CN109393568A - 一种用于加热不燃烧卷烟的白肋烟提取物及其制备方法 - Google Patents
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Classifications
-
- A24F47/008—
Landscapes
- Manufacture Of Tobacco Products (AREA)
Abstract
本发明提供一种用于加热不燃烧卷烟的白肋烟提取物及其应用，采用白肋烟烟杆、甘蔗渣复合生物材料为固定化载体，吸附生物制剂包括微生物产香菌株和酶，温育水解发酵白肋烟粉末，再结合连续逆流超声溶剂提取技术，制备白肋烟提取物，与丙二醇复配，具有天然烟草浓郁本香，白肋烟特征气息减轻，刺激性降低，带有清新果香和焦糖气息、烘烤香等自然复合香气，工艺条件温和，提取率和生产效率提高；在新型加热不燃烧卷烟材料中应用，与烟香协调、风格统一，增加烟气浓度、提高满足感，丰富烟香，白肋烟刺激性气息明显减轻，口感改善。
Description
技术领域
本发明涉及无烟卷烟领域，具体涉及一种用于加热不燃烧卷烟的白肋烟提取物及其应用。
背景技术
烟用添加剂为改善烟草理化性能的助剂，包括香料香精、保润剂、助燃剂、防霉剂和吸附剂。加热不燃烧型卷烟与传统燃烧型卷烟比较，加热温度一般在500℃一下，通常为300℃，对卷烟中的呈香物质的作用和产生香气的机理不同，往往与卷烟燃吸的感官效果差异较大，需要加香加料以弥补烟香的不足。天然香料因其天然性、安全性和自然复合的香气，更迎合消费者对健康的需求，但仍然具有提取效率较低、溶剂残留多、杂质含量高、纯度较低、纯化步骤复杂导致成本高，有些因特征香气显著，会导致外加香气掩盖烟香等缺陷。由于香料物质大部分为分子量较低、沸点低、挥发性较强的化合物，高温加工过程中损失严重，导致释香不均匀现象，甚至在储存期间因挥发失去香味，或是化学性质不稳定易被氧化变质。
白肋烟红花烟种。它起源于美国俄亥俄州，混合型卷烟的原料，也可用于雪茄烟、斗烟和嚼烟。白肋烟主脉较粗，水分含量较高叶片薄而轻、组织结构疏松而不粗糙，弹性强，填充值高，吸收香料性能好，尼古丁和总氮含量比烤烟高，烟气劲头大，含糖量低，有刺激性大，香气不明显，香气量不足的缺陷，具有很强的吸收能力，在一般工艺加工过程中，白肋烟吸收糖料40％以上，晒烟20～30％，烤烟仅10～20％。白肋烟有调和香气和吃味的作用，是混合型卷烟的重要原料；而用于烤烟型卷烟产品中，白肋烟需要克服特征烟香和特征吃味强烈，劲头较大，有刺激性和杂气等缺陷，现有技术中，白肋烟用于烤烟型卷烟产品中以2～4％的比例少量使用。
将白肋烟作为加热不燃烧卷烟添加剂，其挥发性成分均为烟草本源物质，一般烟草提取物都是通过溶剂溶解加热提取，提取物中含有一定量的大分子化合物，尤其是用于电子烟、电加热新型卷烟、燃料加热型烟草制品等，在较低的温度下难于雾化产生烟雾，香味物质难于蒸发出来，杂质较多，增加烟香的同时也具有增加刺激性、杂气和残留感等缺陷，并且白肋烟提取物往往具有白肋烟特征气息，刺激性大。
