CN107667092B - 作为fgfr4抑制剂的甲酰化n-杂环衍生物 - Google Patents
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Abstract
本发明提供式(I)化合物或其药学上可接受盐；制备所述化合物的方法，和其治疗应用。本发明还提供药理活性剂与含所述化合物的药物组合物的组合。
Description
技术领域
本发明提供甲酰化N-杂环化合物，其在抑制FGFR4中的应用以及用所述化合物治疗疾病的方法。
发明背景
正常生长以及组织修复和重建需要特定和精确控制激活生长因子和其受体。成纤维细胞生长因子(FGF)构成具有超过20个结构相关多肽的家族，其由发育调节并在广泛多种组织中表达。FGF刺激增殖、细胞迁移和分化并在骨骼及肢体发育、伤口愈合、组织修复、造血作用、血管生成和肿瘤发生中发挥主要作用(综述参见Ornitz,Novartis Found Symp232:63-76；讨论76-80,272-82(2001))。
FGF的生物作用由特异细胞表面受体调节，该受体属于蛋白激酶的受体蛋白酪氨酸激酶(RPTK)家族。这些蛋白由胞外配体结合域、单一跨膜结构域和胞内酪氨酸激酶结构域组成，胞内酪氨酸激酶结构域在结合FGF后经历磷酸化。迄今已鉴定4个FGFR：FGFR1(也称为Flg、fms-样基因、flt-2、bFGFR、N-bFGFR或Cek1)、FGFR2(也称为Bek-细菌表达激酶-、KGFR、Ksam、Ksaml和Cek3)、FGFR3(也称为Cek2)和FGFR4。所有成熟FGFR共有一个共同结构，其由氨基末端信号肽、3个胞外免疫球蛋白样结构域(Ig结构域I、Ig结构域II、Ig结构域lII)及在Ig结构域之间的酸性区(“酸性盒”结构域)、跨膜结构域和胞内激酶结构域组成(Ullrich和Schlessinger,Cell 61:203,1990；Johnson和Williams(1992)Adv.CancerRes.60:1-41)。不同FGFR同种型对不同FGF配体的结合亲和性不同。
FGFR中的改变与许多人类癌症相关，包括黑素瘤、乳腺癌、胃癌、结肠癌、膀胱癌、胰腺癌和肝细胞癌。近期报道了FGFR4可能特别在肝癌中发挥重要作用(PLoS One,2012,卷7,36713)。其它研究也显示FGFR4或其配体FGF19涉及其它癌症类型，包括乳腺癌、成胶质细胞瘤、***癌、横纹肌肉瘤、胃癌、卵巢癌、肺癌、结肠癌(Int.J.Cancer 1993；54:378-382；Oncogene 2010；29:1543–1552；Cancer Res 2010；70:802-812；Cancer Res 2011；71:4550-4561；Clin Cancer Res 2004；10:6169-6178；Cancer Res 2013；73:2551-2562；ClinCancer Res 2012；18:3780-3790；J.Clin.Invest.2009；119:3395–3407；Ann Surg Oncol2010；17:3354-61；Cancer 2011；117:5304-13；Clin Cancer Res 2013；19:809-820；PNAS2013；110:12426-12431；Oncogene 2008；27:85-97)。
FGF受体的抑制剂是专利申请WO0078731、WO03099796和WO06000420的主题。
更特定地，涉及FGFR4阻断抗体的疗法已描述于例如WO2009/009173、WO2007/136893、WO2012/138975、WO2010/026291、WO2008/052798和WO2010/004204。WO2014/144737和WO2014/011900还描述低分子量FGFR4抑制剂。
发明内容
不断需要开发作为良好药物候选物的新FGFR4抑制剂。这类候选物尤其在癌症治疗中得到应用，特别是治疗肝癌。
本发明提供化合物、其药学上可接受盐、其药物组合物和其组合，所述化合物是FGFR4抑制剂。本发明还提供治疗、预防或改善癌症的方法，包括向需要其的对象给予有效量的FGFR4抑制剂。
本文描述多个本发明实施方式。
在某些方面中，本文提供式(I)化合物或其药学上可接受盐：
在另一个实施方式中，本发明提供药物组合物，包括治疗有效量的式(I)定义所述化合物，或其药学上可接受盐，或其子式(Ia)、(Ib)，以及一种或多种药学上可接受载体。
在另一个实施方式中，本发明提供药物组合物，包括治疗有效量的式(I)定义所述化合物，或其药学上可接受盐，或仅其子式(Ia)、(Ib)。
在另一个实施方式中，本发明提供组合尤其是药物组合，包括治疗有效量的式(I)定义所述化合物，或其药学上可接受盐，或其子式(Ia)、(Ib)，以及一种或多种治疗活性剂。
在另一个实施方式中，本发明涉及抑制对象中FGFR4受体活性的方法，其中所述方法包括向对象给予治疗有效量的如本文所定义的式(I)或其子式(Ia)、(Ib)的化合物，或其药学上可接受盐。
在另一个实施方式中，本发明涉及治疗病症或疾病的方法，所述病症或疾病选自例如肝癌、乳腺癌、成胶质细胞瘤、***癌、横纹肌肉瘤、胃癌、卵巢癌、肺癌或结肠癌，所述方法包括向对象给予治疗有效量的本文所定义式(I)或其子式(Ia)、(Ib)的化合物，或其药学上可接受盐。
发明详述
本发明提供式(I)化合物或其药学上可接受盐
其中
X是N或CH，
A是C(O)且B是NR5或
A和B共同形成部分5-或6-元芳环，其中A是C且B是C或N；
R1选自氢、羟基C1-C3烷基、卤代C1-C3烷基、CO2H、CH2NR2R3、含至少一个选自N、O或S的杂原子的5元芳香杂环，该环任选用C1-C3烷基取代一次或大于一次；
R2是C1-C3烷基且R3是C(O)C1-C3烷基
或
R2和R3和与其结合的N形成饱和5-或6-元环，任选包括一个选自N、O或S的额外杂原子，该环任选用R4取代一次或大于一次；
R4就每一次出现而言独立选自C1-C3烷基、C1-C3烷氧基或在同一碳原子结合的2个R4形成氧代基团；
R5选自氢、C1-C3烷基、C1-C3烷氧基C1-C3烷基、(CH2)0-1-R6；
R6是4-、5-或6元饱和杂环，包括至少一个选自N、O或S的杂原子；
R7选自氰基、卤代C1-C3烷基；
R8选自氢、NR9R10、C1-C6烷氧基；
R9是氢；
R10选自C1-C6烷基、羟基C1-C6烷基、C1-C4烷氧基C1-C6烷基。
除非另有说明，术语“本发明的化合物”或“发明的化合物”指式(I)、(Ia)、(Ib)的化合物和其盐，以及所有立体异构体(包括非对映异构体和对映体)、旋转异构体、互变异构体、同分异构内部加成产物和同位素标记的化合物(包括氘取代)及固有形成的部分。
具体地，式(I)、(Ia)、(Ib)的化合物能容易地形成互变异构体和同分异构内部加成产物，如下所示。
例如，其中R1是羟甲基、CO2H的本发明的化合物如化合物(I-1)或(I-2)可分别采用下示形式(分别为化合物(I-1a)和(I-2a))。
因此，化合物(I–1)、(I–2)和其对应的同分异构体(I–1a)、(I–2a)也形成发明的一部分，其中A、B、X、R7和R8如本文所定义。
互变异构体或同分异构内部加成产物和这些种类之间的平衡混合物的存在能由本领域技术人员用诸如NMR等工具鉴定。
本文所用的术语“C1-C6烷基”指仅由碳和氢原子组成的直链或支链烃链基团，没有不饱和现象，具有1-6个碳原子，其通过单键结合分子的剩余部分。术语“C1-C3烷基”或“C1-C4烷基”能据此解释。C1-C6烷基的示例包括但不限于甲基、乙基、正丙基、1-甲基乙基(异丙基)、正丁基、正戊基和1,1-二甲基乙基(叔丁基)。
本文所用的术语“羟基C1-C6烷基”指式–Ra-OH的基团，其中Ra是如上定义的C1-C6烷基。羟基C1-C6烷基的示例包括但不限于羟基-甲基、2-羟基-乙基、2-羟基-丙基、3-羟基-丙基和5-羟基-戊基。
本文所用的术语“C1-C6烷氧基”指式-ORa的基团，其中Ra是一般如上定义的C1-C6烷基。术语“C1-C3烷氧基”据此解释。C1-C6烷氧基的示例包括但不限于甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、异丁氧基、戊氧基和己氧基。
本文所用的术语“C1-C4烷氧基C1-C6烷基”指式–Rb-O-Ra的基团，其中Ra是C1-C4烷基且Rb是C1-C6烷基，如上所定义。术语“C1-C3烷氧基C1-C3烷基”据此解释。氧原子可与烷基中的任何碳原子键合。C1-C4烷氧基C1-C6烷基的示例包括但不限于甲氧基-甲基、甲氧基-乙基、乙氧基-乙基、1-乙氧基-丙基和2-甲氧基-丁基。
“卤素”或“卤代”指溴、氯、氟或碘。
本文所用的术语“卤素C1-C3烷基”或“卤代C1-C3烷基”指如上定义的C1-C3烷基，被如上定义的一个或多个卤代基团取代。卤素C1-C3烷基的示例包括但不限于三氟甲基、二氟甲基、氟甲基、三氯甲基、2,2,2-三氟乙基、1-氟甲基-2-氟乙基,3-溴-2-氟丙基和1-溴甲基-2-溴乙基。
本文所用的术语“4-、5-或6元饱和杂环，包括至少一个选自N、O或S的杂原子”包括例如但不限于四氢呋喃。
本文所用的术语“饱和5-或6-元环，任选包括一个选自N、O或S的额外杂原子”涉及R2和R3以及其结合的N原子形成所述环的实施方式时，包括例如但不限于吡咯烷、恶唑烷、哌嗪、吗啉、硫代吗啉环。优选地，其包括吡咯烷和哌嗪环。
本文所用的术语“5-或6-元芳环”包括5元杂环芳环，含有一个或多个选自N、O或S的杂原子。示例包括但不限于咪唑、吡唑。其也包括6元碳环芳环例如苯基，或含有一个或多个选自N、O或S的杂原子的杂环芳环，例如吡啶。
本文所用的术语“大于一次”指取代基R4时，包括2、3、4、5或6次。优选地，其包括2或3次。
本文所用的术语“FGFR4”指成纤维细胞生长因子受体4，也称为CD334、JTK2、TKF。
在本发明的一个实施方式中，提供式(Ia)化合物或其药学上可接受盐。
其中
X是N或CH；
R1选自氢、羟基C1-C3烷基、卤代C1-C3烷基、CO2H、CH2NR2R3、含至少一个选自N、O或S的杂原子的5元芳香杂环，该环任选用C1-C3烷基取代一次或大于一次；
R2是C1-C3烷基且R3是C(O)C1-C3烷基
或
R2和R3和与其结合的N形成饱和5-或6-元环，任选包括一个选自N、O或S的额外杂原子，该环任选用R4取代一次或大于一次；
R4就每一次出现而言独立选自C1-C3烷基、C1-C3烷氧基或在同一碳原子结合的2个R4形成氧代基团；
R5选自氢、C1-C3烷基、C1-C3烷氧基C1-C3烷基、(CH2)0-1-R6；
R6是4-、5-或6元饱和杂环，包括至少一个选自N、O或S的杂原子；
R7选自氰基、卤代C1-C3烷基；
R8选自氢、NR9R10、C1-C6烷氧基；
R9是氢；
R10选自C1-C6烷基、羟基C1-C6烷基、C1-C4烷氧基C1-C6烷基。
在本发明的一个实施方式中，提供式(Ia-1)化合物或其药学上可接受盐。
其中
R1选自氢、羟基C1-C3烷基、卤代C1-C3烷基、CO2H、CH2NR2R3、含至少一个选自N、O或S的杂原子的5元芳香杂环，该环可选用C1-C3烷基取代；
R2是C1-C3烷基且R3是C(O)C1-C3烷基
或
R2和R3和与其结合的N形成饱和5-或6-元环，任选包括一个选自N、O或S的额外杂原子，该环任选用R4取代一次或大于一次；
R4就每一次出现而言独立选自C1-C3烷基、C1-C3烷氧基或在同一碳原子结合的2个R4形成氧代基团；
R5选自氢、C1-C3烷基、C1-C3烷氧基C1-C3烷基、(CH2)0-1-R6；
R6是4-、5-或6元饱和杂环，包括至少一个选自N、O或S的杂原子；
R8选自氢、NR9R10、C1-C3烷氧基；
R9是氢；
R10选自C1-C3烷基、羟基C1-C4烷基、C1-C3烷氧基C1-C3烷基。
在本发明的一个实施方式中，提供式(Ib)化合物或其药学上可接受盐。
其中n是0或1；
B是C或N；
D、E、F、G各自独立选自CH或N，只要当n是0时，B、E、F或G中至少一个是N；
X是N或CH；
R1选自氢、羟基C1-C3烷基、卤代C1-C3烷基、CO2H、CH2NR2R3、含至少一个选自N、O或S的杂原子的5元芳香杂环，该环任选用C1-C3烷基取代一次或大于一次；
R2是C1-C3烷基且R3是C(O)C1-C3烷基
或
R2和R3和与其结合的N形成饱和5-或6-元环，任选包括一个选自N、O或S的额外杂原子，该环任选用R4取代一次或大于一次；
R4就每一次出现而言独立选自C1-C3烷基、C1-C3烷氧基或在同一碳原子结合的2个R4形成氧代基团；
R7选自氰基、卤代C1-C3烷基；
R8选自氢、NR9R10、C1-C6烷氧基；
R9是氢；
R10选自C1-C6烷基、羟基C1-C6烷基、C1-C4烷氧基C1-C6烷基。
在本发明的一个实施方式中，提供式(Ib-1)化合物或其药学上可接受盐。
其中
R1选自氢、羟基C1-C3烷基、卤代C1-C3烷基、CO2H、CH2NR2R3、含至少一个选自N、O或S的杂原子的5元芳香杂环，该环任选用C1-C3烷基取代；
R2是C1-C3烷基且R3是C(O)C1-C3烷基
或
R2和R3与其结合的N形成饱和5-或6-元环，任选包括一个选自N、O或S的额外杂原子，该环可选用R4取代一次或大于一次；
R4就每一次出现而言独立选自C1-C3烷基、C1-C3烷氧基或在同一碳原子结合的2个R4形成氧代基团；
R7选自氰基、卤代C1-C3烷基；
R8选自氢、NR9R10、C1-C3烷氧基；
R9是氢；
R10选自C1-C3烷氧基C1-C3烷基、羟基C1-C4烷基、C1-C3烷基。
在本发明的一个实施方式中，提供式(Ib-2)化合物或其药学上可接受盐。
其中
B是C或N；
E、F、G各自独立选自CH或N，只要B、E、F或G中至少一个是N；
R1选自氢、羟基C1-C3烷基、卤代C1-C3烷基、CO2H、CH2NR2R3、含至少一个选自N、O或S的杂原子的5元芳香杂环，该环任选用C1-C3烷基取代；
R2是C1-C3烷基且R3是C(O)C1-C3烷基
或
R2和R3和与其结合的N形成饱和5-或6-元环，任选包括一个选自N、O或S的额外杂原子，该环任选用R4取代一次或大于一次；
R4就每一次出现而言独立选自C1-C3烷基、C1-C3烷氧基或在同一碳原子结合的2个R4形成氧代基团；
R7选自氰基、卤代C1-C3烷基；
R8选自氢、NR9R10、C1-C3烷氧基；
R9是氢；
R10选自C1-C3烷基、羟基C1-C4烷基、C1-C3烷氧基C1-C3烷基。
本文描述本发明的多个列举实施方式。应注意到到每个实施方式中规定的特征可结合其它指定特征以提供本发明的进一步实施方式。
实施方式1.采用游离形式或药学上可接受盐形式的式(I)化合物
其中
X是N或CH，
A是C(O)且B是NR5或
A和B共同形成部分5-或6-元芳环，其中A是C且B是C或N；
R1选自氢、羟基C1-C3烷基、卤代C1-C3烷基、CO2H、CH2NR2R3、含至少一个选自N、O或S的杂原子的5元芳香杂环，该环任选用C1-C3烷基取代一次或大于一次；
R2是C1-C3烷基且R3是C(O)C1-C3烷基
或
R2和R3和与其结合的N形成饱和5-或6-元环，任选包括一个选自N、O或S的额外杂原子，该环任选用R4取代一次或大于一次；
R4就每一次出现而言独立选自C1-C3烷基、C1-C3烷氧基或在同一碳原子结合的2个R4形成氧代基团；
R5选自氢、C1-C3烷基、C1-C3烷氧基C1-C3烷基、(CH2)0-1-R6；
R6是4-、5-或6元饱和杂环，包括至少一个选自N、O或S的杂原子；
R7选自氰基、卤代C1-C3烷基；
R8选自氢、NR9R10、C1-C6烷氧基；
R9是氢；
R10选自C1-C6烷基、羟基C1-C6烷基、C1-C4烷氧基C1-C6烷基。
实施方式2.采用游离形式或药学上可接受盐形式的如实施方式1所述的式(Ia)化合物
实施方式3.采用游离形式或药学上可接受盐形式的如实施方式2所述化合物，其中R5选自C1-C3烷基、(CH2)0-1-R6。
实施方式4.采用游离形式或药学上可接受盐形式的如实施方式1所述的式(Ib)化合物
其中n是0或1；
B是C或N；
D、E、F、G各自独立选自CH或N，只要当n是0时，B、E、F或G中至少一个是N。
实施方式5.采用游离形式或药学上可接受盐形式的如实施方式4所述的化合物，其中n是1，B是C且D、E、F、G都是CH。
实施方式6.采用游离形式或药学上可接受盐形式的如实施方式4所述的化合物，其中n是0且
代表咪唑或吡唑环。
实施方式7.采用游离形式或药学上可接受盐形式的如实施方式1-6中任一项所述的化合物，其中X是CH。
实施方式8.采用游离形式或药学上可接受盐形式的如实施方式1-7中任一项所述的化合物，其中R1是含至少一个选自N、O或S的杂原子的5元芳香杂环，该环任选用C1-C3烷基取代一次或大于一次。
实施方式9.采用游离形式或药学上可接受盐形式的如实施方式1-7中任一项所述的化合物，其中R1是CH2NR2R3。
实施方式10.采用游离形式或药学上可接受盐形式的如实施方式9所述的化合物，其中R2和R3和与其结合的N形成饱和5-或6-元环，任选包括一个选自N、O或S的额外杂原子，该环任选用R4取代一次或大于一次。
实施方式11.如实施方式10所述的化合物或其药学上可接受盐，其中R2和R3和与其结合的N形成吡咯烷或哌嗪环，该环任选用R4取代一次或大于一次。
实施方式12.如实施方式10或11所述的化合物或其药学上可接受盐，其中R4就每一次出现而言独立选自C1-C3烷基或在同一碳原子结合的2个R4形成氧代基团。
实施方式13.如实施方式10-12中任一项所述的化合物或其药学上可接受盐，其中若R4存在，其存在1、2或3次。
实施方式14.如实施方式1-13中任一项所述的化合物，其中R7是氰基。
实施方式15.如实施方式1-14中任一项所述的化合物，其中R8是NR9R10。
实施方式16.如实施方式15所述的化合物，其中R9是氢且R10是C1-C3烷氧基C1-C3烷基。
实施方式17.如实施方式1所述的化合物，所述化合物选自
6-((2-(6-甲酰基吡啶-2-基)苯基)氨基)烟腈；
3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-(6-甲酰基吡啶-2-基)-1-甲基脲；
3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-(6-甲酰基吡啶-2-基)-1-(2-甲氧基乙基)脲；
3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-(6-甲酰基吡啶-2-基)-1-((四氢呋喃-3-基)甲基)脲；
3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-(6-甲酰基-5-(羟甲基)吡啶-2-基)-1-((四氢呋喃-3-基)甲基)脲；
3-(5-氰基-4-异丙氧基吡啶-2-基)-1-(7-羟基-5-氧代-5,7-二氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2-基)-1-甲基脲；
3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-(7-羟基-5-氧代-5,7-二氢呋喃并[3,4-b]吡啶-2-基)-1-甲基脲；
3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-乙基-1-(6-甲酰基-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)脲；
3-(5-氰基-4-(异丙基氨基)吡啶-2-基)-1-乙基-1-(6-甲酰基-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)脲；
3-(5-氰基-4-异丙氧基吡啶-2-基)-1-乙基-1-(6-甲酰基-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)脲；
3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-(6-甲酰基-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-1-甲基脲；
3-(5-氰基-4-(异丙基氨基)吡啶-2-基)-1-(6-甲酰基-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-1-甲基脲；
N-((6-(3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-甲基脲基)-2-甲酰基吡啶-3-基)甲基)-N-甲基乙酰胺；
3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-(5-(二氟甲基)-6-甲酰基吡啶-2-基)-1-甲基脲；
3-(5-氰基-4-异丙氧基吡啶-2-基)-1-(6-甲酰基-5-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)吡啶-2-基)-1-甲基脲；
3-(5-氰基-4-异丙氧基吡啶-2-基)-1-(5-(二氟甲基)-6-甲酰基吡啶-2-基)-1-甲基脲；
3-(5-氰基吡啶-2-基)-1-(6-甲酰基-5-((2-氧代吡咯烷-1-基)甲基)吡啶-2-基)-1-甲基脲3-(5-氰基吡啶-2-基)-1-(6-甲酰基-5-((2-氧代吡咯烷-1-基)甲基)吡啶-2-基)-1-甲基脲；
3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-(6-甲酰基-5-((2-氧代吡咯烷-1-基)甲基)吡啶-2-基)-1-甲基脲；
3-(5-氰基-4-异丙氧基吡啶-2-基)-1-(6-甲酰基-5-((4-甲基-2-氧代哌嗪-1-基)甲基)吡啶-2-基)-1-甲基脲；
3-(5-氰基-4-((2-羟基-2-甲基丙基)氨基)吡啶-2-基)-1-(6-甲酰基-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-1-甲基脲；
3-(5-氰基-4-异丙氧基吡啶-2-基)-1-(6-甲酰基-5-((2-氧代吡咯烷-1-基)甲基)吡啶-2-基)-1-甲基脲；
3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-(6-甲酰基-5-((4-甲基-2-氧代哌嗪-1-基)甲基)吡啶-2-基)-1-甲基脲；
3-(5-氰基-4-异丙氧基吡啶-2-基)-1-(6-甲酰基-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-1-甲基脲；
3-(5-氰基-4-异丙氧基吡啶-2-基)-1-(6-甲酰基-5-((3-甲氧基吡咯烷-1-基)甲基)吡啶-2-基)-1-甲基脲；
6-(2-((4-((2-甲氧基乙基)氨基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基)-1H-咪唑-1-基)-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶甲醛；
6-(5-((4-((2-甲氧基乙基)氨基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶甲醛；
3-(5-氰基-4-异丙氧基吡啶-2-基)-1-(6-甲酰基-5-(吡咯烷-1-基甲基)吡啶-2-基)-1-甲基脲和
1-(5-氰基-4-异丙氧基吡啶-2-基)-3-(4-甲酰基吡啶-2-基)脲。
实施方式18.如实施方式17所述的化合物，所述化合物选自
(R)-3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-(6-甲酰基吡啶-2-基)-1-((四氢呋喃-3-基)甲基)脲和
(S)-3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-(6-甲酰基吡啶-2-yl)-1-((四氢呋喃-3-基)甲基)脲。
实施方式19.一种药物组合物，所述组合物包括如实施方式1-18中任一项所述的化合物或其药学上可接受盐。
实施方式20.一种组合，所述组合包括治疗有效量的如实施方式1-18中任一项所述的化合物或其药学上可接受盐以及一种或多种治疗活性剂。
实施方式21.如实施方式20所述的组合，其特征在于，所述一种或多种治疗活性剂选自抗癌剂。
实施方式22.如实施方式1-18中任一项所述的化合物或其药学上可接受盐，所述化合物或其药学上可接受盐用作药物。
实施方式23.如实施方式1-18中任一项所述的化合物或其药学上可接受盐，所述化合物或其药学上可接受盐用于抑制对象的FGFR4活性。
实施方式24.如实施方式1-18中任一项所述的化合物或其药学上可接受盐，所述化合物或其药学上可接受盐用于治疗对象中可通过抑制FGFR4治疗的病症或疾病。
实施方式25.如实施方式1-18中任一项所述的化合物或其药学上可接受盐，所述化合物或其药学上可接受盐用于治疗选自癌症的病症或疾病。
实施方式26.如实施方式25所述的化合物或其药学上可接受盐，其中所述癌症选自肝癌、乳腺癌、成胶质细胞瘤、***癌、横纹肌肉瘤、胃癌、卵巢癌、肺癌、结肠癌。
实施方式27.如实施方式26所述的化合物或其药学上可接受盐，其中所述癌症是肝癌。
根据起始材料和过程的选择，化合物能以可能的异构体之一或其混合物的形式存在，例如作为纯光学异构体，或作为异构体混合物如外消旋物和非对映异构体混合物，这取决于不对称碳原子数目。本发明意在包括所有这些可能的异构体，包括外消旋混合物、非对映体混合物和光学纯形式。光学活性(R)-和(S)-异构体可用手性合成子或手性试剂制备，或用常规技术拆分。如果化合物包含双键，取代基可以是E或Z构型。如果化合物包含二取代环烷基，环烷基取代基可具有顺式或反式构型。也意在纳入所有互变异构体形式。
本文所用的术语“盐”指本发明化合物的酸加成或碱加成盐。“盐”特别包括“药学上可接受盐”。术语“药学上可接受盐”指保留本发明化合物生物有效性和特性的盐，且其通常不是在生物学或其他方面不合需要的。许多情况下，本发明化合物能通过存在氨基和/或羧基或其中类似基团来形成酸和/或碱盐。
药学上可接受酸加成盐能用无机酸和有机酸形成。能获得盐的无机酸包括例如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等。能获得盐的有机酸包括例如乙酸、丙酸、乙醇酸、草酸、马来酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、甲苯磺酸、磺基水杨酸等。
药学上可接受碱加成盐能用无机碱和有机碱形成。
能获得盐的无机碱包括例如铵盐和元素周期表第I-XII列的金属。在某些实施方式中，所述盐获自钠、钾、铵、钙、镁、铁、银、锌和铜；特别合适的盐包括铵、钾、钠、钙和镁盐。
能获得盐的有机碱包括例如伯、仲和叔胺，取代胺包括天然存在的取代胺、环胺、碱性离子交换树脂等。某些有机胺包括异丙胺、苄星、胆酸盐、二乙醇胺、二乙胺、赖氨酸、葡甲胺、哌嗪和氨丁三醇。
另一方面，本发明提供式(I)、(Ia)或(Ib)的化合物，采用乙酸盐、抗坏血酸盐、己二酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、溴化物/氢溴酸盐、碳酸氢盐/碳酸盐、硫酸氢盐/硫酸盐、樟脑磺酸盐、癸酸盐、氯化物/盐酸盐、氯茶碱盐(chlortheophyllonate)、柠檬酸盐、乙二磺酸盐、富马酸盐、葡庚酸盐、葡糖酸盐、葡糖醛酸盐、谷氨酸盐、戊二酸盐、乙醇酸盐、马尿酸盐、氢碘酸盐/碘化物、羟乙基磺酸盐、乳酸盐、乳糖酸盐、十二烷基硫酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐、甲基硫酸盐、粘酸盐、萘甲酸盐、萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、十八酸盐、油酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、双羟萘酸盐、磷酸盐/磷酸氢盐/磷酸二氢盐、多聚聚半乳糖醛酸盐、丙酸盐、癸二酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、磺基水杨酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、甲苯磺酸盐、三苯乙酸盐、三氟乙酸盐或昔萘酸盐形式。
另一方面，本发明提供式(I)、(Ia)或(Ib)的化合物，采用钠、钾、铵、钙、镁、铁、银、锌、铜、异丙胺、苄星、胆酸盐、二乙醇胺、二乙胺、赖氨酸、葡甲胺、哌嗪或氨丁三醇盐形式。
