CN103582426A - 寡糖混合物以及包含该混合物的食品，特别是婴儿配方产品 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了包含至少一种N-乙酰基-乳糖胺、至少一种唾液酸化的寡糖以及至少一种岩藻糖基化的寡糖的寡糖混合物。公开了包含所述寡糖混合物的食品、特别是婴儿配方产品。

Description

寡糖混合物以及包含该混合物的食品,特别是婴儿配方产品
发明领域
本发明涉及寡糖混合物以及包含所述寡糖混合物的食品，特别是婴儿配方产品(infant formula)。
发明背景
人类的结肠留驻有多种细菌，所述细菌对消化道生理具有正面和负面的双重作用，也具有其它***性的影响。结肠中所发现的细菌的优势类群包括拟杆菌属(Bacteroides)物种，尤其是双歧杆菌属(Bifidobacteria)、真细菌属(Eubacteria)、梭菌属(Clostridia)和乳杆菌属(Lactobacilli)。这些细菌响应于结肠中的底物可用性、氧化还原电位、pH、O2张力及其分布而具有变化的活性。通常，肠内的细菌可分为对其宿主发挥潜在危害或有益作用的各物种。致病作用(例如其可能由梭菌属或拟杆菌属引起)包括腹泻、感染、肝脏损害、致癌作用和肠腐烂。健康促进作用可通过有害细菌的生长抑制、免疫功能的刺激、增强必需营养成分的消化和吸收以及维生素的合成而引起。可具有健康促进作用的细菌类群(例如双歧杆菌属和乳杆菌属)在数量和/或活性上的增加是合乎需要的。
就婴儿的具体情况而言，可以认为婴儿的胃肠道直至出生前都是无菌的。在出生的过程中，其遭遇了来自母亲消化道和皮肤的细菌并开始建群。响应于婴儿的喂养，消化道微生物群(microbiota)的组成存在大的差异。母乳喂养的婴儿的粪便菌群包括双歧杆菌属的可观群体和一些乳杆菌属物种，而配方产品喂养的婴儿具有更复杂的微生物群，通常存在双歧杆菌属物种和拟杆菌属物种、梭菌属和链球菌属(Streptococci)。断乳后，开始建立类似成人模式的消化道微生物群模式。
对于所有的婴儿均建议使用母乳。但是，在一些情况下，出于医学原因，或者由于母亲选择不用母乳喂养，母乳喂养是不充分或不成功的。针对这些情况开发了婴儿配方产品。
向食品中添加益生元是促进结肠中有益细菌的数量和/或活性的一种方法。益生元是非可消化性的食品成分，其通过选择性地刺激结肠中一种或有限数量的细菌的生长和/或活性来有益地影响宿主，从而增进宿主健康。此类成分是非可消化性的，因为其在胃或小肠中不能被分解和吸收，从而可以完整的通过并到达结肠，在此处由有益细菌选择性地进行发酵。益生元的实例包括某些寡糖，例如低聚果糖(FOS)和低聚半乳糖(GOS)。
已知人乳比大多数其它动物乳含有更大量的不能消化的寡糖。事实上，不能消化的寡糖代表了母乳中第三大固体成分(次于乳糖和脂质)，初乳中存在的浓度是12-15g/l，成熟乳汁中以5-8g/l存在。人乳寡糖高度耐受酶水解，表明这些寡糖可以显示出与其热值不直接相关的关键性功能。
由于对人乳组成的了解有所增进，已经建议将益生元添加到婴儿配方产品中。多种补充了益生元如低聚果糖和低聚半乳糖混合物的婴儿配方产品是可商购获得的。但是，此类混合物仅提供近似人乳中存在的寡糖混合物。在人乳中已经检测到100种以上不同的寡糖成分，其中一些在如牛乳的动物乳中尚未检测到，或仅检测到少量。一些唾液酸化的寡糖和岩藻糖基化的寡糖存在于牛乳和初乳中，但是仅以非常小的量存在。
来自Abbott Laboratories的EP0975235B1描述了包含一种或多种人乳寡糖的合成营养组合物，其中组合物中的HMO选自一组8种HMO(3-岩藻糖基乳糖、乳-(lacto-)N-岩藻戊糖(fucopentaose)III、乳-N-岩藻戊糖II、二岩藻糖基乳糖、2’-岩藻糖基乳糖、乳-N-岩藻戊糖I、乳-N-新四糖(neotetraose)以及乳-N-岩藻戊糖V)，其中所述组合物预期用于以下情况：正常、健康的婴儿、儿童、成人或具有特殊需要的对象，例如伴随某些病理学病状的那些。本欧洲专利说明：一般而言，寡糖保护婴儿免受呼吸道、胃肠道以及泌尿生殖道的病毒和细菌感染。