目前有专利“一种白肋烟加料料基的制备方法”(申请号 201510420420.X)是一种烟叶本源天然氨基酸及其在白肋烟中的应用，白肋烟废弃粉末加缓冲溶液，加0.1％～0.3％的蛋白酶，调节反应体系的pH值为4.6～6.0，加热到40～60℃，反应4～6h，再加等量蛋白酶，然后与糖混合施加到白肋烟叶片中，经烘焙处理，提高感官质量；专利“一种用于新型烟草制品的晒黄烟提取物的制备方法”(申请号 201610988163.4)由晒黄烟加水加热回流提取，粗提物用纱布和0.8 微米的滤膜过滤，然后加入其重量2～30％的复合氨基酸或氨类物质和晒黄烟水提物重量0～20％的溶剂，pH值2～11，搅拌加热在常压下反应1-7小时自然冷却得到晒黄烟美拉德反应物，最后将其置于填料精馏塔内精馏，并收集塔顶的密度为1.0479-1.1158的液体物质即为晒黄烟提取物，可直接加入电子烟油、***烟、鼻烟、烟草喷雾等新型烟草中，增加了新型烟草的香气和浓度、提高满足感；专利“一种提高白肋烟香气协调性的里料及其制备方法和应用”(申请号 201610962696.5)一种提高白肋烟香气协调性的里料，由按照质量百分数计的多种组分组成：转化糖5-15％、冰醋酸5-10％、甘油1-3％、里料底香香精1-2％、60℃热水70-88％，上述组分之和为100％。所述转化糖按蔗糖100份加水50份配成的饱和溶液，加入蔗糖重量 3.0％的柠檬酸，在80-100℃反应2h制备得到。本发明的里料配方使白肋烟特征香气明显减弱，使其与烤烟香协调，达到提高白肋烟香气协调性的目的，且理化指标稳定，使用针对性强，能够很方便的使用于传统卷烟料液施加过程中。
但是通过白肋烟烟杆、甘蔗渣复合生物吸附材料来固定生物制剂，温育水解发酵白肋烟叶，结合连续逆流超声提取技术，得到白肋烟提取物，与丙二醇复配，在加热不燃烧卷烟中应用，尚未见相关报道。
发明内容
根据上述不足，本发明的目的是提供一种用于加热不燃烧卷烟的白肋烟提取物及其应用，采用白肋烟烟杆、甘蔗渣复合生物材料为固定化载体，吸附生物制剂包括微生物产香菌株和酶，温育水解发酵白肋烟粉末，再结合连续逆流超声溶剂提取技术，制备白肋烟提取物，与丙二醇复配，具有天然烟草浓郁本香，白肋烟特征气息减轻，刺激性降低，带有清新果香和焦糖气息、烘烤香等自然复合香气，工艺条件温和，提取率和生产效率提高；在新型加热不燃烧卷烟材料中应用，与烟香协调、风格统一，增加烟气浓度、提高满足感，丰富烟香，白肋烟刺激性气息明显减轻，口感改善。
本发明通过以下技术方案实现：
一种用于加热不燃烧卷烟的白肋烟提取物的制备方法，包括如下步骤：
(2)前处理：白肋烟烟叶经粉碎机粉碎至40目～200目粉末；
(2)微生物菌株的活化：将扣囊复膜孢酵母(Saccharomycopsis fibuligera)的活性冻干粉，加入到5～20倍质量的灭菌处理的质量浓度为5～30％葡萄糖溶液中，加入丁二酸，调节pH值为1～6，置于10～25℃水浴锅活化10～30min，得到菌株活化液；
(3)固定化载体制备：将白肋烟烟杆、甘蔗渣洗净烘干，将烟杆处理成约1cm长的碎块，与甘蔗渣混合，高压灭菌后烘干，得到混合生物材料固定化载体；
(4)微生物菌株的固定化处理：将一定量上述步骤(3)灭菌烘干后的混合固定化载体，放入容器，按照固定化载体与微生物菌株活化液质量比为1:1～10，加入已培养好的活化液，放置于4±0.5℃冷藏柜固定12～36h，得到固定化菌株-载体；
(5)酶的固定化处理：将天冬酰胺酶溶解到水溶液中，酶占水质量比为0.01～0.05％，加入碳酸钠调节pH值为7～10，搅拌混匀，放入上述步骤(3)的混合固定化载体，放置于4±0.5℃冷藏柜固定12～36 h，得到固定化酶-载体；
