CN108348513A - 用于治疗或预防癌症的ribociclib与达拉菲尼的组合 - Google Patents

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Abstract

本公开涉及药物组合，包括周期素依赖性激酶4/6(CDK4/6)抑制剂化合物、(b)B‑Raf抑制剂化合物、和可任选的(c)α‑同种型特异性磷脂酰肌醇3‑激酶(PI3K)抑制剂化合物，用于治疗或预防癌症，以及相关药物组合物、应用和治疗或预防癌症的方法。

Description

用于治疗或预防癌症的RIBOCICLIB与达拉菲尼的组合
技术领域
本公开涉及药物组合，包括(a)细胞周期蛋白依赖性激酶4/6(CDK4/6)抑制剂化合物、(b)B-Raf抑制剂化合物，以及可任选的(c)α-同种型特异性磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)抑制剂化合物，用于治疗或预防癌症。本公开还提供相关药物组合物、应用和治疗或预防癌症的方法。
发明背景
肿瘤发展与细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)和其调节因子的遗传变异及失调紧密相关，表明CDK抑制剂可能是有用的抗癌疗法。事实上，早期结果表明转化细胞与正常细胞的差异在于其对例如细胞周期蛋白D/CDK4/6的需求，且可能开发出新型抗肿瘤药，其没有用常规细胞毒性和细胞抑制药物时所观察到一般宿主毒性。
CDK的功能是磷酸化某些蛋白并从而使其活化或失活，包括例如视网膜母细胞瘤蛋白、核纤层蛋白、组蛋白H1和有丝***纺锤体组分。CDK介导的催化步骤涉及从ATP到大分子酶底物的磷酸转移反应。已发现数组化合物(综述于例如Fischer,P.M.Curr.Opin.DrugDiscovery Dev.2001,4,623-634)通过CDK特异性ATP拮抗作用而具有抗增殖性质。
在分子水平，调节CDK/细胞周期蛋白复合体活性需要一系列刺激性和抑制性的磷酸化或脱磷酸事件。CDK磷酸化通过一组CDK活化激酶(CAK)和/或如wee1、Myt1和Mik1的激酶进行。脱磷酸通过磷酸酶如Cdc25(a&c)、PP2A或KAP进行。
CDK/细胞周期蛋白复合体活性可进一步由2个家族的内源细胞蛋白质类抑制剂调节：Kip/Cip家族或INK家族。INK蛋白特异性结合CDK4和CDK6。p16ink4(也称为MTS1)是在大量原发性癌中突变或缺失的潜在肿瘤抑制基因。Kip/Cip家族包含蛋白如p21Cip1,Waf1、p27Kip1和p57kip2，其中p21由p53诱导且能使CDK2/细胞周期蛋白(E/A)复合体失活。在乳腺、结肠和***癌中观察到非典型的低p27表达水平。相反，实体瘤中的细胞周期蛋白E过表达显示与较差的患者预后相关。细胞周期蛋白D1过表达与食管、乳腺、鳞状和非小细胞肺癌相关。
CDK和其相关蛋白在增殖细胞中协调和驱动细胞周期的关键作用已如上所概括。也已描述CDK在其中发挥关键作用的一些生化通路。因此，可能非常需要开发治疗增殖性疾病如癌症的单一疗法，其使用广泛靶向CDK或靶向特异CDK的疗法。
已鉴定多种Ras GTPase和B-Raf激酶中的突变，其能引起MAPK通路的持续和组成型激活，最终导致细胞***和存活增加。由此，这些突变与广泛人类癌症的建立、发展和进展密切相关。Raf激酶特别是B-Raf在信号转导中的生物学作用描述于Davies,H.等,Nature(2002)9:1-6；Garnett,M.J.&Marais,R.,Cancer Cell(2004)6:313-319；Zebisch,A.&Troppmair,J.,Cell.Mol.Life Sci.(2006)63:1314-1330；Midgley,R.S.&Kerr,D.J.,Crit.Rev.Onc/Hematol.(2002)44:109-120；Smith,R.A.等,Curr.Top.Med.Chem.(2006)6:1071-1089；和Downward,J.,Nat.Rev.Cancer(2003)3:11-22。
在大比例的人黑素瘤(Davies(2002)同上)和甲状腺癌(Cohen等J.Nat.CancerInst.(2003)95(8)625-627和Kimura等Cancer Res.(2003)63(7)1454-1457)中已发现激活MAPK通路信号转导的B-Raf激酶天然产生的突变，以及在下列癌症中的频率较低但仍显著：
Barret腺癌(Garnett等,Cancer Cell(2004)6 313-319和Sommerer等Oncogene(2004)23(2)554-558)、胆道癌(Zebisch等,Cell.Mol.Life Sci.(2006)631314-1330)、乳腺癌(Davies(2002)同上)、***(Moreno-Bueno等Clin.Cancer Res.(2006)12(12)3865-3866)、胆管癌(Tannapfel等Gut(2003)52(5)706-712)、包括原发性CNS肿瘤(如成胶质细胞瘤、星形细胞瘤和室管膜瘤(Knobbe等Acta Neuropathol.(Berl.)(2004)108(6)467-470,Davies(2002)同上,和Garnett等,Cancer Cell(2004)同上))以及继发性CNS肿瘤(即源自中枢神经***外的肿瘤转移到中枢神经***)的中枢神经***肿瘤、包括大肠结肠癌在内的结直肠癌(Yuen等Cancer Res.(2002)62(22)6451-6455,Davies(2002)同上和Zebisch等,Cell.Mol.Life Sci.(2006))、胃癌(Lee等Oncogene(2003)22(44)6942-6945)、包括头颈部鳞状细胞癌在内的头颈癌(Cohen等J.Nat.Cancer Inst.(2003)95(8)625-627和Weber等Oncogene(2003)22(30)4757-4759)、包括白血病在内的血液癌症(Garnett等,CancerCell(2004)同上),尤其是急性淋巴细胞白血病(Garnett等,Cancer Cell(2004)同上和Gustafsson等Leukemia(2005)19(2)310-312)、急性骨髓性白血病(AML)(Lee等Leukemia(2004)18(1)170-172和Christiansen等Leukemia(2005)19(12)2232-2240)、骨髓增生异常综合征(Christiansen等Leukemia(2005)同上)和慢性髓细胞性白血病(Mizuchi等Biochem.Biophys.Res.Commun.(2005)326(3)645-651)；霍奇金淋巴瘤(Figl等Arch.Dermatol.(2007)143(4)495-499)、非霍奇金淋巴瘤(Lee等Br.J.Cancer(2003)89(10)1958-1960)、巨核细胞白血病(Eychene等Oncogene(1995)10(6)1159-1165)和多发性骨髓瘤(Ng等Br.J.Haematol.(2003)123(4)637-645)、肝细胞癌(Garnett等,Cancer Cell(2004)、包括小细胞肺癌(Pardo等EMBO J.(2006)25(13)3078-3088)和非小细胞肺癌(Davies(2002)同上)在内的肺癌(Brose等Cancer Res.(2002)62(23)6997-7000,Cohen等J.Nat.Cancer Inst.(2003)同上和Davies(2002)同上)、卵巢癌(Russell&McCluggageJ.Pathol.(2004)203(2)617-619和Davies(2002)同上)、子宫内膜癌(Garnett等,CancerCell(2004)同上和Moreno-Bueno等Clin.Cancer Res.(2006)同上)、胰腺癌(Ishimura等Cancer Lett.(2003)199(2)169-173)、垂体腺瘤(De Martino等J.Endocrinol.Invest.(2007)30(1)RC1-3)、***癌(Cho等Int.J.Cancer(2006)119(8)1858-1862)、肾癌(Nagy等Int.J.Cancer(2003)106(6)980-981)、肉瘤(Davies(2002)同上)以及皮肤癌(Rodriguez-Viciana等Science(2006)311(5765)1287-1290和Davies(2002)同上)。c-Raf过表达与AML(Zebisch等,Cancer Res.(2006)66(7)3401-3408和Zebisch(Cell.Mol.LifeSci.(2006))和红白血病(Zebisch等,Cell.Mol.Life Sci.(2006))相关联。
磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)包括脂质激酶家族，其催化磷酸转移至肌醇脂质的D-3'位以生成磷脂酰肌醇-3-磷酸(PIP)、磷脂酰肌醇-3,4-二磷酸(PIP2)和磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸(PIP3)，其通过使含普列克底物蛋白同源区、FYVE、Phox和其它磷脂结合域的蛋白停靠到通常位于质膜上的多种信号转导复合体内从而担当信号级联的第二信使(Vanhaesebroeck等,Annu.Rev.Biochem 70:535(2001)；Katso等,Annu.Rev.CellDev.Biol.17:615(2001))。在2个1类PI3K中，1A类PI3K是由催化p110亚基(α,β,δ同种型)构成的异二聚体，该亚基组成型连接调节亚基，所述调节亚基可以是p85α、p55α、p50α、p85β或p55γ。1B类亚类有一个家族成员，即由催化p110γ亚基构成的异二聚体，该亚基与2个调节亚基p101或p84之一相连(Fruman等,Annu Rev.Biochem.67:481(1998)；Suire等,Curr.Biol.15:566(2005))。p85/55/50亚基的模块结构域包括Src同源(SH2)结构域，其使磷酸酪氨酸残基以特定顺序结合于活化的受体酪氨酸激酶和胞质酪氨酸激酶上，引起1A类PI3K的活化和定位。1B类PI3K通过G蛋白偶联受体直接活化，该受体结合肽与非肽配体的多样性库(Stephens等,Cell 89:105(1997)；Katso等,Annu.Rev.Cell Dev.Biol.17:615-675(2001))。因此，I类PI3K的所得磷脂产物连接具有下游细胞活性的上游受体，包括增殖、存活、趋化性、细胞运输、运动性、代谢、炎症和过敏反应、转录和翻译(Cantley等,Cell 64:281(1991)；Escobedo和Williams,Nature 335:85(1988)；Fantl等,Cell 69:413(1992))。
许多情况下，PIP2和PIP3招募Akt(病毒癌基因v-Akt的人同源物产物)至质膜，在该处其担当对生长和存活而言重要的许多胞内信号通路的节点(Fantl等,Cell 69:413-423(1992)；Bader等,Nature Rev.Cancer 5:921(2005)；Vivanco和Sawyer,NatureRev.Cancer 2:489(2002))。PI3K异常调节通常经Akt活化增加存活，是人类癌症的最普遍事件之一，并显示在多个水平出现。使磷酸肌醇在肌醇环3'位脱磷酸并因而拮抗PI3K活性的肿瘤抑制基因PTEN，在很多肿瘤中功能性缺失。其它肿瘤中，扩增p110α同种型PIK3CA和Akt的基因，并已在数个人类癌症中证明其基因产物的蛋白表达增加。
此外，已在人类癌症中描述了那些用于上调p85-p110复合体的p85α突变和p85α易位。最终，在多种人类癌症中以显著频率描述了激活下游信号通路的PIK3CA的体细胞错义突变(Kang等,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 102:802(2005)；Samuels等,Science 304:554(2004)；Samuels等,Cancer Cell 7:561-573(2005))。这些观察显示磷脂酰肌醇3-激酶失调以及该信号通路的上游和下游组分是与人类癌症和增殖性疾病相关的最常见失调之一(Parsons等,Nature 436:792(2005)；Hennessey等,Nature Rev.Drug Disc.4:988-1004(2005))。
已发现下面给出的式(III)的2-甲酰胺环氨基脲衍生物具有有利的药理性质，并抑制例如PI3K(磷脂酰肌醇3-激酶)。具体地，相对于β和/或δ和/或γ亚型，这些化合物优选显示对PI3Kα的选择性提高。由此，式(III)化合物适合例如用于治疗依赖于PI3激酶的疾病(尤其是PI3Kα，如显示PI3Kα过表达或PI3Kα扩增或PIK3CA体细胞突变的那些)，特别是增殖性疾病如肿瘤疾病和白血病。
此外，这些化合物优选显示提高代谢稳定性并因而降低清除率，产生改善的药代动力学分布。
通过Raf家族激酶在这些癌症中发挥的作用以及用一定范围临床前和治疗性药剂(包括一种选择性靶向抑制B-RAF激酶活性的药剂)的探索性研究(King A.J.,等,(2006)Cancer Res.66:11100-11105)，通常认为一种或多种Raf家族激酶的抑制剂可用于治疗与Raf激酶相关的癌症。
许多癌症尤其是携带B-RAF突变、B-RAF V600E突变、PIK3CA突变和/或PIK3CA过表达的那些癌症，适合用例如B-RAF抑制剂治疗。然而，某些情况下，所述癌症对选定疗法获得耐药性并最终变得难于治疗。
就癌症患者而言，尽管有许多治疗选择，但仍需要有效和安全的治疗剂以及需要其优先用于联合疗法。具体地，需要有效的治疗癌症方法，特别是对当前疗法而言有耐药性和/或难治的那些癌症。
发明概述
在第一方面，本文提供含以下的药物组合：
(a)具有式(I)结构的第一化合物：
或其药学上可接受盐或溶剂合物，和
(b)具有式(II)结构的第二化合物：
或其药学上可接受盐或溶剂合物。
在一个实施方式中，所述具有式(I)结构的化合物或其药学上可接受盐或溶剂合物，以及具有式(II)结构的化合物或其药学上可接受盐或溶剂合物在同一制剂中。
在一个实施方式中，所述具有式(I)结构的化合物或其药学上可接受盐或溶剂合物，以及具有式(II)结构的化合物或其药学上可接受盐或溶剂合物在分开的制剂中。
在一个实施方式中，所述第一方面的组合用于同时或依序施用。
在第一方面的一个实施方式中，所述药物组合还包括具有式(III)结构的第三化合物：
或其药学上可接受盐或溶剂合物。
在一个实施方式中，所述具有式(I)结构的化合物或其药学上可接受盐或溶剂合物、具有式(II)结构的化合物或其药学上可接受盐或溶剂合物以及具有式(III)结构的化合物或其药学上可接受盐或溶剂合物在同一制剂中。
在一个实施方式中，所述具有式(I)结构的化合物或其药学上可接受盐或溶剂合物、具有式(II)结构的化合物或其药学上可接受盐或溶剂合物以及具有式(III)结构的化合物或其药学上可接受盐或溶剂合物在2种或更多种分开的制剂中。
在一个实施方式中，所述具有式(I)结构的化合物或其药学上可接受盐或溶剂合物、具有式(II)结构的化合物或其药学上可接受盐或溶剂合物以及具有式(III)结构的化合物或其药学上可接受盐或溶剂合物在2种或3种分开的制剂中。
在一个实施方式中，所述药物组合用于同时或依序施用，该组合包括具有式(I)结构的化合物或其药学上可接受盐或溶剂合物、具有式(II)结构的化合物或其药学上可接受盐或溶剂合物以及具有式(III)结构的化合物或其药学上可接受盐或溶剂合物。
在上述药物组合的一个特定实施方式中，所述第一化合物是具有式(I)结构化合物的琥珀酸盐。
在上述药物组合的一个特定实施方式中，所述第二化合物是具有式(II)结构化合物的甲磺酸盐。
在第二方面，本文提供在需要的对象中治疗或预防癌症的方法，包括向对象施用治疗有效量的上述实施方式中任一项所述药物组合。
在一个实施方式中，所述癌症选自下组：黑素瘤、肺癌(包括非小细胞肺癌(NSCLC))、结直肠癌(CRC)、乳腺癌、肾癌、肾细胞癌(RCC)、肝癌、急性骨髓性白血病(AML)、骨髓增生异常综合征(MDS)、甲状腺癌、胰腺癌、多发性神经纤维瘤和肝细胞癌。
在一个特定实施方式中，所述癌症是结直肠癌。
在第二方面的某些特定实施方式中，所述癌症表征为B-Raf突变、B-RafV600E突变、PIK3CA突变和PIK3CA过表达中的一个或多个。
在第三方面，本文提供上述药物组合，用于治疗或预防癌症。
在第四方面，本文提供上述药物组合，用于制造治疗或预防癌症的药物。
在第三和第四方面的某些实施方式中，所述癌症选自下组：黑素瘤、肺癌(包括非小细胞肺癌(NSCLC))、结直肠癌(CRC)、乳腺癌、肾癌、肾细胞癌(RCC)、肝癌、急性骨髓性白血病(AML)、骨髓增生异常综合征(MDS)、甲状腺癌、胰腺癌、多发性神经纤维瘤和肝细胞癌。
