CN107629965A - 一种铁皮石斛真菌发酵制品的制备方法及其发酵制品与应用 - Google Patents
一种铁皮石斛真菌发酵制品的制备方法及其发酵制品与应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开一种铁皮石斛真菌发酵制品的制备方法及其发酵制品与应用。所述铁皮石斛真菌发酵制品的制备方法包括石斛制备、菌种活化、液体种子培养、石斛真菌发酵、发酵制品处理步骤。所述发酵制品经铁皮石斛真菌发酵制品的制备方法制备得到。所述应用是将铁皮石斛真菌发酵制品制备食品、保健食品、化妆品和/或药品。本发明以具有纤维素酶等物质的药食用真菌对铁皮石斛发酵,将石斛纤维素等分解为小分子碳源,又保留铁皮石斛的有益成分,且发酵制品口感醇厚,兼具铁皮石斛清香和真菌独特香味,还含有丰富的真菌多糖、皂苷类、多酚类、黄酮类等活性物质,有效成分易于肠道吸收,具有提高免疫力、抗肿瘤、抗氧化、降血脂及血压、调节肠道菌群平衡等功效。
Description
技术领域
本发明属于生物工程技术领域,具体涉及一种具有提高免疫力、抗肿瘤、抗氧化、降血脂及血压、调节肠道菌群平衡的铁皮石斛真菌发酵制品的制备方法及其发酵制品与应用。
背景技术
大型真菌是一种古老生物,我国大型真菌约10000~20000种,已被描述的约8000种,在《神农本草经》和《本草纲目》均有真菌药用价值的记载。药食同源大型真菌是指一类食用后不会造成人体中毒,能形成肉质或胶质的肉眼可见的子实体的真菌。药食同源的真菌由于富含萜类化合物(倍半萜、二萜类化合物和三萜类化合物、四萜类化合物)、多糖类化合物、蛋白多肽、生物碱、甾醇类化合物、核苷类化合物等活性物质,大多具有抗菌、抗病毒、抗癌、抗氧化、提高免疫力、降血压、降血糖、降胆固醇等功效,是目前菌物类最有开发应用前景的一类。由于受生理状态特殊性和复杂性以及外部环境的制约,造成药食同源的真菌在自然界中形成子实体稀少,特别是形成可用子实体需多年。而人工栽培极其困难,培养条件苛刻,且生长周期长达,难以满足日益膨胀的市场需要。现已有多种大型真菌能通过液体发酵,在短时间(例如5~45d)内获得大量的菌丝体,并在发酵液中包含其多种药用成分。
铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)为兰科(Orchidaceae)石斛属(Dendrobium)多年生附生草本植物。现代中医药研究表明:石斛茎中含有大量多糖和多种生物碱等药物化学成份,具有滋阴润肺,益胃补肾,补五脏虚劳,清肺止咳,健脑,明目,抗疲劳,提高人体免疫力,抗衰老,抑制肿瘤,扩张血管等作用,是石斛属药用植物中最为珍稀名贵的种。现代药理研究表明,铁皮石斛具有抗氧化,抗疲劳,增强免疫,促消化,降血糖,降血压等功效。
现有技术中,石斛活性物质的提取方法以水提醇沉法为主,还有酶法提取和超声波辅助提取等方法。近年来,将中药作为药用或食用真菌的发酵基质的研究与应用越来越多,具有活性成分的药性基质被药用真菌发酵,它既能提供真菌所需营养大量生长菌体,同时又能因真菌的酶而改变其原来的组织成分。以中药为培养基或在培养基中添加适量中药,可能对中药中的某些成分进行转化,提高其药效。其原理为利用真菌的酶强大的分解转化能力,不仅可以对培养基中中药的纤维,糖类和蛋白质等物质加以利用,而且在代谢过程中可以对中药中的一些成分进行转化,从而提高中药活性成分。
灰树花(Grifolarondosa(Dicks.:Fr.)S.F.Gray)是药食同源覃菌,属担子菌亚门,层菌纲,非褶菌目,多孔菌科,树花菌属。富含多糖、维生素、微量元素等功能性成分,能预防白癜风、贫血、坏血病,同时具有抗肿瘤、降血糖等功效,近代医学进一步证明,还能防止动脉硬化、提高免疫力、抗衰老等多种作用。