(6)白肋烟两步发酵：将步骤(1)所得白肋烟粉末与5～15倍质量的水混合均匀，加入步骤(4)所述固定化菌株-载体，在温度为 35～55℃，匀速搅拌，添加丁二酸调节pH值为1.0～6.0，发酵1～3d；加入氨水，调节pH值为7～9，加入步骤(5)所述固定化酶-载体，温度为20～40℃，搅拌均匀，发酵1～3d，过滤白肋烟末残渣，保留白肋烟发酵液A；
(7)连续逆流超声提取：将步骤(6)过滤所得白肋烟残渣，按速率0.1～1.0kg/10min投料至浸出舱，开启主机和超声波发生器，调节温度40～60℃，配置质量比浓度50～80％的丙二醇水溶液，加入碳酸钠搅拌均匀，调节pH值为7～9，按料液比的质量比为1:2～6，从浸出舱低端运行0.2～1h后调节出液阀门均匀放液，控制溶剂加入流量，保持浸出仓液位平衡，连续逆流超声提取达30～60min时，投料加入一定比例的氢氧化镁、复合氨基酸，当连续逆流超声提取共达90～150 min时，停止生产工艺，排渣，得到浸出液B；
(8)将步骤(5)的发酵液A和步骤(6)的浸出液B合并，得到白肋烟提取物。
进一步的，所述步骤(2)中扣囊复膜孢酵母(Saccharomycopsis fibuligera)为食品级，活性为10～30u/mg，葡萄糖、丁二酸为食品级。
进一步的，所述步骤(3)中的白肋烟烟杆与甘蔗渣的质量比为 1～10:1，该混合生物材料固定化载体与白肋烟粉末的质量比为1:3～10。
进一步的，所述步骤(5)中碳酸钠为食品级，匀速搅拌的转速为 20～60rpm。
进一步的，所述步骤(7)中使用的氢氧化镁为分析纯，占白肋烟质量的0.1～1％，所述复合氨基酸为亮氨酸、异亮氨酸、半胱氨酸，食品级，占白肋烟质量的0.5～1.5％，三者之间的质量比为 1:0.5～2:0.5～2。
本发明还提供一种上述方法制备的白肋烟提取物在新型加热不燃烧卷烟中的应用，将该白肋烟提取物，按与加热不燃烧卷烟配方烟丝0.001～0.07％的质量比加香，卷烟烟香饱满、浓度增加、劲头适中、满足感提高，白肋烟刺激性气息减轻，还带有清新苹果香气、酒香、烤乳酪香和烤肉香。
本发明还提供一种上述方法制备的白肋烟提取物在新型加热不燃烧卷烟的卷烟纸中的应用，将该白肋烟提取物按卷烟纸质量的 0.01～0.7％涂布上去，增加新型卷烟的烟香和提高满足感，丰富香气，白肋烟刺激性气息明显减轻，带有清新苹果香、酒香、烤乳酪香和烤肉香，口感改善。
本发明还提供一种上述方法制备的白肋烟提取物在新型加热不燃烧卷烟的水基胶中的应用，按质量比0.01～0.1％添加到烟用水基胶中，搅拌均匀，在卷包工序中按正常工艺条件应用，在新型卷烟制品加热时，增加烟气浓度、丰富烟香，白肋烟刺激性气息显著减轻，带有清新苹果香气、酒香、烤乳酪香和烤肉香。
本发明的先进性：
(1)采用白肋烟烟杆、甘蔗渣作为生物制剂吸附固定化的复合生物材料载体，其中白肋烟烟杆是烟草本源物质，含有的纤维素吸附作用强，同时也是对废弃烟杆的资源利用，经过榨糖之后剩下的甘蔗渣，约有50％的纤维，纤维长度约为0.65～2.17mm，宽度是21～28μ m，吸附能力强，两者按一定比例混合后，其协同作用下吸附固定微生物菌株和酶的效率高、不易解吸，后期与发酵物液过滤分离容易，使得纯化成本降低，效率提高；
