CN108524684A - 裸花紫珠中具有抗***作用的活性部位筛选 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及中药提取领域,尤其是裸花紫珠提取方法及不同部位提取物在治疗***中的应用。针对现有技术中对裸花紫珠的研究没有针对裸花紫珠不同部位有效作用成分提取含量的研究,以及提取物体外实验与临床疗效统一性的研究,尤其是提取物西医治疗作用与中医诊断临床对应疗效一致性的研究;本发明的目的是:1、提供一种裸花紫珠提取物的制备方法,更全面的提取落花紫珠中的成分;一种裸花紫珠提取物,其特征在于其原料采用新鲜状态的裸花紫珠,其制备方法为:新鲜原料经提取,浓缩得到裸花紫珠提取物。
Description
技术领域
本发明涉及中药提取领域,尤其是裸花紫珠提取方法及不同部位提取物在治疗***中的应用。
背景技术
***(cervicitis)是妇科常见疾病之一,多见于育龄妇女,为宫颈受损伤和病原体侵袭而致,包括子宫颈***部炎症及子宫颈管黏膜炎症。临床上将***分为急性和慢性两种,以慢性炎症为多。
世界卫生组织对中国妇女的调查表明:我国育龄女性人口数字约为1.5~2亿,其中约41%的女性患有不同程度的妇科炎性疾病,已婚女性发病率更高达70%。据统计,***约占妇产科门诊总数的40-50%,居妇科疾病之首,其中慢性***占门诊病人的10%~25%。正如其他炎症一样,***也是多病因的病理过程,很多致病因素均可成为***的病因,如内源性卵巢性激素的影响,外源性病原体的感染,机械性刺激或损伤,沙眼衣原体或淋病奈瑟球菌感染等均可导致***,不同年龄组***患病率统计学处理有显著性差异(P<0.05),其中30~50岁患病率相对较高,25~30岁患病率次之,50岁以上患病率较低。
***的中医症型
1、脾虚型:
这种***的症状带下色白或淡黄,质粘稠,无臭气,绵绵不断,面色苍白或萎黄,四肢不温,精神疲倦,纳少便溏,两足浮肿,舌质淡,苔白或腻,脉缓弱。
2、肾虚型:
这种***的症状白带量多,质稀薄或稍粘无臭,或伴腰酸如折,小腹冷感,小便多,大便渲,舌质淡,苔白,脉沉;或伴***灼热,头晕目眩,面部烘热,五心烦热,舌红少苔,脉细数。
3、湿热下注型:
这种***的症状带下量多色黄,质粘腻有臭气,胸闷口腻,纳食较差,或小腹作痛,阴痒,小便黄少,舌苔腻或厚。
裸花紫珠Callicarpa nudiflora Hook. et Arn. 为马鞭草科紫珠属植物,又名紫珠。裸花紫珠药用部位为地上干燥部分,全年均可采收。
1977 年版中国药典一部首次将其单列,味苦、微辛、平。归脾、胃,肝经。具有消炎、解毒、收敛、止血的功效,用于散瘀止血、解毒消肿。也可用于衄血、咳血、吐血、便血、跌打瘀肿、外伤出血、水火烫伤、疮毒溃烂等。
尽管裸花紫珠作为复方用药疗效确切,但关于其单个用药在治疗***方面的研究偏少,但近年来对裸花紫珠剂型的药理作用和临床应用相关的报道逐渐增多。
研究表明裸花紫珠提取物具有促进止血、抑制血栓形成、抑制细菌和细胞毒活性、抵抗炎症、加强免疫等药理活性。
通过研究表明总黄酮具有抗炎、止血的功效,裸花紫珠提取的有效成分中的黄酮类成分极大可能是裸花紫珠的抗炎止血活性部位。
发明专利,201110200973.6申请日 2011.07.19;申请人九芝堂股份有限公司
记载:“本发明实现了最大程度地从裸花紫珠中提取有效活性成分,发明人对裸花紫珠的提取方式(榨取、加热)、采收时间(春季、夏季、秋季、冬季)和不同干燥状态(新鲜、干品)进行了***研究,
