；1.35-1.50(6H)；1.50-2.10(10H)；2.10-2.25(4H)；3.01(2H)；3.31-3.55(4H)；4.10-4.40(3H)；7.68(0.6H)；7.97(1H)；8.27(0.4H)；12.50(1H)。

LC/MS(ESI)：761.8；(计算的([M+H]⁺)：762.1)。

分子B9：通过Boc-乙二胺与分子B8之间的反应获得的产物

通过对分子B8(12g，15.77mmol)和Boc-乙二胺(3.03g，18.92mmol)应用与用于制备分子B3的方法类似的方法，在通过柱色谱在硅胶(乙酸乙酯、甲醇)上纯化后得到无色油状物。

收率：12.5g(88％)

¹H NMR(DMSO-d₆，ppm)：0.85(6H)；1.20-1.55(55H)；1.50-2.25(14H)；2.95-3.10(6H)；3.31-3.55(4H)；4.10-4.40(3H)；6.74(1H)；7.60-8.25(3H)。

LC/MS(ESI)：904.1；(计算的([M+H]⁺)：904.3)。

分子BA3

在对分子B9(12.5g，13.84mmol)应用与用于制备分子BA1的方法类似的方法后，将在真空浓缩后获得的残余物溶解在甲醇中，并在真空下蒸发，将该操作重复4次，在减压干燥后得到作为盐酸盐的分子BA3的白色固体。

收率：9.2g(79％)

¹H NMR(DMSO-d₆，ppm)：0.85(6H)；1.10-1.65(48H)；1.70-2.35(12H)；2.85(2H)；3.01(2H)；3.25-3.65(6H)；4.10-4.50(3H)；7.70-8.40(6H)。

LC/MS(ESI)：803.9；(计算的([M+H]⁺)：804.2)。

实施例BA4：分子BA4

分子B10：通过分子B8与Boc-1-氧基-4，7，10-三氧杂-13-十三烷之间的反应获得的产物。

通过对分子B8(29.80g，39.15mmol)和Boc-1-氨基-4，7，10-三氧杂-13-十三烷(15.05g，46.96mmol)应用与用于制备分子B3的方法类似的方法，得到无色稠油状物。

收率：25.3g(61％)

¹H NMR(DMSO-d₆，ppm)：0.85(6H)；1.25-2.35(75H)；2.85-3.20(6H)；3.25-3.65(16H)；4.10-4.45(3H)；6.38(0.1H)；6.72(0.9H)；7.50-8.25(3H)。

LC/MS(ESI)：1064.2；(计算的([M+H]⁺)：1064.5)。

分子BA4

在对分子B10(25.3g，23.8mmol)应用与用于制备分子BA1的方法类似的方法后，将在真空浓缩后获得的残余物溶解在甲醇中，并在真空下蒸发，将该操作重复4次，在减压干燥后得到作为盐酸盐的分子BA4的白色固体。

收率：20.02g(84％)

¹H NMR(DMSO-d₆，ppm)：0.85(6H)；1.15-2.35(66H)；2.80-3.20(6H)；3.30-3.65(16H)；4.10-4.45(3H)；7.55-8.60(6H)。

LC/MS(ESI)：964.9；(计算的([M+H]⁺)：964.6)。

实施例BA5：分子BA5

分子B11：通过棕榈酰氯与L-脯氨酸之间的反应获得的产物。

通过对棕榈酰氯(15.39g，55.99mmol)和L-脯氨酸(12.89g，111.98mmol)应用与用于制备分子A26的方法类似的方法，得到分子B11的白色固体。

收率：19.10g(96％)

LC/MS(ESI)：354.4；707.8；(计算的([M+H]⁺)：354.3；([2M+H]⁺)：707.6)。

分子B12：通过分子B11与L-赖氨酸之间的反应获得的产物。

通过对分子B11(19.10g，54.02mmol)和L-赖氨酸(4.15g，28.36mmol)应用与用于制备分子B1的方法类似的方法，在减压浓缩反应介质后得到油状残余物。将该残余物在水(150mL)中稀释，用乙酸乙酯(2x 75mL)洗涤，然后通过缓慢加入6N HCl将水相酸化至pH为1。产物用二氯甲烷萃取3次，将有机相经Na₂SO₄干燥，然后过滤并减压浓缩，得到11.2g黄色油状残余物。同时，将先前的乙酸乙酯有机相用2N HCl水溶液(2x 75mL)、饱和NaCl水溶液(75mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，得到10.2g黄色油状残余物。在这些残余物中的每一种在丙酮中重结晶后，得到白色固体。

收率：11.83g(54％)

¹H NMR(CDCl₃，ppm)：0.87(6H)；1.06-2.44(70H)；2.78-2.96(1H)；3.35-3.75(5H)；4.28-4.43(0.1H)；4.43-4.52(0.2H)；4.52-4.61(1.8H)；4.61-4.75(0.9H)；7.74-8.02(2H)。

LC/MS(ESI)：818.0；(计算的([M+H]⁺)：818.7)。

分子B13：通过分子B12与Boc-乙二胺之间的偶联获得的产物

通过对B12(18.00g，22.02mmol)的THF溶液和Boc-乙二胺(4.23g，26.43mmol)应用与用于制备分子A27的方法类似的方法，在于乙腈中重结晶两次后得到白色固体。

收率：17.5g(83％)

¹H NMR(DMSO-d6，ppm)：0.85(6H)；1.15-2.29(79H)；2.92-3.12(6H)；3.30-3.59(4H)；4.06-4.13(0.65H)；4.16-4.29(2H)；4.38-4.42(0.35H)；6.71-6.76(1H)；7.60-7.69(1.3H)；7.76-7.81(0.65H)；7.93-7.97(0.35H)；8.00-8.04(0.35H)；8.10-8.17(0.35H)。

LC/MS(ESI)：960.4；(计算的([M+H]⁺)：960.8)。

分子BA5

通过对分子B13(24.4g，25.43mmol)应用与用于制备分子BA1的方法类似的方法，将在真空浓缩后获得的残余物溶解在二氯甲烷(150mL)中，将有机相用2M氢氧化钠水溶液(90mL)洗涤2次。加入乙腈(120mL)，通过减压浓缩除去二氯甲烷。然后使介质静置72h，在过滤并用乙腈漂洗，然后减压干燥后，得到白色固体。该操作重复4次。

收率：14.28g(65％)

¹H NMR(DMSO-d6，ppm)：0.85(6H)；1.06-2.32(70H)；2.53-2.63(2H)；2.89-3.61(10H)；4.04-4.43(3H)；7.55-7.62(0.65H)；7.65-7.72(0.65H)；7.80(0.65H)；7.91(0.35H)；8.03(0.35H)；8.14-8.23(0.35H)。

LC/MS(ESI)：860.0；(计算的([M+H]⁺)：860.8)。

实施例BA6：分子BA6

分子B14：通过分子A26与2，3-二氨基丙酸之间的偶联获得的产物

通过对分子A26(80.00g，245.78mmol)和2，3-二氨基丙酸二盐酸盐(22.84g，129.04mmol)应用与用于制备分子B1的方法类似的方法，在于乙腈中重结晶后得到白色固体。

收率：69g(78％)

¹H NMR(DMSO-d6，ppm)：0.86(6H)；1.08-1.38(40H)；1.40-1.55(4H)；1.68-2.30(12H)；3.16-3.66(6H)；4.20-4.39(3H)；7.67-8.31(2H)；12.70(1H)。

LC/MS(ESI)：719.4；741.5；(计算的([M+H]⁺)：719.6；([M+Na]⁺)：741.6)。

分子B15：通过分子B14与Boc-乙二胺之间的偶联获得的产物

通过对B14(32.00g，44.50mmol)在二氯甲烷种的溶液和Boc-乙二胺(8.56g，53.40mmol)应用与用于制备分子A27的方法类似的方法，在通过柱色谱在硅胶(乙酸乙酯、甲醇)上纯化后得到无色油状物。

收率：24.5g(64％)

¹H NMR(DMSO-d6，ppm)：0.85(6H)；1.16-2.42(65H)；2.89-3.14(4H)；3.17-3.66(6H)；4.11-4.43(3H)；6.77(1H)；7.38-8.23(3H)。