(2)本发明的白肋烟烟叶粉末，经扣囊复膜孢酵母 (Saccharomycopsisfibuligera)和天冬酰胺酶分步吸附发酵，增香降刺。白肋烟粉末溶解在水中，与吸附在白肋烟烟杆、甘蔗渣上的扣囊复膜孢酵母(Saccharomycopsisfibuligera)的复杂酶体系进行酸性条件下的温育水解发酵过程中，该活性菌株具有产淀粉酶、β-葡萄糖苷酶、酸性蛋白酶等特性，能够高效降解白肋烟粉末细胞壁中及细胞中的纤维素、淀粉、纤维二糖、蔗糖等大分子物质，转化为葡萄糖，并进一步转化为酯香为主的香味物质和乙醇，增加清新酒香，将非挥发性糖苷转化成挥发性的香气物质，产香产酯除杂味，破坏细胞壁更多地释放细胞中的活性化学物质，提高产率和增加香气自然复杂性；天冬酰胺酶在第二步发酵时，碱性条件下酶活性高，转化白肋烟中的天冬酰胺为天冬氨酸，减少白肋烟加热时美拉德反应产生的天冬酰胺美拉德反应物产生的白肋烟特征性刺激性气息，转化为天冬氨酸美拉德反应物的吡嗪类烤烟气息。微生物菌株和酶两者协同强效联合作用下，更好地转化非挥发性糖苷为挥发性香气成分，更有效地分解细胞壁中的纤维素、纤维二糖等支架成分，更多释放胞内活性成分与致香物质，降解多糖类物质为挥发性致香小分子成分，且能将部分葡萄糖转化为乙醇，释放到发酵液中，形成发酵液自然复合丰富的清新果香、酒香、奶香，经简单过滤即可与带有微生物菌株的固定化载体分离，步骤简单；
(3)再结合连续逆流超声溶剂提取白肋烟发酵物料残渣，工艺条件温和、缩短生产时间、提高生产效率、降低成本，生产过程中添加氢氧化镁进一步吸附提取液中残留的影响吸味的杂质如鞣质成分，添加复合氨基酸，与白肋烟提取液中的还原糖以及其他游离氨基酸，在逆流40～60℃低温加热条件下，充分进行美拉德中间体增香反应，生成中间体醛类增香物质，进一步增香减杂。
总的来说，使得杂质大分子成分包括蛋白质、纤维素、多糖、淀粉等分解、转化为香味物质，杂质杂味减少，刺激性降低，香气种类自然复杂性增加，香气品质提高，赋予白肋烟提取物具有天然烟草浓郁本香的同时，还带有自然复合丰富香气包括清新苹果香、酒香、烤奶酪香、烤肉香等；生产工艺条件温和、步骤简单、易操作、成效高、成本低，杂质少，白肋烟特征刺激气息明显减轻，香料品质提升；在新型加热不燃烧烟草中应用于配方烟丝、卷烟纸、水基胶等材料中，与烟气协调、风格一致，增强烟草本香、提高满足感、降低刺激性，增加烟香丰富性，白肋烟刺激性气息明显减轻，带有奶香、清新苹果香、酒香、烤肉香、烤乳酪香气，工艺条件温和易实现，操作步骤简单。
具体实施方式
以下结合具体实施例对本发明进行详细地说明。
实施例1
一种用于加热不燃烧卷烟的白肋烟提取物的制备方法，包括如下步骤：
(1)前处理：白肋烟烟叶经粉碎机粉碎至40目粉末；
(2)微生物菌株的活化：将扣囊复膜孢酵母(Saccharomycopsis fibuligera)的活性冻干粉，加入到5倍质量的灭菌处理的质量浓度为 5％葡萄糖溶液中，加入丁二酸，调节pH值为1，置于10℃水浴锅活化10min，得到菌株活化液；
(3)固定化载体制备：将白肋烟烟杆、甘蔗渣洗净烘干，将烟杆处理成约1cm长的碎块，与甘蔗渣混合，高压灭菌后烘干，得到混合生物材料固定化载体；
(4)微生物菌株的固定化处理：将一定量上述步骤(3)灭菌烘干后的混合固定化载体，放入容器，按照固定化载体与微生物菌株活化液质量比为1:1，加入已培养好的活化液，放置于4±0.5℃冷藏柜固定 12h，得到固定化菌株-载体；
