CN109295071B - 一种水稻花器官发育调控基因peh1及其编码的蛋白质和应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种水稻花器官发育调控基因PEH1及其编码的蛋白质和应用，所述基因PEH1具有如SEQ ID No:1所示的核苷酸序列；所述SEQ ID No:1核苷酸序列中添加、取代、***或缺失一个或多个核苷酸而生成的核苷酸序列、等位基因或衍生物；所述蛋白质具有如SEQ ID No:2所示的氨基酸序列，所述SEQ ID No:2氨基酸序列中添加、取代、***或缺失一个或多个氨基酸而生成的氨基酸序列或衍生物；所述基因PEH1及其编码的蛋白质应用于水稻的花器官发育调节。本发明利用该基因对水稻花器官发育进行调控，为深入研究水稻生殖器官发育的分子机制具有重要的理论及实际意义。

Description

一种水稻花器官发育调控基因PEH1及其编码的蛋白质和应用

【技术领域】

本发明涉及植物基因工程领域，具体涉及一种水稻花器官发育调控基因PEH1及其编码的蛋白质和应用。

【背景技术】

水稻不仅是单子叶植物基因组研究的模式植物，而且是重要的粮食作物。水稻是世界上三分之一人类的主食，其花不仅是繁殖器官，而且是形成子粒的基础。水稻花的正常发育直接影响稻谷产量和稻米品质，因此水稻花发育的研究一直是水稻遗传育种工作者关注的重点。研究水稻花发育不仅具有重要的理论意义，而且对水稻产量和品质遗传育种具有重要的指导意义。

20世纪90年代，植物发育生物学家通过对拟南芥、金鱼草花的同源异型突变体研究发现双子叶植物的花器官形成由多基因控制，基因之间彼此关联，提出具有里程碑意义的ABC模型(Coen ES and Meyerowitz EM.The war of the whorls:geneticinteractions controlling flower development.Nature,1991,353(5):31～37.)。随着研究的深入和克隆出的花同源异型基因数量的增加，ABC模型延伸为ABCDE模型(TheissenG.,Development of floral organ identity:stories from the MADS house.Curr OpinPlant Biol.,2001,4(1):75-85.)。

通过水稻分子遗传学的研究发现双子叶模式植物拟南芥、金鱼草等物种研究中获得的“ABCDE花器官调控模型”部分适用于解释水稻等单子叶植物花器官发育的分子调控(Yoshida H and Nagato Y.Flower development in rice.2011,J Exp Bot.,62(14):4719–4730；Lombardo F and Yoshida H.Interpreting lemma and palea homologies:apoint of view from rice floral mutants.Front Plant Sci,2015,61(6):1-6.)。目前已克隆多个与双子叶植物拟南芥、金鱼草相应的ABCDE模型基因功能相似、产物同源的MADS-box基因(于新,***,王才林.水稻花器官发育的分子机理.分子植物育种,2013,11(4):617-624.)，然而水稻与拟南芥等进化上相差较远，花的形态结构差异较大，水稻花具有与双子叶植物相似的雄蕊和雌蕊繁殖器官，但没有明显的双子叶植物所具有的花萼和花瓣结构，围绕雄蕊和雌蕊繁殖花器官的是与双子叶植物和其他单子叶植物的花萼、花瓣明显不同的外稃、内稃和浆片。

随着研究的深入及新的水稻花发育相关突变体基因的分离，越来越多的研究显示，单子叶水稻与双子叶拟南芥菜花器官形态建成有较多的不同仍然有许多问题需要解决(Hitoshi Y and Yasuo N.Flower development in rice.J Exp Bot,2011,62(14):4719-4730；Lombardo F and Yoshida H.Interpreting lemma and palea homologies:a pointof view from rice floral mutants.Front Plant Sci,2015,61(6):1-6.)。首先，内、外稃是否是花萼的同源物，这一点并没有充足的实验证据来支持；其次，内、外稃是同一种器官或是不同的器官也还未获得充分的证据；第三，水稻颖片究竟是一朵退化的花还是一整朵花的有机组成部分，仍然不是很清楚。因而，对水稻的花发育过程的遗传调控机制尚不能像拟南芥那样形成一个总体轮廓，要阐明水稻花发育的一些基本问题，还有待一些新的基因克隆和研究。