LC/MS(ESI)：861.7；(计算的([M+H]⁺)：861.7)。

分子BA6

通过对分子B15(24.50g，28.45mmol)应用与用于制备分子BA5的方法类似的方法，在于乙腈中重结晶后得到白色固体。

收率：19.7g(91％)

¹H NMR(DMSO-d6，ppm)：0.85(6H)；1.10-2.40(58H)；2.51-2.62(2H)；2.90-3.16(2H)；3.16-3.67(6H)；4.04-4.47(3H)；7.33-8.27(3H)。

LC/MS(ESI)：761.5；(计算的([M+H]⁺)：761.6)。

实施例BA7：分子BA7

分子B16：通过N-(叔-丁氧基羰基)-1，6-二氨基己烷与分子B8之间的反应得到的产物

通过对分子B8(10g，13.14mmol)和N-(叔-丁氧基羰基)-1，6-二氨基己烷(3.41g，15.77mmol)应用与用于制备分子A27的方法类似的方法，在于乙腈中重结晶后得到白色固体。

收率：10.7g(85％)

¹H NMR(CDCl₃，ppm)：0.88(6H)；1.17-2.40(79H)；3.00-3.71(10H)；4.26-4.58(3H)；4.67(1H)；6.74(1H)；7.34-7.49(2H)。

LC/MS(ESI)：959.9；(计算的([M+H]⁺)：959.8)。

分子BA7

在对分子B16(10.5g，10.94mmol)应用与用于制备分子BA1的方法类似的方法后，将2N NaOH水溶液滴加到冷却至0℃的反应介质中。水相用二氯甲烷萃取，然后有机相用5％NaCl水溶液洗涤3次。在经Na2SO4干燥后，对有机相进行过滤，真空浓缩，并将残基物在乙腈中重结晶。

收率：5.4g(58％)

¹H NMR(CDCl₃，ppm)：0.88(6H)；1.19-2.40(72H)；2.67(2H)；3.03-3.70(8H)；4.26-4.57(3H)；6.71(1H)；7.39-7.49(2H)。

LC/MS(ESI)：859.8；(计算的([M+H]⁺)：859.7)。

BB：共聚氨基酸的合成

式VII或VIIb的定义的共聚氨基酸

表1f：根据本发明合成的共聚氨基酸的列表

部分BB：共聚氨基酸的合成

实施例BB14：共聚氨基酸BB14-在其一个末端处被分子BA2修饰并且数均分子量(Mn)为4020g/mol的聚L-谷氨酸钠

将分子BA2的盐酸盐(2.12g，2.70mmol)、氯仿(40mL)、分子筛(1.5g)以及Amberlite IRN 150离子交换树脂(1.5g)依次加入合适的容器中。在辊上搅拌1h后，过滤介质并用氯仿漂洗树脂。蒸发混合物，然后与甲苯共蒸发。将残余物溶解在无水DMF(20mL)中，直接用于聚合反应。

将L-谷氨酸γ-苄酯N-羧酸酐(18g，68.42mmol)在预先于烘箱中干燥的圆底烧瓶中真空放置30min，然后引入无水DMF(100mL)。将混合物在氩气下搅拌直至溶解完成，冷却至4℃，然后快速引入如上所述制备的分子BA2的溶液。将混合物在4℃与室温之间搅拌2天，然后在65℃下加热2h。然后将反应混合物冷却至室温，然后在搅拌下逐滴倒入二异丙基醚(1.2L)中。通过过滤回收白色沉淀，用二异丙基醚(100mL)洗涤两次，然后在30℃下真空干燥，得到白色固体。将固体在TFA(105mL)中稀释，然后在0℃下滴加33％氢溴酸(HBr)在乙酸中的溶液(38mL，220mmol)。将溶液在室温下搅拌2h，然后在搅拌的条件下逐滴倒入至二异丙基醚/水的1∶1(v/v)混合物(600mL)中。搅拌2h后，使非均相混合物静置过夜。通过过滤回收白色沉淀，依次用二异丙基醚和水的1∶1(v/v)混合物(200mL)洗涤，然后用水(100mL)洗涤。通过加入10N氢氧化钠水溶液，然后加入1N氢氧化钠水溶液将pH调节至7，将所得固体溶解于水(450mL)中。将混合物通过0.45μm过滤器过滤，然后通过针对0.9％NaCl溶液，随后针对水进行超滤直至渗透物的导电率小于50μS/cm来进行纯化。然后将共聚氨基酸溶液浓缩至约30g/L的理论值并将pH调节至7。将水溶液通过0.2μm过滤器过滤并在4℃下储存。

干提取物：22.3mg/g

DP(通过¹H NMR估计的)＝29，从而i＝0.034。

共聚氨基酸BB14的计算平均分子量为5089g/mol。

HPLC-含水SEC(校准物PEG)：Mn＝4020g/mol。

实施例BB15：共聚氨基酸BB15-在其一个末端处被分子BA3修饰并且数均分子量(Mn)为3610g/mol的聚L-谷氨酸钠

通过对分子BA3的盐酸盐(3.62g，4.32mmol)和25.0g(94.97mmol)L-谷氨酸γ-苄酯N-羧酸酐应用与用于制备共聚氨基酸BB14的方法类似的方法，得到在其一个末端处被分子BA3修饰的聚-L-谷氨酸钠。

干提取物：26.5mg/g

DP(通过¹H NMR估计的)＝24，从而i＝0.042。

共聚氨基酸BB15的计算平均分子量为4390g/mol。

HPLC-含水SEC(校准物PEG)：Mn＝3610g/mol。

实施例BB16：共聚氨基酸BB16-在其一个末端处被分子BA4修饰并且数均分子量(Mn)为3300g/mol的聚L-谷氨酸钠

通过对分子BA4的盐酸盐(5.70g，5.70mmol)和29.99g(113.9mmol)L-谷氨酸γ-苄酯N-羧酸酐应用与用于制备共聚氨基酸BB14的方法类似的方法，得到在其一个末端处被分子BA4修饰的聚-L-谷氨酸钠。

干提取物32.3mg/g

DP(通过¹H NMR估计的)＝23，从而i＝0.043。

共聚氨基酸BB16的计算平均分子量为4399g/mol。

HPLC-含水SEC(校准物PEG)：Mn＝3300g/mol。

实施例BB17：共聚氨基酸BB17-在其一个末端处被分子BA3修饰并且数均分子量(Mn)为10700g/mol的聚L-谷氨酸钠

通过对分子BA3的盐酸盐(2.51g，3mmol)和52.7g(200mmol)L-谷氨酸γ-苄酯N-羧酸酐应用与用于制备共聚氨基酸BB14的方法类似的方法，得到在其一个末端处被分子BA3修饰的聚-L-谷氨酸钠。

干提取物：24.5mg/g

DP(通过¹H NMR估计的)＝65，从而i＝0.015。

共聚氨基酸BB17的计算平均分子量为10585g/mol。

HPLC-含水SEC(校准物PEG)：Mn＝10700g/mol。

实施例BB18：共聚氨基酸BB18-在其一个末端处被分子BA3修饰并且数均分子量为6600g/mol的聚L-谷氨酸钠

通过对分子BA3的盐酸盐(2.51g，3mmol)和31.6g(120mmol)L-谷氨酸γ-苄酯N-羧酸酐应用与用于制备共聚氨基酸BB14的方法类似的方法，得到在其一个末端处被分子BA3修饰的聚-L-谷氨酸钠。

干提取物：27.3mg/g

DP(通过¹H NMR估计的)＝40，从而i＝0.025。

共聚氨基酸BB18的计算平均分子量为6889g/mol。

HPLC-含水SEC(校准物PEG)：Mn＝6600g/mol。

实施例BB19：共聚氨基酸BB19-在其一个末端处被分子BA3修饰并且数均分子量(Mn)为3400g/mol的聚L-谷氨酸钠

通过对分子BA3的盐酸盐(36.26g，43.2mmol)和L-谷氨酸γ-苄酯N-羧酸酐(250.0g，949.7mmol)应用与用于制备共聚氨基酸BB14的方法类似的方法，得到在其一个末端处被分子BA3修饰的聚-L-谷氨酸钠。

