CN109156262A - 一种高三萜灵芝的栽培方法 - Google Patents

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蔡锦灏
蔡国良
任彬斌
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Abstract

本发明涉及一种高三萜灵芝的栽培方法，属于农业经济作物栽培技术领域。所述方法包括如下步骤：一、灵芝菌种选育；二、菌种制作，（1）培养基配方：母体菌种培养基：PDA培养基，马铃薯300g，葡萄糖30g，柠檬酸1g，琼脂30g，水2000ml，pH值6~7；繁殖培养基：窄叶树木屑68%，麸皮30%，葡萄糖2％，柠檬酸1%，天然石膏2％，含水量65%±3%；（2）母种菌种制作；（3）原种制作；（4）栽培种制作。本发明的一种高三萜灵芝的栽培方法，在培养基制作过程中，采用特定的母体菌种培养基和繁殖培养基，结合相应的菌种制作方法，制成抗病效果好、成活率高的菌种，通过栽培后得到的灵芝，其灵芝三萜含量在7%以上，适于产业化推广。

Description

一种高三萜灵芝的栽培方法
技术领域
本发明属于农业经济作物栽培技术领域，具体涉及一种高三萜灵芝的栽培方法。
背景技术
灵芝作为中华民族的瑰宝，在中国拥有5000多年的悠久历史。近年来，随着人们生活水平的提高，以及灵芝人工培育的普及，灵芝逐渐进入人们的视野，成为保健食品市场的新宠。在我国灵芝从实验室研究到大规模进入市场，大约开始于上个世纪80年代末90年代初。随着现代医药科技的发展，灵芝也进入了食品、医药、饮料、化妆品等领域，目前在中国大陆、中国香港、中国台湾、日本、韩国、东南亚及欧美等国家和地区已掀起了一股灵芝热，关于灵芝的开发和科研层出不穷经过大量的临床研究表明，灵芝富含灵芝三萜、多糖、核苷酸类、微量元素等多种活性物质。灵芝孢子粉凝聚了灵芝子实体的精华，其功效是灵芝子实体（灵芝菌盖）的75倍，灵芝三萜为灵芝孢子粉中的重要成分，具有显著的生理活性，对慢性支气管炎、高血脂症、高血压症、糖尿病、神经衰弱、肝病、肾病、肿瘤等辅助治疗都有不同程度的疗效，对于亚健康人群及中老年保健有免疫调节的效果。
我国灵芝年产量已超过1万吨，日本每年消耗约1500吨左右的灵芝，韩国年消耗则高达4500吨。目前我国已形成了一个繁荣的灵芝类保健品产业，从上世纪90年代初仅10来家灵芝类保健品生产企业，发展到现在已超过100家。目前，国内大部分知名保健品企业生产的灵芝孢子粉中三萜含量普遍在2~4（单位：g/100g）之间。
灵芝三萜为灵芝孢子粉中的重要成分，具有显著的生理活性。灵芝三萜具有免疫调节、清除自由基、增强巨噬细胞吞噬能力等作用，同时可使人体血液中的血气旺盛，促进新陈代谢，防止老化，有清血行气、改善体质的功能。另外：灵芝三萜针对癌症病人能够迅速提高人体免疫力，促进淋巴细胞增殖，提高巨噬细胞、NK细胞、T细胞的吞噬能力，可直接或间接毒杀癌细胞。
人体肿瘤细胞60%为增殖细胞，是肿瘤发展、长大、转移的基础，对人体危害极大，但对放化疗敏感，易杀灭；40%为G0期细胞，又叫休眠期细胞，不***，不生长，但对放化疗不敏感，难以被化疗等药物杀死。当某些因素使增殖期细胞大量死亡时(如化疗时)，G0期肿瘤细胞即可进入增殖周期，成为肿瘤复发的根源。灵芝三萜最大的特点表现为可激活化疗药物难以杀死的G0期肿瘤细胞，驱使其进入细胞生长期，然后联合化疗或单独毒杀它，防止其结束休眠期后大量繁殖和转移。
研究一种成活率高、三萜含量高、适于推广的灵芝的栽培技术，成为灵芝栽培技术一个重点的研发方向。
发明内容
本发明的目的是提供一种成活率高、三萜含量高、适于推广的高三萜灵芝的栽培方法。
本发明解决上述问题所采用的技术方案为：一种高三萜灵芝的栽培方法，所述方法包括如下步骤：
一、灵芝菌种选育
灵芝母种由野生灵芝的子实体培育分离而得到；
二、菌种制作
（1） 培养基配方
母体菌种培养基 ：PDA培养基，马铃薯300g，葡萄糖30g，柠檬酸1g，琼脂30g，水2000ml，pH值6~7；
繁殖培养基：窄叶树木屑68%，麸皮30%，葡萄糖2％，柠檬酸1%，天然石膏2％，含水量65%±3%；
（2）母种菌种制作
母种的培养基配制分装后应立即灭菌，冷却，在无菌条件下，进行无菌操作将母种一级种接入培养基，密封好，然后26～28℃环境下培养；
（3）原种制作
配料、拌料→装瓶→灭菌→冷却→无菌环境下接种→26～28℃环境下培养→菌丝长满，待栽培种制作用；
（4）栽培种制作
配料、拌料→装袋→灭菌→冷却→无菌环境下接种→24～27℃环境下培养→菌丝长满，待下步栽培生产使用；
三、栽培
将上述步骤二的菌种用于栽培生产，制成成品灵芝。
所述原种制作过程中的灭菌，采用高压灭菌，灭菌时间1小时。
所述栽培种作过程中的灭菌，采用常压灭菌，灭菌时间1小时。
所述原种制作过程中无菌环境下接种，一支母种移植扩大原种不超过6瓶。
所述栽培种作过程中无菌环境下接种，一瓶原种移植扩大栽培种不超过25袋。
与现有技术相比，本发明的优点在于：
本发明菌种制作过程中依次通过培养基配方优化、母种菌种制作、原种制作、栽培种制作过程，在培养基制作过程中，采用特定的母体菌种培养基和繁殖培养基，结合相应的菌种制作方法，制成抗病效果好、成活率高的菌种，通过栽培后得到的灵芝，其灵芝三萜含量在7%以上，适于产业化推广。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明作进一步详细描述。
实施例1：
一种高三萜灵芝的栽培方法，所述方法包括如下步骤：
一、灵芝菌种选育
灵芝母种由野生灵芝的子实体培育分离而得到；
二、菌种制作
（1） 培养基配方
母体菌种培养基 ：PDA培养基(马铃薯葡萄糖琼脂培养基)，马铃薯300g，葡萄糖30g，柠檬酸1g，琼脂30g，水2000ml，pH值6~7。
繁殖培养基：窄叶树木屑68%，麸皮30%，葡萄糖2％，柠檬酸1%，天然石膏2％，含水量65%±3%。
（2）母种菌种制作
母种的培养基配制分装后应立即灭菌，冷却，在无菌条件下，进行无菌操作将母种一级种接入培养基，密封好，然后26～28℃环境下培养。
（3）原种制作
配料、拌料（按照生产配方，严格计量，准确配比，调整好水分）→装瓶→灭菌（高压灭菌1小时）→冷却→无菌环境下接种（一支母种移植扩大原种不应超过6瓶）→26～28℃环境下培养→菌丝长满（待栽培种制作用）。
（4）栽培种制作
配料、拌料（按照生产配方，严格计量，准确配比，调整好水分）→装袋→灭菌（常压灭菌18小时）→冷却→无菌环境下接种（一瓶原种移植扩大栽培种不应超过25袋）→24～27℃环境下培养→菌丝长满（待下步生产使用）。
三、栽培
将上述步骤二的菌种用于栽培生产，制成成品灵芝。
通过上述技术栽培的灵芝，抗病性好，成活率高，通过检测，灵芝三萜含量在7%以上。
除上述实施例外，本发明还包括有其他实施方式，凡采用等同变换或者等效替换方式形成的技术方案，均应落入本发明权利要求的保护范围之内。