在一个特定实施方式中，所述癌症是结直肠癌。
在第三和第四方面的某些特定实施方式中，所述癌症表征为B-Raf突变、B-RafV600E突变、PIK3CA突变和PIK3CA过表达中的一个或多个。
在第五方面，本文提供上述药物组合在制造治疗或预防癌症药物中的应用。
在第六方面，本文提供上述药物组合在治疗或预防癌症中的应用。
在第五和第六方面的特定实施方式中，所述癌症选自下组：黑素瘤、肺癌(包括非小细胞肺癌(NSCLC))、结直肠癌(CRC)、乳腺癌、肾癌、肾细胞癌(RCC)、肝癌、急性骨髓性白血病(AML)、骨髓增生异常综合征(MDS)、甲状腺癌、胰腺癌、多发性神经纤维瘤和肝细胞癌。
在一个特定实施方式中，所述癌症是结直肠癌。
在第五和第六方面的某些特定实施方式中，所述癌症表征为B-Raf突变、B-RafV600E突变、PIK3CA突变和PIK3CA过表达中的一个或多个。
在第七方面，本文提供含以下的药物组合物：
(a)具有式(I)结构的第一化合物：
或其药学上可接受盐或溶剂合物，和
(b)具有式(II)结构的第二化合物：
或其药学上可接受盐或溶剂合物。
在第七方面的一个实施方式中，所述药物组合物还包括具有式(III)结构的第三化合物：
或其药学上可接受盐或溶剂合物。
在一个实施方式中，所述药物组合物包括一种或多种赋形剂。
附图简要说明
图1显示LEE011、达拉菲尼、BYL719和其组合在6个B-Raf突变结直肠癌细胞系中的剂量-反应曲线。x轴表示治疗稀释的log10；y轴表示治疗后相对于DMSO的细胞计数。强虚线表示治疗开始前的细胞数(‘基线’)。
图2显示LEE011、达拉菲尼、BYL719和其组合在6个B-Raf突变结直肠癌细胞系中以及24小时、48小时和72小时后的最大半胱天冬酶3/7诱导(不同灰度)。x轴表示治疗；y轴表示各治疗所见的最大半胱天冬酶3/7诱导(％细胞)。
图3显示LEE011、达拉菲尼和LEE011与达拉菲尼的组合在6个B-Raf突变结直肠癌细胞系中的剂量-反应曲线。x轴表示治疗稀释的log10；y轴表示治疗后相对于DMSO的细胞计数。强虚线表示治疗开始前的细胞数(‘基线’)。
图4显示LEE011、达拉菲尼和LEE011与达拉菲尼的组合在6个结直肠癌细胞系中以及24小时、48小时和72小时后的最大半胱天冬酶3/7诱导(不同灰度)。x轴表示治疗；y轴表示各治疗所见的最大半胱天冬酶3/7诱导(％细胞)。
发明详述
抑制剂化合物
CDK 4/6抑制剂7-环戊基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-羧酸二甲酰胺(也称为“LEE011”或“ribociclib”)在本文中指具有式(I)结构的化合物或化合物(I)：
化合物(I)以及其药学上可接受盐和溶剂合物描述于国际公开号WO 2010/020675(例如实施例74)，其全部内容通过引用纳入本文。
B-Raf抑制剂N-{3-[5-(2-氨基-4-嘧啶基)-2-(1,1-二甲基乙基)-1,3-噻唑-4-基]-2-氟苯基}-2,6-二氟苯磺酰胺(也称为“达拉菲尼”)在本文中指具有式(II)结构的化合物或化合物(II)：
化合物(II)以及其药学上可接受盐和溶剂合物描述于国际公开WO 2009/137391(例如实施例58a-58e)。此公开通过引用全文纳入本文。化合物(II)可根据实施例3的方法制备。
α-同种型特异性PI3K抑制剂化合物(S)-吡咯烷-1,2-二羧酸2-酰胺1-({4-甲基-5-[2-(2,2,2-三氟-1,1-二甲基-乙基)-吡啶-4-基]-噻唑-2-基}-酰胺)(也称为“BYL719”或“alpelisib”)在本文中指具有式(III)结构的化合物或化合物(III)：
化合物(III)以及其药学上可接受盐和溶剂合物描述于国际公开号WO 2010/029082(例如实施例15)。此公开通过引用全文纳入本文。
盐和溶剂合物
本文所述抑制剂化合物的盐能单独存在或与游离碱形式混合，且优选是药学上可接受盐。除非另有说明，本文所用的“药学上可接受盐”包括本发明化合物中可存在的酸性和碱性基团的盐。例如，这类盐可作为酸加成盐形成，优选用有机或无机酸与碱性氮原子反应后形成。合适的无机酸是例如氢卤酸如盐酸，硫酸或磷酸。合适的有机酸是例如羧酸或磺酸，如富马酸或甲磺酸。出于分离或纯化目的，还能使用药学上不可接受盐，例如苦味酸盐或高氯酸盐。
在本文所述药物组合的一个优选实施方式中，所述具有式(I)结构的化合物采用琥珀酸盐形式。
在本文所述药物组合的一个优选实施方式中，所述具有式(II)结构的化合物采用甲磺酸盐形式。
在本文所述药物组合的一个优选实施方式中，所述具有式(III)结构的化合物采用其游离碱形式。
出于治疗目的仅采用药学上可接受盐、溶剂合物或游离化合物(适用时采用药物制剂形式)，因而优选这些。鉴于游离形式的化合物与采用其盐形式(包括能用做中间体的那些盐，例如在纯化或鉴定新化合物期间)的化合物之间的密切关系，在适当且可取时，上下文任何提及游离化合物也应理解为指对应盐。本文考虑的盐优选是药学上可接受盐；本领域已知合适的反离子形成的药学上可接受盐。
治疗方法
本发明涉及治疗或预防癌症。
在一个实施方式中，所述癌症选自下组：黑素瘤、肺癌(包括非小细胞肺癌(NSCLC))、结直肠癌(CRC)、乳腺癌、肾癌、肾细胞癌(RCC)、肝癌、急性骨髓性白血病(AML)、骨髓增生异常综合征(MDS)、甲状腺癌、胰腺癌、多发性神经纤维瘤和肝细胞癌。
在一个特定实施方式中，所述癌症是结直肠癌。
在第二方面的某些特定实施方式中，所述癌症表征为B-Raf突变、B-RafV600E突变、PIK3CA突变和PIK3CA过表达中的一个或多个。
在第三方面，本文提供上述药物组合，用于治疗或预防癌症。
在第四方面，本文提供上述药物组合，用于制造治疗或预防癌症的药物。
在第三和第四方面的某些实施方式中，所述癌症选自下组：黑素瘤、肺癌(包括非小细胞肺癌(NSCLC))、结直肠癌(CRC)、乳腺癌、肾癌、肾细胞癌(RCC)、肝癌、急性骨髓性白血病(AML)、骨髓增生异常综合征(MDS)、甲状腺癌、胰腺癌、多发性神经纤维瘤和肝细胞癌。
在一个特定实施方式中，所述癌症是结直肠癌。
在第三和第四方面的某些特定实施方式中，所述癌症表征为B-Raf突变、B-RafV600E突变、PIK3CA突变和PIK3CA过表达中的一个或多个。
在第五方面，本文提供上述药物组合在制造治疗或预防癌症药物中的应用。
在第六方面，本文提供上述药物组合在治疗或预防癌症中的应用。
在第五和第六方面的特定实施方式中，所述癌症选自下组：黑素瘤、肺癌(包括非小细胞肺癌(NSCLC))、结直肠癌(CRC)、乳腺癌、肾癌、肾细胞癌(RCC)、肝癌、急性骨髓性白血病(AML)、骨髓增生异常综合征(MDS)、甲状腺癌、胰腺癌、多发性神经纤维瘤和肝细胞癌。
在一个特定实施方式中，所述癌症是结直肠癌。
在第五和第六方面的某些特定实施方式中，所述癌症表征为B-Raf突变、B-RafV600E突变、PIK3CA突变和PIK3CA过表达中的一个或多个。
药物组合和组合物
所述组合和组合物能施用于含细胞或组织的***以及人类对象(如患者)或动物对象。
本发明的组合和组合物能以多种剂型和规格采用药物有效量或临床有效量施用。
用于分开施用2种组合成分或以固定组合(如含该组合的单个盖仑组合物)施用的药物组合物，可以本领域已知的任何方式制备，且是适合肠部(如口服或直肠)和胃肠外施用于包括人在内的哺乳动物(温血动物)的那些。
本文所述药物组合物可包含约0.1％-约99.9％、优选约1％-约60％的治疗剂。就肠部或胃肠外施用而言，用于联合疗法的合适药物组合物是例如采用单位剂型的那些，如包糖衣片剂、片剂、胶囊或栓剂或安瓿。除非另有说明，这些以本身已知的方式制备，例如通过本领域技术人员显而易见的多种常规混合、粉碎、直接压片、制粒、包糖衣、溶解、冻干工艺或加工技术。应理解各剂型单个剂量所含组合伴侣的单位内容物本身不需构成有效量，因为必要的有效量可通过施用多个剂量单位来实现。
含药剂组合或药剂组合中单独药剂的单位剂型可采用包封于胶囊如明胶胶囊内的微片剂形式。为此，能使用药物制剂所用的明胶胶囊，如获自辉瑞(Pfizer)的称为CAPSUGEL的明胶硬胶囊。
