CN108697142A - 用于控制婴儿或幼儿的食物摄入量和生长的包含2FL和LNnT的组合物 - Google Patents
用于控制婴儿或幼儿的食物摄入量和生长的包含2FL和LNnT的组合物 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及一种营养组合物，所述营养组合物包含至少一种岩藻糖基化低聚糖和至少一种N‑乙酰化低聚糖，所述营养组合物用于减少和/或控制婴儿或幼儿的食物摄入量，和/或用于促进婴儿或幼儿的健康生长。
Description
技术领域
本发明涉及包含特定低聚糖的营养组合物，用于减少和/或控制婴儿或幼儿的食物摄入量，和/或用于促进婴儿或幼儿的健康生长。
背景技术
由于各种原因，建议所有婴儿采用母乳喂养。据特别广泛报道，母乳喂养的婴儿与婴儿配方食品喂养的婴儿具有不同的生长模式。实际上，与婴儿配方食品喂养的婴儿相比，母乳喂养的婴儿在出生后头一年内具有较低的体重增长和较低的体脂量。另外，母乳喂养的婴儿与婴儿配方食品喂养的婴儿相比具有不同的肠道微生物群分布。总之，这些因素影响了婴儿的生理发育，包括代谢、免疫力和全面生长。
还据报道，婴儿和幼儿的喂养模式，根据所消耗的奶的类型和输奶方式，例如可根据其饱腹感反应消化食物的频率和量而变化。此前的研究报道，从出生后的第6周开始，配方食品喂养的婴儿的喂食量显著高于母乳喂养的婴儿(Sievers等人，“母乳喂养和配方食品喂养的婴儿的喂养模式(Feeding patterns in breast-fed and formula-fedinfants)”，2002年)。另一项研究表明，与配方食品喂养的儿童相比，母乳喂养的儿童的饱腹感反应在出生后第一年比第二年增强(A Brown等人，“在婴儿出生第一年内母乳喂养促进18至24个月儿童的饱腹感反应(Breastfeeding during the first year promotessatiety responsiveness in children aged 18-24months)”，2012年)。这些研究表明，母乳可能含有一些引起饱腹感的因素。此外，与那些直接用母乳喂养的婴儿相比，在早婴儿期用奶瓶喂养的婴儿更容易在后婴儿期清空奶瓶或奶杯(Li等人，“与直接用母乳喂养的婴儿相比，用瓶装奶喂养的婴儿更缺乏对奶摄入量的自我调节能力吗？(Do Infants Fed FromBottles Lack Self-regulation of Milk Intake Compared With Directly BreastfedInfants？)”，2010年)。
然而，在一些情况下，由于某些医学原因，母乳喂养并不足够或不成功，或者母亲不选择母乳喂养。已针对这些情况研发了婴儿配方食品。还研发了用特殊成分丰富母亲的乳汁或婴儿配方食品的强化剂(fortifier)。
短链脂肪酸(SCFA)尤其通过结肠中的膳食纤维的微生物发酵产生。已表明，丙酸是涉及调节食物摄入量并增强饱腹感的SCFA。(Arora等人，“丙酸：抗肥胖和饱腹感增强因子？(Propionate.Anti-obesity and satiety enhancing factor？)”，2011年；Lin等人，“丁酸和丙酸预防由饮食引起的肥胖并通过游离脂肪酸受体3-独立机构调节肠道激素(Butyrate and Propionate Protect against Diet-Induced Obesity and RegulateGut Hormones via Free Fatty Acid Receptor 3-Independent Mechanisms)”，2012年；Chambers等人，“向人体结肠靶向输送丙酸对超重成人的食欲调节、体重维持和肥胖的影响(Effects of targeted delivery of propionate to the human colon on appetiteregulation,body weight maintenance and adiposity in overweight adults)”，2014年；Canfora等人，“短链脂肪酸对体重和胰岛素敏感性的控制(Short-chain fatty acidsin control of body weight and insulin sensitivity)”，《自然综述：内分泌学》，第11卷，第577-591页，2015年。
因此，增加结肠丙酸含量对食欲调节和体重管理具有吸引力。然而，口服SCFA不适口，并且迅速被小肠吸收。因此，已针对一些研究开发了在近端结肠中释放丙酸的特定输送***。在2014年Chambers等人的“向人体结肠靶向输送丙酸对超重成人的食欲调节、体重维持和肥胖的影响(Effects of targeted delivery of propionate to the human colonon appetite regulation,body weight maintenance and adiposity in overweightadults)”中，科学家已开发了一种特定的载体分子，由此丙酸通过酯键化学结合到菊粉(主要由果糖构成的天然聚合物)。该菊粉-丙酸酯为化学合成的。仅当菊粉聚合物由结肠中的微生物群发酵时，化学结合到菊粉的大部分丙酸被释放，从而提供靶向结肠输送。然而，此类载体存在一些缺点，例如，如果用于设计用于婴儿或幼儿的组合物，这种类型的化学合成物质可能面临管控问题。这项研究实际上是为成年人设计的。因此，一些更“天然的”溶液(例如，在母乳中发现的成分)将优选地施用于婴儿或幼儿。
因此，应开发更适合婴儿和幼儿的替代性溶液。
所有人乳低聚糖(HMO)是人乳中继乳糖和脂肪之后的第三大固体成分。HMO通常在还原端含有乳糖，而在非还原端含有碳水化合物芯，该碳水化合物芯通常含岩藻糖或唾液酸。人乳中存在超过一百种已经分离并表征的乳低聚糖。
已描述了用于不同健康目的(主要是免疫目的)的一些使用HMO成分(诸如，岩藻糖基化低聚糖、乳糖-N-四糖、乳糖-N-新四糖和/或唾液酸化低聚糖)的组合物。
然而，尚未探讨使用HMO来控制婴儿或幼儿的食物摄入量。使用HMO促进健康生长的作用也很有限，例如，婴儿的生长速度接近母乳喂养的婴儿获得的生长速度。
为了婴儿或幼儿获得这种健康益处，显然需要开发合适的方法。
此外，由于这类婴儿或幼儿特别娇弱，因此需要递送这种健康益处的方式应当是特别适合年幼个体(婴儿和幼儿)的方式，不涉及传统的药物干预的方式。
需要以下列方式向这些婴儿或幼儿递送此类健康益处：不引发副作用的方式和/或不仅容易递送还能获得父母或健康护理人员广泛认可的方式。
再者，需要递送这种益处的方式的价格对大多数人来说应当公道合理，而且大多数人都负担得起。
发明内容
本发明人已发现，包含至少一种岩藻糖基化低聚糖和至少一种N-乙酰化低聚糖的组合物可增加动物模型中的结肠丙酸产量。
由于已知丙酸用于控制食物摄入量和增强饱腹感，因此这种组合物可有利地用于减少和/或控制婴儿或幼儿的食物摄入量。
营养组合物也可用于促进婴儿或幼儿健康的生长，因为发明人已发现这种组合物还可增加动物模型的瘦体重、改善相对摄入量、促进生长和减少脂肪含量。
在一个特别有利的实施方案中，根据本发明的营养组合物包含2'-岩藻糖基乳糖(2-FL)和乳糖-N-新四糖(LNnT)，具体地讲2FL与LNnT的重量比为1:2至2:1。
附图说明
图1表示利用低纤维饮食和富含5％不同测试纤维的低纤维饮食喂养小鼠时，其盲肠中的丙酸产量。
缩写：Pos ctr＝阳性对照；HMO＝人乳低聚糖，测试重量比为1:1的2FL+LNnT；PDX＝聚右旋糖。
图2表示富含纤维的饮食的每种SCFA的中值除以阳性对照饮食的中值的比率。
缩写：Ctrl pos＝阳性对照；HMO＝人乳低聚糖，测试重量比为1:1的2FL+LNnT；PDX＝聚右旋糖。
图3表示3周龄(d＝22天)大鼠的瘦体重(以克为单位)。
