CN109287379A - 一种适用于虫草栽培的糯米培养基及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种适用于虫草栽培的糯米培养基及其应用，属于食用菌培育领域，所述培养基含糯米和营养液，其料液质量体积比为1 g:1.6mL。所述营养液为葡萄糖20g、蛋白胨6g、磷酸氢二钾2g、硫酸镁1.5g、磷酸氢二钠1.5g和尿素1.5g溶于纯化水组成的1000 mL培养液。培养基中的营养液能给虫草生长提供额外的营养，提高虫草的营养成分的含量。本发明提供了一种虫草栽培培养基，该培养基制作简单，使用方便，生产加工成本低，生长周期短，生物转化率较高，能够适应工厂化生产与使用，提高经济效益。
Description
技术领域
本发明提供一种适用于虫草栽培的糯米培养基及其应用，属于食用菌培育领域。
背景技术
北虫草[Cordyceps sinensis（L .Fr）Link]又称蛹虫草、北冬虫夏草，是一种食药两用真菌，作为冬虫夏草的替代品而被广泛栽培，市场前景广阔。人工栽培北虫草需要有一定的技术作支持，在其生长的环境因子中，对温度、光照、空气相对湿度等有着严格的要求。培养基的含水量也是北虫草能否正常生长和高产的重要因素之一。但人工栽培的蛹虫草存在菌丝生长慢、子实体整齐度差、颜色饱和度差、生物转化率低、产品质量不一等不足，究其原因除了管理上存在一定问题外，主要是培养基不能很好地满足蛹虫草生长的营养需求。同时，现有技术蛹虫草栽培用培养基还存在配方复杂、制作繁琐、成本高等问题。
发明内容
本发明的目的在于提供一种适用于虫草栽培的糯米培养基及其应用，制作简单，成本低，能够 完全满足蛹虫草各阶段生长发育所需营养，采用本发明培养基培养蛹虫草，菌丝生长快、生物转化率高、产品质量优。
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
一种适用于虫草栽培的糯米培养基含糯米和营养液，其料液质量体积比为1 g:1.6mL。
所述营养液为葡萄糖20g、蛋白胨6g、磷酸氢二钾2g、硫酸镁1.5g、磷酸氢二钠1.5g和尿素1.5g溶于纯化水组成的1000 mL培养液。
所述的糯米培养基在虫草栽培中的应用。
本发明的优点在于：
虫草为珍稀药材，含有虫草素、虫草酸、丰富的蛋白质、多核苷、多糖、生物碱、甾醇、环状缩羧肽等多种活性物质，具有抗肿瘤、抗菌消炎、抗氧化、衰老、抗纤维化、抗转移、抗疲劳、改善胰岛素分泌保肝、调节免疫等药理作用，具有广阔的应用发展前景。虫草的栽培方法和栽培时使用的培养基对虫草的生长有重要的影响。糯米含有蛋白质、脂肪、糖类、钙、磷、铁、维生素B1、维生素B2、烟酸及淀粉等活性成分，营养丰富，能为虫草生长提供全面的营养支持。培养基中的营养液能给虫草生长提供额外的营养，提高虫草的营养成分的含量。本发明提供了一种虫草栽培培养基，该培养基制作简单，使用方便，生产加工成本低，生长周期短，生物转化率较高，能够适应工厂化生产与使用，提高经济效益。
附图说明
图1蛹虫草在4种不同糯米栽培培养基中的生物转化率。
图2 蛹虫草糯米栽培。注：A.菌丝生长时期；B.子实体生长初期；C.子实体生长后期。
具体实施方式
实施例1
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
实验室收藏菌种（菌株编号：MF28，ITS序列NCBI登录号：MF379054）
1.2 蛹虫草糯米栽培探究
首先设计了4种糯米栽培培养基配方进行试验筛选，4种配方如下：（A）、15g糯米+21mLA营养液（取葡萄糖20g、蛋白胨6g、磷酸氢二钾2g、硫酸镁1.5g和磷酸氢二钠1.5g溶于纯化水组成的1000 mL培养液）；（B）、15g糯米+21 mL B营养液（取葡萄糖20g、蛋白胨6g、磷酸氢二钾2g、硫酸镁1.5g、磷酸氢二钠1.5g和尿素1.5g溶于纯化水组成的1000 mL培养液）；（C）、15g糯米+21mL C营养液（取葡萄糖20g、牛肉膏6g、磷酸氢二钾2g、硫酸镁1.5g和磷酸氢二钠1.5g 溶于纯化水组成的1000 mL培养液）；（D）、15g糯米+21mL D营养液（取葡萄糖20g、牛肉膏6g、磷酸氢二钾2g、硫酸镁1.5g、磷酸氢二钠1.5g和尿素1.5g溶于纯化水组成的1000 mL培养液）。以蛹虫草生物转化率为指标，筛选出生物转化率较高的配方，并对栽培进一步正交优化。