本发明的单位剂型可任选还包括用于药物的其他常规载体或赋形剂。这类载体的示例包括但不限于：崩解剂、粘合剂、润滑剂、助流剂、稳定剂、填充剂、稀释剂、着色剂、调味剂和防腐剂。本领域普通技术人员可通过常规实验根据剂型的特定所需性质选择一种或多种上述载体，而无需任何过度负担。所用各载体的量在本领域常规范围内。通过引用纳入本文的下列参考文献公开了用于配制口服剂型的技术和赋形剂。参见《药物赋形剂手册》(TheHandbook of Pharmaceutical Excipients),第4版,Rowe等编,美国医药协会(AmericanPharmaceuticals Association)(2003)；和《雷明顿：药学科学与实践》(Remington:theScience and Practice of Pharmacy),第20版,Gennaro编,利平科特·威廉斯·威尔金斯出版公司(Lippincott Williams&Wilkins)(2003)。
本文所用的术语“药学上可接受赋形剂”或“药学上可接受载体”包括，如本领域技术人员已知的任何及所有溶剂、分散介质、包衣剂、表面活性剂、抗氧化剂、防腐剂(例如抗菌剂、抗真菌剂)、等渗剂、吸收延迟剂、盐、防腐剂、药物、药物稳定剂、粘合剂、赋形剂、崩解剂、润滑剂、甜味剂、调味剂、染料等，和其组合(参见例如《雷明顿药物科学》(Remington'sPharmaceutical Sciences),第18版,麦克出版公司(Mack Printing Company),1990,第1289-1329页)。除非任何常规载体与活性成分不相容，否则就考虑其在治疗或药物组合物中的应用。
通过在造粒前或造粒期间将一或多种常规载体纳入初始混合物，或者通过在口服剂型中将一或多种常规载体与含药剂组合或药剂组合中单独药剂的颗粒组合，这些可任选的其他常规载体可纳入口服剂型。在后一个实施方式中，所述组合的混合物可进一步混和，如经V型混合机，随后压片或模塑成片剂(例如单层片剂)、由胶囊包封或填入小袋。
药学上可接受崩解剂的示例包括但不限于：淀粉；粘土；纤维素；藻酸盐；树胶；交联聚合物如交联聚乙烯吡咯烷酮或交聚维酮，例如来自ISP(International SpecialtyProducts)(新泽西州韦恩)的POLYPLASDONE XL；交联羧甲基纤维素钠或可斯卡麦勒斯钠，例如来自FMC的AC-DI-SOL；和交联羧甲基纤维素钙；大豆多糖；和瓜尔豆胶。崩解剂可以约0％-约10％重量的组合物含量存在。在一个实施方式中，所述崩解剂以约0.1％-约5％重量的组合物含量存在。
药学上可接受粘合剂的示例包括但不限于：淀粉；纤维素及其衍生物，例如微晶纤维素，如来自FMC(宾夕法尼亚州费城)的AVICEL PH,来自陶氏化学公司(Dow ChemicalCorp.)(密歇根州米德兰)的羟丙基纤维素羟乙基纤维素和羟丙甲纤维素METHOCEL；蔗糖；右旋糖；玉米糖浆；多糖；和明胶。粘合剂可以约0％-约50％(如约2-20％)组合物重量的含量存在。
药学上可接受润滑剂和药学上可接受助流剂的示例包括但不限于：硅胶、三硅酸镁、淀粉、滑石、磷酸三钙、硬脂酸镁、硬脂酸铝、硬脂酸钙、碳酸镁、氧化镁、聚乙二醇、粉状纤维素和微晶纤维素。润滑剂可以约0％-约10％重量的组合物含量存在。在一个实施方式中，所述润滑剂可以约0.1％-约1.5％重量的组合物含量存在。助流剂可以约0.1％-约10％重量的组合物含量存在。
药学上可接受填充剂和药学上可接受稀释剂的示例包括但不限于：糖粉、可压缩糖、葡萄糖结合剂、糊精、右旋糖、乳糖、甘露醇、微晶纤维素、粉状纤维素、山梨醇、蔗糖和滑石。例如，填充剂和/或稀释剂可以约0％-约80％组合物重量的含量存在。
用于治疗癌症的最优剂量的各组合伴侣能用已知方法就各个体凭经验确定，并取决于多种因素，包括但不限于：疾病进展程度；个体的年龄、体重、总体健康、性别和饮食；施用时间和途径；和个体正在服用的其它药物。最优剂量可用本领域已熟知的常规测试和程序确立。
可与载体材料联用以产生单一剂型的各组合伴侣量会根据所治疗个体和特定施用模式而变化。在一些实施方式中，含本文所述药剂组合的单位剂型包含一定量的组合各药剂，其通常在药剂单独施用时施用。
本发明组合所用各组合伴侣的有效剂量可根据所用特定化合物或药物组合物、施用模式、所治疗病症和所治疗病症严重度而变化。因此，本文所述组合的剂量方案根据多种因素选择，包括施用途径以及患者的肾和肝功能。
各组合伴侣的有效剂量可能需要相较组合中的一种化合物，更频繁施用另一种化合物。因此，为能适当给药，包装的药物产品能包括含化合物组合的一种或多种剂型，和含化合物组合之一但不含组合中其它化合物的一种或多种剂型。
一般地，化合物(I)(“LEE011”)以在人中每天10mg-2000mg的剂量范围施用。在一个实施方式中，LEE011以600mg QD施用。在另一个实施方式中，LEE011以300mg QD施用。在另一个实施方式中，LEE011以900mg QD施用。
一般地，化合物(II)(达拉菲尼)(基于无盐/未溶剂化的化合物重量)以在人中每天20mg-600mg剂量范围施用。在一个实施方式中，达拉菲尼以100mg-300mg QD施用。在另一个实施方式中，达拉菲尼以150mg QD施用。
化合物(III)(“BYL719”)可以约1-6.5mg/kg有效日剂量在成年人或儿童中口服施用。化合物(III)可以约70mg-455mg日剂量口服施用于70kg体重的成年人，如约200-400mg、或约240mg-400mg、或约300mg-400mg、或约350mg-400mg，采用单一剂量或多至每日4次的分开的剂量。优选地，化合物(III)以约350mg-约400mg日剂量施用于70kg体重的成年人。
产生功效而无毒性的本发明组合(即化合物(I)、化合物(II)和可任选的化合物(III))的最优比例、个体和组合剂量，以及组合伴侣浓度基于治疗剂对靶位点可及性的动力学，并用本领域技术人员已知的方法测定。
剂量频率可根据所用化合物和待治疗或待预防的特定病症而变化。一般地，优选足以提供有效治疗的最小剂量。一般可使用本领域普通技术人员熟悉的适合所治疗或预防病症的试验来监测患者的疗效。
在某些方面，本文所述药物组合用于治疗或预防癌症，或用于制备治疗或预防癌症的药物。在一个特定实施方式中，本文所述药物组合用于治疗癌症，或用于制备治疗癌症的药物。
在某些方面，提供治疗或预防癌症(如治疗癌症)的方法，包括向需要的患者施用药物有效量的本文所述药物组合。癌的性质是多因子的。某些情况下，作用机制不同的药物可组合。然而，仅考虑具有不同作用模式的任何治疗剂组合并不必然产生具有利效果的组合。
施用本文所述药物组合可能不仅产生有益效果如协同治疗效果，例如涉及缓解、延迟症状发展或抑制症状；而且也产生更意外的有益效果，例如相较仅应用本发明组合所用药物治疗剂之一的单一疗法，副作用更少、反应更持久、生活质量改善或发病率降低。
另一益处是能使用更低剂量的本文所述药物组合治疗剂，例如使得剂量不仅通常更小，而且可较不频繁施用，或能用于减少单独用组合伴侣之一时观察到的副作用发生率。这符合待治疗患者的期望和需求。
通过已建立的测试模型显示出本文所述药物组合产生本文之前所述的有益效果。本领域技术人员完全能选择相关测试模型以证明这类有益效果。例如，本发明组合的药理活性可在临床研究或动物模型中证明。
在确定一种或多种组分之间的协同相互作用时，效果的最优范围和就效果而言的各组分绝对剂量范围可如下明确测量：以不同的w/w比例范围和剂量向需要治疗的患者施用组分。对于人而言，进行患者临床研究的复杂性和成本可使得应用这种测试形式作为协同作用初级模型不切实际。然而，在某些实验中(参见例如实施例1和2)观察到协同作用能预测在现有其它物种和动物模型内的效果以进一步测量协同效应。这些研究的结果也能用于预测有效剂量比范围以及绝对剂量和血浆浓度。
在一个实施方式中，本文提供的组合和/或组合物展示出协同效应。
在一个实施方式中，本文提供施用于人的协同组合，所述组合包括本文所述抑制剂，其中各抑制剂的剂量范围对应于合适肿瘤模型或临床研究中表明的协同范围。
用于本发明组合的组合伴侣以市售单一药物形式施用时，其剂量和施用模式可与各市售药物包装说明书提供的信息一致，除非本文另有提及。
定义
本文所用的某些术语如下所述。化合物用标准命名法描述。除非另有定义，本文使用的所有技术术语和科学术语具有与本公开所属领域技术人员通常理解相同的意义。
本文定义的术语“药物组合物”指含至少一种治疗剂的混合物或溶液，所述治疗剂待施用于对象如哺乳动物或人，以预防或治疗影响哺乳动物或人的特定疾病或病症。
本文定义的术语“药学上可接受”指在合理医学判断范围内，适于接触对象如哺乳动物或人组织的那些化合物、材料、组合物和/或剂型，而没有过度毒性、刺激、过敏反应和其它问题并发症，并具有合理的效益/风险比。
本文所用的术语“治疗”或“处理”包括减缓、减轻或缓解对象中至少一种症状或者实现疾病发展延迟的治疗。例如，治疗可以是减少一种或多种疾病症状或者完全消除疾病，如癌症。在本发明意义内，术语“治疗”也指阻滞、延迟疾病发生(即疾病临床表征前的阶段)和/或降低疾病发展或恶化的风险。本文所用的术语“预防”、“防止”或“阻止”包括预防至少一种症状，该症状与所预防状态、疾病或紊乱相关或由其导致。