本文给出的任何公式也意在代表未标记形式以及同位素标记形式的化合物。同位素标记化合物具有本文给出结构式所示结构，除了一个或多个原子被具有选定原子质量或质量数的原子取代。能纳入本发明化合物的同位素示例包括氢、碳、氮、氧、磷、氟和氯的同位素，分别例如2H,3H,11C,13C,14C,15N,18F 31P,32P,35S,36Cl,123I,124I,125I。本发明包括多个如本文定义的同位素标记化合物，例如其中存在放射性同位素的那些，如3H和14C，存在非放射性同位素的那些，如2H和13C。这类同位素标记化合物用于代谢研究(用14C)、反应动力学研究(用例如2H或3H)、检测或成像技术如正电子发射断层成像(PET)或单光子发射计算机断层扫描(SPECT)，包括药物或底物组织分布试验，或用于放射性治疗患者。具体地，18F化合物可能特别适合PET或SPECT研究。式(I)的同位素标记化合物一般能通过本领域技术人员已知常规技术或与所附实施例所述类似过程制备，采用合适的同位素标记试剂取代先前使用的未标记试剂。
此外，用较重同位素特别是氘(即2H或D)取代可提供由更高代谢稳定性引起的某些治疗优势，例如增加体内半衰期或减少剂量需求或改善治疗指数。应理解此背景下的氘被视作式(I)化合物的取代基。这种较重同位素特别是氘的浓度可由同位素富集系数定义。本文所用的术语“同位素富集系数”指同位素丰度与指定同位素天然丰度之比。如果本发明化合物的取代基指氘，这种化合物就各指定氘原子而言的同位素富集系数为至少3500(各指定氘原子处52.5％氘纳入)、至少4000(60％氘纳入)、至少4500(67.5％氘纳入)、至少5000(75％氘纳入)、至少5500(82.5％氘纳入)、至少6000(90％氘纳入)、至少6333.3(95％氘纳入)、至少6466.7(97％氘纳入)、至少6600(99％氘纳入)或至少6633.3(99.5％氘纳入)。
本发明所述药学上可接受溶剂合物包括其中结晶溶剂可被同位素取代的那些，如D2O、d6-丙酮、d6-DMSO。
本发明化合物即式(I)化合物包含能用作氢键供体和/或受体的基团，能够与合适共晶形成体形成共晶。这些共晶可通过已知共晶形成过程制备自式(I)化合物。这类过程包括在结晶条件下研磨、加热、共升华、共熔或在溶液中使式(I)化合物与共晶形成体接触及分离由此形成的共晶。合适的共晶形成体包括描述于WO 2004/078163的那些。因此，本发明进一步提供含式(I)化合物的共晶。例如，本发明提供含式(I)化合物和有机酸如柠檬酸的共晶。
本文所用的术语“药学上可接受载体”包括任何和所有溶剂、分散介质、包衣剂、表面活性剂、抗氧化剂、防腐剂(如抗菌剂、抗真菌剂)、等渗剂、吸收延缓剂、盐、防腐剂、药物稳定剂、粘合剂、赋形剂、崩解剂、润滑剂、增甜剂、调味剂、染料等和其组合，如本领域技术人员已知(参见例如《雷明顿药物科学》(Remington's Pharmaceutical Sciences),第18版.麦克印刷公司(Mack Printing Company),1990,第1289-1329页)。除非任何常规载体与活性成分不相容，否则考虑其在治疗或药物组合物中的应用。
术语“治疗有效量”的本发明化合物指会引起对象生物或医学反应的本发明化合物量，例如减少或抑制酶或蛋白活性、或改善症状、缓解病症、减缓或延迟疾病进展、或预防疾病等。在一个非限制性实施方式中，术语“治疗有效量”指给予对象时对以下有效的本发明化合物量：(1)至少部分缓解、抑制、预防和/或改善病症或病症或疾病，所述病症或病症或疾病(i)由FGFR4调节或(ii)与FGFR4活性相关或(iii)表征为FGFR4活性(正常或异常)，或(2)减少或抑制FGFR4活性；或(3)减少或抑制FGFR4表达。在另一个非限制性实施方式中，术语“治疗有效量”指给予细胞或组织或非细胞生物材料或介质时，对至少部分减少或抑制FGFR4活性有效的本发明化合物量。
本文所用的术语“对象”指动物。所述动物通常是哺乳动物。例如，对象也指灵长类(如人，男性或女性)、牛、绵羊、山羊、马、狗、猫、兔、大鼠、小鼠、鱼、鸟等。在某些实施方式中，所述对象是灵长类。在其它实施方式中，所述对象是人。
本文所用的术语“抑制”、“抑制作用”或“遏制”指降低或遏止给定病征、症状、或病症、或疾病，或者生物活性或过程的基线活性显著减少。
在一个实施方式中，如本文所用，术语任何疾病或病症的“治疗”、“处理”或“疗法”指改善疾病或病症(即减缓或阻滞或减少疾病或其至少一种临床症状的发展)。在另一个实施方式中，“治疗”、“处理”或“疗法”指缓解或改善至少一个物理参数，包括患者可能无法分辨的那些。在另一个实施方式中，“治疗”、“处理”或“疗法”指调节疾病或病症，在物理上(如稳定可分辨的症状)、生理上(如稳定物理参数)或两者兼有。在另一个实施方式中，“治疗”、“处理”或“疗法”指预防或延迟疾病或病症的发生或发展或进展。
如本文所用，如果对象在生物学、医学或生活质量上受益于治疗，则这些对象“需要”这类治疗。
本文所用的术语“一个”、“一种”、“所述”和用于本发明上下文(特别是权利要求上下文)的类似术语应解释为涵盖单数和复数，除非本文另有说明或与上下文明显矛盾。
本文所述的全部方法能以任何合适顺序进行，除非本文另有说明或与上下文明显矛盾。使用本文提供的任何和所有示例或示范性语言(例如“如”)仅意在更好阐明本发明，而不对另外主张保护的发明范围构成限制。
本发明化合物的不对称原子(如碳等)能以外消旋或对映体富集例如(R)-、(S)-或(R,S)-构型存在。在某些实施方式中，各不对称原子具有至少50％对映体过量、至少60％对映体过量、至少70％对映体过量、至少80％对映体过量、至少90％对映体过量、至少95％对映体过量或至少99％对映体过量的(R)-或(S)-构型。若可能，具有不饱和双键的原子处的取代基可以顺式-(Z)-或反式-(E)-形式存在。
因此，本文所用的本发明化合物能以以下之一的形式存在：可能的同分异构体、旋转异构体、阿托异构体、互变异构体或其混合物，例如基本纯几何(顺式或反式)同分异构体、非对映异构体、光学异构体(对映体)、外消旋物或其混合物。
同分异构体的任何所得混合物能在成分的物理化学差异基础上，分成纯或基本纯几何或光学异构体、非对映异构体、外消旋物，例如通过色谱和/或分步结晶。
终产物或中间体的任何所得外消旋物能通过已知方法拆分成旋光对映体，例如通过分离其非对映体盐(用光学活性酸或碱获得)，并释放光学活性酸性或碱性化合物。具体地，碱性部分可因而用于将本发明化合物拆分成其旋光对映体，例如通过分步结晶用光学活性酸形成的盐，光学活性酸如酒石酸、二苯甲酰酒石酸、二乙酰酒石酸、二-O,O'-对甲苯酰酒石酸、二扁桃酸、苹果酸或樟脑-10-磺酸。外消旋产物还能通过手性色谱拆分，如采用手性吸附剂的高压液相色谱(HPLC)。
此外，包括其盐在内的本发明化合物也能以其水合物形式获得，或包括用于其结晶的其它溶剂。本发明化合物可固有地或通过设计与药学上可接受溶剂(包括水)形成溶剂合物；因此，本发明意图涵盖溶剂化和未溶剂化形式。术语“溶剂合物”指本发明化合物(包括其药学上可接受盐)与一种或多种溶剂分子的分子复合体。这种溶剂分子是常用于制药领域的那些，其已知对接受者无害，例如水、乙醇等。术语“水合物”指其中溶剂分子是水的复合体。
本发明化合物的溶剂合物示例如下所示(化合物(I-a)和(I-3a))。
因此，本发明化合物和其溶剂合物如式(I)和(I-3)的化合物及其各溶剂合物(I–a)和(I–3a)，其中A、B、X、R7和R8如本文涉及式(I)化合物所定义，也形成本发明一部分。
溶剂合物的存在能由本领域技术人员用诸如NMR等工具鉴定。
包括其盐、水合物和溶剂合物在内的本发明化合物可固有地或通过设计形成多晶形物。
通常，式(I)化合物具体是式(Ia)和(Ib)的化合物能根据以下提供的方案制备。
方案1
步骤1：式(IV)化合物，其中R1、X和R5如本文涉及式(I)化合物所定义，例如氨基吡啶或相关类似物，用酰化剂(Ar-O-CO-X1，其中X1是离去基团且Ar是芳基，包括例如苯基、对硝基苯基、4-氟苯基、五氟苯基)激活，酰化剂如氯甲酸苯酯或碳酸二苯酯，以产生式(III)的芳基氨基甲酸酯化合物。将式(IV)化合物酰化以制备式(III)的芳基氨基甲酸酯化合物，可在有或没有激活的情况下发生。适当激活的示例是用碱如六甲基二硅基氨基锂去质子化。
步骤2：NH2-杂环，其中R7和R8如本文涉及式(I)化合物所定义，取代式(III)芳基氨基甲酸酯化合物的OAr部分，其中R1、X和R5如本文涉及式(I)化合物所定义，直接或通过激活以产生式(II)化合物，其中R1、R5、R7、R8和X如本文涉及式(I)化合物所定义。适当激活的示例是用碱如六甲基二硅基氨基锂去质子化。
步骤3：式(II)化合物的缩醛保护基团，其中R1、R5、R7、R8和X如本文涉及式(I)化合物所定义，通过酸的水溶液处理来移除以产生式(Ia)化合物，其中R1、R5、R7、R8和X如本文涉及式(I)化合物所定义。捕获释放的醛作为对应的醛亚硫酸氢盐加合物，能用作促进纯化的方式。纯的亚硫酸氢盐加合物能随后分离，例如通过过滤，然后以纯形式释放醛。亚硫酸氢盐加合物形成的合适条件示例是用溶于水的NaHSO3处理。亚硫酸氢盐加合物去保护返回到醛的合适条件示例是用NaHCO3水溶液处理。
方案2
步骤1：式(IV)化合物，其中R1、R5和X如本文涉及式(I)化合物所定义，例如氨基吡啶或相关类似物，与异氰酸盐化合物(杂环-N＝C＝O，其中R7和R8如本文涉及式(I)化合物所定义)或能原位释放异氰酸盐的异氰酸盐等价物反应，以产生式(II)化合物，其中R1、R5、R7、R8和X如本文涉及式(I)化合物所定义。用于制备杂环-N＝C＝O的合适异氰酸盐前体示例包括苯氨基甲酸酯、酰基咪唑、酰基***和氨基甲酰氯。
步骤2：式(II)化合物的缩醛保护基团，其中R1、R5、R7、R8和X如本文涉及式(I)化合物所定义，通过酸的水溶液处理来移除以产生式(Ia)化合物，其中R1、R5、R7、R8和X如本文涉及式(I)化合物所定义。
方案3
步骤1：式(VI)化合物，其中R1、R5和X如本文涉及式(I)化合物所定义，例如溴氨基吡啶或相关类似物，与异氰酸盐化合物(杂环-N＝C＝O，其中R7和R8如本文涉及式(I)化合物所定义)或能原位释放异氰酸盐的异氰酸盐等价物反应，以产生式(V)化合物，其中R1、R5、R7、R8和X如本文涉及式(I)化合物所定义。用于制备杂环-N＝C＝O的合适异氰酸盐前体示例包括苯氨基甲酸酯、酰基咪唑、酰基***和氨基甲酰氯。
步骤2：式(V)化合物，其中R1、R5、R7、R8和X如本文涉及式(I)化合物所定义，经历卤素-金属交换反应以产生2-吡啶有机金属中间体。进行此卤素-金属交换的合适试剂示例包括正丁基锂和叔丁基锂。中间体2-吡啶有机金属物种随后用合适甲酰化试剂如DMF甲酰化，从而引入2-甲酰基并产生式(Ia)化合物，其中R1、R5、R7、R8和X如本文涉及式(I)化合物所定义。
方案4
方案4概括了在式(I)化合物中将R1取代基邻位引入2-甲酰基的方法。
步骤1：式(IV-1)化合物(其中R5和X如本文涉及式(I)化合物所定义)的溴化、碘化或氯化在用合适的溴化、碘化或氯化剂处理后发生，溴化、碘化或氯化剂分别例如N-溴代琥珀酰亚胺,N-碘代琥珀酰亚胺或N-氯代琥珀酰亚胺，以产生式(IV-2)化合物，其中R5和X如本文涉及式(I)化合物所定义。
步骤2：式(IV-3)化合物，其中R5和X如本文涉及式(I)化合物所定义，通过式(IV-2)化合物(其中R5和X如本文涉及式(I)化合物所定义)的卤素-金属交换反应获得，然后是金属化中间体的甲酰化。合适的试剂组合包括正丁基锂和DMF。式(IV-3)化合物，其中R5和X如本文涉及式(I)化合物所定义，能用作上示方案1和2的起始材料。
步骤3和4：式(IV-3)化合物，其中R5和X如本文涉及式(I)化合物所定义，能进一步构建，一个示例是用适当保护基团(PG)来还原和保护伯醇，分别如步骤3和4所概括。用于还原步骤的合适试剂包括NaBH4和B2H6，合适保护基团是三烷基甲硅烷基如叔丁基二甲基硅烷基。受保护的中间体(如式(IV-5)化合物，其中R5和X如本文涉及式(I)化合物所定义)可随后偶联以产生式(Ia)化合物，其中R1、R5、R7、R8和X如本文涉及式(I)化合物所定义，如方案1和2所述。
方案5
步骤1和2：式(IV-2)化合物，其中R5和X如本文涉及式(I)化合物所定义，能转变成对应脲衍生物(式(II-1)化合物，其中R5、R7、R8和X如本文涉及式(I)化合物所定义)，遵循方案1概述的方法。
步骤3：式(II)化合物，其中R1、R5、R7、R8和X如本文涉及式(I)化合物所定义，可根据一系列方法获得，包括例如三氟甲基化或芳基化。合适的三氟甲基化试剂包括：(1,10-菲咯啉)(三氟甲基)铜(I)。合适的芳基化条件包括通过Suzuki或Stille偶联反应。
步骤4：式(II)化合物，其中R1、R5、R7、R8和X如本文涉及式(I)化合物所定义，能随后去保护以产生式(Ia)化合物，其中R1、R5、R7、R8和X如本文涉及式(I)化合物所定义，如方案1和2所述。
方案6
步骤1：如方案4所概述的式(IV-3)化合物，其中R5和X如本文涉及式(I)化合物所定义，能转变成式(IV)化合物，其中R1、R5和X如本文涉及式(I)化合物所定义，转变遵循一些方法，包括例如：用脱氧作用氟化产生R1＝二氟甲基；还原胺化产生R1＝氨甲基，其中氨基可以是伯、仲或叔氨基。在R1是仲氨甲基的情况中，能进行进一步酰化反应以产生叔酰胺，或通过分子内反应产生内酰胺衍生物。用于氟化反应的合适试剂组合包括：DAST或XtalFluor，带有三乙胺三氢氟酸盐。用于还原胺化的合适试剂组合包括：Na(OAc)3BH，带有对应胺或氨基酯。合适的酰化试剂包括：乙酸酐或酯的分子内氨解。
步骤2和3：式(IV)化合物，其中R1、R5和X如本文涉及式(I)化合物所定义，经历尿素生成和去保护以产生式(Ia)化合物，其中R1、R5、R7、R8和X如本文涉及式(I)化合物所定义，如方案1和2所述。
方案1、2、4、5和6的化合物中所示缩醛基团可由其它合适缩醛如二烷基缩醛例如二甲氧基取代。
方案7
步骤1：式(XI)化合物，其中R1和X如本文涉及式(I)化合物所定义，如2-卤代吡啶或相关类似物，与含邻氨基或适当保护的邻氨基或可经受引入邻氨基的合适有机金属芳香族化合物偶联，在诸如Suzuki等反应中，用芳硼酸或芳基硼酸酯，以产生式(X)的联芳基化合物，其中R1、X、n、B、D、E、F和G如本文涉及式(I)化合物所定义且其中PG是保护基团。合适的条件包括用催化剂如PdCl2(PPh3)2和碱如NaHCO3加热，在水与有机溶剂如1,2-二甲氧基乙烷的溶剂混合物中。其它交叉偶联反应如Stille或Negishi偶联也能用于形成式(X)化合物。用于邻氨基的合适氨基保护基团(PG)示例包括：二碳酸二叔丁酯(Boc)、乙酰、羧基苄基(Cbz)。
步骤2：式(IX)化合物，其中R1、X、n、B、D、E、F和G如本文涉及式(I)化合物所定义，能通过去保护式(X)化合物获得，其中R1、X、n、B、D、E、F和G如本文涉及式(I)化合物所定义且其中PG是保护基团。例如，用酸如三氟乙酸处理式(X)化合物，其中PG是Boc，产生式(IX)化合物。
步骤3：式(VIII)化合物，其中R1、R7、R8、X、n、B、D、E、F和G如本文涉及式(I)化合物所定义，通过式(IX)化合物(其中R1、X、n、B、D、E、F和G如本文涉及式(I)化合物所定义)与2-卤素或2-三氟甲烷磺酰吡啶(其中吡啶部分是方案7所示杂环，其中R7和R8如本文涉及式(I)化合物所定义)反应获得，这是在过渡金属催化的偶联反应如Buckwald-Hartwig或Goldberg偶联反应中。合适的条件包括用催化剂如Pd2(dba)3、配体如4,5-双(二苯基膦)-9,9-二甲基氧杂蒽和碱如Cs2CO3在溶剂如1,4-二恶烷中加热。
步骤4：式(VII)化合物，其中R1、R7、R8、X、n、B、D、E、F和G如本文涉及式(I)化合物所定义，通过式(VIII)化合物反应获得，其中R1、X、n、B、D、E、F和G如本文涉及式(I)化合物所定义，这是通过用合适还原剂如LiBH4还原。
步骤5：式(Ib)化合物，其中R1、R7、R8、X、n、B、D、E、F和G如本文涉及式(I)化合物所定义，通过式(VII)化合物反应获得，其中R1、R7、R8、X、n、B、D、E、F和G如本文涉及式(I)化合物所定义，采用合适氧化剂如二氧化锰。
方案8
步骤1：式(XI-1)化合物，其中X如本文涉及式(I)化合物所定义，如3,6-二卤代吡啶或相关类似物，与含邻氨基或可经受引入邻氨基的合适芳香族化合物例如2-氨基咪唑或5-氨基吡唑偶联，在诸如Goldgerg等反应中，以产生式(X-1)的联芳基化合物，其中X、n、B、D、E、F和G如本文涉及式(I)化合物所定义且其中PG是保护基团。合适的条件包括用催化剂如碘化亚铜(I)、配体如8-羟基喹啉和碱如Cs2CO3在溶剂如叔丁醇中加热。
步骤2：式(IX-1)化合物，其中R1、X、n、B、D、E、F和G如本文涉及式(I)化合物所定义，通过式(X-1)化合物与硼酸或硼酸酯衍生物在Suzuki反应中反应来获得，其中X、n、B、D、E、F和G如本文涉及式(I)化合物所定义。其它交叉偶联反应如Stille或Negishi偶联也能用于形成式(IX-1)化合物。合适的条件包括用催化剂如PdCl2(dppf)和碱如Na2CO3加热，在水与有机溶剂如1,2-二甲氧基乙烷的溶剂混合物中。
步骤3：式(VIII-1)化合物，其中R1、R7、R8、X、n、B、D、E、F和G如本文涉及式(I)化合物所定义，通过式(IX-1)化合物(其中R1、X、n、B、D、E、F和G如本文涉及式(I)化合物所定义)与2-卤素或2-三氟甲烷磺酰吡啶(其中吡啶部分是方案8所示杂环，其中R7和R8如本文涉及式(I)化合物所定义)反应获得，这是在过渡金属催化的偶联反应如Buckwald-Hartwig或Goldberg偶联反应中。合适的条件包括用催化剂如Pd2(dba)3、配体如Xantphos和碱如Cs2CO3在溶剂如1,4-二恶烷中加热。
步骤4：式(VIII-1)化合物，其中R1、R7、R8、X、n、B、D、E、F和G如本文涉及式(I)化合物所定义，通过酸的水溶液处理来经历其缩醛基的去保护以产生式(Ib)化合物，其中R1、R7、R8、X、n、B、D、E、F和G如本文涉及式(I)化合物所定义。
另一方面，本发明涉及制备式(I)化合物的过程，具体是式(Ia)化合物，其为游离形式或药学上可接受盐形式，包括以下步骤：
a)将本文定义的式(IV)化合物与合适异氰酸盐化合物偶联以产生本文定义的式(II)化合物；
b)将步骤a)所得如本文定义的式(II)化合物去保护以产生式(I)化合物；
c)回收如此获得的式(I)化合物，其为游离形式或药学上可接受盐形式。
另一方面，本发明涉及制备式(I)化合物的过程，具体是式(Ib)化合物，其为游离形式或药学上可接受盐形式，包括以下步骤：
a)将本文定义的式(XI)化合物与合适氨基芳基化合物偶联以产生本文定义的式(IX)化合物；
b)将本文定义的式(IX)化合物与合适吡啶基化合物偶联以产生本文定义的式(VIII)化合物；
c)式(VIII)化合物转变成式(I)化合物；
d)回收如此获得的式(I)化合物，其为游离形式或药学上可接受盐形式。
本文定义的式(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)、(VII)、(VIII)、(IX)、(X)、(XI)化合物用于制备本发明化合物，如式(I)化合物。因此，一方面，本发明涉及式(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)、(VII)、(VIII)、(IX)、(X)、(XI)化合物或其盐。另一方面，本发明涉及式(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)、(VII)、(VIII)、(IX)、(X)、(XI)化合物或其盐在制备式(I)化合物中的应用。
本发明还包括本过程的任何变体，其中在其任何阶段可获得的中间产物用作起始材料并完成剩余步骤，或其中起始材料在反应条件下原位形成，或其中反应组分以其盐或光学纯材料的形式使用。
本发明化合物和中间体也能根据本领域技术人员一般已知的方法彼此转化。
另一方面，本发明提供药物组合物，包括本发明化合物或其药学上可接受盐，以及药学上可接受载体。在另一方式中，所述组合物包括至少2种药学上可接受载体，如本文所述的那些。出于本发明目的，除非另有指定，溶剂合物和水合物一般被视作组合物。药学上可接受载体优选无菌。药物组合物能配制用于特定给药途径，如口服给药、胃肠外给药和直肠该药等。另外，本发明的药物组合物能以固体形式(包括但不限于胶囊、片剂、药丸、颗粒、粉末或栓剂)或液体形式(包括但不限于溶液、悬液或乳液)制备。药物组合物能经受常规药物操作如灭菌和/或能包含常规惰性稀释剂、润滑剂或缓冲剂以及佐剂如防腐剂、稳定剂、湿润剂、乳化剂和缓冲液等。
通常，药物组合物是片剂或明胶胶囊，包括活性成分以及以下一种或多种：
a)稀释剂，例如乳糖、右旋糖、蔗糖、甘露醇、山梨醇、纤维素和/或甘氨酸；
b)润滑剂，例如二氧化硅、滑石、硬脂酸、其镁或钙盐和/或聚乙二醇；
c)粘合剂，例如硅酸镁铝、淀粉糊、明胶、黄芪胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和/或聚乙烯吡咯烷酮；
d)崩解剂，例如淀粉、琼脂、藻酸或其钠盐、或泡腾混合物；和
e)吸附剂、着色剂、调味料和甜味剂。
在一个实施方式中，所述药物组合物是仅含活性成分的胶囊。
片剂可根据本领域已知方法进行薄膜包衣或肠包衣。
用于口服给药的合适组合物包括有效量的本发明化合物，采用片剂、锭剂、水性或油性悬液、可分散粉末或颗粒、乳液、硬或软胶囊、或糖浆或酏剂、溶液或固态分散液形式。
用于口服应用的组合物根据本领域已知制备药物组合物的任何方法制备且这类组合物能包含一种或多种选自甜味剂、增味剂、着色剂和防腐剂的试剂以提供药学上优良和可口的制品。
片剂可包含活性成分，混合无毒的药学上可接受赋形剂，其适合制备片剂。这些赋形剂是例如惰性稀释剂，如碳酸钙、碳酸钠、乳糖、磷酸钙或磷酸钠；造粒和崩解剂，如玉米淀粉或藻酸；粘合剂，如淀粉、明胶或***胶；和润滑剂，如硬脂酸镁、硬脂酸或滑石。片剂未包衣或通过已知技术包衣以延迟胃肠道中的崩解和吸收并因而在更长时间段提供持续作用。例如，能采用时间延迟材料如单硬脂酸甘油酯或双硬脂酸甘油酯。用于口服应用的制剂能呈现为硬明胶胶囊，其中活性成分与惰性稀释剂混合，如碳酸钙、磷酸钙或高岭土，或呈现为软明胶胶囊，其中活性成分与水或油介质混合，如花生油、液体石蜡或橄榄油。
某些可注射组合物是水性等渗溶液或悬液，且栓剂有利地制备自脂肪乳剂或悬液。所述组合物可无菌和/或包含佐剂，如防腐剂、稳定剂、湿润剂或乳化剂、溶液促进剂、调节渗透压的盐和/或缓冲剂。另外，其也可包含其它治疗上有价值的物质。所述组合物分别根据常规混合、造粒或包衣方法制备，且包含约0.1-75％或包含约1-50％活性成分。
用于透皮应用的合适组合物包括有效量的本发明化合物与合适载体。适合透皮递送的载体包括可吸收的药理上可接受溶剂以协助通过宿主皮肤。例如，透皮装置采用绷带形式，包括支持元件、含化合物以及任选带载体的储库，任选的速度控制屏障从而以受控和预定速度在延长时间段中向宿主皮肤递送化合物，以及把装置缚牢到皮肤的手段。
用于局部应用如到皮肤和眼睛的合适组合物，包括水溶液、悬液、油膏、乳膏、凝胶或可喷射制剂如用于通过气雾剂递送等。这种局部递送***尤其适合皮肤应用，如用于治疗皮肤癌，如预防性用于防晒霜、洗液、喷雾等。因此，其特别适合用于局部，包括本领域熟知的化妆品、制品。这些制剂可包含增溶剂、稳定剂、张力增强剂、缓冲剂和防腐剂。
本文所用的局部应用也可涉及吸入或鼻内应用。其可方便地以来自干粉吸入器的干粉形式(单独，作为混合物例如带乳糖的干混料，或是混合成分颗粒，例如带磷脂质)来递送，或采用来自增压容器、泵、喷雾、喷雾器或雾化器的气溶胶喷雾呈递，用或未使用合适的推进剂。
采用游离形式或药学上可接受盐形式的式(I)化合物显示有价值的药理性质，如FGFR4调节性质，如实施例所提供体外试验所示，并因而指示用于疗法或用作研究化学品，例如作为工具化合物。
特别感兴趣的本发明化合物在本文所述生物测定中具有良好效力。另一方面，其应具有有利的安全性。另一方面，其应具有有利的药代动力学特性。此外，理想的药物候选会采用稳定、不吸潮和易配制的形式。相比其它受体尤其是其它FGF受体如FGFR1、FGFR2和FGFR3，本发明化合物对FGFR4有选择性。因此，本发明涉及作为选择性FGFR4抑制剂的化合物。
关于其作为FGFR4抑制剂的活性，采用游离或药学上可接受盐形式的式(I)化合物用于治疗由FGFR4蛋白活性调节的病症如癌症，或响应(特别指以治疗有益方式)FGFR4抑制的病症，尤其是下文提及的疾病或病症。
本发明化合物可用于治疗癌症。具体地，本发明化合物可用于治疗选自以下的适应症：肝癌、乳腺癌、成胶质细胞瘤、***癌、横纹肌肉瘤、胃癌、卵巢癌、肺癌、结肠癌。
本发明化合物也可用于治疗表征为阳性FGFR4表达的实体恶性肿瘤。
本发明化合物也可用于治疗表征为阳性KLB(β-klotho)表达的实体恶性肿瘤。
本发明化合物也可用于治疗表征为阳性FGF19表达的实体恶性肿瘤。
本发明化合物也可用于治疗表征为阳性FGFR4和阳性KLB表达的实体恶性肿瘤。
本发明化合物也可用于治疗表征为阳性FGFR4和阳性FGF19表达的实体恶性肿瘤。
本发明化合物也可用于治疗表征为阳性FGFR4、阳性KLB和阳性FGF19表达的实体恶性肿瘤。
上述FGFR4、KLB和/或FGF19的任何阳性表达能通过技术人员已知的方法评价，如RT-qPCR、蛋白质印迹、ELISA、免疫组织化学。
表征为阳性FGFR4和KLB表达的实体恶性肿瘤包括例如肝癌。
因此，作为另一实施方式，本发明提供式(I)化合物或其药学上可接受盐在治疗中的应用。在另一实施方式中，所述治疗用于可通过抑制FGFR4治疗的疾病。在另一实施方式中，所述疾病选自上述列表，适当地是肝癌。
因此，作为另一实施方式，本发明提供式(I)化合物或其药学上可接受盐应用于治疗。在另一实施方式中，所述治疗用于可通过抑制FGFR4治疗的疾病。在另一实施方式中，所述疾病选自上述列表，适当地是肝癌。
在另一实施方式中，本发明提供治疗可通过抑制FGFR4治疗的疾病的方法，包括给予治疗上可接受量的式(I)化合物或其药学上可接受盐。在另一实施方式中，所述疾病选自上述列表，适当地是肝癌。
在一个实施方式中，本发明提供抑制对象FGFR4活性的方法，其中所述方法包括向对象给予治疗有效量的权利要求1-5中任一项所述的化合物或其药学上可接受盐。
在一个实施方式中，本发明提供治疗癌症的方法，包括向对象给予治疗有效量的权利要求1-5中任一项所述的化合物或其药学上可接受盐。
因此，作为另一实施方式，本发明提供式(I)化合物或其药学上可接受盐在制备药物中的应用。在另一实施方式中，所述药物用于治疗可通过抑制FGFR4治疗的疾病。在另一实施方式中，所述疾病选自上述列表，适当地是肝癌。
本发明的药物组合物或组合能采用就约50-70kg对象而言约1-1000mg活性成分的单位剂量，或是约1-500mg或约1-250mg或约1-150mg或约0.5-100mg、或约1-50mg活性成分。治疗有效剂量的化合物、药物组合物或其组合取决于对象种类、体重、年龄和个体情况、所治疗病症或疾病或其严重度。掌握普通技术的医生、临床医生或兽医能容易确定预防、治疗或抑制病症或疾病进展所需的各活性成分有效量。
上面引用的剂量性质在体外和体内试验中可验证，有利地使用哺乳动物，如小鼠、大鼠、狗、猴或其分离器官、组织和制品。本发明化合物能以溶液形式如水溶液体外应用，以及肠道、胃肠外、优选静脉内来体内应用，如作为悬液或水溶液。体外剂量范围可以是约10-3摩尔-10-9摩尔浓度。根据给药途径，体内治疗有效量范围可以是约0.1-500mg/kg，约1-100mg/kg。
本发明所述化合物的活性能通过实施例所述体外方法评价。
本发明化合物可与一种或多种其它治疗剂同时，或在其前后给药。本发明化合物可分开给药，通过同一或不同给药途径，或在与其它药剂相同的药物组合物中共同给药。例如，治疗剂是化合物、肽、抗体、抗体片段或核酸，当与本发明化合物联合给予患者时，其具有治疗活性或提高治疗活性。因此，在一个实施方式中，本发明提供组合，包括治疗有效量的式(I)化合物或其药学上可接受盐以及一种或多种治疗活性剂。
在一个实施方式中，本发明提供产品，包括式(I)化合物和至少一种其它治疗活性剂作为联合制剂以同时、分开或依序用于疗法。在一个实施方式中，所述疗法治疗通过FGFR4调节的疾病或病症。作为联合制剂提供的产品包括组合物，其含有式(I)化合物和在同一药物组合物中一起的其它治疗剂，或式(I)化合物和其它治疗剂采用不同形式，如采用药盒形式。
某些情况下，本发明化合物如实施例1-30中任一项所述化合物可联合其它治疗剂，如其它抗癌剂、抗过敏剂、止吐剂(或抗呕剂)、镇痛药、细胞保护剂和其组合。
考虑用于联合疗法的通用化疗剂包括阿那曲唑
比卡鲁胺
硫酸博来霉素
白消安
白消安注射剂
卡培他滨
N4-戊氧基羰基-5-脱氧-5-氟胞嘧啶核苷、卡铂
卡莫司汀
苯丁酸氮芥
顺铂
克拉屈滨
环磷酰胺
阿糖胞苷、胞嘧啶***糖苷
阿糖胞苷脂质体注射剂
达卡巴嗪
更生霉素(放线菌素D、Cosmegan)、盐酸柔红霉素
道诺霉素柠檬酸盐脂质体注射剂
***、多西他赛
盐酸阿霉素
依托泊苷
磷酸氟达拉滨
5-氟尿嘧啶
氟他胺
替扎他滨、吉西他滨(双氟脱氧胞嘧啶核苷)、羟基脲
伊达比星
异环磷酰胺
伊立替康
左旋门冬酰胺酶
甲酰四氢叶酸钙、美法仑
6-巯基嘌呤
氨甲喋呤
米托蒽醌
麦罗塔、紫杉醇
单周蛋白结合型紫杉醇