干提取物：22.4mg/g

DP(通过¹H NMR估计的)＝25，从而i＝0.04。

共聚氨基酸BB19的计算平均分子量为4540g/mol。

HPLC-含水SEC(校准物PEG)：Mn＝3400g/mol。

实施例BB20：

共聚氨基酸BB20-在其一个末端处被分子BA3修饰并且数均分子量(Mn)为2500g/mol的聚L-谷氨酸钠

通过对呈游离胺形式的分子BA3(1.017g，12.7mmol)和L-谷氨酸γ-苄酯N-羧酸酐(5.0g，19.0mmol)应用与用于制备共聚氨基酸BB14的方法类似的方法，得到在其一个末端处被分子BA3修饰的聚-L-谷氨酸钠。

干提取物：11.2mg/g

DP(通过¹H NMR估计的)＝17，从而i＝0.059。

共聚氨基酸BB20的计算平均分子量为3332g/mol。

HPLC-含水SEC(校准物PEG)：Mn＝2500g/mol。

实施例BB21：

共聚氨基酸BB21-在其一个末端处被分子BA3修饰并且数均分子量(Mn)为1100g/mol的聚L-谷氨酸钠

通过对呈游离胺形式的分子BA3(3.814g，4.75mmol)和L-谷氨酸γ-苄酯N-羧酸酐(10.0g，38.0mmol)应用与用于制备共聚氨基酸BB14的方法类似的方法，得到在其一个末端处被分子BA3修饰的聚-L-谷氨酸钠。

干提取物：16.1mg/g

DP(通过¹H NMR估计的)＝9，从而i＝0.11。

共聚氨基酸BB21的计算平均分子量为2123g/mol。

HPLC-含水SEC(校准物PEG)：Mn＝1100g/mol。

实施例BB22：

共聚氨基酸BB22-在其一个末端处被分子BA3修饰并且数均分子量(Mn)为2900g/mol的聚D-谷氨酸钠

通过对呈游离胺形式的分子BA3(2.77g，3.45mmol)和D-谷氨酸γ-苄酯N-羧酸酐(20.0g，76.0mmol)应用与用于制备共聚氨基酸BB14的方法类似的方法，得到在其一个末端处被分子BA3修饰的聚-D-谷氨酸钠。

干提取物：15.2mg/g

DP(通过¹H NMR估计的)＝21，从而i＝0.048。

共聚氨基酸BB22的计算平均分子量为3936g/mol。

HPLC-含水SEC(校准物PEG)：Mn＝2900g/mol。

实施例BB23：

共聚氨基酸BB23-在其一个末端处被分子BA3修饰并且数均分子量(Mn)为2800g/mol的单元D-或L-谷氨酸钠的随机共聚物

将L-谷氨酸γ-苄酯N-羧酸酐(20.0g，76.00mmol)和D-谷氨酸γ-苄酯N-羧酸酐(20.0g，76.00mmol)在预先于烘箱中干燥的圆底烧瓶中真空放置30min，然后引入无水DMF(75mL)。将混合物在氩气下搅拌直至溶解完成，冷却至4℃，然后快速引入呈游离胺形式的分子BA3(5.55g，6.91mmol)在氯仿(14.5mL)中的溶液。将混合物在4℃与室温之间搅拌18h，然后在65℃下加热2h。然后将反应混合物冷却至室温，然后在搅拌的条件下逐滴倒入到二异丙基醚(1.2L)中。通过过滤回收白色沉淀，用二异丙基醚(80mL)洗涤三次，然后在30℃下真空干燥直至得到白色固体。将固体在TFA(152mL)中稀释，然后在0℃下滴加33％氢溴酸(HBr)在乙酸中的溶液(106mL，220mmol)。将溶液在室温下搅拌3h，然后在搅拌的条件下逐滴倒入至二异丙基醚/水的1∶1(v/v)混合物(1.84L)中。在滴液漏斗中分离水相，并通过加入10N NaOH水溶液将pH调节至7.2。在加入水(250mL)后，将混合物通过0.45μm过滤器过滤，然后通过针对0.9％NaCl溶液，随后针对水进行超滤直至渗透物的导电率小于50μS/cm来进行纯化。然后将共聚氨基酸溶液浓缩至约25g/L，通过0.2μm过滤器过滤并在4℃下储存。

干提取物：28.2mg/g

DP(通过¹H NMR估计的)＝21，从而i＝0.048。

共聚氨基酸BB23的计算平均分子量为3936g/mol。

HPLC-含水SEC(校准物PEG)：Mn＝2800g/mol。

实施例BB24：共聚氨基酸BB24-在其一个末端处被分子BA3修饰并且数均分子量(Mn)为2800g/mol的聚D-谷氨酸钠和聚L-谷氨酸钠的嵌段共聚物

将D-谷氨酸γ-苄酯N-羧酸酐(13.5g，51.3mmol)在预先于烘箱中干燥的圆底烧瓶中真空放置30min，然后引入无水DMF(52mL)。将混合物在氩气下搅拌直至溶解完成，冷却至0℃，然后快速引入呈游离胺形式的分子BA3(3.43g，4.27mmol)在氯仿(8.6mL)中的溶液。将混合物在0℃下搅拌24h，然后加入-L-谷氨酸γ-叔丁酯N-羧酸酐(13.5g，58.9mmol)在DMF(15mL)中的溶液。将混合物在0℃与室温之间搅拌21h，然后在65℃下加热2h。然后将反应混合物冷却至室温，然后在搅拌的条件下逐滴倒入至二异丙基醚(0.8L)中。通过过滤回收白色沉淀，用二异丙基醚(52mL)洗涤三次，然后在30℃下真空干燥直至得到白色固体。将固体在TFA(96mL)中稀释，然后在0℃下滴加33％氢溴酸(HBr)在乙酸中的溶液(68mL，388mmol)。将溶液在室温下搅拌2h，然后在搅拌的条件下逐滴倒入至二异丙基醚/水的1∶1(v/v)混合物(1.2mL)中。搅拌2h后，使非均相混合物静置过夜。通过过滤回收白色沉淀，依次用二异丙基醚和水的1∶1(v/v)混合物(100mL)洗涤，然后用水(100mL)洗涤。通过加入10N氢氧化钠水溶液，然后加入1N氢氧化钠水溶液将pH调节至7，将所得固体溶解于水(900ml)中。将混合物通过0.45μm过滤器过滤，然后通过针对0.9％NaCl溶液，随后针对水进行超滤直至渗透物的导电率小于50μS/cm来进行纯化。然后将共聚氨基酸溶液浓缩至约20g/L的理论值并将pH调节至7。将水溶液通过0.2μm过滤器过滤并在4℃下储存。

干提取物：23.9mg/g

DP(通过¹H NMR估计的)＝25，从而i＝0.04。

共聚氨基酸BB24的计算平均分子量为4541g/mol。

HPLC-含水SEC(校准物PEG)：Mn＝2800g/mol。

实施例BB25：

共聚氨基酸BB25-在其一个末端处被分子BA5修饰并且数均分子量(Mn)为2800g/mol的聚L-谷氨酸钠

通过对呈游离胺形式的分子BA5(1.70g，1.98mmol)和L-谷氨酸γ-苄酯N-羧酸酐(11.46g，43.5mmol)应用与用于制备共聚氨基酸BB14的方法类似的方法，得到在其一个末端处被分子BA5修饰的聚-L-谷氨酸钠。

干提取物：19.8mg/g

DP(通过¹H NMR估计的)＝23，从而i＝0.043。

共聚氨基酸BB25的计算平均分子量为4295g/mol。

HPLC-含水SEC(校准物PEG)：Mn＝2800g/mol。

实施例BB26：

共聚氨基酸BB26-在其-个末端处被分子BA6修饰并且数均分子量(Mn)为2900g/mol的聚L-谷氨酸钠

通过对呈游离胺形式的分子BA6(3.05g，4.01mmol)和L-谷氨酸γ-苄酯N-羧酸酐(22.78g，86.5mmol)应用与用于制备共聚氨基酸BB14的方法类似的方法，得到在其一个末端处被分子BA6修饰的聚-L-谷氨酸钠。