正常大鼠：参考，由雌鼠哺育的大鼠
IUGR大鼠：IUGR(宫内生长受限的)大鼠，由雌鼠哺育
IUGR大鼠/HMO混合物：IUGR大鼠，由雌鼠哺育并补充人乳低聚糖(重量比为2:1的2FL+LNnT)。
*对比正常大鼠，P<0.001；#对比IUGR大鼠，P<0.001
图4表示以下组从第22至29天(图4A；*对比正常大鼠，P<0.001；#对比IUGR大鼠，P<0.01)和从第22至36天(图4B；*对比正常大鼠，P<0.001；#对比IUGR大鼠，P＝0.03)的相对摄入量(总食物摄入量/平均体重)：
正常大鼠：参考，用对照饮食喂养的大鼠
IUGR大鼠：IUGR(宫内生长受限的)大鼠；用对照饮食喂养
IUGR大鼠/HMO混合物：利用补充有4.5重量％的人乳低聚糖混合物(重量比为2:1的2FL+LNnT)的饮食喂养的IUGR大鼠。
图5表示以下组从第22至29天(图5A)和从第22至36天(图5B)的相对摄入量(总食物摄入量/平均体重)：
正常大鼠：参考，用对照饮食喂养的大鼠
IUGR大鼠：IUGR(宫内生长受限的)大鼠；用对照饮食喂养
IUGR大鼠/2FL：利用补充有4.5重量％的人乳低聚糖2FL的饮食喂养的IUGR大鼠
IUGR大鼠/LNnT：利用补充有4.5重量％人乳低聚糖LNnT的饮食喂养的IUGR大鼠
IUGR大鼠/HMO混合物：利用补充有4.5重量％的人乳低聚糖(重量比为2:1的2FL+LNnT)的饮食喂养的IUGR大鼠。
图6表示利用不同饮食(2FL、LNnT、2FL+LNnT)或麦芽糖糊精(参考/对照)喂养的IUGR仔鼠从p2至p157的生长。
图7表示利用补充有1.5g/L的HMO(1g的2FL+0.5g的LNnT)的乳替代品或用对照乳替代品喂养的仔猪从p2至p32的平均体重。
图8表示利用补充有1.5g/L的HMO(1g的2FL+0.5g的LNnT)的乳替代品或用对照乳替代品喂养的仔猪在p33天的脂肪量。
具体实施方式
如本文所用，下列术语具有如下含义。
术语“婴儿”是指年龄在12个月以下的儿童。
表述“幼儿”是指年龄介于一岁和三岁之间的儿童，也称为学步儿童。
“剖腹产婴儿或幼儿”是指通过剖腹产术分娩的婴儿或幼儿。这意味着婴儿或幼儿不是经***分娩的。
“顺产婴儿或幼儿”是指经***分娩而不是通过剖腹产术分娩的婴儿或幼儿。
“早产儿”是指不足月生产的婴儿或幼儿。通常是指在妊娠满36周之前出生的婴儿或幼儿。
表述“营养组合物”是指供给个体养分的组合物。该营养组合物通常以口服或静脉注射方式摄入。它可包含脂质或脂肪源、碳水化合物源和/或蛋白质源。在一个具体实施方案中，营养组合物为即饮型组合物，诸如即饮型配方食品。
在一个具体实施方案中，本发明的组合物是低变应原营养组合物。表述“低变应原营养组合物”是指不大可能引起***反应的营养组合物。
在一个具体实施方案中，本发明的营养组合物是“合成营养组合物”。表述“合成营养组合物”是指采用化学和/或生物方法获得的混合物，该混合物的化学性质可能与哺乳动物乳汁中天然存在的混合物相同(也就是说，合成营养组合物不是母乳)。
如本文所用，表述“婴儿配方食品”涉及专用于供给出生后头几个月的婴儿营养，而且本身满足这类人群的多种营养需求的食料(符合欧盟委员会2006年12月22日颁发的针对婴儿配方食品和较大婴儿配方食品的第91/321/EEC 2006/141/EC号指令中第2(c)条的规定)。也涉及旨在用于婴儿的营养组合物，如在食品法典委员会(法典STAN 72-1981)和婴儿特殊品(包括针对特殊医学目的的食品)中所定义的那样。表述“婴儿配方食品”既涵盖“1段婴儿配方食品”，也涵盖“2段婴儿配方食品”或“较大婴儿配方食品”。
“2段婴儿配方食品”或“较大婴儿配方食品”从第6个月开始提供。婴儿配方食品构成了这类人逐渐多样化饮食中的主要液体成分。
表述“婴孩食物”是指旨在用于供给不满一岁婴儿或幼儿特定营养的食料。
表述“婴儿谷物组合物”是指旨在用于供给不满一岁婴儿或幼儿特定营养的食料。
术语“强化剂”是指适宜与母乳或婴儿配方食品混合的液态或固态营养组合物。
表述“离乳期”是指在婴儿或幼儿饮食中逐步用其它食物替代母乳的时期。
表述“天龄/周龄/月龄/年龄”、“出生后的天数/周数/月数/年数”和“出生天数/周数/月数/年数”可互换使用。
术语“SCFA”是指短链脂肪酸。
表述“增加结肠丙酸产量”是指与标准组合物(即不包含至少一种岩藻糖基化低聚糖和至少一种N-乙酰化低聚糖的营养组合物)和/或与补充有普通纤维(如聚右旋糖或果胶)的标准组合物相比，用根据本发明的营养组合物(即包含至少一种岩藻糖基化低聚糖和至少一种N-乙酰化低聚糖的营养组合物)喂养的个体的结肠(或大肠)中或其一部分(诸如盲肠)中测量的丙酸含量更高。丙酸产量可通过技术人员已知的技术诸如通过气液色谱法来测量。
表述“减少和/或控制食物摄入量”是指当婴儿或幼儿食用本发明的营养组合物(即包含至少一种岩藻糖基化低聚糖和至少一种N-乙酰化低聚糖的营养组合物)时，其摄入的食物量将减少或得到调节，使得当食用标准营养组合物(即不包含至少一种岩藻糖基化低聚糖和至少一种N-乙酰化低聚糖的营养组合物)时，其摄入的食物量变得更少。在一些实施方案中，本发明的营养组合物的摄入量接近或相当于母乳的摄入量。摄入量或量可指每餐或每天的量。
术语“生长”是指婴儿或幼儿的体重、身高和/或头围的增长。在一个具体实施方案中，它是指体重。生长应理解为婴儿或幼儿的体重、身高和/或头围随着年龄的增长而发生的变化。这些参数在婴儿发育期间并不只是增加，实际上，由WHO公布的标准生长曲线显示，婴儿的体重可能在婴儿出生后头几天下降。因此，生长应理解为婴儿在出生后头几个月的整体增长。因此，表述“生长速度”和“生长的速度”也可用于替代术语“生长”。
表述“促进健康生长”和“促进最佳生长”可互换使用。它们包括促进生长速度，该生长速度接近或相当于母乳喂养的婴儿的生长速度。它们包括促进儿科医生确认的正常生长，以免其与产生健康问题相关。这些表述还包括预防用配方食品喂养的婴儿可能的过度生长或体重过度增加，特别是在出生后头几个月。表述“促进健康生长”还可包括控制体重管理和/或避免体重增加(特别是体重过度增加)，和/或促进瘦体重增加(特别是在总体重或脂肪量增加时)，和/或减少脂肪含量。
“饱腹感”是饭后饱胀的感觉，抑制了饭后一段时间想进食的冲动。表述“增强饱腹感反应”(或“引起饱腹感”)包括与将常规营养组合物(即不包含至少一种岩藻糖基化低聚糖和至少一种N-乙酰化低聚糖的营养组合物)施用于婴儿或幼儿相比，将根据本发明的营养组合物(即包含至少一种岩藻糖基化低聚糖和至少一种N-乙酰化低聚糖的营养组合物)施用于婴儿或幼儿，使婴儿或幼儿更早地(即更快地)具有饱腹感，即婴儿或幼儿将消化较少量的食物而具有饱胀感。它也可指“调节(例如降低/减弱)食欲”。可在接近或相当于通过母乳喂养获得饱腹感的时间点出现饱腹感。
“母乳”应理解为母乳或母亲的初乳。
术语“HMO”是指一种或多种人乳低聚糖。这些碳水化合物耐受消化酶(例如胰酶和/或绒毛膜酶)的酶促水解，这表明其可表现不与其热值直接相关的功能。本领域已特别指出，这些碳水化合物在婴儿和幼儿的早期发育(诸如，免疫***成熟)过程中发挥关键作用。在人乳中发现了许多不同种类的HMO。每种单独的低聚糖都以葡萄糖、半乳糖、唾液酸(N-乙酰神经氨酸)、岩藻糖和/或N-乙酰基葡糖胺与这些分子间各式各样的键的组合为基础，因此人乳含有大量种类各不相同的低聚糖，迄今已鉴定出逾130种此类结构。几乎所有低聚糖的还原端都有乳糖部分，同时非还原端的末端位置都由唾液酸和/或岩藻糖(如果存在的话)占据。HMO可以呈酸性(例如，含带电唾液酸的低聚糖)，也可以呈中性(例如，岩藻糖基化低聚糖)。HMO的一些示例为岩藻糖基化低聚糖、N-乙酰化低聚糖和/或唾液酸化低聚糖。