氟虫双酰胺(phoenix)(Yttrium90/MX-DTPA),、喷司他丁、聚苯丙生20与卡莫司汀植入物
它莫昔芬柠檬酸盐
替尼泊苷
6-硫鸟嘌呤、塞替派、替拉扎明
注射用的盐酸拓扑替康
长春花碱
长春新碱
和长春瑞滨
用于和本发明化合物如实施例1-30中任一项所述化合物组合的特别感兴趣的抗癌剂包括：
-酪氨酸激酶抑制剂如盐酸埃罗替尼
利尼伐尼(N-[4-(3-氨基-1H-吲唑-4-基)苯基]-N'-(2-氟-5-甲基苯基)脲，也称为ABT 869，可获自基因泰克(Genentech))；苹果酸舒尼替尼
博舒替尼(4-[(2,4-二氯-5-甲氧基苯基)氨基]-6-甲氧基-7-[3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙氧基]喹啉-3-甲腈，也称为SKI-606并描述于美国专利号6,780,996)；达沙替尼
帕唑帕尼
索拉非尼
凡德他尼(ZD6474)；和伊马替尼或甲磺酸伊马替尼(
和
)；
-血管内皮生长因子(VEGF)受体抑制剂如贝伐单抗
阿西替尼
丙氨酸布立尼布(BMS-582664,(S)-((R)-1-(4-(4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基氧基)-5-甲基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-6-基氧基)丙烷-2-基)2-氨基丙酸酯)；索拉非尼
帕唑帕尼
苹果酸舒尼替尼
西地尼布(AZD2171,CAS288383-20-1)；尼达尼布(BIBF1120,CAS 928326-83-4)；Foretinib(GSK1363089)；替拉替尼(BAY57-9352,CAS 332012-40-5)；阿帕替尼(YN968D1,CAS 811803-05-1)；伊马替尼
帕纳替尼(AP24534,CAS 943319-70-8)；Tivozanib(AV951,CAS 475108-18-0)；瑞戈非尼(BAY73-4506,CAS 755037-03-7)；瓦他拉尼二盐酸盐(PTK787,CAS 212141-51-0)；布立尼布(BMS-540215,CAS 649735-46-6)；凡德他尼(
或AZD6474)；二磷酸莫替沙尼(AMG706,CAS 857876-30-3,N-(2,3-二氢-3,3-二甲基-1H-吲哚-6-基)-2-[(4-吡啶甲基)氨基]-3-吡啶甲酰胺，描述于PCT公开号WO 02/066470)；多韦替尼二乳酸(TKI258,CAS 852433-84-2)；Linfanib(ABT869,CAS 796967-16-3)；卡博替尼(XL184,CAS849217-68-1)；来他替尼(CAS 111358-88-4)；N-[5-[[[5-(1,1-二甲基乙基)-2-恶唑基]甲基]硫基]-2-噻唑基]-4-哌啶甲酰胺(BMS38703,CAS 345627-80-7)；(3R,4R)-4-氨基-1-((4-((3-甲氧基苯基)氨基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-5-基)甲基)哌啶-3-醇(BMS690514)；N-(3,4-二氯-2-氟苯基)-6-甲氧基-7-[[(3aα,5β,6aα)-八氢-2-甲基环戊并[c]吡咯-5-基]甲氧基]-4-氨基喹唑啉(XL647,CAS 781613-23-8)；4-甲基-3-[[1-甲基-6-(3-吡啶)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基]氨基]-N-[3-(三氟甲基)苯基]-苯甲酰胺(BHG712,CAS 940310-85-0)；和阿柏西普
-血小板衍生生长因子(PDGF)受体抑制剂伊马替尼
利尼伐尼(N-[4-(3-氨基-1H-吲唑-4-基)苯基]-N'-(2-氟-5-甲基苯基)脲，也称为ABT869，可获自基因泰克)；苹果酸舒尼替尼
奎扎替尼(AC220,CAS 950769-58-1)；帕唑帕尼
阿西替尼
索拉非尼
尼达尼布(BIBF1120,CAS928326-83-4)；替拉替尼(BAY57-9352,CAS 332012-40-5)；瓦他拉尼二盐酸盐(PTK787,CAS212141-51-0)；和二磷酸莫替沙尼(AMG706,CAS 857876-30-3,N-(2,3-二氢-3,3-二甲基-1H-吲哚-6-基)-2-[(4-吡啶甲基)氨基]-3-吡啶甲酰胺，描述于PCT公开号WO 02/066470)；
-成纤维细胞生长因子受体(FGFR)抑制剂如丙氨酸布立尼布(BMS-582664,(S)-((R)-1-(4-(4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基氧基)-5-甲基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-6-基氧基)丙烷-2-基)2-氨基丙酸酯)；尼达尼布(BIBF1120,CAS 928326-83-4)；多韦替尼二乳酸(TKI258,CAS 852433-84-2)；3-(2,6-二氯-3,5-二甲氧基-苯基)-1-{6-[4-(4-乙基-哌嗪-1-基)-苯基氨基]-嘧啶-4-基}-1-甲基-脲(BGJ398,CAS 872511-34-7)；达鲁舍替(PHA-739358)；和N-[2-[[4-(二乙基氨基)丁基]氨基]-6-(3,5-二甲氧基苯基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-基]-N'-(1,1-二甲基乙基)-脲(PD173074,CAS 219580-11-7)；
-Aurora激酶抑制剂如达鲁舍替(PHA-739358)；N-[4-[[6-甲氧基-7-[3-(4-吗啉基)丙氧基]-4-喹唑啉基]氨基]苯基]苯甲酰胺(ZM447439,CAS 331771-20-1)；4-(2-氨基-4-甲基-5-噻唑基)-N-[4-(4-吗啉基)苯基]-2-氨基嘧啶(CYC116,CAS 693228-63-6)；陶扎色替(VX680或MK-0457,CAS 639089-54-6)；Alisertib(MLN8237)；(N-{2-[6-(4-环丁基氨基-5-三氟甲基-嘧啶-2-基氨基)-(1S,4R)-1,2,3,4-四氢-1,4-环亚氨基(epiazano)-萘-9-基]-2-氧代-乙基}-乙酰胺)(PF-03814735)；4-[[9-氯-7-(2,6-二氟苯基)-5H-嘧啶并[5,4-d][2]苯并氮杂卓-2-基]氨基]-苯甲酸(MLN8054,CAS 869363-13-3)；Cenisertib(R-763)；巴拉塞替(AZD1152)；和N-环丙基-N'-[3-[6-(4-吗啉基甲基)-1H-苯并咪唑-2-基]-1H-吡唑-4-基]-脲(AT9283)；
-周期蛋白依赖性激酶(CDK)抑制剂如Aloisine A；Alvocidib(也称为夫拉平度或HMR-1275,2-(2-氯苯基)-5,7-二羟基-8-[(3S,4R)-3-羟基-1-甲基-4-哌啶基]-4-苯并吡喃酮并描述于美国专利号5,621,002)；克唑替尼(PF-02341066,CAS 877399-52-5)；2-(2-氯苯基)-5,7-二羟基-8-[(2R,3S)-2-(羟甲基)-1-甲基-3-吡咯烷基]-4H-1-苯并吡喃-4-酮，盐酸盐(P276-00,CAS 920113-03-7)；1-甲基-5-[[2-[5-(三氟甲基)-1H-咪唑-2-基]-4-吡啶基]氧基]-N-[4-(三氟甲基)苯基]-1H-苯并咪唑-2-胺(RAF265,CAS 927880-90-8)；Indisulam(E7070)；Roscovitine)(CYC202)；6-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基)-8H-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮，盐酸盐(PD0332991)；Dinaciclib(SCH727965)；N-[5-[[(5-叔丁基恶唑-2-基)甲基]硫代]噻唑-2-基]哌啶-4-甲酰胺(BMS387032,CAS 345627-80-7)；4-[[9-氯-7-(2,6-二氟苯基)-5H-嘧啶并[5,4-d][2]苯并氮杂卓-2-基]氨基]-苯甲酸(MLN8054,CAS 869363-13-3)；5-[3-(4,6-二氟-1H-苯并咪唑-2-基)-1H-吲唑-5-基]-N-乙基-4-甲基-3-氨甲基吡啶(AG-024322,CAS 837364-57-5)；4-(2,6-二氯苯甲酰氨基)-1H-吡唑-3-羧酸N-(哌啶-4-基)酰胺(AT7519,CAS 844442-38-2)；4-[2-甲基-1-(1-甲基乙基)-1H-咪唑-5-基]-N-[4-(甲磺酰)苯基]-2-氨基嘧啶(AZD5438,CAS 602306-29-6)；帕布昔利布(PD-0332991)；和(2R,3R)-3-[[2-[[3-[[S(R)]-S-环丙基磺亚胺酰基]-苯基]氨基]-5-(三氟甲基)-4-嘧啶基]氧基]-2-丁醇(BAY 10000394)；
-细胞周期检测点激酶(CHK)抑制剂如7-羟基星形孢菌素(UCN-01)；6-溴-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-5-(3R)-3-哌啶-吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-胺(SCH900776,CAS 891494-63-6)；5-(3-氟苯基)-3-脲基噻吩-2-羧酸N-[(S)-哌啶-3-基]酰胺(AZD7762,CAS 860352-01-8)；4-[((3S)-1-氮杂双环[2.2.2]辛烷-3-基)氨基]-3-(1H-苯并咪唑-2-基)-6-氯喹啉-2(1H)-酮(CHIR 124,CAS 405168-58-3)；7-氨基更生霉素(7-AAD)、Isogranulatimide,debromohymenialdisine；N-[5-溴-4-甲基-2-[(2S)-2-吗啉基甲氧基]-苯基]-N'-(5-甲基-2-吡嗪基)脲(LY2603618,CAS 911222-45-2)；萝卜硫素(CAS 4478-93-7,异硫氰酸-4-甲亚硫酰基丁酯)；9,10,11,12-四氢-9,12-环氧-1H-二吲哚[1,2,3-fg:3',2',1'-kl]吡咯并[3,4-i][1,6]苯并二氮芳辛-1,3(2H)-二酮(SB-218078,CAS 135897-06-2)；和TAT-S216A(YGRKKRRQRRRLYRSPAMPENL)、及CBP501((d-Bpa)sws(d-Phe-F5)(d-Cha)rrrqrr)；和(αR)-α-氨基-N-[5,6-二氢-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-氧代-1H-吡咯并[4,3,2-ef][2,3]苯并二氮杂-8-基]-环己烷乙酰胺(PF-0477736)；
-3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶-1(PDK1或PDPK1)抑制剂如7-2-氨基-N-[4-[5-(2-菲基)-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基]苯基]-乙酰胺(OSU-03012,CAS 742112-33-0)；吡咯烷-1-羧酸(3-{5-溴-4-[2-(1H-咪唑-4-基)-乙氨基]-嘧啶-2-基氨基}-苯基)-酰胺(BX912,CAS 702674-56-4)；和4-十二烷基-N-1,3,4-噻二唑-2-基-苯磺酰胺(PHT-427,CAS1191951-57-1)；
-丙酮酸脱氢酶激酶(PDK)抑制剂如(+)-脱氢枞胺；二氯乙酸(DCA)；和Leelamine；
-蛋白激酶B(PKB)或AKT抑制剂如8-[4-(1-氨基环丁基)苯基]-9-苯基-1,2,4-***并[3,4-f][1,6]萘啶-3(2H)-酮(MK-2206,CAS 1032349-93-1)；哌立福辛(KRX0401)；4-十二烷基-N-1,3,4-噻二唑-2-基-苯磺酰胺(PHT-427,CAS 1191951-57-1)；4-[2-(4-氨基-1,2,5-恶二唑-3-基)-1-乙基-7-[(3S)-3-哌啶基甲氧基]-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-4-基]-2-甲基-3-丁炔-2-醇(GSK690693,CAS 937174-76-0)；8-(1-羟乙基)-2-甲氧基-3-[(4-甲氧基苯基)甲氧基]-6H-二苯并[b,d]吡喃-6-酮(palomid 529、P529或SG-00529)；Tricirbine(6-氨基-4-甲基-8-(β-D-呋喃核糖基)-4H,8H-吡咯并[4,3,2-de]嘧啶并[4,5-c]哒嗪)；(αS)-α-[[[5-(3-甲基-1H-吲唑-5-基)-3-吡啶基]氧基]甲基]-苯乙胺(A674563,CAS 552325-73-2)；4-[(4-氯苯基)甲基]-1-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)-4-哌啶胺(CCT128930,CAS 885499-61-6)；4-(4-氯苯基)-4-[4-(1H吡唑-4-基)苯基]-哌啶(AT7867,CAS 857531-00-1)；和Archexin(RX-0201,CAS 663232-27-7)；
-蛋白激酶C(PKC)激活剂如苔藓抑素I(bryo-1)和Sotrastaurin(AEB071)；B-RAF抑制剂如瑞戈非尼(BAY73-4506,CAS 755037-03-7)；Tuvizanib(AV951,CAS 475108-18-0)；威罗非尼(
PLX-4032,CAS 918504-65-1)；Encorafenib(也称为LGX818)；1-甲基-5-[[2-[5-(三氟甲基)-1H-咪唑-2-基]-4-吡啶基]氧基]-N-[4-(三氟甲基)苯基-1H-苯并咪唑-2-胺(RAF265,CAS 927880-90-8)；5-[1-(2-羟乙基)-3-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-4-基]-2,3-二氢茚-1-酮肟(GDC-0879,CAS 905281-76-7)；5-[2-[4-[2-(二甲氨基)乙氧基]苯基]-5-(4-吡啶基)-1H-咪唑-4-基]-2,3-二氢-1H-茚-1-酮肟(GSK2118436或SB590885)；(+/-)-甲基(5-(2-(5-氯-2-甲基苯基)-1-羟基-3-氧代-2,3-二氢-1H-吲哚-1-基)-1H-苯并咪唑-2-基)氨基甲酸酯(也称为XL-281和BMS908662)和N-(3-(5-氯-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-羰基)-2,4-二氟苯基)丙烷-1-磺酰胺(也称为PLX4720)；
-C-RAF抑制剂如索拉非尼
3-(二甲氨基)-N-[3-[(4-羟苯甲酰基)氨基]-4-甲基苯基]-苯甲酰胺(ZM336372,CAS 208260-29-1)；和3-(1-氰基-1-甲基乙基)-N-[3-[(3,4-二氢-3-甲基-4-氧代-6-喹唑啉基)氨基]-4-甲基苯基]-苯甲酰胺(AZ628,CAS1007871-84-2)；
-人粒细胞集落刺激因子(G-CSF)调节剂如非格司亭
苹果酸舒尼替尼
Pegilgrastim
和奎扎替尼(AC220,CAS 950769-58-1)；
-RET抑制剂如苹果酸舒尼替尼
凡德他尼
二磷酸莫替沙尼(AMG706,CAS 857876-30-3,N-(2,3-二氢-3,3-二甲基-1H-吲哚-6-基)-2-[(4-吡啶甲基)氨基]-3-吡啶甲酰胺，描述于PCT公开号WO 02/066470)；索拉非尼(BAY 43-9006)；瑞戈非尼(BAY73-4506,CAS 755037-03-7)；和达鲁舍替(PHA-739358)；
-FMS样酪氨酸激酶3(FLT3)抑制剂或CD135如苹果酸舒尼替尼
奎扎替尼(AC220,CAS 950769-58-1)；N-[(1-甲基-4-哌啶基)甲基]-3-[3-(三氟甲氧基)苯基]-咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-胺硫酸盐(SGI-1776,CAS 1173928-26-1)；和尼达尼布(BIBF1120,CAS928326-83-4)；
-c-KIT抑制剂如帕唑帕尼
多韦替尼二乳酸(TKI258,CAS 852433-84-2)；二磷酸莫替沙尼(AMG706,CAS 857876-30-3,N-(2,3-二氢-3,3-二甲基-1H-吲哚-6-基)-2-[(4-吡啶甲基)氨基]-3-吡啶甲酰胺，描述于PCT公开号WO 02/066470)；马赛替尼
瑞戈非尼(BAY73-4506,CAS 755037-03-7)；Tivozanib(AV951,CAS 475108-18-0)；瓦他拉尼二盐酸盐(PTK787,CAS 212141-51-0)；替拉替尼(BAY57-9352,CAS332012-40-5)；Foretinib(GSK1363089,之前的XL880,CAS 849217-64-7)；苹果酸舒尼替尼
奎扎替尼(AC220,CAS 950769-58-1)；阿西替尼
达沙替尼(BMS-345825)；和索拉非尼
-Bcr/Abl激酶抑制剂如伊马替尼
盐酸尼洛替尼(Inilotinibhydrochloride)；尼洛替尼
达沙替尼(BMS-345825)；博舒替尼(SKI-606)；帕纳替尼(AP24534)；巴氟替尼(INNO406)；达鲁舍替(PHA-739358),AT9283(CAS 1133385-83-7)；塞卡替尼(AZD0530)；和N-[2-[(1S,4R)-6-[[4-(环丁基氨基)-5-(三氟甲基)-2-嘧啶]氨基]-1,2,3,4-四氢萘-1,4-亚氨-9-基]-2-氧代乙基]-乙酰胺(PF-03814735,CAS942487-16-3)；
-IGF-1R抑制剂如Linsitnib(OSI-906)；[7-[反式-3-[(氮杂啶-1-基)甲基]环丁基]-5-(3-苄氧基苯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基]胺(AEW541,CAS 475488-34-7)；[5-(3-苄氧基苯基)-7-[反式-3-[(吡咯烷-1-基)甲基]环丁基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基]胺(ADW742或GSK552602A,CAS 475488-23-4)；(2-[[3-溴-5-(1,1-二甲基乙基)-4-羟苯基]亚甲基]-丙二腈(酪氨酸磷酸化抑制剂AG1024,CAS 65678-07-1)；4-[[(2S)-2-(3-氯苯基)-2-羟乙基]氨基]-3-[7-甲基-5-(4-吗啉基)-1H-苯并咪唑-2-基]-2(1H)-吡啶酮(BMS536924,CAS 468740-43-4)；4-[2-[4-[[(2S)-2-(3-氯苯基)-2-羟乙基]氨基]-1,2-二氢-2-氧代-3-吡啶基]-7-甲基-1H-苯并咪唑-5-基]-1-哌嗪丙腈(BMS554417,CAS 468741-42-6)；(2S)-1-[4-[(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)氨基]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-2-基]-N-(6-氟-3-吡啶基)-2-甲基-2-吡咯烷甲酰胺(BMS754807,CAS 1001350-96-4)；苦鬼臼毒素(AXL1717)；和去甲二氢愈创木酸(Nordihydroguareacetic acid)；
-PIM激酶抑制剂如1,10-二氢吡咯并[2,3-a]咔唑-3-甲醛(DHPCC-9)；N-[(1-甲基-4-哌啶基)甲基]-3-[3-(三氟甲氧基)苯基]-咪唑并[1,2-b]哒嗪-6-胺硫酸盐(SGI-1776,CAS 1173928-26-1)；和CX-6258(描述于ACS Med.Chem.Lett.,2012,3(2),第135–139页)；
-MET抑制剂如Cabozantinib(XL184,CAS 849217-68-1)；Foretinib(GSK1363089,之前的XL880,CAS 849217-64-7)；Tivantinib(ARQ197,CAS 1000873-98-2)；1-(2-羟基-2-甲基丙基)-N-(5-(7-甲氧基喹啉-4-基氧基)吡啶-2-基)-5-甲基-3-氧代-2-苯基-2,3-二氢-1H-吡唑-4-甲酰胺(AMG 458)；克唑替尼(
PF-02341066)；(3Z)-5-(2,3-二氢-1H-吲哚-1-基磺酰基)-3-({3,5-二甲基-4-[(4-甲基哌嗪-1-基)羰基]-1H-吡咯-2-基}亚甲基)-1,3-二氢-2H-吲哚-2-酮(SU11271)；(3Z)-N-(3-氯苯基)-3-({3,5-二甲基-4-[(4-甲基哌嗪-1-基)羰基]-1H-吡咯-2-yl}亚甲基)-N-甲基-2-氧代吲哚啉-5-磺酰胺(SU11274)；(3Z)-N-(3-氯苯基)-3-{[3,5-二甲基-4-(3-吗啉-4-基丙基)-1H-吡咯-2-基]亚甲基}-N-甲基-2-氧代吲哚啉-5-磺酰胺(SU11606)；6-[二氟[6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1,2,4-***并[4,3-b]哒嗪-3-基]甲基]-喹啉(JNJ38877605,CAS 943540-75-8)；2-[4-[1-(喹啉-6-基甲基)-1H-[1,2,3]***并[4,5-b]吡嗪-6-基]-1H-吡唑-1-基]乙醇(PF04217903,CAS 956905-27-4)；N-((2R)-1,4-二恶烷-2-基甲基)-N-甲基-N'-[3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-5-氧代-5H-苯并[4,5]环庚[1,2-b]吡啶-7-基]硫酰胺(MK2461,CAS917879-39-1)；6-[[6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1,2,4-***并[4,3-b]哒嗪-3-基]硫代]-喹啉(SGX523,CAS 1022150-57-7)；和(3Z)-5-[[(2,6-二氯苯基)甲基]磺酰基]-3-[[3,5-二甲基-4-[[(2R)-2-(1-吡咯烷基甲基)-1-吡咯烷基]羰基]-1H-吡咯-2-基]亚甲基]-1,3-二氢-2H-吲哚-2-酮(PHA665752,CAS 477575-56-7)；
-人类表皮生长因子受体2(HER2受体)(也称为Neu,ErbB-2,CD340,or p185)抑制剂如曲妥单抗
帕妥珠单抗
来那替尼(HKI-272,(2E)-N-[4-[[3-氯-4-[(吡啶-2-基)甲氧基]苯基]氨基]-3-氰基-7-乙氧基喹啉-6-基]-4-(二甲氨基)丁-2-烯酰胺，并描述于PCT公开号WO 05/028443)；拉帕替尼或二甲苯磺酸拉帕替尼
(3R,4R)-4-氨基-1-((4-((3-甲氧基苯基)氨基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-5-基)甲基)哌啶-3-醇(BMS690514)；(2E)-N-[4-[(3-氯-4-氟苯基)氨基]-7-[[(3S)-四氢-3-呋喃基]氧基]-6-喹唑啉基]-4-(二甲氨基)-2-丁烯酰胺(BIBW-2992,CAS 850140-72-6)；N-[4-[[1-[(3-氟苯基)甲基]-1H-吲唑-5-基]氨基]-5-甲基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-6-基]-氨基甲酸,(3S)-3-吗啉基甲酯(BMS 599626,CAS 714971-09-2)；卡纽替尼二盐酸盐(PD183805或CI-1033)；和N-(3,4-二氯-2-氟苯基)-6-甲氧基-7-[[(3aα,5β,6aα)-八氢-2-甲基环戊[c]吡咯-5-基]甲氧基]-4-氨基喹唑啉(XL647,CAS 781613-23-8)；
-表皮生长因子受体(EGFR)抑制剂如盐酸埃罗替尼
吉非替尼
N-[4-[(3-氯-4-氟苯基)氨基]-7-[[(3”S”)-四氢-3-呋喃基]氧基]-6-喹唑啉基]-4(二甲氨基)-2-丁烯酰胺,
)；Vandetanib
拉帕替尼
(3R,4R)-4-氨基-1-((4-((3-甲氧基苯基)氨基)吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-5-基)甲基)哌啶-3-醇(BMS690514)；卡纽替尼二盐酸盐(CI-1033)；6-[4-[(4-乙基-1-哌嗪基)甲基]苯基]-N-[(1R)-1-苯乙基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺(AEE788,CAS 497839-62-0)；木利替尼(TAK165)；培利替尼(EKB569)；阿法替尼(BIBW2992)；来那替尼(HKI-272)；N-[4-[[1-[(3-氟苯基)甲基]-1H-吲唑-5-基]氨基]-5-甲基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-6-基]-氨基甲酸,(3S)-3-吗啉基甲酯(BMS599626)；N-(3,4-二氯-2-氟苯基)-6-甲氧基-7-[[(3aα,5β,6aα)-八氢-2-甲基环戊[c]吡咯-5-基]甲氧基]-4-氨基喹唑啉(XL647,CAS781613-23-8)；和4-[4-[[(1R)-1-苯乙基]氨基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-基]-苯酚(PKI166,CAS 187724-61-4)；
-Hedgehog拮抗剂如维莫德吉(2-氯-N-[4-氯-3-(2-吡啶基)苯基]-4-(甲磺酰)-苯甲酰胺,GDC-0449，并描述于PCT公开号WO 06/028958)；1-(4-氯-3-(氟苯基)苯基)-3-((3-(4-氟苯基)-3,4-二氢-4-氧代-2-喹唑啉基)甲基)-脲(CAS 330796-24-2)；N-[(2S,3R,3'R,3aS,4'aR,6S,6'aR,6'bS,7aR,12'aS,12'bS)-2',3',3a,4,4',4'a,5,5',6,6',6'a,6'b,7,7',7a,8',10',12',12'a,12'b-二十氢-3,6,11',12'b-四甲基螺[呋喃并[3,2-b]吡啶-2(3H),9'(1'H)-萘并[2,1-a]薁]-3'-基]-甲烷磺酰胺(IPI926,CAS 1037210-93-7)；4-氟-N-甲基-N-[1-[4-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-1-酞嗪基]-4-哌啶基]-2-(三氟甲基)-苯甲酰胺(LY2940680,CAS 1258861-20-9)；和索尼德吉(LDE225)；
-mTOR抑制剂如替西罗莫司
地磷莫司(正式称为deferolimus,(1R,2R,4S)-4-[(2R)-2[(1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28Z,30S,32S,35R)-1,18-二羟基-19,30-二甲氧基-15,17,21,23,29,35-六甲基-2,3,10,14,20-戊氧代-11,36-二氧杂-4-氮杂三环[30.3.1.04,9]三十六烷-16,24,26,28-四烯-12-基]丙基]-2-甲氧基环己基二甲基次磷酸酯，也称为AP23573和MK8669并描述于PCT公开号WO 03/064383)；依维莫司(
或RAD001)；雷帕霉素(AY22989,
)；Simapimod(CAS 164301-51-3)；(5-{2,4-二[(3S)-3-甲基吗啉-4-基]吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-基}-2-甲氧基苯基)甲醇(AZD8055)；2-氨基-8-[反式-4-(2-羟乙氧基)环己基]-6-(6-甲氧基-3-吡啶基)-4-甲基-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(PF04691502,CAS 1013101-36-4)；N2-[1,4-二氧代-4-[[4-(4-氧代-8-苯基-4H-1-苯并吡喃-2-基)吗啉-4-基]甲氧基]丁基]-L-精氨酰甘氨酰-L-α-天门冬氨酰L-丝氨酸-,内盐(SF1126,CAS 936487-67-1)；N-[4-[[[3-[(3,5-二甲氧基苯基)氨基]-2-喹喔啉基]氨基]磺酰基]苯基]-3-甲氧基-4-甲基-苯甲酰胺(XL765,也称为SAR245409)；和(1R,4R)-4-(4-氨基-5-(7-甲氧基-1H-吲哚-2-基)咪唑并[1,5-f][1,2,4]三嗪-7-基)环己烷羧酸(OSI-027)；
-磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)抑制剂如4-[2-(1H-吲唑-4-基)-6-[[4-(甲磺酰)哌嗪-1-基]甲基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-yl]吗啉(也称为GDC 0941并描述于PCT公开号WO09/036082和WO 09/055730)；2-甲基-2-[4-[3-甲基-2-氧代-8-(喹啉-3-基)-2,3-二氢咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基]苯基]丙腈(也称为BEZ235或NVP-BEZ 235并描述于PCT公开号WO06/122806)；4-(三氟甲基)-5-(2,6-二吗啉嘧啶-4-基)吡啶-2-胺(也称为BKM120或NVP-BKM120并描述于PCT公开号WO2007/084786)；陶扎色替(VX680或MK-0457,CAS 639089-54-6)；(5Z)-5-[[4-(4-吡啶基)-6-喹啉]亚甲基]-2,4-噻唑烷二酮(GSK1059615,CAS 958852-01-2)；(1E,4S,4aR,5R,6aS,9aR)-5-(乙酰氧基)-1-[(二-2-丙烯基氨基)亚甲基]-4,4a,5,6,6a,8,9,9a-八氢-11-羟基-4-(甲氧基甲基)-4a,6a-二甲基-环戊并[5,6]萘并[1,2-c]吡喃-2,7,10(1H)-三酮(PX866,CAS 502632-66-8)；8-苯基-2-(吗啉-4-基)-色满-4-酮(LY294002,CAS 154447-36-6)；2-氨基-8-乙基-4-甲基-6-(1H-吡唑-5-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(SAR 245409或XL 765)；1,3-二氢-8-(6-甲氧基-3-吡啶基)-3-甲基-1-[4-(1-哌嗪基)-3-(三氟甲基)苯基]-2H-咪唑并[4,5-c]喹啉-2-酮,(2Z)-2-丁烯二酸酯(1:1)(BGT 226)；5-氟-3-苯基-2-[(1S)-1-(9H-嘌呤-6-基氨基)乙基]-4(3H)-喹唑啉酮(CAL101)；2-氨基-N-[3-[N-[3-[(2-氯-5-甲氧基苯基)氨基]喹喔啉-2-基]氨磺酰]苯基]-2-甲基丙酰胺(SAR 245408或XL 147)；和(S)-吡咯烷-1,2-二羧酸2-酰胺1-({4-甲基-5-[2-(2,2,2-三氟-1,1-二甲基-乙基)-吡啶-4-基]-噻唑-2-基}-酰胺)(BYL719)；
-Bcl-2蛋白家族抑制剂如4-[4-[[2-(4-氯苯基)-5,5-二甲基-1-环己烯-1-基]甲基]-1-哌嗪基]-N-[[4-[[(1R)-3-(4-吗啉基)-1-[(苯硫基)甲基]丙基]氨基]-3-[(三氟甲基)磺酰]苯基]磺酰]苯甲酰胺(也称为ABT-263并描述于PCT公开号WO 09/155386)；四制癌素A；抗霉素；棉子酚((-)BL-193)；Obatoclax；乙基-2-氨基-6-环戊基-4-(1-氰基-2-乙氧基-2-氧代乙基)-4H色酮-3-羧酸酯(HA14–1)；奥利默森(G3139,
)；Bak BH3肽；(-)-乙酸棉子酚(AT-101)；4-[4-[(4'-氯[1,1'-二苯基]-2-基)甲基]-1-哌嗪基]-N-[[4-[[(1R)-3-(二甲基氨基)-1-[(苯硫基)甲基]丙基]氨基]-3-硝基苯基]磺酰]-苯甲酰胺(ABT-737,CAS 852808-04-9)；和Navitoclax(ABT-263,CAS 923564-51-6)；
-丝裂原活化蛋白激酶(MEK)抑制剂如XL-518(也称为GDC-0973,Cas号1029872-29-4,可获自ACC公司(ACC Corp.))；司美替尼(5-[(4-溴-2-氯苯基)氨基]-4-氟-N-(2-羟乙氧基)-1-甲基-1H-苯并咪唑-6-甲酰胺，也称为AZD6244或ARRY 142886，描述于PCT公开号WO2003077914)；Benimetinib(6-(4-溴-2-氟苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-羟乙基氧基)-酰胺，也称为MEK162,CAS 1073666-70-2，描述于PCT公开号WO2003077914)；2-[(2-氯-4-碘苯基)氨基]-N-(环丙基甲氧基)-3,4-二氟-苯甲酰胺(也称为CI-1040或PD184352并描述于PCT公开号WO2000035436)；N-[(2R)-2,3-二羟基丙氧基]-3,4-二氟-2-[(2-氟-4-碘苯基)氨基]-苯甲酰胺(也称为PD0325901并描述于PCT公开号WO2002006213)；2,3-二[氨基[(2-氨基苯基)硫代]亚甲基]-丁二腈(也称为U0126并描述于US专利号2,779,780)；N-[3,4-二氟-2-[(2-氟-4-碘苯基)氨基]-6-甲氧基苯基]-1-[(2R)-2,3-二羟基丙基]-环丙磺酰胺(也称为RDEA119或BAY869766并描述于PCT公开号WO2007014011)；(3S,4R,5Z,8S,9S,11E)-14-(乙氨基)-8,9,16-三羟基-3,4-二甲基-3,4,9,19-四氢-1H-2-苯并氧杂环十四稀-1,7(8H)-二酮(也称为E6201并描述于PCT公开号WO2003076424)；2’-氨基-3’-甲氧基黄酮(也称为PD98059，可获自德国的Biaffin GmbH&Co.,KG)；威罗非尼(PLX-4032,CAS 918504-65-1)；(R)-3-(2,3-二羟基丙基)-6-氟-5-(2-氟-4-碘苯基氨基)-8-甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-4,7(3H,8H)-二酮(TAK-733,CAS 1035555-63-5)；Pimasertib(AS-703026,CAS 1204531-26-9)；二甲基亚砜曲美替尼(GSK-1120212,CAS 1204531-25-80)；2-(2-氟-4-碘苯基氨基)-N-(2-羟乙氧基)-1,5-二甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-甲酰胺(AZD 8330)；和3,4-二氟-2-[(2-氟-4-碘苯基)氨基]-N-(2-羟乙氧基)-5-[(3-氧代-[1,2]氧杂-2-基)甲基]苯甲酰胺(CH 4987655或Ro 4987655)；
-P38MAPK抑制剂如奥安替尼(TSU-68,CAS 252916-29-3)；度马莫得(Dilmapimod)(SB681323,CAS 444606-18-2)；6-[(氨基羰基)(2,6-二氟苯基)氨基]-2-(2,4-二氟苯基)-3-吡啶甲酰胺(VX702)；8-苯基-2-(吗啉-4-基)-色满-4-酮(LY294002,CAS 154447-36-6)；4-[4-(4-氟苯基)-2-[4-(甲基亚磺酰基)苯基]-1H-咪唑-5-基]-吡啶(SB203580,CAS152121-47-6)；4-[4-(4-氟苯基)-2-[4-(甲基亚磺酰基)苯基]-1H-咪唑-5-基]-吡啶(SB203580,CAS 152121-47-6)；反式-4-[4-(4-氟苯基)-5-(2-甲氧基-4-嘧啶基)-1H-咪唑-1-基]-环己醇(SB 239063,CAS 193551-21-2)；6-(4-氟苯基)-2,3-二氢-5-(4-吡啶基)-咪唑并[2,1-b]噻唑(SKF 86002,CAS 72873-74-6)；5-(2,6-二氯苯基)-2-[(2,4-二氟苯基)硫代]-6H-嘧啶并[1,6-b]哒嗪-6-酮(VX745,CAS 209410-46-8)；他匹莫德(SCIO469,CAS 309913-83-5)；1-[4-[3-(4-氯苯基)-4-(4-嘧啶基)-1H-吡唑-5-基]-1-哌啶基]-2-羟基-乙酮(SD0006,CAS 1184301-42-5)；度马莫得(SB681323,CAS 444606-18-2)；3-溴-4-[(2,4-二氟苄基)氧基]-1-[5-[(甲基氨基)羰基]-2-甲基苯基]-6-甲基吡啶-2(1H)-酮(PH797804,CAS 586379-66-0)；4-[[5-[(环丙氨基)羰基]-2-甲基苯基]氨基]-5-甲基-N-丙基-吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-6-甲酰胺(BMS-582949,CAS 623152-17-0)；吡莫德(R1503,CAS 449811-01-2)；2-[(六氢环戊[c]吡咯-2(1H)-基)氨基]-8-甲基-6-(2-甲基苯基)-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(AW814141,CAS 905285-51-0)；4-[5-(4-氟苯基)-2-(甲硫基)-1H-咪唑-4-基]-N-(1-苯乙基)-2-氨基吡啶,(9CI)(ML 3403)；和rel-6-氯-5-[[(2R,5S)-4-[(4-氟苯基)甲基]-2,5-二甲基-1-哌嗪基]羰基]-N,N,1-三甲基-α-氧代-1H-吲哚-3-乙酰胺(SCIO 282和SD 282)；
-JAK抑制剂如鲁索替尼
托法替尼(CP690550)；阿西替尼(AG013736,CAS 319460-85-0)；5-氯-N2-[(1S)-1-(5-氟-2-嘧啶)乙基]-N4-(5-甲基-1H-吡唑-3-基)-2,4-二氨基嘧啶(AZD1480,CAS 935666-88-9)；(9E)-15-[2-(1-吡咯烷基)乙氧基]-7,12,26-三氧杂-19,21,24-三氮杂四环[18.3.1.12,5.114,18]-廿六碳-1(24),2,4,9,14,16,18(25),20,22-壬烯(SB-1578,CAS 937273-04-6)；Momelotinib(CYT 387)；巴瑞克替尼(INCB-028050或LY-3009104)；帕克替尼(SB1518)；(16E)-14-甲基-20-氧杂-5,7,14,27-四氮杂四环[19.3.1.12,6.18,12]二十七-1(25),2,4,6(27),8,10,12(26),16,21,23-葵烯(SB 1317)；Gandotinib(LY 2784544)；N,N-环丙基-4-[(1,5-二甲基-1H-吡唑-3-基)氨基]-6-乙基-1,6-二氢-1-甲基-咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-7-甲酰胺(BMS911543)；
-烷化剂如奥沙利铂
替莫唑胺(
和
)；更生霉素(也称为放线菌素-D,
)；美法仑(也称为L-PAM,L-溶肉瘤素和苯丙氨酸氮芥,
)；六甲三聚氰胺(也称为六甲蜜胺(HMM),
)；卡莫司汀
苯达莫司汀
白消安(
和
)；卡铂
洛莫司汀(也称为CCNU,
)；顺铂(也称为CDDP,
和
-AQ)；苯丁酸氮芥
环磷酰胺(
和
)；达卡巴嗪(也称为DTIC、DIC和咪唑甲酰胺,DTIC-
)；六甲三聚氰胺(也称为六甲蜜胺(HMM),
；异环磷酰胺
Prednumustine；甲基苄肼
二氯甲基二乙胺(也称为氮芥、盐酸氮芥和二氯甲基二乙胺盐酸盐,
)；链脲菌素
噻替派(也称为硫代磷酰胺、TESPA和TSPA,
)；环磷酰胺(
)；和苯达莫司汀HCl
-芳香酶抑制剂如依西美坦
来曲唑
和阿那曲唑
-拓扑异构酶I抑制剂如伊立替康
盐酸拓扑替康
和7-乙基-10-羟基喜树碱(SN38)；
-拓扑异构酶II抑制剂如依托泊苷(VP-16和磷酸依托泊苷,
和
)；替尼泊苷(VM-26,
)；和Tafluposide；
-DNA合成抑制剂如卡培他滨
盐酸吉西他滨
奈拉滨((2R,3S,4R,5R)-2-(2-氨基-6-甲氧基-嘌呤-9-基)-5-(羟甲基)氧戊环-3,4-二醇,
和
)；和Sapacitabine(1-(2-氰基-2-脱氧-β-D-***呋喃)-4-(棕榈酰氨基)嘧啶-2(1H)-酮)；
-叶酸拮抗剂或叶酸拮抗物如三甲曲沙葡糖醛酸酯
羟乙基磺酸吡曲克辛(BW201U)；培美曲塞(LY231514)；雷替曲塞
和氨甲蝶呤
-免疫调节剂如阿夫土珠(可获自
)；乙二醇化非格司亭
来那度胺(CC-5013,
)；萨力多胺
Actimid(CC4047)；和IRX-2(人细胞因子混合物，包括白介素1、白介素2和干扰素γ,CAS 951209-71-5,可获自IRX治疗公司(IRX Therapeutics))或例如一种或多种共刺激分子的活化剂(如以下一种或多种的激动剂：OX40,CD2,CD27,CDS,ICAM-1,LFA-1(CD11a/CD18),ICOS(CD278),4-1BB(CD137),GITR,CD30,CD40,BAFFR,HVEM,CD7,LIGHT,NKG2C,SLAMF7,NKp80,CD160,B7-H3或CD83配体)，或例如一种或多种免疫检查点分子抑制剂(如以下一种或多种的抑制剂：PD-1,PD-L1,PD-L2,CTLA4,TIM3,LAG3,VISTA,BTLA,TIGIT,LAIR1,CD160,2B4和/或TGFRβ)；
-促凋亡受体激动剂(PARA)，包括DR4(TRAILR1)和DR5(TRAILR2)如杜拉乐明(AMG-951,RhApo2L/TRAIL)；马帕木单抗(HRS-ETR1,CAS 658052-09-6)；来沙木单抗(HGS-ETR2,CAS 845816-02-6)；Apomab
可那木单抗(AMG655,CAS 896731-82-1)；和替加珠单抗(CS1008,CAS 946415-34-5,可获自第一三共株式会社(Daiichi Sankyo))；
-磷脂酶A2(PLA2)抑制剂如曼诺力得；E-(3-乙酰胺-1-苄基-2-乙基吲哚基-5-氧基)丙烷磺酸(LY311727)；阿那格雷
甲基花生四烯基氟代膦酸酯(MAFP)；花生四烯酸三氟甲基酮(AACOCF3)；(E)-6-(1-溴乙亚胺)四氢-3-(1-萘乙烯)-2H-吡喃-2-酮(溴烯醇内酯或BEL)；R-溴烯醇内酯(R-BEL)；S-溴烯醇内酯(S-BEL)；二异丙基氟化磷酸酯(DFP)；苯甲基磺酰氟(PMSF)；和Pefabloc(CAS 34284-75-8,4-[2-氨乙基]苯磺酰氟化物)；SRC抑制剂如达沙替尼
塞卡替尼(AZD0530,CAS 379231-04-6)；博舒替尼(SKI-606,CAS 380843-75-4)；5-[4-[2-(4-吗啉基)乙氧基]苯基]-N-(苯基甲基)-2-吡啶乙酰胺(KX2-391,CAS 897016-82-9)；和4-(2-氯-5-对甲氧苯胺基)-6-甲氧基-7-(1-甲基哌啶-4-基甲氧基)喹唑啉(AZM475271,CAS 476159-98-5)；
-破骨细胞性骨吸收抑制剂如唑来膦酸
伊班膦酸盐
阿仑膦酸钠
利塞膦酸盐(
和
)；和三氧化矿物凝聚体(MTA)；
-G蛋白偶联生长抑素受体抑制剂如奥曲肽(也称为醋酸奥曲肽,
和Sandostatin
)；醋酸兰瑞肽(CAS 127984-74-1)；司格列肽(MK678)；醋酸伐普肽
和Cyclo(D-Trp-Lys-Abu-Phe-MeAla-Tyr)(BIM23027)；
-白介素-11和合成白介素-11(IL-11)如奥普瑞白介素
红细胞生成素和合成红细胞生成素如红细胞生成素(
和
)；阿法达贝泊汀
聚乙二醇肽
和EPO共价连接聚乙二醇
-核因子κB受体活化剂(RANK)抑制剂如狄诺塞麦(
和
)；血小板生成素模拟肽体如罗米司亭
细胞生长刺激物如帕利夫明
红细胞生成素(
和
)；阿法达贝泊汀
Peginesatide
和EPO共价连接聚乙二醇
-组蛋白去乙酰化酶(HDAC)抑制剂如Voninostat
罗咪酯肽
Treichostatin A(TSA)；Oxamflatin；伏立诺他(
辛二酰苯胺异羟肟酸)；Pyroxamide(syberoyl-3-氨基吡啶酰胺异羟肟酸)；Trapoxin A(RF-1023A)；Trapoxin B(RF-10238)；环[(αS,2S)-α-氨基-η-氧代-2-环氧乙烷辛酰-O-甲基-D-酪氨酰-L-异亮氨酰-L-脯氨酰](Cyl-1)；环[(αS,2S)-α-氨基-η-氧代-2-环氧乙烷辛酰-O-甲基-D-酪氨酰-L-异亮氨酰-(2S)-2-哌啶羰基](Cyl-2)；环[L-丙氨酰-D-丙氨酰-(2S)-η-氧代-L-α-氨基环氧乙烷辛酰-D-脯氨酰](HC-毒素)；环[(αS,2S)-α-氨基-η-氧代-2-环氧乙烷辛酰-D-苯丙氨酰-L-亮氨酰-(2S)-2-哌啶羰基](WF-3161)；Chlamydocin((S)-环(2-甲基丙氨酰-L-苯丙氨酰-D-脯氨酰-η-氧代-L-α-氨基环氧乙烷辛酰)；Apicidin(环(8-氧代-L-2-氨基癸酰-1-甲氧基-L-色氨酰-L-异亮氨酰-D-2-哌啶羰基)；罗咪酯肽(
FR-901228)；4-苯基丁酸；Spiruchostatin A；Mylproin(丙戊酸)；恩替诺特(MS-275,N-(2-氨基苯基)-4-[N-(吡啶-3-基-甲氧基羰基)-氨基-甲基]-苯甲酰胺)；和Depudecin(4,5:8,9-双酐-1,2,6,7,11-五脱氧-D-threo-D-ido-十一烷-1,6-二烯醇)；
-生物反应调节剂包括疗剂如干扰素、白介素、集落刺激因子、单克隆抗体、疫苗(治疗性和预防性)、基因疗法以及非特异免疫调节剂如干扰素α
干扰素β；干扰素γ；白介素-2(IL-2或阿地白介素,
)；非格司亭
沙格司亭
红细胞生成素(依泊亭)；白介素-11(奥普瑞白介素)；咪喹莫特
来那度胺
利妥昔单抗
曲妥单抗
卡介苗(
和
BCG)；左旋咪唑
和地尼白介素(Denileukin diftitox)
-抗肿瘤抗生素如阿霉素(
和
)；博来霉素
柔红霉素(盐酸柔红霉素、道诺霉素和盐酸红比霉素,
)；柔红霉素脂质体(柔红霉素柠檬酸盐脂质体,
)；米托蒽醌(DHAD,
)；表柔比星(EllenceTM)；伊达比星(
Idamycin
)；丝裂霉素C
格尔德霉素；除莠霉素；近灰霉素；和脱乙酰近灰霉素|；
-抗微管或抗有丝***剂如长春花生物碱(如酒石酸长春瑞滨
长春新碱
和长春地辛
)；紫杉烷(如紫杉醇和多西他赛)；和雌氮芥
植物生物碱如紫杉醇(Taxol和OnxalTM)；紫杉醇蛋白结合
长春花碱(也称为硫酸长春碱、长春花碱和VLB,Alkaban-
及
)；长春新碱(也称为硫酸长春新碱、LCR和VCR,
及Vincasar
)；和长春瑞滨
-紫杉烷抗肿瘤剂如紫杉醇
多西他赛
卡巴他赛(
1-羟基-7β,10β-二甲氧基-9-氧代-5β,20-环氧紫杉烷-11-烯-2α,4,13α-三基-4-乙酸酯-2-苯甲酸酯-13-[(2R,3S)-3-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}-2-羟基-3-苯基丙酸酯)；和莱龙太素((2α,3ξ,4α,5β,7α,10β,13α)-4,10-二(乙酰氧基)-13-({(2R,3S)-3-[(叔丁氧基羰基)氨基]-2-羟基-3-苯基丙酰基}氧基)-1-羟基-9-氧代-5,20-环氧-7,19-环紫杉烷-11-烯-2-基苯甲酸酯)；组织蛋白酶K抑制剂如奥当卡替(MK-0822,N-(1-氰基环丙基)-4-氟-N2-{(1S)-2,2,2-三氟-1-[4'-(甲磺酰)联苯-4-基]乙基}-L-亮氨酰胺并描述于PCT公开号WO 03/075836)；巴利卡替(N-(1-((氰甲基)氨甲酰基)环己基)-4-(4-丙基哌嗪-1-基)苯甲酰胺,AAE581,CAS 354813-19-7)；和Relacatib(SB-462795,CAS 362505-84-8)；
-埃坡霉素B类似物如伊沙匹隆
帕土匹龙(EP0906)；沙戈匹隆(CAS305841-29-6)；和21-氨基埃坡霉素B(BMS-310705,CAS 280578-49-6)；热休克蛋白(HSP)抑制剂如坦螺旋霉素(17-烯丙基氨基-17-去甲氧格尔德霉素，也称为KOS-953和17-AAG，可获自西格玛(SIGMA)并描述于美国专利号4,261,989)；瑞他霉素(IPI504),Ganetespib(STA-9090)；[6-氯-9-(4-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-2-基甲基)-9H-嘌呤-2-基]胺(BIIB021或CNF2024,CAS 848695-25-0)；反式-4-[[2-(氨基羰基)-5-[4,5,6,7-四氢-6,6-二甲基-4-氧代-3-(三氟甲基)-1H-吲唑-1-基]苯基]氨基]环己基甘氨酸酯(SNX5422或PF04929113,CAS 908115-27-5)；5-[2,4-二羟基-5-(1-甲基乙基)苯基]-N-乙基-4-[4-(4-吗啉基甲基)苯基]-3-异恶唑甲酰胺(AUY922,CAS 747412-49-3)；和17-二甲基氨乙基氨基-17-去甲氧格尔德霉素(17-DMAG)；法尼酰转移酶抑制剂(FTI)如替吡法尼(R115777,
)；洛那法尼(SCH66336)；[2S-[1[R*(R*)],2R*(S*),3R*]]-2-[[2-[[2-[(2-氨基-3-巯丙基)氨基]-3-甲戊基]氧基]-1-氧代-3-苯丙基]氨基]-4-(甲磺酰)-丁酸,1-甲基乙基酯(L-744832,CAS 160141-09-3)；和(R)-2,3,4,5-四氢-1-(1H-咪唑-4-基甲基)-3-(苯基甲基)-4-(2-噻吩磺酰)-1H-1,4-苯二氮杂-7-腈(BMS-214662,CAS 195987-41-8)；
-血小板生成素(TpoR)激动剂如艾曲波帕(SB497115,
和
)；和罗米司亭
-蛋白酶体抑制剂如硼替佐米
枸橼酸艾沙佐米(MLN9708,CAS1201902-80-8)；丹诺普韦(RG7227,CAS 850876-88-9)；艾沙佐米(MLN2238,CAS 1072833-77-2)；和(S)-N-[(苯基甲氧基)羰基]-L-亮氨酰-N-(1-甲酰-3-甲基丁基)-L-亮氨酰胺(MG-132,CAS 133407-82-6)；
-纺锤体驱动蛋白(KSP)抑制剂(也称为Eg5抑制剂)如Monastrol(乙基4-(3-羟苯基)-6-甲基-2-亚硫烷基-3,4-二氢-1H-嘧啶-5-羧酸酯)；伊斯平斯(SB715992)；(2S)-4-(2,5-二氟苯基)-N-[(3R,4S)-3-氟-1-甲基-4-哌啶基]-2,5-二氢-2-(羟甲基)-N-甲基-2-苯基-1H-吡咯-1-甲酰胺(MK-0731,CAS 845256-65-7)；Litronesib(LY2523355,CAS910634-41-2)；和(2S)-2-(3-氨丙基)-5-(2,5-二氟苯基)-N-甲氧基-N-甲基-2-苯基-1,3,4-噻二唑-3(2H)-甲酰胺(ARRY520)；和9-环戊基-7,9-二氢-2-[[2-甲氧基-4-[(1-甲基-4-哌啶基)氧基]苯基]氨基]-7-甲基-8H-嘌呤-8-酮(AZ 3146)；
-Polo样激酶(Plk)抑制剂如(R)-4-[(8-环戊基-7-乙基-5,6,7,8-四氢-5-甲基-6-氧代-2-蝶啶基)氨基]-3-甲氧基-N-(1-甲基-4-哌啶基)苯甲酰胺(BI2536,CAS 755038-02-9)；渥曼青霉素；桑色素；槲皮素；Volasertib(BI6727)；8-苯基-2-(吗啉-4-基)-色满-4-酮(LY294002)；5-[6-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]-1H-苯并咪唑-1-基]-3-[[(1R)-1-[2-(三氟甲基)苯基]乙基]氧基]-噻吩-2-甲酰胺(GSK461364)；(E)-4-[2-[2-[N-乙酰-N-[(p-甲氧基苯基)磺酰基]氨基]苯基]乙烯基]吡啶1-氧化物(HMN214)；和Rigosertib(ON01910)；
-肾上腺类固醇抑制剂如氨鲁米特
曲洛司坦
和米托坦
-抗雄激素如尼鲁米特(
和
)；比卡鲁胺
甲地孕酮
醋酸环丙孕酮
和氟他米特(FulexinTM或
)；亮丙瑞林
Foserelin
曲普瑞林(Trelstar
)；阿巴瑞克
和非那雄胺(
或MK-906)；
-促蛋白合成类固醇如氟***
羟甲烯龙(Anadrol
)氧雄龙
和康力龙
-蛋白酶体抑制剂如硼替佐米
卡非佐米(PX-171-007,(S)-4-甲基-N-((S)-1-(((S)-4-甲基-1-((R)-2-甲基环氧乙烷-2-基)-1-氧代戊烷-2-基)氨基)-1-氧代-3-苯基丙烷-2-基)-2-((S)-2-(2-吗啉代乙酰氨基)-4-苯基丁酰胺基)-戊酰胺)；Marizomib(NPI-0052)；枸橼酸艾沙佐米(MLN-9708)；Delanzomib(CEP-18770)；和O-甲基-N-[(2-甲基-5-噻唑基)羰基]-L-丝氨酰-O-甲基-N-[(1S)-2-[(2R)-2-甲基-2-环氧乙烷基]-2-氧代-1-(苯基甲基)乙基]-L-丝氨酰胺(ONX-0912)；
-促性腺素释放激素(GnRH)受体激动剂如亮丙瑞林或醋酸亮丙瑞林(
和
)；布舍瑞林
那法瑞林
组氨瑞林(Supprelin
或
)；戈舍瑞林
德舍瑞林
地加瑞克
和曲普瑞林
-HPV疫苗如人***状瘤病毒(HPV)疫苗(
(ATC代码J07BM02)和
(ATC代码J07BM01)；
-铁螯合剂如水飞蓟宾；姜黄色素；乙二胺四乙酸(EDTA)；Triapine(3-氨基吡啶-2-甲醛缩氨基硫脲)；二-2-吡啶酮缩氨基硫脲；二-2-吡啶酮-4,4,-二甲基-3-缩氨基硫脲；去铁敏；和地拉罗司
-抗代谢物如克拉屈滨(2-氯脱氧腺苷,
)；5-氟尿嘧啶
6-硫鸟嘌呤
培美曲塞
阿糖孢苷(也称为阿糖胞嘧啶(Ara-C),
)；阿糖胞苷脂质体(也称为脂质体Ara-C,DepoCytTM)；地西他滨
羟基脲(
DroxiaTM和MylocelTM)；氟达拉滨
氟尿苷
氨甲蝶呤(也称为甲氨蝶呤、甲氨蝶呤钠(MTX)；
和TrexallTM)；喷司他丁
雷替曲塞
和普拉曲沙(FolotynTM)；
-双磷酸盐如帕米磷酸二钠
唑来膦酸或唑来膦酸盐
阿仑膦酸钠
利塞膦酸盐
和伊班膦酸盐
-去甲基化制剂如5-氮杂胞苷
和地西他滨
-类维生素A如阿利维A酸(9-顺维甲酸,
)；维甲酸(全反式维甲酸，也称为ATRA,
)；异维甲酸(13-顺维甲酸,
和
)；蓓萨罗丁
脂质体视黄酸；他扎罗汀
全反式视黄醇；全反式视醛(也称为全反式视黄醛)；全反式4-氧代-维甲酸；棕榈酸视黄酯；和视黄醇乙酸酯；
-细胞因子如白介素-2(也称为阿地白介素和IL-2,
)；白介素-11(也称为奥普瑞白介素(oprevelkin),
)；和Alpha干扰素α(也称为IFN-α,
A和
)；
-***受体下调剂如氟维司群
-抗***如它莫西芬
托瑞米芬
和氟维司群
-选择性***受体调节剂(SERM)如雷洛昔芬
巴多昔芬；它莫西芬
和托瑞米芬
-***释放激素(LHRH)激动剂如戈舍瑞林
和醋酸亮丙瑞林
-孕酮如甲地孕酮(也称为醋酸甲地孕酮,
)；17α-羟化酶/C17,20裂解酶(CYP17A1)抑制剂如醋酸阿比特龙
-混杂细胞毒性剂如三氧化二砷
天冬酰胺酶(也称为L-天冬酰胺酶、欧文氏菌属L-天冬酰胺酶,
和
)；和菊欧文氏菌天冬酰胺酶
-C-C趋化因子受体4(CCR4)抗体如莫加珠单抗
CD20抗体如利妥昔单抗(
和
)；和托西莫单抗
和奥法木单抗
-CD20抗体药物偶联物如替伊莫单抗
和托西莫单抗；
-CD22抗体药物偶联物如奥英妥珠单抗(也称为CMC-544和WAY-207294，可获自杭州尚杰化工有限公司(Hangzhou Sage Chemical Co.,Ltd.))；
-CD30mAb-细胞毒素偶联物如布妥昔单抗
-CD33抗体药物偶联物如吉妥珠单抗奥唑米星
-CD40抗体如达西珠单抗(也称为SGN-40或huS2C6，可获自西雅图遗传学公司(Seattle Genetics,Inc))；
-CD52抗体如阿仑单抗
-抗CS1抗体如埃罗妥珠单抗(HuLuc63,CAS号915296-00-3)；
-CTLA-4抗体如曲美木单抗(IgG2单克隆抗体，可获自辉瑞(Pfizer),之前称为替昔木单抗(ticilimumab),CP-675,206)；
-和易普利姆玛(CTLA-4抗体，也称为MDX-010,CAS号477202-00-9)；
