CN107630031B - 一种调控植物育性的方法和体系 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种育性基因及其应用，属于生物技术领域，具体涉及植物杂交育种方法，包括不育系繁殖和杂交种子制备，更具体地涉及一个育性基因FL2及其突变体及其在杂交育种中的应用。

Description

一种调控植物育性的方法和体系
本申请是申请日为2013年11月7日的中国专利申请201380004377.8“一种育性基因及其应用”的分案申请。
技术领域
本发明属于生物技术领域，具体涉及植物杂交育种方法，包括不育系繁殖和杂交种子制备，更具体地涉及一个育性基因FL2及其突变体及其在杂交育种中的应用。
技术背景
杂交育种是提高农作物生产的有效途径，杂交种通常比常规种具有明显的产量、抗性和适应性优势，杂交种的选育通常也比常规种选育周期短、见效快。目前杂交育种已经成为许多作物的主要育种方法。
作物雄性不育系的选育是杂交育种的关键环节。雄性不育系是雄配子发育缺陷、雌配子发育正常的植物个体，作为母本接受来自父本的花粉。雄性不育系的选育需要考虑几个因素：1、杂交配组：不育系与相应的父本植物组合产生具有优良性状的杂交后代；2、不育系的繁殖：不育系能在一定条件下恢复育性使其得到保持；3、不育系自身繁殖以及杂交制种效率：好的不育系必须易于繁殖，而且杂交制种产量高。目前用于水稻杂交育种的雄性不育系包括细胞质不育系和细胞核不育系。细胞质雄性不育杂交育种体系涉及雄性不育系、恢复系和保持系，即所谓的三系法。三系杂交需要有特定的恢复系和保持系，不但制种过程复杂，还大大限制了杂种优势对不同品种资源的利用。与三系法对应的二系法利用核基因控制的不育系和该不育系在特定生长环境条件下恢复育性的特点，使恢复系和保持系合二为一。与“三系法”相比，“两系法”具有明显的优势，既省去了保持系而简化了杂交种子的生产程序，且大大扩展了父本的选择范围，可以将各种优良性状组合到杂交后代中。
用于两系杂交的不育系的关键特性是：在一定的条件下不育系保持不育性，可用于杂交制种；而条件改变时不育系可恢复育性自身繁殖，达到保持该不育系的目的。目前两系杂交中采用的不育系多为光温敏不育系，其育性受温度和光照变化影响，这些环境因素的不稳定会影响不育系的稳定性，导致自交结实，降低了杂交种子的纯度，从而使制种风险增加。而且利用目前技术所能选用的用于两系杂交的不育系十分有限，比如粳稻品种中几乎没有很好的两系杂交组合，限制了品种资源的充分利用。
为了解决目前水稻杂交种育种方法中存在的缺陷，如不育系的稳定性、杂交品种资源的局限性、制种技术复杂、制种成本高等技术瓶颈，人们正在尝试新的杂交育种技术，新型的杂交育种技术将充分利用隐性核基因控制的雄性不育基因，构建育性稳定不受环境影响的不育系，解除环境因素对杂交育种的制约，消除生产上的潜在风险；同时，所利用的隐性核不育基因应该适用于绝大多数品种，使杂种优势资源利用大幅提高，解决杂种优势的资源利用问题；本发明即提供了一种作物育性基因以及基于该基因突变所产生的雄性不育系，该不育系的育性稳定、不受环境条件影响、能够被野生型转基因恢复。该基因以及该基因突变产生的不育系为构建新型杂交育种体系提供了必要的元件。
发明简述
本发明提供了一种DNA序列，所述DNA序列具有调控植物育性的功能，其特征在于，所述DNA序列选自下列组的序列之一：
a)具有SEQ ID NO：1、5或27所示的核苷酸序列；
b)具有SEQ ID NO：10或11所示的核苷酸序列；
c)具有SEQ ID NO：13或14所示的核苷酸序列；
d)具有SEQ ID NO：16或17所示的核苷酸序列；
e)具有SEQ ID NO：19所示的核苷酸序列；
f)具有SEQ ID NO：21或22所示的核苷酸序列；
g)在严格条件下能够与(a)-(f)之任一所述序列的DNA杂交的DNA序列；或
h)与(a)-(g)之任一所述序列互补的DNA序列。
上述DNA序列编码的氨基酸序列如SEQ ID NO：2、6、8、12、15、18、20或23所示。
本发明还提供了一种表达盒，其特征在于所述表达盒包含上述的DNA序列。
本发明还提供了一种表达载体，其特征在于所述表达载体包含上述的表达盒。
本发明还提供了一种工程菌，其特征在于所述工程菌包含上述的表达载体。
本发明还提供了一种基因在植物育性调控中的应用，其特征在于，所述育性调控基因的核苷酸序列选自下列组的序列之一：
a)具有SEQ ID NO：1、5或27所示的核苷酸序列；
b)具有SEQ ID NO：10或11所示的核苷酸序列；
c)具有SEQ ID NO：13或14所示的核苷酸序列；
d)具有SEQ ID NO：16或17所示的核苷酸序列；
e)具有SEQ ID NO：19所示的核苷酸序列；
f)具有SEQ ID NO：21或22所示的核苷酸序列；
g)在严格条件下能够与(a)-(f)之任一所述序列的DNA杂交的DNA序列；或
h)与(a)-(g)之任一所述序列互补的DNA序列。
本发明还包括一种通过突变育性调控基因SEQ ID NO：1、5、10、11、13、14、16、17、19、21、22或27获得雄性不育材料的方法。
本发明中所述的“突变”包括在育性调控基因的核苷酸序列上进行取代、缺失或添加一个或多个核苷酸。
本发明还提供了一种恢复由相应的SEQ ID NO：1、5、10、11、13、14、16、17、19、21、22或27所示基因突变所导致的雄性不育，使雄性不育突变体恢复成可育的方法。
本发明还包括一种突变体材料的应用，其特征在于所述突变材料是由核苷酸序列的突变所造成，所述核苷酸序列如SEQ ID NO：1、5、10、11、13、14、16、17、19、21、22或27所示。
上述“突变”可以是点突变，也可以是DNA缺失或***突变，也可以是通过RNAi、定点突变等基因沉默手段产生。
本发明还提供了将上述材料和DNA序列应用于育种中的方法，更具体地所述应用是指将突变体植株作为不育系母本，与恢复系杂交，生产杂交种子。
本发明还提供了一种启动子，所述启动子具有花药特异表达的特性，其核苷酸序列如SEQ ID NO：3或9所示，本发明还包括包含上述启动子的表达盒、载体和/或工程菌株。
本发明还提供了一种在植物中表达目的核苷酸序列的方法，所述方法包括向植物体导入DNA构建体，所述DNA构建体含有启动子及操作性连接于所述启动子的目的核苷酸序列，其中所述启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO：3或9所示。
所述的“目的核苷酸序列”可以是结构基因、调节基因、结构基因的反义基因、调节基因的反义基因或者能够干扰内源基因表达的小RNA，其在花粉发育晚期的特异性表达可以调节花粉的育性及花粉萌发。
本发明还包括上述DNA序列和或启动子在以下(a)至(d)中任一项中的应用：
(a)培育植物品种或品系；
(b)培育授粉受精能力增强的植物品种或品系；
(c)培育授粉受精能力消弱的植物品种或品系；
(d)培育雄性不育植物品种或品系。
本发明还提供了一种用于保持雄性不育植株的纯合隐性状态的方法，所述方法包括：
a)提供第一植株，其包含FL2基因的纯合隐性等位基因，并且其是雄性不育的；
b)向第一植株中引入下述构建体，形成第二植株，所述第二植株包含FL2基因的纯合隐性等位基因和所述构建体，且构建体在第二植株中为半合状态，所述构建体包含：
i)第一核苷酸序列，其包含FL2核苷酸序列，当在第一植株中表达时其将恢复雄性生育力；
ii)第二核苷酸序列，当其表达时，会抑制所述第二植株中可育雄性配子的形成或功能，具体为花粉失活基因ZM-PA；以及
c)用所述第二植株的雄性配子使所述第一植株受精，以产生保持了所述第一植株纯合隐性状态的后代。
附图说明
图1OsFL2突变体和野生型黄华占小花形态。
图2OsFL2突变体和野生型黄华占花药形态。
图3OsFL2突变体和野生型黄华占花粉染色分析。
图4OsFL2突变体和野生型黄华占雌器官形态比较。
图5OsFL2突变体柱头外露情况，箭头指露出的柱头。
图6为黄华占OsFL2、OsFL2突变体和日本晴OsFL2的cDNA序列比对结果，其中HHZ表示黄华占OsFL2序列，Mutant表示OsFL2突变体序列，Nip表示日本晴中的OsFL2序列。
图7为黄华占OsFL2、OsFL2突变体和日本晴OsFL2的蛋白质序列比对结果，其中HHZ表示黄华占OsFL2序列，Mutant表示OsFL2突变体序列，Nip表示日本晴中的OsFL2序列。
图8OsFL2在不同水稻组织器官中的表达水平分析。
图9OsFL2基因的启动子表达载体。
图10OsFL2基因的启动子驱动GUS基因在水稻花药中特异表达。
图11水稻雄性不育突变体(OsFL2)的转基因功能互补载体。
图12OsFL2基因的RNAi干扰载体。
图13OsFL2基因在RNAi干扰载体的转基因植株的幼穗花药中的表达水平，其中1-10代表转基因植株，11代表野生型植株。
图14OsFL2基因编码的蛋白与大麦、高粱、小米(谷子)、二穗短柄草、玉米基因组中的同源蛋白的序列比对图。
图15是pZN3载体图。
图16显示了染色后的可育花粉粒和不可育花粉粒。
图17为转基因植株所收获的种子的荧光分离比分析，该图表明种子均显示1：1的分离比。
发明详述
本文提到的所有参考文献都通过引用并入本文。
除非有相反指明，本文所用的所有技术和科学术语都具有与本发明所属领域普通技术人员通常所理解的相同的含义。除非有相反指明，本文所使用的或提到的技术是本领域普通技术人员公知的标准技术。材料、方法和例子仅作阐述用，而非加以限制。
本发明包括一种育性相关基因及其核苷酸和蛋白序列，还包括通过操作该基因在调控植株雄性生育力中的应用。非限制性地举例而言，下文描述的任何方法都可与本发明所提供的相应核苷酸序列一起使用，例如，将所述育性基因的突变体序列引入植株以导致植株雄性不育、使植株内源序列突变、向植株中引入该序列的反义序列、使用发卡形式、或将其与其它核苷酸序列连接起来调控植株的表型，或者是本领域技术人员已知的可用于影响植株的雄性生育力的多种方法中的任一方法。
本发明所提供的育性基因FL2，是一个花粉发育相关的基因。在水稻中该育性基因位于第10号染色体上，其在籼稻中的核苷酸序列如SEQ ID NO：1、4或27所示，氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示；在粳稻中其核苷酸序列如SEQ ID NO：5所示，其氨基酸序列如SEQ IDNO：6所示；在大麦中该育性基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：10或11所示，其氨基酸序列如SEQ ID NO：12所示；在高粱中该育性基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：13或14所示，其氨基酸序列如SEQ ID NO：15所示；在玉米中该育性基因ZmFL2的核苷酸序列如SEQ ID NO：16或17所示，其氨基酸序列如SEQ ID NO：18所示；在谷子中该育性基因的核苷酸序列如SEQ IDNO：19所示，其氨基酸序列如SEQ ID NO：20所示；在二穗短柄草中该育性基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：21或22所示，其氨基酸序列如SEQ ID NO：23所示。
本发明还包括下列组的序列之一：a)与上述FL2基因序列具有至少90％(优选为至少95％)序列相似性，且具有相同功能的DNA序列；b)在严格条件下能够与(a)所述序列的DNA杂交的DNA序列；c)与上述任一所述序列互补的DNA序列。
上述所述育性基因，可从各种植物中分离获得。本领域技术人员应该知晓，本发明所述的育性恢复基因包括与FL2基因高度同源，并且具有同样的育性调控功能的高度同源的功能等价体序列。所述高度同源的功能等价体序列包括在严谨条件下能够与本发明所公开的FL2基因的核苷酸序列杂交的DNA序列。本发明中所使用的“严谨条件”是公知的，包括诸如在含400mM NaCl、40mM PIPES(pH6.4)和1mM EDTA的杂交液中于60℃杂交12-16小时，然后在65℃下用含0.1SDS、和0.1％SSC的洗涤液洗涤15-60分钟。
功能等价体序列还包括与本发明所公开的FL2基因所示的序列有至少90％、95％、96％、97％、98％或99％序列相似性，且具有育性调控功能的DNA序列，可以从任何植物中分离获得。其中，序列相似性的百分比可以通过公知的生物信息学算法来获得，包括Myers和Miller算法(Bioinformatics，4(1)：11-17，1988)、Needleman-Wunsch全局比对法(J.Mol.Biol.，48(3)：443-53，1970)、Smith-Waterman局部比对法(J.Mol.Biol.，147：195-197，1981)、Pearson和Lipman相似性搜索法(PNAS，85(8)：2444-2448，1988)、Karlin和Altschul的算法(Altschul等，J.Mol.Biol.，215(3)：403-410，1990；PNAS，90：5873-5877，1993)。这对于本领域技术人员来说是熟悉的。
本发明所述的基因序列可以从任何植物中分离获得，包括但不限于芸苔属、玉米、小麦、高粱、两节荠属、白芥、蓖麻子、芝麻、棉籽、亚麻子、大豆、拟南芥属、菜豆属、花生、苜蓿、燕麦、油菜籽、大麦、燕麦、黑麦(Rye)、粟、蜀黍、小黑麦、单粒小麦、斯佩尔特小麦(Spelt)、双粒小麦、亚麻、格兰马草(Gramma grass)、摩擦禾、假蜀黍、羊茅、多年生麦草、甘蔗、红莓苔子、番木瓜、香蕉、红花、油棕、香瓜、苹果、黄瓜、石斛、剑兰、菊花、百合科、棉花、桉、向日葵、芸苔、甜菜、咖啡、观赏植物和松类等。优选地，植物包括玉米、大豆、红花、芥菜、小麦、大麦、黑麦、稻、棉花和高粱。
本发明还提供了通过影响FL2的核苷酸序列或者通过调控FL2基因的转录表达从而影响植株育性的方法。所述影响植株育性是指通过调控FL2基因的表达，从而使所述植株的育性发生改变，如导致植株雄性不育。具体地，取决于具体应用需求，可以通过多种方法来影响FL2基因在植物体内的表达，从而达到调控植株雄性育性的效果。更具体地，调控FL2基因的表达可以使用许多本领域普通技术人员可获得的工具进行，例如，通过突变、诱变、反义基因的转入、共抑制或发夹结构的引入等，都可以用于破坏FL2基因的正常表达，从而获得雄性不育的植株。另一方面，本发明还包括通过将野生型FL2的核苷酸序列引入植株来恢复FL2表达被破坏的植株的雄性生育力。
本发明还提供了一种FL2基因的不育突变体序列及其雄性不育突变体材料。更具体地，所述雄性不育突变体材料是通过突变水稻内源的FL2基因，或突变与其高度同源的基因的核苷酸序列，使该植物体丧失雄性育性的过程。所述“突变”包括但不限于以下方法，如用物理或化学的方法导致的基因突变，化学方法包括用EMS等诱变剂处理所导致的诱变，所述突变还可以是点突变，也可以是DNA缺失或***突变，还可以是通过RNAi、定点突变等基因沉默手段产生。
具体地，本发明还提供了一种水稻雄性不育突变体，其含有突变后的雄性不育基因，所述突变后的雄性不育基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：7所示，氨基酸序列如SEQ IDNO：8所示。与野生型相比，在不育突变体中，该基因编码区的第1688位点由G突变为A(图6)，导致对应的其编码的蛋白序列的第563位点的氨基酸由甘氨酸(G)变为天门冬氨酸(D)。本领域技术人员应该知晓，可以将所述核苷酸序列SEQ ID NO：7构建到植物表达载体，进行植物转化，从而获得新的转基因的雄性不育突变体材料。
本发明还提供了一种FL2基因的启动子，所述启动子具有在花粉中特异表达的功能，相应启动子的序列为FL2基因从ATG到上游700bp至2500bp左右的核苷酸序列。更具体地，在水稻中，所述OsFL2基因启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO：3或SEQ ID NO：9所示。将SEQ ID NO：3或SEQ ID NO：9与报告基因GUS相连，转化植物，检测分析转基因植株中的GUS表达活性和表达模式，通过在转基因植株的根、茎、叶和花中都进行GUS染色分析，结果发现OsFL2启动子驱动GUS基因主要在水稻花药中表达,更具体地在花药发育的P7期特异性的高表达。说明本发明所提供的SEQ ID NO：3或SEQ ID NO：9启动子是一个花药特异性表达的启动子。
本发明所提供的植物花粉特异表达启动子，含有序列表中SEQ ID NO：3或SEQ IDNO：9所示的核苷酸序列，或包含与SEQ ID NO：3或SEQ ID NO：9中所列核苷酸序列具有90％以上相似性的核苷酸序列，或包含来源于SEQ ID NO：3或SEQ ID NO：9序列上的100个及100以上连续的核苷酸片段，并且可以驱动与该启动子操作性连接的核苷酸序列在植物花粉中的表达。含有上述序列的表达载体、转基因细胞系以及宿主菌等均属于本发明的保护范围。扩增本发明所公开的SEQ ID NO：3或SEQ ID NO：9启动子的任一核苷酸片段的引物对也在本发明的保护范围之内。
本发明所提供的启动子核苷酸序列还可用于从水稻以外的其它植物中分离相应序列，尤其是从其他单子叶植物中进行同源克隆。根据这些相应序列与本文所列启动子序列间的序列同源性，或与本启动子基因的同源性，使用如PCR、杂交等技术来鉴别分离这些相应序列。因此，根据它们与本发明所列的SEQ ID NO：3或SEQ ID NO：9启动子序列(或其片段)间的序列相似性而分离的相应片段，也包括在实施方案中。
本发明所述的“启动子”是指一种DNA调控区域，其通常包含能指导RNA聚合酶II在特定编码序列的合适转录起始位点起始RNA合成的TATA盒。启动子还可包含其它识别序列，这些识别序列通常位于TATA盒的上游或5’端，通常被称为上游启动子元件，起调控转录效率的作用。本领域技术人员应该知晓，虽然已经鉴定了针对本发明公开的启动子区域的核苷酸序列，但是分离和鉴定处于本发明鉴定的特定启动子区域的TATA盒上游区域的其它调控元件也在本发明的范围内。因此，本文公开的启动子区域通常被进一步界定为包含上游调控元件，例如用于调控编码序列的组织表达性和时间表达功能的那些元件、增强子等。以相同的方式，可以鉴定、分离出使得能在目标组织(例如雄性组织)中进行表达的启动子元件，将其与其它核心启动子一起使用，以验证雄性组织优先的表达。核心启动子指起始转录所需的最小限度的序列，例如被称为TATA盒的序列，这是编码蛋白质的基因的启动子通常都具有的。因此，可选地，FL2基因的上游启动子可与其自身的或来自其它来源的核心启动子关联使用。
核心启动子可以是任何一种已知的核心启动子，例如花椰菜花叶病毒35S或19S启动子(美国专利No.5,352,605)、泛素启动子(美国专利No.5,510,474)、IN2核心启动子(美国专利No.5,364,780)或玄参花叶病毒启动子。
所述基因启动子的功能可以通过以下方法进行分析：将启动子序列与报告基因可操作性连接，形成可转化的构建体，再将该构建体转入植株中，在获得转基因后代中，通过观察报告基因在植物各个组织器官中的表达情况来确认其表达特性；或者将上述构建体亚克隆进用于瞬时表达实验的表达载体，通过瞬时表达实验来检测启动子或其调控区的功能
用来测试启动子或调控区域功能的适当表达载体的选择将取决于宿主和将该表达载体引入宿主的方法，这类方法是本领域普通技术人员所熟知的。对于真核生物，在载体中的区域包括控制转录起始和控制加工的区域。这些区域被可操作地连接到报告基因，所述报告基因包括YFP、UidA、GUS基因或荧光素酶。包含位于基因组片段中的推定调控区的表达载体可以被引入完整的组织，例如阶段性花粉，或引入愈伤组织，以进行功能验证。
此外，本发明的启动子可与并非FL2基因的核苷酸序列相连，以表达其它异源核苷酸序列。本发明的启动子核苷酸序列及其片段和变体可与异源核苷酸序列一起组装在一个表达盒中，用于在目的植株中表达，更具体地，在该植株的雄性器官中表达。所述表达盒有合适的限制性酶切位点，用于***所述启动子和异源核苷酸序列。这些表达盒可用于对任何植株进行遗传操作，以获得想要的相应表型。
本发明所公开的FL2启动子，更具体地为水稻中的FL2启动子，可用于驱动下列异源核苷酸序列的表达，以使转化的植株获得雄性不育的表型。所述异源核苷酸序列可编码促使碳水化合物降解的酶或修饰酶、淀粉酶、脱支酶和果胶酶，更具体的如α淀粉酶基因、茁长素(auxin)，rot B、细胞毒素基因、白喉毒素、DAM甲基化酶、亲和素，或者可选自原核调控***，还可以是显性的雄性不育基因。
在某些实施方式中，本发明中所提到的可操作地连接在本发明启动子下游的核酸，其中所述的“核酸”可以是操作性连接于本文所公开的启动子之上的结构基因、调节基因、结构基因的反义基因、调节基因的反义基因或者能够干扰内源基因表达的小RNA。
更具体地，可以将本发明所提供的育性调控基因SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：5构建到启动子SEQ ID NO：3或SEQ ID NO：9的下游，从而驱动该育性调控基因在花粉中的特异表达，或是通过RNAi的技术原理，构建由SEQ ID NO：3或SEQ ID NO：9启动的可以沉默SEQ IDNO：1基因的RNAi载体，从而获得SEQ ID NO：1基因的雄性不育突变体。
本发明所提供的启动子序列可分离自任何植物，包括但不限于芸苔属、玉米、小麦、高粱、两节荠属、白芥、蓖麻子、芝麻、棉籽、亚麻子、大豆、拟南芥属、菜豆属、花生、苜蓿、燕麦、油菜籽、大麦、燕麦、黑麦(Rye)、粟、蜀黍、小黑麦、单粒小麦、斯佩尔特小麦(Spelt)、双粒小麦、亚麻、格兰马草(Gramma grass)、摩擦禾、假蜀黍、羊茅、多年生麦草、甘蔗、红莓苔子、番木瓜、香蕉、红花、油棕、香瓜、苹果、黄瓜、石斛、剑兰、菊花、百合科、棉花、桉、向日葵、芸苔、甜菜、咖啡、观赏植物和松类等。优选地，植物包括玉米、大豆、红花、芥菜、小麦、大麦、黑麦、稻、棉花和高粱。