【发明内容】

本发明要解决的技术问题之一，在于提供一种水稻花器官发育调控基因PEH1及其应用，利用该基因对水稻花器官发育进行调控，为深入研究水稻生殖器官发育的分子机制具有重要的理论及实际意义。

本发明是这样实现上述技术问题之一的：

一种水稻花器官发育调控基因PEH1，所述基因PEH1具有如SEQ ID No:1所示的核苷酸序列。

进一步地，所述SEQ ID No:1核苷酸序列中添加、取代、***或缺失一个或多个核苷酸而生成的核苷酸序列、等位基因或衍生物。

进一步地，含所述的一种水稻花器官发育调控基因PEH1的质粒、植物表达载体、宿主细胞。

进一步地，所述基因PEH1及其核苷酸序列中添加、取代、***或缺失一个或多个核苷酸而生成的核苷酸序列、等位基因或衍生物应用于水稻的花器官发育调节。

进一步地，含有一种水稻花器官发育调控基因PEH1的质粒、植物表达载体、宿主细胞应用于水稻的花器官发育调节。

本发明要解决的技术问题之二，在于提供一种水稻花器官发育调控基因PEH1编码的蛋白质及其应用，利用该蛋白质对水稻花器官发育进行调控，为深入研究水稻生殖器官发育的分子机制具有重要的理论及实际意义。

本发明是这样实现上述技术问题之二的：

一种水稻花器官发育调控基因PEH1编码的蛋白质，所述蛋白质具有如SEQ ID No:2所示的氨基酸序列。

进一步地，所述SEQ ID No:2氨基酸序列中添加、取代、***或缺失一个或多个氨基酸而生成的氨基酸序列或衍生物。

进一步地，所述蛋白质及其氨基酸序列中添加、取代、***或缺失一个或多个氨基酸而生成的氨基酸序列或衍生物，应用于水稻的花器官发育调节。

本发明具有如下优点：

本发明所述的基因或蛋白质对于水稻花器官(内外稃、雌雄器官等)正常发育至关重要，所述基因或蛋白质突变引起水稻雌雄胚子形成异常，内外稃片形态畸形，形成辣椒状颖花，利用本发明基因或蛋白质能对水稻花器官进行改造，为深入研究水稻生殖器官发育的分子机制具有重要的理论及实际意义。

【附图说明】

下面参照附图结合实施例对本发明作进一步的说明。

图1为本发明PEH1基因的突变结构图。

图2为本发明PEH1基因的测序图，其中a测序图是野生型,b测序图为突变型。

图3为本发明PEH1基因在突变株fro1(t)与明恢86的表达水平柱形图。

【具体实施方式】

本发明涉及一种水稻花器官发育调控基因PEH1，所述基因PEH1具有如SEQ ID No:1所示的核苷酸序列。

所述SEQ ID No:1核苷酸序列中添加、取代、***或缺失一个或多个核苷酸而生成的核苷酸序列、等位基因或衍生物。

所述基因PEH1及其核苷酸序列中添加、取代、***或缺失一个或多个核苷酸而生成的核苷酸序列、等位基因或衍生物应用于水稻的花器官发育调节。

本发明还涉及含上述一种水稻花器官发育调控基因PEH1的质粒、植物表达载体、宿主细胞。

所述的含有一种水稻花器官发育调控基因PEH1的质粒、植物表达载体、宿主细胞应用于水稻的花器官发育调节。

本发明又涉及一种水稻花器官发育调控基因PEH1编码的蛋白质，所述蛋白质具有如SEQ ID No:2所示的氨基酸序列。

所述SEQ ID No:2氨基酸序列中添加、取代、***或缺失一个或多个氨基酸生成的氨基酸序列或衍生物。

所述的一种水稻花器官发育调控基因PEH1编码的蛋白质，所述蛋白质及其氨基酸序列中添加、取代、***或缺失一个或多个氨基酸生成的氨基酸序列或衍生物，应用于水稻的花器官发育调节。