-p53-MDM2抑制剂如(S)-1-(4-氯-苯基)-7-异丙氧基-6-甲氧基-2-(4-{甲基-[4-(4-甲基-3-氧代-哌嗪-1-基)-反式-环己基甲基]-氨基}-苯基)-1,4-二氢-2H-异喹啉-3-酮,(S)-5-(5-氯-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢-吡啶-3-基)-6-(4-氯-苯基)-2-(2,4-二甲氧基-嘧啶-5-基)-1-异丙基-5,6-二氢-1H-吡咯并[3,4-d]咪唑-4-酮,[(4S,5R)-2-(4-叔丁基-2-乙氧苯基)-4,5-二(4-氯苯基)-4,5-二甲基咪唑-1-基]-[4-(3-甲基磺酰丙基)哌嗪-1-基]甲酮(RG7112),4-[[(2R,3S,4R,5S)-3-(3-氯-2-氟苯基)-4-(4-氯-2-氟苯基)-4-氰基-5-(2,2-二甲丙基)吡咯烷-2-羰基]氨基]-3-甲氧基苯甲酸(RG7388),SAR299155,2-((3R,5R,6S)-5-(3-氯苯基)-6-(4-氯苯基)-1-((S)-1-(异丙基磺酰)-3-甲基丁烷-2-基)-3-甲基-2-氧代派啶-3-基)乙酸(AMG232),{(3R,5R,6S)-5-(3-氯苯基)-6-(4-氯苯基)-1-[(2S,3S)-2-羟基-3-戊烷基]-3-甲基-2-氧代-3-派啶}乙酸(AM-8553),(±)-4-[4,5-二(4-氯苯基)-2-(2-异丙氧基-4-甲氧基-苯基)-4,5-二氢-咪唑-1-羰基]-哌嗪-2-酮(Nutlin-3),2-甲基-7-[苯基(苯氨基)甲基]-8-喹啉醇(NSC 66811),1-N-[2-(1H-吲哚-3-基)乙基]-4-N-吡啶-4-基苯-1,4-二胺(JNJ-26854165),4-[4,5-二(3,4-氯苯基)-2-(2-异丙氧基-4-甲氧基-苯基)-4,5-二氢-咪唑-1-羧基]-哌嗪-2-酮(Caylin-1),4-[4,5-二(4-三氟甲基-苯基)-2-(2-异丙氧基-4-甲氧基-苯基)-4,5-二氢-咪唑-1-羧基]-哌嗪-2-酮(Caylin-2),5-[[3-二甲氨基)丙基]氨基]-3,10-二甲基嘧啶并[4,5-b]喹啉-2,4(3H,10H)-二酮二盐酸盐(HLI373)和反式-4-碘代-4′-硼烷-查耳酮(SC204072)；
-p53活化剂。
一些患者可能在给药期间或之后经历对本发明化合物和/或其它抗癌剂的过敏反应；因此，通常施用抗过敏药以尽可能减少过敏反应风险。合适的抗过敏药包括皮质类固醇如***(例如
)、倍氯米松(例如
)、氢化可的松(也称为可的松、氢化可的松琥珀酸钠、氢化可的松磷酸钠，并以商品名
氢化可的松磷酸盐、
Hydrocort
和
销售)、***龙(以商品名
和
销售)、强的松(以商品名
Liquid
和
销售)、甲基***龙(也称为6-甲基***龙、甲基***龙醋酸酯、甲基***龙琥珀酸钠，以商品名
和
销售)；抗组胺药如苯海拉明(例如
)、羟嗪和赛庚啶；和支气管扩张剂如β肾上腺素受体激动剂、沙丁胺醇(例如
)和特布他林
一些患者可能在本发明化合物和/或其它抗癌剂给药期间或之后经历恶心；因此，抗呕剂用于预防恶心(胃底)和呕吐。合适的抗呕剂包括阿瑞匹坦
昂丹司琼
格拉司琼HCl
劳拉西泮
***
普鲁氯嗪
卡索匹坦
和其组合。
通常处方缓解治疗期间所经历疼痛的药物以使患者更舒适。通常使用常见非处方镇痛药，如
然而，阿片类镇痛药物如氢可酮/醋氨酚或氢可酮/对乙酰氨基酚(例如
)、***(例如
)、氧可酮(例如
)、盐酸羟***酮
和芬太尼(例如
)也用于中等到严重疼痛。
在保护正常细胞免于治疗毒性和限制器官毒性的努力中，细胞保护剂(如神经保护剂、自由基清除剂、心脏保护剂、蒽环类药物外渗中和剂、营养物等)可用作辅助疗法。合适的细胞保护剂包括氨磷汀
谷氨酰胺、地美司钠
美司钠
右丙亚胺
扎利罗登
和甲酰四氢叶酸(也称为甲酰四氢叶酸钙、嗜橙菌因子和亚叶酸)。
由代码、通用或商品名识别的活性化合物结构可获自现行版本的标准纲要“默克索引(Merck Index)”或数据库，如国际专利(Patents International)(例如IMS世界出版物(IMS World Publications))。
可与本发明化合物组合的上述化合物能如本领域所述制备和给药，例如上面引用文献所述。
在一个实施方式中，本发明提供药物组合物，包括至少一种本发明化合物(如本文所述实施例1-30中任一项所述化合物)或其药学上可接受盐以及适合给予人或动物对象的药学上可接受载体，单独或与其它抗癌剂一起，例如上面所述的那些。
在一个实施方式中，本发明提供治疗人或动物对象的方法，所述对象需要这类治疗，包括向对象给予治疗有效量的本发明化合物(如本文所述实施例1-30中任一项所述化合物)或其药学上可接受盐，单独或联合其它抗癌剂。
具体地，组合物共同配制作为联合疗法或分开给药。
在联合疗法中，本发明化合物和其它抗癌剂可同时、同步或没有特定时间限制地依序给药，其中这类给药在患者体内提供治疗有效水平的2种化合物。
在一个优选的实施方式中，本发明化合物和其它抗癌剂一般以任何顺序通过输注或口服依序给予。给药方案可根据疾病阶段、患者身体状态、个体药物的安全性和个体药物耐受性以及给予该组合的主治医生和医师熟知的其它标准而变化。本发明化合物和其它抗癌剂可在彼此给药数分钟、数小时、数日或甚至数周内给予，这取决于用于治疗的特定周期。另外，周期能包括在治疗周期内给予一种药物远密集于另一种，并且每次给药采用不同剂量。
在本发明的另一方面，提供药盒，包括一种或多种本发明化合物和本文公开的组合伴侣。代表性药盒包括(a)本发明化合物或其药学上可接受盐，(b)至少一种组合伴侣例如上面所示，其中这种药盒可包括包装说明书或其它标签，包括给药指南。
本发明化合物也可有利地与已知治疗过程联用，例如给予激素或尤其是辐射。本发明化合物可具体用作放射致敏剂，尤其用于治疗显示对放疗敏感性弱的肿瘤。
在一个实施方式中，本发明提供药物组合物，包括式(I)化合物和另一治疗剂。可选地，药物组合物能包括药学上可接受载体，如上所述。
在一个实施方式中，本发明提供含2种或更多单独药物组合物的药盒，其中至少一种包含式(I)化合物。在一个实施方式中，所述药盒包括分开保留所述组合物的方式，如容器、分开的瓶或分开的铝箔包。这类药盒示例是罩板包装，如常用于包装片剂、胶囊等。
本发明药盒可用于给予不同剂型，例如口服和胃肠外，从而以不同剂量间隔给予单独组合物，或针对另一组合物滴定不同组合物。为促进依从性，本发明药盒一般包括给药指南。
在本发明的联合疗法中，本发明化合物和其它治疗剂可由相同或不同厂商制备和/或配制。此外，本发明化合物和其它治疗剂可整合形成联合疗法：(i)将组合产品交给医生前(如在药盒包括本发明化合物和其它治疗剂的情况中)；(ii)临给药前由医生自己完成(或在医生指导下)；(iii)患者自身，如在本发明化合物和其它治疗剂依序给药期间。
因此，本发明提供式(I)化合物在治疗由FGFR4调节的疾病或病症中的应用，其中制备所述药物以与另一治疗剂一起给药。本发明还提供另一治疗剂在治疗由FGFR4调节的疾病或病症中的应用，所述药物与式(I)化合物一起给药。
本发明也提供式(I)化合物，用于治疗由FGFR4所调节疾病或病症的方法，其中制备式(I)化合物以与另一治疗剂一起给药。本发明还提供另一治疗剂，用于治疗由FGFR4所调节疾病或病症的方法，其中制备另一治疗剂以与式(I)化合物一起给药。本发明还提供式(I)化合物，用于治疗由FGFR4所调节疾病或病症的方法，其中式(I)化合物与另一治疗剂一起给药。本发明还提供另一治疗剂，用于治疗由FGFR4所调节疾病或病症的方法，其中另一治疗剂与式(I)化合物一起给药。
本发明也提供式(I)化合物在治疗由FGFR4调节的疾病或病症中的应用，其中所述患者之前(如24小时内)用另一治疗剂治疗。本发明还提供另一治疗剂在治疗由FGFR4调节的疾病或病症中的应用，其中所述患者之前(如24小时内)用式(I)化合物治疗。
在一个实施方式中，所述另一治疗剂选自抗癌剂。
下列实施例旨在阐明本发明，而不被解释为对其的限制。温度以摄氏度给出。如果没有另外说明，所有蒸发在减压下进行，通常是约15mm Hg-100mm Hg(＝20-133mbar)。终产品、中间体和起始材料的结构通过标准分析方法确认，如微量分析和光谱特性，例如MS、IR、NMR。所用缩写是本领域常规的那些。
用于合成本发明化合物的所有起始材料、构件、试剂、酸、碱、脱水剂、溶剂和催化剂可市售获得或能通过本领域普通技术人员已知的有机合成法生成。此外，本发明化合物能通过本领域普通技术人员已知的有机合成法生成，如以下实施例所示。
缩写
分析细节
NMR:测量在Bruker UltrashieldTM 400(400MHz),Bruker UltrashieldTM 600(600MHz),400MHz DRX Bruker CryoProbe(400MHz)或500MHz DRX Bruker CryoProbe(500MHz)光谱仪上进行，使用或不用三甲基硅烷作为内标。化学位移(d值)以来自四甲基硅烷的ppm低磁场报告，光谱裂分图谱命名为单峰(s)、双峰(d)、三峰(t)、四峰(q)、多重峰、未分辨或更重叠信号(m)、宽信号(br)。溶剂在括号内给出。
UPLC-MS 1:
***:Waters Acquity UPLC，带有Waters SQ检测器。
柱:Acquity HSS T3 1.8μm 2.1x50mm。
流动:1.2ml/min。柱温:50℃。
梯度:1.4min中从2到98％B,A＝水+0.05％甲酸+3.75mM醋酸铵,B＝乙腈+0.04％甲酸。
UPLC-MS 3:
***:Waters Acquity UPLC，带有Waters SQ检测器。
柱:Acquity HSS T3 1.8μm 2.1x50mm。
流动:1.0ml/min。柱温:60℃。
梯度:1.4min中从5到98％B,A＝水+0.05％甲酸+3.75mM醋酸铵,B＝乙腈+0.04％甲酸。
UPLC-MS 5:
***:Waters Acquity UPLC，带有Waters SQ检测器。
柱:Sunfire C18 3.5μm 2.1x20mm。
流动:0.62ml/min。柱温:40℃。
梯度:4min中从5到100％B,A＝水+0.1％三氟乙酸,B＝乙腈+0.1％三氟乙酸。
UPLC-MS 6:
***:Waters Acquity Ultra Performance，带有Waters SQ检测器。
柱:Acquity HSS T3 1.8μm 2.1x50mm。
流动:1.0ml/min。柱温:60℃。
梯度:1.4min中从5到98％B,A＝水+0.05％甲酸+3.75mM醋酸铵,B＝乙腈+0.04％甲酸。
UPLC-MS 7:
***:Waters Acquity Ultra Performance，带有Waters SQ检测器。
柱:Acquity HSS T3 1.8μm 2.1x50mm。
流动:1.0ml/min。柱温:60℃。
梯度:1.4min中从5到98％B,A＝水+0.05％甲酸+3.75mM醋酸铵,B＝乙腈+0.04％甲酸。
UPLC-MS 8:
***:Waters Acquity Ultra Performance，带有Waters SQ检测器。
柱:Acquity HSS T3 1.8μm 2.1x50mm。
流动:1.4ml/min。柱温:60℃。
梯度:1.4min中从1到98％B,A＝水+0.05％甲酸+3.75mM醋酸铵,B＝乙腈+0.04％甲酸。
制备方法
快速色谱***:
***:Teledyne ISCO,CombiFlash Rf。
柱:预先包装的
Rf筒。
样品吸收于Isolute HM-N
上或硅胶上，或应用作为溶液。
超临界流体色谱(SFC 1):
***:Waters SFC 100预***，带有Waters 2998光电二极管阵列(PDA)检测器和Waters 3100质量检测器。
柱尺寸250x 30mm。
柱:
流动:100ml/min 120bar背压
梯度:优化的梯度洗脱，使用超临界CO2/MeOH。
中间体
中间体1:6-((2-(6-(羟甲基)吡啶-2-基)苯基)氨基)烟腈。
乙基6-(2-((5-氰基吡啶-2-基)氨基)苯基)吡啶甲酸酯(中间体2,110mg,0.319mmol)悬于THF(4ml)并用LiBH4(15.3mg,0.703mmol)处理。混合物在室温搅拌5小时。反应混合物用水淬灭并稀释于EtOAc。分离有机层并用饱和Na2CO3水溶液室温搅拌1小时。随后分离有机层，用Na2SO4干燥并真空浓缩。原材料通过正相色谱(12g硅胶筒,庚烷/EtOAc100:0-0:100)纯化产生标题化合物作为米黄色固体。(UPLC-MS 1)tR 0.94min；ESI-MS303.1[M+H]+.
中间体2:乙基6-(2-((5-氰基吡啶-2-基)氨基)苯基)吡啶甲酸酯。
乙基6-(2-氨基苯基)吡啶甲酸酯(中间体3,462mg,1.91mmol)、6-溴烟腈(419mg,2.29mmol)、Pd2(dba)3(34.9mg,0.038mmol)、4,5-双(二苯基膦)-9,9-二甲基氧杂蒽(77mg,0.133mmol)、Cs2CO3(932mg,2.86mmol)和二氧六环(10ml)在氩气下加入小瓶。密封小瓶且反应混合物在100℃搅拌16小时。随后，反应混合物冷却至室温，EtOAc稀释并用水(2x)和卤水洗涤。有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。残留物用EtOAc磨碎，固体经过滤收集，用EtOAc洗涤并真空干燥以获得标题化合物作为浅橙色固体。(UPLC-MS 5)tR2.78min；ESI-MS345.3[M+H]+.
中间体3:乙基6-(2-氨基苯基)吡啶甲酸酯。
溶于DCM(10ml)的乙基6-(2-((叔丁氧羰基)氨基)苯基)吡啶甲酸酯(中间体4,685mg,2.00mmol)溶液用TFA(3ml)处理。溶液在室温搅拌2小时，随后真空浓缩。残留物溶于DCM并用饱和Na2CO3水溶液洗涤(2x)和水洗涤。有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩以获得标题化合物作为米黄色固体。(UPLC-MS 1)tR 1.00min；ESI-MS 243.4[M+H]+.
中间体4:乙基6-(2-((叔丁氧羰基)氨基)苯基)吡啶甲酸酯。
6-(2-((叔丁氧羰基)氨基)苯基)吡啶甲酸(中间体5,837mg,2.66mmol)、HATU(1215mg,3.20mmol)、N-甲基吗啉(0.878ml,7.99mmol)和EtOH(1ml,17.1mmol)溶于DMF(15ml)。反应溶液在室温搅拌2小时，稀释于EtOAc并用饱和Na2CO3水溶液和卤水洗涤。有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。原材料通过正相色谱(24g硅胶筒,庚烷/EtOAc 100:0-65:35)纯化产生标题化合物作为无色油。(UPLC-MS 1)tR 1.30min；ESI-MS 343.2[M+H]+.
中间体5:6-(2-((叔丁氧羰基)氨基)苯基)吡啶甲酸。
小瓶装入乙基6-溴吡啶甲酸酯(700mg,3.04mmol)、叔丁基2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂戊硼烷-2-基)苯氨基甲酸酯(1165mg,3.65mmol)、PdCl2(PPh3)2(214mg,0.304mmol)，加盖，氩气冲洗，然后加入DME(20ml)和Na2CO3(水中2M,4.56ml,9.13mmol)。混合物在100℃搅拌16小时。反应混合物冷却至室温，用饱和Na2CO3水溶液提取(3x)。合并的水层随后用HCl(水中8M)酸化至pH 5。沉淀物经过滤收集以获得标题化合物作为米白色固体。(UPLC-MS 1)tR 0.99min；ESI-MS 313.1[M-H+]-.
中间体6:1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-甲基脲。
苯基(6-(1,3-二氧戊环-2-基)吡啶-2-基)(甲基)氨基甲酸酯(中间体7,49mg,0.163mmol)和6-氨基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)烟腈(中间体8,34.5mg,0.179mmol)在氩气下溶于THF(1ml)。溶液冷却至-78℃并用LHMDS(THF中1M,0.359ml,0.359mmol)缓慢处理。反应混合物在-78℃搅拌1小时，随后缓慢加温至0℃并在0℃搅拌30分钟。将反应混合物倒入饱和NH4Cl水溶液并用DCM提取2次。合并的有机层随后用Na2SO4干燥，过滤并浓缩。原材料通过正相色谱(4g硅胶筒,庚烷/EtOAc 100:0-0:100)纯化产生标题化合物作为白色固体。(UPLC-MS 3)tR 0.92min；ESI-MS 399.2[M+H]+.
中间体7:苯基(6-(1,3-二氧戊环-2-基)吡啶-2-基)(甲基)氨基甲酸酯。
溶于THF(1.5ml)的6-(1,3-二氧戊环-2-基)-N-甲基吡啶-2-胺(中间体9,45mg,0.250mmol)和碳酸二苯酯(107mg,0.499mmol)溶液在-10℃用LiHMDS(THF中1M,0.350ml,0.350mmol)处理并搅拌0.5小时。然后，加入LiHMDS(THF中1M,0.350ml,0.350mmol)，反应加温至室温并搅拌1.5小时。反应混合物用饱和NH4Cl水溶液淬灭，EtOAc(2x)提取。合并的有机层用卤水洗涤，Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。原材料通过正相色谱(4g硅胶筒,庚烷/EtOAc 100:0-0:100)纯化产生标题化合物作为淡黄色固体。(UPLC-MS 5)tR1.92min；ESI-MS 301.1[M+H]+.
中间体8:6-氨基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)烟腈。
溶于DMA(20ml)的6-氨基-4-氟烟腈(中间体10,1.10g,8.02mmol)溶液用2-甲氧基乙胺(2.07ml,24.1mmol)和DIPEA(4.20mL,24.1mmol)处理，加热至50℃并搅拌15小时。反应混合物冷却至室温并浓缩。原材料通过正相色谱(24g硅胶筒,庚烷/EtOAc 100:0-0:100)纯化。含产品的各部分进行浓缩并真空干燥产生标题化合物作为米白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.92(s,1H),6.39(s,2H),6.15(t,1H),5.61(s,1H),3.46(t,2H),3.27(s,3H),3.24(q,2H).(UPLC-MS 3)tR 0.62；ESI-MS 193.1[M+H]+.
中间体9:6-(1,3-二氧戊环-2-基)-N-甲基吡啶-2-胺。
小瓶装有2-溴-6-(1,3-二氧戊环-2-基)吡啶(200mg,0.869mmol)、甲胺(THF中2M,0.87ml,1.7mmol)、氯[2-(二环己基膦基)-3,6-二甲氧基-2’,4’,6’-三异丙基-1,1’-联苯][2-(2-氨乙基)苯基]钯(II)(34.7mg,0.043mmol)和K2CO3(1133mg,3.48mmol)，氩气冲洗，然后加入叔BuOH(4ml)，加盖，加热至110℃且混合物搅拌2小时。反应混合物冷却至室温，用水稀释并用EtOAc提取(2x)。合并的有机层用卤水洗涤，Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。原材料通过正相色谱(12g硅胶筒,庚烷/EtOAc 100:0-45:55)纯化产生标题化合物作为浅棕色油。(UPLC-MS 3)tR 0.36min；ESI-MS 181.1[M+H]+.
中间体10:6-氨基-4-氟烟腈。
溶于DMA(800ml)的4-氟-5-碘吡啶-2-胺(中间体11,240g,1mol)、氰化锌(125g,1.05mol)、锌(13g,0.2mol)、Pd2(dba)3(25g,25mmol)和dppf(55g,0.1mol)进行脱气并在氮气下装入圆底烧瓶。混合物在100℃搅拌3小时。反应混合物用5％NaHCO3(2l)稀释，EtOAc(4x 600ml)提取。合并的有机层用5％NaOH(1l)洗涤，Na2SO4干燥，浓缩至700ml。所得有机相通过硅胶柱用EtOAc(1.7l)洗脱。合并的有机滤液用2M HCl(3x 800ml)洗涤。水相pH用饱和NaHCO3调至10。水相用DCM(3x 500ml)提取。合并的DCM用Na2SO4干燥并浓缩。残留物通过柱色谱(戊烷:EtOAc 10:1-3:2洗脱)然后从戊烷:EtOAc 3/1重结晶来进一步纯化，以产生标题化合物作为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.40(d,1H),7.40(s,2H),6.34(d,1H).
中间体11:4-氟-5-碘吡啶-2-胺。
溶于MeCN(9l)的4-氟吡啶-2-胺(336g,2.5mol)和NIS(745g,2.75mol)悬液用TFA(114g,1mol)处理。反应混合物随后在室温搅拌8小时。反应混合物用EtOAc(10l)稀释，用饱和Na2S2O3(2x 5l)、卤水(4x 5l)洗涤。合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并浓缩获得粗产品。粗产品通过从EtOAc/戊烷(1/10)重结晶来纯化，以获得标题化合物作为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.14(d,1H),6.45(s,2H),6.33(d,1H).
中间体12:1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-(2-甲氧基乙基)脲。
标题化合物通过与中间体6类似的方法制备，这是用苯基(6-(1,3-二氧戊环-2-基)吡啶-2-基)(2-甲氧基乙基)氨基甲酸酯(中间体13)取代苯基(6-(1,3-二氧戊环-2-基)吡啶-2-基)(甲基)氨基甲酸酯(中间体7)。(UPLC-MS 3)tR 0.95min；ESI-MS 443.2[M+H]+.
中间体13:苯基(6-(1,3-二氧戊环-2-基)吡啶-2-基)(2-甲氧基乙基)氨基甲酸酯。
标题化合物通过与中间体7类似的方法制备，这是用6-(1,3-二氧戊环-2-基)-N-(2-甲氧基乙基)吡啶-2-胺(中间体14)取代6-(1,3-二氧戊环-2-基)-N-甲基吡啶-2-胺(中间体9)。(UPLC-MS 5)tR 1.91min；ESI-MS 345.2[M+H]+.
中间体14:6-(1,3-二氧戊环-2-基)-N-(2-甲氧基乙基)吡啶-2-胺。
2-溴-6-(1,3-二氧戊环-2-基)吡啶(210mg,0.913mmol)和2-甲氧基乙胺(1ml,11.6mmol)的混合物加热至90℃，持续16小时。反应混合物冷却至室温并在水与EtOAc之间分层。水层用EtOAc提取(2x)。合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。原材料通过正相色谱(12g硅胶筒,庚烷/EtOAc 100:0-40:60)纯化产生标题化合物作为黄色油。(UPLC-MS3)tR 0.47min；ESI-MS 225.2[M+H]+.
中间体15:(外消旋)1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-((四氢呋喃-3-基)甲基)脲。
(外消旋)苯基(6-(1,3-二氧戊环-2-基)吡啶-2-基)((四氢呋喃-3-基)甲基)氨基甲酸酯(中间体16,43.8mg,0.118mmol)和6-氨基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)烟腈(中间体8,25mg,0.130mmol)在氩气下溶于THF(1ml)。溶液冷却至-78℃并用LHMDS(THF中1M,0.260ml,0.260mmol)缓慢处理。反应混合物在-78℃搅拌1小时，然后缓慢加温至-20℃，持续2.5小时，接着加温至室温，持续30分钟。将反应混合物倒入饱和NH4Cl水溶液并用DCM提取2次。合并的有机相随后用Na2SO4干燥，过滤并蒸发。原材料通过正相色谱(4g硅胶筒,庚烷/EtOAc100:0-0:100)纯化产生标题化合物作为白色固体。(UPLC-MS 3)tR 0.92min；ESI-MS 469.2[M+H]+.
中间体16:(外消旋)苯基(6-(1,3-二氧戊环-2-基)吡啶-2-基)((四氢呋喃-3-基)甲基)氨基甲酸酯。
溶于THF(4ml)的(外消旋)6-(1,3-二氧戊环-2-基)-N-((四氢呋喃-3-基)甲基)吡啶-2-胺(中间体17,160mg,0.639mmol)和碳酸二苯酯(274mg,1.28mmol)溶液在-78℃用LiHMDS(THF中1M,0.895ml,0.895mmol)处理并搅拌30分钟。反应混合物在-78℃用饱和NH4Cl水溶液淬灭。所得混合物随后加温至室温，接着在DCM与水之间分层。水层用DCM洗涤2次。合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。原材料通过正相色谱(12g硅胶筒,庚烷/EtOAc 100:0-40:60)纯化产生标题化合物作为无色油。(UPLC-MS 3)tR1.00min；ESI-MS370.9[M+H]+.
中间体17:(外消旋)6-(1,3-二氧戊环-2-基)-N-((四氢呋喃-3-基)甲基)吡啶-2-胺。
隔膜密封的小瓶装有2-溴-6-(1,3-二氧戊环-2-基)吡啶(200mg,0.869mmol)、(外消旋)(四氢呋喃-3-基)甲胺(176mg,1.74mmol),氯[2-(二环己基膦基)-3,6-二甲氧基-2’,4’,6’-三异丙基-1,1’-联苯][2-(2-氨乙基)-苯基]钯(II)(34.7mg,0.043mmol)和K2CO3(1.13g,3.48mmol)，氩气冲洗，然后加入叔BuOH(4ml)，加盖，加热至110℃且搅拌2小时。反应混合物冷却至室温，用水稀释并用EtOAc提取(2x)。合并的有机层用卤水洗涤，Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。原材料通过正相色谱(12g硅胶筒,庚烷/EtOAc 100:0-26:74)纯化产生标题化合物作为浅棕色油。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.38(dd,1H),6.67(t,1H),6.59(d,1H),6.44(dd,1H),5.50(s,1H),4.07-3.99(m,2H),3.97-3.90(m,2H),3.77-3.67(m,2H),3.65-3.58(m,1H),3.44(dd,1H),3.26-3.12(m,2H),2.48-2.42(m,1H),2.00-1.90(m,1H),1.64-1.53(m,1H).
中间体18:(外消旋)1-(5-(((叔丁基二甲基硅烷)氧基)甲基)-6-(1,3-二氧戊环-2-基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-((四氢呋喃-3-基)甲基)脲。
将溶于THF(0.9M,1.21ml,1.09mmol)的LiHMDS溶液加入溶于THF(5ml)的苯基(5-(((叔丁基二甲基硅烷)氧基)甲基)-6-(1,3-二氧戊环-2-基)吡啶-2-基)((四氢呋喃-3-基)甲基)氨基甲酸酯(中间体19,280mg,0.54mmol)和6-氨基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)烟腈(中间体8,115mg,0.60mmol)，用干冰/丙酮浴在-78℃冷却。在–78℃搅拌20分钟后，加入溶于THF(1.8ml)的额外LiHMDS，继续搅拌20分钟，反应加温至室温，加入NH4Cl水溶液且混合物用EtOAc提取。有机层用卤水洗涤，Na2SO4干燥并蒸发。残留物随后通过正相色谱用40g
柱纯化，用从庚烷到庚烷中50％EtOAc的梯度洗脱。接着合并含产品的各部分，蒸发产生标题化合物。(UPLC-MS 7)tR 1.45min；ESI-MS 613.5[M+H]+.
中间体19:(外消旋)苯基(5-(((叔丁基二甲基硅烷)氧基)甲基)-6-(1,3-二氧戊环-2-基)吡啶-2-基)((四氢呋喃-3-基)甲基)氨基甲酸酯。
将溶于THF(0.9M,1.02ml,0.835mmol)的LiHMDS溶液加入溶于THF(10ml)的(外消旋)5-(((叔丁基二甲基硅烷)氧基)甲基)-6-(1,3-二氧戊环-2-基)-N-((四氢呋喃-3-基)甲基)吡啶-2-胺(中间体20,366mg,0.918mmol)和碳酸二苯酯(197mg,0.918mmol)，用干冰/丙酮浴在-78℃冷却。在–78℃搅拌30分钟后，加入额外的碳酸二苯酯(90mg,0.420mmol)，允许反应混合物加温至室温。然后加入NH4Cl水溶液，EtOAc提取。有机层用卤水洗涤，Na2SO4干燥并蒸发。残留物随后通过正相色谱用40g
柱纯化，用从庚烷到庚烷中50％EtOAc的梯度洗脱。接着合并含产品的各部分，蒸发产生标题化合物。(UPLC-MS 6)tR1.49min；ESI-MS 515.4[M+H]+.
