CN108324603B - 一种含有松花粉提取物的化妆品及其制备工艺 - Google Patents

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Abstract

本发明属于生物技术领域，尤其涉及一种含有松花粉提取物的化妆品及其制备工艺。本发明采用乙醇提取和乙醇醇沉的方法提取松花粉，解决了松花粉提取物中有细小沉淀生成的问题，获得了稳定的松花粉提取物；本发明使用适宜的大孔吸附树脂对黄酮进行精制纯化；浓缩液用多元醇水溶液进行调配，形成以多元醇水溶液为体系的松花粉提取物，得到的提取物稳定，与化妆品相容性好，对肌肤刺激小，为松花粉提取物应用到化妆品领域提供了基础。本发明采用的松花粉提取方法，工艺简单，收率高，杂质少，可操作性强，得到的松花粉提取物稳定性好，无沉淀生成，过敏风险低，与化妆品基质相容性好，得到的化妆品具有美白、抗衰老、抗菌抗炎的作用。

Description

一种含有松花粉提取物的化妆品及其制备工艺
技术领域
本发明属于生物技术领域，尤其涉及一种含有松花粉提取物的化妆品及其制备工艺。
背景技术
自古松花粉就是食疗、美容之珍品，其在护肤品上的应用具有悠久历史，清《本草从新》记载松花粉“善糁诸痘疮伤损并湿烂不痂”。现代科学研究表明，松花粉含有多种维生素、蛋白质、氨基酸、脂肪等营养成分，被誉为“超级微型营养库”。其中的花粉黄酮等活性成分具有美白、抗衰老、抗菌抗炎功效，经常用于化妆品中。
目前黄酮提取的几种工艺中，热水提取法杂质较多，且收率不高；碱提酸沉法对于提取松花粉黄酮不可行，尝试后发现加酸无法有效沉淀；超临界提取成本过高；酶提法和醇提法工艺简单易行，收率高，杂质少，但尝试后发现体系会不断有细小颗粒生成，过微孔膜亦无法解决。
发明内容
本发明针对现有技术的不足，提供一种含有松花粉提取物的化妆品及其制备工艺。
本发明提供一种含有松花粉提取物的化妆品，其组分按照重量百分比计包括：50-60％水、3-8％丙三醇、3-8％1,3-丁二醇、0.3-3％烟酰胺、3-8％松花粉提取物、1-5％十八醇、3-7％D-泛醇、3-8％辛酸癸酸甘油三酯、3-8％合成角鲨烷、1-4％硅油200、1-5％霍霍巴油、0.5-2％PMX-0345硅油、0.5-1％苯氧乙醇、2-6％吐温-60和2-6％NIKKOL NikkomuleseSE。
其中，所述的松花粉提取物的制备工艺，步骤如下：
(1)醇提：取松花粉，加入浓度25-95wt％乙醇，40-1000W、10-70KHz、10-99℃超声辅助回流提取1-3h，得提取液；其中，乙醇与松花粉的重量比为(1-100):1；
(2)过滤浓缩：将步骤(1)的提取液趁热过滤，所得滤液在10-90℃条件下减压浓缩，浓缩至液体呈浸膏状；
(3)醇沉：将步骤(2)的浓缩液冷却至-10～10℃，加入浓缩液重量1-5倍的浓度75-99.9wt％乙醇，搅拌1-40min，静置醇沉1-20h；
(4)过滤：将步骤(3)的醇沉滤液过0.22-10μm微孔膜，收集滤液；
(5)树脂纯化：将步骤(4)的滤液采用AB-8大孔吸附树脂吸附滤液中的黄酮，吸附树脂重量为滤液重量的1-20倍，吸附流速为1-10BV/h；再采用吸附树脂1-10倍体积的纯化水洗脱，流速为1-10BV/h；最后采用吸附树脂1-20倍体积的浓度50-99.5wt％乙醇洗脱，流速为1-15BV/h；
(6)浓缩：将步骤(5)经过树脂纯化后的液体在10-90℃条件下减压浓缩，浓缩至液体呈浸膏状；
(7)取步骤(6)的浓缩液，加入浓缩液重量1-16倍的1,3-丁二醇和浓缩液重量1-10倍的纯化水，再加入浓缩液重量0.02倍MTI，得松花粉提取物。