1)新鲜的状态的裸花紫珠加热提取的提取得率、总黄酮和木犀草素、总鞣质含量均比相同时期的干品高。以秋季采收的裸花紫珠为例,新鲜裸花紫珠中的提取得率、总黄酮含量、木犀草素、总鞣质含量分别是干品的1.20、1.59、1.52、1.05 倍,说明原料在干燥过程中有效成分的丧失了大部分。
2)与加热提取相比,榨取明显提高了裸花紫珠的得率、总黄酮和木犀草素、总鞣质含量。以秋季采收的裸花紫珠为例,新鲜裸花紫珠榨取的得率、总黄酮含量、木犀草素、总鞣质含量分别是干品的1.13、1.23、1.20、1.14 倍。
3)不同采收季节的裸花紫珠的得率、总黄酮和木犀草素含量有一定差异,研究表明夏季和秋季时期的提取得率、总黄酮和木犀草素含量优于春季和冬季。”
本发明制备的裸花紫珠提取物与裸花紫珠干药材提取物均具有对金黄色葡萄球菌、大杆菌、 伤寒杆菌、 肺炎球菌、 绿脓杆菌、 乙型链球菌、 丙型链球菌和幽门螺旋杆菌均有不同度的抑制和杀灭作用, 但本发明制备的裸花紫珠提取物效果更好。”
虽然发明人对裸花紫珠的提取方式(榨取、加热)、采收时间(春季、夏季、秋季、冬季)和不同干燥状态(新鲜、干品)进行了***研究,然而发明并没有对不同的裸花紫珠不同的部位的提取率做出研究,并且虽然对提取物的体外抗菌、止血、镇痛、收敛作用做了研究,然而体外实验效果是否与临床治疗作用一致并没有作进一步的验证。
***,顾名思义,是宫颈发炎了,是宫颈里有细菌,真菌引起的发炎。如果这样的话,西医用抗生素是科学的。抗生素可以消炎杀菌,治疗炎症应该药到病除。事实是,用抗生素治疗***,易反复,而且越治越重,甚至于渐而治成顽疾。
在妇科炎症疾病中,西药的口服药主要以全身用抗生素及抗真菌药物为主,且抗生素及抗真菌药物药性寒凉,伤害阳气。滥用抗生素,抗真菌药物导致机体阳气损伤,病情加重。
发明专利,申请号 201710316539.1 一种治疗妇科炎症的裸花紫珠凝胶剂及其制备方法 一种治疗妇科炎症的裸花紫珠凝胶剂,其特征在于裸花紫珠1-500重量份,粘胶剂1-50重量份,保湿剂1-50重量份和透皮促进剂1-50重量份。本品治疗效果好,细菌性***炎和霉菌性***炎有效率均为100%,***有效率为87.5%。在治疗过程中,无刺激性,患者未见明显的不良反应。
然而发明并没有对不同的裸花紫珠不同的部位的提取率做出研究,也没有按照中医理论来对***的不同类型治疗作用做出进一步研究,中医对***的认识,和西医有差别,是否这种差别会造成治疗效果的不同,现有技术并没有给出明确的结果。
发明内容
针对现有技术中对裸花紫珠的研究没有针对裸花紫珠不同部位有效作用成分提取含量的研究,以及提取物体外实验与临床疗效统一性的研究,尤其是提取物西医治疗作用与中医诊断临床对应疗效一致性的研究;本发明的目的是:
1、提供一种裸花紫珠提取物的制备方法,更全面的提取落花紫珠中的成分;
2、提供裸花紫珠不同部位的提取成分的含量差异比较,更全面的揭示裸花紫珠不同部位的提取成分含量差异;
3、提供裸花紫珠不同部位的提取物在治疗中医理论下的不同***的治疗效果,使临床应用更有针对性减少副作用的产生。
其解决问题的技术方案是:
一种裸花紫珠提取物,其特征在于其原料采用新鲜状态的裸花紫珠,其制备方法为:新鲜原料经提取,浓缩得到裸花紫珠提取物。
提取方法是:
方法一)新鲜状态的裸花紫珠原料, 经压榨得到压榨液及压榨渣, 压榨液滤过, 滤液浓缩, 干燥得裸花紫珠提取物。