“岩藻糖基化低聚糖”是具有岩藻糖残基的低聚糖。这种低聚糖呈中性。一些示例为2'-FL(2'-岩藻糖基乳糖或2-岩藻糖基乳糖或2FL或2-FL)、3-FL(3-岩藻糖基乳糖)、二岩藻糖基乳糖、乳糖-N-岩藻五糖(例如，乳糖-N-岩藻五糖I、乳糖-N-岩藻五糖II、乳糖-N-岩藻五糖III、乳糖-N-岩藻五糖V)、乳糖-N-岩藻六糖、乳糖-N-二岩藻六糖I、岩藻糖基乳糖-N-六糖、岩藻糖基乳糖-N-新六糖、二岩藻糖基乳糖-N-六糖I、二岩藻糖基乳糖-N-新六糖II以及这些物质的任意组合。
表述“包含2'-岩藻糖基表位的岩藻糖基化低聚糖”和“2-岩藻糖基化低聚糖”涵盖了具有一定同源形式的岩藻糖基化低聚糖，这些同源形式的岩藻糖基化低聚糖都包含2’-岩藻糖基表位，因而可推测它们具有一定同源功能。
表述“(一种或多种)N-乙酰化低聚糖”涵盖“N-乙酰氨基乳糖苷”和“含N-乙酰氨基乳糖苷的(一种或多种)低聚糖”两者。这种低聚糖是具有N-乙酰氨基乳糖苷残基的中性低聚糖。合适的示例为：LNT(乳糖-N-四糖)、对-乳糖-N-新六糖(对-LNnH)、LNnT(乳糖-N-新四糖)或它们的任意组合。其它示例为：乳糖-N-六糖、乳糖-N-新六糖、对-乳糖-N-六糖、对-乳糖-N-新六糖、乳糖-N-八糖、乳糖-N-新八糖、异-乳糖-N-八糖、对-乳糖-N-八糖以及乳糖-N-十糖。
表述“至少一种岩藻糖基化低聚糖”和“至少一种N-乙酰化低聚糖”是指“至少一种类型的岩藻糖基化低聚糖”和“至少一种类型的N-乙酰化低聚糖”。
“HMO的前体”是用于制备HMO的关键化合物，诸如唾液酸和/或岩藻糖。
“唾液酸化低聚糖”是含带电唾液酸的低聚糖，即具有唾液酸残基的低聚糖。这种低聚糖呈酸性。一些示例为3-SL(3'-唾液酸乳糖)和6-SL(6'-唾液酸乳糖)。
表述“低聚半乳糖”、“半乳低聚糖”和“GOS”可互换使用。它们是指包含两个或更多个半乳糖分子的低聚糖，其不带电荷，也不具有N-乙酰基残基(即，其为中性低聚糖)。在一个具体实施方案中，所述两个或更多个半乳糖分子由β-1,2、β-1,3、β-1,4或β-1,6键连接。在另一个实施方案中，“低聚半乳糖”和“GOS”也包含含有β-1,2、β-1,3或β-1,6键连接的一个半乳糖分子和一个葡萄糖分子(即，二糖)的低聚糖。
本发明的营养组合物可为固体形式(例如，粉末)或液体形式。当组合物为固体形式(例如粉末)时，各种成分(例如，低聚糖)的量可表示为以干重计g/100g组合物；或者当组合物是指液体形式时，其表示为浓度g/L组合物(该后者也涵盖可通过将粉末用诸如乳、水等液体冲调而获得的液体组合物，例如冲调型婴儿配方食品或较大婴儿配方食品/2段婴儿配方食品、或婴儿谷物产品、或任何其它专为婴儿营养设计的制剂)。
术语“益生元”是指通过有选择地刺激健康细菌(诸如，人体结肠中的双歧杆菌)的生长和/或其活性，而对宿主产生有利作用的非消化性碳水化合物(Gibson GR,RoberfroidMB.Dietary modulation of the human colonic microbiota:introducing the conceptof prebiotics.J Nutr.1995；125:1401-12)。
术语“益生菌”是指对宿主的健康或良好状态具有有益效应的微生物细胞制剂或微生物细胞组分。(Salminen S,Ouwehand A.Benno Y.等人“Probiotics:how should theybe defined”Trends Food Sci.Technol.，《食品科学与技术趋势》，1999年，第10卷，第107-110页)。微生物细胞一般为细菌或酵母。
术语“cfu”应理解为菌落形成单位。
除非另外指明，否则所有百分比均按重量计。
另外，在本发明的上下文中，术语“包含”或“包括”不排除其它可能的要素。本发明的组合物(包括本文所述的多个实施方案)可包含下列要素、由或基本上由下列要素组成：本文所述的本发明的基本要素和必要限制，以及本文所述或者视需求来定的任何其它或可选成分、组分或限制。
不能将本说明书中对现有技术文献中的任何参考视为承认此类现有技术为众所周知的技术或构成本领域普遍常识的一部分。
现在将更详细描述本发明。应当注意，本申请描述的各个方面、特征、实施例和实施方案可以相容和/或可以组合在一起。
因此，本发明涉及包含至少一种岩藻糖基化低聚糖和至少一种N-乙酰化低聚糖的营养组合物，用于减少和/或控制婴儿或幼儿的食物摄入量。
它还可用于促进婴儿或幼儿健康生长。
不受理论约束，本发明的发明人认为，岩藻糖基化低聚糖和N-乙酰化低聚糖协同作用以令人意外地提供上述健康益处。低聚糖的这种特定组合将显著增加个体的丙酸产量，因此可用于减少和/或控制食物摄入量和/或促进婴儿或幼儿健康生长。
本发明的营养组合物包含至少一种岩藻糖基化低聚糖。可存在一种或若干种类型的岩藻糖基化低聚糖。(一种或多种)岩藻糖基化低聚糖实际上可选自包括以下项的列表：2'-岩藻糖基乳糖、3’-岩藻糖基乳糖、二岩藻糖基乳糖、乳糖-N-岩藻五糖(诸如，乳糖-N-岩藻五糖I、乳糖-N-岩藻五糖II、乳糖-N-岩藻五糖III、乳糖-N-岩藻五糖V)、乳糖-N-岩藻六糖、乳糖-N-二岩藻六糖I、岩藻糖基乳糖-N-六糖、岩藻糖基乳糖-N-新六糖(诸如，岩藻糖基乳糖-N-新六糖I、岩藻糖基乳糖-N-新六糖II)、二岩藻糖基乳糖-N-六糖I、二岩藻基-乳糖-N-新六糖、二岩藻糖基乳糖-N-新六糖I、二岩藻糖基乳糖-N-新六糖II、岩藻糖基-对-乳糖-N-六糖、三岩藻基-对-乳糖-N-六糖I以及它们的任意组合。
在一些具体实施方案中，岩藻糖基化低聚糖包含2'-岩藻糖基表位。例如，该岩藻糖基化低聚糖可选自包括以下项的列表：2’-岩藻糖基乳糖、二岩藻糖基乳糖、乳糖-N-岩藻五糖、乳糖-N-岩藻六糖、乳糖-N-二岩藻六糖、岩藻糖基乳糖-N-六糖、岩藻糖基乳糖-N-新六糖、二岩藻糖基乳糖-N-六糖、二岩藻基-乳糖-N-新六糖、二岩藻糖基乳糖-N-新六糖、岩藻糖基-对-乳糖-N-六糖以及它们的任意组合。
一个在优选的实施方案中，根据本发明的营养组合物包含2’-岩藻糖基乳糖(或2FL、或2’FL、或2-FL或2’-FL)。在一个具体实施方案中，不存在除2’-岩藻糖基乳糖以外的其它类型的岩藻糖基化低聚糖，即，本发明的营养组合物仅包含2’-岩藻糖基乳糖作为岩藻糖基化低聚糖。
可通过层析技术或过滤技术从天然源诸如动物乳汁来分离(一种或多种)岩藻糖基化低聚糖。或者，也可利用特殊的岩藻糖基转移酶和/或岩藻糖苷酶，通过生物技术手段，通过使用基于酶(重组酶或天然酶)的发酵技术或微生物发酵技术，来制备岩藻糖基化低聚糖。在后一者情况下，微生物可表达其天然酶和底物，或者可被工程改造成能够产生相应的底物和酶。可使用单一微生物培养物和/或混合培养物。可以最初具有任意聚合度(DP)的受体底物开始形成岩藻糖基化低聚糖，从DP＝1开始。或者，可以通过由乳糖和游离岩藻糖化学合成来制备岩藻糖基化低聚糖。岩藻糖基化低聚糖也可从(例如)日本协和发酵工业株式会社(Kyowa,Hakko,Kogyo)购得。
本发明的组合物还包含至少一种N-乙酰化低聚糖。可存在一种或若干种类型的N-乙酰化低聚糖。一种或多种N-乙酰化低聚糖可以是例如乳糖-N-四糖(LNT)、乳糖-N-新四糖(LNnT)或它们的任意组合。在一些具体实施方案中，N-乙酰化低聚糖为乳糖-N-新四糖(LNnT)、对-乳糖-N-新六糖(对-LNnH)或它们的任意组合。在一些具体实施方案中，N-乙酰化低聚糖为LNnT。在一些具体实施方案中，N-乙酰化低聚糖为LNT。在一些其它具体实施方案中，N-乙酰化低聚糖为LNT与LNnT的混合物。在一些具体实施方案中，组合物包含LNT和LNnT两者，LNT:LNnT比率为5:1至1:2，或2:1至1:1，或2:1.2至2:1.6。
在一个优选的实施方案中，根据本发明的营养组合物包含乳糖-N-新四糖(LNnT)。在一个具体实施方案中，除了乳糖-N-新四糖(LNnT)之外不包含其它类型的N-乙酰化低聚糖，即本发明的营养组合物只包含乳糖-N-新四糖(LNnT)作为N-乙酰化低聚糖。