本发明还包括含有FL2基因和/或其启动子的构建体，所述构建体包括通常所说的载体或表达盒。所述构建体中的启动子可以是天然启动子或被取代的启动子，其将驱动所连核苷酸序列在植株中的表达。构建体中的启动子可以是诱导型启动子。当将FL2基因的核苷酸序列与另一个启动子相连，优选的是，该启动子在花粉发育早期充分驱动该序列的表达,例如可以在花粉发育的P7期特异性表达。具体地，可使用的启动子的种类包括组成型病毒启动子，例如花椰菜花叶病毒(CaMV)19S和35S启动子，或玄参花叶病毒35S启动子，或泛素启动子。
组织特异表达启动子可用于靶向特定的植物组织中增强转录和/或表达。启动子可在目标组织中表达也在其它植物组织中表达，可在目标组织中强烈表达以及比其它组织程度低得多的表达，或者可高度优选在目标组织中表达。在一种实施方式中，启动子是偏好在植物的雄性或雌性组织中特异表达的类型。本发明不必须在方法中使用任何特定的雄性组织优先型启动子，本领域技术人员已知的很多此类启动子中的任何都可以使用。本文描述的天然的FL2启动子是可使用的启动子的一个例子。另一种此类启动子是5126启动子、MS45启动子、MS26启动子、BS92-7启动子、SGB6调控元件和TA29启动子等，其偏好于指导其连接的基因在植物雄性组织中的表达。某些构建体中还可以包括配子组织优先表达启动子。雄性配子优先表达启动子包括PG47启动子以及ZM13启动子。
上述构建体中还可包括其它组分，这主要取决于载体构建的目的和用途，例如可进一步包括选择标记基因、靶向或调控序列、稳定序列或引导序列、内含子等。表达盒还将在目标异源核苷酸序列的3’端包括在植物中具有功能的转录和翻译终止子。终止子可以是本发明所提供基因的终止子，也可以是来自外源的终止子。更具体地，上述终止子可以是胭脂氨酸合酶或章鱼碱合酶终止区域。
在希望将异源核苷酸序列的表达产物引向特定细胞器，例如质体、造粉体，或者引向内质网，或在细胞表面或细胞外分泌的情况下，表达盒还可包含用于编码转运肽的核苷酸序列。此类转运肽是本领域所公知的，其包括但不限于Rubisco的小亚基、植物EPSP合酶、玉米Brittle-1叶绿体转运肽等。
在制备表达盒的过程中，可对多种DNA片段加以操作，以提供处于合适方向，或是处于正确读码框中的DNA序列。为达到此目的，可使用衔接子或接头，将DNA片段连起来，或者进一步包括其它操作，以提供方便的限制性酶切位点等。
进一步地，本发明所提供的构建体中还可包括选择标记基因，用于选择经转化的细胞或组织。所述选择标记基因包括赋予抗生素抗性或对除草剂抗性的基因。合适的选择标记基因包括但不限于:氯霉素抗性基因，潮霉素抗性基因，链霉素抗性基因，奇霉素抗性基因，磺胺类抗性基因，草甘磷抗性基因，草丁嶙抗性基因。所述选择标记基因还可以是红色荧光基因、青色荧光蛋白基因、黄色荧光蛋白基因、荧光素酶基因、绿色荧光蛋白基因、花青甙p1等基因。
本发明所提供的表达盒或载体可被***质粒、粘粒、酵母人工染色体、细菌人工染色体或其他适合转化进宿主细胞中的任何载体中。优选的宿主细胞是细菌细胞，尤其是用于克隆或储存多核苷酸、或用于转化植物细胞的细菌细胞，例如大肠杆菌、根瘤土壤杆菌和毛根土壤杆菌。当宿主细胞是植物细胞时，表达盒或载体可被***被转化的植物细胞的基因组中。***可以是定位的或随机的***。优选地，***通过诸如同源重组来实现。另外，表达盒或载体可保持在染色体外。本发明的表达盒或载体可存在于植物细胞的核、叶绿体、线粒体和/或质体中。优选地，本发明的表达盒或载体被***植物细胞核的染色体DNA中。
本发明还包括所公开的FL2基因及其启动子的应用，在某些应用的实施方式中，可以应用本发明所提供的FL2基因或其启动子来实现FL2或其他类似育性相关基因突变所获得的雄性不育系的繁殖和保持。
具体地，上述雄性不育系的繁殖和保持，是指以纯合隐性核雄性不育突变体为转化受体材料，将紧密连锁的3个目标基因转化至该不育突变体受体植株中。所述3个目标基因分别是育性恢复基因、花粉失活基因和颜色标记筛选基因。其中，育性恢复基因可使不育的转化受体育性恢复，花粉失活基因可使含有转化的外源基因的花粉失活，即失去授精能力，筛选基因可以用于转基因种子和非转基因种子的分拣，分拣出的非转基因种子用作不育系生产杂交种，转基因种子用作保持系来源源不断地、稳定地生产不育系。
更具体地，根据本发明的一个实施例，可以以水稻核隐性不育fl2/fl2突变体为转化受体材料，将紧密连锁的3个目标基因转化至该不育系：其中，育性恢复基因OsFL2可使转化受体育性恢复；花粉失活基因Zm-PA可使含有外源基因的花粉失活，即失去授精能力；荧光色选基因RFP(r)用于转基因种子和非转基因种子的分拣，分拣出的非转基因种子用作不育系生产杂交种，转基因种子用作保持系来源源不断地稳定地生产不育系。由于该技术利用生物技术生产非转基因产品，解决了水稻杂交制种过程中面临的瓶颈问题，即三系法资源利用率低而两系法中不育系育性不稳定的问题。
本发明的所提供的花粉特异表达启动子可用于外源基因在花粉中的特异性表达，从而避免该外源基因在植物其他组织中持续表达所带来的不利影响，还可以用于植物花粉生长发育相关基因的功能分析和鉴定；可用于雄性不育系和恢复系的创建；并可应用于花粉败育实验中，从而避免由植物转基因漂移或花粉逃逸所带来的生物安全问题，对植物雄性不育系和恢复系的创造具有重要意义。
本发明还提供了一种植物的生产方法，其包括：
(1)构建本发明第二方面或第五方面所提供的表达盒；
(2)将步骤(1)获得的表达盒导入植物细胞；
(3)再生出转基因植物；和
(4)选择出转基因植物；并且
(5)任选地，增殖步骤(4)获得的植物以获得后代。
本发明的转基因植物使用植物生物技术领域技术人员已知的转化方法制备。任何方法可被用于将重组表达载体转化进植物细胞中，以产生本发明的转基因植物。转化方法可包括直接和间接的转化方法。合适的直接方法包括聚乙二醇诱导的DNA摄入、脂质体介导的转化、使用基因枪导入、电穿孔、以及显微注射，等。在本发明的具体实施方式中，本发明使用了基于土壤杆菌的转化技术(可参见Horsch RB等(1985)Science 225：1229；WhiteFF，Vectors for Gene Transfer in Higher Plants，Transgenic Plants，第1卷，Engineering and Utilization，Academic Press，1993，pp.15-38；Jenes B等.Techniquesfor Gene Transfer，Transgenic Plants，第1卷，Engineering and Utilization，Academic Press，1993，pp.128-143，等)。土壤杆菌菌株(例如根瘤土壤杆菌或毛根土壤杆菌)包含质粒(Ti或Ri质粒)和T-DNA元件，所述质粒和元件在用土壤杆菌转染后被转移至植物，而T-DNA被整合进植物细胞的基因组中。T-DNA可位于Ri-质粒或Ti-质粒上，或独立地包含在所谓的双元载体中。土壤杆菌介导的转化方法描述于例如中。土壤杆菌介导的转化最适合双子叶植物，但是也适合单子叶植物。土壤杆菌对植物的转化描述于例如中。转化可导致瞬时或稳定的转化和表达。尽管本发明的核苷酸序列可被***落入这些广泛种类中的任何植物和植物细胞中，但是其尤其适用于作物植物细胞。
与现有技术相比，本发明具有如下的有益效果：本发明提供了一种水稻花粉发育基因以及基于该基因突变所产生的雄性不育系，该不育系的育性稳定、不受环境条件影响、能够被野生型转基因恢复。该基因以及该基因突变产生的不育系为构建第三代杂交育种体系提供了必要的元件，该基因突变产生的雄性不育系，用来生产杂交种子，对于突破并改良现有的“三系”和“两系”杂交技术有重要意义。
具体实施方式
下面对本发明的实施例作详细说明，本实施例在以本发明技术方案为前提下进行实施，给出了详细的实施方式和具体的操作过程，但本发明的保护范围不限于下述的实施例。
实施例1、水稻雄性不育突变体(osfl2)筛选
该突变体的获得是通过EMS诱变籼稻黄华占种子(M0)，EMS诱变浓度和时间是0.7％，12小时，来自M0代种子植株结实后混收，获得突变体库(M1)。来自M1代种子的植株在种子成熟期用于筛选，获得不育株。不育株割稻桩再生，再生株在生殖期用I2-KI染色检测花粉发育和染色反应。其中一个突变体表现为无花粉型不育(no pollen)，命名为osfl2。
实施例2、水稻雄性不育突变体(osfl2)遗传分析
osfl2突变体不育株与野生型黄华占杂交，80棵F1代植株全部表现为可育。再将F1代进行自交，获得的300棵F2代植株中，78棵表现为无花粉型不育，222棵植株表型为完全可育，不育与可育植株的分离比接近1：3，显示该突变是由隐性核基因控制。
实施例3、水稻雄性不育突变体(osfl2)育性稳定性分析
为了确定osfl2突变体育性是否受环境光照温度等条件影响，不育株与野生型黄华占杂交产生的F2代植株在深圳、三亚、湖南、北京种植，进一步观察植株育性和表型分离比。在所有区域，不育株：可育株均表现为1：3分离比(表1)，割稻桩再生的不育株仍表现为不育，说明该突变体不育性状不受环境因素影响。
表1：水稻雄性不育突变体(OsFL2)杂交F2代分离比
可育株数 不育株数 χ<sup>2</sup>(3:1)
深圳 88 31 0.034
三亚 104 29 0.150
湖南 65 21 0.000
北京 61 19 0.033
实施例4、水稻雄性不育突变体(osfl2)生殖器官表型分析
与野生型相比，突变体植株生长发育正常，同期开花。外稃和内稃大小、形态、开张尺寸、开张时间与野生型没有差别(图1)。但突变体花药瘦小，呈白色(图2)，花药不开裂，没有花粉，进一步用I2-KI溶液对突变体的花粉进行染色检测，结果如图3所示，野生型的花粉染色正常，而突变体没有花粉。突变体的雌器官(包括子房，花柱，柱头)均比野生型略大(图4)。突变体柱头外露率达89％以上(图5)，而野生型黄华占柱头很少外露。将不育突变体植株与可育植株混播，在自然生长条件下，不育突变体接受可育株异花授粉可以恢复结实，对100株突变体植株的结实率进行统计，结实率均可达40％以上，而在赶粉的条件下，不育突变体植株接受可育株异花授粉，结实率则可达70-80％。进一步观察突变体的种子发育正常，没有裂颖。
实施例5、水稻雄性不育突变体基因的克隆
突变体基因克隆采取Mutmap方法，即利用突变体与原野生亲本杂交构建F2群体，通过重测序进行基因定位的方法。将不育株与野生型黄华占杂交，选取30棵F2代不育植株，取叶片提取基因组DNA，等量混合后用于高通量基因组测序，共获得20Gb基因组序列数据，相当于50x水稻基因组。与野生型黄华占基因组序列比较显示突变基因可能是第10染色体上的Os10g38050等位基因。在野生型黄华占中该基因的编码区全长1767bp，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。SEQ ID NO:1所编码的蛋白含588个氨基酸，其氨基酸序列如SEQ IDNO：2所示。在不育突变体中，该基因编码区的第1688位点由G突变为A(图6)，导致对应的其编码的蛋白序列的第563位点的氨基酸由甘氨酸(G)变为天门冬氨酸(D)(图7)。采用最新的SNP(单核苷酸多态性)研究工具HRM(High Resolution Melt，即高分辨率熔解)分析，进一步验证所有的无花粉植株均携带纯合突变型位点，而可育植株携带纯和野生型或杂合型位点。该位点为纯和野生型的植株自交后代全部可育，该位点为杂合型的植株自交后代表现不育：可育1：3分离。该基因cDNA编码区在粳稻日本晴和野生型黄华占之间存在核苷酸序列多态性(图6)，与黄华占相比，具体为粳稻日本晴在该基因的核苷酸序列的第59-64位的出现一个片段的缺失，具体缺失片段是CCGCCG，第451位的G突变为T，第1371位的G突变为A，导致对应的该基因的氨基酸序列在第20-21位处出现2个氨基酸残基的多态性，第151位的氨基酸残基由丙氨酸A突变为丝氨酸S(图7)，具体的在粳稻日本晴中，该基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：5所示，其编码的氨基酸序列如SEQ ID NO：6所示。进一步分析，该基因在籼稻品种9311和野生型黄华占之间没有多态性。
实施例6、OsFL2基因在水稻各器官中的表达分析
根据OsFL2的cDNA序列设计引物，上游引物为F1:5’-GCCTCACCGTCCTCCTCTAC-3’(SEQ ID NO:33)，下游引物为R1:5’-CGGGTCCGAGAACACCAC-3’(SEQ ID NO:34)，同时以水稻Actin基因作为内参对照设计引物，上游引物为5’-GCTATGTACGTCGCCATCCA-3’(SEQ ID NO:35)，下游引物为5’-GGACAGTGTGGCTGACACCAT-3’(SEQ ID NO:36)。用黄华占水稻材料提取总RNA并合成cDNA模板。采取实时定量PCR方法，分析OsFL2基因在水稻根、茎、叶、外稃、内稃、颖片、雌蕊和幼穗颖花原基分化期(stage6)、幼穗花粉母细胞减数***时期(stage7)及四分体形成阶段(stage8)、小孢子早期(stage9)、小孢子中晚期(stage10)及成熟花粉期(stage12)的表达谱，其结果如图8所示，该基因在幼穗花粉母细胞减数***时期(stage7)特异表达且表达量很高，在花粉母细胞四分体形成阶段(stage8)表达量开始降低，而在根、茎、叶、种子及其它幼穗发育时期表达水平很低。
实施例7、OsFL2基因的启动子表达载体构建及功能分析
OsFL2基因的启动子表达载体(图9)的构建：用引物OsFL2-Pro-F(GGATCCGGATTTCGAGGATCAAGCT，SEQ ID NO:37)和OsFL2-Pro-R(GTCGACTTTCGCCGGGCAAATTCGC,SEQ ID NO:38)扩增水稻基因组得到2520bp的OsFL2基因启动子片段(SEQ ID NO:3)，将该片段用SalI和BamHI双酶切后连入启动子检测载体pHPG中得到pOsFL2-pro载体。通过农杆菌介导的方法转化至野生型水稻愈伤组织中，并筛选再生得到12株转基因水稻植株。通过分析B-半乳糖苷酶的活性分析OsFL2启动子的表达模式，在转基因的植株的根、茎、叶和花中通过GUS染色分析，发现OsFL2启动子驱动GUS主要在水稻花粉中表达，所述启动子的GUS染色结果如图10所示。此外，将启动子SEQ ID NO:9连上GUS进行功能验证发现，其染色结果与SEQ ID NO:3的结果一致，均为花药特异表达型的启动子。
实施例8、水稻雄性不育突变体(osfl2)的转基因功能互补
互补载体的构建(图11)：用引物OsFL2-Res-F(gtttaaacGGATTTCGAGGATCAAGCT，SEQ ID NO:39)和OsFL2-Res-R(ggatccACCCTGCATTTTTTATGCC，SEQ ID NO:40)扩增水稻基因组获得含有OsFL2起始密码子ATG上游的2500bp左右的碱基和终止密码子TGA后的497个碱基的全长序列片段(SEQ ID NO：4)，将该片段用PmeI和BamHI双酶切后连入基因组互补表达载体中得到pOsFL2-Res载体。通过农杆菌介导的方法转化至黄华占osfl2突变体的种子诱导的愈伤组织中，筛选再生得到转基因植株，共获得8株转基因阳性植株，所有转基因阳性植株均表现可育。这些分析进一步证明基因OsFL2参与花粉发育调控，该基因突变导致无花粉表型。
实施例9、OsFL2基因的RNAi干扰的转基因株系的获得与表型分析
OsFL2基因的RNAi干扰载体(图12)的构建：用引物OsFL2-Flag-F(GCGTCGCCGACAACCC，SEQ ID NO:41)和OsFL2-Flag-R(TGGAGAAGGCCCGCGAC，SEQ ID NO:42)扩增水稻cDNA得到474bp的OsFL2基因片段，分别用带有KpnI和BamHI酶切位点的两对扩增引物扩增得到正反向的OsFL2基因片段1和OsFL2基因片段2，酶切连入pRNAi载体中得到pOsFL2-RNAi。通过农杆菌介导的方法转化日本晴的愈伤组织，筛选再生后共获得10棵转基因植株，其中有7株雄性育性出现明显下降。采用实施例6中根据OsFL2和Actin的cDNA设计的引物对进行实时定量PCR，分析OsFL2基因在割稻桩再生植株的幼穗花粉母细胞减数***及四分体形成时期(P7期)中的表达水平，结果显示RNAi干扰载体转基因的不育植株中OsFL2的RNA表达水平明显下降(图13)。这些分析进一步证明基因OsFL2参与花粉发育调控，该基因突变导致无花粉表型。
实施例10、OsFL2突变体植株与恢复系的杂交分析
黄华占OsFL2突变体植株能够被多个生产中常用的恢复系授粉，产生可育种子。部分组合的杂交种子显示出明显的杂种优势，说明该黄华占突变体在杂交育种中有一定的应用价值，可以作为不育系的候选材料加以培育。黄华占OsFL2突变体植株与多个恢复系杂交产生的F2代不育植株，仍表现出柱头高度外露(外露率达60-88％)，说明该突变体基因与柱头外露性状连锁遗传。柱头高度外露性状有利于异花授粉，提高杂交种制种效率。
实施例11、OsFL2基因编码的蛋白与大麦、高粱、玉米基因组中预测的同源蛋白的序列比对
在NCBI数据库中，利用protein blast工具，对水稻OsFL2基因编码的蛋白全序列在蛋白数据库中进行查找，得到了大麦、高粱、玉米、谷子(又称小米)、二穗短柄草的基因组中预测的同源蛋白，将这些蛋白序列进行比对分析，结果显示来自不同植物的同源蛋白都具有非常相似的保守序列，彼此之间同源性很高(图14)，表明该蛋白在植物花的雄性器官发育过程中生物学功能保守，起着非常重要的作用。
其中，在大麦中该育性基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：10或11所示，其氨基酸序列如SEQ ID NO：12所示；在高粱中该育性基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：13或14所示，其氨基酸序列如SEQ ID NO：15所示；在玉米中该育性基因ZmFL2的核苷酸序列如SEQ ID NO：16或17所示，其氨基酸序列如SEQ ID NO：18所示；在谷子中该育性基因的核苷酸序列如SEQID NO：19所示，其氨基酸序列如SEQ ID NO：20所示；在二穗短柄草中该育性基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：21或22所示，其氨基酸序列如SEQ ID NO：23所示。
实施例12、OsFL2基因在新一代杂交育种技术中的应用
OsFL2基因可以用于新一代杂交育种技术，该技术的核心思想是：以水稻核隐性雄性不育突变体为转化受体材料，通过将紧密连锁的3个目标基因转化至不育突变体中，其中，育性恢复基因可使转化受体育性恢复，花粉失活基因可使含有外源基因的花粉失活，即失去授精能力，筛选基因可以用于转基因种子和非转基因种子的分拣，分拣出的非转基因种子即为不育系，而转基因种子用作保持系。通过保持系给不育系授粉杂交，可以在不育系上结实，由此繁殖不育系。而保持系通过自交可以源源不断地得以繁殖。由于该技术利用生物技术生产非转基因产品，解决了水稻杂交制种过程中面临的瓶颈问题，即三系法资源利用率低而两系法中不育系育性不稳定的问题。
根据以上原理，发明人采用水稻OsFL2基因构建了表达载体pZN3。在构建水稻的植物表达载体之前，发明人首先分别对表达载体内的Zm-PA、OsFL2和RFP三个表达盒单独进行了水稻转化，并进一步对各个表达盒的功能进行了验证。结果表明各个表达盒单独转化水稻时，都能够工作良好，达到预期的设计效果。
进一步,发明人通过装配下述DNA元件，构建了图15所示的pZN3载体：
1)以pCAMBIA2300载体为基础；
2)基因表达盒LTP2：RFP(r)-PINII，RFP(r)基因(SEQ ID NO：24)的开放读码框连接于LTP2启动子(SEQ ID NO：25)和PINII终止子(SEQ ID NO：26)之间，重组成RFP(r)的基因表达盒(LTP2：RFP(r)：PINII)；
3)OsFL2基因表达盒，目标基因OsFL2及其启动子和终止子的全长核苷酸序列如SEQ ID NO：4所示，其中OsFL2基因的启动子序列如SEQ ID NO：3所示，其终止子序列如SEQID NO：28所示，OsFL2基因的基因组DNA序列如SEQ ID NO：27所示，其核苷酸序列编码的蛋白氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示；
4)基因表达盒PG47：ZM-BT1：ZM-PA：IN2-1，目标基因ZM-PA(其核苷酸序列如SEQID NO：29所示)的开放读码框连接于启动子PG47(其核苷酸序列如SEQ ID NO：30所示)、转运肽ZM-BT1(其核苷酸序列如SEQ ID NO：31所示)的下游，终止子IN2-1(其核苷酸序列如SEQ ID NO：32所示)的上游。
水稻转化：利用电激法将质粒pZN3转入农杆菌Agl0菌株，利用农杆菌介导法对含有纯合的OsFL2隐性不育位点的黄华占水稻进行遗传转化，得到26株单拷贝转基因植株材料。具体的转化受体材料的获得是通过：使突变体杂合植株结实产生的种子,通过HRM(highresolution melting)方法鉴定分离其中的含有纯合osfl2隐性不育位点的黄华占种子，诱导愈伤进行转化。
转基因水稻植株的花粉育性检测：对上述所得到的26株单拷贝转基因水稻(含有纯合的OsFL2隐性不育位点)植株进行分析发现，转基因植株和非转基因对照植株之间没有明显的形态差异，但是花粉育性明显不同。对pZN3构建体转化水稻得到的转基因植株材料，进行花粉可染率检测，同时对野生型水稻进行花粉可染率检测(图16)。采用的方法为：在水稻开花期，从转基因水稻植株、及其野生型对照植株各随机抽取单株，各株取一朵花，每朵花取1个花药，置于载玻片中央，滴加一滴1％的I2-KI溶液，用镊子和解剖针释放花粉后，盖上盖玻片，在显微镜下观察、计数可染色花粉数和花粉总数，可以着色为深蓝色的为可育花粉，而不能够着色的为败育花粉(图16显示了染色后的可育花粉粒和不可育花粉粒)。分析转基因水稻植株的花粉可染率。结果显示对照植株的可着色的花粉占98％～100％；而多个随机抽取的转基因植株中，正常花粉(可着色)与败育花粉(不能着色)比例接近1：1，表明所构建的保持系可以产生等量的携带外源基因的花粉和不携带外源基因的花粉，即构建体pZN3使转基因株系花粉的50％失活。该结果表明本发明所提供的载体能够达到预期的花粉失活功能。