(5)酶的固定化处理：将天冬酰胺酶溶解到水溶液中，酶占水质量比为0.01％，加入碳酸钠调节pH值为7，搅拌混匀，放入上述步骤(3)的混合固定化载体，放置于4±0.5℃冷藏柜固定12h，得到固定化酶-载体；
(6)白肋烟两步发酵：将步骤(1)所得白肋烟粉末与5～15倍质量的水混合均匀，加入步骤(4)所述固定化菌株-载体，在温度为35℃，匀速搅拌，添加丁二酸调节pH值为1.0，发酵1d；加入氨水，调节 pH值为7，加入步骤(5)所述固定化酶-载体，温度为20℃，搅拌均匀，发酵1d，过滤白肋烟末残渣，保留白肋烟发酵液A；
(7)连续逆流超声提取：将步骤(6)过滤所得白肋烟残渣，按速率0.1kg/10min投料至浸出舱，开启主机和超声波发生器，调节温度 40℃，配置质量比浓度50％的丙二醇水溶液，加入碳酸钠搅拌均匀，调节pH值为7，按料液比的质量比为1:2，从浸出舱低端运行0.2h后调节出液阀门均匀放液，控制溶剂加入流量，保持浸出仓液位平衡，连续逆流超声提取达30min时，投料加入一定比例的氢氧化镁、复合氨基酸，当连续逆流超声提取共达90min时，停止生产工艺，排渣，得到浸出液B；
(8)将步骤(5)的发酵液A和步骤(6)的浸出液B合并，得到白肋烟提取物。
进一步的，所述步骤(2)中扣囊复膜孢酵母(Saccharomycopsis fibuligera)为食品级，活性为10u/mg，葡萄糖、丁二酸为食品级。
进一步的，所述步骤(3)中的白肋烟烟杆与甘蔗渣的质量比为 1:1，该混合生物材料固定化载体与白肋烟粉末的质量比为1:3。
进一步的，所述步骤(5)中碳酸钠为食品级，匀速搅拌的转速为 20rpm。
进一步的，所述步骤(7)中使用的氢氧化镁为分析纯，占白肋烟质量的0.1％，所述复合氨基酸为亮氨酸、异亮氨酸、半胱氨酸，食品级，占白肋烟质量的0.5％，三者之间的质量比为1:0.5:0.5。
上述方法制备的白肋烟提取物在新型加热不燃烧卷烟配方烟丝中应用，按与加热不燃烧卷烟配方烟丝0.001％的质量比加香，卷烟烟香饱满、浓度增加、劲头适中、满足感提高，白肋烟特征强烈气息明显减轻，还带有清新苹果香气、酒香、烤乳酪香和烤肉香。
实施例2
一种用于加热不燃烧卷烟的白肋烟提取物的制备方法，包括如下步骤：
(3)前处理：白肋烟烟叶经粉碎机粉碎至100目粉末；
(2)微生物菌株的活化：将扣囊复膜孢酵母(Saccharomycopsis fibuligera)的活性冻干粉，加入到12倍质量的灭菌处理的质量浓度为15％葡萄糖溶液中，加入丁二酸，调节pH值为3，置于18℃水浴锅活化20min，得到菌株活化液；
(3)固定化载体制备：将白肋烟烟杆、甘蔗渣洗净烘干，将烟杆处理成约1cm长的碎块，与甘蔗渣混合，高压灭菌后烘干，得到混合生物材料固定化载体；
(4)微生物菌株的固定化处理：将一定量上述步骤(3)灭菌烘干后的混合固定化载体，放入容器，按照固定化载体与微生物菌株活化液质量比为1:5，加入已培养好的活化液，放置于4±0.5℃冷藏柜固定 24h，得到固定化菌株-载体；
(5)酶的固定化处理：将天冬酰胺酶溶解到水溶液中，酶占水质量比为0.01～0.05％，加入碳酸钠调节pH值为8.5，搅拌混匀，放入上述步骤(3)的混合固定化载体，放置于4±0.5℃冷藏柜固定24h，得到固定化酶-载体；