干提取物：16.9mg/g

DP(通过¹H NMR估计的)＝21，从而i＝0.048。

共聚氨基酸BB26的计算平均分子量为3894g/mol。

HPLC-含水SEC(校准物PEG)：Mn＝2900g/mol。

实施例BB27：

共聚氨基酸BB27-在其一个末端处被分子BA3修饰并且数均分子量(Mn)为2300g/mol的聚L-谷氨酸钠

共聚氨基酸BB27-1：数均分子量(Mn)为3600g/mol的在其一个末端被分子BA3修饰并且在另一个末端处被氧脯氨酸封端的聚-L-谷氨酸。

将L-谷氨酸γ-苄酯N-羧酸酐(122.58g，466mmol)在预先于烘箱中干燥的圆底烧瓶中真空放置30min，然后引入无水DMF(220mL)。将混合物在氩气下搅拌直至溶解完成，冷却至-10℃，然后快速引入呈游离胺形式的分子BA3(17.08g，21.3mmol)在氯仿(40mL)中的溶液。将混合物在0℃与室温之间的温度下搅拌2天，然后在65℃下加热4h。然后将反应介质冷却至25℃，然后加入氧脯氨酸(13.66g，105.8mmol)、HOBt(2.35g，15.3mmol)和EDC(20.28g，105.8mmol)。在25℃下搅拌24h后，将溶液真空浓缩以除去氯仿和50％的DMF。然后将反应混合物在55℃下加热并在1h内引入1150mL甲醇。然后将反应混合物冷却至0℃。18h后，通过过滤回收白色沉淀，用270mL二异丙基醚洗涤三次，然后在30℃下真空干燥，得到白色固体。将固体在TFA(390mL)中稀释，然后在0℃下滴加33％氢溴酸(HBr)在乙酸中的溶液(271mL，1547mmol)。将溶液在室温下搅拌2h，然后在搅拌的条件下逐滴倒入至二异丙基醚/水的1∶1(v/v)混合物(970mL)中。搅拌2h后，使非均相混合物静置过夜。通过过滤回收白色沉淀，依次用二异丙基醚(380mL)洗涤，然后用水(380mL)洗涤。通过加入10N氢氧化钠水溶液，然后加入1N氢氧化钠水溶液将pH调节至7，将所得固体溶于水(3.6L)中。将混合物通过0.45μm过滤器过滤，然后通过针对0.9％NaCl溶液、0.1N NaOH溶液、0.9％NaCl溶液、磷酸缓冲液(150mM)、0.9％NaCl溶液，随后针对水进行超滤直至渗透物的导电率小于50μS/cm来进行纯化。然后将共聚氨基酸溶液浓缩至约30g/L的理论值，通过0.2μm过滤器过滤，然后在搅拌下加入37％HCl溶液酸化至pH 2。然后通过过滤回收白色沉淀，用水洗涤两次，然后在30℃下真空干燥，得到白色固体。

共聚氨基酸BB27

通过对呈游离胺形式的分子BA3(1.206g，1.50mmol)和共聚氨基酸BB27-1(5.5g，33.4mmol)应用与用于制备共聚氨基酸BB2的方法类似的方法，得到在其一个末端处被分子BA3修饰的聚-L-谷氨酸钠。

干提取物：19.0mg/g

DP(基于¹H NMR估计的)：22

基于¹H NMR：i＝0.089

共聚氨基酸BB27的计算平均分子量为4826g/mol。

HPLC-含水SEC(校准物PEG)：Mn＝2300g/mol。

实施例BB42：

共聚氨基酸BB42-在其一个末端处被分子B8修饰并且数均分子量(Mn)为3200g/mol的聚L-谷氨酸钠

将DCC(0.659g，3.19mmol)和NHS(0.365g，3.17mmol)加入到分子B8(2.366g，3.11mmol)在DMF(19.5mL)中的溶液中。在室温下搅拌16h后，将溶液过滤，直接用于下面的反应。

将L-谷氨酸γ-苄酯N-羧酸酐(18.0g，68.4mmol)在预先于烘箱中干燥的圆底烧瓶中真空放置30min，然后引入无水DMF(40mL)。将混合物在氩气下搅拌直至溶解完成，冷却至0℃，然后快速引入己胺(0.411mL，3.11mmol)。在0℃下搅拌30h后，加入上文中制备的分子B8的溶液。将混合物在0℃与室温之间搅拌72h，然后在搅拌的条件下逐滴倒入至二异丙基醚(0.9L)中。通过过滤回收白色沉淀，用二异丙基醚(5次100mL)洗涤，然后在30℃下真空干燥，得到白色固体。将固体在TFA(69mL)中稀释，然后将溶液冷却至4℃。然后滴加33％HBr的乙酸溶液(48mL，0.274mol)。将混合物在室温下搅拌2h，然后在搅拌的条件下逐滴倒入到二异丙基醚和水的1∶1(v/v)混合物(0.8L)上。搅拌2h后，使非均相混合物静置过夜。通过过滤回收白色沉淀，用二异丙基醚和水的1∶1(v/v)混合物(70mL)洗涤，然后用水(70mL)洗涤。通过加入10N氢氧化钠水溶液，然后加入1N氢氧化钠水溶液将pH调节至7，将所得固体溶解于水(0.42L)中。溶解后，通过加入水直至获得0.63L的终体积，将理论浓度调节至20g/L的理论值。将溶液通过0.45μm过滤器过滤，然后通过针对0.9％NaCl溶液，随后针对水进行超滤直至渗透物的导电率小于50μS/cm来进行纯化。将所得溶液通过0.2μm过滤器过滤并在2-8℃下储存。

干提取物：22.2mg/g

DP(基于¹H NMR估计的)：22

基于¹H NMR：i＝0.045

共聚氨基酸BB42的计算平均分子量为4160g/mol。

HPLC-含水SEC(校准物PEG)：Mn＝3200g/mol。

实施例BB43：

共聚氨基酸BB43-在其一个末端处被分子BA3修饰并且另一个末端被分子B8修饰、数均分子量(Mn)为2000g/mol的聚L-谷氨酸钠

将DCC(0.257g，1.24mmol)和NHS(0.143g，1.24mmol)加入到分子B8(0.946g，1.24mmol)在DMF(8mL)中的溶液中。在室温下搅拌16h后，将溶液过滤，直接用于下面的反应。

将L-谷氨酸γ-苄酯N-羧酸酐(6.0g，22.8mmol)在预先于烘箱中干燥的圆底烧瓶中真空放置30min，然后引入无水DMF(14mL)。将混合物在氩气下搅拌直至溶解完成，冷却至0℃，然后快速引入呈游离胺形式的分子BA3(0.832g，1.04mmol)在氯仿(2.0mL)中的溶液。在0℃下搅拌18h后，加入预先制备的分子B8的溶液。将混合物在0℃与室温之间搅拌22h，然后在搅拌的条件下逐滴倒入至二异丙基醚(0.34L)中。通过过滤回收白色沉淀，用二异丙基醚(7次15mL)洗涤，然后在30℃下真空干燥，得到白色固体。将固体在TFA(23mL)中稀释，然后将溶液冷却至4℃。然后滴加33％HBr的乙酸溶液(15mL，85.7mol)。将混合物在室温下搅拌2h，然后在搅拌的条件下逐滴倒入到二异丙基醚和水的1∶1(v/v)混合物(0.28L)上。搅拌2h后，使非均相混合物静置过夜。通过过滤回收白色沉淀，用二异丙基醚和水的1∶1(v/v)混合物(24mL)洗涤2次，然后用水(24mL)洗涤2次。通过加入10N氢氧化钠水溶液，然后加入1N氢氧化钠水溶液将pH调节至12，将所得固体溶解于水(0.16L)中。30分钟后，通过缓慢加入1N HCl水溶液将pH调节至7。将溶液通过0.45μm过滤器过滤，然后通过针对0.9％NaCl溶液，随后针对水进行超滤直至渗透物的导电率小于50μS/cm来进行纯化。将所得溶液通过0.2μm过滤器过滤并在2-8℃下储存。