转基因水稻植株的荧光种子与非荧光种子分离分析：对上述实施例所得到的26株单拷贝转基因水稻植株(含有纯合的OsFL2隐性不育位点)所结T1代种子进行荧光分离比例调查，结果表明这些种子均显示1：1分离比(图17)，即携带外源基因的荧光种子和不携带外源基因的非荧光种子表现为1：1分离，表明本发明所提供的载体各元件作为整体表达良好，可以实现创制和繁殖不育系的目的；其中，OsFL2基因可以恢复雄性不育突变体受体的育性，Zm-PA基因和RFP基因的表达可以分别实现预期的花粉失活功能和种子筛选标记功能。
序列表
<110> 深圳市作物分子设计育种研究院
深圳兴旺生物种业有限公司
<120> 一种调控植物育性的方法和体系
<150> 201210445558.1
<151> 2012-11-09
<160> 42
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 1767
<212> DNA
<213> 水稻(Oryza sativa Indica)
<400> 1
atggcagcac ttggccgcgc gagctcgtcg gcgccggtgc ttgccgccgc cgccgccgcc 60
gccgtgctcc tctcgctctg cctcgccgcg ctctcggaag agcaagagca actggagaac 120
ctgcggttcg tgcggcacgc gcaggacgcg ccgctggtgt cgagctacaa ctacatcgtc 180
atcggcggcg gcacggcggg gtgcccgctg gcggcgacgc tgtcggagca ctcgcgcgtg 240
ctgctgctgg agcgcggcgg cctgccgtac gccaacatgt cgagcgagca gcacttcacg 300
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acgcgggcga gcaacgagta cgtgcgcgcc gccgggtggg acgcgcggct ggtgaactcg 480
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cacgtcaccg gcaccaagat cggcggcacc atcttcgaca actccggcca gcgccacacc 660
gccgccgact tcctccgcca cgcccgcccc cgcggcctca ccgtcctcct ctacgccacc 720
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gaggtgatcg tgtcggcggg gacgctgggg agcccgcagc tgctgatgct gagcggcgtc 900
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gggatgctgt cgccgcagac ggggcagctc ggcacgctgc cgccgaagca gaggacgccg 1200
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<210> 2
<211> 588
<212> PRT
<213> 水稻(Oryza sativa Indica)
<400> 2
Met Ala Ala Leu Gly Arg Ala Ser Ser Ser Ala Pro Val Leu Ala Ala
1 5 10 15
Ala Ala Ala Ala Ala Val Leu Leu Ser Leu Cys Leu Ala Ala Leu Ser
20 25 30
Glu Glu Gln Glu Gln Leu Glu Asn Leu Arg Phe Val Arg His Ala Gln
35 40 45
Asp Ala Pro Leu Val Ser Ser Tyr Asn Tyr Ile Val Ile Gly Gly Gly
50 55 60
Thr Ala Gly Cys Pro Leu Ala Ala Thr Leu Ser Glu His Ser Arg Val
65 70 75 80
Leu Leu Leu Glu Arg Gly Gly Leu Pro Tyr Ala Asn Met Ser Ser Glu
85 90 95
Gln His Phe Thr Asp Ala Leu Ala Asp Thr Ser Pro Ala Ser Pro Ala
100 105 110
Gln Arg Phe Ile Ser Glu Asp Gly Val Val Asn Ala Arg Ala Arg Val
115 120 125
Leu Gly Gly Gly Ser Cys Leu Asn Ala Gly Phe Tyr Thr Arg Ala Ser
130 135 140
Asn Glu Tyr Val Arg Ala Ala Gly Trp Asp Ala Arg Leu Val Asn Ser
145 150 155 160
Ser Tyr Arg Trp Val Glu Arg Ser Leu Val Phe Arg Pro Asp Val Pro
165 170 175
Pro Trp Gln Ala Ala Leu Arg Asp Ala Leu Leu Glu Val Gly Val Thr
180 185 190
Pro Asp Asn Gly Phe Thr Phe Asp His Val Thr Gly Thr Lys Ile Gly
195 200 205
Gly Thr Ile Phe Asp Asn Ser Gly Gln Arg His Thr Ala Ala Asp Phe
210 215 220
Leu Arg His Ala Arg Pro Arg Gly Leu Thr Val Leu Leu Tyr Ala Thr
225 230 235 240
Val Ser Arg Ile Leu Phe Lys Ser Gln Asp Gly Val Pro Tyr Pro Val
245 250 255
Ala Tyr Gly Val Val Phe Ser Asp Pro Leu Gly Val Gln His Arg Val
260 265 270
Tyr Leu Arg Asp Gly Asp Lys Asn Glu Val Ile Val Ser Ala Gly Thr
275 280 285
Leu Gly Ser Pro Gln Leu Leu Met Leu Ser Gly Val Gly Pro Gln Ala
290 295 300
His Leu Glu Ala His Gly Ile Glu Val Ile Val Asp Gln Pro Met Val
305 310 315 320
Gly Gln Gly Val Ala Asp Asn Pro Met Asn Ser Val Phe Ile Pro Ser
325 330 335
Pro Val Pro Val Glu Leu Ser Leu Val Gln Val Val Gly Ile Thr Arg
340 345 350
Ser Gly Ser Phe Ile Glu Gly Val Ser Gly Ser Glu Phe Gly Met Pro
355 360 365
Val Ser Asp Gly Ala Leu Arg Trp Ala Arg Ser Phe Gly Met Leu Ser
370 375 380
Pro Gln Thr Gly Gln Leu Gly Thr Leu Pro Pro Lys Gln Arg Thr Pro
385 390 395 400
Glu Ala Leu Gln Arg Ala Ala Glu Ala Met Met Arg Leu Asp Arg Arg
405 410 415
Ala Phe Arg Gly Gly Phe Ile Leu Glu Lys Ile Leu Gly Pro Val Ser
420 425 430
Ser Gly His Val Glu Leu Arg Thr Thr Asp Pro Arg Ala Asn Pro Ser
435 440 445
Val Thr Phe Asn Tyr Phe Arg Glu Ala Glu Asp Leu Glu Arg Cys Val
450 455 460
His Gly Ile Glu Thr Ile Glu Arg Val Ile Gln Ser Arg Ala Phe Ser
465 470 475 480
Asn Phe Thr Tyr Ala Asn Ala Ser Val Glu Ser Ile Phe Thr Asp Ser
485 490 495
Ala Asn Phe Pro Val Asn Leu Leu Pro Arg His Val Asn Asp Ser Arg
500 505 510
Ser Pro Glu Gln Tyr Cys Met Asp Thr Val Met Thr Ile Trp His Tyr
515 520 525
His Gly Gly Cys His Val Gly Ala Val Val Asp Asp Asp Tyr Arg Val
530 535 540
Phe Gly Val Gln Gly Leu Arg Val Ile Asp Ser Ser Thr Phe Lys Tyr
545 550 555 560
Ser Pro Gly Thr Asn Pro Gln Ala Thr Val Met Met Leu Gly Arg Tyr
565 570 575
Met Gly Val Lys Ile Gln Ser Glu Arg Trp Lys Lys
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<210> 3
<211> 2520
<212> DNA
<213> 水稻(Oryza sativa Indica)
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ctcagggctc ctccacaatt tacaaagctg ctcgaagatc ttctttgcag tgcaaagcaa 2400
tctgcaagat tattcaagac atctactctt gatctaccat tgagctaact ccggatatat 2460
aaacagaccg aacgtttcgt cccaggggaa tgtgaaagtt agcgaatttg cccggcgaaa 2520
atggcagcac ttggccgcgc gagctcgtcg gcgccggtgc ttgccgccgc cgccgccgcc 2580
gccgtgctcc tctcgctctg cctcgccgcg ctctcggaag agcaaggtgc gtaaacgttg 2640
cgttgtatct ttgcgttgat gcgtgttgcg tcgtcgtcgt gttcatggcg tgcgatggcg 2700
ttgtgcagag caactggaga acctgcggtt cgtgcggcac gcgcaggacg cgccgctggt 2760
gtcgagctac aactacatcg tcatcggcgg cggcacggcg gggtgcccgc tggcggcgac 2820
gctgtcggag cactcgcgcg tgctgctgct ggagcgcggc ggcctgccgt acgccaacat 2880
gtcgagcgag cagcacttca cggacgcgct ggccgacacg tcgccggcgt cgccggcgca 2940
gcggttcatc tcggaggacg gcgtggtgaa cgcccgggcg cgggtgctcg gcggcgggag 3000
ctgcctcaac gccgggttct acacgcgggc gagcaacgag tacgtgcgcg ccgccgggtg 3060
ggacgcgcgg ctggtgaact cgtcgtaccg gtgggtggag cgctcgctgg tgttccgccc 3120
cgacgtgccg ccgtggcagg cggcgctccg cgacgcgctg ctcgaggtcg gcgtcacgcc 3180
cgacaacggc ttcaccttcg accacgtcac cggcaccaag atcggcggca ccatcttcga 3240
caactccggc cagcgccaca ccgccgccga cttcctccgc cacgcccgcc cccgcggcct 3300
caccgtcctc ctctacgcca ccgtctcccg tatcctcttc aaaagccaag gtacacagct 3360
acgatgaaaa tggaaaatgt gctgtgcgcc gaagaagctt gacctcacga cggcgagctt 3420
ttgccatggc gtgcagacgg ggtgccgtac ccggtggcgt acggggtggt gttctcggac 3480
ccgctggggg tgcagcaccg ggtgtacctc cgcgacggcg acaagaacga ggtgatcgtg 3540
tcggcgggga cgctggggag cccgcagctg ctgatgctga gcggcgtcgg gccgcaggcg 3600
cacctggagg cgcacggcat cgaggtgatc gtggaccaac ccatggtcgg gcagggcgtc 3660
gccgacaacc cgatgaactc ggtgttcatc ccgtcgccgg tgccggtgga gctctccctg 3720
gtgcaggtcg tcggcatcac ccgctccggc agcttcatcg agggggtgag cgggtcggag 3780
ttcggcatgc cggtgtcgga cggcgcgctc cggtgggcgc gcagcttcgg gatgctgtcg 3840
ccgcagacgg ggcagctcgg cacgctgccg ccgaagcaga ggacgccgga ggcgctgcag 3900
cgggcggcgg aggcgatgat gcggctggac aggagggcgt tccggggagg cttcatcctg 3960
gagaagatcc tcgggccggt gtcctccggc cacgtcgagc tgcgaaccac cgacccgagg 4020
gcgaacccgt cggtgacgtt caactacttc cgcgaggcgg aggatctgga gcggtgcgtc 4080
catggcatcg agacgatcga gcgggtgatc cagtcgcggg ccttctccaa cttcacctac 4140
gccaacgcct ccgtcgagtc catcttcacc gattccgcca acttccccgt caacctgctg 4200
ccgcgccatg tcaacgactc gcgctcgccg gagcagtact gcatggacac cgtcatgacc 4260
atctggcact accacggcgg ctgccatgtc ggcgccgtcg tcgacgacga ttaccgggtg 4320
ttcggggtgc aggggctcag ggtgatcgac agctccacct tcaagtactc ccccggcacc 4380
aaccctcagg ccaccgtcat gatgctcggc aggtaactgg catcatttta gctcatgaaa 4440
gtgcattgcc atgagtaaca acacactaac agtatagttt tcaatatgga cactgggcag 4500
gtatatgggt gtgaagattc agtccgagag atggaagaaa tgatgaacaa aagataattt 4560
cgtttcagga gcaaaaaaat gcatgtaatt caaggaaaag aaaatgttca actgtcttta 4620
gagtttagag tagattttat ttgcacccac ttaattttta ctcttctcta gacataggtt 4680
cagtatctgc ttgttgatta tgtaaccttg aagaagcatt gcaaaaacaa agcggaaact 4740
tatgttacca agggcatgac gaagaaataa atggattaga tttcattgac acttagaaaa 4800
tggaaccagc aaatcaaggc tgaaaataat tacactagaa acttatttta atggctttac 4860
atgtcgctac atacttaaat caatcaaagt tgctaccaaa gccatgttcc ctaaacagag 4920
ggttccgggc tctcaaacat tcttaatctt ctatacattg ataaaaagta tacataaaaa 4980
gaaaacctat taagatggaa atgttgaatt ctcttaagaa aggcataaaa aatgcagggt 5040
<210> 5
<211> 1761
<212> DNA
<213> 水稻(Oryza sativa Japonica)
<400> 5
atggcagcac ttggccgcgc gagctcgtcg gcgccggtgc ttgccgccgc cgccgccgtg 60
ctcctctcgc tctgcctcgc cgcgctctcg gaagagcaag agcaactgga gaacctgcgg 120
ttcgtgcggc acgcgcagga cgcgccgctg gtgtcgagct acaactacat cgtcatcggc 180
ggcggcacgg cggggtgccc gctggcggcg acgctgtcgg agcactcgcg cgtgctgctg 240
ctggagcgcg gcggcctgcc gtacgccaac atgtcgagcg agcagcactt cacggacgcg 300
ctggccgaca cgtcgccggc gtcgccggcg cagcggttca tctcggagga cggcgtggtg 360
aacgcccggg cgcgggtgct cggcggcggg agctgcctca acgccgggtt ctacacgcgg 420
gcgagcaacg agtacgtgcg cgcctccggg tgggacgcgc ggctggtgaa ctcgtcgtac 480
cggtgggtgg agcgctcgct ggtgttccgc cccgacgtgc cgccgtggca ggcggcgctc 540
cgcgacgcgc tgctcgaggt cggcgtcacg cccgacaacg gcttcacctt cgaccacgtc 600
accggcacca agatcggcgg caccatcttc gacaactccg gccagcgcca caccgccgcc 660
gacttcctcc gccacgcccg cccccgcggc ctcaccgtcc tcctctacgc caccgtctcc 720
cgtatcctct tcaaaagcca agacggggtg ccgtacccgg tggcgtacgg ggtggtgttc 780
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tccctggtgc aggtcgtcgg catcacccgc tccggcagct tcatcgaggg ggtgagcggg 1080
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ctgtcgccgc agacggggca gctcggcacg ctgccgccga agcagaggac gccggaggcg 1200
ctgcagcggg cggcggaggc gatgatgcgg ctggacagga gggcgttccg gggaggcttc 1260
atcctggaga agatcctcgg gccggtgtcc tccggccacg tcgagctgcg aaccaccgac 1320
ccgagggcga acccgtcggt gacgttcaac tacttccgcg aggcagagga tctggagcgg 1380
tgcgtccatg gcatcgagac gatcgagcgg gtgatccagt cgcgggcctt ctccaacttc 1440
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ctgctgccgc gccatgtcaa cgactcgcgc tcgccggagc agtactgcat ggacaccgtc 1560
atgaccatct ggcactacca cggcggctgc catgtcggcg ccgtcgtcga cgacgattac 1620
cgggtgttcg gggtgcaggg gctcagggtg atcgacagct ccaccttcaa gtactccccc 1680
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tccgagagat ggaagaaatg a 1761
<210> 6
<211> 586
<212> PRT
<213> 水稻(Oryza sativa Japonica)
<400> 6
Met Ala Ala Leu Gly Arg Ala Ser Ser Ser Ala Pro Val Leu Ala Ala
