发明内容
发明目的:本发明的目的是解决现有技术的不足,提供一种配比科学合理,美白效果确切,临床使用安全的中药复方,本发明另一个目的是提供该中药复方的制备方法及其在制备美白、祛痘日用品中的应用。
技术方案:为了实现以上目的,本发明采取的技术方案为:
一种具有美白功能的中药复方,它是由下列重量份数的原料药制成:五倍子炭3~10份、黄柏3~10份、紫草3~10份。
作为优选方案,以上所述的具有美白功能的中药复方,它是由下列重量份数的原料药制成:五倍子炭3~6份、黄柏3~6份、紫草3~6份。
作为更优选方案,以上所述的具有美白功能的中药复方,它是由下列重量份数的原料药制成:五倍子炭3份、黄柏3份、紫草3份。
以上所述的五倍子炭由五倍子碳炒炮制20~30分钟得到。
本发明提供的具有美白功能的中药复方,可以将各原料药的提取物和日用品上可接受的载体,如保湿剂、抗氧化剂、表面活性剂、醇类、水等基质成分制备成软膏、乳膏剂、面霜、凝胶、乳液、喷剂或洗面奶,作为其它优选方案,也可以制备成粉、香皂、油、干粉、粉底液或湿粉等,方便使用。
本发明提供的具有美白功能的中药复方的制备方法,其包括以下步骤:
首先取五倍子碳炒20~30分钟,得五倍子碳,按重量份数取五倍子碳、黄柏和紫草打细粉,备用,然后加提取液回流提取1至3次,每次回流1至3小时,合并提取液,过滤,取滤液,浓缩药液,加入乙醇沉淀,取滤液,浓缩即得。
作为优选方案,以上所述的具有美白功能的中药复方的制备方法,所述的提取液为水、甲醇、乙醇、含水醇类或丙酮等。
作为优选方案,以上所述的具有美白功能的中药复方的制备方法,回流提取时加入的提取液量为药材量的6至10倍。
作为优选方案,以上所述的具有美白功能的中药复方的制备方法,加入乙醇使乙醇的浓度为70~80%,可以去除大量大分子杂质,提高临床疗效。
作为另一优选方案,以上所述的具有美白功能的中药复方的制备方法,得到提取液后也可通过树脂柱除去杂质,得到精制的提取物。
本发明提供的的具有美白功能的中药复方在制备美白、祛痘日用品中的应用。
有益效果:本发明根据中医药理论,采用辨证论治的理论进行中药组方筛选,提供的药物组合物配比科学合理,临床实验结果表明,本发明提供的中药复方具有很好的抑制酪氨酸酶、抗自由基和抗紫外线的作用,能有效抑制黑色素生成,淡化色素沉着、老年斑、雀斑等。与现有技术的美白剂相比,发明提供的中药复方能从不同途径全面抑制黑色素的合成,具有优异的美白效果,同时,该中药复方含有多种中药活性成分,不含化学合成物质,能促进皮肤的新陈代谢,无毒副作用,对皮肤刺激性小,能改善皮肤的营养与健康,使皮肤自然地洁白柔嫩,且性质稳定。
同时本发明提供的中药复方的制备方法,工艺稳定,提取有效成分含量高,杂质少,可操作性强,适合工业化大生产。
具体实施方式:
下面结合具体实施例进一步阐明本发明,应理解这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围,在阅读了本发明之后,本领域技术人员对本发明的各种等价形式的修改均落于本申请所附权利要求所限定的范围。
实施例1
1、具有美白功能的中药复方的原料药:五倍子炭3份、黄柏3份、紫草3份。
2、具有美白功能的中药复方的制备方法:
首先取五倍子碳炒20~30分钟,得五倍子碳,取五倍子碳3份、黄柏3份和紫草3份于烘箱干燥过夜,粉碎后过40目筛,备用,然后加入药材量7倍的水,加热回流提取1小时,过滤,滤渣再加入3倍量的水,加热回流提取1小时,合并提取液,过滤,取滤液,浓缩药液,加入95%的乙醇使乙醇浓度为70%,静置淀沉,取滤液,浓缩,加入0.2%-0.3%的活性炭,在80~90℃加热2小时,过滤得到中药提取物和保湿剂、抗氧化剂、表面活性剂、醇类、水等基质成分制备成软膏、乳膏剂、面霜、凝胶、乳液、喷剂或洗面奶。(批号:001)
实施例2