干提取物：18.9mg/g

DP(基于¹H NMR估计的)：22

基于¹H NMR：i₁＝0.09

共聚氨基酸BB43的计算平均分子量为4871g/mol。

HPLC-含水SEC(校准物PEG)：Mn＝2000g/mol。

实施例BB44：

共聚氨基酸BB44-在其一个末端处被分子BA7修饰并且数均分子量(Mn)为3300g/mol的聚L-谷氨酸钠

通过对呈游离胺形式的分子BA7(4.45g，5.18mmol)和30.0g(113.96mmol)L-谷氨酸γ-苄酯N-羧酸酐应用与用于制备共聚氨基酸BB14的方法类似的方法，得到在其一个末端处被分子BA7修饰的聚-L-谷氨酸钠。

干提取物：29.0mg/g

DP(通过¹H NMR估计的)＝25，从而i＝0.04。

共聚氨基酸BB44的计算平均分子量为4597g/mol。

HPLC-含水SEC(校准物PEG)：Mn＝3300g/mol。

部分CE：反例共聚氨基酸

部分C：

使用的胰高血糖素是源自肽合成过程的人胰高血糖素。其源自Bachem公司(参考407473)。

实施例C1：2mg/mL的胰高血糖素溶液

将粉状胰高血糖素(80mg)引入45-mL烧瓶中。加入0.003N盐酸水溶液(40mL)。通过反复倒转管混合胰高血糖素粉末直至胰高血糖素完全溶解。然后将2mg/mL的胰高血糖素溶液通过膜(0.22μm)过滤。

实施例C2：4mg/mL的胰高血糖素溶液

将粉状胰高血糖素(160mg)引入45-mL烧瓶中。加入0.006N盐酸水溶液(40mL)。通过反复倒置管混合胰高血糖素粉末直至胰高血糖素完全溶解。然后将4mg/mL的胰高血糖素溶液通过膜(0.22μm)过滤。

实施例C3：6mg/mL的胰高血糖素溶液

将粉状胰高血糖素(240mg)引入45-mL烧瓶中。加入0.01N盐酸水溶液(40mL)。通过反复倒置管混合胰高血糖素粉末直至胰高血糖素完全溶解。然后将6mg/mL的胰高血糖素溶液通过膜(0.22μm)过滤。

实施例C4：10mg/mL的胰高血糖素溶液

将粉状胰高血糖素(400mg)引入45-mL烧瓶中。加入0.01N盐酸水溶液(40mL)。通过反复倒置管混合胰高血糖素粉末直至胰高血糖素完全溶解。然后将10mg/mL的胰高血糖素溶液通过膜(0.22μm)过滤。

首先，进行测试以验证聚氨基酸是否可能使胰高血糖素增溶，并测定使胰高血糖素增溶所需的共聚氨基酸的最小浓度。

实施例CA1：共聚氨基酸AB16的浓度为可变的并且胰高血糖素浓度为1mg/mL的组合物。

在精密天平上称取2X mg共聚氨基酸AB16，并加入2mL包含间甲酚(46mM)、甘油(548mM)的10mM磷酸盐缓冲溶液。搅拌组合物直至共聚氨基酸溶解，然后将溶液通过膜(0.22μm)进行过滤。

将2mL如实施例C1中制备的胰高血糖素溶液与2mL如上制备的共聚氨基酸溶液混合，得到包含X mg/mL的共聚氨基酸和1mg/mL的胰高血糖素的组合物。

进行目视检查以确定是否获得澄清溶液。最低浓度的结果示于表5中。

实施例CA3：共聚氨基酸AB14的浓度为可变的并且胰高血糖素浓度为1mg/mL的组合物。

以与实施例CA1中所述相同的方式，制备包含X mg/mL的共聚氨基酸BB14和1mg/mL的胰高血糖素的组合物。

实施例CA5：共聚氨基酸BB15的浓度为可变的并且胰高血糖素浓度为1mg/mL的组合物。

以与实施例CA1中所述相同的方式，制备包含X mg/mL的共聚氨基酸BB15和1mg/mL的胰高血糖素的组合物。

表5：用于使人胰高血糖素(1mg/mL)增溶的共聚氨基酸的最低浓度(以mg/mL计)

实施例CA7：共聚氨基酸BB15为4.4mg/mL和胰高血糖素为2mg/mL的溶液。

在精密天平上称取17.2mg共聚氨基酸BB15，并加入2mL包含间甲酚(46mM)、甘油(548mM)的10mM磷酸盐缓冲溶液。搅拌组合物直至共聚氨基酸溶解，然后将溶液通过膜(0.22μm)进行过滤。

将2mL如实施例C2中制备的胰高血糖素溶液与2mL如上制备的共聚氨基酸BB15的溶液混合。

得到澄清溶液。

实施例CA8：共聚氨基酸BB15为4.4mg/mL和胰高血糖素为3mg/mL的溶液

将2mL如实施例C3中制备的胰高血糖素溶液与2mL如实施例CA7中制备的共聚氨基酸BB15溶液混合。

得到澄清溶液。

实施例CA9：共聚氨基酸BB15为4.4mg/mL和胰高血糖素为5mg/mL的溶液

将2mL如实施例C4中制备的胰高血糖素溶液与2mL如实施例CA7中制备的共聚氨基酸BB15溶液混合。

得到澄清溶液。

进行测试以验证共聚氨基酸是否使得可能使胰高血糖素稳定，然后确定为使胰高血糖素稳定所必需的共聚氨基酸的最小浓度。

实施例CB1：共聚氨基酸BB15的浓度为可变的并且胰高血糖素浓度为1mg/mL的溶液

在精密天平上称取2X mg共聚氨基酸BB15，并加入2mL包含间甲酚(46mM)、甘油(548mM)的10mM磷酸盐缓冲溶液。搅拌组合物直至共聚氨基酸溶解，然后将溶液通过膜(0.22μm)进行过滤。

然后制备这些溶液的三份各自1mL的样品，并于37℃下静置。

目视检查在第7天、第14天和第21天进行，见表6。

在容量为3mL的烧瓶中对1mL体积的组合物进行下表中描述的实施例CB1a至CB1g的组合物的物理稳定性的研究(Adelphi-参考：VCDIN2RDLS1)。

表6：用于测定疏水基团/胰高血糖素的最小摩尔比的一系列浓度

用其它共聚氨基酸制备浓度系列，得到以下稳定溶液。

实施例CB5：共聚氨基酸AB15为14mg/mL和胰高血糖素为1mg/mL的溶液

在精密天平上称取56mg共聚氨基酸AB15，并加入2mL包含间甲酚(46mM)、甘油(548mM)的10mM磷酸盐缓冲溶液。搅拌组合物直至共聚氨基酸溶解，然后将溶液通过膜(0.22μm)进行过滤。

将2mL如实施例C1中制备的胰高血糖素溶液与2mL如上制备的共聚氨基酸溶液混合。然后制备该溶液的三份各自1mL的样品，并于37℃下静置。

实施例CB6：共聚氨基酸AB16为16.2mg/mL和胰高血糖素为1mg/mL的溶液

在精密天平上称取64.8mg共聚氨基酸AB16，并加入2mL包含间甲酚(46mM)、甘油(548mM)的10mM磷酸盐缓冲溶液。搅拌组合物直至共聚氨基酸溶解，然后将溶液通过膜(0.22μm)进行过。

将2mL如实施例C1中制备的胰高血糖素溶液与2mL如上制备的共聚氨基酸的溶液混合。然后制备该溶液的三份各自1mL的样品，并于37℃下静置。

实施例CB7：共聚氨基酸AB17为6.4mg/mL和胰高血糖素为1mg/mL的溶液

在精密天平上称取25.6mg共聚氨基酸AB17，并加入2mL包含间甲酚(46mM)、甘油(548mM)的10mM磷酸盐缓冲溶液。搅拌组合物直至共聚氨基酸溶解，然后将溶液通过膜(0.22μm)进行过滤。

实施例CB15：共聚氨基酸BB14为9.1mg/mL和胰高血糖素为1mg/mL的溶液

在精密天平上称取36.4mg共聚氨基酸BB14，并加入2mL包含间甲酚(46mM)、甘油(548mM)的10mM磷酸盐缓冲溶液。搅拌组合物直至共聚氨基酸溶解，然后将溶液通过膜(0.22μm)进行过滤。