本发明的目的是提供食品，所述食品尤其在人消化道中作为益生元是有效的。
存在特别针对幼儿、婴儿和/或新生婴儿的食品的需要，所述食品有助于获得正常免疫或炎症状态或减轻或降低食物***反应效应。
存在提供以上益处同时保持个体的平衡正常代谢的食品的需要。
存在通过非药物干预来改善人消化道环境的需要，所述干预与婴儿或幼儿等虚弱个体相容。
存在提供对***反应原口服耐受的食品的需要。
发明概述
本发明提供包含至少一种N-乙酰基-乳糖胺、至少一种唾液酸化的寡糖以及至少一种岩藻糖基化的寡糖的寡糖混合物。
以上成分的混合物是新的保护和免疫调节组合物，所述组合物作为食品中的益生元是尤其有效的。该混合物比商购获得的益生元成分如FOS和GOS在结构上更接近人母乳寡糖，因为其包含例如特定酸性(唾液酸化的)以及中性(岩藻糖基化的或N-乙酰基-乳糖胺)寡糖的混合物。
在一个实施方案中，寡糖混合物可来源于动物乳，例如牛乳、山羊乳或水牛乳的一种或多种。
在另一实施方案中，寡糖混合物是合成组合物。
在另一方面，本发明涉及含有如上所述寡糖混合物的食品。任选地，建议将该食品作为婴儿食物或配方产品，但是该产品可用于幼儿、婴儿或成人消耗的任何食物或饮料。成人通常在需要时使用本发明的寡糖混合物，尤其是在临床营养的技术领域中。含有这种寡糖混合物作为益生元的食品的消耗将选择性地促进结肠中一种或有限数量的有益细菌的生长和/或活性，并且由此改善宿主的健康。
发明详述
如本文中所使用，下列术语具有下列意义。
术语“婴儿”意指12月龄以下的儿童。
术语“年幼儿童”意指年龄在1至3岁之间的儿童。
术语“婴儿配方产品”意指预期用于在生命前四个至六个月期间的婴儿的特定营养用途、且本身满足此类人的营养要求的食品(1991年5月14日关于婴儿配方产品及后续配方产品(follow-on formulae)的欧洲委员会指令(European Commission Directive)91/321/EEC第1.2条)。
术语“后续配方产品”意指预期用于年龄超过四个月的婴儿的特定营养用途、且构成此类人的逐渐多样化饮食的主要液体元素的食品。
术语“新生婴儿配方产品”意指预期用于在生命前四个月期间的婴儿的特定营养用途的食品。
术语“幼儿食物”意指预期用于婴儿在生命最初几年期间的特定营养用途的食品。
术语“婴儿谷类组合物”意指预期用于婴儿在生命最初几年期间的特定营养用途的食品。
术语“成长乳”意指适合年幼儿童特定营养需要的乳基饮料。
术语“增强对***反应原的口服耐受”意指当口服时降低对***反应原的敏感性。
术语“营养组合物”意指向对象提供营养的组合物。该营养组合物通常经口服或静脉内服用，并且其通常包括脂质或脂肪源以及蛋白质源。
术语“合成组合物”意指通过化学和/或生物(例如酶)方式获得的组合物，其化学上与哺乳动物乳中天然存在的混合物相同。只要至少一种组分通过化学和/或生物(例如酶)方式获得，就可以说组合物是合成的。
术语“低变应原性的组合物”意指不太可能引起***性反应的组合物。
术语“唾液酸化的寡糖”意指具有唾液酸残基的寡糖。
术语“岩藻糖基化的寡糖”意指具有岩藻糖残基的寡糖。
术语“益生元”意指非可消化性的碳水化合物，其通过选择性地刺激人结肠中健康的细菌如双歧杆菌属的生长和/或活性来有益地影响宿主(Gibson GR，Roberfroid MB.Dietary modulation of the human colonicmicrobiota：introducing the concept of prebiotics.J Nutr.1995；125：1401-12)。
术语“益生菌”意指对宿主健康或保持良好状态具有有益作用的微生物细胞制剂或微生物细胞组分。(Salminen S，Ouwehand A.Benno Y.等“Probiotics：how should they be defined”Trends Food Sci.Technol.1999：10107-10)。