1、具有美白功能的中药复方的原料药:五倍子炭10份、黄柏10份、紫草10份。
2、具有美白功能的中药复方的制备方法:
首先取五倍子碳炒20~30分钟,得五倍子碳,取五倍子碳10份、黄柏10份和紫草10份于烘箱干燥过夜,粉碎后过40目筛,备用,然后加入药材量8倍的水,加热回流提取2小时,过滤,滤渣再加入6倍量的水,加热回流提取1小时,合并提取液,过滤,取滤液,浓缩药液,加入95%的乙醇使乙醇浓度为80%,静置淀沉,取滤液,浓缩,加入0.2%-0.3%的活性炭,在80~90℃加热2小时,过滤得到中药提取物和保湿剂、抗氧化剂、表面活性剂、醇类、水等基质成分制备成软膏、乳膏剂、面霜、凝胶、乳液、喷剂或洗面奶。(批号:002)
实施例3
1、具有美白功能的中药复方的原料药:五倍子炭6份、黄柏6份、紫草6份。
2、具有美白功能的中药复方的制备方法:
首先取五倍子碳炒20~30分钟,得五倍子碳,取五倍子碳6份、黄柏6份和紫草6份于烘箱干燥过夜,粉碎后过40目筛,备用,然后加入药材量10倍的水,加热回流提取1小时,过滤,滤渣再加入6倍量的水,加热回流提取2小时,合并提取液,过滤,取滤液,浓缩药液,加入95%的乙醇使乙醇浓度为70%,静置淀沉,取滤液,浓缩,加入0.2%-0.3%的活性炭,在80~90℃加热2小时,过滤得到中药提取物和保湿剂、抗氧化剂、表面活性剂、醇类、水等基质成分制备成软膏、乳膏剂、面霜、凝胶、乳液、喷剂或洗面奶。(批号:003)
实施例4
1、具有美白功能的中药复方的原料药:五倍子炭8份、黄柏4份、紫草6份。
2、具有美白功能的中药复方的制备方法:
首先取五倍子碳炒20~30分钟,得五倍子碳,取五倍子碳8份、黄柏4份和紫草6份于烘箱干燥过夜,粉碎后过40目筛,备用,然后加入药材量8倍的水,加热回流提取2小时,过滤,滤渣再加入6倍量的水,加热回流提取1小时,合并提取液,过滤,取滤液,浓缩药液,加入95%的乙醇使乙醇浓度为75%,静置淀沉,取滤液,浓缩,加入0.2%-0.3%的活性炭,在80~90℃加热2小时,过滤得到中药提取物和保湿剂、抗氧化剂、表面活性剂、醇类、水等基质成分制备成软膏、乳膏剂、面霜、凝胶、乳液、喷剂或洗面奶。(批号:004)
实施例5 药效学评价
1、B16F10黑素瘤细胞培养及传代
无菌条件下,将细胞接种于含10%胎牛血清的DMEM培养基的培养瓶中,在37℃,体积分数为5%CO2培养箱中培养,每天换液,待细胞融合达80%以上时进行传代,每2~3d用0.25%胰酶消化传代1次,实验用第3~4代细胞。待细胞生长到对数期,用PBS洗涤,0.25%胰酶消化,细胞计数板计数,然后接种至细胞培养板待测。
2、中药复方提取液对B16F10细胞形态的影响
在光镜下观察细胞形态及生长情况,如图1所述,发现正常黑素瘤细胞呈梭形,胞体较大,胞浆丰富,均匀透明,细胞有2~3个树枝状突,突起较短但粗大明显;中药提取液(实施例1制备得到的提取液5和10ug/ml)作用后的B16F10黑素瘤细胞略呈梭形,胞体扁平变薄,胞体增大,胞浆稀薄,部分细胞树突已不明显。当浓度达到(实施例1制备得到的提取液20,40,80ug/ml)后,B16F10黑素瘤细胞呈多角形,胞体缩小,胞浆透明度下降,并随着剂量的增加,存活细胞减少,出现较多细胞间细胞碎片。
3、中药复方提取液对B16F10细胞增殖的影响
通过MTT实验观测本发明提供的中药复方对B16F10黑素瘤细胞增殖的影响,实验药物:本发明实施例1制备得到的中药复方提取液分为4个组,剂量分别为5、10、40、80ug/ml,对照药物:熊果苷,经表1的MTT实验结果表明,中药复方提取液对B16F10细胞增殖有较强的抑制作用,在5~80ug/ml剂量范围内呈较好的正比关系,从给药后24小时后,正常细胞组随着培养时间的延长,细胞活性明显减弱,表明中药复方提取液在对黑素瘤细胞有较强的抑制作用。