实施例CB16：共聚氨基酸BB16为3.8mg/mL和胰高血糖素为1mg/mL的溶液

在精密天平上称取15.2mg共聚氨基酸BB16，并加入2mL包含间甲酚(46mM)、甘油(548mM)的10mM磷酸盐缓冲溶液。搅拌组合物直至共聚氨基酸溶解，然后将溶液通过膜(0.22μm)进行过滤。

实施例CB17：共聚氨基酸BB16为6.3mg/mL和胰高血糖素为1mg/mL的溶液

在精密天平上称取25.2mg共聚氨基酸BB16，并加入2mL包含间甲酚(46mM)、甘油(548mM)的10mM磷酸盐缓冲溶液。搅拌组合物直至共聚氨基酸溶解，然后将溶液通过膜(0.22μm)进行过滤。

实施例CB18：共聚氨基酸BB15为4.4mg/mL和胰高血糖素为2mg/mL的溶液

在精密天平上称取17.6mg共聚氨基酸BB15，并加入2mL包含间甲酚(46mM)、甘油(548mM)的10mM磷酸盐缓冲溶液。搅拌组合物直至共聚氨基酸溶解，然后将溶液通过膜(0.22μm)进行过滤。

将2mL如实施例C2中制备的胰高血糖素溶液与2mL如上制备的共聚氨基酸溶液混合。然后制备该溶液的三份各自1mL的样品，并于37℃下静置。

实施例CB19：共聚氨基酸BB15为8.8mg/mL和胰高血糖素为2mg/mL的溶液

在精密天平上称取35.4mg共聚氨基酸BB15，并加入2mL包含间甲酚(46mM)、甘油(548mM)的10mM磷酸盐缓冲溶液。搅拌组合物直至共聚氨基酸溶解，然后将溶液通过膜(0.22μm)进行过滤。

实施例CB20：共聚氨基酸BB15为6.3mg/mL、胰高血糖素为0.1mg/mL以及L-甲硫氨酸为0.1mg/mL的溶液

通过用1.6mL的水、1.3mL的126.7mM的间甲酚、358μL的4.9M的甘油、360μL的100mM的磷酸盐缓冲剂和75μL的9.8mg/mL的L-甲硫氨酸溶解46.5mg的共聚氨基酸BB15的冻干物来制备12.6mg/mL的共聚氨基酸BB15溶液。然后将溶液通过膜(0.22μm)进行过滤。

实施例CB21：共聚氨基酸BB15为6.3mg/mL、胰高血糖素为1mg/mL以及L-甲硫氨酸为1mg/mL的溶液

通过用937μL的水、1.3mL的126.7mM的间甲酚、358μL的4.9M的甘油、360μL的100mM的磷酸盐缓冲溶液和733μL的9.8mg/mL的L-甲硫氨酸溶解46.5mg的共聚氨基酸BB15的冻干物来制备12.6mg/mL的共聚氨基酸BB15溶液。然后将溶液通过膜(0.22μm)进行过滤。

实施例CB22：共聚氨基酸BB15为6.3mg/mL、胰高血糖素为1mg/mL以及艾塞那肽为0.1mg/mL的溶液

将14mg艾塞那肽(Bachem；产品号-4044219)引入Eppendorf管中，然后加入1.4mL的水。通过反复倒转混合粉末，并将10mg/mL的艾塞那肽溶液通过膜(0.22μm)进行过滤。

通过用937μL的水、817μL的126.7mM的间甲酚、224μL的4.9M的甘油、225μL的100mM的缓冲溶液和45μL的10mg/mL的艾塞那肽溶解28.3mg的共聚氨基酸BB15的冻干物来制备12.6mg/mL的共聚氨基酸BB15溶液。将溶液通过膜(0.22μm)过滤。

通过将2mL如实施例C1中制备的胰高血糖素溶液与2mL如上制备的12.6mg/mL的BB15溶液混合来制备终溶液。将混合物手动匀化并且其含有1mg/mL的胰高血糖素、0.1mg/mL的艾塞那肽、6.3mg/mL的BB15、5mM的磷酸盐缓冲剂、23mM的间甲酚和249mM的甘油。

然后制备该溶液中的3份各自1mL的样品，并于37℃下静置。

实施例CB23：共聚氨基酸BB15为6.3mg/mL、胰高血糖素为1mg/mL以及艾塞那肽为0.25mg/mL的溶液

以与实施例CB22中所述相同的方式获得10mg/mL的艾塞那肽溶液。

通过用872μL水、817μL的126.7mM的间甲酚、224μL的4.9M的甘油、225μL的100mM的磷酸缓冲溶液和113μL的10mg/mL的艾塞那肽溶解28.4mg共聚氨基酸BB15的冻干物来制备12.6mg/mL的共聚氨基酸BB15溶液。然后将溶液通过膜(0.22μm)进行过滤。

通过将2mL如实施例C1中制备的胰高血糖素溶液与2mL如上制备的12.6mg/mL的共聚氨基酸BB15溶液混合来制备终溶液。将混合物手动匀化并且其含有1mg/mL的胰高血糖素、0.25mg/mL的艾塞那肽、6.3mg/mL的BB15、5mM的磷酸盐缓冲剂、23mM的间甲酚和249mM的甘油。

然后制备该溶液中的3份各自1mL的样品，并于37℃下静置。

实施例CB24：共聚氨基酸BB15为6.3mg/mL、胰高血糖素为1mg/mL以及艾塞那肽为0.5mg/mL的溶液

如上文实施例中所制备的，通过用750μL水、817μL的126.7mM的间甲酚、224μL的4.9M的甘油、225μL的100mM的磷酸缓冲液和226μL的10mg/mL的艾塞那肽溶解28.2mg共聚氨基酸BB15的冻干物来制备12.6mg/mL的共聚氨基酸BB15溶液。将溶液通过膜(0.22μm)进行过滤。

通过将2mL如实施例C1中制备的胰高血糖素溶液与2mL如上制备的12.6mg/mL的BB15溶液混合来制备终溶液。将混合物手动匀化并且其含有1mg/mL的胰高血糖素、0.5mg/mL的艾塞那肽、6.3mg/mL的共聚氨基酸BB15、5mM的磷酸盐缓冲剂、23mM的间甲酚和249mM的甘油。

然后制备该溶液中的3份各自1mL的样品，并于37℃下静置。

实施例CB26：共聚氨基酸BB15为3.8mg/mL、胰高血糖素为1mg/mL和柠檬酸盐的pH7.1的组合物

在精密天平上称取7.6mg共聚氨基酸BB15并于水中稀释，通过依次加入浓缩的甘油溶液、磷酸盐缓冲剂和柠檬酸盐，得到BB15的终浓度为7.6mg/mL、甘油的终浓度为550mM、源自NaH₂PO₄和Na₂HPO₄的磷酸盐的终浓度为4mM、柠檬酸钠的终浓度为10mM的水溶液。然后将溶液通过膜(0.22μm)进行过滤。

以诸如获得包含3.8mg/mL的共聚氨基酸BB15、1mg/mL的胰高血糖素和5mM的柠檬酸盐的组合物的方式，将2mL如实施例C1中制备的胰高血糖素溶液与2mL如上制备的共聚氨基酸溶液混合。将溶液的pH调节至pH 7.1±0.1。然后将溶液通过膜(0.22μm)进行过滤。

还以类似于实施例CB26中描述的组合物的方式制备组合物CB27、CB30和CB30’(表6a)。L-甲硫氨酸以1mg/mL存在于组合物CB30和CB30’中。

以与实施例CB26中所述的组合物类似的方式，并且通过在混合胰高血糖素溶液和共聚氨基酸溶液时加入氯化锌溶液，也已以诸如获得所需的浓度的方式制备了组合物CB28和CB29(表6a)。

将上面制备的组合物以每个测试盒(cartridge)1mL的量转移到测试盒中(根据OMPI的3mL易填充型(easy-to-fill from OMPI of 3mL)-参考P40B4100.3250)并于37℃下静置。