术语“药学有效量”或“治疗有效量”的治疗剂组合是相比用所述组合治疗疾病的基线临床可观察征兆和症状，足以提供可观察改善的量。
本文所用的术语“组合”、“治疗组合”或“药物组合”指采用一个剂量单位形式的固定组合或非固定组合，或联合施用的成套药盒；其中2种或更多治疗剂可同时独立地施用或在一定时间间隔内分开地施用，尤其是当这些时间间隔允许组合伴侣显示协作如协同效应。
术语“联合疗法”指施用2种或更多治疗剂以治疗本公开所述的治疗病症或疾病。这类施用涵盖以基本同时的方式共施用这些治疗剂，如在活性成分比例固定的单一制剂或各活性成分的分开制剂中(如胶囊和/或静脉内制剂)。另外，这类施用也涵盖在大致同时或不同时间以依序或分开方式使用各类治疗剂。无论活性成分是作为单一制剂还是分开制剂施用，所述治疗剂作为同一治疗进程的一部分施用于相同患者。任何情况下，治疗方案会提供治疗本文所述病症或疾病的有益效果。
本文所用的术语“协同效应”指2种治疗剂，如CDK抑制剂LEE011、B-Raf抑制剂达拉菲尼，和可任选的PI3K抑制剂BYL719作用以产生效果，例如减缓增殖性疾病尤其是癌症或其症状的症状进展，其大于单独施用各治疗剂效果的简单叠加。例如，协同效应能用合适方法计算，如Sigmoid-Emax方程(Holford,N.H.G.和Scheiner,L.B.,Clin.Pharmacokinet.6:429-453(1981))、Loewe相加性方程(Loewe,S.和Muischnek,H.,Arch.Exp.PatholPharmacol.114:313-326(1926))和中效方程(Chou,T.C.和Talalay,P.,Adv.EnzymeRegul.22:27-55(1984))。上面所提及的各方程能应用于实验数据以产生对应图线，从而协助评价药物组合效果。与上面所提及方程相关的对应图线分别是浓度-效应曲线、等效应图曲线和联合指数曲线。
本文所用的术语“对象”或“患者”包括动物，其能患有癌症或直接或间接涉及癌症的任何疾病，或者受其影响。对象示例包括哺乳动物，如人、狗、牛、马、猪、绵羊、山羊、猫、小鼠、兔、大鼠以及转基因非人动物。在一个优选实施方式中，所述对象是人，如患有、有风险患有、或潜在能患有癌症的人。
本文所用的术语“固定组合”、“固定剂量”和“单一制剂”指配制成以一定量递送2种或更多治疗剂给患者的单一载体或载剂或剂型，所述量对癌症治疗在治疗上共同有效。单一载剂设计成递送一定量的各药剂以及任何药学上可接受载体或赋形剂。在一些实施方式中，所述载剂是片剂、胶囊、药丸或贴片。在其它实施方式中，所述载剂是溶液或悬液。
术语“非固定组合”、“成套药盒”和“分开的制剂”指活性成分如LEE011和达拉菲尼作为单独实体同时、同步或无特定时间限制地依序施用于患者，其中这类施用在需要其的温血动物体内提供治疗有效水平的2种化合物。后者也应用于鸡尾酒疗法，如施用3种或更多活性成分。
本文所用的术语“单位剂量”指向所治疗患者同时一起施用在一个剂型中的2种或3种药剂。在一些实施方式中，所述单位剂量是单一制剂。在某些实施方式中，所述单位剂量包括一个或多个载剂，从而各载剂包括有效量的至少一种药剂以及药学上可接受载体和赋形剂。在一些实施方式中，所述单位剂量是同时施用于患者的一个或多个片剂、胶囊、药丸、注射剂、输液、贴片等。
“口服剂型”包括处方或预期用于口服施用的单位剂型。
术语“包含”和“包括”在本文中以其开放和非限制性意义使用，除非另有说明。
术语“一个”和“一种”和“所述”以及描述本发明上下文中的类似提及(特别是下列权利要求的上下文中)应解释为涵盖单数和复数，除非本文另有说明或与上下文明显矛盾。复数用于化合物、盐等时，也指单一化合物、盐等。
术语“约”或“大致”应具有在给定值或范围的10％以内、更优选5％以内的含义。
实施例
材料与方法
化合物以20mM浓度溶于100％DMSO(西格玛(Sigma)，产品目录号D2650)，并在-20℃保存待用。化合物排列在药物主模板(葛莱娜(Greiner)，产品目录号788876)中并以2000X浓度连续稀释3倍(7步)。
从商业供应商ATCC、CellBank澳大利亚和HSRRB获得用于此研究的结直肠癌细胞系，培养并处理(表1)。所有细胞系培养基补充有10％FBS(海克隆(HyClone),产品目录号SH30071.03)。LIM2551的培养基额外补充有0.6μg/mL胰岛素(西格玛，产品目录号I9278)、1μg/mL氢化可的松(西格玛，产品目录号H0135)和10μM 1-硫代甘油(西格玛，产品目录号M6145)。
表1.细胞系信息
细胞系在37℃和5％CO2培养箱中培养，在T-75培养瓶中扩增。所有情形下，细胞从冷冻储液中解冻，用1:3稀释通过≥1次传代来扩增，用ViCell计数器(贝克曼库尔特(Beckman-Coulter))计数并评价活力，然后接种。为分离并扩增细胞系，细胞用0.25％胰蛋白酶-EDTA(GIBCO，产品目录号25200)从培养瓶中移出。通过Idexx Radil(美国密苏里州哥伦比亚)进行的PCR检测方法确定并通过检测SNP组来正确鉴定，确定所有细胞系没有支原体污染。
配合前述方法(Horn,Sandmann等.2011)和使用R中的Bioconductor包EBImage(Pau,Fuchs等.2010)后，分析图像。2个通道中的对象即DAPI(用于Hoechst/DNA)和FITC(用于半胱天冬酶3/7)通过自适应阈值化单独分段并计数。比较负对照(DMSO)和正对照(星形孢菌素)后，手动确定每细胞系的半胱天冬酶3/7阳性对象阈值。通过分析DNA通道中的17个额外对象/核特征(形状和强度特征)，鉴定碎片/片段化核。为此，手动比较正对照(星孢菌素)与负对照(DMSO)之间的额外特征分布/细胞系。能在条件之间区分的特征(如比较DMSO与星形孢菌素的特征测量分布的位移)用于确定‘碎片’群与‘活’核群。从原始核计数中减去碎片计数。所得核数目用作细胞增殖的量度(‘细胞计数’)。
化合物对细胞增殖的作用计算自相对于负对照(DMSO)的细胞计数的治疗的细胞计数，在图1和图3中表示为y轴上的‘标准化细胞计数’(＝‘xnorm’)。协同组合用最高单药模型(HSA)作为零假设(Berenbaum 1989)鉴定。超过HAS模型则预测受抑制靶标之间的功能联系(Lehar,Zimmermann等.2007,Lehar,Krueger等.2009)。模型输入是抑制值/药物剂量：
I＝1-xnorm
I:抑制
xnorm:标准化细胞计数(3次重复的中值)
在组合治疗的每一剂量点，计算组合抑制与2种单药中较强的抑制之间的区别(＝模型残差)。类似地，为评价三重组合在各剂量点的协同作用，计算三联药物抑制与最强药物对抑制之间的差异。为有利于高抑制下的组合效果，残差用在同一剂量点观察到的抑制加权。药物组合的总体组合得分C是所有浓度中加权残差的总和：
C＝Σ浓度(I数据*(I数据–I模型))
I数据:测量的抑制
I模型:根据HSA零假设的抑制
稳健组合z计分(zC)计算为治疗的组合得分C与非相互作用组合的绝对中位差(mad)之比：
zC＝C/mad(C零)
C零:非相互作用组合的组合得分
zC是组合强度指示物:
zC≥3:协同作用
3>zC≥2:弱协同作用
zC<2:无协同作用
IIC50是相对于DMSO产生50％细胞计数的浓度。使用R中的DRC包(Ritz和Streibig2005)并拟合四参数log-逻辑函数与数据，完成IC50计算(见表2和表3)。
化合物对细胞凋亡的作用如下确定：相对于(减去碎片前的)原始细胞计数，计算每治疗和时间点有活化半胱天冬酶3/7的细胞百分数(图2和图4的y轴)。未经实验测量的各时间点细胞计数如下通过回归分析获得：对第0天和治疗结束时(假设细胞指数生长)对数变换的细胞计数拟合线性模型。
实施例1：在B-Raf突变结直肠癌细胞系中联合PIK3CA抑制剂BYL179与CDK4/6抑制剂LEE011和B-Raf抑制剂达拉菲尼对增殖的体外效果。