1 5 10 15
Ala Ala Ala Val Leu Leu Ser Leu Cys Leu Ala Ala Leu Ser Glu Glu
20 25 30
Gln Glu Gln Leu Glu Asn Leu Arg Phe Val Arg His Ala Gln Asp Ala
35 40 45
Pro Leu Val Ser Ser Tyr Asn Tyr Ile Val Ile Gly Gly Gly Thr Ala
50 55 60
Gly Cys Pro Leu Ala Ala Thr Leu Ser Glu His Ser Arg Val Leu Leu
65 70 75 80
Leu Glu Arg Gly Gly Leu Pro Tyr Ala Asn Met Ser Ser Glu Gln His
85 90 95
Phe Thr Asp Ala Leu Ala Asp Thr Ser Pro Ala Ser Pro Ala Gln Arg
100 105 110
Phe Ile Ser Glu Asp Gly Val Val Asn Ala Arg Ala Arg Val Leu Gly
115 120 125
Gly Gly Ser Cys Leu Asn Ala Gly Phe Tyr Thr Arg Ala Ser Asn Glu
130 135 140
Tyr Val Arg Ala Ser Gly Trp Asp Ala Arg Leu Val Asn Ser Ser Tyr
145 150 155 160
Arg Trp Val Glu Arg Ser Leu Val Phe Arg Pro Asp Val Pro Pro Trp
165 170 175
Gln Ala Ala Leu Arg Asp Ala Leu Leu Glu Val Gly Val Thr Pro Asp
180 185 190
Asn Gly Phe Thr Phe Asp His Val Thr Gly Thr Lys Ile Gly Gly Thr
195 200 205
Ile Phe Asp Asn Ser Gly Gln Arg His Thr Ala Ala Asp Phe Leu Arg
210 215 220
His Ala Arg Pro Arg Gly Leu Thr Val Leu Leu Tyr Ala Thr Val Ser
225 230 235 240
Arg Ile Leu Phe Lys Ser Gln Asp Gly Val Pro Tyr Pro Val Ala Tyr
245 250 255
Gly Val Val Phe Ser Asp Pro Leu Gly Val Gln His Arg Val Tyr Leu
260 265 270
Arg Asp Gly Asp Lys Asn Glu Val Ile Val Ser Ala Gly Thr Leu Gly
275 280 285
Ser Pro Gln Leu Leu Met Leu Ser Gly Val Gly Pro Gln Ala His Leu
290 295 300
Glu Ala His Gly Ile Glu Val Ile Val Asp Gln Pro Met Val Gly Gln
305 310 315 320
Gly Val Ala Asp Asn Pro Met Asn Ser Val Phe Ile Pro Ser Pro Val
325 330 335
Pro Val Glu Leu Ser Leu Val Gln Val Val Gly Ile Thr Arg Ser Gly
340 345 350
Ser Phe Ile Glu Gly Val Ser Gly Ser Glu Phe Gly Met Pro Val Ser
355 360 365
Asp Gly Ala Leu Arg Trp Ala Arg Ser Phe Gly Met Leu Ser Pro Gln
370 375 380
Thr Gly Gln Leu Gly Thr Leu Pro Pro Lys Gln Arg Thr Pro Glu Ala
385 390 395 400
Leu Gln Arg Ala Ala Glu Ala Met Met Arg Leu Asp Arg Arg Ala Phe
405 410 415
Arg Gly Gly Phe Ile Leu Glu Lys Ile Leu Gly Pro Val Ser Ser Gly
420 425 430
His Val Glu Leu Arg Thr Thr Asp Pro Arg Ala Asn Pro Ser Val Thr
435 440 445
Phe Asn Tyr Phe Arg Glu Ala Glu Asp Leu Glu Arg Cys Val His Gly
450 455 460
Ile Glu Thr Ile Glu Arg Val Ile Gln Ser Arg Ala Phe Ser Asn Phe
465 470 475 480
Thr Tyr Ala Asn Ala Ser Val Glu Ser Ile Phe Thr Asp Ser Ala Asn
485 490 495
Phe Pro Val Asn Leu Leu Pro Arg His Val Asn Asp Ser Arg Ser Pro
500 505 510
Glu Gln Tyr Cys Met Asp Thr Val Met Thr Ile Trp His Tyr His Gly
515 520 525
Gly Cys His Val Gly Ala Val Val Asp Asp Asp Tyr Arg Val Phe Gly
530 535 540
Val Gln Gly Leu Arg Val Ile Asp Ser Ser Thr Phe Lys Tyr Ser Pro
545 550 555 560
Gly Thr Asn Pro Gln Ala Thr Val Met Met Leu Gly Arg Tyr Met Gly
565 570 575
Val Lys Ile Gln Ser Glu Arg Trp Lys Lys
580 585
<210> 7
<211> 1767
<212> DNA
<213> 水稻(Oryza sativa)
<400> 7
atggcagcac ttggccgcgc gagctcgtcg gcgccggtgc ttgccgccgc cgccgccgcc 60
gccgtgctcc tctcgctctg cctcgccgcg ctctcggaag agcaagagca actggagaac 120
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<210> 8
<211> 588
<212> PRT
<213> 水稻(Oryza sativa)
<400> 8
Met Ala Ala Leu Gly Arg Ala Ser Ser Ser Ala Pro Val Leu Ala Ala
1 5 10 15
Ala Ala Ala Ala Ala Val Leu Leu Ser Leu Cys Leu Ala Ala Leu Ser
20 25 30
Glu Glu Gln Glu Gln Leu Glu Asn Leu Arg Phe Val Arg His Ala Gln
35 40 45
Asp Ala Pro Leu Val Ser Ser Tyr Asn Tyr Ile Val Ile Gly Gly Gly
50 55 60
Thr Ala Gly Cys Pro Leu Ala Ala Thr Leu Ser Glu His Ser Arg Val
65 70 75 80
Leu Leu Leu Glu Arg Gly Gly Leu Pro Tyr Ala Asn Met Ser Ser Glu
85 90 95
Gln His Phe Thr Asp Ala Leu Ala Asp Thr Ser Pro Ala Ser Pro Ala
100 105 110
Gln Arg Phe Ile Ser Glu Asp Gly Val Val Asn Ala Arg Ala Arg Val
115 120 125
Leu Gly Gly Gly Ser Cys Leu Asn Ala Gly Phe Tyr Thr Arg Ala Ser
130 135 140
Asn Glu Tyr Val Arg Ala Ala Gly Trp Asp Ala Arg Leu Val Asn Ser
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Ser Tyr Arg Trp Val Glu Arg Ser Leu Val Phe Arg Pro Asp Val Pro
165 170 175
Pro Trp Gln Ala Ala Leu Arg Asp Ala Leu Leu Glu Val Gly Val Thr
180 185 190
Pro Asp Asn Gly Phe Thr Phe Asp His Val Thr Gly Thr Lys Ile Gly
195 200 205
Gly Thr Ile Phe Asp Asn Ser Gly Gln Arg His Thr Ala Ala Asp Phe
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Leu Arg His Ala Arg Pro Arg Gly Leu Thr Val Leu Leu Tyr Ala Thr
225 230 235 240
Val Ser Arg Ile Leu Phe Lys Ser Gln Asp Gly Val Pro Tyr Pro Val
245 250 255
Ala Tyr Gly Val Val Phe Ser Asp Pro Leu Gly Val Gln His Arg Val
260 265 270
Tyr Leu Arg Asp Gly Asp Lys Asn Glu Val Ile Val Ser Ala Gly Thr
275 280 285
Leu Gly Ser Pro Gln Leu Leu Met Leu Ser Gly Val Gly Pro Gln Ala
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His Leu Glu Ala His Gly Ile Glu Val Ile Val Asp Gln Pro Met Val
305 310 315 320
Gly Gln Gly Val Ala Asp Asn Pro Met Asn Ser Val Phe Ile Pro Ser
325 330 335
Pro Val Pro Val Glu Leu Ser Leu Val Gln Val Val Gly Ile Thr Arg
340 345 350
Ser Gly Ser Phe Ile Glu Gly Val Ser Gly Ser Glu Phe Gly Met Pro
355 360 365
Val Ser Asp Gly Ala Leu Arg Trp Ala Arg Ser Phe Gly Met Leu Ser
370 375 380
Pro Gln Thr Gly Gln Leu Gly Thr Leu Pro Pro Lys Gln Arg Thr Pro
385 390 395 400
Glu Ala Leu Gln Arg Ala Ala Glu Ala Met Met Arg Leu Asp Arg Arg
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Ala Phe Arg Gly Gly Phe Ile Leu Glu Lys Ile Leu Gly Pro Val Ser
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Ser Gly His Val Glu Leu Arg Thr Thr Asp Pro Arg Ala Asn Pro Ser
435 440 445
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His Gly Ile Glu Thr Ile Glu Arg Val Ile Gln Ser Arg Ala Phe Ser
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485 490 495
Ala Asn Phe Pro Val Asn Leu Leu Pro Arg His Val Asn Asp Ser Arg
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His Gly Gly Cys His Val Gly Ala Val Val Asp Asp Asp Tyr Arg Val
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545 550 555 560
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565 570 575
Met Gly Val Lys Ile Gln Ser Glu Arg Trp Lys Lys
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<212> DNA
<213> 水稻(Oryza sativa)
<400> 9
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tggtgaactc gtcgtaccgg tgggtggagc gcgcgctggt gttccggccc gacgtgccgc 960
cgtggcaggc cgcgctccgg gacgcgctgc tggaggccgg cgtcaccccg gataacggat 1020
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tcgacgacaa ctaccgggtg ttcggggtgg gggggctcag ggtcatcgac agctccacct 2100
tcaggtactc ccccggcacc aacccgcagg ccaccgtcat gatgctcggc aggtaaacac 2160
cagacccttg caattatact gatctgaatg aatgaactcg actaacacga acgttataaa 2220
tctggtatgt acaggtatat gggcataaag attcaggccg agagatggag gaaatgatat 2280
ttcag 2285
<210> 11
<211> 1767
<212> DNA
<213> 大麦(Hordeum vulgare)
<400> 11
atgctgagct cgccggcgca aatggcactt ggccgcgcga gatcgccggc gctggtgcta 60
gtcgccgccg tccttggctc gctctgcatc gtcgcactct cggaggatga gcaactggag 120
aacctgcggt tcgtgcagca cgcgcaggac gcgccgctgg tgtcgcactt caactacatc 180
gtggtcggcg gcggcacgtc cgggtgcccg ctggcggcga cgctgtcgga gcactcgcgg 240
gtgctcctgc tggagcgcgg gggcctcccc taccgcaaca tgtcgaacca ggagcacttc 300
acggacgcgc tggccgacac gtcgctggcg tccccggcgc agcggttcat ctcgacggac 360
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gaccacgtga cggggaccaa gatcggcggc accatcttcg acaacaacgg gcagcggcac 660
accgccgccg acttcctccg gcacgcccgg ccgcgggggc tcaccgtggt gctctacgcc 720
acggtgtcgc ggatcctgtt caggagccag gagggggtgc cgtacccggt ggcgtacggg 780
gtggtgttcg cggacccgct gggggtgcag caccgggtgt acctccggga cggggccaag 840
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gtggggctct ccctggtgca ggtggtcggg atcaccaagt ccggcagctt catcgagggc 1080
gtgagcggct ccgagttcgg catcccggtg tcggacggcg cccgccgcct cgccaacttc 1140
ggcctcttct cgccccagac cgggcagctc ggcacgctgc cgccgggcca gaggacgccg 1200
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<210> 12
<211> 588
<212> PRT
<213> 大麦(Hordeum vulgare)
<400> 12
Met Leu Ser Ser Pro Ala Gln Met Ala Leu Gly Arg Ala Arg Ser Pro
1 5 10 15
Ala Leu Val Leu Val Ala Ala Val Leu Gly Ser Leu Cys Ile Val Ala
20 25 30
Leu Ser Glu Asp Glu Gln Leu Glu Asn Leu Arg Phe Val Gln His Ala
35 40 45
Gln Asp Ala Pro Leu Val Ser His Phe Asn Tyr Ile Val Val Gly Gly
50 55 60
Gly Thr Ser Gly Cys Pro Leu Ala Ala Thr Leu Ser Glu His Ser Arg
65 70 75 80
Val Leu Leu Leu Glu Arg Gly Gly Leu Pro Tyr Arg Asn Met Ser Asn
85 90 95
Gln Glu His Phe Thr Asp Ala Leu Ala Asp Thr Ser Leu Ala Ser Pro
100 105 110
Ala Gln Arg Phe Ile Ser Thr Asp Gly Val Val Asn Ala Arg Ala Arg
115 120 125
Val Leu Gly Gly Gly Ser Cys Leu Asn Ala Gly Phe Tyr Thr Arg Ala
130 135 140
Ser Asn Glu Tyr Val Arg Thr Ala Gly Trp Asp Ala Arg Leu Val Asn
145 150 155 160
Ser Ser Tyr Arg Trp Val Glu Arg Ala Leu Val Phe Arg Pro Asp Val
165 170 175
Pro Pro Trp Gln Ala Ala Leu Arg Asp Ala Leu Leu Glu Ala Gly Val
180 185 190
Thr Pro Asp Asn Gly Phe Thr Phe Asp His Val Thr Gly Thr Lys Ile
195 200 205
Gly Gly Thr Ile Phe Asp Asn Asn Gly Gln Arg His Thr Ala Ala Asp
210 215 220
Phe Leu Arg His Ala Arg Pro Arg Gly Leu Thr Val Val Leu Tyr Ala
225 230 235 240
Thr Val Ser Arg Ile Leu Phe Arg Ser Gln Glu Gly Val Pro Tyr Pro
245 250 255
Val Ala Tyr Gly Val Val Phe Ala Asp Pro Leu Gly Val Gln His Arg
260 265 270
Val Tyr Leu Arg Asp Gly Ala Lys Asn Glu Val Ile Leu Ser Ala Gly
275 280 285
Thr Leu Gly Ser Pro Gln Leu Leu Met Leu Ser Gly Val Gly Pro Gln
290 295 300
Ala His Leu Glu Ala His Gly Ile Gln Val Leu Val Asp Gln Pro Met
305 310 315 320
Val Gly Gln Gly Val Ala Asp Asn Pro Met Asn Ser Val Phe Ile Pro
325 330 335
Ser Pro Val Pro Val Gly Leu Ser Leu Val Gln Val Val Gly Ile Thr
340 345 350
Lys Ser Gly Ser Phe Ile Glu Gly Val Ser Gly Ser Glu Phe Gly Ile
355 360 365
Pro Val Ser Asp Gly Ala Arg Arg Leu Ala Asn Phe Gly Leu Phe Ser
370 375 380