“***反应”是已由医师检测到并可以以不定期或以更持久的方式治疗的***反应。“食物***反应”是对营养组合物的***反应。
除非另有说明，所有百分比均以重量计。
本发明的寡糖混合物优选为低变应原性的组合物。
本发明提供寡糖混合物，所述寡糖混合物包含选自乳-N-四糖和乳-N-新四糖的至少一种N-乙酰基-乳糖胺、选自3’-唾液酸乳糖和6’-唾液酸乳糖的至少一种唾液酸化的寡糖，以及选自2，-岩藻糖基乳糖、3-岩藻糖基乳糖、二岩藻糖基乳糖、乳-N-岩藻戊糖(即乳-N-岩藻戊糖I、乳-N-岩藻戊糖II、乳-N-岩藻戊糖III和乳-N-岩藻戊糖V)、乳-N-二岩藻己糖(difucohexaose)I、单岩藻糖基乳-N-己糖、二岩藻糖基乳-N-己糖I和二岩藻糖基乳-N-新己糖(neohexaose)II的至少一种岩藻糖基化的寡糖。
本发明人惊讶地发现，当包含于食品中时，本发明的寡糖混合物尤其有利于预防和降低食物***反应及有关食物***反应对健康的影响的风险和/或降低其严重性和/或降低其发生率。所述影响优选为(i)皮肤影响，特应性皮炎、皮疹或发红；(ii)对免疫***或炎症状态的影响；或(iii)对肠胃***的影响，例如绞痛、腹痛等。
本发明的寡糖混合物可来源于动物乳。所述乳可由任何哺乳动物、尤其是由牛、山羊、水牛、马、象、骆驼或绵羊获得。
所述寡糖混合物含有至少一种N-乙酰基-乳糖胺。也就是说，其含有N-乙酰基-乳糖胺和/或含有N-乙酰基-乳糖胺的寡糖。适合的含有N-乙酰基-乳糖胺的寡糖包括乳-N-四糖(LNT)和乳-N-新四糖(LNnT)。
因此，根据本发明，N-乙酰基-乳糖胺优选选自乳-N-四糖(LNT)和乳-N-新四糖(LNnT)。
如例如在美国专利第5,288,637号和WO96/10086中所述，可通过使用糖基转移酶将糖单元从供体部分酶转移至受体部分来化学合成LNT和LNnT。可选地，可通过将游离或与寡糖(例如乳果糖(lactulose))结合的己酮糖(例如果糖)化学转化为N-乙酰基己糖胺或含有N-乙酰基己糖胺的寡糖来制备LNT和LNnT，如Wrodnigg，T.M.；Stutz，A.E.(1999)Angew.Chem.Int.Ed.38：827-828中所描述。然后可将以此方式产生的N-乙酰基-乳糖胺转移至作为受体部分的乳糖。
优选地，本发明的寡糖混合物含有按干重计0.1至3g N-乙酰基-乳糖胺乳糖/100g寡糖混合物。
唾液酸化的寡糖3′-唾液酸乳糖和6′-唾液酸乳糖可通过色谱法或过滤由天然来源如动物乳中分离。可选地，其还可通过生物技术方式、使用特定的唾液酸转移酶或唾液酸酶、神经氨酸酶、通过基于酶的发酵技术(重组体或天然酶)或化学合成或微生物发酵技术来制备。在后者的情况下，微生物可表达其天然的酶和底物或可对其进行改造以产生相应的底物和酶。可使用单一微生物培养物或混合培养物。唾液酸基-寡糖的形成能由受体底物、始于从DP＝1起的任何聚合度(DP)开始。
优选地，本发明的寡糖混合物含有按干重计0.05至2g，更优选0.1至2g唾液酸化的寡糖/100g寡糖混合物。
岩藻糖基化的寡糖可选自2，-岩藻糖基乳糖、3-岩藻糖基乳糖、二岩藻糖基乳糖、乳-N-岩藻戊糖I、乳-N-岩藻戊糖I、乳-N-岩藻戊糖II、乳-N-岩藻戊糖III、乳-N-岩藻戊糖V、乳-N-二岩藻己糖I、单岩藻糖基乳-N-己糖、二岩藻糖基乳-N-己糖I以及二岩藻糖基乳-N-新己糖II。
尤其优选的岩藻糖基化的寡糖是2，-岩藻糖基乳糖。
所述岩藻糖基化的寡糖可通过色谱法或过滤技术由天然来源如动物乳中分离。可选地，其可通过生物技术方式、使用特定的岩藻糖基转移酶和/或岩藻糖苷酶、通过使用基于酶的发酵技术(重组体或天然酶)或微生物发酵技术来制备。在后者的情况下，微生物可表达其天然的酶和底物或可对其进行改造以产生相应的底物和酶。可使用单一微生物培养物和/或混合培养物。岩藻糖基化的寡糖的形成能由受体底物、始于从DP＝1起的任何聚合度(DP)开始。可选地，岩藻糖基化的寡糖可由乳糖和游离岩藻糖通过化学合成来制备。岩藻糖基化的寡糖还可由例如日本的Kyowa，Hakko，Kogyo获得。