为测试BYL719、LEE011、与达拉菲尼组合对细胞增殖的效果，细胞接种于有清底的黑色384孔微量板(Matrix/赛默科技(Thermo Scientific)，产品目录号4332)中的50μL培养基/每孔，细胞密度为500-1250细胞/孔(表1)，并在37度、5％CO2孵育24小时。24小时后，制备384孔板/细胞系以通过显微镜检查(见下)进行细胞计数，而不接受处理(＝‘基线)。其它细胞板如下处理：用ATS声学液体分配器(ECD生物***公司(ECD Biosystems))从药物主模板转移25nL 2000X化合物并获得最终1X浓度。BYL719在13nM-10μM的终浓度范围中使用，LEE011在13nM-10μM的终浓度范围中使用，达拉菲尼在1.4nM-1μM的终浓度范围中使用(7个1:3稀释步骤)。为评价三重组合的效果，在同一实验中测试所有个体化合物、所有3个成对组合(BYL719+LEE011、BYL719+达拉菲尼、LEE011+达拉菲尼)和三重组合(BYL719+LEE011+达拉菲尼)。成对组合和三重组合在各稀释度以1:1(用于药物对)和1:1:1(用于三联药物)固定比例测试，产生7种组合/处理。另外，负对照(DMSO＝‘载剂’)和正对照(星形孢菌素＝杀死细胞,7点1:2稀释系列用于16nM-1μM的剂量范围)作为治疗对照转移，在所测试细胞系中无功效的化合物与BYL719和LEE011的组合作为组合对照(不超过更有效单药功效的组合＝‘非相互作用’组合)。化合物添加后，用HP D300数字分配器(帝肯)将50nL 2mMCellEvent半胱天冬酶-3/7绿色检测试剂(赛默飞世尔(ThermoFisher)，产品目录号C10423)加入三个重复之一。半胱天冬酶3/7诱导作为治疗诱导的细胞凋亡替代物测量。细胞根据其倍增时间处理72小时-96小时(表1)，且使用装有4X物镜和FITC激发/发射滤光片的InCell分析仪2000(通用电气医疗集团(GE Healthcare))每24小时通过显微镜检查测量半胱天冬酶3/7活化。治疗结束时，制备细胞以通过显微镜检查进行细胞计数。细胞在溶于PBS(波士顿生物产品公司(Boston Bioproducts)，产品目录号BM-220)的4％PFA(EMS，产品目录号15714)、0.12％TX-100(EMS，产品目录号22140)中固定并透化45分钟。细胞用PBS洗3次后，其DNA用Hoechst 33342(赛默飞世尔，产品目录号H3570)染色30分钟，终浓度为4μg/ml。细胞用PBS洗3次，然后板用带铝密封件(安捷伦科技(Agilent Technologies)，产品目录号06644-001)的PlateLoc(安捷伦科技)热密封，4℃保存直至成像。使用装有4X物镜和DAPI激发/发射滤光片的InCell分析仪2000(通用电气医疗集团)，通过荧光显微镜在单一图像中捕获每孔所有细胞/治疗。
在总共6个B-Raf突变结直肠癌细胞系中，对PIK3CA抑制剂BYL719、CDK4/6抑制剂LEE011与B-Raf抑制剂达拉菲尼的功效进行单独以及联合评价，其中3个B-Raf突变结直肠癌细胞系也是PIK3CA突变型(表1)。BYL719在PIK3CA突变细胞中有效，具有微摩尔IC50，而LEE011在除了一个(OUMS-23)以外的细胞系中有效，具有低微摩尔IC50(图1和表2)。达拉菲尼在除了一个(OUMS-23)以外的细胞系中有效，具有纳摩尔至低微摩尔IC50(图1和表2)。相比于药物对，三重组合(BYL719+LEE011+达拉菲尼)在2/6个细胞系中引起协同抑制(根据HSA模型)以及在2/6个细胞系中引起弱协同抑制(表2)。相较成对的组合，三重组合并不更强诱导细胞调亡(通过测量半胱天冬酶3/7诱导来评价)(图2)。共同地，在B-Raf突变CRC中联合抑制PIK3CA、CDK4/6和B-Raf可提供相较各单药能够改善反应的有效治疗模式，并产生临床更持久的反应。
表2.各化合物的单药IC50值以及LEE011、达拉菲尼与BYL719组合的协同作用z计分测量。
实施例2：在B-Raf突变结直肠癌细胞系中联合CDK4/6抑制剂LEE011和B-Raf抑制剂达拉菲尼对增殖的体外效果。
为测试LEE011与达拉菲尼组合对细胞增殖的效果，细胞接种于有清底的黑色384孔微量板(Matrix/赛默科技，产品目录号4332)中的50μL培养基/每孔，细胞密度为500-1250细胞/孔(表1)，并在37度、5％CO2孵育24小时。24小时后，制备384孔板/细胞系以通过显微镜检查(见下)进行细胞计数，而不接受治疗(＝‘基线)。其它细胞板如下处理：用ATS声学液体分配器(ECD生物***公司)从药物主模板转移25nL 2000X化合物，并获得最终1X浓度。LEE011在13nM-10μM的终浓度范围中使用，达拉菲尼在1.4nM-1μM的终浓度范围中使用(7个1:3稀释步骤)。对于LEE011与达拉菲尼组合，单个药剂在各稀释度以1:1固定比例合并，产生7种组合/治疗。另外，负对照(DMSO＝‘载剂’)和正对照(星形孢菌素＝杀死细胞,7点1:2稀释系列用于16nM-1μM剂量范围)作为治疗对照转移，在所测试细胞系中无功效的化合物与LEE011和达拉菲尼联用作为组合对照(不超过更有效单药功效的组合＝‘非相互作用’组合)。化合物添加后，用HP D300数字分配器(帝肯)将50nL 2mM CellEvent半胱天冬酶-3/7绿色检测试剂(赛默飞世尔，产品目录号C10423)加入三个重复之一。半胱天冬酶3/7诱导作为治疗诱导的细胞凋亡替代物测量。细胞根据其倍增时间处理72小时-96小时(表1)，使用装有4X物镜和FITC激发/发射滤光片的InCell分析仪2000(通用电气医疗集团)每24小时通过显微镜检查测量半胱天冬酶3/7活化。治疗结束时，制备细胞以通过显微镜检查进行细胞计数。细胞在溶于PBS(波士顿生物产品公司，产品目录号BM-220)的4％PFA(EMS，产品目录号15714)、0.12％TX-100(EMS，产品目录号22140)中固定并透化45分钟。细胞用PBS洗3次后，其DNA用Hoechst 33342(赛默飞世尔，产品目录号H3570)染色30分钟，终浓度为4μg/ml。细胞用PBS洗3次，然后板用带铝密封件(安捷伦科技(Agilent Technologies)，产品目录号06644-001)的PlateLoc(安捷伦科技)热密封，4℃保存直至成像。使用装有4X物镜和DAPI激发/发射滤光片的InCell分析仪2000(通用电气医疗集团)通过荧光显微镜在单一图像中捕获每孔所有细胞/治疗。
在总共6个B-Raf结直肠癌细胞系(3个也是PIK3CA突变型)中对CDK4/6抑制剂LEE011与B-Raf抑制剂达拉菲尼的功效进行单独以及联合评价(表1)。作为单药的LEE011抑制除了一个(OUMS-23)以外的细胞系生长，具有微摩尔IC50值(图3和表3)。作为单药的达拉菲尼强烈抑制除了一个(OUMS-23)以外的细胞系生长，具有纳摩尔至亚微摩尔IC50值(图3和表3)。联合治疗在5/6个所测试的细胞系中引起协同抑制(根据HSA模型)，并具有不同强度(表3)。相较单药，组合并不更强诱导细胞调亡(通过测量半胱天冬酶3/7诱导来评价)，这可能是CDK4/6抑制后细胞周期阻滞诱导的结果(图4)。在B-Raf突变结直肠癌中联合抑制CDK4/6和B-Raf可提供相较各单药能够改善反应的有效治疗方法，并产生临床更持久的反应。
表3.各化合物的单药IC50值以及LEE011与达拉菲尼组合的协同作用z计分测量。
实施例3：达拉菲尼的合成方法
方法1：达拉菲尼(第一晶形)：N-{3-[5-(2-氨基-4-嘧啶基)-2-(1,1-二甲基乙基)-1,3-噻唑-4-基]-2-氟苯基}-2,6-二氟苯磺酰胺：
溶于甲醇7M(8ml,56.0mmol)的N-{3-[5-(2-氯-4-嘧啶基)-2-(1,1-二甲基乙基)-1,3-噻唑-4-基]-2-氟苯基}-2,6-二氟苯磺酰胺(196mg,0.364mmol)和氨的悬液在密封管中加热至90℃，持续24小时。反应用DCM稀释，加入硅胶并浓缩。粗产物在硅胶上进行层析，用100％DCM-1:1[DCM:(9:1EtOAc:MeOH)]洗脱。浓缩干净的部分以产生粗产物。粗产物通过反相HPLC(乙腈:水梯度，两者都有0.1％TFA)再纯化。合并的干净部分进行浓缩，然后在DCM与饱和NaHCO3之间分开。分离DCM层并用Na2SO4干燥。获得目标化合物N-{3-[5-(2-氨基-4-嘧啶基)-2-(1,1-二甲基乙基)-1,3-噻唑-4-基]-2-氟苯基}-2,6-二氟苯磺酰胺(94mg,47％收率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 10.83(s,1H),7.93(d,J＝5.2Hz,1H),7.55-7.70(m,1H),7.35-7.43(m,1H),7.31(t,J＝6.3Hz,1H),7.14-7.27(m,3H),6.70(s,2H),5.79(d,J＝5.13Hz,1H),1.35(s,9H).MS(ESI):519.9[M+H]+.