Pro Gln Thr Gly Gln Leu Gly Thr Leu Pro Pro Gly Gln Arg Thr Pro
385 390 395 400
Glu Ala Leu Gln Arg Ala Ala Glu Ala Met Arg Arg Leu Asp Arg Arg
405 410 415
Ala Phe Arg Gly Gly Phe Ile Leu Glu Lys Ile Leu Gly Pro Val Ser
420 425 430
Thr Gly His Ile Glu Leu Arg Thr Thr Asp Pro Arg Ala Asn Pro Ala
435 440 445
Val Thr Phe Asn Tyr Phe Gln Glu Ala Glu Asp Leu Glu Arg Cys Val
450 455 460
Arg Gly Ile Gln Thr Ile Glu Arg Val Ile Gln Ser Arg Ala Phe Ser
465 470 475 480
Asn Phe Thr Tyr Ala Asn Thr Thr Val Glu Ser Ile Phe Thr Asp Ser
485 490 495
Ala Asn Phe Pro Val Asn Leu Leu Pro Arg His Val Asn Asp Ser Arg
500 505 510
Ser Pro Glu Gln Tyr Cys Arg Glu Thr Val Met Thr Ile Trp His Tyr
515 520 525
His Gly Gly Cys His Val Gly Ala Val Val Asp Asp Asn Tyr Arg Val
530 535 540
Phe Gly Val Gly Gly Leu Arg Val Ile Asp Ser Ser Thr Phe Arg Tyr
545 550 555 560
Ser Pro Gly Thr Asn Pro Gln Ala Thr Val Met Met Leu Gly Arg Tyr
565 570 575
Met Gly Ile Lys Ile Gln Ala Glu Arg Trp Arg Lys
580 585
<210> 13
<211> 1964
<212> DNA
<213> 高粱(Sorghum bicolor)
<400> 13
atggcgcctg ggcttgcgag ctcggccgcg ctgggggttt tggccatcgt tcttggctcc 60
tcgtgcctcg tcgcgctctc ggaggatggt tcgtgccgtg ccggactgca tgccgtgaat 120
atggtcatgc gtttttgttt tcttttggat tttctgcact tctgcaaacg tctgaatcgg 180
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cccgctggcg gcgacgctgt cggagcactc ccgcgtgctg ctcctggagc gcggaggcct 360
cccctaccgc aacatgtcca accagcagca cttcacggag gcgctggcgg acacgtcccc 420
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ggccggcgtc acccccgaca acggcttcac cttcgaccac gtcccgggca ccaagatcgg 720
cggcaccatc ttcgacagca gcgggcagcg gcacaccgcc gccgacttcc tccgccacgc 780
gcggcccagg ggcctcaccg tgttcctcta cgctaccgtc tcgaggatcc tcttcaggca 840
gcaagagggc gtgccgtacc cggtggcgta cggcgtggtg ttcacggacc cgctgggcgt 900
gcagcaccgg gtgtacctcc gcgacggcgg caagaacgag gtgatcctgt ccgcggggac 960
gctggggagc ccgcagctgc tgatgctgag cggcgtcgga ccgcaggcgc acctggaggc 1020
gcacggcatc caggtgctgg tcgaccagcc catggtcggg cagggcgtgg ccgacaaccc 1080
catgaactcg gtgttcatcc cgtcgccggt gcccgtcacg ctctcgctcg tgcaggtcgt 1140
cgggatcacc cggttcggca gcttcatcga gggcgtcagc ggctccgagt tcggcatccc 1200
cgtctccgac ggcgcccgcc gcctagctcg caacttcggc ctcttctctc ctcaggtgtg 1260
gtcggtcggt ccggtcggtg cttcgttcca tactgacagc aacatagccg ccggaaatga 1320
aatgtactga ctactgacgg atcatcttgc ggcagaccgg gcagctgggc acgctgccgc 1380
cgaagcagag aaccccggag gctctggagc gggcggcgga ggcgatgcgg cggctggaca 1440
ggcgggcgtt ccggggcggc ttcatcctgg agaagatcct gggcccggtg tcgtcggggc 1500
acatcgagct gcggtccgcc gacccgcgcg cgaacccggc ggtgacgttc aactacttcc 1560
aggagtcgga ggacctggag cggtgcgtgc acggcatcca gacgatcgag cgggtgatcc 1620
agtcccgggc cttcgccaac ttcacctacg ccaacgcgtc cgtggagtcc atcttcaccg 1680
actccgccaa cttccccgtc aacctcctgc cgcggcacgt caacgactcc cggacgcccg 1740
agcagtactg cagggacacc gtcatgacca tctggcacta ccacggcgga tgccaggtcg 1800
gcgccgtcgt cgacgacgat taccgggtgt tcggcgtgca gcggctcagg gtgatcgaca 1860
gctccacgtt caagtactcc ccggggacca acccgcaggc caccgtcatg atgctcggaa 1920
ggtatatggg ggtgaaaatt caggcccaga gatggaggaa atga 1964
<210> 14
<211> 1749
<212> DNA
<213> 高粱(Sorghum bicolor)
<400> 14
atggcgcctg ggcttgcgag ctcggccgcg ctgggggttt tggccatcgt tcttggctcc 60
tcgtgcctcg tcgcgctctc ggaggatgag ccactggaga acctgcggtt cgttcgccac 120
gcgcaggacg cgccgctggt gtcgcaatac aactacatcg tcatcggcgg cggcacggcg 180
ggctgcccgc tggcggcgac gctgtcggag cactcccgcg tgctgctcct ggagcgcgga 240
ggcctcccct accgcaacat gtccaaccag cagcacttca cggaggcgct ggcggacacg 300
tccccggcgt cgcccgcgca gcggttcatc tccgaggacg gcgtggtgaa cgcgcgggcg 360
cgggtgctgg gcggcgggag ctgcctcaac gccggcttct acacgcgggc cagcaacgac 420
tacgtgcgcg ccgccgggtg ggacacccgc ctcgtcaact cctcgtacca ctgggtggag 480
cgcgcgctcg tgttccgccc ggacgtgccc ccatggcagg ccgcgctccg cgacgcgctg 540
ctggaggccg gcgtcacccc cgacaacggc ttcaccttcg accacgtccc gggcaccaag 600
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aggcagcaag agggcgtgcc gtacccggtg gcgtacggcg tggtgttcac ggacccgctg 780
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cacgtcaacg actcccggac gcccgagcag tactgcaggg acaccgtcat gaccatctgg 1560
cactaccacg gcggatgcca ggtcggcgcc gtcgtcgacg acgattaccg ggtgttcggc 1620
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aggaaatga 1749
<210> 15
<211> 582
<212> PRT
<213> 高粱(Sorghum bicolor)
<400> 15
Met Ala Pro Gly Leu Ala Ser Ser Ala Ala Leu Gly Val Leu Ala Ile
1 5 10 15
Val Leu Gly Ser Ser Cys Leu Val Ala Leu Ser Glu Asp Glu Pro Leu
20 25 30
Glu Asn Leu Arg Phe Val Arg His Ala Gln Asp Ala Pro Leu Val Ser
35 40 45
Gln Tyr Asn Tyr Ile Val Ile Gly Gly Gly Thr Ala Gly Cys Pro Leu
50 55 60
Ala Ala Thr Leu Ser Glu His Ser Arg Val Leu Leu Leu Glu Arg Gly
65 70 75 80
Gly Leu Pro Tyr Arg Asn Met Ser Asn Gln Gln His Phe Thr Glu Ala
85 90 95
Leu Ala Asp Thr Ser Pro Ala Ser Pro Ala Gln Arg Phe Ile Ser Glu
100 105 110
Asp Gly Val Val Asn Ala Arg Ala Arg Val Leu Gly Gly Gly Ser Cys
115 120 125
Leu Asn Ala Gly Phe Tyr Thr Arg Ala Ser Asn Asp Tyr Val Arg Ala
130 135 140
Ala Gly Trp Asp Thr Arg Leu Val Asn Ser Ser Tyr His Trp Val Glu
145 150 155 160
Arg Ala Leu Val Phe Arg Pro Asp Val Pro Pro Trp Gln Ala Ala Leu
165 170 175
Arg Asp Ala Leu Leu Glu Ala Gly Val Thr Pro Asp Asn Gly Phe Thr
180 185 190
Phe Asp His Val Pro Gly Thr Lys Ile Gly Gly Thr Ile Phe Asp Ser
195 200 205
Ser Gly Gln Arg His Thr Ala Ala Asp Phe Leu Arg His Ala Arg Pro
210 215 220
Arg Gly Leu Thr Val Phe Leu Tyr Ala Thr Val Ser Arg Ile Leu Phe
225 230 235 240
Arg Gln Gln Glu Gly Val Pro Tyr Pro Val Ala Tyr Gly Val Val Phe
245 250 255
Thr Asp Pro Leu Gly Val Gln His Arg Val Tyr Leu Arg Asp Gly Gly
260 265 270
Lys Asn Glu Val Ile Leu Ser Ala Gly Thr Leu Gly Ser Pro Gln Leu
275 280 285
Leu Met Leu Ser Gly Val Gly Pro Gln Ala His Leu Glu Ala His Gly
290 295 300
Ile Gln Val Leu Val Asp Gln Pro Met Val Gly Gln Gly Val Ala Asp
305 310 315 320
Asn Pro Met Asn Ser Val Phe Ile Pro Ser Pro Val Pro Val Thr Leu
325 330 335
Ser Leu Val Gln Val Val Gly Ile Thr Arg Phe Gly Ser Phe Ile Glu
340 345 350
Gly Val Ser Gly Ser Glu Phe Gly Ile Pro Val Ser Asp Gly Ala Arg
355 360 365
Arg Leu Ala Arg Asn Phe Gly Leu Phe Ser Pro Gln Thr Gly Gln Leu
370 375 380
Gly Thr Leu Pro Pro Lys Gln Arg Thr Pro Glu Ala Leu Glu Arg Ala
385 390 395 400
Ala Glu Ala Met Arg Arg Leu Asp Arg Arg Ala Phe Arg Gly Gly Phe
405 410 415
Ile Leu Glu Lys Ile Leu Gly Pro Val Ser Ser Gly His Ile Glu Leu
420 425 430
Arg Ser Ala Asp Pro Arg Ala Asn Pro Ala Val Thr Phe Asn Tyr Phe
435 440 445
Gln Glu Ser Glu Asp Leu Glu Arg Cys Val His Gly Ile Gln Thr Ile
450 455 460
Glu Arg Val Ile Gln Ser Arg Ala Phe Ala Asn Phe Thr Tyr Ala Asn
465 470 475 480
Ala Ser Val Glu Ser Ile Phe Thr Asp Ser Ala Asn Phe Pro Val Asn
485 490 495
Leu Leu Pro Arg His Val Asn Asp Ser Arg Thr Pro Glu Gln Tyr Cys
500 505 510
Arg Asp Thr Val Met Thr Ile Trp His Tyr His Gly Gly Cys Gln Val
515 520 525
Gly Ala Val Val Asp Asp Asp Tyr Arg Val Phe Gly Val Gln Arg Leu
530 535 540
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565 570 575
Ala Gln Arg Trp Arg Lys
580
<210> 16
<211> 2585
<212> DNA
<213> 玉米(Zea mays)
<400> 16
ctcacagcaa attcgtctca cgcatattcg tcatccagct ccgtttaaaa tgcgtgctca 60
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<210> 17
<211> 2242
<212> DNA
<213> 玉米(Zea mays)
<400> 17
atggcgcctg ggcttgcgaa ctgggtcgcg ctggttcgcg ctggttctga ccgtcctcct 60
tggtctctcg tgcctcgtcg tcgcgctctc ggaggatggt ttgtgatggt ttgtgccgga 120
cttgtcacgc gctctttggt atttctgcag ttctgcaaac gtgtgaattg gcatgaattg 180
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cccctacgcg cccctggtgt cgcagtacaa ctacatcgtg atcggcggcg gcacggcggg 300
gtgcccgctg gcggccgctg gcggcgacgc tgtcggagca ctcgcgcgtg ctgctcctgg 360
agcgcggggg cctcccgtcc cgcaacgtcc cgcaacatgt ccgaccagca gcacttcacg 420
gacgcgctgg cggacacgtc cccggcgtcg cccgccgtcg cccgcgcagc ggttcgtgtc 480
cgaggacggc gtggtgaacg cgcgggcccg ggtgctgggc gggggtgggc gggggcagct 540
gcctcaacgc cgggttctac acgcgggcca gcaccgacta cgtgcgcgcc gccgggcgcc 600
gccggctggg acgcccgcct cgtcaactcg tcctaccgct gggtggagcg cgcgctcgtg 660
ttccgtcgtg ttccgccccg ccgtgccccc gtggcaggcc gcgctccgcg acgcgctgct 720
cgaggccggc gtcacccggc gtcacgcccg acaacggctt caccttcgac cacgtcacgg 780
gcaccaagat cgggggcacc atcttgcacc atcttcgaca gcagcggcca gcgccacacc 840
gccgccgact tcctccgcca cgcgcgcccc agggggcccc agggggctca ccgtgttcct 900
ctacgctacc gtctccagga tcctcttcag acagcaaggt acgtaaaggt acgtacgtgc 960
gtgcacggct tccgcatttt tttttcgaca gtgcgggctg gcacgatcgc gctctatcgc 1020
gctctgaagc ggagaatcgt gcgctgtcga cagagggcgt gccgtacccg gtggcgtacg 1080
gtgtggtacg gtgtggtgtt cacggacccg ctcggggtgc agcaccgggt gtacctccgg 1140
gacggcgcca agaaccgcca agaacgaggt gatcctgtcg gcggggacgc tggggagccc 1200
gcagctgctg atgctgagcg gcgtcgagcg gcgtcggccc gcaggcgcac ctggaggcgc 1260
acggcgtcca ggtgctggtg gaccagccca tggtcgccca tggtcgggca gggcgtggct 1320
gacaacccga tgaactcggt gttcatcccg tcgccggtgc ccgtcggtgc ccgtcacgct 1380
gtcgctcgtg caggtcgtcg ggatcacccg gtccggcagc ttcatcgagg gcgtgcgagg 1440
gcgtgagcgg ctccgagttc ggcatccccg tctccgaggg cgcccgtcgc ctggctcgca 1500
gcttctcgca gcttcggcct cttctctccg cagacggggc agctgggcac gttgccgccg 1560
aagcagagaa ccccagagaa ccccagaggc cctggagcgc gcggcggagg cgatgcggcg 1620
gctggacagg cgggcgttcc ggggcgttcc ggggcggatt catcctggag aagatcctgg 1680
gccccgtctc ctcgggccac gtcgagctgc ggtccgctgc ggtccgccga cccgcgcgcg 1740
aacccggcgg tgacgttcaa ctacttccag gagtcggagg acctgggagg acctgcagcg 1800
gtgcgtgcgc ggcatccaga cgatcgagcg cgtgatccag tcccgggcct tcgccggcct 1860
tcgccaactt cacctacgcc aacgcttcca cggagtccat cttcaccgac tccgccaact 1920
tcccccaact tccccgtcaa cctcctgccg cggcacgtca acgactcccg gacgcccgag 1980
cagtactgca gggacctgca gggacaccgt catgaccatc tggcattacc acggcgggtg 2040
ccaggtcggc gccgtcgtgg acgaccgtgg acgacgatta ccgggtgttc ggcgtgcagc 2100