本发明基因的获得及其功能验证步骤如下：

PEH1基因定位：为了分离基因，本发明首先组建了一个定位群体，由突变体fro1(t)分离群体中的正常植株(基因型为野生型或杂合型)与籼稻品种9311杂交，构建定位群体，采用基于高通量测序的分离体混合分析(BSA-seq)方法，快速定位候选基因。

候选突变位点验证：利用网站Rice Genome Annotation Project找到候选基因的信息，在候选位点两侧设计一对特异性测序引物，分别对纯合野生型和突变体的DNA进行PCR扩增，将产物送测序并比对，确定候选基因。Real-time PCR分析野生型和突变体在RNA上的表达量，进一步确定候选基因。

PEH1基因的功能分析：通过遗传转化，将包含完整的PEH1基因的片段转到突变体fro1(t)中进行功能互补试验，获得了使突变体恢复正常表型的转基因水稻。

本发明基于早期发现的一个由未知单隐性核基因控制控制的水稻花器官发育突变体fro1(t)(毛毕刚,***,***,陈在杰,彭永宏,王锋.两个水稻生殖器官突变体的形态特征和遗传分析.分子植物育种,2008,6(2):233-238；陈在杰,吴煜兵,陈少游,***,王锋.水稻生殖发育突变体fro1(t)的形态发生及基因定位.福建农业学报,2010,25(6):677-683.)。

同野生型水稻明恢86相比，突变体fro1(t)的突变表型主要表现在：株型矮小，生长势较弱；内、外稃片扭曲变形抱合，小穗外形酷似辣椒，但小穗始终闭合不开花，最终枯萎；副颖多数退化；浆片转变成薄叶状器官；雄蕊花丝膨大扭曲，花药表面扭曲变形，无花粉，雄蕊个数2-6枚，部分雄蕊转化为底部叶状，顶部有类似柱头的雌蕊状器官；子房发育正常，但是多数花柱融合，柱头簇生，3-4个。突变体fro1(t)不能结实，只能以杂合株的形式保存，是一个单隐性基因控制的突变体。

以下结合具体实施例对本发明作进一步地说明。

实施例1：水稻花器官发育调控基因PEH1的获得

水稻材料：水稻突变体fro1(t)来自籼稻品种明恢86的组培后代，定位亲本为籼稻品种9311.

定位群体构建：选取突变体fro1(t)分离群体中的野生表型(基因型为野生纯合或杂合)与籼稻品种9311进行杂交，构建定位群体F2。

基因定位：基于F2群体，在分离子代中，进行表型选择，将“突变表型”(即与突变体亲本表型一致)的个体挑选出来，分别剪取叶片等量混合提取DNA，构建得到隐性纯合池；将“野生表型”(即与野生型亲本表型一致)的个体随机选取50株，分别剪取叶片等量混合提取DNA，构建显性杂合池；选取单株突变亲本提取DNA进行测序。将亲本个体和子代混合池送诺禾致源生物信息科技有限公司进行全基因组测序，采用IlluminaPE(paired end)测序方法，读段长度均为150bp，测序深度在40×左右。以日本晴基因组序列为参考，基于两池读段数据筛选变异位点。将在两池中符合期望基因型(野生型池中为纯合正常基因型,突变型池中为纯合突变基因型)的变异位点认定为候选突变位点。