其中，所述NIKKOL Nikkomulese SE购买自日光化学贸易(上海)有限公司。
本发明的第二个目的在于提供上述化妆品的制备方法，步骤如下：
(1)取十八醇、辛酸癸酸甘油酸酯、合成角鲨烷、硅油-200、霍霍巴油、PMX-0345硅油、吐温-60于油相锅中，加热至80℃保温并搅拌30min；
(2)取丙三醇、1,3-丁二醇、烟酰胺、NIKKOL Nikkomulese SE、水在水相锅中加热至80℃保温并搅拌30min；
(3)将水相锅中物料缓缓加入油相锅中，搅拌5min开始均质，均质时间5min；
(4)继续搅拌，待温度降至45℃以下后，加入D-泛醇、松花粉提取物和苯氧乙醇，继续搅拌30min，即得。
本发明的有益效果是：
1、本发明采用乙醇提取和乙醇醇沉的方法提取松花粉，解决了松花粉提取物中有细小沉淀生成的问题，获得了稳定的松花粉提取物；本发明使用适宜的大孔吸附树脂对黄酮进行精制纯化；浓缩液用多元醇水溶液进行调配，形成以多元醇水溶液为体系的松花粉提取物，得到的提取物稳定，与化妆品相容性好，对肌肤刺激小，为松花粉提取物应用到化妆品领域提供了基础。
2、本发明采用的松花粉提取方法，工艺简单，收率高，杂质少，可操作性强，得到的松花粉提取物稳定性好，无沉淀生成，过敏风险低，与化妆品基质相容性好，得到的化妆品具有美白、抗衰老、抗菌抗炎的作用。
附图说明
图1为本发明实施例1-2制得的松花粉提取物对DPPH自由基清除率示意图；
图2为不同浓度的松花粉提取物对成纤维细胞存活率影响的示意图；
图3为使用本化妆品后志愿者皮肤弹性R2值的示意图。
具体实施方式
以下结合实例对本发明的原理和特征进行描述，所举实例只用于解释本发明，并非用于限定本发明的范围。
实施例1
一种含有松花粉提取物的化妆品，其组分按照重量百分比计包括：52％水、5％丙三醇、5％1,3-丁二醇、1％烟酰胺、5％松花粉提取物、3％十八醇、5％D-泛醇、5％辛酸癸酸甘油三酯、5％合成角鲨烷、2％硅油200、3％霍霍巴油、1％PMX-0345硅油、1％苯氧乙醇、4％吐温-60和3％NIKKOL Nikkomulese SE。
其中，所述的松花粉提取物的制备工艺，步骤如下：
(1)醇提：取松花粉，加入浓度75wt％乙醇，85℃水浴回流提取3h，提取2次，得提取液；其中，乙醇与松花粉的重量比为20:1；
(2)过滤浓缩：将步骤(1)的提取液趁热过滤，所得滤液在45℃条件下减压浓缩，浓缩至液体呈浸膏状；
(3)醇沉：将步骤(2)的浓缩液冷却至0℃，加入浓缩液重量2.5倍的浓度95wt％乙醇，搅拌5min，静置醇沉12h；
(4)过滤：将步骤(3)的醇沉滤液过0.45μm微孔膜，收集滤液；
(5)树脂纯化：将步骤(4)的滤液采用AB-8大孔吸附树脂吸附滤液中的黄酮，吸附树脂重量为滤液重量的6倍，吸附流速为2BV/h；再采用吸附树脂5倍体积的纯化水洗脱，流速为2BV/h；最后采用吸附树脂8倍体积的浓度95wt％乙醇洗脱，流速为5BV/h；
(6)浓缩：将步骤(5)经过树脂纯化后的液体在45℃条件下减压浓缩，浓缩至浸膏状；
(7)取步骤(6)的浓缩液，加入浓缩液重量16倍的1,3-丁二醇和浓缩液重量3倍的纯化水，再加入浓缩液重量0.02倍MTI，得松花粉提取物，检测黄酮含量为0.20mg/mL。
实施例2
一种含有松花粉提取物的化妆品，其组分按照重量百分比计包括：57％水、3％丙三醇、3％1,3-丁二醇、2％烟酰胺、4％松花粉提取物、5％十八醇、3％D-泛醇、6％辛酸癸酸甘油三酯、3％合成角鲨烷、1％硅油200、1％霍霍巴油、2％PMX-0345硅油、1％苯氧乙醇、6％吐温-60和3％NIKKOL Nikkomulese SE。