gactgagggt gatcgacagc tccacgttca agtacgttca agtactcccc cggcaccaac 2160
ccgcaggcca ccgtcatgat gctcggaagg tatatgggtg tgaaagggtg tgaaaattca 2220
ggccgagaga tggaggaaat ga 2242
<210> 18
<211> 672
<212> PRT
<213> 玉米(Zea mays)
<400> 18
Met Ala Pro Gly Leu Ala Asn Trp Val Ala Leu Val Leu Thr Val Leu
1 5 10 15
Leu Gly Leu Ser Cys Leu Val Val Ala Leu Ser Glu Asp Glu Thr Leu
20 25 30
Asp Lys Leu Arg Phe Val Arg His Ala Gln Asp Ala Pro Leu Val Ser
35 40 45
Gln Tyr Asn Tyr Ile Val Ile Gly Gly Gly Thr Ala Gly Cys Pro Leu
50 55 60
Ala Ala Thr Leu Ser Glu Gly Cys Pro Leu Ala Ala Thr Leu Ser Glu
65 70 75 80
His Ser Arg Val Leu Leu Leu Glu Arg Gly Gly Leu Pro Ser Arg Asn
85 90 95
Met Ser Asp Gln Gln His Phe Thr Asp Ala Leu Ala Asp Thr Ser Pro
100 105 110
Ala Ser Pro Ala Gln Arg Phe Val Ser Glu Asp Gly Val Val Asn Ala
115 120 125
Arg Ala Arg Val Leu Gly Gly Gly Ser Cys Leu Asn Arg Val Leu Gly
130 135 140
Gly Gly Ser Cys Leu Asn Ala Gly Phe Tyr Thr Arg Ala Ser Thr Asp
145 150 155 160
Tyr Val Arg Ala Ala Gly Trp Asp Ala Arg Leu Val Asn Ser Ser Tyr
165 170 175
Arg Trp Val Glu Arg Ala Leu Val Phe Arg Pro Ala Val Pro Pro Trp
180 185 190
Gln Ala Ala Leu Arg Asp Ala Leu Leu Glu Ala Gly Val Thr Pro Asp
195 200 205
Asn Gly Leu Glu Ala Gly Val Thr Pro Asp Asn Gly Phe Thr Phe Asp
210 215 220
His Val Thr Gly Thr Lys Ile Gly Gly Thr Ile Phe Asp Ser Ser Gly
225 230 235 240
Gln Arg His Thr Ala Ala Asp Phe Leu Arg His Ala Arg Pro Arg Gly
245 250 255
Leu Thr Val Phe Leu Tyr Ala Thr Val Ser Arg Ile Leu Phe Arg Gln
260 265 270
Gln Glu Gly Val Pro Tyr Pro Val Arg Gln Gln Glu Gly Val Pro Tyr
275 280 285
Pro Val Ala Tyr Gly Val Val Phe Thr Asp Pro Leu Gly Val Gln His
290 295 300
Arg Val Tyr Leu Arg Asp Gly Ala Lys Asn Glu Val Ile Leu Ser Ala
305 310 315 320
Gly Thr Leu Gly Ser Pro Gln Leu Leu Met Leu Ser Gly Val Gly Pro
325 330 335
Gln Ala His Leu Glu Ala His Gly Val Gln Val Leu Val Asp Glu Ala
340 345 350
His Gly Val Gln Val Leu Val Asp Gln Pro Met Val Gly Gln Gly Val
355 360 365
Ala Asp Asn Pro Met Asn Ser Val Phe Ile Pro Ser Pro Val Pro Val
370 375 380
Thr Leu Ser Leu Val Gln Val Val Gly Ile Thr Arg Ser Gly Ser Phe
385 390 395 400
Ile Glu Gly Val Ser Gly Ser Glu Phe Gly Ile Pro Val Ser Glu Gly
405 410 415
Ala Arg Arg Leu Ile Pro Val Ser Glu Gly Ala Arg Arg Leu Ala Arg
420 425 430
Ser Phe Gly Leu Phe Ser Pro Gln Thr Gly Gln Leu Gly Thr Leu Pro
435 440 445
Pro Lys Gln Arg Thr Pro Glu Ala Leu Glu Arg Ala Ala Glu Ala Met
450 455 460
Arg Arg Leu Asp Arg Arg Ala Phe Arg Gly Gly Phe Ile Leu Glu Lys
465 470 475 480
Ile Leu Gly Pro Val Ser Ser Gly His Val Ile Leu Gly Pro Val Ser
485 490 495
Ser Gly His Val Glu Leu Arg Ser Ala Asp Pro Arg Ala Asn Pro Ala
500 505 510
Val Thr Phe Asn Tyr Phe Gln Glu Ser Glu Asp Leu Gln Arg Cys Val
515 520 525
Arg Gly Ile Gln Thr Ile Glu Arg Val Ile Gln Ser Arg Ala Phe Ala
530 535 540
Asn Phe Thr Tyr Ala Asn Ala Ser Thr Glu Ser Ile Phe Thr Asp Ser
545 550 555 560
Ala Ser Thr Glu Ser Ile Phe Thr Asp Ser Ala Asn Phe Pro Val Asn
565 570 575
Leu Leu Pro Arg His Val Asn Asp Ser Arg Thr Pro Glu Gln Tyr Cys
580 585 590
Arg Asp Thr Val Met Thr Ile Trp His Tyr His Gly Gly Cys Gln Val
595 600 605
Gly Ala Val Val Asp Asp Asp Tyr Arg Val Phe Gly Val Gln Arg Leu
610 615 620
Arg Val Ile Asp Ser Ser Val Gln Arg Leu Arg Val Ile Asp Ser Ser
625 630 635 640
Thr Phe Lys Tyr Ser Pro Gly Thr Asn Pro Gln Ala Thr Val Met Met
645 650 655
Leu Gly Arg Tyr Met Gly Val Lys Ile Gln Ala Glu Arg Trp Arg Lys
660 665 670
<210> 19
<211> 1959
<212> DNA
<213> 谷子(Setaria italica)
<400> 19
tttgccggcg aaaatggcgc tggggcttgc gagctcggcg gcgctggttc tagccaccat 60
cctgggctcc ttgtgcctcg tcgcactctc agaggatgag caactcgaga acctgcggtt 120
cgtgcggcgc gcacaggacg cgcccctggt gtcgcactac aactacatca tcatcggcgg 180
cggcacggcg ggttgcccac tggcggcgac gctgtcggag cactcccgcg tgctgctcct 240
ggagcgcggt ggcctcccct accgcaacat gtccaaccag cagcacttca cggacgcgct 300
ggcggacacg tccccggcgt cgccggcgca gcggttcatc tccgaggacg gcgtggtgaa 360
cgcccgggcg cgggtgctgg gcggtggcag ctgcctcaac gccgggttct acacgcgcgc 420
cagcaacgac tacgtgcacg ccgccgggtg ggacgcgcgc ctcgtcaact cgtcctaccg 480
ctgggtggag cgcgcgctgg tgttccgccc cgacgttccg ccgtggcagg cggcgctccg 540
cgacgcgctg ctcgaggccg gcgtcacgcc cgacaacggg ttcaccttcg accacgtcac 600
ggggaccaag atcgggggca ccatcttcga cagcagcggg cagcggcaca ccgccgccga 660
cttcctccgc cacgcgcgcc ccgggggcct caccgtgctc ctctacgcca ccgtctcgag 720
gatcctcttc aggcagcagg agggggcgcc gtacccggtg gcgtacggcg tggtgttcag 780
cgacccgctg ggggtgcagc accgggtgta cctccaggac ggcggcaaga acgaggtgat 840
cctatcggcg gggacgctgg ggagcccgca gctgctgatg ctgagcggcg tcgggccgca 900
ggcgcacctg gaggcgcacg gcgtccaggt gctagtggac cagcccatgg tcgggcaggg 960
cgtggccgac aatcccatga actcggtgtt catcccgtcg cccgtgcccg tcgcgctctc 1020
gctcgtgcag gtcgtgggga tcacccgcac cggcagcttc atcgagggcg tcagcggctc 1080
cgagttcggc atcccagtct ccgagggcgt ccgccgcctc gctcgcaact tcggcctctt 1140
ctctcctcag accgggcagc tcggcacgct gccgccgaag cagaggacgc cggaggcgct 1200
gcagcgcgcg gcggaggcga tgcggcggct ggacaggcgg gcgttccggg gcggcttcat 1260
cctggagaag atcctggggc ccgtgtcgtc gggccacatc gagctgcgct ccaccgaccc 1320
gcgcgcgaac ccggcggtga cgttcaacta cttccaggag aaggaggacc tggaccggtg 1380
cgtgcatggc atcgagacga tcgagcgggt catccagtcc cgggccttcg ccaatttcac 1440
ctacgccaac gcctccgtcg agtccatctt caccgactcc gccaacttcc ccgtcaacct 1500
gctgccgcgc cacgccaacg actcccggac gccggagcag tactgcaggg acaccgtcat 1560
gaccatctgg cactaccacg gcggctgcca ggtcggcgcc gtcgtcgacg atgactaccg 1620
ggtgttcggc gtgcagcggc tcagggtcat cgacagctcc accttcaagt actccccagg 1680
caccaacccg caggccaccg tcatgatgct cggaaggtat atgggtgtga aaatccaggc 1740
agagagatgg aggaaatgat caagaagagc aaatgatttc tgtatcgggg tacctgacta 1800
tctgctttag agtagtttta ttttattttt ctctttactc ttctctagag atagttctag 1860
tttccggttg ttgattccaa atccttcaca cccttgagat gcatagctca gcatttcgca 1920
agaacagtga aaaattatgc tgcattggca tgatggaaa 1959
<210> 20
<211> 581
<212> PRT
<213> 谷子(Setaria italica)
<400> 20
Met Ala Leu Gly Leu Ala Ser Ser Ala Ala Leu Val Leu Ala Thr Ile
1 5 10 15
Leu Gly Ser Leu Cys Leu Val Ala Leu Ser Glu Asp Glu Gln Leu Glu
20 25 30
Asn Leu Arg Phe Val Arg Arg Ala Gln Asp Ala Pro Leu Val Ser His
35 40 45
Tyr Asn Tyr Ile Ile Ile Gly Gly Gly Thr Ala Gly Cys Pro Leu Ala
50 55 60
Ala Thr Leu Ser Glu His Ser Arg Val Leu Leu Leu Glu Arg Gly Gly
65 70 75 80
Leu Pro Tyr Arg Asn Met Ser Asn Gln Gln His Phe Thr Asp Ala Leu
85 90 95
Ala Asp Thr Ser Pro Ala Ser Pro Ala Gln Arg Phe Ile Ser Glu Asp
100 105 110
Gly Val Val Asn Ala Arg Ala Arg Val Leu Gly Gly Gly Ser Cys Leu
115 120 125
Asn Ala Gly Phe Tyr Thr Arg Ala Ser Asn Asp Tyr Val His Ala Ala
130 135 140
Gly Trp Asp Ala Arg Leu Val Asn Ser Ser Tyr Arg Trp Val Glu Arg
145 150 155 160
Ala Leu Val Phe Arg Pro Asp Val Pro Pro Trp Gln Ala Ala Leu Arg
165 170 175
Asp Ala Leu Leu Glu Ala Gly Val Thr Pro Asp Asn Gly Phe Thr Phe
180 185 190
Asp His Val Thr Gly Thr Lys Ile Gly Gly Thr Ile Phe Asp Ser Ser
195 200 205
Gly Gln Arg His Thr Ala Ala Asp Phe Leu Arg His Ala Arg Pro Gly
210 215 220
Gly Leu Thr Val Leu Leu Tyr Ala Thr Val Ser Arg Ile Leu Phe Arg
225 230 235 240
Gln Gln Glu Gly Ala Pro Tyr Pro Val Ala Tyr Gly Val Val Phe Ser
245 250 255
Asp Pro Leu Gly Val Gln His Arg Val Tyr Leu Gln Asp Gly Gly Lys
260 265 270
Asn Glu Val Ile Leu Ser Ala Gly Thr Leu Gly Ser Pro Gln Leu Leu
275 280 285
Met Leu Ser Gly Val Gly Pro Gln Ala His Leu Glu Ala His Gly Val
290 295 300
Gln Val Leu Val Asp Gln Pro Met Val Gly Gln Gly Val Ala Asp Asn
305 310 315 320
Pro Met Asn Ser Val Phe Ile Pro Ser Pro Val Pro Val Ala Leu Ser
325 330 335
Leu Val Gln Val Val Gly Ile Thr Arg Thr Gly Ser Phe Ile Glu Gly
340 345 350
Val Ser Gly Ser Glu Phe Gly Ile Pro Val Ser Glu Gly Val Arg Arg
355 360 365
Leu Ala Arg Asn Phe Gly Leu Phe Ser Pro Gln Thr Gly Gln Leu Gly
370 375 380
Thr Leu Pro Pro Lys Gln Arg Thr Pro Glu Ala Leu Gln Arg Ala Ala
385 390 395 400
Glu Ala Met Arg Arg Leu Asp Arg Arg Ala Phe Arg Gly Gly Phe Ile
405 410 415
Leu Glu Lys Ile Leu Gly Pro Val Ser Ser Gly His Ile Glu Leu Arg
420 425 430
Ser Thr Asp Pro Arg Ala Asn Pro Ala Val Thr Phe Asn Tyr Phe Gln
435 440 445
Glu Lys Glu Asp Leu Asp Arg Cys Val His Gly Ile Glu Thr Ile Glu
450 455 460
Arg Val Ile Gln Ser Arg Ala Phe Ala Asn Phe Thr Tyr Ala Asn Ala
465 470 475 480
Ser Val Glu Ser Ile Phe Thr Asp Ser Ala Asn Phe Pro Val Asn Leu
485 490 495
Leu Pro Arg His Ala Asn Asp Ser Arg Thr Pro Glu Gln Tyr Cys Arg
500 505 510
Asp Thr Val Met Thr Ile Trp His Tyr His Gly Gly Cys Gln Val Gly
515 520 525
Ala Val Val Asp Asp Asp Tyr Arg Val Phe Gly Val Gln Arg Leu Arg
530 535 540
Val Ile Asp Ser Ser Thr Phe Lys Tyr Ser Pro Gly Thr Asn Pro Gln
545 550 555 560
Ala Thr Val Met Met Leu Gly Arg Tyr Met Gly Val Lys Ile Gln Ala
565 570 575
Glu Arg Trp Arg Lys
580
<210> 21
<211> 2000
<212> DNA
<213> 二穗短柄草(Brachypodium distachyon)
<400> 21
atggcacttt gccgcgcgat ctcggcggcg ctggtgctcg ccgccgccgt cttactcggc 60
tcgctctgcc ccgtcgccct ctcggaggac ggtgcgtaca tatattctgc cttccgtgtt 120
tcttaagttg tcacgactca cgattaacgt gtctcattcg tgcgtgcaga gcgactggag 180
aacctgcggt tcgtgcagca cgcatcggac gcgccgctgg tgtcgcactt caactacatc 240
atcgtgggcg ggggcacgtc ggggtgcccg ctggcggcga cgctgtcgga gcactcgcgg 300
gtgctcctcc tggagcgggg cgggctgccg cacgccaaca tgtcgagcca ggagcacttc 360
acggacgcgc tggcggacac gtccccggcg tccccggcgc agcggttcgt ttcggaagac 420
ggggtggtga acgcccgcgc cagggtgctt ggcggaggga gctgcctcaa cgcgggcttc 480
tacacgcgcg ccagcaacga gtacgtgcgc accgccgggt gggaccccag gctggtgaac 540
tcgtcctacc gctgggtgga gcgcgcgctc gtgttccggc caggcgtgcc gccgtggcag 600
gcggctctgc gggacgcgct gctcgaggcc ggcgtcacgc cggataacgg cttcacgttt 660
gatcatgtca cggggaccaa gatcgggggc accatcttcg acggcaacgg ccagcggcac 720
acggccgccg acttcctacg gcacgccagg cccaggggcc tcaccgtcgt gctctacgcc 780