在全基因组范围内共筛查至4个候选突变体点(下表1所示)，其中3个位于基因间，因此可以排除。另一个候选突变位点发生在LOC_Os08g39420基因编码区(+800bp)发生了1个碱基A的缺失(TAAAAAT—TAAAAT)，导致编码序列发生移码，从而造成了该基因蛋白翻译的提前终止，具体参照图1(黑框表示外显子区，左边白框表示5-UTR，右边白框表示3-UTR，黑色箭头表示突变位置，*号表示缺失位点，-号表示蛋白翻译终止)。因此，将该LOC_Os08g39420基因确定为fro1(t)突变体的候选基因，命名为PEH1(即PEPPER HULL 1的缩写)。

表1候选突变位点及所在基因的注释信息

实施例2：突变位点及目标基因的确定

为了验证上面筛选的结果，在PEH1基因的突变位点两侧设计一对引物(5’-TACAGAAAGCCCTCAAGGAAGC-3’(如SEQ ID No:3所示)；5’-AACAACAAGAGGGGGAAATCAG-3'(如SEQ ID No:4所示))，分别对明恢86和突变株的基因组DNA进行PCR扩增，并对扩增产物进行测序，具体参照图2，图2中a测序图是野生型,b测序图为突变型，测序结果发现突变株中的这个突变确实存在。

为了进一步验证上述缺失突变及所属基因与水稻花器官发育的相关性，提取明恢86及突变株(各三个植株)在抽穗些颖花的总RNA，然后反转录成cDNA。设计PEH1基因序列特异的引物(5’-CAGAAGTCAGCGGATGTAAGGT-3’(如SEQ ID No:5所示)；5’-GGAATCGGCACAGCAATCAA-3'(如SEQ ID No:6所示))进行qRT-PCR相关实验。qRT-PCR反应条件为95℃，30s；95℃，10s；55℃，20s；72℃，10s；40Cycles。所有反应进行3个生物学重复和3个技术重复，qRT-PCR内参基因为OsActin1(LOC_Os03g50885)，具体结果见图3。图3中A、B、C分别代表PEH1基因在突变体fro1(t)的三个不同植株与明恢86的表达量差异，结果显示PEH1在突变株中转录水平较野生型显著下降。

实施例3：互补实验验证PEH1基因功能

根据LOC_Os08g39420基因序列，在网站(https://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi)上找到包含该基因的日本晴BAC克隆AP014964.1中该基因上下游序列，设计全基因扩增引物，该引物对分别包含CE Entry Vector(Vazyme)的URS和DRS序列及两个核酸内切酶的识别序列，其中一条引物包括URS序列和核酸内切酶EcoRI的识别序列[5'-ggatcttccagagatgaattcGTTGAAGAACTCGCTGTCCGTG-3'(如SEQ ID No:7所示)]；另一条引物包括DRS序列和核酸内切酶HindIII的识别序列[5'-ctgccgttcgacgataagcttGTCGTCAGTCCTCGCATTATTCA-3'(如SEQ ID No:8所示)]，片段6589bp,包括整个基因的编码区、起始密码子上游1320bp启动子序列和终止密码子下游419bp的调控序列。

提取籼稻品种明恢86的DNA，采用

HS DNA Polymerase with GCBuffer(TAKALA)，PCR反应条件为94℃，5sec；98℃，10sec；60℃，30sec；72℃，7min；32Cycles；72℃,5min。使用1％琼脂糖凝胶电泳，挖取相应DNA片段回收。应用ClonExpressEntry One Step Cloning Kit(Vazyme)将该片段直接克隆至CE Entry Vector,重组产物转化后挑单克隆测序。将测序正确的克隆摇菌提质粒，用内切酶EcoRI及HindIII完全酶切，电泳分离后，割取DNA片段连接至pCAMBIA1300中，从而构建成互补载体pCAMBIA1300+promoter+PEH1+nos。将该质粒通过电击转入农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)株系LBA4404中转化水稻。使用农杆菌介导的遗传转化方法转化突变体fro1(t)成熟胚诱导的愈伤组织(苏军,胡昌泉,翟红利,颜静宛,陈在杰,王锋,2003,农杆菌介导籼稻明恢86高效稳定转化体系的建立,福建农业学报,18(4):209-213)。