方法二)取新鲜状态的裸花紫珠原料, 经粉碎得到裸花紫珠浆液加入10倍95%乙醇提取回收溶剂得到提取物1;
剩余残渣,加入10倍量氯仿提取回收溶剂得到提取物2;
剩余残渣,加入10倍正己烷热回流提取,然后回收正己烷得到提取物3;
合并提取物1、2、3得到裸花紫珠总提取物。
所述的新鲜状态裸花紫珠原料, 为新鲜茎叶,根皮。
表一为不同的提取方法(榨取、分段提取)对不同的季节,不同的部位,的裸花紫珠提取结果
表一
研究结果说明裸花紫珠的提取得率、 总黄酮和木犀草素、 总鞣质含量与采收季节、提取方式和药材部位有关。
1)与榨取相比,分步提取裸花紫珠的提取得率有下降、总黄酮和木犀草素、总鞣质得率略有增加,说明榨取过程中的裸花紫珠提取物更完整,同时也说明杂质更多,并且因为榨取压榨渣中也含有一部分总黄酮、 木犀草素、 总鞣质,导致提取废物中有效成分的流失,分步提取裸花紫珠总黄酮含量、 木犀草素、 总鞣质纯度更高。
2)不同部位的裸花紫珠的得率、总黄酮和木犀草素含量有一定差异, 研究表明茎叶夏季和秋季时期的提取得率、总黄酮和木犀草素含量优于春季和冬季,而根皮中的提取得率、总黄酮和木犀草素含量含量恰恰相反,春季和冬季优于夏季和秋季,并且茎叶中的提取得率、总黄酮和木犀草素含量优于根皮。
本发明相对于现有技术, 具有如下优点和技术效果 :本发明采用分段提取以裸花紫珠鲜药材为原料,其活性成分总黄酮和木犀草素、总鞣质纯度更高,有利于提高资源利用率。另一方面减少有效物质的损失。
具体实施方式:
以下结合实施例对发明的内容做进一步的详细说明
实施例一
取 10 月采收的新鲜裸花紫珠叶 1kg,加 2kg 水破碎成匀浆,压榨,滤过,浓缩,干燥得107.8g 提取物,裸花紫珠提取得率为 10.78%,测得总黄酮含量为 58.9mg/g,木犀草素含量为0.68mg/g,总鞣质含量 17.35 mg/g 。
实施例二
取10月采收的新鲜裸花紫珠根皮1kg,加2kg水破碎成匀浆,压榨,滤过,浓缩,干燥得89.7g 提取物,裸花紫珠提取得率为 8.97%,测得总黄酮含量为 50.7mg/g,木犀草素含量为0.51mg/g,总鞣质含量 15.34 mg/g。
实施例三
取 10 月采收的新鲜裸花紫珠叶 1kg,经粉碎得到裸花紫珠浆液,加入10倍95%乙醇提取回收溶剂得到提取物1;剩余残渣,加入10倍量氯仿提取回收溶剂得到提取物2;剩余残渣,用10倍正己烷热回流提取,然后回收正己烷得到提取物3;合并提取物1、2、3得到裸花紫珠总提取物干燥得98.8g,裸花紫珠提取得率为 9.88%,测得总黄酮含量为 53.4mg/g,木犀草素含量为0.56mg/g,总鞣质含量 16.57 mg/g。
实施例四
取 10 月采收的新鲜裸花紫根皮1kg,经粉碎得到裸花紫珠浆液加入10倍95%乙醇提取回收溶剂得到提取物1;剩余残渣,加入10倍量氯仿提取回收溶剂得到提取物2;剩余残渣,用10倍正己烷热回流提取,然后回收正己烷得到提取物3;合并提取物1、2、3得到裸花紫珠总提取物77.4g,裸花紫珠提取得率为 7.74%,测得总黄酮含量为 49.2mg/g,木犀草素含量为0.43mg/g,总鞣质含量 14.25 mg/g。
实施例五
将本发明裸花紫珠提取物100g( 实施例三方法制得),取混合脂肪酸甘油酯98g,于45℃以下溶化,加入裸花紫珠提取物粉末,混合均匀,浇模,冷却,制成100 粒。***给药,一次1 粒,一日2 次。
实施例六
将本发明裸花紫珠提取物100g( 实施例四方法制得),取混合脂肪酸甘油酯98g,于45℃以下溶化,加入裸花紫珠提取物粉末,混合均匀,浇模,冷却,制成100 粒。***给药,一次1 粒,一日2 次。