accgtgtcac ggatcctctt cagaagccaa ggtactcttt catgatccta atttcatgtc 840
gaactacgca gaaagaagta agaacgactt atttttgtgc cgtgacacta ctgtagaggg 900
cgttccgtac ccggtggcgt acggggtggt gttcggggac ccgctggggg tgcagcaccg 960
ggtgtacctc cgtgacgggg ccaagaacga ggtgatcctg gcggccggga cgctggggag 1020
cccgcagctg ctgatgctga gcggcgtggg cccgcaggcg cacctggagg cccacggcat 1080
ccaggccctg gtcgaccagc ccatggtcgg gcagggcgtc gccgacaacc ccatgaactc 1140
ggtgttcatc ccgtcgccgg tgcccgtggg cctctccctg gtgcaggtcg tcggcatcac 1200
caagtccggc agcttcatcg agggcgtcag cggctcggag ttcggcatcc cggtctccga 1260
cagcgcccgc cgcctcgccg ccagcttcgg cctcttctct cctcagaccg ggcagctcgg 1320
cacgctgccg cccaagcaga ggacgcccga ggcgctgcag cgcgcggcgg acgccatgcg 1380
gcggctcgac cggcgcgcgt tccggggcgg cttcatcctg gagaagatcc tcgggccggt 1440
ctccacgggg cacgtcgagc tccggaccac ggacccgagg gccaacccgg cggtgctgtt 1500
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caggtcgccc gagcagtact gcagggagac cgtcatgacc atctggcact accacggcgg 1740
ctgccatgtc ggcgccgtcg tcgacgacga ttaccgggtg tttggggtaa gggggctcag 1800
ggtcatcgac agctccacct tcaggtactc ccccggcacc aacccgcagg ccaccgtcat 1860
gatgctcggc aggtaaactc gtcgaagtct gaaatgatta gttgtgttga tctgaatgac 1920
cttgagtaaa aacactagtg ttctgaatct gcacaggtat atgggagtga agattcaggc 1980
cgagagatgg aggaagtgat 2000
<210> 22
<211> 1752
<212> DNA
<213> 二穗短柄草(Brachypodium distachyon)
<400> 22
atggcacttt gccgcgcgat ctcggcggcg ctggtgctcg ccgccgccgt cttactcggc 60
tcgctctgcc ccgtcgccct ctcggaggac gagcgactgg agaacctgcg gttcgtgcag 120
cacgcatcgg acgcgccgct ggtgtcgcac ttcaactaca tcatcgtggg cgggggcacg 180
tcggggtgcc cgctggcggc gacgctgtcg gagcactcgc gggtgctcct cctggagcgg 240
ggcgggctgc cgcacgccaa catgtcgagc caggagcact tcacggacgc gctggcggac 300
acgtccccgg cgtccccggc gcagcggttc gtttcggaag acggggtggt gaacgcccgc 360
gccagggtgc ttggcggagg gagctgcctc aacgcgggct tctacacgcg cgccagcaac 420
gagtacgtgc gcaccgccgg gtgggacccc aggctggtga actcgtccta ccgctgggtg 480
gagcgcgcgc tcgtgttccg gccaggcgtg ccgccgtggc aggcggctct gcgggacgcg 540
ctgctcgagg ccggcgtcac gccggataac ggcttcacgt ttgatcatgt cacggggacc 600
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ttcagaagcc aagagggcgt tccgtacccg gtggcgtacg gggtggtgtt cggggacccg 780
ctgggggtgc agcaccgggt gtacctccgt gacggggcca agaacgaggt gatcctggcg 840
gccgggacgc tggggagccc gcagctgctg atgctgagcg gcgtgggccc gcaggcgcac 900
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caggtcgtcg gcatcaccaa gtccggcagc ttcatcgagg gcgtcagcgg ctcggagttc 1080
ggcatcccgg tctccgacag cgcccgccgc ctcgccgcca gcttcggcct cttctctcct 1140
cagaccgggc agctcggcac gctgccgccc aagcagagga cgcccgaggc gctgcagcgc 1200
gcggcggacg ccatgcggcg gctcgaccgg cgcgcgttcc ggggcggctt catcctggag 1260
aagatcctcg ggccggtctc cacggggcac gtcgagctcc ggaccacgga cccgagggcc 1320
aacccggcgg tgctgttcaa ctacttccag gaggcggagg acctggagcg gtgcgtgcgg 1380
gggatccaga cgatcgagcg tgtgatcgcg tcgcgtgcct tttcgaactt cacctactcc 1440
aacgcctccg tggagtccat cttcagcgac tcggcgaact tccccgtgaa cctgctgccg 1500
cggcacgcca acgactccag gtcgcccgag cagtactgca gggagaccgt catgaccatc 1560
tggcactacc acggcggctg ccatgtcggc gccgtcgtcg acgacgatta ccgggtgttt 1620
ggggtaaggg ggctcagggt catcgacagc tccaccttca ggtactcccc cggcaccaac 1680
ccgcaggcca ccgtcatgat gctcggcagg tatatgggag tgaagattca ggccgagaga 1740
tggaggaagt ga 1752
<210> 23
<211> 583
<212> PRT
<213> 二穗短柄草(Brachypodium distachyon)
<400> 23
Met Ala Leu Cys Arg Ala Ile Ser Ala Ala Leu Val Leu Ala Ala Ala
1 5 10 15
Val Leu Leu Gly Ser Leu Cys Pro Val Ala Leu Ser Glu Asp Glu Arg
20 25 30
Leu Glu Asn Leu Arg Phe Val Gln His Ala Ser Asp Ala Pro Leu Val
35 40 45
Ser His Phe Asn Tyr Ile Ile Val Gly Gly Gly Thr Ser Gly Cys Pro
50 55 60
Leu Ala Ala Thr Leu Ser Glu His Ser Arg Val Leu Leu Leu Glu Arg
65 70 75 80
Gly Gly Leu Pro His Ala Asn Met Ser Ser Gln Glu His Phe Thr Asp
85 90 95
Ala Leu Ala Asp Thr Ser Pro Ala Ser Pro Ala Gln Arg Phe Val Ser
100 105 110
Glu Asp Gly Val Val Asn Ala Arg Ala Arg Val Leu Gly Gly Gly Ser
115 120 125
Cys Leu Asn Ala Gly Phe Tyr Thr Arg Ala Ser Asn Glu Tyr Val Arg
130 135 140
Thr Ala Gly Trp Asp Pro Arg Leu Val Asn Ser Ser Tyr Arg Trp Val
145 150 155 160
Glu Arg Ala Leu Val Phe Arg Pro Gly Val Pro Pro Trp Gln Ala Ala
165 170 175
Leu Arg Asp Ala Leu Leu Glu Ala Gly Val Thr Pro Asp Asn Gly Phe
180 185 190
Thr Phe Asp His Val Thr Gly Thr Lys Ile Gly Gly Thr Ile Phe Asp
195 200 205
Gly Asn Gly Gln Arg His Thr Ala Ala Asp Phe Leu Arg His Ala Arg
210 215 220
Pro Arg Gly Leu Thr Val Val Leu Tyr Ala Thr Val Ser Arg Ile Leu
225 230 235 240
Phe Arg Ser Gln Glu Gly Val Pro Tyr Pro Val Ala Tyr Gly Val Val
245 250 255
Phe Gly Asp Pro Leu Gly Val Gln His Arg Val Tyr Leu Arg Asp Gly
260 265 270
Ala Lys Asn Glu Val Ile Leu Ala Ala Gly Thr Leu Gly Ser Pro Gln
275 280 285
Leu Leu Met Leu Ser Gly Val Gly Pro Gln Ala His Leu Glu Ala His
290 295 300
Gly Ile Gln Ala Leu Val Asp Gln Pro Met Val Gly Gln Gly Val Ala
305 310 315 320
Asp Asn Pro Met Asn Ser Val Phe Ile Pro Ser Pro Val Pro Val Gly
325 330 335
Leu Ser Leu Val Gln Val Val Gly Ile Thr Lys Ser Gly Ser Phe Ile
340 345 350
Glu Gly Val Ser Gly Ser Glu Phe Gly Ile Pro Val Ser Asp Ser Ala
355 360 365
Arg Arg Leu Ala Ala Ser Phe Gly Leu Phe Ser Pro Gln Thr Gly Gln
370 375 380
Leu Gly Thr Leu Pro Pro Lys Gln Arg Thr Pro Glu Ala Leu Gln Arg
385 390 395 400
Ala Ala Asp Ala Met Arg Arg Leu Asp Arg Arg Ala Phe Arg Gly Gly
405 410 415
Phe Ile Leu Glu Lys Ile Leu Gly Pro Val Ser Thr Gly His Val Glu
420 425 430
Leu Arg Thr Thr Asp Pro Arg Ala Asn Pro Ala Val Leu Phe Asn Tyr
435 440 445
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450 455 460
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465 470 475 480
Asn Ala Ser Val Glu Ser Ile Phe Ser Asp Ser Ala Asn Phe Pro Val
485 490 495
Asn Leu Leu Pro Arg His Ala Asn Asp Ser Arg Ser Pro Glu Gln Tyr
500 505 510
Cys Arg Glu Thr Val Met Thr Ile Trp His Tyr His Gly Gly Cys His
515 520 525
Val Gly Ala Val Val Asp Asp Asp Tyr Arg Val Phe Gly Val Arg Gly
530 535 540
Leu Arg Val Ile Asp Ser Ser Thr Phe Arg Tyr Ser Pro Gly Thr Asn
545 550 555 560
Pro Gln Ala Thr Val Met Met Leu Gly Arg Tyr Met Gly Val Lys Ile
565 570 575
Gln Ala Glu Arg Trp Arg Lys
580
<210> 24
<211> 678
<212> DNA
<213> 人工合成(artificial synthesis)
<400> 24
atggcctcct ccgagaacgt gatcaccgag ttcatgcgct tcaaggtgcg catggagggc 60
accgtgaacg gccacgagtt cgagatcgag ggcgagggcg agggccgccc ctacgagggc 120
cacaacaccg tgaagctgaa ggtgaccaag ggcggccccc tgcccttcgc ctgggacatc 180
ctgtcccccc agttccagta cggctccaag gtgtacgtga agcaccccgc cgacatcccc 240
gactacaaga agctgtcctt ccccgagggc ttcaagtggg agcgcgtgat gaacttcgag 300
gacggcggcg tggccaccgt gacccaggac tcctccctgc aggacggctg cttcatctac 360
aaggtgaagt tcatcggcgt gaacttcccc tccgacggcc ccgtgatgca gaagaagacc 420
atgggctggg aggcctccac cgagcgcctg tacccccgcg acggcgtgct gaagggcgag 480
acccacaagg ccctgaagct gaaggacggc ggccactacc tggtggagtt caagtccatc 540
tacatggcca agaagcccgt gcagctgccc ggctactact acgtggacgc caagctggac 600
atcacctccc acaacgagga ctacaccatc gtggagcagt acgagcgcac cgagggccgc 660
caccacctgt tcctgtag 678
<210> 25
<211> 812
<212> DNA
<213> 大麦(hordeum vulgare)
<400> 25
aaccgtctct tcgtgagaat aaccgtggcc taaaaataag ccgatgagga taaataaaat 60
gtggtggtac agtacttcaa gaggtttact catcaagagg atgcttttcc gatgagctct 120
agtagtacat cggacctcac atacctccat tgtggtgaaa tattttgtgc tcatttagtg 180
atgggtaaat tttgtttatg tcactctagg ttttgacatt tcagttttgc cactcttagg 240
ttttgacaaa taatttccat tccgcggcaa aagcaaaaca attttatttt acttttacca 300
ctcttagctt tcacaatgta tcacaaatgc cactctagaa attctgttta tgccacagaa 360
tgtgaaaaaa aacactcact tatttgaagc caaggtgttc atggcatgga aatgtgacat 420
aaagtaacgt tcgtgtataa gaaaaaattg tactcctcgt aacaagagac ggaaacatca 480
tgagacaatc gcgtttggaa ggctttgcat cacctttgga tgatgcgcat gaatggagtc 540
gtctgcttgc tagccttcgc ctaccgccca ctgagtccgg gcggcaacta ccatcggcga 600
acgacccagc tgacctctac cgaccggact tgaatgcgct accttcgtca gcgacgatgg 660
ccgcgtacgc tggcgacgtg cccccgcatg catggcggca catggcgagc tcagaccgtg 720
cgtggctggc tacaaatacg taccccgtga gtgccctagc tagaaactta cacctgcaac 780
tgcgagagcg agcgtgtgag tgtagccgag ta 812
<210> 26
<211> 349
<212> DNA
<213> 马铃薯(Solanum tuberosum)
<400> 26
ttcgaacgcg taggtaccac atggttaacc tagacttgtc catcttctgg attggccaac 60
ttaattaatg tatgaaataa aaggatgcac acatagtgac atgctaatca ctataatgtg 120
ggcatcaaag ttgtgtgtta tgtgtaatta ctagttatct gaataaaaga gaaagagatc 180
atccatattt cttatcctaa atgaatgtca cgtgtcttta taattctttg atgaaccaga 240
tgcatttcat taaccaaatc catatacata taaatattaa tcatatataa ttaatatcaa 300
ttgggttagc aaaacaaatc tagtctaggt gtgttttgcg aatgcggcc 349
<210> 27
<211> 2023
<212> DNA
<213> 水稻(Oryza sativa Indica)
<400> 27
atggcagcac ttggccgcgc gagctcgtcg gcgccggtgc ttgccgccgc cgccgccgcc 60
gccgtgctcc tctcgctctg cctcgccgcg ctctcggaag agcaaggtgc gtaaacgttg 120
cgttgtatct ttgcgttgat gcgtgttgcg tcgtcgtcgt gttcatggcg tgcgatggcg 180
ttgtgcagag caactggaga acctgcggtt cgtgcggcac gcgcaggacg cgccgctggt 240
gtcgagctac aactacatcg tcatcggcgg cggcacggcg gggtgcccgc tggcggcgac 300
gctgtcggag cactcgcgcg tgctgctgct ggagcgcggc ggcctgccgt acgccaacat 360
gtcgagcgag cagcacttca cggacgcgct ggccgacacg tcgccggcgt cgccggcgca 420
gcggttcatc tcggaggacg gcgtggtgaa cgcccgggcg cgggtgctcg gcggcgggag 480
ctgcctcaac gccgggttct acacgcgggc gagcaacgag tacgtgcgcg ccgccgggtg 540
ggacgcgcgg ctggtgaact cgtcgtaccg gtgggtggag cgctcgctgg tgttccgccc 600
cgacgtgccg ccgtggcagg cggcgctccg cgacgcgctg ctcgaggtcg gcgtcacgcc 660
cgacaacggc ttcaccttcg accacgtcac cggcaccaag atcggcggca ccatcttcga 720
caactccggc cagcgccaca ccgccgccga cttcctccgc cacgcccgcc cccgcggcct 780
caccgtcctc ctctacgcca ccgtctcccg tatcctcttc aaaagccaag gtacacagct 840
acgatgaaaa tggaaaatgt gctgtgcgcc gaagaagctt gacctcacga cggcgagctt 900
ttgccatggc gtgcagacgg ggtgccgtac ccggtggcgt acggggtggt gttctcggac 960