优选地，本发明的寡糖混合物包含按干重计0.1至3g的岩藻糖基化的寡糖/100g寡糖混合物。
在优选的实施方案中，本发明的寡糖混合物包含0.05至3g总量的N-乙酰基-乳糖胺、唾液酸化的寡糖和岩藻糖基化的寡糖/100g寡糖混合物。
在本发明的优选方面，将上述寡糖混合物加至食品中。在本发明的上下文中，术语“食品”意图涵盖任何可消耗的物质。因此，其可以是预期用于由人消耗的产品，尤其是婴儿配方产品、后续配方产品、婴儿或年幼儿童食物如婴儿谷类等。尤其是，可将本发明的寡糖混合物加至婴儿配方产品、脱水乳或谷类混合物中。
因此，本发明还包括包含本发明的寡糖混合物的食品。所述食品优选地包含蛋白质源、脂肪源以及碳水化合物源。
本发明的食品优选为低变应原性的组合物。
本发明的食品还含有蛋白质源。对于本发明而言，认为蛋白质的类型不是关键，只要满足对必需氨基酸含量的最低需求，并且保证令人满意的生长即可。因此，可使用基于乳清、酪蛋白及其混合物的蛋白质源，以及基于大豆的蛋白质源。但是，蛋白质源优选地包含20％至95％的乳清蛋白质和/或来源于乳清的蛋白质。就乳清蛋白质而言，该蛋白质源可基于酸乳清或甜乳清或其混合物，并且可以以任何需要的比例包含α-乳清蛋白和β-乳球蛋白。
本发明的食品通常含有碳水化合物源。这在本发明的食品是婴儿配方产品时尤其优选。在这种情况下，可以使用在婴儿配方产品中常规存在的任何碳水化合物源如乳糖、蔗糖、麦芽糖糊精、淀粉及其混合物，但优选的碳水化合物源是乳糖。
本发明的食品通常包含脂质源。如果本发明的食品是婴儿配方产品，这尤其相关。在这种情况下，脂质源可以是适合用于婴儿配方产品的任何脂质或脂肪。优选的脂肪源包括棕榈油酸甘油酯(palm oleic)、高油酸向日葵油和高油酸红花油。也可加入必需脂肪酸亚油酸和α-亚麻酸，同样可加入少量的包含大量预制的花生四烯酸和二十二碳六烯酸的油，例如鱼油或微生物油。脂肪源优选具有n-6至n-3脂肪酸的比率为约5∶1至约15∶1；例如约8∶1至约10∶1。
本发明的食品还优选地包含认为在日常饮食中是必需的所有维生素和矿物质，并且以营养显著的量包含所述物质。已确定了某些维生素和矿物质的最小需要量。任选地存在于本发明食品中的矿物质、维生素以及其他营养素的实例包括维生素A、维生素B1、维生素B2、维生素B6、维生素B12、维生素E、维生素K、维生素C、维生素D、叶酸、肌醇、烟酸、生物素、泛酸、胆碱、钙、磷、碘、铁、镁、铜、锌、锰、氯、钾、钠、硒、铬、钼、牛磺酸和L-肉碱。通常以盐的形式加入矿物质。特定矿物质和其他维生素的存在和量将根据预期群体而变化。
如需要，本发明的食品可包含乳化剂和稳定剂如大豆、卵磷脂、柠檬酸的甘油单酯和二酯等。
本发明的食品还可包含具有有益作用的其他物质，例如乳铁蛋白、核苷酸、核苷等。
本发明的食品优选为合成营养组合物。在这种情况下，所述食品可以是新生婴儿配方产品、婴儿配方产品、幼儿食物、婴儿谷类组合物、后续配方产品或成长乳，并且所述食品优选为新生婴儿配方产品。
本发明的食品可进一步包含至少一种益生菌菌株，所述益生菌菌株优选双歧杆菌属和/或乳杆菌属。所述食品尤其有利于增强对***反应原的口服耐受。
适合的益生菌菌株包括鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)ATCC53103，由芬兰的Valio Oy以LGG为商标获得；鼠李糖乳杆菌CGMCC1.3724、副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei) CNCM I-2116、罗伊乳杆菌(Lactobacillus reuteri)，由BioGaia A.B以Reuteri为商标出售；约氏乳杆菌(Lactobacillus johnsonii)CNCM I-1225、唾液链球菌(Streptococcussalivarius)DSM13084，由新西兰的BLIS Technologies Limited以KI2的名称出售；尤其是由丹麦的Christian Hansen公司以Bb12为商标出售的乳双歧杆菌(Bifidobacterium lactis)CNCM I-3446；由日本的Morinaga MilkIndustry Co.