(一种或多种)N-乙酰化低聚糖可采用酶转移法，即使用糖基转移酶将供体部分的糖单元转移到受体部分来化学合成，如例如美国专利5,288,637和WO 96/10086所述。或者，LNT和LNnT可通过将游离的或与低聚糖(例如，乳果糖)结合的酮-六糖(例如，果糖)化学转化成N-乙酰六糖胺或包含N-乙酰六糖胺的低聚糖来制备，如Wrodnigg,T.M.；Stutz,A.E.(1999)Angew.Chem.Int.Ed.38:827-828(Wrodnigg,T.M.、Stutz,A.E.，1999年，《应用化学国际版》(德国)，第38卷，第827-828页)中所述。然后可将用这种方式制得的N-乙酰氨基乳糖苷转移到作为受体部分的乳糖。(一种或多种)N-乙酰化低聚糖也可通过基于微生物发酵技术的生物技术手段制得。
在本发明的特别有利的实施方案中，该营养组合物包含2'-岩藻糖基乳糖(2FL)和乳糖-N-新四糖(LNnT)。
在另一个具体实施方案中，本发明的营养组合物包含由2’-岩藻糖基乳糖(2-FL)与乳糖-N-新四糖(LNnT)组成的低聚糖混合物。换句话讲，本发明的营养组合物仅包含2’-岩藻糖基乳糖(2-FL)作为岩藻糖基化低聚糖并且仅包含乳糖-N-新四糖(LNnT)作为N-乙酰化低聚糖。
在一些实施方案中，本发明的营养组合物中的岩藻糖基化低聚糖与N-乙酰化低聚糖(例如2FL与LNnT)的重量比为1:10至12:1，诸如1:7至10:1或1:5至5:1或2:1至5:1或1:3至3:1或1:2至2:1或1:1至3:1或1:5至1:0.5，例如1:1或2:1；例如1:1或2：1或10:1。
存在于本发明的营养组合物中的岩藻糖基化低聚糖和N-乙酰化低聚糖的总量可为用水重构之前营养组合物的0.1重量％至10重量％，诸如0.5重量％至7重量％或1重量％至5重量％。对于重构的即饮型配方，总量可为0.01％至1％，更优选地0.05％至0.7％或0.1％至0.5％。
本发明的营养组合物可例如包含：
-岩藻糖基化低聚糖，以干重计，其总量为组合物的0.2g/L至5g/L，例如0.5g/L至4.5g/L或1g/L至4g/L，或其总量为组合物的0.13g/100g至3.48g/100g，例如0.34g/100g至3.13g/100g或0.69g/100g至2.78g/100g；和/或
-N-乙酰化低聚糖，以干重计，其总量为组合物的0.05g/L至5g/L，例如0.1g/L至2g/L或0.1g/L至1g/L，或其总量为组合物的0.03g/100g至3.48g/100g，例如0.07g/100g至1.4g/100g或0.07g/100g至0.7g/100g。
根据本发明的营养组合物还可包含至少另一种低聚糖(即，除了必需存在于组合物中的岩藻糖基化低聚糖和N-乙酰化低聚糖以外)和/或至少一种纤维和/或至少一种人乳低聚糖前体。另一种低聚糖和/或纤维和/或前体可选自包括以下项的列表：低聚半乳糖(GOS)、低聚果糖(FOS)、菊粉、低聚木糖(XOS)、聚右旋糖、唾液酸化低聚糖、唾液酸、岩藻糖以及它们的任意组合。它们的量可为组合物的0重量％至10重量％。
除了包含在低聚糖混合物中的低聚糖外，可用合适的商业产品，包括FOS与菊粉的组合，以制备根据本发明的营养组合物的，商业产品诸如由BENEO公司以商标Orafti出售的产品，或者由泰莱(Tate&Lyle)公司以商标STA出售的聚右旋糖。
在一个具体实施方案中，根据本发明的组合物可包含唾液酸化低聚糖。可存在一种或若干种唾液酸化低聚糖。该(一种或多种)唾液酸化低聚糖可选自3'-唾液酸乳糖(3-SL)、6'-唾液酸乳糖(6-SL)以及它们的任意组合。在本发明的一些实施方案中，该组合物包含3-SL和6-SL。在一些具体实施方案中，3'-唾液乳糖(3-SL)与6'-唾液乳糖(6-SL)之间的比率可在5:1至1:10、或3:1至1:1、或1:1至1:10的范围内。在一些具体实施方案中，该组合物中的唾液酸化低聚糖为6'-唾液酸乳糖(6-SL)。
可通过层析技术或过滤技术从天然源(诸如，动物乳汁)分离(一种或多种)唾液酸化低聚糖。或者，也可使用特殊的唾液酸转移酶或唾液酸酶、唾液酸苷酶，通过生物技术手段，通过基于酶(重组酶或天然酶)的发酵技术、通过化学合成或通过微生物发酵技术，来制备唾液酸化低聚糖。在后一种情况下，微生物可表达其天然酶和底物，或者也可经工程化以产生相应的底物和酶。可使用单一微生物培养物或混合培养物。可以最初具有任意聚合度(DP)的受体底物开始形成唾液酸化低聚糖，从DP＝1开始。另选地，可通过由乳糖和游离N'-乙酰神经氨酸(唾液酸)的化学合成来制备唾液乳糖。唾液乳糖也可从例如日本的KyowaHakko Kogyo商购获得。
在具体示例中，组合物可包含以干重计总量为组合物的0.05g/L至5g/L，例如0.1g/L至4g/L或0.3g/L至2g/L，或总量为组合物的0.03g/100g至3.5g/100g，例如0.1g/100g至2g/100g或0.2g/100g至1g/100g的(一种或多种)唾液酸化低聚糖。
在具体实施方案中，营养组合物还可包含至少一种BMO(牛乳低聚糖)。在一个具体实施方案中，营养组合物可另外包含低聚糖混合物(“BMOS”)，该低聚糖混合物包含0.1重量％至4.0重量％的(一种或多种)N-乙酰化低聚糖，92.0重量％至99.5重量％的(一种或多种)低聚半乳糖和0.2重量％至4.0重量％的(一种或多种)唾液酸化低聚糖。WO2006087391和WO2012160080提供了制备BMO混合物的一些示例。
在本发明的一些具体实施方案中，营养组合物不含任何一种或多种唾液酸化低聚糖、任何GOS和/或任何牛乳低聚糖。
根据本发明的组合物任选地还可包含人乳低聚糖的至少一种前体。可存在一种或若干种前体。例如，人乳低聚糖前体为唾液酸、岩藻糖或者它们的混合物。在一些具体实施方案中，该组合物包含唾液酸。
在具体示例中，该组合物包含0g/L至3g/L人乳低聚糖前体，或0g/L至2g/L、或0g/L至1g/L、或0g/L至0.7g/L、或0g/L至0.5g/L、或0g/L至0.3g/L、或0g/L至0.2g/L人乳低聚糖前体。
根据本发明的组合物可包含以干重计0g至2.1g人乳低聚糖前体每100g组合物，例如以干重计0g至1.5g、或0g至0.8g、或0g至0.15g人乳低聚糖前体每100g组合物。
本发明的营养组合物还可包含至少一种益生菌(或益生菌菌株)，诸如益生细菌菌株。
最常用的益生微生物主要是以下属的细菌和酵母：乳酸杆菌属菌种(Lactobacillus spp.)、链球菌属菌种(Streptococcus spp.)、肠球菌属菌种(Enterococcus spp.)、双歧杆菌属菌种(Bifidobacterium spp.)和酵母属菌种(Saccharomyces spp.)。
在一些具体实施方案中，益生菌为益生细菌菌株。在一些具体实施方案中，其具体为双歧杆菌(Bifidobacteria)和/或乳酸杆菌(Lactobacilli)。
合适的益生细菌菌株包括可从芬兰瓦利奥公司(Valio Oy,Finland)获得的商标为LGG的鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)ATCC 53103，鼠李糖乳杆菌CGMCC1.3724，副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)CNCM I-2116，约氏乳杆菌(Lactobacillus johnsonii)CNCM I-1225，由新西兰BLIS科技有限公司(BLISTechnologies Limited,New Zealand)出售的商品名为KI2的唾液链球菌(Streptococcussalivarius)DSM 13084，尤其由丹麦汉森集团公司(Christian Hansen company,Denmark)出售的商标为Bb 12的乳酸双歧杆菌(Bifidobacterium lactis)CNCM 1-3446，由日本森永乳业有限公司(Morinaga Milk Industry Co.Ltd.,Japan)出售的商标为BB536的长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)ATCC BAA-999，由丹尼斯克公司(Danisco)出售的商标为Bb-03的短双岐杆菌(Bifidobacterium breve)，由森永乳业有限公司(Morinaga)出售的商标为M-16V的短双岐杆菌，由宝洁公司(Procter&GambIe Co.)出售的商标为Bifantis的婴儿双歧杆菌(Bifidobacterium infantis)以及由Institut Rosell研究机构(拉曼集团)(Institut Rosell(Lallemand))出售的商标为R0070的短双岐杆菌。