方法2：达拉菲尼(替代晶形)：N-{3-[5-(2-氨基-4-嘧啶基)-2-(1,1-二甲基乙基)-1,3-噻唑-4-基]-2-氟苯基}-2,6-二氟苯磺酰胺：
19.6mg N-{3-[5-(2-氨基-4-嘧啶基)-2-(1,1-二甲基乙基)-1,3-噻唑-4-基]-2-氟苯基}-2,6-二氟苯磺酰胺(可根据实施例58a制备)与500μL乙酸乙酯在2-mL小瓶中室温合并。浆液在0-40℃的温度循环48小时。所得浆液冷却至室温，经真空过滤收集固体。固体通过Raman、PXRD、DSC/TGA分析，表明晶形不同于上面实施例58a所得晶形。
方法3：达拉菲尼(替代晶形，大批)：N-{3-[5-(2-氨基-4-嘧啶基)-2-(1,1-二甲基乙基)-1,3-噻唑-4-基]-2-氟苯基}-2,6-二氟苯磺酰胺：
步骤A：3-{[(2,6-二氟苯基)磺酰基]氨基}-2-氟苯甲酸甲酯：
将3-氨基-2-氟苯甲酸甲酯(50g,1eq)加入反应器，然后加入二氯甲烷(250mL,5vol)。搅拌内容物并冷却至～15℃，加入吡啶(26.2mL,1.1eq)。添加吡啶后，反应器内容物调整至～15℃，开始经加料漏斗加入2,6-二氟苯磺酰氯(39.7mL,1.0eq)。添加期间的温度保持在<25℃。添加完成后，反应器内容物加温至20-25℃，保持过夜。加入乙酸乙酯(150mL)，经蒸馏除去二氯甲烷。一旦蒸馏完成，反应混合物随后用乙酸乙酯(5vol)再稀释一次并浓缩。反应混合物用乙酸乙酯(10vol)和水(4vol)稀释，内容物搅拌加热至50-55℃，直至所有固体溶解。分层并分离。有机层用水(4vol)稀释，内容物加热至50-55℃，持续20-30分钟。分层后分离，乙酸乙酯层减压蒸发至～3体积。加入乙酸乙酯(5vol)，再次减压蒸发至～3体积。然后向反应器加入环己烷(9vol)，内容物加热回流30分钟，随后冷却到0℃。过滤固体并用环己烷(2x 100mL)冲洗。固体空气干燥过夜，获得3-{[(2,6-二氟苯基)磺酰基]氨基}-2-氟苯甲酸甲酯(94.1g,91％)。
步骤B：N-{3-[(2-氯-4-嘧啶基)乙酰基]-2-氟苯基}-2,6-二氟苯磺酰胺：
一般根据上面步骤A制备的3-{[(2,6-二氟苯基)磺酰基]氨基}-2-氟苯甲酸甲酯(490g,1当量)溶于THF(2.45L,5体积)，搅拌并冷却到0-3℃。将溶于THF的1M双(三甲基硅基)氨基锂(5.25L,3.7当量)溶液加入反应混合物，然后加入溶于THF(2.45L,5体积)的2-氯-4-甲基嘧啶(238g,1.3当量)。反应随后搅拌1小时。反应用4.5M HCl(3.92L,8体积)淬灭。移除水层(底层)并弃去。有机层减压浓缩至～2L。向反应混合物加入IPAc(乙酸异丙酯)(2.45L)，随后浓缩到～2L。加入IPAc(0.5L)和MTBE(2.45L)，在N2下搅拌过夜。过滤固体。固体和母滤液共同回加，搅拌数小时。过滤固体并用MTBE(～5vol)洗涤。将固体置于50℃真空烘箱过夜。固体在30℃真空烘箱中干燥整个周末，获得N-{3-[(2-氯-4-嘧啶基)乙酰基]-2-氟苯基}-2,6-二氟苯磺酰胺(479g,72％)。
步骤C：N-{3-[5-(2-氯-4-嘧啶基)-2-(1,1-二甲基乙基)-1,3-噻唑-4-基]-2-氟苯基}-2,6-二氟苯磺酰胺：
向反应容器加入N-{3-[(2-氯-4-嘧啶基)乙酰基]-2-氟苯基}-2,6-二氟苯磺酰胺(30g,1eq)，然后加入二氯甲烷(300mL)。反应浆液冷却至～10℃，N-溴代琥珀酰亚胺(“NBS”)(12.09g,1eq)以3个大致相等的部分加入，每次添加之间搅拌10-15分钟。最终加入NBS后，反应混合物加温到～20℃并搅拌45分钟。然后向反应容器加入水(5vol)，搅拌混合物且随后分层。再次向二氯甲烷层加入水(5vol)，搅拌混合物并分层。二氯甲烷层浓缩至～120mL。向反应混合物加入乙酸乙酯(7vol)，浓缩至～120mL。随后向反应混合物加入二甲基乙酰胺(270mL)，冷却到～10℃。2,2-二甲基硫代丙酰胺(1.3g,0.5eq)以2个相等部分加入反应内容物，每次添加之间搅拌～5分钟。反应加温到20-25℃。45分钟后，容器内容物加热到75℃并保持1.75小时。反应混合物随后冷却到5℃，缓慢加入水(270ml)，保持温度低于30℃。接着加入乙酸乙酯(4vol)，搅拌混合物且层分开。再次向水层加入乙酸乙酯(7vol)，搅拌内容物且层分开。再次向水层加入乙酸乙酯(7vol)，搅拌内容物并分层。合并有机层并用水(4vol)洗4次，在20-25℃搅拌过夜。有机层随后在加热和真空下浓缩至120mL。容器内容物随后加热到50℃，缓慢加入庚烷(120mL)。添加庚烷后，容器内容物加热回流，随后冷却到0℃并保持2小时。过滤固体并用庚烷(2x 2vol)冲洗。固体产物接着在30℃真空干燥，获得N-{3-[5-(2-氯-4-嘧啶基)-2-(1,1-二甲基乙基)-1,3-噻唑-4-基]-2-氟苯基}-2,6-二氟苯磺酰胺(28.8g,80％)。
步骤D：N-{3-[5-(2-氨基-4-嘧啶基)-2-(1,1-二甲基乙基)-1,3-噻唑-4-基]-2-氟苯基}-2,6-二氟苯磺酰胺：
在1gal压力反应器中，根据上面步骤C制备的N-{3-[5-(2-氯-4-嘧啶基)-2-(1,1-二甲基乙基)-1,3-噻唑-4-基]-2-氟苯基}-2,6-二氟苯磺酰胺(120g)与氢氧化铵(28-30％,2.4L,20vol)的混合物在密封压力反应器中加热到98-103℃，在此温度搅拌2小时。反应缓慢冷却到室温(20℃)并搅拌过夜。过滤固体，用最少量母液洗涤并真空干燥。向EtOAc(15vol)/水(2vol)混合物加入固体，在60-70℃加热至完全溶解，移出水层并弃去。EtOA层加入水(1vol)并用HCl水溶液中和至～pH 5.4-5.5，加入水(1vol)。在60-70℃移出水层并弃去。有机层用水(1vol)在60-70℃洗，移出水层并弃去。有机层在60℃过滤并浓缩至3体积。向混合物加入EtOAc(6vol)，在72℃加热并搅拌10分钟，随后冷却到20℃并搅拌过夜。EtOAc经真空蒸馏移出以浓缩反应混合物至～3体积。反应混合物在～65-70℃维持～30分钟。加入溶于庚烷浆液的产品晶体，其具有的晶形与上面实施例58b所制备相同(且可通过实施例58b过程制备)。庚烷(9vol)在65-70℃缓慢加入。浆液在65-70℃搅拌2-3小时，然后缓慢冷却到0-5℃。过滤产物，用EtOAc/庚烷(3/1v/v,4vol)洗涤，在45℃真空干燥，获得N-{3-[5-(2-氨基-4-嘧啶基)-2-(1,1-二甲基乙基)-1,3-噻唑-4-基]-2-氟苯基}-2,6-二氟苯磺酰胺(102.3g,88％)。
方法4：达拉菲尼(甲磺酸盐)：N-{3-[5-(2-氨基-4-嘧啶基)-2-(1,1-二甲基乙基)-1,3-噻唑-4-基]-2-氟苯基}-2,6-二氟苯磺酰胺甲磺酸盐：
向溶于异丙醇(2mL)的N-{3-[5-(2-氨基-4-嘧啶基)-2-(1,1-二甲基乙基)-1,3-噻唑-4-基]-2-氟苯基}-2,6-二氟苯磺酰胺(204mg,0.393mmol)溶液加入甲磺酸(0.131mL,0.393mmol)，溶液在室温搅拌3小时。形成白色沉淀物，过滤浆液并用***冲洗以产生为白色结晶固体的目标化合物(210mg,83％收率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 10.85(s,1H)7.92-8.05(m,1H)7.56-7.72(m,1H)6.91-7.50(m,7H)5.83-5.98(m,1H)2.18-2.32(m,3H)1.36(s,9H).MS(ESI):520.0[M+H]+.