，Ltd.以BB536为商标出售的长双歧杆菌(Bifidobacteriumlongum)ATCC BAA-999；由Danisco以Bb-03为商标出售的短双歧杆菌(Bifidobacterium breve)；由Morinaga以M-16V为商标出售的短双歧杆菌；由Procter&GambIe公司以Bifantis为商标出售的婴儿双岐杆菌(Bifidobacterium infantis)以及由Institut Rosell(Lallemand)以R0070为商标出售的短双歧杆菌。
本发明的食品可进一步包含至少一种益生元，通常以食品的重量计的量为0.3至10％。
例如，所述食品也可包含除本发明的N-乙酰基-乳糖胺、唾液酸化的寡糖以及岩藻糖基化的寡糖以外的益生元。益生元通常是非可消化性的，因为其在胃或小肠中不能被分解和吸收，当其通过并到达结肠时是完整的，在此处由有益细菌选择性地发酵。益生元的实例包括某些寡糖，例如低聚果糖(FOS)和低聚半乳糖(GOS)。可使用益生元的组合，例如90％GOS与10％短链低聚果糖，例如在由BENEO-Orafti以
Figure BDA00003237167500091
低聚果糖(之前是
Figure BDA00003237167500092
)为商标出售的产品中，或10％菊粉，如在由BENEO-Orafti以
Figure BDA00003237167500093
菊粉(之前是
Figure BDA00003237167500094
)为商标出售的产品中。尤其优选的益生元的组合是70％短链低聚果糖和30％菊粉，其是由BENEO-Orafti以“Prebio1”为商标出售的产品。
根据本发明的优选的实施方案，本发明的食品优选用于预防和降低食物***反应及有关食物***反应对健康的影响的风险和/或降低其严重性和/或降低其发生率。所述影响优选为(i)皮肤影响，特应性皮炎、皮疹或发红；(ii)对免疫***或炎症状态的影响；或(iii)对肠胃***的影响，例如绞痛、腹痛等。
本发明的组合物可进一步包含其他营养化合物，所述其他营养化合物与要求保护的寡糖协同作用以递送要求保护的对皮肤如皮肤***反应或特应性皮炎的益处。此类其他化合物可以是例如特定非水解蛋白质、低变应原性的蛋白质(即水解的或部分水解的蛋白质)、低乳糖成分、低乳糖糖类或水解糖类。人们假定，可通过以下事实来确定各成分的协同作用：各成分一起帮助维持效应物的低生理水平始终低于开始显示皮肤效应(例如特应性皮炎)的阈值。
根据本发明的另一实施方案，将本发明的食品用于增强对***反应原的口服耐受。
本发明还涉及包含寡糖混合物的食品的用途，所述寡糖混合物包含至少一种N-乙酰基-乳糖胺、至少一种唾液酸化的寡糖以及至少一种岩藻糖基化的寡糖，所述食品作为合成营养组合物(即作为合成营养剂)，用于预防和降低食物***反应及有关食物***反应对健康的影响的风险和/或降低其严重性和/或降低其发生率。
本发明还涉及包含寡糖混合物的食品的用途，所述寡糖混合物包含至少一种N-乙酰基-乳糖胺、至少一种唾液酸化的寡糖以及至少一种岩藻糖基化的寡糖，所述食品作为合成营养组合物(即作为合成营养剂)，用于增强对***反应原的所述口服耐受。
所述用途涵盖食品是补充剂、优选以单位剂量形式提供的添加剂的事实。
根据优选的实施方案，将本发明的食品用于婴儿和年幼儿童。本发明的组合物及用途特别适用于有***反应的风险、有***反应家族史或已经经历过一些***反应(特别是呼吸道***反应或皮肤***反应)的偶发事件的婴儿或儿童。在一个实施方案中，本发明的组合物及用途适用于有***反应风险或已经经历过***反应(特别是呼吸道***反应或皮肤***反应)的偶发事件的青少年或成人。在一个实施方案中，本发明涵盖要求保护的组合物的用途，其用于在婴儿或年幼儿童的群体中以及用于缓解***反应的症状或在以后的生活中降低***反应的风险。