中间体20:(外消旋)5-(((叔丁基二甲基硅烷)氧基)甲基)-6-(1,3-二氧戊环-2-基)-N-((四氢呋喃-3-基)甲基)吡啶-2-胺。
将二异丙基乙胺(0.22ml,1.26mmol)、叔丁基二甲基氯硅烷(164mg,1.09mmol)和DMAP(5mg,0.042mmol)在室温连续加入溶于DCM(5ml)的(外消旋)(2-(1,3-二氧戊环-2-基)-6-(((四氢呋喃-3-基)甲基)氨基)吡啶-3-基)甲醇(中间体21,235mg,0.838mmol)。搅拌18小时后，加入额外的叔丁基二甲基氯硅烷(50mg,0.332mmol)并连续搅拌1小时。反应混合物随后在饱和NaHCO3水溶液与DCM之间分层，DCM提取2x，有机层用Na2SO4干燥并蒸发产生标题化合物作为黄色油。(UPLC-MS 7)tR 1.22min；ESI-MS 395.2[M+H]+.
中间体21:(外消旋)(2-(1,3-二氧戊环-2-基)-6-(((四氢呋喃-3-基)甲基)氨基)吡啶-3-基)甲醇。
将硼氢化钠(39mg,1.02mmol)加入溶于EtOH(10ml)的(外消旋)2-(1,3-二氧戊环-2-基)-6-(((四氢呋喃-3-基)甲基)氨基)吡啶甲醛(中间体22,370mg,0.931mmol)溶液，用冰浴冷却至0℃。反应混合物在室温搅拌1小时，然后在饱和NaHCO3水溶液与EtOAc之间分层，EtOAc提取3x，有机层用Na2SO4干燥并蒸发。残留物随后通过正相色谱用24g
柱纯化，用从庚烷到庚烷中50％EtOAc的梯度洗脱。接着合并含各产品的部分，蒸发产生标题化合物作为无色油。(UPLC-MS 6)tR 0.40min；ESI-MS 281.2[M+H]+.
中间体22:(外消旋)2-(1,3-二氧戊环-2-基)-6-(((四氢呋喃-3-基)甲基)氨基)吡啶甲醛。
将含MeLi的Et2O溶液(1.6M,0.90ml,1.44mmol)加入溶于THF(15ml)的(外消旋)5-溴-6-(1,3-二氧戊环-2-基)-N-((二氧戊环-3-基)甲基)吡啶-2-胺(中间体23,430mg,1.31mmol)溶液，用干冰/丙酮浴在-78℃冷却。在–78℃搅拌5分钟后，逐滴加入含nBuLi的己烷溶液(1.6M,0.90ml,0.90mmol)。再搅拌20分钟后，加入DMF(1.01ml,13.1mmol)，反应混合物在-78℃搅拌1小时，然后加温至室温。加入NH4Cl水溶液，混合物用DCM提取，有机层用Na2SO4干燥并蒸发产生标题化合物。(UPLC-MS 6)tR 0.66min；ESI-MS279.2[M+H]+.
中间体23:(外消旋)5-溴-6-(1,3-二氧戊环-2-基)-N-((二氧戊环-3-基)甲基)吡啶-2-胺。
3,6-二溴-2-(1,3-二氧戊环-2-基)吡啶(中间体32,104mg,0.337mmol)、(四氢呋喃-3-基)甲胺(51mg,0.505mmol)、CuI(3.2mg,0.017mmol)和K2CO3(47mg,0.337mmol)的混合物在隔膜密封的小瓶中90℃加热1小时，然后在110℃加热1小时。冷却的反应混合物在水与DCM之间分层，DCM提取2x，合并的有机层用卤水洗涤并蒸发。残留物随后通过正相色谱用4g
柱纯化，用从庚烷到EtOAc的梯度洗脱。合并含产品的各部分，蒸发产生标题化合物作为黄色油。(UPLC-MS 6)tR 0.86min；ESI-MS 329.1and 331.1[M+H]+.
中间体24和25:(S)1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-((四氢呋喃-3-基)甲基)脲和(R)1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-((四氢呋喃-3-基)甲基)脲。
(外消旋)1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-((四氢呋喃-3-基)甲基)脲(中间体15,275mg,0.587mmol)如下纯化：手性HPLC:VWR LAPREP P110+环+P314仪器；Chiracel Oz/20
5x 42cm柱；70:30庚烷/EtOH流动相；80ml/min流速；6ml注入体积(EtOH/DCM)；UV 280nm检测。合并含产品的各部分，蒸发产生保留时间为30.0分钟的第一洗脱峰和保留时间为61.5分钟的第二洗脱峰。
中间体26:1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(4-甲基哌嗪-1-羰基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-异丙氧基吡啶-2-基)-1-甲基脲。
将含LiHMDS的THF溶液(0.40ml,0.361mmol)加入溶于THF(5ml)的苯基(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(4-甲基哌嗪-1-羰基)吡啶-2-基)(甲基)氨基甲酸酯(中间体27,70mg,0.181mmol)和6-氨基-4-异丙氧基烟腈(中间体28,32.0mg,0.181mmol)的混合物，用干冰丙酮浴在-78℃冷却。反应混合物在-78℃搅拌2小时，加温至室温并再搅拌2小时。加入饱和NaHCO3水溶液和DCM，混合物用DCM提取3x，有机层用Na2SO4干燥并蒸发。残留物吸附到isolute HM-N
上，通过正相色谱用12g
柱纯化，用从庚烷到EtOAc和随后从DCM到DCM中10％MeOH的梯度洗脱。合并含产品的各部分，蒸发产生标题化合物。(UPLC-MS 7)tR 0.76min；ESI-MS 510.4[M+H]+.
中间体27:苯基(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(4-甲基哌嗪-1-羰基)吡啶-2-基)(甲基)氨基甲酸酯。
将LiHMDS溶液(1.34ml,1.21mmol)逐滴加入(2-(1,3-二氧戊环-2-基)-6-(甲基氨基)吡啶-3-基)(4-甲基哌嗪-1-基)甲酮(中间体29,185mg,0.60mmol)、碳酸二苯酯(259mg,1.21mmol)和THF(7ml)的混合物，用干冰/丙酮浴在-78℃冷却。反应混合物在-78℃搅拌1小时，加温至室温，然后在加入NH4Cl水溶液前室温搅拌1小时。水层用DCM提取3x，Na2SO4干燥并蒸发。粗产品如下纯化产生标题化合物：正相色谱,24g
柱，用从庚烷到EtOAc和随后从DCM到DCM中10％MeOH的梯度洗脱。(UPLC-MS 6)tR 0.64min；ESI-MS 427.2[M+H]+.
中间体28:6-氨基-4-异丙氧基烟腈。
KHMDS溶液(87g,438mmol)在室温逐滴加入溶于THF(250ml)的丙-2-醇(26.3g,438mmol)溶液。15分钟后，加入溶于THF(200ml)的6-氨基-4-氟烟腈(中间体10,30g,219mmol)溶液，反应混合物在室温搅拌18小时。反应混合物在饱和NH4Cl水溶液与EtOAc之间分层，EtOAc提取(2x)，合并的EtOAc层用Na2SO4干燥并蒸发。残留物用Et2O磨碎，过滤所得产物作为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.12(s,1H),6.82(s,2H),6.07(s,1H),4.64(septet,1H),1.31(d,6H).(UPLC-MS 7)tR 0.61；ESI-MS 178.1[M+H]+.
中间体29:(2-(1,3-二氧戊环-2-基)-6-(甲基氨基)吡啶-3-基)(4-甲基哌嗪-1-基)甲酮。
将HATU(265mg,0.696mmol)和Et3N(0.297ml,2.14mmol)在室温加入溶于DMF(3ml)的2-(1,3-二氧戊环-2-基)-6-(甲基氨基)烟酸钠盐(中间体30,1.0g,0.535mmol)，然后是1-甲基哌嗪(0.214g,2.14mmol)。反应混合物搅拌1小时，随后在水与EtOAc之间分层，EtOAc提取2x，DCM提取2x，nBuOH提取2x，合并的有机层用Na2SO4干燥并蒸发。残留物用DCM磨碎，过滤并蒸发产生标题化合物。(UPLC-MS 6)tR 0.29；ESI-MS 307.2[M+H]+.
中间体30:2-(1,3-二氧戊环-2-基)-6-(甲基氨基)烟酸钠盐。
将含nBuLi的己烷溶液(1.6M,3.45ml,5.52mmol)加入溶于THF(10ml)的5-溴-6-(1,3-二氧戊环-2-基)-N-甲基吡啶-2-胺(中间体31,650mg,2.51mmol)搅拌溶液，用干冰/丙酮浴冷却。反应混合物在-78℃搅拌15分钟，然后经溶液CO2起泡10秒。继续在-78℃搅拌10分钟，反应混合物在水与Et2O之间分层。水层进行酸化，随后DCM洗涤，接着用NaHCO3碱化和DCM洗涤，蒸发且固体用MeOH磨碎。MeOH的过滤和蒸发产生标题化合物。(UPLC-MS 6)tR0.32；ESI-MS 225.1[M+H]+.
中间体31:5-溴-6-(1,3-二氧戊环-2-基)-N-甲基吡啶-2-胺。
3,6-二溴-2-(1,3-二氧戊环-2-基)吡啶(中间体32,950mg,3.07mmol)、EtOH中甲胺(33％,1.48ml,9.22mmol)和EtOH(4ml)的混合物在隔膜密封的小瓶中110℃加热18小时。冷却后，加入溶于EtOH的额外甲胺(2.96ml,18.4mmol)，在120℃继续加热20小时。冷却的反应混合物在水与EtOAc之间分层，EtOAc提取2x，Na2SO4干燥并蒸发。粗产品如下纯化产生标题化合物作为黄色固体：正相色谱,40g
柱，用从庚烷到EtOAc的梯度洗脱。(UPLC-MS 6)tR 0.77min；ESI-MS 259.1和261.1[M+H]+.
中间体32:3,6-二溴-2-(1,3-二氧戊环-2-基)吡啶。
溶于甲苯(5ml)的3,6-二溴吡啶甲醛[1215183-85-9](365g,1.378mol)、乙二醇(98ml,1.764mol)和对甲苯硫酸一水化合物(26.8g,141mmol)混合物加热回流，分离的H2O用Dean-Stark分水器收集。4小时后，反应混合物冷却至室温，倒入饱和NaHCO3水溶液并用EtOAc(2x)提取。合并的有机层用Na2SO4干燥并蒸发获得粗标题化合物作为米黄色固体。(UPLC-MS 3)tR 0.91；ESI-MS 307.9/309.9/311.9[M+H]+.
中间体33:1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(4-甲基哌嗪-1-羰基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-甲基脲。
将含LiHMDS的THF溶液(0.40ml,0.361mmol)加入溶于THF(5ml)的苯基(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(4-甲基哌嗪-1-羰基)吡啶-2-基)(甲基)氨基甲酸酯(中间体27,70mg,0.164mmol)和6-氨基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)烟腈(中间体8,35mg,0.181mmol)混合物，用干冰丙酮浴冷却至-78℃。反应混合物在-78℃搅拌2小时，加温至室温，再搅拌2小时。加入饱和NaHCO3水溶液和DCM，混合物用DCM提取3x，有机层用Na2SO4干燥并蒸发。残留物吸附到isolute HM-N
上，通过正相色谱用12g
柱纯化，用从庚烷到EtOAc和随后从DCM到DCM中10％MeOH的梯度洗脱。随后合并含产品的各部分，蒸发产生标题化合物。(UPLC-MS 7)tR 0.59min；ESI-MS 525.3[M+H]+.
中间体34:1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-乙基脲。
将含LiHMDS的THF溶液(0.45ml,0.407mmol)加入溶于THF(3ml)的苯基(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)(乙基)氨基甲酸酯(中间体35,73mg,0.185mmol)和6-氨基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)烟腈(中间体8,39mg,0.204mmol)混合物，用干冰丙酮浴冷却至-78℃。反应混合物在-78℃搅拌1小时，加入额外的LiHMDS溶液(0.45ml)，在加入更多LiHMDS溶液(0.45ml)前再搅拌10分钟。反应混合物搅拌1小时，然后加温至室温，加入饱和NaHCO3水溶液和DCM，混合物用DCM提取3x，有机层用Na2SO4干燥并蒸发。残留物吸附到isolute HM-N
上，通过正相色谱用24g
柱纯化，用从庚烷到EtOAc的梯度洗脱。随后合并含产品的各部分，蒸发产生标题化合物。(UPLC-MS 7)tR0.98min；ESI-MS 493.3[M+H]+.
中间体35:苯基(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)(乙基)氨基甲酸酯。
溶于THF(10ml)的6-(1,3-二氧戊环-2-基)-N-乙基-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-胺(中间体36,320mg,1.17mmol)和碳酸二苯酯(275mg,1.28mmol)溶液在-78℃用LiHMDS(THF中1M,1.43ml,1.28mmol)处理并搅拌2小时。反应混合物随后加温至室温，搅拌2小时，用饱和NH4Cl水溶液淬灭，EtOAc提取(2x)，合并的有机层用卤水洗涤，Na2SO4干燥，过滤并浓缩。原材料通过正相色谱(40g
柱,用庚烷/EtOAc 100:0-0:100的梯度洗脱)纯化产生标题化合物作为白色固体。(UPLC-MS 6)tR 1.06min；ESI-MS 395.2[M+H]+.
中间体36:6-(1,3-二氧戊环-2-基)-N-乙基-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-胺。
5-溴-6-(1,3-二氧戊环-2-基)-N-乙基吡啶-2-胺(中间体37,370mg,1.36mmol)、1-甲基吡唑-4-硼酸频哪醇酯(423mg,2.03mmol)、PdCl2(dppf).CH2Cl2加合物(111mg,0.14mmol)、DME(5ml)和饱和Na2CO3水溶液(1.67ml)的混合物在隔膜密封的小瓶中于Ar气下80℃加热4小时。冷却的反应混合物在水与DCM之间分层，DCM提取2x，合并的有机层蒸发到isolute HM-N
上。通过正相色谱用40g
柱纯化，用从庚烷到EtOAc的梯度洗脱，产生标题化合物。(UPLC-MS 6)tR 0.52min；ESI-MS275.2[M+H]+.
中间体37:5-溴-6-(1,3-二氧戊环-2-基)-N-乙基吡啶-2-胺。
标题化合物以与5-溴-6-(1,3-二氧戊环-2-基)-N-甲基吡啶-2-胺(中间体31)类似的方式制备，除了溶于THF的乙胺溶液(2M)用于取代溶于EtOH的甲胺溶液。(UPLC-MS 7)tR 0.88min；ESI-MS 273.2[M+H]+.
中间体38:1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-(异丙基氨基)吡啶-2-基)-1-乙基脲。
标题化合物以与1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-乙基脲(中间体34)类似的方式制备，除了6-氨基-4-(异丙基氨基)烟腈(中间体39)用于取代6-氨基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)烟腈(中间体8)。(UPLC-MS 7)tR 1.09min；ESI-MS 477.3[M+H]+.
中间体39:6-氨基-4-(异丙基氨基)烟腈。
溶于DMA(17ml)的异丙胺(1.83ml,21.3mmol)、6-氨基-4-氟烟腈(中间体10,972mg,7.09mmol)和二异丙基乙胺(3.71ml,21.3mmol)混合物在隔膜密封的反应容器中50℃加热48小时。反应混合物随后冷却，蒸发并通过正相色谱用40g
柱纯化，用从DCM到DCM中10％MeOH的梯度洗脱。合并含产品的各部分并蒸发。残留物在DCM与10％柠檬酸水溶液之间分层，水层用DCM洗2x，用NaHCO3碱化，DCM提取(4x)，来自碱浸提的合并的有机提取物用Na2SO4干燥并蒸发产生标题化合物作为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.89(s,1H),6.31(s,br,2H),5.71(d,br,1H),5.58(s,1H),3.61–3.49(m,1H),1.14(d,6H).
中间体40:1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-异丙氧基吡啶-2-基)-1-乙基脲。
标题化合物以与1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-乙基脲(中间体34)类似的方式制备，除了6-氨基-4-异丙氧基烟腈(中间体28)用于取代6-氨基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)烟腈(中间体8)。(UPLC-MS 7)tR 1.14min；ESI-MS 478.2[M+H]+.
中间体41:1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-甲基脲。
标题化合物以与1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-乙基脲(中间体34)类似的方式制备，除了苯基(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)(甲基)氨基甲酸酯(中间体42)用于取代苯基(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)(乙基)氨基甲酸酯(中间体35)。(UPLC-MS 6)tR 0.93min；ESI-MS 479.3[M+H]+.
中间体42:苯基(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)(甲基)氨基甲酸酯。
标题化合物以与苯基(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)(乙基)氨基甲酸酯(中间体35)类似的方式制备，除了6-(1,3-二氧戊环-2-基)-N-甲基-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-胺(中间体43)用于取代6-(1,3-二氧戊环-2-基)-N-乙基-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-胺(中间体36)。(UPLC-MS 7)tR 0.96min；ESI-MS381.2[M+H]+.
中间体43:6-(1,3-二氧戊环-2-基)-N-甲基-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-胺。
标题化合物以与6-(1,3-二氧戊环-2-基)-N-乙基-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-胺(中间体36)类似的方式制备，除了5-溴-6-(1,3-二氧戊环-2-基)-N-甲基吡啶-2-胺(中间体31)用于取代5-溴-6-(1,3-二氧戊环-2-基)-N-乙基吡啶-2-胺(中间体37)。(UPLC-MS 7)tR 0.44min；ESI-MS 261.2[M+H]+.
中间体44:1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-(异丙氨基)吡啶-2-基)-1-甲基脲。
标题化合物以与1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-乙基脲(中间体34)类似的方式制备，除了苯基(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)(甲基)氨基甲酸酯(中间体42)和6-氨基-4-(异丙基氨基)烟腈(中间体39)用于取代苯基(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)(乙基)氨基甲酸酯(中间体35)和6-氨基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)烟腈(中间体8)。(UPLC-MS 6)tR 1.05min；ESI-MS 463.3[M+H]+.
中间体45:N-((6-(3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-甲基脲基)-2-(1,3-二氧戊环-2-基)吡啶-3-基)甲基)-N-甲基乙酰胺。
标题化合物以与1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-乙基脲(中间体34)类似的方式制备，除了苯基(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-((N-甲基乙酰胺基)甲基)吡啶-2-基)(甲基)氨基甲酸酯(中间体46)用于取代苯基(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)(乙基)氨基甲酸酯(中间体35)。(UPLC-MS 7)tR 0.83min；ESI-MS 484.2[M+H]+.
中间体46:苯基(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-((N-甲基乙酰胺基)甲基)吡啶-2-基)(甲基)氨基甲酸酯。
标题化合物以与苯基(5-(((叔丁基二甲基硅烷)氧基)甲基)-6-(1,3-二氧戊环-2-基)吡啶-2-基)((四氢呋喃-3-基)甲基)氨基甲酸酯(中间体19)类似的方式制备，除了N-((2-(1,3-二氧戊环-2-基)-6-(甲基氨基)吡啶-3-基)甲基)-N-甲基乙酰胺(中间体47)用于取代5-(((叔丁基二甲基硅烷)氧基)甲基)-6-(1,3-二氧戊环-2-基)-N-((四氢呋喃-3-基)甲基)吡啶-2-胺(中间体20)。(UPLC-MS 7)tR 0.91min；ESI-MS 386.2[M+H]+.
中间体47:N-((2-(1,3-二氧戊环-2-基)-6-(甲基氨基)吡啶-3-基)甲基)-N-甲基乙酰胺。
将乙酸酐(0.126ml,1.31mmol)加入6-(1,3-二氧戊环-2-基)-N-甲基-5-((甲基氨基)甲基)吡啶-2-胺(中间体48,325mg,1.31mmol)、2,6-二甲基吡啶(0.236ml,1.97mmol)和DCM(2ml)的混合物，所述混合物用冰浴冷却。反应混合物在0℃搅拌30分钟，随后在室温搅拌18小时，加入饱和NaHCO3水溶液且水层用DCM提取3x。合并的有机层用Na2SO4干燥并蒸发。通过正相色谱用12g
柱纯化，用从庚烷到EtOAc的梯度洗脱，产生标题化合物作为黄胶。(UPLC-MS 6)tR 0.40min；ESI-MS 266.2[M+H]+.
中间体48:6-(1,3-二氧戊环-2-基)-N-甲基-5-((甲基氨基)甲基)吡啶-2-胺。
2-(1,3-二氧戊环-2-基)-6-(甲基氨基)吡啶甲醛(中间体49,340mg,1.47mmol)、甲胺盐酸盐(198mg,2.94mmol)、溶于EtOH的甲胺溶液(8M,0.367ml,2.94mmol)、氰基硼氢化钠(369mg,5.88mmol)和MeOH(8ml)的混合物在隔膜密封的小瓶中50℃加热3小时。冷却的反应混合物在水与DCM之间分层，用DCM提取2x，Na2SO4干燥，过滤并蒸发产生标题化合物作为黄色泡沫。(UPLC-MS 6)tR 0.31min；ESI-MS 224.2[M+H]+.
中间体49:2-(1,3-二氧戊环-2-基)-6-(甲基氨基)吡啶甲醛。
将溶于己烷的nBuLi溶液(1.6M,3.47ml,5.56mmol)加入溶于THF(50ml)的5-溴-6-(1,3-二氧戊环-2-基)-N-甲基吡啶-2-胺(中间体31,1.2g,4.63mmol)，用干冰/丙酮浴冷却。在-78℃搅拌5分钟后，加入额外溶于己烷的nBuLi(3.47ml,5.56mmol)，反应混合物在-78℃再搅拌20分钟，然后加入DMF(3.59ml,46.3mmol)。在-78℃继续再搅拌1小时，反应混合物加温至室温，用NH4Cl水溶液淬灭和EtOAc提取2x。合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并蒸发。通过正相色谱用80g
柱纯化，用从庚烷到EtOAc的梯度洗脱，产生标题化合物。(UPLC-MS 7)tR 0.55min；ESI-MS 209.3[M+H]+.
中间体50:3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-(5-(二氟甲基)-6-(1,3-二氧戊环-2-基)吡啶-2-基)-1-甲基脲。
标题化合物以与1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-乙基脲(中间体34)类似的方式制备，除了苯基(5-(二氟甲基)-6-(1,3-二氧戊环-2-基)吡啶-2-基)(甲基)氨基甲酸酯(中间体51)用于取代苯基(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)(乙基)氨基甲酸酯(中间体35)。(UPLC-MS 7)tR 1.04min；ESI-MS 449.2[M+H]+.
中间体51:苯基(5-(二氟甲基)-6-(1,3-二氧戊环-2-基)吡啶-2-基)(甲基)氨基甲酸酯。
标题化合物以与苯基(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(4-甲基哌嗪-1-羰基)吡啶-2-基)(甲基)氨基甲酸酯(中间体27)类似的方式制备，除了5-(二氟甲基)-6-(1,3-二氧戊环-2-基)-N-甲基吡啶-2-胺(中间体52)用于取代(2-(1,3-二氧戊环-2-基)-6-(甲基氨基)吡啶-3-基)(4-甲基哌嗪-1-基)甲酮(中间体29)。(UPLC-MS 7)tR 1.15min；ESI-MS 351.1[M+H]+.
中间体52:5-(二氟甲基)-6-(1,3-二氧戊环-2-基)-N-甲基吡啶-2-胺。
将DAST(0.60ml,4.11mmol)加入溶于DCM(6ml)的2-(1,3-二氧戊环-2-基)-6-(甲基氨基)吡啶甲醛(中间体49,340mg,1.47mmol)溶液，用冰浴冷却。反应加温至室温，搅拌18小时，随后在饱和NaHCO3水溶液与DCM之间分层并用DCM提取2x。合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并蒸发。通过正相色谱用12g
柱纯化，用从庚烷到EtOAc的梯度洗脱，产生标题化合物作为白色固体。(UPLC-MS 6)tR 0.75min；ESI-MS 231.1[M+H]+.
中间体53:1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-异丙氧基吡啶-2-基)-1-甲基脲。
标题化合物以与1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-乙基脲(中间体34)类似的方式制备，除了苯基(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)吡啶-2-基)(甲基)氨基甲酸酯(中间体54)和6-氨基-4-异丙氧基烟腈(中间体28)用于取代苯基(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)(乙基)氨基甲酸酯(中间体35)和6-氨基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)烟腈(中间体8)。(UPLC-MS 6)tR 0.80min；ESI-MS 496.4[M+H]+.
中间体54:苯基(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)吡啶-2-基)(甲基)氨基甲酸酯。
标题化合物以与苯基(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(4-甲基哌嗪-1-羰基)吡啶-2-基)(甲基)氨基甲酸酯(中间体27)类似的方式制备，除了6-(1,3-二氧戊环-2-基)-N-甲基-5-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)吡啶-2-胺(中间体55)用于取代(2-(1,3-二氧戊环-2-基)-6-(甲基氨基)吡啶-3-基)(4-甲基哌嗪-1-基)甲酮(中间体29)。(UPLC-MS 6)tR 0.70min；ESI-MS 413.3[M+H]+.
中间体55:6-(1,3-二氧戊环-2-基)-N-甲基-5-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)吡啶-2-胺。
将NaBH(OAc)3(458mg,2.16mmol)在室温加入溶于1,2-二氯乙烷(10ml)的2-(1,3-二氧戊环-2-基)-6-(甲基氨基)吡啶甲醛(中间体49,300mg,1.44mmol)和1-甲基哌嗪(0.168ml,1.51mmol)溶液。反应混合物搅拌18小时，随后在饱和NaHCO3与DCM之间分层，DCM提取2x，Na2SO4干燥并蒸发产生标题化合物作为黄色油。(UPLC-MS 8)tR 0.54min；ESI-MS293.3[M+H]+.
中间体56:3-(5-氰基-4-异丙氧基吡啶-2-基)-1-(5-(二氟甲基)-6-(1,3-二氧戊环-2-基)吡啶-2-基)-1-甲基脲。
标题化合物以与1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-乙基脲(中间体34)类似的方式制备，除了苯基(5-(二氟甲基)-6-(1,3-二氧戊环-2-基)吡啶-2-基)(甲基)氨基甲酸酯(中间体51)和6-氨基-4-异丙氧基烟腈(中间体28)用于取代苯基(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)(乙基)氨基甲酸酯(中间体35)和6-氨基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)烟腈(中间体8)。(UPLC-MS7)tR 1.19min；ESI-MS 434.2[M+H]+.
中间体57:1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-((2-氧代吡咯烷-1-基)甲基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基吡啶-2-基)-1-甲基脲。
1-((2-(1,3-二氧戊环-2-基)-6-(甲基氨基)吡啶-3-基)甲基)吡咯烷-2-酮(中间体58,42mg,0.091mmol)、苯基(5-氰基吡啶-2-基)氨基甲酸酯(中间体59,72mg,0.30mmol)、DMAP(16.7mg,0.136mmol)和AcCN(1ml)的混合物在隔膜密封的小瓶中于Ar气下70℃加热18小时。冷却的反应混合物在饱和NaHCO3水溶液与DCM之间分层，DCM提取2x，Na2SO4干燥并蒸发。通过正相色谱用12g
柱纯化，用从庚烷到EtOAc的梯度洗脱，产生标题化合物作为白色固体。(UPLC-MS 6)tR 0.87min；ESI-MS 423.3[M+H]+.
中间体58:1-((2-(1,3-二氧戊环-2-基)-6-(甲基氨基)吡啶-3-基)甲基)吡咯烷-2-酮。
2-(1,3-二氧戊环-2-基)-6-(甲基氨基)吡啶甲醛(中间体49,315mg,1.06mmol)、甲基4-氨基丁酸酯盐酸盐(244mg,1.59mmol)、Et3N(0.25ml,1.80mmol)和1,2-二氯乙烷(5ml)的混合物在室温搅拌2.5小时。加入NaBH(OAc)3(337mg,1.59mmol)，反应混合物在室温搅拌18小时。加入额外的甲基4-氨基丁酸酯盐酸盐(244mg,1.59mmol)和Et3N(0.25ml,1.80mmol)，1小时后加入NaBH(OAc)3(337mg,1.59mmol)。反应混合物搅拌48小时，随后在饱和NaHCO3水溶液与DCM之间分层，DCM提取2x，合并的有机层蒸发到isolute HM-N
上。通过正相色谱用24g
柱纯化，用从庚烷到EtOAc和随后DCM到DCM中10％MeOH的梯度洗脱，产生标题化合物。(UPLC-MS 6)tR 0.41min；ESI-MS 278.4[M+H]+.
中间体59:苯基(5-氰基吡啶-2-yl)氨基甲酸酯。
氯甲酸苯酯(0.53ml,4.20mmol)逐滴加入溶于THF(10ml)的6-氨基烟腈(0.50g,4.20mmol)和吡啶(0.39ml,4.83mmol)的搅拌溶液，用冰浴冷却。30分钟后，过滤反应混合物，固体用Et2O洗3x，滤液蒸发产生标题化合物。(UPLC-MS 6)tR 0.92min；ESI-MS 240.1[M+H]+.
中间体60:1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-((2-氧代吡咯烷-1-基)甲基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-甲基脲。
4-氯甲酸硝基苯酯(107mg,0.53mmol)在5分钟中加入溶于THF(2ml)的6-氨基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)烟腈(中间体8,102mg,0.53mmol)和吡啶(0.049ml,0.61mmol)，在Ar正压下用冰浴冷却。反应混合物在0℃搅拌3小时，加入溶于THF(2ml)的1-((2-(1,3-二氧戊环-2-基)-6-(甲基氨基)吡啶-3-基)甲基)吡咯烷-2-酮(中间体58,118mg,0.43mmol)和DMAP(71mg,0.58mmol)，反应混合物加温至室温，搅拌1小时，随后在70℃加热18小时。冷却的反应混合物在饱和NaHCO3水溶液与DCM之间分层，DCM提取2x并蒸发到isolute HM-N
上。(UPLC-MS 7)tR 0.83min；ESI-MS 496.4[M+H]+.