凸圆灵芝又称白芝(Fuscoporiapunctata(Fr.)Cum),又名桦剥管孔菌,多孔菌科,滴孔菌属,属桦木属树木专性木腐菌,引起木质部形成褐色腐朽,分布于我国黑龙江、吉林、辽宁、内蒙古等地区,具有重要的实用价值和药用价值。
红灵芝(Ganoderma lucidium)是一种药食同源的真菌,中医认为能够扶正固本、增强免疫功能和提高机体抵抗力,具有降血糖,降血压,抗神经衰弱,抗肿瘤,保肝解毒,抗衰老等功效。
云芝或称彩绒革盖菌(CorilusversicolorQuel.),隶属担子菌亚门,层菌纲,非褶菌目,多孔菌科,云芝属或革盖菌属。云芝在我国被广泛用于癌症和免疫缺陷等疾病的治疗,被民间视为治病神药。研究表明,云芝多糖具有显著的抗氧化活性,对超氧阴离子自由基和DPPH自由基具有显著的清除作用。
猴头(Hericium erinaceus(RullexF.)Pers.)是药食同源覃菌,具有抗溃疡、抗炎症、抗肿瘤、抗衰老、抗疲劳、提高机体耐缺氧能力、增加心肌血液输出量、加速机体血液循环、降血糖、保肝护肝和降血脂、降血压等作用。
茯苓(Poria cocos)隶属于真菌门,是药食同源覃菌。茯苓为多孔菌科真菌茯苓的干燥菌核,具有利尿、镇静、抗肿瘤、保护防脏组织、增强心律等作用。
申请号为2015100256084的专利公开了一种铁皮石斛发酵制品及其制备方法,将铁皮石斛破碎后加水提取,制得提取液,继而接入肠膜明串珠菌进行发酵,制得第一发酵液;同时向pH4.5~6的果蔬液中加入果胶酶进行酶解,制得果蔬酶解液,并向果蔬酶解液中接入乳酸菌进行发酵,制得第二发酵液;接着向第二发酵液中接入复合酵母菌发酵,制得第三发酵液;最后将第一发酵液和第三发酵液混匀且离心,对上清液均质,灭菌即为铁皮石斛发酵制品。
申请号为201610422473的专利公开了一种高溶解性益生菌发酵石斛粉及其制备与应用,其在发酵前利用纤维素酶对石斛进行酶解处理,提高了石斛溶解性及适口性,同时纤维素酶解产生的糖类物质又可作为益生菌发酵的底物,解决了已有益生菌发酵石斛粉溶解性差、冲泡后易分层、口感粗粝的缺点。
发明内容
本发明的第一目的在于提供一种方法简单、过程安全且不受季节限制,具有提高免疫力、抗肿瘤、抗氧化、降血脂及血压、调节肠道菌群平衡的铁皮石斛真菌发酵制品的制备方法;第二目的在于提供一种第一目制备得到的发酵制品;第三目的在于提供一种第二目的的发酵制品的应用。
本发明的第一目的是这样实现的:包括石斛制备、菌种活化、液体种子培养、石斛真菌发酵、发酵制品处理步骤,具体步骤如下:
A、石斛制备:将铁皮石斛鲜条去除不可食用部位并洗净,自然晾干后切小段,打浆得到石斛浆备用;
B、菌种活化:将保藏的药食同源真菌菌种转接到斜面固体培养基上于28~30℃下培养5~10d;
C、液体种子培养:将上述经活化的药食同源真菌菌种切取一块接种于装有100mL液体培养基的300mL三角瓶中,在28~30℃条件下以140~150r/min震荡培养7~10d,直到形成肉眼可见的菌丝体和/或菌球布满三角瓶结束发酵;
D、石斛真菌发酵:将制备得到的石斛浆与发酵营养液按2:8~3:7的料液体积比混合置入100mL于300mL三角瓶中并灭菌,灭菌后将C步骤培养好的真菌液体种子按混合液10~20%的体积质量比接种到混合液中,恒温发酵直到形成肉眼可见的菌丝体和/或菌球布满三角瓶结束发酵;
E、发酵制品处理:将D步骤发酵结束的石斛真菌发酵液经1000r/min离心去除菌体和石斛渣,取发酵液经巴氏灭菌,得到铁皮石斛真菌发酵制品。
本发明的第二目的是这样实现的:铁皮石斛真菌发酵制品的制备方法制备得到的铁皮石斛真菌发酵制品。
本发明的第三目的是这样实现的:铁皮石斛真菌发酵制品在制备食品、保健食品、化妆品和/或药品中的应用。