(6)白肋烟两步发酵：将步骤(1)所得白肋烟粉末与10倍质量的水混合均匀，加入步骤(4)所述固定化菌株-载体，在温度为45℃，匀速搅拌，添加丁二酸调节pH值为3.5，发酵2d；加入氨水，调节 pH值为8，加入步骤(5)所述固定化酶-载体，温度为30℃，搅拌均匀，发酵2d，过滤白肋烟末残渣，保留白肋烟发酵液A；
(7)连续逆流超声提取：将步骤(6)过滤所得白肋烟残渣，按速率0.5kg/10min投料至浸出舱，开启主机和超声波发生器，调节温度 50℃，配置质量比浓度65％的丙二醇水溶液，加入碳酸钠搅拌均匀，调节pH值为8，按料液比的质量比为1:4，从浸出舱低端运行1.6h后调节出液阀门均匀放液，控制溶剂加入流量，保持浸出仓液位平衡，连续逆流超声提取达45min时，投料加入一定比例的氢氧化镁、复合氨基酸，当连续逆流超声提取共达120min时，停止生产工艺，排渣，得到浸出液B；
(8)将步骤(5)的发酵液A和步骤(6)的浸出液B合并，得到白肋烟提取物。
进一步的，所述步骤(2)中扣囊复膜孢酵母(Saccharomycopsis fibuligera)为食品级，活性为20u/mg，葡萄糖、丁二酸为食品级。
进一步的，所述步骤(3)中的白肋烟烟杆与甘蔗渣的质量比为5.5:1，该混合生物材料固定化载体与白肋烟粉末的质量比为1:6.5。
进一步的，所述步骤(5)中碳酸钠为食品级，匀速搅拌的转速为 40rpm。
进一步的，所述步骤(7)中使用的氢氧化镁为分析纯，占白肋烟质量的0.5％，所述复合氨基酸为亮氨酸、异亮氨酸、半胱氨酸，食品级，占白肋烟质量的1.0％，三者之间的质量比为1:1:1。
上述方法制备的白肋烟提取物在新型加热不燃烧卷烟的卷烟纸中应用，按卷烟纸质量的0.01％涂布上去，增加新型卷烟的烟香和提高满足感，丰富香气，刺激性降低，白肋烟特征刺激性气息明显减轻，带有清新苹果香、酒香、烤乳酪香和烤肉香，口感改善。
实施例3
一种用于加热不燃烧卷烟的白肋烟提取物的制备方法，包括如下步骤：
(1)前处理：白肋烟烟叶经粉碎机粉碎至200目粉末；
(2)微生物菌株的活化：将扣囊复膜孢酵母(Saccharomycopsis fibuligera)的活性冻干粉，加入到20倍质量的灭菌处理的质量浓度为30％葡萄糖溶液中，加入丁二酸，调节pH值为6，置于25℃水浴锅活化30min，得到菌株活化液；
(3)固定化载体制备：将白肋烟烟杆、甘蔗渣洗净烘干，将烟杆处理成约1cm长的碎块，与甘蔗渣混合，高压灭菌后烘干，得到混合生物材料固定化载体；
(4)微生物菌株的固定化处理：将一定量上述步骤(3)灭菌烘干后的混合固定化载体，放入容器，按照固定化载体与微生物菌株活化液质量比为1:10，加入已培养好的活化液，放置于4±0.5℃冷藏柜固定36h，得到固定化菌株-载体；
(5)酶的固定化处理：将天冬酰胺酶溶解到水溶液中，酶占水质量比为0.05％，加入碳酸钠调节pH值为10，搅拌混匀，放入上述步骤(3)的混合固定化载体，放置于4±0.5℃冷藏柜固定36h，得到固定化酶-载体；
(6)白肋烟两步发酵：将步骤(1)所得白肋烟粉末与15倍质量的水混合均匀，加入步骤(4)所述固定化菌株-载体，在温度为55℃，匀速搅拌，添加丁二酸调节pH值为6.0，发酵3d；加入氨水，调节 pH值为9，加入步骤(5)所述固定化酶-载体，温度为40℃，搅拌均匀，发酵3d，过滤白肋烟末残渣，保留白肋烟发酵液A；