表1 中药提取液对B16F10细胞增殖的影响(n=5,
)
与细胞对照组比较*P<0.05,**P<0.01
4、中药复方提取液对B16F10细胞酪氨酸酶活性的影响
4.1实验药物:本发明实施例2制备得到的中药复方提取液分为4个组,剂量分别为5、10、20、40ug/ml,对照药物:熊果苷。
4.2实验步骤:待细胞融合达80%以上时,常规胰酶消化处理后吹打成单细胞悬液,分3瓶加入50ml细胞瓶,培养1天,加入不同浓度的含药单培,每瓶6ml,药物终浓度分别为10,20,40,80ug/ml,培养24h后,发现正常组细胞已满,光镜下观察细胞生长情况,摄片;每瓶细胞加2ml0.25%胰酶消化,细胞皱缩后,加培养液2ml终止消化,吹打使细胞完全脱落均匀分布于培养液,分别加入2个离心管,分别用于检测黑素和酪氨酸酶活性。
离心管于1000r/min,离心5min,弃上清,加入1%Triton X-100溶液1ml,迅速置-80℃冻存1h,随后室温融化使细胞完全破裂,37℃预温后加入0.1%L-DOPA溶液1ml,37℃反应1h,立即于酶标仪490nm波长处测定吸光度(A)值。每一浓度设5个复孔。
4.3实验结果:由表2的实验结果表明,与正常组细胞比较,中药复方提取液作用24小时后,可呈剂量依赖性抑制酪氨酸酶活性,实验结果表明本发明提供的中药复方提取液能显著抑制酪氨酸酶活性,从而能抑制黑素细胞生成,达到很好的美白皮肤的功效。并且由表3的实验结果表明,本发明提供的中药复方提取液与正常组细胞比较,药物作用24小时后,能明显抑制黑素的生成,P<0.01,且呈现很好的剂量依赖性,且比熊果苷的活性更强,进一步证明本发明中药复方提取液具有很好的抑制黑素的生成,能发挥很好的美白功效。
表2 中药复方提取液对B16F10酪氨酸酶活性的影响(n=5,)
与细胞对照组比较*P<0.05,**P<0.01
表3 中药复方提取液对B16F10黑素的影响(n=5,)
与细胞对照组比较*P<0.05,**P<0.01
5、中药复方提取液对B16F10细胞凋亡的影响
5.1实验药物:本发明实施例2制备得到的中药复方提取液分为4个组,剂量分别为5、10、20、40ug/ml。
5.2实验步骤:取对数生长期细胞,常规胰酶消化处理后吹打成单细胞悬液,将细胞浓度调为5*104个/ml,接种于6孔细胞培养板,每孔3ml,待细胞贴壁后,弃去上清液,分别加入含不同浓度药物的培养基,每孔3ml,药物终浓度分别为5,10,20,40ug/ml,继续培养24h后,用流式细胞仪检测细胞凋亡情况,每一浓度设3个复孔。
5.3实验结果:由表4的实验结果表明,本发明提供的中药复方提取液与正常组细胞比较,药物作用24小时后,能明显促进B16F10细胞凋亡,且呈现很好的剂量依赖性,从而能发挥很好的美白功效。
表4 中药提取液对B16F10细胞凋亡的影响(n=3,
)
与细胞对照组比较*P<0.05,**P<0.01
通过以上实验结果表明,本发明提供的中药复方具有很好的抑制酪氨酸酶活性、抑制B16F10细胞黑素生成、抑制B16F10细胞增殖和促进B16F10细胞凋亡的功效,从而能发挥很好的美白功效。
本发明根据中医药理论,采用辨证论治的理论进行配比组方,通过以上实验结果表明,本发明提供的中药复方具有很好的抑制黑色素生成的作用,具有确切的美白功效,且中药复方提取物不含毒性化学物质或重金属,使用安全无副作用,质量稳定,有望开发成新一代的美白制剂。
以上所述仅是本发明的优选实施方式,应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明原理的前提下,还可以做出若干改进和润饰,这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。