临床试验
选取2016年1月到2017年1月1年间的具有典型***的患者120例,其中急性***60例;慢性***60例;年龄跨度在18-70,岁平均42岁,各60例分为3组每组20例分别用用实施例5、6及妇宁栓的药物治疗,一周为一个疗程,4个疗程结束后统计结果,结果以病情完全控制为人数显示。
病例选择标准,凡具有以下症状及检查结果的皆为可选病例;
一.急性***
1、妇科检查 可见宫颈充血、红肿,伴颈管黏膜水肿和宫颈黏膜外翻。宫颈触痛明显。宫颈管有脓性分泌物。
2、白细胞检测 检查宫颈管分泌物或***分泌物中的白细胞,急性***患者宫颈管脓性分泌物中性粒细胞计数大于30个/高倍视野,***分泌物白细胞计数大于10个/高倍视野。
3、病原体检测 做宫颈分泌物涂片或细菌培养,寻找致病菌。怀疑衣原体感染时可做酶联免疫吸附试验检测沙眼衣原体抗原。
二.慢性***
1、妇科检查:可发现子宫颈呈糜烂样改变,触之易出血。或有黄色分泌物覆盖子宫颈口或从子宫颈口流出,可有宫颈触痛。也可表现为子***、宫颈腺体囊肿或子宫颈肥大。
2、***镜检查:***久治不愈、有接触性出血、巴氏涂片二级或以上时,可行***镜检查,以便及早发现可能存在的癌前病变(如宫颈上皮内瘤样变)或早期***。
3、病原体检测:宫颈分泌物涂片或细菌培养可发现致病菌。宫颈细胞涂片亦可检查出***、滴虫、真菌。必要时需行衣原体、支原体、人***瘤病毒的检查。
4、宫颈刮片和宫颈活检:慢性***应常规做宫颈刮片细胞学检查,与***前病变、***、宫颈结核等疾病相鉴别。取***溃疡较明显处或病变较深处的组织进行病理学检查,为最准确的检查方法。
治疗方法
治疗组1:使用本发明实施例5 所述的裸花紫珠***栓进行治疗,一次1 粒,一日2 次,7天为一疗程。
治疗组2:使用本发明实施例6所述的裸花紫珠***膨胀栓进行治疗,一次1 粒,一日2 次,7天为一疗程。
对照组:使用妇宁栓进行治疗,,一次1 粒,一日2 次,7天为一疗程。
疗效判定标准
痊愈:症状消失,妇科检查和实验室检查正常;
显效:症状明显减轻,妇科检查和实验室检查明显好转;
有效:症状有所减轻,妇科检查和实验室检查好转;
无效:治疗前后无变化。
治疗结果
两组对不同***的治疗效果比较见表2 ;
结论
通过实验发现,两组疗效比较治疗组优于对照组,但是不同部位的制成的栓剂针对不同的病例疗效有差异;叶中裸花紫珠总提取的得率高但是只是治疗急性***更好,对于慢性***治疗效果反而不如根皮的提取物,实验显示体外抗菌活性并不与治疗效果一致,尤其是在慢性***治疗中说明病因除了感染中还有别的复杂原因,并不单一;在验证其疗效过程中,未发现毒副作用,安全可靠,疗效显著。
中药不同类型***治疗
选取2017年1月到2018年1月1年间的具有典型***的患者120例,其中湿热下注型60例;脾肾亏虚型60例;年龄跨度在18-72,岁平均45岁,各60例分为3组每组20例分别用实施例5、6及妇宁栓治疗,一周为一个疗程,4个疗程结束后统计结果,结果以病情完全控制为人数显示。
病例选择标准,凡具有以下症状及检查结果的皆为可选病例;
(1)湿热下注表现:带下量多,色黄白或为脓性,或带血丝。***痛或***后***出血。腰酸坠胀,腹胀下坠,或有小便频数疼痛、阴痒,口苦咽干。舌红苔黄腻,脉弦滑。
(2)脾肾亏虚表现:带下量多清稀,绵绵不断,食少神疲,腰膝酸软,面色无华,或大便稀溏。舌淡苔白或腻,脉濡缓。