根据产品的类型，可以以本领域已知的任何适合方式制备该食品，并且在生产工艺期间的适当阶段将本发明的寡糖混合物加至产品中。例如，婴儿配方产品可通过将蛋白质源与除乳糖以外的任何碳水化合物以及脂肪源以适当的比例掺混在一起来制备。如需要可加入乳化剂。可在此时加入维生素和矿物质，但通常稍后加入以避免热降解。可在掺混之前将任何亲脂性维生素、乳化剂等溶解入脂肪源。然后可混入水、优选已进行反渗透的水，来形成液体混合物。
然后，可将液体混合物热处理，以减少细菌载量，例如通过将液体混合物快速加热至约80℃至约150℃的温度，持续约5秒至约5分钟。这可通过蒸汽注射的方式、高压釜或换热器、例如板式换热器进行。
然后，可将液体混合物冷却至约60℃至约85℃，例如瞬时冷却。然后可再次均质化液体混合物，例如分两个阶段，在第一阶段约10MPa至约30MPa，在第二阶段约2MPa至约10MPa。然后可进一步冷却均质化的混合物以加入任何热敏成分，例如维生素和矿物质。此时方便地调节均质化混合物的pH和固体含量。
将均质化的混合物转移至合适的干燥装置如喷雾干燥器或冷冻干燥器，将其转变为粉末。所述粉末应当具有低于以重量计约5％的含水量。在这一阶段可加入N-乙酰基-乳糖胺、唾液酸化的寡糖以及岩藻糖基化的寡糖，通过与益生菌菌株(如使用)一起干混，或通过将其以晶体的糖浆形式与益生菌菌株(如使用)一起掺混，以及喷雾干燥(或冷冻干燥)进行。
本发明的寡糖混合物优选通过干混直接加至婴儿配方产品中。但是，如果其由动物乳制备，例如如下所述，可方便地加入寡糖混合物而不用首先除去所有乳糖。由于婴儿配方产品含有通常完全或部分由乳糖构成的碳水化合物成分，对本领域技术人员显而易见的是，婴儿配方产品中碳水化合物的量将需要调节，以考虑由加入的寡糖混合物提供的其他碳水化合物。年幼儿童或婴儿食品或配方中寡糖混合物的最终浓度优选以干物质的重量计为0.3至4％，优选0.75至1.54％。这相应于0.2至5克每升复溶配方产品的浓度，优选1至2g/l。但是，不得将这些量解释为限定性的，并且这些量应当对目标群体、例如基于年幼儿童或婴儿的体重和年龄或健康进行调整。优选地，每次喂食时将含有本发明的寡糖混合物的配方产品或食物喂给婴儿。
可选地，可将寡糖混合物通过湿混加至湿的婴儿或成人食品中。可将所述混合物以约0.2至约5克寡糖/升产品的浓度加至婴儿配方产品中。但是，不应当将这些量解释为限定性的，并且这些量应当对目标群体、例如基于年幼儿童或婴儿的体重和年龄或特定群体的健康进行调整。当使用湿混时，寡糖掺混物优选以糖浆形式加入。该糖浆可含有不超过80％总固体，但是这不应当是限定性的。
尽管优选补充特别以婴儿营养为目标的食品，但是补充无特别目标或针对成人群体的食品可能是有益的。例如，可将本发明的寡糖混合物加至用于老人的保健营养产品和营养产品中。此类食品可包括乳、酸奶、凝乳、奶酪、冰淇淋等。此类食品还包括口服食物补充剂，以及肠内营养制剂或管喂养施用的实例。
除本发明的寡糖混合物之外，如婴儿配方产品的食品可包含一种或多种单独加入的另外的寡糖。
本发明参照以下实施例进行阐述。
实施例1
含有本发明的寡糖混合物的婴儿配方产品的实例如下。另一实施例基于商业NAN和/或Lactogen婴儿配方产品(来自Nestlé，Switzerland)，向其中加入下述量的本发明的特定寡糖。
营养素 每100kcal 每升
能量(kcal) 100 670
蛋白质(g) 1.83 12.3
脂肪(g) 5.3 35.7
亚油酸(g) 0.79 5.3
α-亚麻酸(mg) 101 675
乳糖(g) 11.2 74.7
矿物质(g) 0.37 2.5
Na(mg) 23 150
K(mg) 89 590
Cl(mg) 64 430
Ca(mg) 62 410
P(mg) 31 210
Mg(mg) 7 50
Mn(μg) 8 50
Se(μg) 2 13
维生素A(μg RE) 105 700
维生素D(μg) 1.5 10
维生素E(mg TE) 0.8 5.4
维生素K1(μg) 8 54
维生素C(mg) 10 67
维生素B1(mg) 0.07 0.47