中间体61:1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-((4-甲基-2-氧代哌嗪-1-基)甲基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-异丙氧基吡啶-2-基)-1-甲基脲。
1-((2-(1,3-二氧戊环-2-基)-6-(甲基氨基)吡啶-3-基)甲基)-4-甲基哌嗪-2-酮(中间体62,65mg,0.21mmol)、苯基(5-氰基-4-异丙氧基吡啶-2-基)氨基甲酸酯(中间体63,139mg,0.47mmol)、DMAP(29mg,0.23mmol)和AcCN(1ml)的混合物在密封的小瓶中于Ar气下70℃加热1小时。冷却的反应混合物在5％柠檬酸水溶液与DCM之间分层，DCM提取2x并蒸发到isolute HM-N
上。通过正相色谱用12g
柱纯化，用从庚烷到EtOAc和随后DCM到DCM中10％MeOH的梯度洗脱，产生标题化合物。(UPLC-MS 6)tR0.83min；ESI-MS510.1[M+H]+.
中间体62:1-((2-(1,3-二氧戊环-2-基)-6-(甲基氨基)吡啶-3-基)甲基)-4-甲基哌嗪-2-酮。
2-(1,3-二氧戊环-2-基)-6-(甲基氨基)吡啶甲醛(中间体49,300mg,1.01mmol)、乙基2-((2-氨基乙基)(甲基)氨基)乙酸酯二盐酸盐(中间体64,414mg,2.02mmol)、Et3N(1.40ml,10.1mmol)和MeOH(10ml)的混合物在室温搅拌2.5小时。加入NaBH(OAc)3(641mg,3.03mmol)且反应混合物在室温搅拌18小时。加入额外的NaBH(OAc)3(641mg,3.03mmol)，继续再搅拌18小时，然后加入NaBH3CN(190mg,3.03mmol)且继续再搅拌4天。反应混合物在饱和NaHCO3水溶液与DCM之间分层，DCM提取2x，合并的有机层用Na2SO4干燥并蒸发。通过正相色谱用24g
柱纯化，用从DCM到DCM中20％MeOH的梯度洗脱，产生标题化合物。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.19(d,1H),6.54–6.46(m,1H),6.44(d,1H),5.69(s,1H),4.51(s,2H),4.20–4.13(m,2H),3.96–3.89(m,2H),3.15–3.06(m,4H),2.74(s,3H),2.60–2.51(m,2H),2.22(s,3H).
中间体63:苯基(5-氰基-4-异丙氧基吡啶-2-基)氨基甲酸酯。
氯甲酸苯酯(3.89ml,31.0mmol)在室温逐滴加入溶于THF(100ml)的6-氨基-4-异丙氧基烟腈(中间体28,2.5g,14.11mmol)和吡啶(2.51ml,31.0mmol)的混合物。反应混合物在室温搅拌12小时，在另外搅拌12小时前加入额外的吡啶(2.51ml,31.0mmol)，然后在EtOAc与饱和NaHCO3水溶液之间分层。有机层用饱和卤水洗涤，MgSO4干燥并蒸发。残留物用Et2O磨碎，过滤所得产物作为米黄色固体。(UPLC-MS 7)tR 1.09；ESI-MS 298.2[M+H]+.
中间体64:乙基2-((2-氨基乙基)(甲基)氨基)乙酸酯二盐酸盐。
浓盐酸(10ml)在室温加入溶于THF(20ml)和EtOH(100ml)的乙基2-((2-((叔丁氧羰基)氨基)乙基)(甲基)氨基)乙酸酯(中间体65,3.05g,11.13mmol)。室温搅拌1小时后，蒸发反应混合物，加入乙醇(20ml)，蒸发，再加入乙醇(50ml)，然后在60℃搅拌70分钟。冷却的反应混合物随之蒸发产生标题化合物作为淡黄色玻璃。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.58(s,br,3H),4.19(q,2H),4.26–4.15(m,2H),3.44(s,br,2H),3.21(s,br,2H),2.88(s,3H),1.21(t,3H).
中间体65:乙基2-((2-((叔丁氧羰基)氨基)乙基)(甲基)氨基)乙酸酯。
溴乙酸乙酯(1.27ml,11.48mmol)在0℃加入叔丁基(2-(甲基氨基)乙基)氨基甲酸酯(2.0g,11.48mmol)、三乙胺(4.81ml)和THF(24ml)的混合物。室温搅拌24小时后，反应混合物在饱和NaHCO3水溶液与DCM之间分曾，DCM提取2x，有机层用Na2SO4干燥并蒸发产生标题化合物作为澄清的淡黄色油。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ5.20(s,br,1H),4.18(q,2H),3.24(s,2H),3.22–3.16(m,2H),2.65–2.61(m,2H),2.38(s,3H),1.42(s,9H),1.24(t,3H).
中间体66:1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-((2-羟基-2-甲基丙基)氨基)吡啶-2-基)-1-甲基脲。
标题化合物以与1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-乙基脲(中间体34)类似的方式制备，除了苯基(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)(甲基)氨基甲酸酯(中间体42)和6-氨基-4-((2-羟基-2-甲基丙基)氨基)烟腈(中间体67)用于取代苯基(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)(乙基)氨基甲酸酯(中间体35)和6-氨基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)烟腈(中间体8)。(UPLC-MS 7)tR 0.89；ESI-MS493.3[M+H]+.
中间体67:6-氨基-4-((2-羟基-2-甲基丙基)氨基)烟腈。
1-氨基-2-甲基乙醇(1.0g,11.22mmol)、6-氨基-4-氟烟腈(中间体10,1.54g,11.22mmol)和三乙胺(6.26ml,44.9mmol)的混合物在隔膜密封的反应容器中于氩气下60℃加热18小时。反应混合物随后冷却，蒸发，在饱和NaHCO3水溶液与n-BuOH之间分层，n-BuOH提取3x，合并的有机层用Na2SO4干燥并蒸发。残留物用Et2O(100ml)和DCM(5ml)磨碎产生标题产物作为米黄色固体。(UPLC-MS 6)tR 0.35；ESI-MS 207.2[M+H]+.
中间体68:1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-((2-氧代吡咯烷-1-基)甲基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-异丙氧基吡啶-2-基)-1-甲基脲。
标题化合物以与1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-((4-甲基-2-氧代哌嗪-1-基)甲基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-异丙氧基吡啶-2-基)-1-甲基脲(中间体61)类似的方式制备，除了1-((2-(1,3-二氧戊环-2-基)-6-(甲基氨基)吡啶-3-基)甲基)吡咯烷-2-酮(中间体58)用于取代1-((2-(1,3-二氧戊环-2-基)-6-(甲基氨基)吡啶-3-基)甲基)-4-甲基哌嗪-2-酮(中间体62)。(UPLC-MS 6)tR 1.03；ESI-MS 481.3[M+H]+.
中间体69:1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-((4-甲基-2-氧代哌嗪-1-基)甲基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-甲基脲。
6-氨基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)烟腈(中间体8,188mg,0.98mmol)在Ar气下室温加入溶于DMF(3ml)的二(1H-1,2,4-***-1-基)甲酮(169mg,1.03mmol)搅拌溶液。2小时后，加入溶于DMF(4ml)的1-((2-(1,3-二氧戊环-2-基)-6-(甲基氨基)吡啶-3-基)甲基)-4-甲基哌嗪-2-酮(中间体62,150mg,0.49mmol)溶液。反应混合物搅拌18小时，在饱和NaHCO3水溶液之间分层，DCM提取2x，合并的有机层用卤水洗涤，Na2SO4干燥并蒸发到isolute HM-N
上。通过正相色谱用40g
柱纯化，用从庚烷到EtOAc的梯度洗脱，产生标题化合物。(UPLC-MS 6)tR 0.64；ESI-MS 525.3[M+H]+.
中间体70:1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-异丙氧基吡啶-2-基)-1-甲基脲。
标题化合物以与1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-乙基脲(中间体34)类似的方式制备，除了苯基(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)(甲基)氨基甲酸酯(中间体42)和6-氨基-4-异丙氧基烟腈(中间体28)用于取代苯基(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)(乙基)氨基甲酸酯(中间体35)和6-氨基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)烟腈(中间体8)。(UPLC-MS 7)tR 1.11；ESI-MS 464.3[M+H]+.
中间体71:(外消旋)1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-((3-甲氧基吡咯烷-1-基)甲基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-异丙氧基吡啶-2-基)-1-甲基脲。
标题化合物以与1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-((4-甲基-2-氧代哌嗪-1-基)甲基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-异丙氧基吡啶-2-基)-1-甲基脲(中间体61)类似的方式制备，除了(外消旋)6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-((3-甲氧基吡咯烷-1-基)甲基)-N-甲基吡啶-2-胺(中间体72)用于取代1-((2-(1,3-二氧戊环-2-基)-6-(甲基氨基)吡啶-3-基)甲基)-4-甲基哌嗪-2-酮(中间体62)。(UPLC-MS 6)tR 0.84；ESI-MS 497.3[M+H]+.
中间体72:(外消旋)6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-((3-甲氧基吡咯烷-1-基)甲基)-N-甲基吡啶-2-胺。
标题化合物以与6-(1,3-二氧戊环-2-基)-N-甲基-5-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)吡啶-2-胺(中间体55)类似的方式制备，除了3-甲氧基吡咯烷用于取代1-甲基哌嗪。(UPLC-MS 6)tR 0.42；ESI-MS 294.2[M+H]+.
中间体73:N2-(1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-1H-咪唑-2-基)-N4-(2-甲氧基乙基)-5-(三氟甲基)吡啶-2,4-二胺。
溶于二恶烷(0.4ml)的1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-1H-咪唑-2-胺(中间体74,30mg,0.094mmol)、2-氯-N-(2-甲氧基乙基)-5-(三氟甲基)吡啶-4-胺(中间体75,26mg,0.103mmol)、Pd2(dba)3(1.7mg,0.002mmol)、Xantphos(2.2mg,0.004mmol)和Cs2CO3(43mg,0.131mmol)的混合物在100℃加热42小时。加入额外的Pd2(dba)3(1.8mg)和Xantphos(2.4mg)，在130℃加热6小时。加入额外的Pd2(dba)3(1.8mg)和Xantphos(2.4mg)，继续在130℃加热。另外16小时后，反应混合物冷却至室温，用H2O稀释和EtOAc提取(3x)。合并的有机层用Na2SO4干燥并过滤。滤液用PL-BnSH树脂(安捷伦科技(Agilent Technologies))处理，过滤并浓缩。原材料应用于24g
硅胶柱，通过正相色谱纯化，用95:5:1DCM/MeOH/浓NH4OH洗脱。合并含产品的各部分并蒸发。残留物用Et2O磨碎，过滤所得标题化合物作为米黄色固体。(UPLC-MS 3)tR 0.89；ESI-MS 531.2[M+H]+.
中间体74:1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-1H-咪唑-2-胺。
溶于DME(6ml)和H2O(2ml)的1-(5-溴-6-(1,3-二氧戊环-2-基)吡啶-2-基)-1H-咪唑-2-胺(中间体76,500mg,1.53mmol)、1-甲基-1H-吡唑-4-硼酸频哪醇酯(389mg,1.83mmol)、PdCl2(dppf).CH2Cl2(125mg,0.153mmol)和Na2CO3(421mg,3.97mmol)的混合物在90℃加热。4.5小时后，反应混合物冷却至室温，用H2O稀释和EtOAc提取(3x)。合并的有机层用Na2SO4干燥并过滤。滤液用PL-BnSH树脂(安捷伦科技)处理，过滤并浓缩。原材料应用于120g
硅胶柱，通过正相色谱纯化，用92.5:7.5:1DCM/MeOH/浓NH4OH洗脱。合并含产品的各部分并蒸发产生标题化合物作为棕色固体。(UPLC-MS 3)tR 0.48；ESI-MS 313.1[M+H]+.
中间体75:2-氯-N-(2-甲氧基乙基)-5-(三氟甲基)吡啶-4-胺。
2-甲氧基乙胺(1.0ml,11.57mmol)在0℃逐滴加入2,4-二氯-5-(三氟甲基)吡啶(500mg,2.32mmol)且混合物在室温搅拌2.5小时。反应混合物在饱和NaHCO3水溶液与DCM之间分层，有机层用Na2SO4干燥并蒸发。残留物应用于120g
硅胶柱，通过正相色谱纯化，用DCM到DCM中50％EtOAc的梯度洗脱。获得标题化合物作为主要位置异构体，在4-氯-N-(2-甲氧基乙基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-胺之前洗脱(比例2:1)。合并含产品的各部分并蒸发产生标题化合物作为黄白色固体。(UPLC-MS 6)tR 0.96；ESI-MS 255.1[M+H]+.
中间体76:1-(5-溴-6-(1,3-二氧戊环-2-基)吡啶-2-基)-1H-咪唑-2-胺。
溶于叔丁醇(9.4ml)的3,6-二溴-2-(1,3-二氧戊环-2-基)吡啶(中间体32,2.0g,6.47mmol)、2-氨基咪唑硫酸盐(1.30g,6.80mmol)、碘化亚铜(0.123g,0.65mmol)、碳酸铯(5.27g,16.18mmol)和8-羟基喹啉(0.141g,0.97mmol)的混合物在100℃加热。23小时后，反应混合物冷却至室温，用H2O稀释和EtOAc提取(3x)。合并的有机层用Na2SO4干燥并蒸发。原材料用DMF磨碎，过滤所得产物作为浅棕色固体。(UPLC-MS 3)tR 0.52；ESI-MS 311.1/313.1[M+H]+.
中间体77:N2-(1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-5-基)-N4-(2-甲氧基乙基)-5-(三氟甲基)吡啶-2,4-二胺。
标题化合物以与N2-(1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-1H-咪唑-2-基)-N4-(2-甲氧基乙基)-5-(三氟甲基)吡啶-2,4-二胺(中间体73)类似的方式制备，除了1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-5-胺(中间体78)用于取代1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-1H-咪唑-2-胺(中间体74)。(UPLC-MS 3)tR 1.23；ESI-MS 531.1[M+H]+.
中间体78:1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-5-胺。
标题化合物以与1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-1H-咪唑-2-胺(中间体74)类似的方式制备，除了1-(5-溴-6-(1,3-二氧戊环-2-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-5-胺(中间体79)用于取代1-(5-溴-6-(1,3-二氧戊环-2-基)吡啶-2-基)-1H-咪唑-2-胺(中间体76)。(UPLC-MS 3)tR 0.69；ESI-MS 313.1[M+H]+.
中间体79:1-(5-溴-6-(1,3-二氧戊环-2-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-5-胺。
标题化合物以与1-(5-溴-6-(1,3-二氧戊环-2-基)吡啶-2-基)-1H-咪唑-2-胺(中间体76)类似的方式制备，除了3-氨基吡唑用于取代2-氨基咪唑。标题化合物在来自反应的主要位置异构体前洗脱：1-(5-溴-6-(1,3-二氧戊环-2-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-3-胺。(UPLC-MS 3)tR 0.83；ESI-MS 313.0和311.0[M+H]+.
中间体80:1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(吡咯烷-1-基甲基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-异丙氧基吡啶-2-基)-1-甲基脲。
标题化合物以与1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-((4-甲基-2-氧代哌嗪-1-基)甲基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-异丙氧基吡啶-2-基)-1-甲基脲(中间体61)类似的方式制备，除了6-(1,3-二氧戊环-2-基)-N-甲基-5-(吡咯烷-1-基甲基)吡啶-2-胺(中间体81)用于取代1-((2-(1,3-二氧戊环-2-基)-6-(甲基氨基)吡啶-3-基)甲基)-4-甲基哌嗪-2-酮(中间体62)。(UPLC-MS 7)tR 0.84；ESI-MS 467.3[M+H]+.
中间体81:6-(1,3-二氧戊环-2-基)-N-甲基-5-(吡咯烷-1-基甲基)吡啶-2-胺。
标题化合物以与6-(1,3-二氧戊环-2-基)-N-甲基-5-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)吡啶-2-胺(中间体55)类似的方式制备，除了吡咯烷用于取代1-甲基哌嗪。(UPLC-MS 7)tR0.37；ESI-MS 264.2[M+H]+.
中间体82:3-(5-氰基-4-异丙氧基吡啶-2-基)-1-(4-(二甲氧基甲基)嘧啶-2-基)脲。
4-(二甲氧基甲基)吡啶-2-胺(35mg,0.207mmol)、苯基(5-氰基-4-异丙氧基吡啶-2-基)氨基甲酸酯(中间体63,92mg,0.309mmol)、4-(二甲基氨基)-吡啶(28mg,0.228mmol)和乙腈(2ml)的混合物在密封小瓶中70℃加热1小时。冷却的混合物在5％柠檬酸水溶液与CH2Cl2之间分层，有机层用Na2SO4干燥并蒸发。残留物通过正相色谱,12g
柱纯化，用庚烷到EtOAc的梯度洗脱以产生标题化合物。(UPLC-2min 7)tR 1.00min；ESI-MS 373.1[M+H]+.
实施例
实施例1：6-((2-(6-甲酰基吡啶-2-基)苯基)氨基)烟腈。
在小瓶中，溶于二恶烷(2ml)的6-((2-(6-(羟甲基)吡啶-2-基)苯基)氨基)烟腈(中间体1,50mg,0.165mmol)溶液用二氧化锰(216mg,2.48mmol)处理。小瓶用氩气冲洗，密封且反应混合物在104℃搅拌45分钟。反应混合物冷却至室温，经硅藻土塞子过滤。塞子用EtOAc洗脱。滤液减压浓缩，残留物通过正相色谱(4g硅胶筒,庚烷/EtOAc 100:0-0:100)纯化产生标题化合物作为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.08(s,1H),10.08(s,1H),8.48(d,1H),8.18–8.07(m,3H),7.96-7.84(m,3H),7.54-7.47(m,1H),7.32-7.25(m,1H),6.95(d,1H).(UPLC-MS 1)tR 1.06min；ESI-MS 301.1[M+H]+.
实施例2：3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-(6-甲酰基吡啶-2-基)-1-甲基脲。
溶于THF(2ml)和水(0.5ml)的1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-甲基脲(中间体6,49mg,0.123mmol)溶液用浓HCl(0.20ml)处理，室温搅拌8小时。反应混合物用饱和NaHCO3水溶液淬灭，DCM提取(3x)。合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。原材料用EtOAc磨碎。向混合物加入庚烷，随后离心悬液。移出母液，干燥固体获得标题化合物作为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.48(s,1H),9.94(d,1H),8.25(s,1H),8.17-8.11(m,1H),7.72(dd,1H),7.68(m,1H),7.47(s,1H),6.97(t,1H),3.55-3.49(m,2H),3.46(s,3H),3.41–3.35(m,2H),3.29(s,3H).
(UPLC-MS 3)tR 0.88min；宽峰；ESI-MS 355.1[M+H]+.
实施例3：3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-(6-甲酰基吡啶-2-基)-1-(2-甲氧基乙基)脲。
标题化合物通过与1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-甲基脲(实施例2)类似的方法制备，1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-甲基脲(中间体6)用1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-(2-甲氧基乙基)脲(中间体12)取代。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.44(s,1H),9.92(s,1H),8.24(s,1H),8.08(t,1H),7.80(d,1H),7.71(d,1H),7.39(s,1H),6.97(t,1H),4.26(t,2H),3.63(t,2H),3.55-3.49(m,2H),3.40-3.36(m,2H),3.29-3.26(m,6H).(UPLC-MS 3)tR 0.93min；宽峰；ESI-MS 399.1[M+H]+.
实施例4：(外消旋)3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-(6-甲酰基吡啶-2-基)-1-((四氢呋喃-3-基)甲基)脲。
标题化合物通过与实施例2类似的方法制备，1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-甲基脲(中间体6)用(外消旋)1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-((四氢呋喃-3-基)甲基)脲(中间体15)取代，原材料通过超临界流体色谱(SFC 1,DEAP柱)纯化。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.62(s,1H),9.94(d,1H),8.23(s,1H),8.11(t,1H),7.74(m,2H),7.42(s,1H),6.93(t,1H),4.17-4.02(m,2H),3.81-3.74(m,1H),3.66-3.56(m,2H),3.53(t,2H),3.45(dd,1H),3.39(q,2H),3.29(s,3H),2.62-2.53(m,1H),1.95-1.84(m,1H),1.56-1.67(m,1H).(UPLC-MS 3)tR 0.89min；ESI-MS 425.2[M+H]+.
实施例5：(外消旋)3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-(6-甲酰基-5-(羟甲基)吡啶-2-基)-1-((四氢呋喃-3-基)甲基)脲。
将浓盐酸(0.36ml)室温加入溶于THF(2ml)和水(2ml)的1-(5-(((叔丁基二甲基硅烷)氧基)甲基)-6-(1,3-二氧戊环-2-基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-((四氢呋喃-3-基)甲基)脲(中间体18,135mg,0.220mmol)。搅拌40分钟后，加入额外的浓盐酸(0.36ml)，这在1.3和2.3小时后再重复2次。反应混合物再搅拌30分钟，在饱和NaHCO3水溶液与DCM之间分层，DCM提取2x，有机层用Na2SO4干燥并蒸发。残留物用EtOAc(3ml)在45℃超声波处理，加入庚烷(3ml)。标题化合物随后经过滤分离作为白色固体。醛和内半缩醛混合物1H NMR(400MHz,DMSO-d6)，主要半缩醛形式的数据：δ11.02(s,1H),8.16(s,1H),7.92(d,1H),7.43(d,1H),7.41(s,1H),7.03(d,1H),6.91(t,br,1H),6.16(d,1H),5.09(d,1H),4.95(d,1H),4.09–3.96(m,2H),3.76–3.70(m,1H),3.61–3.48(m,4H),3.43–3.24(m,4H),3.11(s,3H),1.91–1.81(m,1H),1.61–1.51(m,1H).(UPLC-MS 7)tR0.71min；ESI-MS 455.4[M+H]+.
实施例6和7：(S)-3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-(6-甲酰基吡啶-2-基)-1-((四氢呋喃-3-基)甲基)脲和(R)-3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-(6-甲酰基吡啶-2-基)-1-((四氢呋喃-3-基)甲基)脲。
将浓盐酸(1.56ml)室温加入溶于THF(10ml)和水(10ml)的1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-((四氢呋喃-3-基)甲基)脲(中间体24,110mg,0.235mmol)的第一洗脱对映异构体。搅拌48小时后，反应混合物在饱和NaHCO3水溶液与DCM之间分层，DCM提取3x，有机层用Na2SO4干燥并蒸发。残留物用EtOAc和庚烷磨碎产生标题化合物作为白色固体。
类似地，第二洗脱对映异构体(中间体25)以类似方式去保护。
实施例8：6-(3-(5-氰基-4-异丙氧基吡啶-2-基)-1-甲基脲基)-2-甲酰基烟酸。
将浓盐酸(0.48ml)室温加入溶于THF(3ml)和水(1.5ml)的1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(4-甲基哌嗪-1-羰基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-异丙氧基吡啶-2-基)-1-甲基脲(中间体26,74mg,0.145mmol)。搅拌24小时后，反应混合物在饱和NaHCO3水溶液与DCM之间分层，DCM提取2x，有机层用Na2SO4干燥并蒸发。残留物经AnaLogix C18SF40 150gSuperFlash柱过滤，用含0.1％CF3CO2H的AcCN水溶液洗脱，含产品的各部分蒸发产生标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ12.28(s,1H),8.58(s,1H),8.44(d,1H),8.31(d,1H),7.87(s,1H),7.62(d,1H),6.61(d,1H),4.89–4.81(m,1H),3.53(s,3H),1.39(d,6H).(UPLC-MS6)tR 0.90min；ESI-MS 384.2[M+H]+.
实施例9：6-(3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-甲基脲基)-2-甲酰基烟酸。
将浓盐酸(0.44ml)室温加入溶于THF(3ml)和水(1.5ml)的1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(4-甲基哌嗪-1-羰基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-甲基脲(中间体33,70mg,0.133mmol)。搅拌18小时后，反应混合物在饱和NaHCO3水溶液与DCM之间分层，DCM提取2x，有机层用Na2SO4干燥并蒸发。残留物经AnaLogix C18SF40150g SuperFlash柱过滤，用含0.1％CF3CO2H的AcCN水溶液洗脱，含产品的各部分蒸发，通过反相色谱进一步纯化产生标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ12.05(s,1H),8.44(s,br,1H),8.30–8.25(m,2H),7.55(d,1H),7.46(s,1H),7.04(s,br,1H),6.59(s,br,1H),3.54–3.48(m,5H),3.41–3.35(m,2H),3.29(s,3H).(UPLC-MS 7)tR 0.71min；ESI-MS 399.3[M+H]+.
实施例10：3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-乙基-1-(6-甲酰基-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)脲。
将浓盐酸(0.40ml)室温加入溶于THF(3ml)和水(0.4ml)的1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-乙基脲(中间体34,60mg,0.097mmol)。搅拌18小时后，反应混合物在饱和NaHCO3水溶液与DCM之间分层，DCM提取2x，有机层用Na2SO4干燥并蒸发。残留物吸附到isolute HM-N
上，通过正相色谱用12g
柱纯化，用从庚烷到EtOAc的梯度洗脱。然后合并含产品的各部分并蒸发产生标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ12.44(s,1H),10.11(s,1H),8.26(s,1H),8.17(s,1H),8.10(d,1H),7.83(s,1H),7.50(s,1H),6.93(t,br,1H),4.12–4.03(m,2H),3.92(s,3H),3.55–3.48(m,2H),3.40–3.33(m,2H),3.30(s,3H),1.23(t,3H).(UPLC-MS 6)tR 1.10min；ESI-MS 477.3[M+H]+.
实施例11：3-(5-氰基-4-(异丙基氨基)吡啶-2-基)-1-乙基-1-(6-甲酰基-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)脲。
标题化合物以与3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-乙基-1-(6-甲酰基-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)脲(实施例10)类似的方式制备，除了1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-(异丙基氨基)吡啶-2-基)-1-乙基脲(中间体38)用于取代1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-乙基脲(中间体34)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ12.43(s,1H),10.10(s,1H),8.24(s,1H),8.17(s,1H),8.10(d,1H),7.83(s,1H),7.66(d,1H),7.53(s,1H),6.64(d,br,1H),4.11–4.03(m,2H),3.92(s,3H),3.80–3.71(m,1H),1.25–1.16(m,9H).(UPLC-MS 6)tR 0.96/1.00min；溶于MeOH的样品显示双峰；ESI-MS 433.3[M+H]+.
实施例12：3-(5-氰基-4-异丙氧基吡啶-2-基)-1-乙基-1-(6-甲酰基-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)脲。
标题化合物以与3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-乙基-1-(6-甲酰基-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)脲(实施例10)类似的方式制备，除了1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-异丙氧基氨基)吡啶-2-基)-1-乙基脲(中间体40)用于取代1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-乙基脲(中间体34)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ12.71(s,1H),10.12(s,1H),8.56(s,1H),8.18(s,1H),8.11(d,1H),7.91(s,1H),7.84(s,1H),7.70(d,1H),4.90–4.78(m,1H),4.13–4.04(m,2H),3.92(s,3H),1.42–1.36(m,6H),1.20(t,br,3H).
(UPLC-MS 7)tR 1.05/1.07min；溶于MeOH的样品显示双峰；ESI-MS 434.3[M+H]+.
实施例13：3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-甲基-1-(6-甲酰基-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-yl)脲。
标题化合物以与3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-乙基-1-(6-甲酰基-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)脲(实施例10)类似的方式制备，除了1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-甲基脲(中间体41)用于取代1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-乙基脲(中间体34)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ12.57(s,1H),10.12(s,1H),8.26(s,1H),8.17(s,1H),8.13(d,1H),7.83(s,1H),7.67(d,1H),7.49(s,1H),6.95(d,br,1H),3.92(s,3H),3.56–3.50(m,2H),3.46(s,3H),3.42–3.35(m,2H),3.29(s,3H).(UPLC-MS 6)tR 0.66/0.81min；与水合物的合并峰；ESI-MS 435.1[M+H]+.
实施例14：3-(5-氰基-4-(异丙基氨基)吡啶-2-基)-1-(6-甲酰基-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-1-甲基脲。
标题化合物以与3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-乙基-1-(6-甲酰基-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)脲(实施例10)类似的方式制备，除了1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-(异丙氨基)吡啶-2-基)-1-甲基脲(中间体44)用于取代1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-乙基脲(中间体34)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ12.55(s,1H),10.12(s,1H),8.29(s,1H),8.25(s,1H),8.13(d,1H),7.83(s,1H),7.65(d,1H),7.49(s,1H),6.65(d,br,1H),3.92(s,3H),3.82–3.70(m,1H),3.46(s,3H),1.24(d,6H).(UPLC-MS6)tR 0.94/1.06min；与水合物的合并峰；ESI-MS419.2[M+H]+.
实施例15：N-((6-(3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-甲基脲基)-2-甲酰基吡啶-3-基)甲基)-N-甲基乙酰胺。
将浓盐酸(0.50ml)室温加入溶于THF(2ml)的N-((6-(3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-甲基脲基)-2-(1,3-二氧戊环-2-基)吡啶-3-基)甲基)-N-甲基乙酰胺(中间体45,100mg,0.194mmol)。反应混合物再搅拌18小时，随后用饱和NaHCO3水溶液中和，过滤且固体用水洗涤。固体残留物用Et2O和DCM超声波处理，标题化合物经过滤分离作为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)mixture of rotamers:δ12.47(s,1H),10.07(s,1H),8.23(s,1H),7.73–7.55(m,2H),7.44(s,1H),6.87(s,br,1H),4.95and 4.87(s,2H),3.54–3.25(m,10H),3.00and 2.84(s,3H),2.12and 1.97(s,3H).
(UPLC-MS 7)tR 0.81min；ESI-MS 440.2[M+H]+.