本发明与现有技术相比具有以下有益效果:
1)本发明采用药食同源的真菌灰树花、茯苓、猴头、凸圆灵芝、云芝或红灵芝对铁皮石斛鲜条进行低温发酵,利用真菌具有分解纤维素等物质的强大酶系,以真菌对铁皮石斛鲜条进行深层发酵分解为小分子碳源,增加了铁皮石斛原料有效成分的利用率,不仅克服了石斛具有的过重青草味,又能保留铁皮石斛中的水溶性多糖、石斛碱等有益成分,同时石斛中的多糖等还可促进真菌的生长及代谢产物的生产,使得发酵制品溶解性好、色泽明亮均匀、口感醇厚、无异味,兼具铁皮石斛清香和真菌独特香味,口感极佳。
2)本发明以药食同源的真菌发酵铁皮石斛,真菌在生长中自身产生的代谢产物如真菌多糖、生物碱、核苷类化合物等积累,这些化合物具有抗菌、抗病毒、提高免疫力等作用,由于铁皮石斛与真菌的代谢产物双重作用,使得制备的铁皮石斛真菌发酵制品含有丰富的真菌多糖、皂苷类、多酚类、黄酮类等生物活性物质,铁皮石斛真菌发酵制品具有提高免疫力、抗肿瘤、抗氧化、降血脂及血压、调节肠道菌群平衡等功效,可用于制备食品、保健食品、化妆品和/或药品,应用前景广阔。
3)本发明采用具有纤维素酶的药食用真菌发酵铁皮石斛,无需添加酶等外来物质,不仅节约生产成本,而且简化了生产步骤;通过培养基培养和液体发酵的方法,采收菌丝和肉眼可见的子实体获得真菌的药用活性成分,使得制备方法能够实现工业化、标准化生产且不受季节限制,不仅周期短、节省劳力、成本低以及受外部环境影响小,而且能够充分保证发酵制品的质量稳定。
4)本发明制备的铁皮石斛真菌发酵制品食用方便,制备过程中不添加任何添加剂,相对传统的水提醇沉法、酶法提取和超声波辅助提取,避免了有机溶剂的引入,不仅制备过程安全环保,而且发酵制品绿色健康。
附图说明
图1为实施例与对照例制备得到的铁皮石斛真菌发酵制品的抗氧化能力测定结果;
图中:DPPH—1,1-二苯基-2-三硝基苯肼,别名1,1-二苯基-2-苦肼基(自由基);OH—羟基自由基;还原力—还原氢,包括NADH(还原型辅酶Ⅱ)、NADPH(还原型辅酶Ⅰ)、FADH(黄素腺嘌呤二核苷酸)。
具体实施方式
下面结合附图和实施例对本发明作进一步的说明,但不以任何方式对本发明加以限制,基于本发明教导所作的任何变更或改进,均属于本发明的保护范围。
本发明之铁皮石斛真菌发酵制品的制备方法包括石斛制备、菌种活化、液体种子培养、石斛真菌发酵、发酵制品处理步骤,具体步骤如下:
A、石斛制备:将铁皮石斛鲜条去除不可食用部位并洗净,自然晾干后切小段,打浆得到石斛浆备用;
B、菌种活化:将保藏的药食同源真菌菌种转接到斜面固体培养基上于28~30℃下培养5~10d;
C、液体种子培养:将上述经活化的药食同源真菌菌种切取一块接种于装有100mL液体培养基的300mL三角瓶中,在28~30℃条件下以140~150r/min震荡培养7~10d,直到形成肉眼可见的菌丝体和/或菌球布满三角瓶结束发酵;
D、石斛真菌发酵:将制备得到的石斛浆与发酵营养液按2:8~3:7的料液体积比混合置入100mL于300mL三角瓶中并灭菌,灭菌后将C步骤培养好的真菌液体种子按混合液10~20%的体积质量比接种到混合液中,恒温发酵直到形成肉眼可见的菌丝体和/或菌球布满三角瓶结束发酵;
E、发酵制品处理:将D步骤发酵结束的石斛真菌发酵液经1000r/min离心去除菌体和石斛渣,取发酵液经巴氏灭菌,得到铁皮石斛真菌发酵制品。
所述药食同源真菌为灰树花、凸圆灵芝、茯苓、云芝、红灵芝、猴头。
所述灰树花为G2M510菌株(保藏号GIM5.10)、G2M563菌株(GIM5.63)、G2M5164菌株(GIM5.164),所述凸圆灵芝为G2M56菌株(GIM5.6),所述茯苓为G2M5219菌株(GIM5.219),所述云芝为G2M5178菌株(GIM5.178),所述红灵芝为G2M5250菌株(GIM5.250),所述猴头为G2M5208菌株(GIM5.208),上述菌株均来自广东省微生物菌种保藏中心(GDMCC)。