根据本发明的营养组合物可包含以干重计10e3至10e12cfu益生菌菌株每g组合物，更优选地包含10e7至10e12cfu，诸如10e8至10e10cfu益生菌菌株每g组合物。
在一个实施方案中，益生菌是活的。在另一个实施方案中，益生菌是非复制的或失活的。在一些其它实施方案中，可同时存在活的益生菌和失活的益生菌。
本发明的营养组合物还可包含至少一种噬菌体(细菌噬菌体)或噬菌体的混合物，这些噬菌体优选地针对病原性链球菌、嗜血杆菌(Haemophilus)、莫拉氏菌(Moraxella)和葡萄球菌(Staphylococci)。
根据本发明的营养组合物可为例如婴儿配方食品、1段婴儿配方食品、较大婴儿配方食品或2段婴儿配方食品、婴孩食物、婴儿谷物组合物、强化剂(诸如人乳强化剂)或补充剂。在一些具体实施方案中，本发明的组合物为旨在用于4月龄或6月龄婴儿的婴儿配方食品、强化剂或补充剂。在一个优选的实施方案中，本发明的营养组合物是婴儿配方食品。
在一些其它实施方案中，本发明的营养组合物是强化剂。强化剂可为母乳强化剂(例如，人乳强化剂)或配方食品强化剂(诸如婴儿配方食品强化剂或较大婴儿配方食品强化剂/2段婴儿配方食品强化剂)。
当营养组合物是补充剂时，其可以单位剂量的形式提供。
本发明的营养组合物可为固体(例如粉末)、液体或凝胶形式。
根据本发明的营养组合物通常含有蛋白质源。蛋白质的量可为1.5g/100kcal至3g/100kcal。在一些实施方案中，特别是当该组合物专用于早产儿时，蛋白质的量可为2.4g/100kcal至4g/100kcal或高于3.6g/100kcal。在一些其它的实施方案中，蛋白质的量可低于2.0g/100kcal，例如1.8g/100kcal至2g/100kcal，或者量低于1.8g/100kcal。
只要满足必需氨基酸含量的最低要求并确保令人满意的生长，蛋白质的类型被认为对本发明无关紧要。因此，可使用基于乳清、酪蛋白以及它们的混合物的蛋白质源，也可使用基于大豆的蛋白质源。就所关注的乳清蛋白而言，蛋白质源可基于酸乳清或甜乳清或它们的混合物，并且可包含任何所需比例的α-乳白蛋白和β-乳球蛋白。
在一些有利的实施方案中，蛋白质源以乳清为主(即多于50％的蛋白质来自乳清蛋白，诸如60％或70％)。
该蛋白质可为完整蛋白质或水解蛋白质，或为完整蛋白质和水解蛋白质的混合物。所谓的术语“完整的”是指蛋白质的主要部分是完整的，即分子结构未发生改变，例如至少80％的蛋白质未发生改变，诸如至少85％的蛋白质未发生改变，优选地，至少90％的蛋白质未发生改变，甚至更优选地，至少95％的蛋白质未发生改变，诸如至少98％的蛋白质未发生改变。在一个具体实施方案中，100％的蛋白质未发生改变。
术语“水解的”是指在本发明的上下文中，蛋白质已被水解或分解成其组成氨基酸。
该蛋白质可以是完全水解或部分水解的。例如，对于被认为存在牛乳变应性风险的婴儿或幼儿而言，提供部分水解的蛋白质(水解程度为2％至20％)可能是可取的。如果需要水解的蛋白质，则可根据需要并且如本领域已知的那样进行水解过程。例如，可通过在一个或多个步骤中对乳清级分进行酶法水解来制备乳清蛋白水解产物。如果用作原料的乳清级分基本上不含乳糖，则发现该蛋白质在水解过程中经受少得多的赖氨酸封闭(lysineblockage)。这使得能够将赖氨酸封闭的程度从约15重量％的总赖氨酸降至低于约10重量％的赖氨酸；例如约7重量％的赖氨酸，这大大地提高了蛋白质源的营养质量。
在本发明的一个实施方案中，至少70％的蛋白质被水解，优选地，至少80％的蛋白质被水解，诸如至少85％的蛋白质被水解，甚至更优选地，至少90％的蛋白质被水解，诸如至少95％的蛋白质被水解，特别地至少98％的蛋白质被水解。在一个具体实施方案中，100％的蛋白质被水解。
在一个具体实施方案中，营养组合物的蛋白质是水解的、完全水解的或部分水解的。蛋白质的水解程度(DH)可为8至40、或20至60、或20至80，或大于10、20、40、60、80或90。
在一个具体实施方案中，根据本发明的营养组合物是低变应原组合物。在另一个具体实施方案中，根据本发明的组合物是低变应原营养组合物。
根据本发明的营养组合物通常含有碳水化合物源。这在本发明的营养组合物为婴儿配方食品的情况下是特别优选的。在这种情况下，可使用通常存在于婴儿配方食品中的任何碳水化合物源，诸如乳糖、蔗糖(sucrose)、糖精(saccharose)、麦芽糖糊精、淀粉及其混合物，但是优选的碳水化合物源之一是乳糖。
根据本发明的营养组合物通常包含脂质源。这在本发明的营养组合物为婴儿配方食品的情况下是特别相关的。在这种情况下，脂质源可以是适合用于婴儿配方食品中的任何脂质或脂肪。一些合适的脂肪源包括棕榈油、高油酸葵花油和高油酸红花油。也可加入必需脂肪酸亚油酸和α-亚麻酸，以及少量的包含大量预先形成的花生四烯酸和二十二碳六烯酸的油，诸如鱼油或微生物油。脂肪源中n-6脂肪酸与n-3脂肪酸的比率可为约5:1至约15:1，例如约8:1至约10:1。
本发明的营养组合物还可包含被认为是日常饮食所必需的所有维生素和矿物质，这些维生素和矿物质以营养显著量存在于组合物中。已确定某些维生素和矿物质的最低需求量。矿物质、维生素和任选地存在于本发明的组合物中的其它营养物质的示例包括维生素A、维生素B1、维生素B2、维生素B6、维生素B12、维生素E、维生素K、维生素C、维生素D、叶酸、肌醇、烟酸、生物素、泛酸、胆碱、钙、磷、碘、铁、镁、铜、锌、锰、氯、钾、钠、硒、铬、钼、牛磺酸和L-肉碱。矿物质通常以盐的形式添加。特定矿物质和其它维生素的存在和量将根据适用人群而有所不同。
如有必要，本发明的营养组合物可包含乳化剂和稳定剂，诸如大豆、卵磷脂、柠檬酸甘油单酯和柠檬酸甘油二酯等。
本发明的营养组合物还可包含可能具有有益效果的其它物质，诸如乳铁蛋白、核苷酸、核苷等。
本发明的营养组合物还可包含一种或多种类胡萝卜素。在本发明的一些具体实施方案中，本发明的营养组合物不包含任何类胡萝卜素。
根据本发明的营养组合物可通过任何合适的方式制备。现将以举例的方式描述组合物。
例如，可通过将蛋白质源、碳水化合物源和脂肪源以适当的比例共混在一起来制备配方食品诸如婴儿配方食品。如果使用乳化剂，则可在此时加入。可在此时加入维生素和矿物质，但通常在稍后加入以避免热降解。在共混之前，可先将任何亲脂性维生素、乳化剂等物质溶解于脂肪源中。然后可混入水(优选已经过反渗透的水)，以形成液体混合物。合适的水温在约50℃至约80℃的范围内，以有助于分散成分。可使用可商购获得的液化剂来形成液体混合物。
尤其是如果最终产物是液体形式，则可在此阶段加入一种或多种岩藻糖基化低聚糖和一种或多种N-乙酰化低聚糖。如果最终产物为粉末，可根据需要同样在此阶段加入这些成分。
然后，例如以两个阶段对液体混合物进行均质化。
然后，可对液体混合物进行热处理以减少细菌载量，例如通过将液体混合物快速加热到约80℃至约150℃的范围内的温度并持续约5秒至约5分钟的持续时间。这可通过蒸汽注入、高压灭菌器或热交换器(例如，板式热交换器)来进行。