维生素B2(mg) 0.15 1.0
烟酸(mg) 1 6.7
维生素B6(mg) 0.075 0.50
叶酸(μg) 9 60
泛酸(mg) 0.45 3
维生素B12(μg) 0.3 2
生物素(μg) 2.2 15
胆碱(mg) 10 67
Fe(mg) 1.2 8
I(μg) 15 100
Cu(mg) 0.06 0.4
Zn(mg) 0.75 5
3’唾液酸乳糖(mg) 30 200
6’唾液酸乳糖(mg) 6 40
LNnT(mg) 30 200
2FL(g) 0.3 2.0
实验数据：
发现总结
下面概述的发现显示，寡糖的特定掺混物促进乳酸菌如长双歧杆菌婴儿亚种(Bifidobacterium longum subsp infantis)的代谢活性和生长。不期望受理论的束缚，该影响可部分解释以下观察结果：发现在母亲的早期乳中此类特定寡糖掺混物的量相对较低，其剖腹产出生的儿童在2岁以前出现特应性***反应，尤其是特应性湿疹。这表明，根据本发明，提供具有安全水平的特定寡糖掺混物以及水解蛋白质(完全、广泛或部分)的营养组合物可帮助重新建立婴儿肠道中细菌的天然平衡和/或由此在皮肤病状和皮肤疾病、优选为特应性皮炎的预防和/或治疗方面正面影响健康状态。此外，通过提供尤其作为婴儿配方产品的本发明的营养组合物的新且实际的健康影响的实例，所述发现证实了本发明的有用性。
研究模型1：长双歧杆菌婴儿亚种的刺激
方法：
长双歧杆菌婴儿亚种(ATCC15697)在API生长培养基中厌氧生长，所述API生长培养基补充有1％(w/v)葡萄糖或1％(w/v)2’岩藻糖基乳糖(2FL)或1％(w/v)乳-N-新四糖(LNnT)或1％(w/v)6’唾液酸乳糖(6SL)或1％(w/v)的等量的2FL、LNnT和6SL的组合。稀释每一过夜培养物，以在含有0.1％葡萄糖作为碳源的DMEM(Dulbeccos改良Eagle Medium))中具有0.1的起始OD600。所用的该培养基不含任何其他碳水化合物补充物或具有额外的1％(w/v)葡萄糖或1％(w/v)2’岩藻糖基乳糖(2FL)或1％(w/v)乳-N-新四糖(LNnT)或1％(w/v)6’唾液酸乳糖(6SL)或1％(w/v)的等量的2FL、LNnT和6SL的组合。由此在37℃厌氧条件下进行DMEM培养基的调整。
再孵育一夜之后，通过在600nm测量OD来监测细菌的生长。然后将条件化培养基离心，经0.22微米过滤器过滤上清液以除去细菌。通过HPLC使用Hi-Plex H柱和UV检测器来定量条件化培养基中的乙酸盐。
结果：
我们惊讶地发现，由等份的岩藻糖基化的寡糖(例如2’FL)、N-乙酰化的寡糖(例如LNnT)和唾液酸化的寡糖(例如6SL)组成的寡糖掺混物显著提高乳酸菌(例如双歧杆菌属)的代谢活性，如通过乙酸盐的形成可见(图1)。
寡糖掺混物也刺激细菌的生长(图2)。
图1说明实验结果，其指示双歧杆菌属(长双歧杆菌婴儿亚种)在不含额外碳水化合物或具有以下额外物质的DMEM培养基中的代谢刺激：葡萄糖(Glc)或乳-N-新四糖(LNnT)或2’岩藻糖基乳糖(2FL)或6’唾液酸乳糖(6SL)或LNnT、6SL和2FL的掺混物。(n＝6；显示具有SEM的平均值；指示ANOVA显著性(p＜0.01))。
注意：仅LNnT、6SL和2FL的掺混物显著刺激乙酸盐的产生。
图2说明实验结果，其显示在不含额外碳水化合物或具有以下额外物质的培养基中双歧杆菌属(长双歧杆菌婴儿亚种)的体外生长：葡萄糖(Glc)或乳-N-新四糖(LNnT)或2’岩藻糖基乳糖(2FL)或6’唾液酸乳糖(6SL)或LNnT、6SL和2FL的掺混物。(n＝4；显示具有SEM的平均值；小写字母指示ANOVA显著性(p＜0.02))。
研究模型2：母乳样品及2岁之前***反应性疾病发生的回顾性流行病学分析
方法：