所述A步骤是将新鲜铁皮石斛鲜条去除不可食用部分并洗净,自然晾干后切段,然后按料水1:5~1:10的质量体积比打浆,得到石斛浆经灭菌后置于-20℃冷藏备用。
所述A步骤中的铁皮石斛鲜条原料来源不做严格限定,可以是不同产地的新鲜铁皮石斛鲜条。
所述B步骤中的斜面固体培养基为PDA斜面培养基,所述PDA斜面培养基成分按质量百分比包括:马铃薯20%、葡萄糖2%、琼脂1.5~2%、氯霉素0.01%及余量的水。
所述B步骤中的菌种接种于斜面培养基的斜面底端上方1/3处,所述菌种在斜面培养基上于28~30℃下培养至菌丝长满斜面即可。
所述C步骤中的液体培养基为PDA液体培养基,所述PDA液体培养基成分按质量百分比包括:马铃薯20%,葡萄糖2%、氯霉素0.01%及余量的水。
所述D步骤中的发酵营养液成分按质量百分比包括:0.13%的蛋白胨,0.1%的MgSO4,0.2%的KH2PO4及余量的水。
所述D步骤中石斛恒温发酵的条件为:28~30℃恒温条件下以140~150r/min震荡培养3~10d。
所述D步骤中的灭菌是将装入混合液的三角瓶在本领域的常规条件下灭菌,例如可在120~125℃下灭菌20~-30min。
所述E步骤中的发酵液中添加有蜂蜜、蔗糖或木糖醇等甜味物质。
本发明之铁皮石斛真菌发酵制品的方法还包括冷冻干燥步骤,所述冷冻干燥步骤是将E步骤的发酵液经真空冷冻干燥至含水量5%以下,粉碎至200目得到石斛真菌发酵制品粉剂。
本发明之铁皮石斛真菌发酵制品的制备方法制备得到的铁皮石斛真菌发酵制品。
本发明之铁皮石斛真菌发酵制品在制备食品、保健食品、化妆品和/或药品中的应用。
本发明各实施例及对照例中制备得到的铁皮石斛真菌发酵制品的抗氧化能力测定方法如下:
DPPH清除能力测定:按《基于DPPH、FRAP法的薄荷药材抗氧化谱效关系研究》,徐晶晶等,北京中医药大学学报,2015,38(6):405-410所述方法进行检测;
羟基自由基(OH)清除能力测定:按《紫色胡萝卜汁体外抗氧化活性的研究》,虎春艳等,中国酿造,2015,34(1):85-88所述方法进行检测;
还原力测定按《红茶菌发酵过程中抗氧化能力的变化规律》,朱晓庆等,生产与科研经验,2010,36(11):111-114所述方法进行检测。
实施例1
S100:将新鲜铁皮石斛鲜条去除不可食用部分并洗净,自然晾干后切段,然后按料水1:5(g/mL)的质量体积比打浆,得到石斛浆置于-20℃冷藏备用。
S200:将保藏的药食同源真菌菌种灰树花G2M510菌株(保藏号GIM5.10)从母种斜面试管中用接种铲切取1cm2大小的菌丝块,接种于PDA斜面培养基的斜面底端上方1/3处,于28℃条件下培养5~10d至菌丝长满斜面即可;PDA斜面培养基成分按质量百分比包括:马铃薯20%、葡萄糖2%、琼脂2%、氯霉素0.01%及余量的水。
S300:将S200活化的药食同源真菌菌种用接种铲切取1cm2的菌块,接种于装有100mL PDA液体培养基的300mL三角瓶中,在28℃条件下以150r/min震荡培养7~10d,直到形成肉眼可见的菌丝体和菌球布满三角瓶结束发酵;PDA液体培养基成分按质量百分比包括:马铃薯20%,葡萄糖2%、氯霉素0.01%及余量的水。
S400:将S100制备得到的石斛浆与发酵营养液按2:8(mL/mL)的料液体积比将100mL混合液置入300mL三角瓶中,并于121℃保温灭菌20min,待冷却后将S300培养好的真菌液体种子10g(按混合液体积的10%)接种到100mL混合液中,于28℃恒温150r/min震荡发酵3~10d直到形成肉眼可见的菌丝体和菌球布满三角瓶结束发酵;发酵营养液成分按质量百分比包括:0.13%的蛋白胨,0.1%的MgSO4,0.2%的KH2PO4及余量的水。