本发明共获得独立转PEH1基因水稻植株23株，对转基因植株进行PCR鉴定发现阳性植株21株，阴性植株2株。将阳性的转PEH1基因水稻植株与同时期的突变体比较，发现其小穗外形恢复正常，具备完整的1个穗轴、2个副护颖、2个副颖、1个外稃、1个内稃、1对浆片、6个雄蕊和1个雌蕊。雄雌蕊育性恢复，结实正常。由此可见，通过互补实验更进一步证明了PEH1基因为花器官发育调控基因。

综上所述，本发明利用早期筛选的水稻突变休，构建混合池，进行全基因组测序，快速定位并确定了目标基因PEH1，该基因控制花器官发育。通过对PEH1的功能解读及梳理其上下游基因的关系，将为进一步探索单子叶植物花发育的分子调控机理打下基础。

虽然以上描述了本发明的具体实施方式，但是熟悉本技术领域的技术人员应当理解，我们所描述的具体的实施例只是说明性的，而不是用于对本发明的范围的限定，熟悉本领域的技术人员在依照本发明的精神所作的等效的修饰以及变化，都应当涵盖在本发明的权利要求所保护的范围内。

序列表

<110> 福建省农业科学院生物技术研究所

<120> 一种水稻花器官发育调控基因PEH1及其编码的蛋白质和应用

<130> 100

<160> 8

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 5262

<212> DNA

<213> （Oryza sative）

<400> 1

gaagcgtact catcagagaa gtcagaaagg gaggagagcc gtcgccgccg tgggatgtcg 60

ccgtcgtcgt cgtcgtcgag cacggggccg atgggggtgg cggtgtcgcc ggaggtggaa 120

gcggcgctgg cgcgcggcgg cgcggtcgtc gccctcgagt ccaccatcat ctgccacggt 180

aagctcgcgc ctcgccgcct cctccccacc ccgtctccct cccggattac atggctcact 240

ccggcgatgt gcgcccgcgg ctgggggacg cgtttggctt tcttcccatc ccaggtatgc 300

cctacccgaa gaatctccag accgccatgg aggtggaggc cgtcgtgagg gagaacgggg 360

cggttcctgc caccatagcc attctgaacg gcgtgccaca tgttggtgag tcctgtgatt 420

tttcctgtga ctcggagatc agatacatgt tcaactgttc aagtgctgga ggcgtgatcc 480

gtagttgcta gctactatga attattctcc aattaacacc ggataatttt cgtaatgtga 540

taggccttag cggcgagcaa ttgaagagct tggctgtaag tggaagacag tttcagaaga 600

cggctagaag ggatattgca catgttgtga gtaccttgca cactagaaat tggtcgttca 660

gaatgttttc caatgtgttc agttatatct gcactaaaac tttacagttg atatatgttt 720

ctcgtcttat tgcttcctgt aacgagtttt actgattgaa aggtggcctc tggtggtaat 780

ggtgcaacaa cagtttctgc cactatgttt ttcgctcata aggtcagagc caaaaacatc 840

ttactgctct tgttactgtt aatttatctt tccttgattt gatagccttt ttcttgttca 900

tctttgttac atgtagttgg tgccaatcat tcatctctat atcaaactaa agttgctctc 960

aaattcaggt tggcatacca attttcgtaa ctggagggat tggaggtgtt catagaaatg 1020

gtgaacagag taagtacctt cctccttcca atcgtgtaag gagtcccttg ctatctgcac 1080

attttacagt tgatgcttca atcagttttt ctgagttatg aatggatgct gtagccttcc 1140

attttaatat cgtttactat taccatgggt ctaaatgtgg attatagcag ctcatgcctg 1200

atagaggtca tgtggcttaa tagctctaaa agagggcaag tgaaatgaca tgtttattat 1260

atctagacga tgtaattttt tgttgattta taccatttcg atcagtttgt gtttcttcat 1320

gtgttgaaaa cttagcagaa atttaatatg cctcttgatt ttttgtaatc tagtttgtct 1380

atgcctcttg attttttgta atctagtttg ttttctttag cttttctgca tcctgttgtc 1440