然后，例如通过急速冷却将液体混合物冷却到约60℃至约85℃。然后再次例如以两个阶段对液体混合物进行均质化，其中第一阶段的压力为约10MPa至约30MPa，并且第二阶段的压力为约2MPa至约10MPa。然后可将均质化的混合物进一步冷却以添加任何热敏组分，诸如维生素和矿物质。此时便利地调节均质化的混合物的pH和固体含量。
如果最终产物将为粉末，则将该均质化的混合物转移至合适的干燥装置，诸如喷雾干燥器或冷冻干燥器，然后将其转化为粉末。该粉末的含水量应小于约5重量％。还可以或作为替代在此阶段加入一种或多种岩藻糖基化低聚糖和一种或多种N-乙酰化低聚糖，方法是将其与一种或多种益生菌菌株(如果使用)干混，或以晶体的糖浆形式与一种或多种益生菌菌株共混，然后对混合物进行喷雾干燥或冷冻干燥。
如果优选液体组合物，可对该均质化的混合物进行杀菌，然后在无菌条件下将其装入合适的容器中，或者也可以先将其装入容器中，再进行灭菌。
在另一个实施方案中，本发明的组合物可为补充剂。
补充剂可以是例如片剂、胶囊、锭剂或液体形式。补充剂还可包含保护性亲水胶体(诸如树胶、蛋白质、改性淀粉)、粘结剂、成膜剂、包囊剂/材料、壁/壳材料、基质化合物、包衣、乳化剂、表面活性剂、增溶剂(油类、脂肪类、蜡类、卵磷脂类等)、吸附剂、载体、填充剂、共化合物、分散剂、润湿剂、加工助剂(溶剂)、流动剂、掩味剂、增重剂、胶凝剂和凝胶形成剂。补充剂还可包含常规的药物添加剂和佐剂、赋形剂和稀释剂，包括但不限于：水、任何来源的明胶、植物胶、木素磺酸盐、滑石、糖类、淀粉、***树胶、植物油、聚亚烷基二醇、风味剂、防腐剂、稳定剂、乳化剂、缓冲剂、润滑剂、着色剂、润湿剂、填充剂等。
另外，补充剂还可包含适用于口服或非肠道施用的有机或无机载体材料，以及维生素、矿物质微量元素和根据政府机构(诸如USRDA)推荐的其它微量营养素。
根据本发明的营养组合物用于婴儿或幼儿。婴儿或幼儿可为足月儿或早产儿。在一个具体实施方案中，本发明的营养组合物用于早产婴儿或幼儿。早产婴儿日后出现营养物质利用不良、瘦体质生长受损、内脏区脂肪堆积和代谢疾病的风险增加。因此，在具体实施方案中，本发明的营养组合物用于早产婴儿。
本发明的营养组合物还可用于剖腹产或经***分娩的婴儿或幼儿。
在一些实施方案中，根据本发明的营养组合物可用于离乳期前和/或离乳期过程中。
在一些实施方案中，根据本发明的营养组合物用于存在风险和/或有需要的婴儿或幼儿。
存在风险和/或有需要的婴儿或幼儿可为奶瓶喂养和/或配方食品喂养的婴儿或幼儿。
存在风险和/或有需要的婴儿或幼儿可为满足以下标准中至少之一的婴儿或幼儿：
-他们在控制他们的食物摄入量方面有困难，或者他们具有异常(特别是较高)的食物摄入量(例如他们的食欲更好)，例如：
i)与其他同龄和同体型(体重和身高)的婴儿或幼儿相比，他们进食较多；和/或
ii)他们的饱腹感有所变化，例如延迟的饱腹感反应(可能是由于生理或解剖学原因)；和/或
-他们的体重在出生后头几个月内过度增加。
在一个具体示例中，本发明的营养组合物可用于IUGR(宫内生长受限)婴儿或幼儿。这种特定群体存在风险和/或有需要，因为他们将具有更好的食欲以弥补他们的生长发育迟缓。但他们可能不会利用标准配方以健康的方式进食，例如，与瘦体重增加相比，他们可能具有更高的总重或脂体重增加，这可能促使对未来健康状况的发展和调控，包括日后出现的肥胖或未来相关并发症。据信，本发明的营养组合物提供健康的生长。
营养组合物的施用(提供或喂养)年龄和持续时间可根据可能性和需要而确定。
营养组合物可用于预防目的和/或用于治疗目的。
例如，可在婴儿出生后立即施用营养组合物，特别是当其用于预防目的时。本发明的组合物还可在婴儿出生后1周内、或出生后2周内、或出生后3周内、或出生后1个月内、或出生后2个月内、或出生后3个月内、或出生后4个月内、或出生后6个月内、或出生后8个月内、或出生后10个月内、或出生后1年内、或出生后2年内、或甚至更长时间内提供。在本发明的一些特别有利的实施方案中，营养组合物在婴儿出生后前4或6个月提供(或施用)给所述婴儿。在一些其它实施方案中，本发明的营养组合物在出生后几天(例如，1天、2天、3天、5天、10天、15天、20天…)、或几周(例如，1周、2周、3周、4周、5周、6周、7周、8周、9周、10周…)或几个月(例如，1个月、2个月、3个月、4个月、5个月、6个月、7个月、8个月、9个月、10个月…)提供。这可以尤其指婴儿是早产儿的情况，但这并不是必需的。
出于治疗目的，一旦出现症状，例如当母亲或儿科医生发现其婴儿或幼儿经常饥饿和/或在获得饱腹感之前需要异常(更高)的食物量时，和/或特别是在出生后头几个月内过度生长/体重过度增加时，可施用该组合物。可在症状消失后，或在所述消失过程之后若干天/周/月，停止提供该组合物。
在一个实施方案中，将本发明的组合物当作母乳的补充组合物提供给婴儿或幼儿。在一些实施方案中，婴儿或幼儿在至少前2周、前1个月、2个月、4个月或6个月期间接受母乳。在一个实施方案中，本发明的营养组合物在用母乳提供营养的这段时间之后提供给婴儿或幼儿，或者在用母乳提供营养这段时间内与母乳一起提供给婴儿或幼儿。在另一个实施方案中，在至少一段时间内(例如，在至少1个月、2个月、或4个月后)，在至少1个月、2个月、4个月或6个月期间，将该组合物作为唯一或主要的营养组合物提供给婴儿或幼儿。
在一个实施方案中，本发明的营养组合物是全营养组合物(满足个体全部或大部分营养需求)。在另一个实施方案中，营养组合物是旨在用于例如补充人乳或者补充婴儿配方食品或较大婴儿配方食品的补充剂或强化剂。
本发明人已发现，在动物模型中，特定HMO的干预显著增加了盲肠(结肠的一部分)中的丙酸产量。
如背景技术部分所述，已知丙酸是饱腹感增强因子并控制食物摄入量。
他们还发现，在动物模型中，这种特定HMO的干预还可增加瘦体重、改善相对摄入量、促进生长并减少脂肪含量。
因此，根据本发明的营养组合物可用于减少和/或控制婴儿或幼儿的食物摄入量和/或促进其健康生长。
通过增强所述婴儿或幼儿的饱腹感反应，可获得本发明所针对的健康有益效果。
利用根据本发明的营养组合物，通过增加所述婴儿或幼儿结肠丙酸产量，特别是盲肠中丙酸产量，可获得这些健康有益效果。
这表示了一种新的临床情况，其中可以新的方式聚焦食物摄入量和生长。
在一个具体实施方案中，丙酸产量通过气液色谱法测量，并且可以nmol/mg干重表示。
在一个具体实施方案中，与利用不含至少一种岩藻糖基化低聚糖和至少一种N-乙酰化低聚糖的营养组合物获得的结肠丙酸产量相比，结肠丙酸产量增加至少10％或至少15％或至少20％或至少30％或至少40％或至少50％或至少60％。
在一个具体实施方案中，与利用补充有普通纤维(如聚右旋糖或果胶)的营养组合物获得的结肠丙酸产量相比，结肠丙酸产量增加至少10％或至少15％或至少20％或至少30％或至少40％或至少50％或至少60％或至少70％。
根据本发明的营养组合物还可特别用于避免婴儿或幼儿体重过度增加和/或促进瘦体重增加(或增加瘦体重)。
其它目的：
本发明的另一目的在于包含至少一种岩藻糖基化低聚糖和至少一种N-乙酰化低聚糖的营养组合物用于增强婴儿或幼儿的饱腹感反应。
本发明的另一目的在于使用至少一种岩藻糖基化低聚糖和至少一种N-乙酰化低聚糖来制备营养组合物，以减少和/或控制婴儿或幼儿的食物摄入量。
本发明的另一目的在于使用至少一种岩藻糖基化低聚糖和至少一种N-乙酰化低聚糖来制备营养组合物，以促进婴儿或幼儿的健康生长。
本发明的另一目的在于使用至少一种岩藻糖基化低聚糖和至少一种N-乙酰化低聚糖来制备营养组合物，以增强婴儿或幼儿的饱腹感反应。
本发明的另一目的在于包含至少一种岩藻糖基化低聚糖和至少一种N-乙酰化低聚糖的药物组合物，该药物组合物用于减少和/或控制婴儿或幼儿的食物摄入量。
本发明的另一目的在于包含至少一种岩藻糖基化低聚糖和至少一种N-乙酰化低聚糖的药物组合物，该药物组合物用于促进婴儿或幼儿的健康生长。