Claims (5)

1.一种高三萜灵芝的栽培方法，其特征在于：所述方法包括如下步骤：
一、灵芝菌种选育
灵芝母种由野生灵芝的子实体培育分离而得到；
二、菌种制作
（1） 培养基配方
母体菌种培养基 ：PDA培养基，马铃薯300g，葡萄糖30g，柠檬酸1g，琼脂30g，水2000ml，pH值6~7；
繁殖培养基：窄叶树木屑68%，麸皮30%，葡萄糖2％，柠檬酸1%，天然石膏2％，含水量65%±3%；
（2）母种菌种制作
母种的培养基配制分装后应立即灭菌，冷却，在无菌条件下，进行无菌操作将母种一级种接入培养基，密封好，然后26～28℃环境下培养；
（3）原种制作
配料、拌料→装瓶→灭菌→冷却→无菌环境下接种→26～28℃环境下培养→菌丝长满，待栽培种制作用；
（4）栽培种制作
配料、拌料→装袋→灭菌→冷却→无菌环境下接种→24～27℃环境下培养→菌丝长满，待下步栽培生产使用；
三、栽培
将上述步骤二的菌种用于栽培生产，制成成品灵芝。
2.根据权利要求1所述的一种高三萜灵芝的栽培方法，其特征在于：所述原种制作过程中的灭菌，采用高压灭菌，灭菌时间1小时。
3.根据权利要求1所述的一种高三萜灵芝的栽培方法，其特征在于：所述栽培种作过程中的灭菌，采用常压灭菌，灭菌时间1小时。
4.根据权利要求1所述的一种高三萜灵芝的栽培方法，其特征在于：所述原种制作过程中无菌环境下接种，一支母种移植扩大原种不超过6瓶。
5.根据权利要求1所述的一种高三萜灵芝的栽培方法，其特征在于：所述栽培种作过程中无菌环境下接种，一瓶原种移植扩大栽培种不超过25袋。
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