attctctagt taatttaaga gtaaagtgca cgggcggtcc ttaaacttgc aggggtatgt 1500

catctaggtc tctaaactct caaaatacat atccaagtcc aagaacttgt catagtgtgt 1560

catttaggtc ccaaatcgcc ccagccccta taggatccta cgtggcactg atgtggcatg 1620

ccacacggac aagacgtggc atcattttga ctaacaaatg aaacccattt atctttttct 1680

tcttttctta tcttttcctc ctcctctttt ttttctttct tctccttttt ttttcttttc 1740

ccgagtagaa gaaaggaaaa aaaaagaaga atgagaagaa aacgaagaaa aaagaaggga 1800

aaaaggaaga aaaggacata tcacgtccat atggcatgcc atatcagcgc cacataggat 1860

tctatagggg ctatgtcgat ttgggaccta aatgatacac tttgacaagt tctggaacct 1920

agatgtgcat tttgagagtt tggggaccta gatgacacaa ccttacaagt ttaaggaccg 1980

cctatgcact ttactcttaa tttaagatgc tgatggtgtt ataccatcta ctcagtttga 2040

accctgaagc taaatattta tttatatcca ttatccacac gttctttgaa atacattacc 2100

gacagtttgt tgtatatact tgattaagac atcaattgat taagcacacg tatgtcctat 2160

taaacagttt gcactgtttg atgcagccat ggacatctcc tcagacttaa ctgaacttgg 2220

aaagactcct gtcactgtta tttcagctgg tgtgaaatct attttggaca taccacggac 2280

acttgagtac ttggtattac ctatcactcc cactcttcaa aagaatggct ctttgatctg 2340

ttaaaagtga acttccgtca gttcatgtag attgttttct tgttagaaca ttggatactt 2400

cacacactgt gtatcagtat tttctggatt ctgttcatga agtatgagtg gagcagctgt 2460

tttcaggggc tctccaacaa aattctgtag tcatatctgt tagaccactc tgatatagga 2520

atactaatgt agcattataa tttaaatatg aagtattaca aaacaaggtt tacctagtag 2580

caaagcaaaa aatgctgtgg aattggtagc ttatttttac tcctagtgat gtgctgccat 2640

aagtatgctg ttagctgcac cgttactatg ataggatgat acactgtgca aattacagag 2700

ccaggatctg atacagtaag aaaccaggaa ccagaaatta gttaccacga aaattagctc 2760

acttcctatg tattttttgt tgttatattt ccctcaagaa atagaatgct gttgcatcag 2820

aacctgaaag ttttctcatg tccatgataa ctccatccag acaagtaaaa ctgctagatc 2880

tacaactgag ggtttatagt tttccagaat catacgtttg ttcattttat tctccataat 2940

ctacgaccat ccttttcaag taagtcatga caattttctg gtgtttcttg gtatagacaa 3000

gttatttctt taggttttac tcgttaaatg tgctatattt gaaatttggt gtatttctgg 3060

ctaggcattt caatgaatgc aatgttgttt ggtgctcaat cgtataggtt aactgattgc 3120

attggcagga aactcaagga gtaacggttg ctgcttacaa aaccaatgaa tttcctgctt 3180

tctttacaga agtcagcgga tgtaaggtag aataatttgc ttatgtaaaa tgtttataag 3240

ctatatttaa tttttgtttt gtttgtttaa ggagattttc ttttctgtaa tctggtgtga 3300

atctgtataa aaaagaagag ctggaaatga gtatgggtgt tgatttttca atgttgtgta 3360

ttgtgttgat ctgaaggtcc cagaatcttt cctttatata ttttgccatg agcccttggt 3420