治疗方法
治疗组1:
使用本发明实施例5 所述的裸花紫珠***栓进行治疗,一次1 粒,一日2 次,7天为一疗程。
治疗组2:
使用本发明实施例6所述的裸花紫珠***膨胀栓进行治疗,一次1 粒,一日2 次,7天为一疗程。
对照组:使用妇宁栓进行治疗,一次1 粒,一日2 次,7天为一疗程。
疗效判定标准
1、痊愈:中医证候减少≥95%;
2、显效:95%>中医证候减少≥70%;
3、有效:70%>中医证候减少≥30%;
4、无效:中医证候减少<30%。
治疗结果
两组对不同***的治疗效果比较见表2 ;
结论
疗效有差异;叶中裸花紫珠总提取的得率高湿热下注型***更好,对于脾肾亏虚型反而不如根皮的提取物,实验显示体外抗菌活性并不与治疗效果一致,尤其是在脾肾亏虚型***治疗中说明病因除了感染还有别的复杂原因通过实验发现,两组疗效比较治疗组优于对照组,但是不同部位的制成的栓剂针对不同的病,并不单一;并且通过验证发现裸花紫珠总提取取物针对按照西医的治疗标准筛选的病人疗效优于按照中医标准筛选的病人,从而说明了中医治疗更讲究对因治疗,治疗效果更彻底,更有利于病人的整体康复,在验证其疗效过程中,未发现毒副作用,安全可靠,疗效显著。
典型病例:
病例一
赵××,女,32 岁,教师。患者,带下量多,色黄白,外阴无明显症状,无腹痛,月经正常,舌淡红,苔薄白,脉弦细。妇科检查;外阴正常,***分泌物多,色黄白,宫颈充血、红肿,伴颈管黏膜水肿和宫颈黏膜外翻,子宫颈中度糜烂,诊为子***。
给予裸花紫珠栓,1天2次,一周后,检查***面已基本修复,三周后痊愈,随访半年无复发。
病例二:
李××,女,35岁,工人。患者,带下量较多,色黄,偶有腹坠痛,腰酸。妇科检查:外阴正常,***分泌物多,色黄味腥臭,子宫颈重度糜烂,宫体后位,大小活动正常,双侧附件正常。诊为子***,给予裸花紫珠栓,1天2次,三周后,检查***面已基本修复,二月后痊愈,3 个月后复查,宫颈已光滑,随访半年无复发。
郭××,女,55岁,无业。患者,带下清稀不臭,患带下5年之久,时多时少,双侧性腹痛、腹胀、***。子宫颈呈糜烂样改变,触之易出血,诊为子***。
给予裸花紫珠栓,1天2次,一周后,诸证好转,仅有少量白带。三周后,检查***面已基本修复,一个半月后痊愈,随访半年无复发。
Claims (6)
1.一种裸花紫珠提取物,其特征在于其原料采用新鲜状态的裸花紫珠。
2.根据权利要求1所述的一种裸花紫珠提取物:其特征在于所述的新鲜状态裸花紫珠原料为新鲜茎叶,根皮。
3.根据权利要求1所述的一种裸花紫珠提取物其制备方法为:新鲜原料经提取,浓缩得到裸花紫珠提取物。
4.根据权利要求2所述的一种裸花紫珠提取物其制备方法:其特征在于:新鲜状态的裸花紫珠原料, 经压榨得到压榨液及压榨渣, 压榨液滤过,滤液浓缩, 干燥得裸花紫珠提取物。
5.根据权利要求2所述的一种裸花紫珠提取物其制备方法:其特征在于:取新鲜状态的裸花紫珠原料, 经粉碎得到裸花紫珠浆液加入10倍95%乙醇提取回收溶剂得到提取物1;
剩余残渣,加入10倍量氯仿提取回收溶剂得到提取物2;
剩余残渣,加入10倍正己烷热回流提取,然后回收正己烷得到提取物3;
合并提取物1、2、3得到裸花紫珠总提取物。
6.根据权利要求1所述的一种裸花紫珠提取物:其特征在其不同部位的提取物在治疗不同类型***药物中的应用。
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