我们由一组约52个剖腹产出生的婴儿母亲对来分析早期乳样品中存在的特定寡糖的量。为此，将脱脂乳样品在水中稀释10至100倍，并通过配备有CarboPac PA1柱(Dionex)和电化学检测器的HPAEC(Dionex)分析。用可靠寡糖标准品进行寡糖鉴别和定量。我们将婴儿中(A)***反应性疾病、(B)特应性***反应、(C)特应性湿疹的不存在或存在对由2FL、LNnT和6SL组成(图3)或由2FL、LNnT、LNT(乳-N-四糖)、6SL和3SL(3’唾液酸乳糖)组成(图4)的寡糖掺混物的量作图。
图3说明实验结果，其显示在剖腹产出生的儿童中直至2岁时(A)***反应性疾病、(B)特应性***反应、(C)特应性湿疹的不存在(否)和存在(是)。对在母乳中测量的特定寡糖掺混物的量作图。此处所代表的寡糖掺混物是2’岩藻糖基乳糖(2FL)、乳-N-新四糖(LNnT)和6’唾液酸乳糖(6SL)的总和。(指示统计显著性)
图4说明实验结果，其显示在剖腹产出生的儿童中直至2岁时(A)***反应性疾病、(B)特应性***反应、(C)特应性湿疹的不存在(否)和存在(是)。对在母乳中测量的特定寡糖掺混物的量作图。此处所代表的寡糖掺混物是2’岩藻糖基乳糖(2FL)、乳-N-新四糖(LNnT)、乳-N-四糖(LNT)、6’唾液酸乳糖(6SL)和3’唾液酸乳糖(3SL)的总和。(指示统计显著性)
结果：
我们惊讶地发现，当儿童出现***反应性疾病时，早期乳中特定寡糖掺混物的水平倾向于相对较低(图3A、4A)。对于特应性疾病并且尤其是特应性湿疹，我们测量到：儿童直至2岁出现此类***反应，则在其母亲的早期乳中寡糖掺混物的水平显著较低。

Claims (14)

1.寡糖混合物，其包含至少一种乙酰基-N-乳糖胺、至少一种唾液酸化的寡糖以及至少一种岩藻糖基化的寡糖。
2.根据权利要求1的寡糖混合物，其中乙酰基-N-乳糖胺选自乳-N-四糖和乳-N-新四糖，唾液酸化的寡糖选自3’-唾液酸乳糖和6’-唾液酸乳糖，并且岩藻糖基化的寡糖选自2’-岩藻糖基乳糖、3-岩藻糖基乳糖、二岩藻糖基乳糖、乳-N-岩藻戊糖、乳-N-二岩藻己糖I、单岩藻糖基乳-N-己糖、二岩藻糖基乳-N-己糖I和二岩藻糖基乳-N-新己糖II。
3.根据前述权利要求中任一项的寡糖混合物，所述寡糖混合物是合成的或来源于动物乳。
4.食品，其包含根据前述权利要求中任一项的寡糖混合物，优选为婴儿配方产品。
5.根据前述权利要求中的食品，其包含蛋白质源、脂肪源以及碳水化合物源。
6.根据权利要求4和5中任一项的食品，其是新生婴儿配方产品、婴儿配方产品、幼儿食物、婴儿谷类组合物、后续配方产品或成长乳，并且所述食品优选是新生婴儿配方产品。
7.根据权利要求4至6中任一项的食品，其进一步包含至少一种益生菌菌株，所述益生菌菌株优选为双歧杆菌属和/或乳杆菌属。
8.根据权利要求4至7中任一项的食品，其用于预防和降低食物***反应及有关食物***反应对健康的影响的风险和/或降低其严重性和/或降低其发生率。
9.根据前述权利要求的食品，其中所述影响为(i)皮肤影响，特应性皮炎、皮疹或发红；(ii)对免疫***或炎症状态的影响；或(iii)对肠胃***的影响，例如绞痛、腹痛等。
10.根据权利要求4至7中任一项的食品，其用于增强对***反应原的口服耐受。
11.包含寡糖混合物的食品的用途，所述寡糖混合物包含至少一种N-乙酰基-乳糖胺、至少一种唾液酸化的寡糖以及至少一种岩藻糖基化的寡糖，所述食品作为合成营养组合物，用于预防和降低食物***反应及有关食物***反应对健康的影响的风险和/或降低其严重性和/或降低其发生率。
12.包含寡糖混合物的食品的用途，所述寡糖混合物包含至少一种N-乙酰基-乳糖胺、至少一种唾液酸化的寡糖以及至少一种岩藻糖基化的寡糖，所述食品作为合成营养组合物，用于增强对***反应原的口服耐受。
13.根据权利要求11至12中任一项的用途，其中食品是优选以单位剂量形式提供的补充剂。
14.权利要求4至10中任一项的食品，或权利要求11至13的食品的用途，其中所述食品进一步包含益生菌，所述益生菌优选具有以下健康影响：减少食物***反应、维持消化道的细菌平衡或正面影响对***反应的保护，并且优选含有有效产生所述健康影响的量。
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