acagtatctt ttgtctcact gtactgcagt gttaggatgt ttgtactaac tggctcctgt 3480

ctgcttaatt taggtgccat gtcgcgttga ttctcccgaa gagtgtgcca agataatatg 3540

taagtattaa agttcgcatt taccccatct gtattcatat ctgtatcatt tgtgcgatat 3600

tggtttgaca tgcactgttg gcacatgatc cattaacccg aactgattga actccagcag 3660

acatccaata ccttttgacc tttttactct gttggttaca gaaagctact ggccaatgtt 3720

aattcagaat cacgtaaatt caacaccaat atcctattag aatctacaat tgagtcagca 3780

taagattcag aactgaaagc agcacataac acgaatcggg agttcactat tgtatagagt 3840

ttgattttat cctatgaatt actataactc aactggaaaa agaatttatt gtaacacaga 3900

gtttatcagc attgctgatt tatatctatt ttttacagat gcaaacaaga atttacatct 3960

aggatctggg attttgattg ctgtgccgat tcccaaggaa catgcagctt caggaaatgc 4020

tatagagtct gcaatacaga aagccctcaa ggaagcagag tattgtcctt actcccaacc 4080

tcctgctctc tcactttatc ttttctgtgt atttgtgata ctaacagaaa tgatatctaa 4140

tgactttcta tgttgtttca gggataaaaa tataataggc aacgcgatca ctcccttcat 4200

gcttgacaga gtgaaagtac taactggacg atcttcgcta gaagccagta tcctacaaat 4260

ttaatttcaa actttgctgt attttgaacc acgatgattt tcgtatttcc ctgtagtttt 4320

gagcattgat tagctattta tttctatttc aacatgcaat ttggcatttg gatcttttca 4380

agttggactt tatgagagaa aaatcaaaag gttcaaacgt ttagatgaat aacatctgat 4440

ttccccctct tgttgtttcc tgtgtcaata gaaacttctc cttagcatat tcagatattg 4500

cgcttgtaaa gaacaatgct cttgttggtg ctaaaattgc tgtggccctt tctgatcttc 4560

accagagagt aacaaacagt aaggttctct catcaataat aatagtaaaa tcctaattct 4620

gtaattatct ctacaactaa atacttaggc atcctggttc ataaagattt gcaaggttat 4680

ctgttcttct tgcatgtttt tagtttttac tggatttagt ctactgtctg tgtttattgt 4740

tggagctaga ccctagactt gtgatcacac tcacgtctgc tctgggccag tgatttgctt 4800

ttttatgtga gatatcacac tagcatctcc tctgcctaca tgttcaattg agacctaaca 4860

attttgaact tgctgtaaca ggatttcgga ggtctgcctt atagagtgca tgtacaaagg 4920

caagcgaggt ctgaaacatg gggcatccta ttcatcctca caatgtatgc ttgtacaact 4980

agttggaaac ttgtagcttc atccttttct ggcactatat aaatgaaacc tgaggtgcga 5040

gtgcatgatt tgtagcgaga tttgctactg tagacttaaa ttagtacatt ccactccagc 5100

ataacgtgtt cttcactttt tcgggcgtgt tcttcacttt tttgttaatc tgatcttctg 5160

ctttcacctt gaaaacttga aattaatttg aactgggcat tcagtcctcc tatttggagt 5220

gcatgaactg ttgtcaaact aatgtggaat ttgtgacttg tc 5262

<210> 2

<211> 327

<212> PRT

<213> （Oryza sative）

<400> 2

Met Ser Pro Ser Ser Ser Ser Ser Ser Thr Gly Pro Met Gly Val Ala

1 5 10 15