表6a：共聚氨基酸、1mg/mL的胰高血糖素和柠檬酸盐的pH 7.1的组合物。

实施例CB31：共聚氨基酸BB15为11.3mg/mL、胰高血糖素为3mg/mL和柠檬酸盐的组合物

在精密天平上称取22.7mg共聚氨基酸BB15并于水中稀释，并且通过依次加入甘油、磷酸盐缓冲剂、柠檬酸盐和间甲酚的浓缩液，得到BB15的终浓度为22.7mg/mL、甘油的终浓度为530mM、磷酸盐的终浓度为4mM、柠檬酸钠的终浓度为20mM和间甲酚的终浓度为54mM的水溶液。然后将溶液通过膜(0.22μm)进行过滤。

以诸如获得包含11.3mg/mL的共聚氨基酸BB15、3mg/mL的胰高血糖素和10mM的柠檬酸盐的组合物的方式，将2mL如实施例C3中制备的胰高血糖素溶液与2mL如上制备的共聚氨基酸溶液混合。将溶液的pH调节至pH 7.1±0.1。然后将溶液通过膜(0.22μm)进行过滤。

以与实施例CB31中所述的组合物类似的方式，并且通过在混合胰高血糖素溶液和共聚氨基酸溶液时加入氯化锌溶液，也已以诸如获得所需的浓度的方式制备了组合物CB32和CB34(表6b)。

将上面制备的组合物以每个测试盒1mL的量转移到3个测试盒中(根据OMPI的3mL易填充型-参考P40B4100.3250)并于37℃下静置。

表6b：共聚氨基酸BB15为11.3mg/mL、胰高血糖素为3mg/mL和柠檬酸盐的pH 7.1的组合物

实施例CB35至CB83：共聚氨基酸的组合物

以与实施例CB31中所述的组合物类似的方式，还以获得所需浓度的方式制备组合物CB35至CB84(表6c)。

在所有组合物中，胰高血糖素的浓度为1mg/mL并且磷酸盐缓冲剂的浓度为2mM。

表6c：在共聚氨基酸存在的情况下的pH 7.2+/-0.1的胰高血糖素的组合物

实施例CB84至CB89：共聚氨基酸的组合物

以与实施例CB31中所述的组合物类似的方式，还以获得所需浓度的方式制备组合物CB84至CB89(表6d)。

在所有组合物中，磷酸盐缓冲剂的浓度为2mM。

表6d：在共聚氨基酸存在的情况下的pH 7.2+/-0.1的胰高血糖素的组合物

部分C’-反例制剂

十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)来自Sigma-Aldrich公司(参考A6909)。

十二烷基麦芽糖苷(DDM)来自Sigma-Aldrich公司(参考：D4641)。

名称(mPEG-DSPE 2000)来自Interchim公司(参考：KV5081)。

肉豆蔻酰溶血磷脂酰胆碱(LMPC)来自Combi-Block公司(参考：QE-2488)。

以与实施例CB1中所述的组合物类似的方式，还以获得所需浓度的方式制备组合物CEC1至CEC10(表6e)。

在所有组合物中，胰高血糖的浓度为1mg/mL。磷酸盐缓冲剂的浓度为2mM，并且间甲酚的浓度为27mM。

表6e：在不同浓度的现有技术化合物存在的情况下下，pH 7.2+/-0.1的胰高血糖素为1mg/mL的组合物。

部分D：稳定性

实施例D1：共聚氨基酸/胰高血糖素组合物的物理稳定性

在37℃下于第0天、第7天、第14天和第21天进行在37℃下于静置条件下放置的样品的目视检查，以便检测可见颗粒的出现或浊度。该检查根据欧洲药典的建议(EP 2.9.20)进行：使样品经受至少2000lux的照射，并在白色背景和黑色背景下观察。当在3个样品中的至少2个中可见颗粒时，该组合物被认为是不稳定的。因此，稳定意味着在检查当天至少2个样品不含颗粒。

目视检查的结果报告在下表7中。

在容量为3mL的烧瓶中对1mL体积的组合物进行下表中描述的实施例CB1e、CB2至CB25的组合物的物理稳定性的研究(Adelphi-参考：VCDIN2RDLS1)。

“-”表示未观察到

表7：包含共聚氨基酸和胰高血糖素的组合物的目视检查结果

实施例D1a：共聚氨基酸/胰高血糖素/柠檬酸盐组合物的物理稳定性。

如上文实施例D1中所述进行样品的目视检查。

在表7a中报告了胰高血糖素为1mg/mL和3mg/mL的组合物的目视检查结果。

在容量为3mL的测试盒(根据OMPI的3mL易填充型-参考P40B4100.3250)中对1mL体积的组合物进行下表中描述的实施例CB26至CB34的组合物的物理稳定性的研究。由于该容器的特殊性，观察到的稳定性通常大于在烧瓶中观察到的稳定性。

“-”表示未测量的

表7a：具有或不具有锌的包含共聚氨基酸、胰高血糖素、柠檬酸盐的组合物在37℃下的目视检查结果

具有0.3mM的锌或不具有锌的包含3.8mg/mL的共聚氨基酸BB19、1mg/mL的胰高血糖素和5mM或10mM的柠檬酸盐的组合物在37℃下在静止条件下于测试盒中具有至少42天的物理稳定性。

包含3.3mg/mL和3.9mg/mL的共聚氨基酸BB15、1mg/mL的胰高血糖素、10mM的柠檬酸盐和L-甲硫氨酸(1mg/mL)的组合物在37℃下在静止条件下于测试盒中具有至少21天的物理稳定性。

具有或不具有锌的包含11.3mg/mL的共聚氨基酸BB15、3mg/mL的胰高血糖素和10mM的柠檬酸盐的组合物在37℃下在静态条件下于测试盒中具有至少14天的物理稳定性。

对胰高血糖素为1mg/mL、2mg/mL或3mg/mL的组合物进行下表中描述的实施例CB35至CB78的组合物的物理稳定性的研究，同时进行现有技术中描述的作为胰高血糖素的赋形剂的产品的稳定性研究。

表7b：具有共聚氨基酸的组合物或商业产品在胰高血糖素存在的情况下在37℃下在静止条件下的物理稳定性的结果。

结论：

在测试浓度下，在胰高血糖素存在的情况下共聚氨基酸的组合物比在胰高血糖素存在的情况下的商业产品的制剂更稳定。

实施例D2：共聚氨基酸/胰高血糖素的组合物的化学稳定性

将基于USP说明书改造的RP-HPLC方法用于测定胰高血糖素及其降解产物的浓度。该方法用于评价组合物的胰高血糖素的化学稳定性。HPLC条件如下：

-柱：4.6x 150mm，C-18

-流动相A：溶液S/乙腈80/20(v/v)，溶液S为150mM磷酸二氢钾水溶液，用85％磷酸溶液调节至pH 2.7

-流动相B：水/乙腈60/40(v/v)

-流动相C：水/乙腈10/90(v/v)

-柱温：45℃

-检测：UV 210nm

-自动进样器的温度：4℃

在第7天、第14天和第21天在静止条件下于37℃下测量对样品的回收率。化学稳定性数据(即通过RP-HPLC获得的胰高血糖素的回收率)示于下表8中。

在烧瓶中对组合物(容量为3mL的烧瓶中的1mL体积的组合物(Adelphi-参考：VCDIN2RDLS1))进行下表中描述的组合物的化学稳定性的研究。

“-”表示未测量的

表8：包含共聚氨基酸和胰高血糖素的组合物的回收率的测量

实施例D2a：共聚氨基酸/胰高血糖素/柠檬酸盐组合物的化学稳定性

以与实施例D2类似的方式在第2周、第4周和第6周在静止条件下于37℃下测量对样品的回收率。化学稳定性数据(即通过RP-HPLC获得的胰高血糖素的回收率数据)示于下表中。

在测量盒中对收集的组合物的样品(容量为3mL的测试盒(根据OMPI的3mL易填充型-参考P40B4100.3250)中的1mL的组合物)进行下表中描述的实施例CB26至CB29和CB31至CB34的组合物的化学稳定性的研究。