蛹虫草液体菌种制备：将蛹虫草菌株活化后，接入装有100mL PDB液体培养基的250mL锥形瓶中，置于25℃，160 rpm/min摇瓶培养8天。
实验前，先将生糯米按重量称量，然后装入直径6cm，高10cm的玻璃栽培瓶中，随后加入一定量的上述营养液，使用透气组培封瓶膜封住瓶口。实验中，每个不同处理组重复10次，121℃条件下高温灭菌40min。冷却后超净工作台中接入一定量的蛹虫草液体菌种，封好瓶口，移入人工栽培培养箱。菌丝生长期间避免光照，待菌丝长满90%的糯米培养基后，调节光照、湿度及温度，每天光照12h，光照强度调节在700～800 lx，空气湿度控制在80～90%，温度调节在18～24℃。整个试验过程中，每天记录菌丝及子实体生长情况。
1.3 统计学处理
采用SPSS 13.0和Desig-expert 8.0.6软件进行数据统计学处理和分析。采用t检验分析两组之间的差异。P<0.05为具有统计学意义。
2 结果与分析
2.1 蛹虫草糯米栽培
蛹虫草在4种不同配方的糯米栽培培养基中均能长出菌丝和子实体，其中B配方的菌丝长速和生物转化率相比其它配方更高，其生物转化率可达到71.87%。
在糯米栽培方式中，糯米可以提供碳源及其它微量元素，而营养液中的蛋白胨是氮源的主要来源，此外料液比和接种量也是对菌株菌丝长速和子实体产量影响较大的因素，所以实验对营养液蛋白胨含量、糯米与营养液的料液比、接种量进行了3因素3水平的正交试验（表1）优化。
从表1中可以看出，料液比中的k3最大，蛋白胨含量中的k3最大，接种量中的k3最大，所以可得出糯米栽培最佳方式为营养液蛋白胨含量为1%、糯米与营养液的料液比为1:1.6、接种量4.5 mL为蔗糖，在该种培养方式下，菌丝长满栽培培养基需要3d左右，子实体萌发时间在接种后7d左右，蛹虫草的生物转化率达到87.45%。通过分析极差可以发现，料液比的极差最大，为44.57，即料液比是影响蛹虫草生长的最主要因素，其次是蛋白胨含量，最后是接种量。
方差分析中（表2），料液比的F值最大为47.135，蛋白胨含量其次，为6.666，然后是接种量，为5.471。所以3种因素的显著性差异大小顺序为料液比>蛋白胨含量>接种量，与直观分析结果一致。
表1糯米栽培正交试验设计及结果直观分析
表2糯米栽培正交试验结果的方差分析
糯米含有钙、磷、铁、维生素B1、维生素B2、烟酸及淀粉等多种营养成分，是一种能够提供充足营养成分的栽培基质。因此，本实验进一步探究了采用新型栽培基质糯米对蛹虫草进行栽培的可行性。研究结果发现，蛹虫草在实验设计的4种不同配方糯米栽培培养基中虽均能长出菌丝和子实体，但B配方的菌丝长速和生物转化率相比其它配方更高。实验进一步对B配方的栽培方式进行了正交优化，得出最优栽培方式为：营养液蛋白胨含量为1%、糯米与营养液的料液比为1:1.6、接种量4.5 mL，即15g糯米+24 mL B营养液（取葡萄糖20g、蛋白胨10g、磷酸氢二钾2g、硫酸镁1.5g、磷酸氢二钠1.5g和尿素1.5g溶于纯化水组成的1000 mL培养液）配制成的栽培培养基中接入4.5mL蛹虫草液体菌种。在该种培养方式下，其菌丝长满培养基需要3d左右，子实体萌发时间在接种后7d左右，生物转化率达到87.45%。
以上所述仅为本发明的较佳实施例，凡依本发明申请专利范围所做的均等变化与修饰，皆应属本发明的涵盖范围。
Claims (3)
1.一种适用于虫草栽培的糯米培养基，其特征在于：所述培养基含糯米和营养液，其料液质量体积比为1 g:1.6 mL。
2.根据权利要求1所述的一种适用于虫草栽培的糯米培养基，其特征在于：所述营养液为葡萄糖20g、蛋白胨6g、磷酸氢二钾2g、硫酸镁1.5g、磷酸氢二钠1.5g和尿素1.5g溶于纯化水组成的1000 mL培养液。
3.如权利要求1所述的糯米培养基在虫草栽培中的应用。
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