其中，所述的松花粉提取物的制备工艺，步骤如下：
(1)醇提：取松花粉，加入浓度75wt％乙醇，40W、40KHz、45℃超声辅助回流提取2h，得提取液；其中，乙醇与松花粉的重量比为30:1；
(2)过滤浓缩：将步骤(1)的提取液趁热过滤，所得滤液在60℃条件下减压浓缩，浓缩至液体呈浸膏状；
(3)醇沉：将步骤(2)的浓缩液冷却至4℃，加入浓缩液重量3.5倍的浓度95wt％乙醇，搅拌5min，静置醇沉12h；
(4)过滤：将步骤(3)的醇沉滤液过0.45μm微孔膜，收集滤液；
(5)树脂纯化：将步骤(4)的滤液采用AB-8大孔吸附树脂吸附滤液中的黄酮，吸附树脂重量为滤液重量的6倍，吸附流速为2BV/h；再采用吸附树脂5倍体积的纯化水洗脱，流速为2BV/h；最后采用吸附树脂8倍体积的浓度95wt％乙醇洗脱，流速为5BV/h；
(6)浓缩：将步骤(5)经过树脂纯化后的液体在45℃条件下减压浓缩，浓缩至浸膏状；
(7)取步骤(6)的浓缩液，加入浓缩液重量12倍的1,3-丁二醇和浓缩液重量2倍的纯化水，再加入浓缩液重量0.02倍MTI，得松花粉提取物，检测黄酮含量为0.40mg/mL。
稳定性考察
取实施例1-2的松花粉提取物各40g，平均分装于四个透明样品瓶中置于不同环境下，定期观察状态。四个样品分别置于室内阳光照射处35天、45℃恒温箱中30天、-20℃冰箱冷冻室7天、45℃恒温箱与-20℃冰箱冷冻室循环放置10天。每天观察其状态，外观变化极小，黄酮含量几乎不变，表明所述松花粉提取物具有很好的稳定性。
美白及抗衰老功效评价
表1为样品对于B16细胞内黑色素含量的影响，表2为样品对于B16细胞内酪氨酸酶活性含量的影响。
表1
样品名称 终浓度 A475±SD 相对黑色素含量(％)
cell only - 0.116±0.001 100.0±9.3
8-mop 100uM 0.127±0.002 110.2±1.4
熊果苷 10ug/mL 0.099±0.003 85.1±2.6
松花粉提取物-实施例1 0.20mg/mL(黄酮含量) 0.089±0.002 78.1±1.7
松花粉提取物-实施例2 0.40mg/mL(黄酮含量) 0.078±0.009 69.9±0.8
表2
样品名称 终浓度 A475±SD 相对酪氨酸酶活性(％)
cell only - 0.083±0.001 100.0±2.9
8-mop 100μM 0.104±0.002 149.4±10.6
熊果苷 10ug/mL 0.078±0.002 78.9±5.2
松花粉提取物-实施例1 0.20mg/mL(黄酮含量) 0.069±0.004 66.7±3.3
松花粉提取物-实施例2 0.40mg/mL(黄酮含量) 0.062±0.001 62.4±1.3
由表1、表2数据可知，松花粉提取物能抑制酪氨酸酶活性，减少黑色素含量，具有美白效果。
表3样品对成纤维细胞相对存活率的影响
Figure BDA0001645412530000061
由表3、图1(图1中，从左至右依次为实施例1和实施例2的羟自由基清除率)和图2可知，松花粉提取物的清除羟自由基能力很强，松花粉提取物对成纤维细胞的生长有较好的促进作用。成纤维细胞，也称为纤维母细胞，是疏松***的主要细胞成分，属于终末分化细胞，这种细胞会制造胶原蛋白等蛋白质，充分说明松花粉提取物可能具有抑制皮肤衰老的作用的潜能。
化妆品抗衰老功效评价
皮肤弹性测量
试用本产品2周、4周、6周、8周后的使用皮肤弹性测试仪测量皮肤弹性(R2值).