“-”表示未测量的

表8a：包含共聚氨基酸、胰高血糖素和柠檬酸盐的组合物的回收率的测量物理化学

对混合物进行的目视观察结果和通过ThT对原纤维形成的测量结果

原理

差的肽稳定性可导致被定义为有序的大分子结构的淀粉样蛋白原纤维的形成。这些结构可以可能因样品内凝胶的形成而导致。

监测硫磺素T(ThT)的荧光的测试用于分析溶液的物理稳定性。硫磺素是小分子探针，当其与淀粉样蛋白类型的原纤维结合时具有特征性荧光特征(Naiki等(1989)Anal.BioChem.177，244-249，LeVine(1999)Methods.Enzymol.309，274-284)。

该方法使得可能监测未稀释溶液中对于低ThT浓度的原纤维的形成。在加速稳定性条件：在搅拌和37℃下进行该监测。

实验条件

在即将开始测量时制备样品。在相关实施例中描述了每种组合物的制备。将硫磺素T从浓缩的原液中加入到组合物中，以产生可忽略的组合物的稀释。组合物中硫磺素T的浓度为40μM。

将体积为150μL的组合物引入96孔板的孔中，然后引入2.7μL浓缩的ThT溶液。在3次(一式三份)于一个平板上进行的测试中分析每种组合物。用透明薄膜密封该板以防止组合物蒸发。

然后将该板置于读板器(EnVision 2104Multilabel，Perkin Elmer)的外壳中。将温度调节至37℃，并在960rpm下进行横向搅拌，振幅为1mm。

用442nm的激发波长和482nm的发射波长随时间推移读取每个孔中的荧光强度。

原纤维形成过程本身表现为在称为滞后时间的延迟之后荧光的强烈增加。

考虑到荧光信号开始显著增加到基线以上的时间，在目视确定滞后时间。

报告的滞后时间值对应于对三个孔进行的滞后时间测量的平均值。

所得滞后时间结果示于下表中。

NS＝不显著(一个假设是CTAB淬灭ThT的荧光信号)

部分F：猪中的药效学研究

进行研究的目的是在猪中评估2μg/kg剂量的共聚氨基酸BB15和胰高血糖素(实施例CB1e)的组合物的药效学。

将实施例CB1e的该组合物的降血糖作用与以2μg/kg进行的胰高血糖素溶液(NOVO NORDISK)的注射进行比较。

使用Junior笔使已预先禁食约5.5小时的12只动物在侧腹接受2μg/kg剂量的注射。为了解释在注射前30分钟响应于胰高血糖素注射诱导的高血糖作用而通过胰岛素分泌对血糖过多的调节作用，通过皮下途径向猪施用44μg/kg的奥曲肽。在注射前一小时(T-40min、T-20min和T-10min)抽取三份血液样品，以测定葡萄糖和胰高血糖素的基础水平。然后在施用后3小时内抽取血液样品。通过血糖仪测定血糖过多。

由相对于基础水平的葡萄糖差异表示的血糖过多的中值药效学曲线示于图1中。

表示用实施例CB1e的组合物获得的结果的曲线用空心方块表示，表示组合物的结果的曲线用实心圆圈表示。

基于实施例CB1e和的制剂的施用获得的药效学结果显示注射后迅速出现的高血糖活性，其中在注射后30分钟达到最大血糖过多。这些药效学曲线表明，实施例CB1e和商业人胰高血糖素的制剂具有相似的药效学特性。

Claims

1.一种呈可注射水溶液形式的组合物，其pH值为6.0至8.0，至少包含：

a)人胰高血糖素；

其中

-GpR为式II或式II’的基团：

-GpA为式III或III’的基团：

-GpC为式IV的基团：

-*表示由酰胺官能团键合的不同基团的连接位点；

-a为等于0或1的整数；

-b为等于0或1的整数；

-p为等于1或2的整数；以及

○如果p等于1，则a等于0或1并且GpA为式III’的基团，以及

○如果p等于2，则a等于1并且GpA为式III的基团；

-c为等于0或1的整数，并且如果c等于0，则d等于1或2；

-d为等于0、等于1或2的整数；

-r为等于0或1的整数；以及

○如果r等于0，则所述式I的疏水基团通过所述疏水基团的羰基与所述共聚氨基酸的N-末端位置处的氮原子之间的共价键与所述共聚氨基酸键合，从而形成酰胺官能团，以及

○如果r等于1，则所述式I的疏水基团：

■通过所述疏水基团的氮原子与所述共聚氨基酸的羰基之间的共价键与所述共聚氨基酸键合，从而形成源自所述疏水基团的前体的胺官能团与由所述共聚氨基酸的前体所具有的酸官能团之间的反应的酰胺官能团，或者

■通过所述疏水基团的羰基与所述共聚氨基酸的N末端位置处的氮原子之间的共价键与所述共聚氨基酸键合，从而形成源自所述疏水基团的前体的酸官能团与由所述共聚氨基酸的前体所具有的N末端位置处的胺官能团的反应的酰胺官能团；

-R为选自由以下组成的组的基团：

○直链或支链二价烷基，如果GpR为式II的基团，则其包含2至11个碳原子，或者如果GpR为式II’的基团，则其包含1至11个碳原子，所述烷基具有一个或多个-CONH2官能团，以及

-A为含有1至6个碳原子的直链或支链烷基；

-B为直链或支链烷基，任选地包含芳环，包含1至9个碳原子；

-C_x为直链或支链单价烷基，其中x表示碳原子数目；以及：

○如果p等于1，则x为11至25(11≤x≤25)；

○如果p等于2，则x为9至15(9≤x≤15)；

-所述疏水基团数目与所述谷氨酸或天冬氨酸单元数目之间的比率i为0≤i≤0.5；

-所述谷氨酸或天冬氨酸单元中的聚合度DP为10至250；

-所述游离酸官能团以选自由Na⁺和K⁺组成的组的碱性阳离子的盐形式存在。

2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于所述疏水基团选自由下式V表示的其中p＝1的式I的疏水基团：

GpR、GpA、GpC、r和a具有上文中给出的定义。

3.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于所述疏水基团选自由下式VI表示的其中a＝1且p＝2的式I的疏水基团：

其中

GpR、GpA、GpC、r和a具有上文中给出的定义。

4.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其特征在于所述具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自下式VII的共聚氨基酸：

其中，

●R₁或R₂中的至少一个为如上定义的疏水基团，

●X表示H或选自包含金属阳离子的组的阳离子实体；

●n+m表示所述共聚氨基酸的聚合度DP，即每条链的单体单元的平均数，并且5≤n+m≤250。

5.根据权利要求4所述的组合物，其特征在于具有羧酸根电荷和疏水电荷的共聚氨基酸选自下式VIIb的其中n＝0的式VII的共聚氨基酸：

其中m、X、D、R₁和R₂具有上文给出的定义并且R₁或R₂中的至少一个为式I、V或VI的疏水基团。

6.根据权利要求5所述的组合物，其特征在于所述具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自式VIIb的所述共聚氨基酸，其中R₂为式I、V或VI的疏水基团，其中r＝1并且GpR具有式II’。

7.根据权利要求4至7中任一项所述的组合物，其特征在于所述具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自式VII、VIIb的共聚氨基酸，其中所述至少一种共聚氨基酸选自其中基团D为-CH₂-基团(天冬氨酸单元)的共聚氨基酸。

8.根据权利要求4至7中任一项所述的组合物，其特征在于所述具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸选自式VII、VIIb的所述共聚氨基酸，其中所述至少一种共聚氨基酸选自其中基团D为基团-CH₂-CH₂-(谷氨酸单元)的共聚氨基酸。

9.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其特征在于具有羧酸根电荷和疏水基团的共聚氨基酸的浓度为至多40mg/mL。

10.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其特征在于人胰高血糖素的浓度为0.25mg/mL至5mg/mL。

11.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其特征在于[疏水基团]/[人胰高血糖素]的摩尔比小于15。

12.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其特征在于其另外包含聚阴离子化合物。

13.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其特征在于其另外包含锌盐。

14.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其特征在于其另外包含胃肠激素。

15.根据权利要求13所述的组合物，其特征在于所述胃肠激素选自由艾塞那肽、利拉鲁肽、利西拉肽、阿必鲁肽和度拉糖肽、它们的类似物或衍生物以及它们的药学上可接受的盐组成的组。

16.根据权利要求13和14中任一项所述的组合物，其特征在于胃肠激素的浓度在0.01mg/mL至10mg/mL的区间内。