方法5：达拉菲尼(替代的甲磺酸盐实施方式)：N-{3-[5-(2-氨基-4-嘧啶基)-2-(1,1-二甲基乙基)-1,3-噻唑-4-基]-2-氟苯基}-2,6-二氟苯磺酰胺甲磺酸盐：
N-{3-[5-(2-氨基-4-嘧啶基)-2-(1,1-二甲基乙基)-1,3-噻唑-4-基]-2-氟苯基}-2,6-二氟苯磺酰胺(可根据实施例58a制备)(2.37g,4.56mmol)与预过滤乙腈(5.25vol,12.4mL)合并。在20℃加入溶于H2O(0.75eq.,1.78mL)的预过滤甲基磺酸(1.1eq.,5.02mmol,0.48g)溶液。所得混合物的温度提高到50-60℃，同时维持低搅拌速度。一旦混合物温度达到50-60℃，加入N-{3-[5-(2-氨基-4-嘧啶基)-2-(1,1-二甲基乙基)-1,3-噻唑-4-基]-2-氟苯基}-2,6-二氟苯磺酰胺甲磺酸盐(在0.2vol预过滤乙腈中以1.0％w/w成浆)的晶种(seed)浆液，混合物熟化，同时以快到足以防止固体在50-60℃沉淀的速度搅拌，持续2小时。混合物随后以0.25℃/min冷却到0-5℃，并在0-5℃保持6小时。过滤混合物，湿饼用预过滤乙腈洗涤2次。第一次洗液由14.2ml(6vol)预过滤乙腈组成，第二次洗液由9.5ml(4vol)预过滤乙腈组成。湿固体在50℃真空干燥，产生2.39g(85.1％收率)产物。

Claims (26)

1.一种药物组合，所述组合包括：
(a)具有式(I)结构的第一化合物：
或其药学上可接受盐或溶剂合物，和
(b)具有式(II)结构的第二化合物：
或其药学上可接受盐或溶剂合物。
2.如权利要求1所述的药物组合，其中，所述具有式(I)结构的化合物或其药学上可接受盐或溶剂合物，以及具有式(II)结构的化合物或其药学上可接受盐或溶剂合物在同一制剂中。
3.如权利要求1所述的药物组合，其中，所述具有式(I)结构的化合物或其药学上可接受盐或溶剂合物，以及具有式(II)结构的化合物或其药学上可接受盐或溶剂合物在分开的制剂中。
4.如权利要求1所述的药物组合，其中，所述组合用于同时或依序施用。
5.如权利要求1所述的药物组合，其中，所述组合还包括具有式(III)结构的第三化合物：
或其药学上可接受盐或溶剂合物。
6.如权利要求5所述的药物组合，其中，所述具有式(I)结构的化合物或其药学上可接受盐或溶剂合物、具有式(II)结构的化合物或其药学上可接受盐或溶剂合物以及具有式(III)结构的化合物或其药学上可接受盐或溶剂合物在同一制剂中。
7.如权利要求5所述的药物组合，其中，所述具有式(I)结构的化合物或其药学上可接受盐或溶剂合物、具有式(II)结构的化合物或其药学上可接受盐或溶剂合物以及具有式(III)结构的化合物或其药学上可接受盐或溶剂合物在2种或三种分开的制剂中。
8.如权利要求5所述的药物组合，其中，所述组合用于同时或依序施用。
9.如权利要求1-8中任一项所述的药物组合，其中，所述第一化合物是具有式(I)结构化合物的琥珀酸盐。
10.一种在需要的对象中治疗或预防癌症的方法，所述方法包括向对象施用治疗有效量的如权利要求1-9中任一项所述的药物组合。
11.如权利要求10所述的方法，其中，所述癌症选自下组：黑素瘤、肺癌(包括非小细胞肺癌(NSCLC))、结直肠癌(CRC)、乳腺癌、肾癌、肾细胞癌(RCC)、肝癌、急性骨髓性白血病(AML)、骨髓增生异常综合征(MDS)、甲状腺癌、胰腺癌、多发性神经纤维瘤和肝细胞癌。
12.如权利要求10所述的方法，其中所述癌症是结直肠癌。
13.如权利要求10-12中任一项所述的方法，其中所述癌症表征为B-Raf突变、B-RafV600E突变、PIK3CA突变和PIK3CA过表达中的一个或多个。
14.如权利要求1-9中任一项所述的药物组合，其中所述组合用于治疗或预防癌症。
15.如权利要求1-9中任一项所述的药物组合，其中所述组合用于制造治疗或预防癌症的药物。
16.如权利要求14或15所述的药物组合，其中所述癌症选自下组：黑素瘤、肺癌(包括非小细胞肺癌(NSCLC))、结直肠癌(CRC)、乳腺癌、肾癌、肾细胞癌(RCC)、肝癌、急性骨髓性白血病(AML)、骨髓增生异常综合征(MDS)、甲状腺癌、胰腺癌、多发性神经纤维瘤和肝细胞癌。
17.如权利要求16所述的药物组合，其中所述癌症是结直肠癌。
18.如权利要求14-16中任一项的药物组合，其中所述癌症表征为B-Raf突变、B-RafV600E突变、PIK3CA突变和PIK3CA过表达中的一个或多个。
19.如权利要求1-9中任一项所述药物组合在制造治疗或预防癌症药物中的应用。
20.如权利要求1-9中任一项所述药物组合在治疗或预防癌症中的应用。
21.如权利要求19或20所述的应用，其中所述癌症选自下组：黑素瘤、肺癌(包括非小细胞肺癌(NSCLC))、结直肠癌(CRC)、乳腺癌、肾癌、肾细胞癌(RCC)、肝癌、急性骨髓性白血病(AML)、骨髓增生异常综合征(MDS)、甲状腺癌、胰腺癌、多发性神经纤维瘤和肝细胞癌。
22.如权利要求21所述的应用，其中所述癌症是结直肠癌。
23.如权利要求19-22中任一项所述的应用，其中所述癌症表征为B-Raf突变、B-RafV600E突变、PIK3CA突变和PIK3CA过表达中的一个或多个。
24.一种药物组合物，所述组合物包括：
(a)具有式(I)结构的第一化合物：
或其药学上可接受盐，和
(b)具有式(II)结构的第二化合物：
或其药学上可接受盐。
25.如权利要求24所述的药物组合物，其中所述组合物还包括具有式(III)结构的第三化合物：
或其药学上可接受盐。
26.如权利要求24或25所述的药物组合物，其中所述组合物还包括一种或多种赋形剂。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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BR112021011699A2 (pt) * 2018-12-20 2021-09-08 Novartis Ag Terapia de combinação com um inibidor de raf e um inibidor de cdk4/6 para uso no tratamento contra câncer
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
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