ccgctggggg tgcagcaccg ggtgtacctc cgcgacggcg acaagaacga ggtgatcgtg 1020
tcggcgggga cgctggggag cccgcagctg ctgatgctga gcggcgtcgg gccgcaggcg 1080
cacctggagg cgcacggcat cgaggtgatc gtggaccaac ccatggtcgg gcagggcgtc 1140
gccgacaacc cgatgaactc ggtgttcatc ccgtcgccgg tgccggtgga gctctccctg 1200
gtgcaggtcg tcggcatcac ccgctccggc agcttcatcg agggggtgag cgggtcggag 1260
ttcggcatgc cggtgtcgga cggcgcgctc cggtgggcgc gcagcttcgg gatgctgtcg 1320
ccgcagacgg ggcagctcgg cacgctgccg ccgaagcaga ggacgccgga ggcgctgcag 1380
cgggcggcgg aggcgatgat gcggctggac aggagggcgt tccggggagg cttcatcctg 1440
gagaagatcc tcgggccggt gtcctccggc cacgtcgagc tgcgaaccac cgacccgagg 1500
gcgaacccgt cggtgacgtt caactacttc cgcgaggcgg aggatctgga gcggtgcgtc 1560
catggcatcg agacgatcga gcgggtgatc cagtcgcggg ccttctccaa cttcacctac 1620
gccaacgcct ccgtcgagtc catcttcacc gattccgcca acttccccgt caacctgctg 1680
ccgcgccatg tcaacgactc gcgctcgccg gagcagtact gcatggacac cgtcatgacc 1740
atctggcact accacggcgg ctgccatgtc ggcgccgtcg tcgacgacga ttaccgggtg 1800
ttcggggtgc aggggctcag ggtgatcgac agctccacct tcaagtactc ccccggcacc 1860
aaccctcagg ccaccgtcat gatgctcggc aggtaactgg catcatttta gctcatgaaa 1920
gtgcattgcc atgagtaaca acacactaac agtatagttt tcaatatgga cactgggcag 1980
gtatatgggt gtgaagattc agtccgagag atggaagaaa tga 2023
<210> 28
<211> 497
<212> DNA
<213> 水稻(Oryza sativa Indica)
<400> 28
tgaacaaaag ataatttcgt ttcaggagca aaaaaatgca tgtaattcaa ggaaaagaaa 60
atgttcaact gtctttagag tttagagtag attttatttg cacccactta atttttactc 120
ttctctagac ataggttcag tatctgcttg ttgattatgt aaccttgaag aagcattgca 180
aaaacaaagc ggaaacttat gttaccaagg gcatgacgaa gaaataaatg gattagattt 240
cattgacact tagaaaatgg aaccagcaaa tcaaggctga aaataattac actagaaact 300
tattttaatg gctttacatg tcgctacata cttaaatcaa tcaaagttgc taccaaagcc 360
atgttcccta aacagagggt tccgggctct caaacattct taatcttcta tacattgata 420
aaaagtatac ataaaaagaa aacctattaa gatggaaatg ttgaattctc ttaagaaagg 480
cataaaaaat gcagggt 497
<210> 29
<211> 1488
<212> DNA
<213> 玉米(Zea mays)
<400> 29
atggcggcga caatggcagt gacgacgatg gtgacgagga gcaaggagag ctggtcgtca 60
ttgcaggtcc cggcggtggc attcccttgg aagccacgag gtggcaagac cggcggcctc 120
gagttccctc gccgggcgat gttcgccagc gtcggcctca acgtgtgccc gggcgtcccg 180
gcggggcgcg acccgcggga gcccgatccc aaggtcgtcc gggcggcctg cggcctggtc 240
caggcacaag tcctcttcca ggggtttaac tgggagtcgt gcaagcagca gggaggctgg 300
tacaacaggc tcaaggccca ggtcgacgac atcgccaagg ccggcgtcac gcacgtctgg 360
ctgcctccac cctcgcactc cgtctcgcca caaggctaca tgccaggccg cctatacgac 420
ctggacgcgt ccaagtacgg cacggcggcg gagctcaagt ccctgatagc ggcgttccac 480
ggcaggggcg tgcagtgcgt ggcggacatc gtcatcaacc accggtgcgc ggaaaagaag 540
gacgcgcgcg gcgtgtactg catcttcgag ggcgggactc ccgacgaccg cctggactgg 600
ggccccggga tgatctgcag cgacgacacg cagtactcgg acgggacggg gcaccgcgac 660
acgggcgagg ggttcgcggc ggcgcccgac atcgaccacc tcaacccgcg cgtgcagcgg 720
gagctctccg cctggctcaa ctggctcagg tccgacgccg tggggttcga cggctggcgc 780
ctcgacttcg ccaagggcta ctcgccggcc gtcgccagaa tgtacgtgga gagcacgggg 840
ccgccgagct tcgtcgtcgc ggagatatgg aactcgctga gctacagcgg ggacggcaag 900
ccggcgccca accaggacca gtgccggcag gagctgctgg actggacgcg ggccgtcggc 960
gggcccgcca tggcgttcga cttccccacc aagggcctgc tgcaggcggg cgtgcagggg 1020
gagctgtggc ggctgcgcga cagctccggc aacgcggccg gcctgatcgg gtgggcgccc 1080
gagaaggccg tcaccttcgt cgacaaccat gacaccgggt cgacgcagaa gctctggccg 1140
ttcccatccg acaaggtcat gcagggctac gcctacatcc tcacccatcc aggagtcccc 1200
tgcattttct acgaccacat gttcgactgg aacctgaagc aggagatatc cacgctgtct 1260
gccatcaggg cgcggaacgg catccgcgcc gggagcaagc tgcggatcct cgtggcggac 1320
gcggacgcgt acgtggccgt cgtcgacgag aaggtcatgg tgaagatcgg gacaaggtac 1380
ggcgtgagca gcgtggtccc gtcggatttc cacccggcgg cgcacggcaa ggactactgc 1440
gtctgggaga aagcgagcct ccgcgtcccg gcggggcgcc acctctag 1488
<210> 30
<211> 2737
<212> DNA
<213> 玉米(Zea mays)
<400> 30
tgcaccggac actgtctggt ggcataccag acagtccggt gtgccagatc agggcaccct 60
tcggttcctt tgctcctttg cttttgaacc ctaactttga tcgtttattg gtttgtgttg 120
aacctttatg cacctgtgga atatataatc tagaacaaac tagttagtcc aatcatttgt 180
gttgggcatt caaccaccaa aattatttat aggaaaaggt taaaccttat ttccctttca 240
atctccccct ttttggtgat tgatgccaac acaaaccaaa gaaaatatat aagtgcagaa 300
ttgaactagt ttgcataagg taagtgcata ggttacttag aattaaatca atttatactt 360
ttacttgata tgcatggttg ctttctttta ttttaacatt ttggaccaca tttgcaccac 420
ttgttttgtt ttttgcaaat ctttttggaa attctttttc aaagtctttt gcaaatagtc 480
aaaggtatat gaataagatt gtaagaagca ttttcaagat ttgaaatttc tccccctgtt 540
tcaaatgctt ttcctttgac taaacaaaac tccccctgaa taaaattctc ctcttagctt 600
tcaagagggt tttaaataga tatcaattgg aaatatattt agatgctaat tttgaaaata 660
taccaattga aaatcaacat accaatttga aattaaacat accaatttaa aaaatttcaa 720
aaagtggtgg tgcggtcctt ttgctttggg cttaatattt ctcccccttt ggcattaatc 780
gccaaaaacg gagactttgt gagccattta tactttctcc ccattggtaa atgaaatatg 840
agtgaaagat tataccaaat ttggacagtg atgcggagtg acggcgaagg ataaacgata 900
ccgttagagt ggagtggaag ccttgtcttc gccgaagact ccatttccct ttcaatctac 960
gacttagcat agaaatacac ttgaaaacac attagtcgta gccacgaaag agatatgatc 1020
aaaggtatac aaatgagcta tgtgtgtaat gtttcaatca aagtttcgag aatcaagaat 1080
atttagctca ttcctaagtt tgctaaaggt tttatcatct aatggtttgg taaagatatc 1140
gactaattgt tctttggtgc taacataagc aatctcgata tcaccccttt gttggtgatc 1200
cctcaaaaag tgataccgaa tgtctatgtg cttagtgcgg ctgtgttcaa cgggattatc 1260
cgccatgcag atagcactct cattgtcaca taggagaggg actttgctca atttgtagcc 1320
atagtcccta aggttttgcc tcatccaaag taattgcaca caacaatgtc ctgcggcaat 1380
atacttggct tcggcggtag aaagagctat tgagttttgt ttctttgaag tccaagacac 1440
cagggatctc cctagaaact gacaagtccc tgatgtgctc ttcctatcaa ttttacaccc 1500
tgcccaatcg gcatctgaat atcctattaa atcaaaggtg gatcccttgg ggtaccaaag 1560
accaaattta ggagtgtaaa ctaaatatct catgattctt ttcacggccc taaggtgaac 1620
ttccttagga tcggcttgga atcttgcaca catgcatata gaaagcatac tatctggtcg 1680
agatgcacat aaatagagta aagatcctat catcgaccgg tatacctttt ggtctacgga 1740
tttacctccc gtgtcgaggt cgagatgccc attagttccc atgggtgtcc tgatgggctt 1800
ggcatccttc attccaaact tgttgagtat gtcttgaatg tactttgttt ggctgatgaa 1860
ggtgccatct tggagttgct tgacttgaaa tcctagaaaa tatttcaact tccccatcat 1920
agacatctcg aatttcggaa tcatgatcct actaaactct tcacaagtag atttgttagt 1980
agacccaaat ataatatcat caacataaat ttggcataca aacaaaactt ttgaaatggt 2040
tttagtaaag agagtaggat cggctttact gactctgaag ccattagtga taagaaaatc 2100
tcttaggcat tcataccatg ctgttggggc ttgcttgagc ccataaagcg cctttgagag 2160
tttataaaca tggttagggt actcactatc ttcaaagccg agaggttgct caacatagac 2220
ctattcaccc catttgatca cttttttggt ccttcaggat ctaatagtta tgtataattt 2280
agagtctctt gtttaatggc cagatatttc taattaatct aagaatttat gatatttttt 2340
aattttttat catgtctgat gagaattaac ataaaggctc aattgggtcc tgaattaata 2400
atagagtgaa aattaatcca gaggctctat tagaaccttc aattagtaat accaagatat 2460
atataagata gtagagtata gtttaaatgt tggcattgtt cattctttct tttgttattt 2520
aatttatgct ttccacggtg gttagtggtt acttctgaag ggtccaaata atgcatgaag 2580
agtttgagga caagaagtct gccctaaaaa tagcgatgca aaggcatggt gtccaagcca 2640
tacatatagc gcactaattt tatcagcaga acaatggtat ttataggtcc tagtgcccag 2700
gcaacaagag acacgaataa agcatcgatc acgacac 2737
<210> 31
<211> 225
<212> DNA
<213> 玉米(Zea mays)
<400> 31
atggcggcga caatggcagt gacgacgatg gtgacgagga gcaaggagag ctggtcgtca 60
ttgcaggtcc cggcggtggc attcccttgg aagccacgag gtggcaagac cggcggcctc 120
gagttccctc gccgggcgat gttcgccagc gtcggcctca acgtgtgccc gggcgtcccg 180
gcggggcgcg acccgcggga gcccgatccc aaggtcgtcc gggcg 225
<210> 32
<211> 348
<212> DNA
<213> 玉米(Zea mays)
<400> 32
gatctgacaa agcagcatta gtccgttgat cggtggaaga ccactcgtca gtgttgagtt 60
gaatgtttga tcaataaaat acggcaatgc tgtaagggtt gttttttatg ccattgataa 120
tacactgtac tgttcagttg ttgaactcta tttcttagcc atgccaagtg cttttcttat 180
tttgaataac attacagcaa aaagttgaaa gacaaaaaaa aaaacccccg aacagagtgc 240
tttgggtccc aagctacttt agactgtgtt cggcgttccc cctaaatttc tccccctata 300
tctcactcac ttgtcacatc agcgttctct ttcccctata tctccacg 348
<210> 33
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工合成(artificial synthesis)
<400> 33
gcctcaccgt cctcctctac 20
<210> 34
<211> 18
<212> DNA
<213> 人工合成(artificial synthesis)
<400> 34
cgggtccgag aacaccac 18
<210> 35
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工合成(artificial synthesis)
<400> 35
gctatgtacg tcgccatcca 20
<210> 36
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工合成(artificial synthesis)
<400> 36
ggacagtgtg gctgacacca t 21
<210> 37
<211> 25
<212> DNA
<213> 人工合成(artificial synthesis)
<400> 37
ggatccggat ttcgaggatc aagct 25
<210> 38
<211> 25
<212> DNA
<213> 人工合成(artificial synthesis)
<400> 38
gtcgactttc gccgggcaaa ttcgc 25
<210> 39
<211> 27
<212> DNA
<213> 人工合成(artificial synthesis)
<400> 39
gtttaaacgg atttcgagga tcaagct 27
<210> 40
<211> 25
<212> DNA
<213> 人工合成(artificial synthesis)
<400> 40
ggatccaccc tgcatttttt atgcc 25
<210> 41
<211> 16
<212> DNA
<213> 人工合成(artificial synthesis)
<400> 41
gcgtcgccga caaccc 16
<210> 42
<211> 17
<212> DNA
<213> 人工合成(artificial synthesis)
<400> 42
tggagaaggc ccgcgac 17

Claims (10)

1.一种调控植物雄性育性的方法，通过影响育性基因的表达调控植物的育性，其特征在于所述育性基因的氨基酸序列如SEQ ID NO：2或6所示。
2. 权利要求1所述的方法，其中所述的育性基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1、5或27所示。
3. 权利要求1或2所述的方法，其特征在于，通过突变育性调控基因SEQ ID NO：1、5或27获得雄性不育材料。
4.权利要求3所述的方法，其中所述的突变包括在育性调控基因的核苷酸序列上进行取代、缺失或添加一个或多个核苷酸。
5.权利要求4所述的方法，其中所述的突变通过EMS化学诱变技术获得。
6. 权利要求1或2所述的方法，其特征在于用SEQ ID NO：1、5或27恢复由相应的SEQ IDNO：1、5或27所示基因突变所导致的雄性不育，使雄性不育突变体恢复成可育。
7.权利要求1-6之任一所述的方法在调控植物雄性育性中的应用。
8. 一种突变体材料的获得方法，其特征在于所述突变体材料是由育性基因的突变所造成，含有该突变后的核苷酸序列的植株具有雄性不育的表型，其中所述的育性基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1、5或27所示。
9.权利要求8所述的方法，其中所述的突变是通过基因沉默的手段产生。
10. 权利要求8或9所述的方法，其中所述的育性基因突变后的核苷酸序列如SEQ IDNO：7所示，或所述的育性基因突变后的核苷酸编码的氨基酸序列如SEQ ID NO：8所示。
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