本发明的另一目的在于包含至少一种岩藻糖基化低聚糖和至少一种N-乙酰化低聚糖的药物组合物，该药物组合物用于增强婴儿或幼儿的饱腹感反应。
本发明的另一目的在于使用至少一种岩藻糖基化低聚糖和至少一种N-乙酰化低聚糖，以减少和/或控制婴儿或幼儿的食物摄入量。
本发明的另一目的在于使用至少一种岩藻糖基化低聚糖和至少一种N-乙酰化低聚糖，以促进婴儿或幼儿的健康生长。
本发明的另一目的在于使用至少一种岩藻糖基化低聚糖和至少一种N-乙酰化低聚糖或包含其的营养组合物，以增强婴儿或幼儿的饱腹感反应。
本发明的另一目的涉及用于减少和/或控制婴儿或幼儿的食物摄入量的方法，所述方法包括将包含至少一种岩藻糖基化低聚糖和至少一种N-乙酰化低聚糖的营养组合物施用于所述婴儿或幼儿。
本发明的另一目的涉及用于增强婴儿或幼儿的饱腹感反应的方法，所述方法包括将包含至少一种岩藻糖基化低聚糖和至少一种N-乙酰化低聚糖的营养组合物施用于所述婴儿或幼儿。
说明书的前述不同实施方案、具体实施方式和示例(例如，涉及低聚糖的类型和量、营养组合物、施用、目标人群等)也适用于这些其它目的。
实施例
以下实施例示出了根据本发明所使用的组合物的一些特定实施方案。这些实施例仅出于举例说明目的而给出，不应被理解为是对本发明的限制，因为在不脱离本发明的实质的前提下，可对其作出多种改变。
实施例1
下表1给出了根据本发明的营养组合物(例如，婴儿配方食品)的组成的示例。该组成仅以举例的方式给出。
表1：根据本发明的营养组合物(例如，婴儿配方食品)的组成的示例
实施例2
研究说明
根据以下方案，将来自查尔斯河(Charles River)的5周龄雌性BALB/cByJ CRL小鼠分成若干组并在6周内喂养：
-第1周：用低纤维饮食(组成详见表2)喂养所有组
-第2周至第6周：
·对照组(A组)：低纤维饮食(与第1周相同)
·测试组(B组至D组)：补充有5重量％的测试纤维的低纤维饮食(与第1周相同)(5％的总低纤维饮食被5％的测试纤维代替)
表2：低纤维饮食的组成
测试以下纤维：
HMO＝人乳低聚糖。测试重量比为1:1的2FL+LNnT
PDX＝聚右旋糖
果胶
表3提供了不同测试组和饮食的汇总。
表3：研究的测试组和饮食
6周后，处死各组动物，并收集盲肠的内容物。SCFA产量通过气液色谱法测量(GLC；以nmol/mg干重计SCFA的量)。测量以下SCFA：丙酸、丁酸、戊酸和乙酸。
根据以下方案进行测量：在涂覆有极性固定相的GLC柱上分离酸性溶液(pH为2.0至3.0)中的SCFA。这允许制备最少的样品(无衍生物)并进行简单的基本FID检测。使用含有HgCl2的酸性磷酸盐缓冲液从盲肠中提取SCFA以灭活任何残留的细菌活性，并使用内标(2,2二甲基-丁酸)进行GLC分析。离心后，通过GLC分析无菌过滤的上清液。同时测量SCFA。
计算中值的比率以便比较富含不同纤维的饮食对SCFA产量的影响。
发现
富含HMO饮食的丙酸产量显著增加(参见图1)。与阳性对照相比，其产量增加了约69％。与果胶和PDX相比，其产量分别增加73％和75％。
这是非常惊奇的，因为果胶通常被看作是SCFA的高诱导物(Stark等人，《营养学杂志》，(Stark et al,J Nutr.)1993年，通过膳食纤维的细菌发酵体外短链脂肪酸的产生与这些纤维对大鼠肝固醇合成的影响的比较；(1993,In vitro production of short-chainfatty acids by bacterial fermentation of dietary fiber compared with effectsof those fibers on hepatic sterol synthesis in rats；)Yang等人，Anaerobe，2013年，选定膳食纤维对粪便微生物群组成和短链脂肪酸生产的影响的体外表征)(Yang etal,Anaerobe,2013,In vitro characterization of the impact of selected dietaryfibers on fecal microbiota composition and short chain fatty acidproduction)。
图2表示每种富含纤维的饮食的每种测试SCFA的中值除以阳性对照饮食(即仅低纤维饮食)的中值的比率。比率1(黑线)表示富含饮食和对照饮食之间没有差异。低于1的比率表示与富含纤维的饮食相比，对照饮食中相应的SCFA更高，而高于1的比率表示富含纤维的饮食中相应的SCFA比对照饮食高。
富含PDX和果胶的饮食诱导各种SCFA释放较少。相反，与低纤维饮食相比，富含HMO的饮食诱导了更多丙酸和丁酸的释放。与其它种类的SCFA和其它测试纤维相比，富含HMO的饮食是促使丙酸的差异如此之大的唯一一种。
因此，发明人惊奇地发现，用包含至少一种岩藻糖基化低聚糖和至少一种N-乙酰化低聚糖的组合物喂养的小鼠在盲肠中(因此结肠中)具有明显更高的丙酸产量。
由于丙酸的已知特性，尤其是调节食物摄取和饱腹感增加的特性，因此包含至少一种岩藻糖基化低聚糖和至少一种N-乙酰化低聚糖的组合物对于婴儿或幼儿是有效的，用于减少和/或控制食物摄取和/或促进健康生长。
实施例3
研究说明
从查尔斯河实验室(Charles River Laboratories)购得大量怀孕的雌性大鼠。其中一些在妊娠期的最后10天内60％的食物受到限制。
实验对象-新生鼠仔在出生后立即(d＝1)被分成若干组：
·正常大鼠(参考)：其母亲在怀孕期间没有IUGR(宫内生长受限)(n＝20)。
·IUGR大鼠(对照)：其母亲在怀孕期间有IUGR，即孕妇在妊娠期的最后10天内60％的食物受到限制(n＝20)
·IUGR大鼠+HMO(测试组)：3个不同的组：
IUGR大鼠+2FL(n＝20)
IUGR大鼠+LNnT(n＝20)
IUGR大鼠+2FL/LNnT(也称为IUGR大鼠+HMO混合物)(n＝20)其母亲在怀孕期间有IUGR，即怀孕的大鼠母亲在妊娠期的最后10天内60％的食物受到限制。
在实验过程中，先后利用牛奶和补充有HMO和2FL、LNnT或2FL+LNnT(重量比为2：1)的标准饮食喂养他们；参见下文的详细信息。
选择正常大鼠作为参考模型。
选择IUGR(宫内生长受限的)大鼠作为对照模型，因为他们将具有更好的食欲以弥补他们的生长发育迟缓，因此他们可能不会利用标准饮食以健康的方式进食(例如，与他们的瘦体重增加相比，他们可能具有更高的总重量和/或脂体重增加)，这可能促使对未来健康状况的发展和调控，包括日后出现的肥胖或未来相关并发症。
根据以下方案，从出生(d＝1)至多达出生后第57天(d＝57)喂养所有鼠仔：
-第1天至第6天：由雌鼠哺育所有组的大鼠(仅母乳)
-第7天至第21天：由雌鼠哺育所有大鼠(仅母乳)。但在测试组中，也通过灌服施用3g/kg体重的HMO或HMO混合物：
2FL：3g/kg体重，对于组IUGR大鼠+2FL
LNnT：3g/kg体重，对于组IUGR大鼠+LNnT
2FL：2g/kg体重+LNnT：1g/kg体重，对于组IUGR大鼠+2FL/LNnT
-第22天至第57天：将大鼠与其母亲分离，并且他们具有以下方案：
正常大鼠和IUGR大鼠：利用对照饮食(组合物详见表4)喂养，无HMO补充剂
测试组：利用相同的饮食喂养，但补充有4.5重量％的HMO或HMO混合物(总对照饮食中的麦芽糖糊精被相应的HMO替代)：
4.5重量％的2FL，对于组IUGR大鼠+2FL
4.5重量％的LNnT，对于组IUGR大鼠+LNnT
3重量％的2FL+1.5重量％的LNnT，对于组IUGR大鼠+2FL/LNnT
| ％ | |
| 玉米淀粉 | 53.4 |
| 酪蛋白 | 20 |
| 蔗糖 | 10 |
| 大豆油 | 7 |
| 矿物质混合物AIN-93-G* | 3.5 |
| 胆碱酒石酸氢盐 | 0.25 |
| L-胱氨酸 | 0.3 |
| 叔丁基对苯二酚 | 0.0014 |
| 维生素混合物AIN-93-VX* | 1 |