(7)连续逆流超声提取：将步骤(6)过滤所得白肋烟残渣，按速率1.0kg/10min投料至浸出舱，开启主机和超声波发生器，调节温度 60℃，配置质量比浓度80％的丙二醇水溶液，加入碳酸钠搅拌均匀，调节pH值为9，按料液比的质量比为1:6，从浸出舱低端运行1h后调节出液阀门均匀放液，控制溶剂加入流量，保持浸出仓液位平衡，连续逆流超声提取达60min时，投料加入一定比例的氢氧化镁、复合氨基酸，当连续逆流超声提取共达150min时，停止生产工艺，排渣，得到浸出液B；
(8)将步骤(5)的发酵液A和步骤(6)的浸出液B合并，得到白肋烟提取物。
进一步的，所述步骤(2)中扣囊复膜孢酵母(Saccharomycopsis fibuligera)为食品级，活性为10～30u/mg，葡萄糖、丁二酸为食品级。
进一步的，所述步骤(3)中的白肋烟烟杆与甘蔗渣的质量比为10:1，该混合生物材料固定化载体与白肋烟粉末的质量比为1:10。
进一步的，所述步骤(5)中碳酸钠为食品级，匀速搅拌的转速为 60rpm。
进一步的，所述步骤(7)中使用的氢氧化镁为分析纯，占白肋烟质量的1％，所述复合氨基酸为亮氨酸、异亮氨酸、半胱氨酸，食品级，占白肋烟质量的1.5％，三者之间的质量比为1:2:2。
一种上述方法制备的白肋烟提取物在新型加热不燃烧卷烟的水基胶中的应用，按质量比0.01％添加到烟用水基胶中，搅拌均匀，在卷包工序中按正常工艺条件应用，在新型卷烟制品加热时，增加烟气浓度、丰富烟香，白肋烟特征气息明显减轻，带有清新苹果香气、酒香、烤乳酪香和烤肉香。
试验例1：应用的感官效果对比评价
将实施例1-3吸附发酵制备的白肋烟提取物与白肋烟水提物，分别在新型加热不燃烧卷烟中应用，进行感官评价对比实验。
结果表明(如表1所示)：本发明吸附发酵制备的白肋烟提取物在新型加热不燃烧卷烟的配方烟丝、卷烟纸和水基胶中的应用，与烟气协调、保持卷烟风格一致，增强烟草本香、提高满足感，烟香舒适，带有清新苹果香气、烤乳酪和烤肉香气等，刺激性降低，白肋烟特征气息明显减轻，口感改善。
表1.马里兰烟叶发酵提取物在卷烟中的感官评价
以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何属于本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到的变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应该以权利要求的保护范围为准。
Claims (8)
1.一种用于加热不燃烧卷烟的白肋烟提取物的制备方法，其特征在于包括如下步骤：
(1)前处理：白肋烟烟叶经粉碎机粉碎至40目～200目粉末；
(2)微生物菌株的活化：将扣囊复膜孢酵母(Saccharomycopsis fibuligera)的活性冻干粉，加入到5～20倍质量的灭菌处理的质量浓度为5～30％葡萄糖溶液中，加入丁二酸，调节pH值为1～6，置于10～25℃水浴锅活化10～30min，得到菌株活化液；
(3)固定化载体制备：将白肋烟烟杆、甘蔗渣洗净烘干，将烟杆处理成约1cm长的碎块，与甘蔗渣混合，高压灭菌后烘干，得到混合生物材料固定化载体；