Val Ser Pro Glu Val Glu Ala Ala Leu Ala Arg Gly Gly Ala Val Val

20 25 30

Ala Leu Glu Ser Thr Ile Ile Cys His Gly Met Pro Tyr Pro Lys Asn

35 40 45

Leu Gln Thr Ala Met Glu Val Glu Ala Val Val Arg Glu Asn Gly Ala

50 55 60

Val Pro Ala Thr Ile Ala Ile Leu Asn Gly Val Pro His Val Gly Leu

65 70 75 80

Ser Gly Glu Gln Leu Lys Ser Leu Ala Val Ser Gly Arg Gln Phe Gln

85 90 95

Lys Thr Ala Arg Arg Asp Ile Ala His Val Val Ala Ser Gly Gly Asn

100 105 110

Gly Ala Thr Thr Val Ser Ala Thr Met Phe Phe Ala His Lys Val Gly

115 120 125

Ile Pro Ile Phe Val Thr Gly Gly Ile Gly Gly Val His Arg Asn Gly

130 135 140

Glu Gln Thr Met Asp Ile Ser Ser Asp Leu Thr Glu Leu Gly Lys Thr

145 150 155 160

Pro Val Thr Val Ile Ser Ala Gly Val Lys Ser Ile Leu Asp Ile Pro

165 170 175

Arg Thr Leu Glu Tyr Leu Glu Thr Gln Gly Val Thr Val Ala Ala Tyr

180 185 190

Lys Thr Asn Glu Phe Pro Ala Phe Phe Thr Glu Val Ser Gly Cys Lys

195 200 205

Val Pro Cys Arg Val Asp Ser Pro Glu Glu Cys Ala Lys Ile Ile Tyr

210 215 220

Ala Asn Lys Asn Leu His Leu Gly Ser Gly Ile Leu Ile Ala Val Pro

225 230 235 240

Ile Pro Lys Glu His Ala Ala Ser Gly Asn Ala Ile Glu Ser Ala Ile

245 250 255

Gln Lys Ala Leu Lys Glu Ala Glu Asp Lys Asn Ile Ile Gly Asn Ala

260 265 270

Ile Thr Pro Phe Met Leu Asp Arg Val Lys Val Leu Thr Gly Arg Ser

275 280 285

Ser Leu Glu Ala Asn Ile Ala Leu Val Lys Asn Asn Ala Leu Val Gly

290 295 300

Ala Lys Ile Ala Val Ala Leu Ser Asp Leu His Gln Arg Val Thr Asn

305 310 315 320

Arg Phe Arg Arg Ser Ala Leu

325

<210> 3

<211> 22

<212> DNA

<213> （人工序列）

<400> 3

tacagaaagc cctcaaggaa gc 22

<210> 4

<211> 22

<212> DNA

<213> （人工序列）

<400> 4

aacaacaaga gggggaaatc ag 22

<210> 5

<211> 22

<212> DNA

<213> （人工序列）

<400> 5

cagaagtcag cggatgtaag gt 22

<210> 6

<211> 20

<212> DNA

<213> （人工序列）

<400> 6

ggaatcggca cagcaatcaa 20

<210> 7

<211> 43

<212> DNA

<213> （人工序列）

<400> 7

ggatcttcca gagatgaatt cgttgaagaa ctcgctgtcc gtg 43

<210> 8

<211> 44

<212> DNA

<213> （人工序列）

<400> 8

ctgccgttcg acgataagct tgtcgtcagt cctcgcatta ttca 44

Claims (3)

1.一种水稻花器官发育调控基因PEH1的应用，其特征在于：所述基因PEH1由如SEQ IDNo:1所示的核苷酸序列组成，所述基因PEH1应用于水稻的花器官发育调节。

2.一种水稻花器官发育调控基因PEH1的质粒、植物表达载体、宿主细胞应用于水稻的花器官发育调节，所述基因PEH1由如SEQ ID No:1所示的核苷酸序列组成。

3.一种水稻花器官发育调控基因PEH1编码的蛋白质的应用，其特征在于：所述蛋白质由如SEQ ID No:2所示的氨基酸序列组成，所述蛋白质应用于水稻的花器官发育调节。

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