实施例16：3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-(5-(二氟甲基)-6-甲酰基吡啶-2-基)-1-甲基脲。
标题化合物以与N-((6-(3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-甲基脲基)-2-甲酰基吡啶-3-基)甲基)-N-甲基乙酰胺(实施例15)类似的方式制备，除了3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-(5-(二氟甲基)-6-(1,3-二氧戊环-2-基)吡啶-2-基)-1-甲基脲(中间体50)用于取代N-((6-(3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-甲基脲基)-2-(1,3-二氧戊环-2-基)吡啶-3-基)甲基)-N-甲基乙酰胺(中间体45)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ12.20(s,1H),9.99(s,1H),8.31(d,1H),8.26(s,1H),7.78(d,1H),7.55(t,1H),7.44(s,1H),6.98(s,br,1H),3.56–3.45(m,5H),3.43–3.31(m,2H),3.28(s,3H).(UPLC-MS 7)tR1.03min；ESI-MS 405.2[M+H]+.
实施例17：3-(5-氰基-4-异丙氧基吡啶-2-基)-1-(6-甲酰基-5-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)吡啶-2-基)-1-甲基脲。
标题化合物以与3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-乙基-1-(6-甲酰基-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)脲(实施例10)类似的方式制备，除了1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-异丙氧基吡啶-2-基)-1-甲基脲(中间体53)用于取代1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-乙基脲(中间体34)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ12.84(s,1H),10.19(s,1H),8.56(s,1H),8.10(d,1H),7.89(m,1H),7.63(d,1H),4.84(septet,1H),3.87(s,2H),3.47(s,3H),3.30(s,br,3H),2.58–2.07(m,8H),1.39(d,6H).(UPLC-MS 6)tR 0.77min；ESI-MS 452.4[M+H]+.
实施例18：3-(5-氰基-4-异丙氧基吡啶-2-基)-1-(5-(二氟甲基)-6-甲酰基吡啶-2-基)-1-甲基脲。
标题化合物以与N-((6-(3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-甲基脲基)-2-甲酰基吡啶-3-基)甲基)-N-甲基乙酰胺(实施例15)类似的方式制备，除了3-(5-氰基-4-异丙氧基吡啶-2-基)-1-(5-(二氟甲基)-6-(1,3-二氧戊环-2-基)吡啶-2-基)-1-甲基脲(中间体56)用于取代N-((6-(3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-甲基脲基)-2-(1,3-二氧戊环-2-基)吡啶-3-基)甲基)-N-甲基乙酰胺(中间体45)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δ12.35(s,1H),10.00(s,1H),8.58(s,1H),8.33(d,1H),7.87–7.78(m,2H),7.57(t,1H),4.90-4.80(m,1H),3.53(s,3H),1.39(d,6H).(UPLC-MS 7)tR 0.97/1.18min；与水合物的合并峰；ESI-MS 390.2[M+H]+.
实施例19：3-(5-氰基吡啶-2-基)-1-(6-甲酰基-5-((2-氧代吡咯烷-1-基)甲基)吡啶-2-基)-1-甲基脲。
标题化合物以与3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-乙基-1-(6-甲酰基-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)脲(实施例10)类似的方式制备，除了1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-((2-氧代吡咯烷-1-基)甲基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基吡啶-2-基)-1-甲基脲(中间体57)用于取代1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-乙基脲(中间体34)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ12.74(s,1H),10.12(s,1H),8.79(d,1H),8.25(dd,1H),8.15(d,1H),7.86(d,1H),7.66(d,1H),4.80(s,2H),3.48(s,3H),3.42–3.32(m,2H),2.44–2.38(m,2H),2.01–1.90(m,2H).(UPLC-MS 7)tR 0.77/0.84min；溶于MeOH的样品显示双峰；ESI-MS379.0[M+H]+.
实施例20：3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-(6-甲酰基-5-((2-氧代吡咯烷-1-基)甲基)吡啶-2-基)-1-甲基脲。
标题化合物以与3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-(6-甲酰基-5-(羟甲基)吡啶-2-基)-1-((四氢呋喃-3-基)甲基)脲(实施例5)类似的方式制备，除了1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-((2-氧代吡咯烷-1-基)甲基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-甲基脲(中间体60)用于取代1-(5-(((叔丁基二甲基硅烷)氧基)甲基)-6-(1,3-二氧戊环-2-基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-((四氢呋喃-3-基)甲基)脲(中间体18)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ12.49(s,1H),10.10(s,1H),8.27(s,1H),7.86(d,1H),7.63(d,1H),7.48(s,1H),6.99(t,br,1H),4.79(s,2H),3.56–3.51(m,2H),3.46(s,3H),3.42–3.32(m,2H),3.32–3.27(m,5H),2.36–2.28(m,2H),2.04–1.92(m,2H).(UPLC-MS 6)tR 0.72/0.80min；溶于MeOH的样品显示双峰；ESI-MS 452.2[M+H]+.
实施例21：3-(5-氰基-4-异丙氧基吡啶-2-基)-1-(6-甲酰基-5-((4-甲基-2-氧代哌嗪-1-基)甲基)吡啶-2-基)-1-甲基脲。
标题化合物以与3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-乙基-1-(6-甲酰基-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)脲(实施例10)类似的方式制备，除了1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-((4-甲基-2-氧代哌嗪-1-基)甲基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-异丙氧基吡啶-2-基)-1-甲基脲(中间体61)用于取代1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-乙基脲(中间体34)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ12.68(s,1H),10.10(s,1H),8.57(s,1H),7.87(s,1H),7.78(d,1H),7.68(d,1H),4.92(s,2H),4.84(septet,1H),3.53–3.26(m,5H),3.06(s,2H),2.67–2.58(m,2H),2.24(s,6H).(UPLC-MS 6)tR 0.75/0.80min；溶于MeOH的样品显示双峰；ESI-MS 466.3[M+H]+.
实施例22：3-(5-氰基-4-((2-羟基-2-甲基丙基)氨基)吡啶-2-基)-1-(6-甲酰基-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-1-甲基脲。
标题化合物以与3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-乙基-1-(6-甲酰基-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)脲(实施例10)类似的方式制备，除了1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-((2-羟基-2-甲基丙基)氨基)吡啶-2-基)-1-甲基脲(中间体66)用于取代1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-乙基脲(中间体34)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ12.56(s,1H),10.12(s,1H),8.28(s,1H),8.17(s,1H),8.13(d,1H),7.83(s,1H),7.65(d,1H),7.54(s,1H),6.30(t,br,1H),3.92(s,3H),3.46(s,3H),3.40(d,1H),3.16(d,2H),1.17(d,6H).(UPLC-MS 6)tR 0.76/0.78min；溶于MeOH的样品显示双峰；ESI-MS 449.3[M+H]+.
实施例23：3-(5-氰基-4-异丙氧基吡啶-2-基)-1-(6-甲酰基-5-((2-氧代吡咯烷-1-基)甲基)吡啶-2-基)-1-甲基脲。
标题化合物以与3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-乙基-1-(6-甲酰基-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)脲(实施例10)类似的方式制备，除了1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-((2-氧代吡咯烷-1-基)甲基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-异丙氧基吡啶-2-基)-1-甲基脲(中间体68)用于取代1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-乙基脲(中间体34)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ12.67(s,1H),10.11(s,1H),8.57(s,1H),7.87(s,1H),7.86(d,1H),7.65(d,1H),4.85(septet,1H),4.79(s,2H),3.48(s,3H),3.33–3.25(m,2H),2.35–2.26(m,2H),2.03–1.93(m,2H),1.39(d,6H).(UPLC-MS 6)tR 0.92/0.97min；溶于MeOH的样品显示双峰；ESI-MS 437.2[M+H]+.
实施例24：3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-(6-甲酰基-5-((4-甲基-2-氧代哌嗪-1-基)甲基)吡啶-2-基)-1-甲基脲。
将浓盐酸(1.31ml)室温加入溶于THF(5ml)的1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-((4-甲基-2-氧代哌嗪-1-基)甲基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-甲基脲(中间体69,167mg,0.318mmol)。搅拌18小时后，加入额外的浓盐酸(1.31ml)，室温再继续搅拌1小时。反应混合物在饱和NaHCO3水溶液与DCM之间分层，DCM提取2x，有机层用Na2SO4干燥并蒸发。残留物吸附到isolute HM-N
上，通过正相色谱用24g
柱纯化，用从DCM到DCM中20％MeOH的梯度洗脱。然后合并含产品的各部分并蒸发产生标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ12.46(s,1H),10.09(s,1H),8.26(s,1H),7.78(d,1H),7.66(d,1H),7.47(s,1H),6.96(t,br,1H),4.91(s,2H),3.57–3.51(m,2H),3.45(s,3H),3.39–3.32(m,2H),3.33–3.26(m,5H),3.05(s,2H),2.66–2.59(m,2H),2.24(s,3H).(UPLC-MS 6)tR 0.60/0.63min；带有水合物的未分离峰；ESI-MS 481.3[M+H]+.
实施例25：3-(5-氰基-4-异丙氧基吡啶-2-基)-1-(6-甲酰基-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-1-甲基脲。
标题化合物以与3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-乙基-1-(6-甲酰基-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)脲(实施例24)类似的方式制备，除了1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-异丙氧基吡啶-2-基)-1-甲基脲(中间体70)用于取代1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-((4-甲基-2-氧代哌嗪-1-基)甲基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-甲基脲(中间体69)。(UPLC-MS 6)tR 1.00/1.02min；溶于MeOH的样品显示双峰；ESI-MS 420.1[M+H]+.
实施例26：(外消旋)3-(5-氰基-4-异丙氧基吡啶-2-基)-1-(6-甲酰基-5-((3-甲氧基吡咯烷-1-基)甲基)吡啶-2-基)-1-甲基脲。
标题化合物以与3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-乙基-1-(6-甲酰基-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)脲(实施例10)类似的方式制备，除了1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-((3-甲氧基吡咯烷-1-基)甲基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-异丙氧基吡啶-2-基)-1-甲基脲(中间体71)用于取代1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-乙基脲(中间体34)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ12.85(s,1H),10.17(s,1H),8.56(s,1H),8.11(d,1H),7.89(s,1H),7.64(d,1H),4.84(septet,1H),3.99(s,2H),3.91–3.82(m,1H),3.47(s,3H),3.15(s,3H),2.74–2.58(m,2H),2.48–2.39(m,2H),2.01–1.92(m,1H),1.69–1.61(m,1H),1.38(d,6H).(UPLC-MS 7)tR 0.77min；ESI-MS 453.3[M+H]+.
实施例27：6-(2-((4-((2-甲氧基乙基)氨基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基)-1H-咪唑-1-基)-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶甲醛。
将浓盐酸(0.10ml)室温加入溶于THF(0.3ml)的N2-(1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-1H-咪唑-2-基)-N4-(2-甲氧基乙基)-5-(三氟甲基)吡啶-2,4-二胺(中间体73,13mg,0.025mmol)溶液。3小时后加入额外的浓盐酸(0.3ml)。搅拌5小时后，加入饱和NaHCO3水溶液，混合物用DCM提取(3x)。合并的有机层用Na2SO4干燥并蒸发。残留物用Et2O磨碎产生标题化合物作为淡黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.25(br s,1H),10.20(s,1H),8.31(m,1H),8.28(s,1H),8.10-8.18(m,2H),7.92(s,1H),7.80-7.91(m,2H),7.02(m,1H),6.15(m,1H),3.95(s,3H),3.59(m,2H),3.43(m,2H),3.33(s,3H).(UPLC-MS 3)tR 0.73/0.84(宽峰)；ESI-MS 487.1[M+H]+.
实施例28：6-(5-((4-((2-甲氧基乙基)氨基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶甲醛。
标题化合物以与6-(2-((4-((2-甲氧基乙基)氨基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基)-1H-咪唑-1-基)-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶甲醛(实施例27)类似的方式合成，除了N2-(1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-5-基)-N4-(2-甲氧基乙基)-5-(三氟甲基)吡啶-2,4-二胺(中间体77)用于取代N2-(1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-1H-咪唑-2-基)-N4-(2-甲氧基乙基)-5-(三氟甲基)吡啶-2,4-二胺(中间体73)。获得标题化合物作为淡黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.51(s,1H),10.26(s,1H),8.29-8.30(m,2H),8.21-8.23(m,2H),7.94(s,1H),7.70(d,1H),6.90(d,1H),6.52(s,1H),6.18(m,1H),3.96(s,3H),3.63(m,2H),3.49(m,2H),3.33(s,3H).(UPLC-MS 3)tR 1.22；ESI-MS 487.1[M+H]+.
实施例29：3-(5-氰基-4-异丙氧基吡啶-2-基)-1-(6-甲酰基-5-(吡咯烷-1-基甲基)吡啶-2-基)-1-甲基脲。
标题化合物以与3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-乙基-1-(6-甲酰基-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)脲(实施例24)类似的方式制备，除了1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-(吡咯烷-1-基甲基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-异丙氧基吡啶-2-基)-1-甲基脲(中间体80)用于取代1-(6-(1,3-二氧戊环-2-基)-5-((4-甲基-2-氧代哌嗪-1-基)甲基)吡啶-2-基)-3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-甲基脲(中间体69)，所述材料通过SFC(SFC 1)进一步纯化。(UPLC-MS 7)tR 0.73min；ESI-MS 423.5[M+H]+.
实施例30：1-(5-氰基-4-异丙氧基吡啶-2-基)-3-(4-甲酰基嘧啶-2-基)脲。
标题化合物以与N-((6-(3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-甲基脲基)-2-甲酰基吡啶-3-基)甲基)-N-甲基乙酰胺(实施例15)类似的方式制备，除了3-(5-氰基-4-异丙氧基吡啶-2-基)-1-(4-(二甲氧基甲基)嘧啶-2-基)脲(中间体82)用于取代N-((6-(3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-甲基脲基)-2-(1,3-二氧戊环-2-基)吡啶-3-基)甲基)-N-甲基乙酰胺(中间体45)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ11.76(s,1H),10.95(s,1H),9.88(s,1H),9.04(d,1H),8.57(s,1H),7.92(s,1H),7.57(d,1H),4.90(septet,1H),1.50(d,6H).(UPLC-MS 7)tR 0.74min；宽峰；ESI-MS 345.2[M+H]+.
FGFR4的体外生化激酶测定
所有试验在384孔微量滴定板中进行。各试验板包含40种测试化合物的8点连续稀释液以及作为参照化合物的星孢菌素的4组8点连续稀释液，加上16个高对照和16个低对照。
液体处理和孵育步骤在装有机械臂(Thermo CatX,Caliper Twister II))和孵育器(Liconic STX40,Thermo Cytomat 2C450)的Innovadyne Nanodrop Express上完成。通过加入50nl/孔溶于90％DMSO的化合物溶液，来制备试验板。激酶反应如下起始：逐步加入4.5μl/孔的肽/ATP-溶液(50mM HEPES,pH 7.5,1mM DTT,0.02％吐温(Tween)20,0.02％BSA,0.6％DMSO,10mMβ-甘油磷酸盐和10μM原钒酸钠,16mM MgCl2,1122μM ATP,4μM肽(5-Fluo-Ahx-KKKKEEIYFFFG-NH2,Biosyntan公司(Biosyntan GmbH))，和4.5μl/孔的酶溶液(50mM HEPES,pH 7.5,1mM DTT,0.02％吐温20,0.02％BSA,0.6％DMSO,10mMβ-甘油磷酸盐和10μM原钒酸钠,16mM MgCl2,6nM FGFR4(GST-FGFR4(388-802),通过在昆虫细胞中表达以及亲和色谱而由机构内部制备)。激酶反应在30℃孵育60分钟，随后通过加入16μl/孔的停止液(100mM HEPES pH 7.5,5％DMSO,0.1％Caliper包衣试剂,10mM EDTA和0.015％Brij35)来终止。将有终止激酶反应的板转至Caliper LC3000工作台以读取。用Caliper微流体迁移技术分离磷酸化和未磷酸化的肽。简言之，将来自终止激酶反应的样品加载于芯片。通过恒定缓冲液流动将分析物运送通过芯片，底物肽的迁移通过其标记的荧光信号来监测。磷酸化肽(产物)和未磷酸化肽(底物)通过其电荷/质量比在电场中分开。由所形成磷酸肽的量计算激酶活性。通过非线性回归分析从不同化合物浓度下的百分比抑制值来确定IC50值。
制备化合物稀释液
测试化合物溶于DMSO(10mM)并转入携带独特2D矩阵的1.4mL平底或V型矩阵管。如果不立即使用，储液在+2℃保存。对于试验程序，解冻小瓶并通过扫描仪鉴定，由此产生指导后续工作步骤的工作单。
化合物稀释在96孔板中完成。此模式使处于8个浓度(单点)下的最多40种个体测试化合物的试验可行，包括4种参照化合物。稀释操作包括生成“预稀释板”、“母板”和“试验板”。
预稀释板：聚丙烯96孔板用作预稀释板。总共制备4个预稀释板，包括各自在板位置A1-A10的10种测试化合物，A11处的1种标准化合物和A12处的1种DMSO对照。所有稀释步骤在HamiltonSTAR机器人上完成。
母板：将30μL的个体化合物稀释液(包括4个“预稀释板”的标准化合物和对照)转至384“母板”，包括以下浓度：1’810、362、72.5、54.6、14.5、2.9、0.58和0.12μM，分别在90％DMSO中。
试验板：随后如下制备相同“试验板”：通过HummingBird 384通道分液器抽吸50nL的“母板”各化合物稀释液到384孔“试验板”内。这些板直接用于以9.05μL总体积进行的试验。这在试验中产生10、2.0、0.4、0.08、0.016、0.0032、0.00064和0.000128μM的化合物终浓度以及0.5％的DMSO终浓度。
FGFR4的体外细胞激酶测定
作为细胞FGFR4激酶活性的读取，开发了测量FGFR4上酪氨酸磷酸化含量的试验。为此，生成BaF3-Tel-FGFR4细胞系：用编码融合蛋白的逆转录病毒稳定转导BaF3细胞，所述融合蛋白由融合至FGFR4胞质域(包括近膜区结构域)的TEL氨基末端部分(aa1-337)组成。TEL结构域的存在可介导融合FGFR4激酶的组成型激活，这是通过寡聚化和由此酪氨酸位点的自身磷酸化实现的。
开发基于MSD(Meso Scale Discovery)的捕获ELISA并如下使用：
-细胞处理：每孔250000个BaF3-Tel-FGFR4细胞接种于96孔组织培养板(CorningCat#3359)的40uL生长培养基(RPMI-1640(Amimed Cat#1-41F01-I)，补充有10％胎牛血清,10mM HEPES,1mM丙酮酸钠,2mM稳定谷氨酰胺和1x青霉素-链霉素)。使用液体处理装置(Velocity 11Bravo,安捷伦(Agilent))，在DMSO中制备连续3倍稀释的化合物，预稀释于生长培养基中，然后转移10uL/孔到细胞板。在37℃/5％CO2孵育1小时后，加入50uL裂解缓冲液(150mM NaCl,20mM Tris(pH 7.5),1mM EDTA,1mM EGTA,1％曲通(Triton)X-100,10mMNaF，补充蛋白酶抑制剂(Complete Mini,Roche Cat#11836153001)和磷酸酶)抑制剂(磷酸酶Inhib I,西格玛(SIGMA)Cat#P2850；磷酸酶Inhib II,西格玛Cat#P5726，根据供应商说明)并在冰上孵育30分钟，以300rpm振荡。样品板随后在-70℃冷冻和保存。冰上解冻后，样品板在6℃以1200rpm离心15分钟。
-ELISA试验：多阵列96孔板(MSD,Cat#L15XB-3)用25uL/孔的小鼠抗H-TEL抗体(圣克鲁斯公司(Santa Cruz),Cat#sc-166835)室温包被1小时，抗体在PBS/O中1:400稀释。加入溶于TBS-T(50mM Tris,150mM NaCl,0.02％吐温-20)的150uL 3％MSD-阻断剂A(Cat#R93BA-1)后，板在室温振荡孵育1小时。然后，板用200uL/孔的TBS-T洗涤。50uL细胞裂解物随后转移到包被板并在4℃孵育15小时，然后用200μl TBS-T/孔洗3次并加入25μl/孔的MSDSULFOTAGGED PY20抗体(MSD Cat#R32AP-5)，抗体在TBS-T+1％MSD阻断剂A中1:250稀释。室温振荡孵育1小时后，孔用200μl TBS-T/孔洗3次。加入150μl用纳米水1:4稀释的MSD读取缓冲液(MSD,Cat#R92TC-2)储液后，立即通过SectorImager 6000(MSD)来定量电化学发光信号产生。IC50计算：对于数据分析，试验背景在含培养基和裂解缓冲液但没有细胞的孔中测定，从所有数据点中减去对应值。特定测试化合物浓度对FGFR4磷酸化的影响表示为仅用载剂处理的细胞(DMSO,0.2％f.c.)所得的背景-校正电化学发光读数(该读数设为100)的百分比。引起半数最大信号抑制(IC50)的化合物浓度通过标准四参数曲线拟合(XLfit 5.4,IDBS)确定。
细胞增殖试验
亚甲基蓝染色增殖试验(MBS)：化合物对细胞增殖的影响用HuH-7肝细胞癌细胞评价，所述细胞获自日本研究生物资源细胞库(Japanese Collection of ResearchBioresources Cell Bank)(Cat#JCRB0403)并在37℃,5％CO2加湿培养箱中培养于供应商推荐的培养基(DMEM高葡萄糖(Amimed Cat#1-26F01-I),10％胎牛血清(英杰(Invitrogen)Cat#16140-071),1mM丙酮酸钠(Amimed Cat#5-60F00-H),1x青霉素/链霉素(Amimed Cat#4-01F00-H))。特别地，5000细胞/孔接种于96孔组织培养板(TPP Cat#92696)，总培养基体积为100μl/孔，24小时后一式三份加入递增的化合物稀释液或DMSO。化合物加入后72小时，通过加入25μL/孔的20％戊二醛(西格玛奥德里奇(Sigma Aldrich Ca)t#G400-4)来固定细胞并室温孵育10分钟。细胞用H2O,200μL/孔洗3次，用100μL/孔的0.05％亚甲基蓝(ABCRGmbH Cat#AB117904)室温染色10分钟。细胞用H2O,200μL/孔洗3次，然后通过加入200μL/孔的3％HCl(Fluka Cat#84422)室温振荡裂解30分钟。在A650nm测量光密度。相对DMSO处理细胞提供50％增殖抑制的化合物浓度用XLFit软件测定。
CellTiter Glo(CTG)试验：化合物对细胞增殖的功能效果用HuH-7肝细胞癌细胞评价，所述细胞获自日本研究生物资源细胞库(Cat#JCRB0403)并在37℃,5％CO2加湿培养箱中培养于供应商推荐的培养基(DMEM高葡萄糖(Amimed Cat#1-26F01-I),10％胎牛血清(英杰Cat#16140-071),1mM丙酮酸钠(Amimed Cat#5-60F00-H),1x青霉素/链霉素(AmimedCat#4-01F00-H))。化合物调节的细胞增殖/活力抑制通过定量细胞ATP水平来评估，使用CellTiter-Glo(CTG)试剂(普洛麦格(Promega),Cat#G7573)。简言之，细胞以3’000细胞/孔/80μl新鲜培养基接种于经组织培养处理的96孔板(Costar Cat#3904)，接着加入含有5倍于其预期终浓度的化合物稀释液的20μl培养基。剂量反应效果通过3倍连续稀释的测试化合物评价，从10μM开始。细胞在37℃和5％CO2下孵育3天后，在加入50μl CTG后根据供应商手册使用相应装备的多模式读板仪(M200Pro，瑞士帝肯(TECAN))进行发光检测(积分时间：500ms)以定量抑制剂对细胞活力的影响。对于数据分析，从所有数据点中减去试验背景值，该值在含培养基但没有细胞的孔中测定。为区分细胞毒性和细胞抑制化合物，使用分开的细胞板(第0天)评估相对于化合物添加时所观察到的数目的活细胞数目。特定测试化合物浓度对细胞增殖/活力的影响表示为仅用载剂处理的细胞(DMSO,0.1％f.c.)所得的背景-和第0天-校正发光读数(该读数设为100％)的百分比，而仅含培养基但没有细胞的孔的发光读数设为-100％。引起半数最大生长抑制(GI50)的化合物浓度用标准四参数曲线拟合(XLfit 5.2.,英国的IDBS)确定。
生物学数据
除了上述数据，以下化合物在所示细胞试验中测量为>3000nM：HUH7CTG中的实施例22；BaF3和HUH7CTG中的实施例28。
比较数据
FGFR1(407-822)、FGFR2(406-821)和FGFR3(411-806)的体外生化试验以与上述FGFR4体外生化试验类似的方式进行，采用激酶结构域的所示部分。下列实施例在生化FGFR1、FGFR2和FGFR3试验中都产生IC50值>10000nM：2,3,4,11,13,16,17,18,20,28,30。
如表格和上述比较数据所示，本发明化合物是有效的选择性FGFR4抑制剂。
Claims (7)
1.一种采用游离形式或药学上可接受盐形式的式(Ia)化合物，
其中
X是N或CH，
A是C(O)且B是NR5或
R1选自氢、羟基C1-C3烷基、卤代C1-C3烷基、CO2H、CH2NR2R3、含至少一个N原子的5元芳香杂环，该环任选地用C1-C3烷基取代一次或大于一次；
R2是C1-C3烷基且R3是C(O)C1-C3烷基
或
R2和R3和与其结合的N形成饱和5-或6-元环，任选包括一个N原子，该环任选用R4取代一次或大于一次；
R4就每一次出现而言独立选自C1-C3烷基、C1-C3烷氧基或氧代基团；
R5选自氢、C1-C3烷基、C1-C3烷氧基C1-C3烷基、(CH2)0-1-R6；
R6是4-、5-或6元饱和杂环，包括至少一个O原子；
R7选自氰基、卤代C1-C3烷基；
R8选自氢、NR9R10、C1-C6烷氧基；
R9是氢；
R10选自C1-C6烷基、羟基C1-C6烷基、C1-C4烷氧基C1-C6烷基。
2.如权利要求1所述的采用游离形式或药学上可接受盐形式的化合物，其中X是CH。
3.一种采用游离形式或药学上可接受盐形式化合物，其中所述化合物选自：
6-((2-(6-甲酰基吡啶-2-基)苯基)氨基)烟腈；
3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-(6-甲酰基吡啶-2-基)-1-甲基脲；
3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-(6-甲酰基吡啶-2-基)-1-(2-甲氧基乙基)脲；
3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-(6-甲酰基吡啶-2-基)-1-((四氢呋喃-3-基)甲基)脲；
3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-(6-甲酰基-5-(羟甲基)吡啶-2-基)-1-((四氢呋喃-3-基)甲基)脲；
3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-乙基-1-(6-甲酰基-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)脲；
3-(5-氰基-4-(异丙基氨基)吡啶-2-基)-1-乙基-1-(6-甲酰基-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)脲；
3-(5-氰基-4-异丙氧基吡啶-2-基)-1-乙基-1-(6-甲酰基-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)脲；
3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-(6-甲酰基-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-1-甲基脲；
3-(5-氰基-4-(异丙基氨基)吡啶-2-基)-1-(6-甲酰基-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-1-甲基脲；
N-((6-(3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-甲基脲基)-2-甲酰基吡啶-3-基)甲基)-N-甲基乙酰胺；
3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-(5-(二氟甲基)-6-甲酰基吡啶-2-基)-1-甲基脲；
3-(5-氰基-4-异丙氧基吡啶-2-基)-1-(6-甲酰基-5-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)吡啶-2-基)-1-甲基脲；
3-(5-氰基-4-异丙氧基吡啶-2-基)-1-(5-(二氟甲基)-6-甲酰基吡啶-2-基)-1-甲基脲；
3-(5-氰基吡啶-2-基)-1-(6-甲酰基-5-((2-氧代吡咯烷-1-基)甲基)吡啶-2-基)-1-甲基脲；
3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-(6-甲酰基-5-((2-氧代吡咯烷-1-基)甲基)吡啶-2-基)-1-甲基脲；
3-(5-氰基-4-异丙氧基吡啶-2-基)-1-(6-甲酰基-5-((4-甲基-2-氧代哌嗪-1-基)甲基)吡啶-2-基)-1-甲基脲；
3-(5-氰基-4-((2-羟基-2-甲基丙基)氨基)吡啶-2-基)-1-(6-甲酰基-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-1-甲基脲；
3-(5-氰基-4-异丙氧基吡啶-2-基)-1-(6-甲酰基-5-((2-氧代吡咯烷-1-基)甲基)吡啶-2-基)-1-甲基脲；
3-(5-氰基-4-((2-甲氧基乙基)氨基)吡啶-2-基)-1-(6-甲酰基-5-((4-甲基-2-氧代哌嗪-1-基)甲基)吡啶-2-基)-1-甲基脲；
3-(5-氰基-4-异丙氧基吡啶-2-基)-1-(6-甲酰基-5-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-1-甲基脲；
3-(5-氰基-4-异丙氧基吡啶-2-基)-1-(6-甲酰基-5-((3-甲氧基吡咯烷-1-基)甲基)吡啶-2-基)-1-甲基脲；
6-(2-((4-((2-甲氧基乙基)氨基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基)-1H-咪唑-1-基)-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶甲醛；
6-(5-((4-((2-甲氧基乙基)氨基)-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶甲醛；
3-(5-氰基-4-异丙氧基吡啶-2-基)-1-(6-甲酰基-5-(吡咯烷-1-基甲基)吡啶-2-基)-1-甲基脲和
1-(5-氰基-4-异丙氧基吡啶-2-基)-3-(4-甲酰基吡啶-2-基)脲。
4.一种药物组合物，所述组合物包括治疗有效量的权利要求1-3中任一项所述化合物或其药学上可接受盐以及一种或多种药学上可接受载体。
5.一种组合型产品，所述组合包括治疗有效量的权利要求1-3中任一项所述化合物或其药学上可接受盐以及一种或多种治疗活性剂。
6.如权利要求1-3中任一项所述的化合物或其药学上可接受盐或是权利要求4所述的药物组合物在制备用于治疗癌症的药物中的应用。
7.如权利要求6所述的用途，其中所述癌症选自肝癌、乳腺癌、成胶质细胞瘤、***癌、横纹肌肉瘤、胃癌、卵巢癌、肺癌、结肠癌。
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