(4)微生物菌株的固定化处理：将一定量上述步骤(3)灭菌烘干后的混合固定化载体，放入容器，按照固定化载体与微生物菌株活化液质量比为1:1～10，加入已培养好的活化液，放置于4+0.5℃冷藏柜固定12～36h，得到固定化菌株-载体；
(5)酶的固定化处理：将天冬酰胺酶溶解到水溶液中，酶占水质量比为0.01～0.05％，加入碳酸钠调节pH值为7～10，搅拌混匀，放入上述步骤(3)的混合固定化载体，放置于4+0.5℃冷藏柜固定12～36h，得到固定化酶-载体；
(6)白肋烟两步发酵：将步骤(1)所得白肋烟粉末与5～15倍质量的水混合均匀，加入步骤(4)所述固定化菌株-载体，在温度为35～55℃，匀速搅拌，添加丁二酸调节pH值为1.0～6.0，发酵1～3d；加入氨水，调节pH值为7～9，加入步骤(5)所述固定化酶-载体，温度为20～40℃，搅拌均匀，发酵1～3d，过滤白肋烟末残渣，保留白肋烟发酵液A；
(7)连续逆流超声提取：将步骤(6)过滤所得白肋烟残渣，按速率0.1～1.0kg/10min投料至浸出舱，开启主机和超声波发生器，调节温度40～60℃，配置质量比浓度50～80％的丙二醇水溶液，加入碳酸钠搅拌均匀，调节pH值为7～9，按料液比的质量比为1:2～6，从浸出舱低端运行0.2～1h后调节出液阀门均匀放液，控制溶剂加入流量，保持浸出仓液位平衡，连续逆流超声提取达30～60min时，投料加入一定比例的氢氧化镁、复合氨基酸，当连续逆流超声提取共达90～150min时，停止生产工艺，排渣，得到浸出液B；
(8)将步骤(5)的发酵液A和步骤(6)的浸出液B合并，得到白肋烟提取物。
2.如权利要求1所述的用于加热不燃烧卷烟的白肋烟提取物的制备方法，其特征在于：所述步骤(2)中扣囊复膜孢酵母(Saccharomycopsis fibuligera)为食品级，活性为10～30u/mg，葡萄糖、丁二酸为食品级。
3.如权利要求1所述的用于加热不燃烧卷烟的白肋烟提取物的制备方法，其特征在于：所述步骤(3)中的白肋烟烟杆与甘蔗渣的质量比为1～10:1，该混合生物材料固定化载体与白肋烟粉末的质量比为1:3～10。
4.如权利要求1所述的用于加热不燃烧卷烟的白肋烟提取物的制备方法，其特征在于：所述步骤(5)中碳酸钠为食品级，匀速搅拌的转速为20～60rpm。
5.如权利要求1所述的用于加热不燃烧卷烟的白肋烟提取物的制备方法，其特征在于：所述步骤(7)中使用的氢氧化镁为分析纯，占白肋烟质量的0.1～1％，所述复合氨基酸为亮氨酸、异亮氨酸、半胱氨酸，食品级，占白肋烟质量的0.5～1.5％，三者之间的质量比为1:0.5～2:0.5～2。
6.一种如权利要求1-5中任一项所述方法制备白肋烟提取物在新型加热不燃烧卷烟中的应用，将该白肋烟提取物按与加热不燃烧卷烟配方烟丝0.001～0.07％的质量比加香。
7.一种如权利要求1-5中任一项所述方法制备白肋烟提取物在新型加热不燃烧卷烟的卷烟纸中的应用，将该白肋烟提取物按卷烟纸质量的0.01～0.7％涂布上去。
8.一种如权利要求1-5中任一项所述方法制备白肋烟提取物在新型加热不燃烧卷烟的水基胶中的应用，按质量比0.01～0.1％添加到烟用水基胶中，搅拌均匀，在卷包工序中按正常工艺条件应用。
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