| 麦芽糖糊精 | 4.5 |
*来自研究饮食有限公司(Research Diets,Inc)
表4：对照饮食的组合物
为了评估喂养这些大鼠的效率，尤其是观察喂食是否表示健康的生长，计算了若干个参数，包括：
-瘦体重：它对应于身体组成中不胖的体重量。它是通过磁共振成像测量的。
-相对摄入量：它对应于指定时期内的总食物摄入量除以平均体重。在整个实验过程中对其分若干个阶段进行评估(因此在若干天内连续测量摄入的食物总量以进行计算)。
使用Wilcoxon双尾t检验分析II型误差评估显著性。
发现
虽然IUGR大鼠的瘦体重显著低于正常大鼠，但发明人惊奇地发现，在第22天(即大约3周龄)，IUGR大鼠+HMO混合物的瘦体重显著增加并更接近于参考组(正常大鼠)。图3中示出了这一情况。
如图4A(第22天至第29天的周期)和图4B(第22天至第36天的周期)所示，IUGR大鼠的相对摄入量显著高于正常大鼠的相对摄入量。这些大鼠具有更好的食欲，并且进食更多。然而，当施用HMO混合物时，大鼠的食欲得到调节(削弱)：与IUGR大鼠相比，IUGR大鼠+HMO混合物(2FL+LNnT)的相对摄入量显著降低，并且接近于参考组(正常大鼠)，参见图4和图5。
更令人惊奇的是，HMO混合物的2FL和LNnT之间似乎存在真正的协同作用，因为与IUGR大鼠(对照，无HMO)的相对摄入量相比，补充有单一HMO(单独2FL或单独LNnT)的IUGR大鼠的相对摄入量没有降低，而是显著增加，如图5A(第22天至第29天的周期)和图5B(第22天至第36天的周期)所示。
在整个实验期间，利用HMO混合物(2FL+LNnT)在其它时期观察到相同的趋势。
因此，发明人惊奇地发现，与IUGR大鼠相比，利用包含至少一种岩藻糖基化低聚糖和至少一种N-乙酰化低聚糖的组合物喂养的有需要/存在风险的大鼠(IUGR大鼠，即具有较好食欲并因此易于出现未来健康状况的大鼠)具有较高的瘦体重、得到调节的食欲和显著减少的相对摄入量，并且这些趋于接近参考组。
因此，根据本发明的组合物在用于减少和/或控制食物摄入量和/或促进健康生长中对于婴儿或幼儿是有效的。
实施例4
在执行实施例3的相同经验中，还测量了另一个参数(生长)。简而言之，在哺乳期间(p7至p21)，将3g/kg体重的2FL、LNnT，HMO混合物(2FL:LNnT；2:1的比率)或麦芽糖糊精(IUGR&参考)灌服施用于宫内生长迟缓的(由仅接收所记录的参考怀孕雌鼠的40％的任意摄入量的雌鼠生育的)和参考(由参考雌鼠生育的)鼠仔。在离乳时(p21)，使大鼠随意获取补充有相应处理(4.5％重量/重量)的半纯化饮食，直至p57天。从p57天开始，利用任意量的普通饲料饮食喂养所有大鼠，直到p157天实验结束。
如图6所示，与补充有2FL、LNnT的那些混合物或对照IUGR鼠仔相比，HMO混合物(2FL+LNnT)促进了IUGR鼠仔的生长。
实施例5
将2天龄的小猪随机分配接受补充有1.5g/L的HMO(1g的2FL+0.5g的LNnT)的固定量乳替代品或对照乳替代品(分别为p2至p5和第p6至p33的285ml/kg或325ml/kg体重)直到研究结束的p32天。每天测量体重，如图7所示。在研究结束时，去除内脏，并在去除皮肤、脚和骨头后从胴体收集软组织。化学分析软组织的蛋白质和脂质含量。脂质含量表示为图8中总体重的百分比。
补充有2FL和LNnT混合物的小猪具有与对照动物相似的体重和体重增长。然而，这种小猪在33天龄实验期结束时具有较低百分比的脂肪含量。
因此包含至少一种岩藻糖基化低聚糖和至少一种N-乙酰化低聚糖的营养组合物对于婴儿或幼儿是有效的，用于避免脂肪过量堆积或预防日后出现的相关健康障碍，如日后出现的肥胖。
Claims (19)
1.营养组合物，所述营养组合物包含至少一种岩藻糖基化低聚糖和至少一种N-乙酰化低聚糖，所述营养组合物用于减少和/或控制婴儿或幼儿的食物摄入量。
2.营养组合物，所述营养组合物包含至少一种岩藻糖基化低聚糖和至少一种N-乙酰化低聚糖，所述营养组合物用于促进婴儿或幼儿的健康生长。
3.根据前述权利要求中任一项用于所述用途的营养组合物，其中所述岩藻糖基化低聚糖选自由以下各项组成的列表：2'-岩藻糖基乳糖、3'-岩藻糖基乳糖、二岩藻糖基乳糖、乳糖-N-岩藻五糖I、乳糖-N-岩藻五糖II、乳糖-N-岩藻五糖III、乳糖-N-岩藻五糖V、乳糖-N-岩藻六糖、乳糖-N-二岩藻六糖I、岩藻糖基乳糖-N-六糖、岩藻糖基乳糖-N-新六糖I、岩藻糖基乳糖-N-新六糖II、二岩藻糖基乳糖-N-六糖I、二岩藻糖基乳糖-N-新六糖I、二岩藻糖基乳糖-N-新六糖II、岩藻糖基-对-乳糖-N-六糖以及它们的任意组合。
4.根据前述权利要求中任一项用于所述用途的营养组合物，其中所述岩藻糖基化低聚糖包含2'-岩藻糖基-表位。
5.根据前述权利要求中任一项用于所述用途的营养组合物，其中所述岩藻糖基化低聚糖为2'-岩藻糖基乳糖(2'FL)。
6.根据前述权利要求中任一项用于所述用途的营养组合物，其中所述N-乙酰化低聚糖选自由以下各项组成的列表：乳糖-N-四糖(LNT)、乳糖-N-新四糖(LNnT)以及它们的任意组合。
7.根据前述权利要求中任一项用于所述用途的营养组合物，其中所述N-乙酰化低聚糖为乳糖-N-新四糖(LNnT)、对-乳糖-N-新六糖(对-LNnH)或它们的任意组合，优选地其中所述N-乙酰化低聚糖为乳糖-N-新四糖(LNnT)。
8.根据前述权利要求中任一项用于所述用途的营养组合物，其包含2'-岩藻糖基乳糖(2'FL)和乳糖-N-新四糖(LNnT)，或包含由2'-岩藻糖基乳糖(2'FL)和乳糖-N-新四糖(LNnT)组成的低聚糖混合物。
9.根据前述权利要求中任一项用于所述用途的营养组合物，其中所述岩藻糖基化低聚糖与N-乙酰化低聚糖的重量比为1:10至12:1，诸如1:2至2:1。
10.根据前述权利要求中任一项用于所述用途的营养组合物，其中所述至少一种岩藻糖基化低聚糖和至少一种N-乙酰化低聚糖以所述营养组合物的0.1重量％至10重量％，诸如0.5重量％至7重量％或1重量％至5重量％的总量存在。
11.根据前述权利要求中任一项用于所述用途的营养组合物，其包含选自由以下各项组成的列表的至少另一种或多种低聚糖和/或纤维和/或人乳低聚糖前体：低聚半乳糖(GOS)、低聚果糖(FOS)、低聚木糖(XOS)、菊粉、聚右旋糖、唾液酸化低聚糖、唾液酸、岩藻糖以及它们的任意组合。
12.根据前述权利要求中任一项用于所述用途的营养组合物，所述组合物还包含至少一种益生菌，所述益生菌的量为103cfu/g至1012cfu/g所述组合物(干重)。
13.根据前述权利要求中任一项用于所述用途的营养组合物，其中所述营养组合物为婴儿配方食品、1段婴儿配方食品、较大婴儿配方食品或2段婴儿配方食品、婴孩食物、婴儿谷物组合物、强化剂或补充剂。
14.根据前述权利要求中任一项用于所述用途的营养组合物，其中所述婴儿或幼儿为存在风险和/或有需要的婴儿或幼儿。
15.根据权利要求14中任一项用于所述用途的营养组合物，其中所述婴儿或幼儿满足以下标准中的至少一者：
-他们在控制他们的食物摄入量方面有困难，或者他们具有异常的食物摄入量，诸如：
i)与其他同龄和同体型的婴儿或幼儿相比，他们进食较多；和/或
ii)他们的饱腹感有所变化；和/或
-他们的体重在出生后头几个月内过度增加。
16.根据前述权利要求中任一项用于所述用途的营养组合物，所述营养组合物通过增强所述婴儿或幼儿的饱腹感反应来用于所述用途。
17.根据前述权利要求中任一项用于所述用途的营养组合物，所述营养组合物通过增加所述婴儿或幼儿结肠丙酸产量来用于所述用途。
18.根据前述权利要求中任一项用于所述用途的营养组合物，所述营养组合物用于避免婴儿或幼儿的体重过度增加和/或促进瘦体重增加。
19.根据前述权利要求中任一项所述的营养组合物，其用于增强婴儿或幼儿的饱腹感反应。
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