表4使用产品后皮肤弹性R2值
Figure BDA0001645412530000071
由表4和图3可知，使用本化妆品后皮肤弹性有一定提高，至第八周，皮肤弹性R2值上升7.8％，具有极显著统计学意义。皮肤弹性是皮肤衰老程度的重要指标，说明本产品具有提高皮肤弹性、减少皱纹、减缓衰老的作用。
以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (2)

1.一种含有松花粉提取物的化妆品，其特征在于，其组分按照重量百分比计包括：57％水、3％丙三醇、3％1,3-丁二醇、2％烟酰胺、4％松花粉提取物、5％十八醇、3％D-泛醇、6％辛酸癸酸甘油三酯、3％合成角鲨烷、1％硅油200、1％霍霍巴油、2％PMX-0345硅油、1％苯氧乙醇、6％吐温-60和3％NIKKOL Nikkomulese SE；
其中，所述的松花粉提取物的制备工艺，步骤如下：
(1)醇提：取松花粉，加入浓度75wt％乙醇，40W、40KHz、45℃超声辅助回流提取2h，得提取液；其中，乙醇与松花粉的重量比为30:1；
(2)过滤浓缩：将步骤(1)的提取液趁热过滤，所得滤液在60℃条件下减压浓缩，浓缩至液体呈浸膏状；
(3)醇沉：将步骤(2)的浓缩液冷却至4℃，加入浓缩液重量3.5倍的浓度95wt％乙醇，搅拌5min，静置醇沉12h；
(4)过滤：将步骤(3)的醇沉滤液过0.45μm微孔膜，收集滤液；
(5)树脂纯化：将步骤(4)的滤液采用AB-8大孔吸附树脂吸附滤液中的黄酮，吸附树脂重量为滤液重量的6倍，吸附流速为2BV/h；再采用吸附树脂5倍体积的纯化水洗脱，流速为2BV/h；最后采用吸附树脂8倍体积的浓度95wt％乙醇洗脱，流速为5BV/h；
(6)浓缩：将步骤(5)经过树脂纯化后的液体在45℃条件下减压浓缩，浓缩至浸膏状；
(7)取步骤(6)的浓缩液，加入浓缩液重量12倍的1,3-丁二醇和浓缩液重量2倍的纯化水，再加入浓缩液重量0.02倍MTI，得松花粉提取物，检测黄酮含量为0.40mg/mL。
2.一种权利要求1所述化妆品的制备方法，其特征在于，步骤如下：
(1)取十八醇、辛酸癸酸甘油酸酯、合成角鲨烷、硅油-200、霍霍巴油、PMX-0345硅油、吐温-60于油相锅中，加热至80℃保温并搅拌30min；
(2)取丙三醇、1,3-丁二醇、烟酰胺、NIKKOL Nikkomulese SE、水在水相锅中加热至80℃保温并搅拌30min；
(3)将水相锅中物料缓缓加入油相锅中，搅拌5min开始均质，均质时间5min；
(4)继续搅拌，待温度降至45℃以下后，加入D-泛醇、松花粉提取物和苯氧乙醇，继续搅拌30min，即得。
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