S500:取S400发酵结束的石斛真菌发酵液,经1000r/min离心去除菌体和铁皮石斛渣,取发酵液经巴氏灭菌得到铁皮石斛真菌发酵制品。
实施例2
S100:将新鲜铁皮石斛鲜条去除不可食用部分并洗净,自然晾干后切段,然后按料水1:10(g/mL)的质量体积比打浆,得到石斛浆置于-20℃冷藏备用。
S200:将保藏的药食同源真菌菌种茯苓G2M5219菌株(保藏号GIM5.219)从母种斜面试管中用接种铲切取1cm2大小的菌丝块,接种于PDA斜面培养基的斜面底端上方1/3处,于28℃条件下培养5~10d至菌丝长满斜面即可;PDA斜面培养基成分按质量百分比包括:马铃薯20%、葡萄糖2%、琼脂1.5%、氯霉素0.01%及余量的水。
S300:将S200活化的药食同源真菌菌种用接种铲切取1cm2的菌块,接种于装有100mL PDA液体培养基的300mL三角瓶中,在28℃条件下以140r/min震荡培养7~10d,直到形成肉眼可见的菌丝体和菌球布满三角瓶结束发酵;PDA液体培养基成分按质量百分比包括:马铃薯20%,葡萄糖2%、氯霉素0.01%及余量的水。
S400:将S100制备得到的石斛浆与发酵营养液按3:7(mL/mL)的料液体积比将100mL混合液置入300mL三角瓶中,并于125℃保温灭菌20min,待冷却后将S300培养好的真菌液体种子20g(按混合液体积的20%)接种到100mL混合液中,于28℃恒温140r/min震荡发酵3~10d直到形成肉眼可见的菌丝体和菌球布满三角瓶结束发酵;发酵营养液成分按质量百分比包括:0.13%的蛋白胨,0.1%的MgSO4,0.2%的KH2PO4及余量的水。
S500:取S400发酵结束的石斛真菌发酵液,经1000r/min离心去除菌体和铁皮石斛渣,取发酵液经巴氏灭菌,然后依据个人口味添加一定比例的蜂蜜,得到铁皮石斛真菌发酵制品。
实施例3
S100:将新鲜铁皮石斛鲜条去除不可食用部分并洗净,自然晾干后切段,然后按料水1:15(g/mL)的质量体积比打浆,得到石斛浆置于-20℃冷藏备用。
S200:将保藏的药食同源真菌菌种红灵芝G2M5250菌株(保藏号GIM5.250)从母种斜面试管中用接种铲切取1cm2大小的菌丝块,接种于PDA斜面培养基的斜面底端上方1/3处,于30℃条件下培养5~10d至菌丝长满斜面即可;PDA斜面培养基成分按质量百分比包括:马铃薯20%、葡萄糖2%、琼脂2%、氯霉素0.01%及余量的水。
S300:将S200活化的药食同源真菌菌种用接种铲切取1cm2的菌块,接种于装有100mL PDA液体培养基的300mL三角瓶中,在30℃条件下以150r/min震荡培养7~10d,直到形成肉眼可见的菌丝体和菌球布满三角瓶结束发酵;PDA液体培养基成分按质量百分比包括:马铃薯20%,葡萄糖2%、氯霉素0.01%及余量的水。
S400:将S100制备得到的石斛浆与发酵营养液按4:6(mL/mL)的料液体积比将100mL混合液置入300mL三角瓶中,并于120℃保温灭菌30min,待冷却后将S300培养好的真菌液体种子25g(按混合液体积的25%)接种到100mL混合液中,于30℃恒温150r/min震荡发酵3~10d直到形成肉眼可见的菌丝体和菌球布满三角瓶结束发酵;发酵营养液成分按质量百分比包括:0.13%的蛋白胨,0.1%的MgSO4,0.2%的KH2PO4及余量的水。
S500:取S400发酵结束的石斛真菌发酵液,经1000r/min离心去除菌体和铁皮石斛渣,取发酵液经巴氏灭菌,然后依据个人口味添加一定比例的蔗糖,得到铁皮石斛真菌发酵制品。
实施例4
S100:将新鲜铁皮石斛鲜条去除不可食用部分并洗净,自然晾干后切段,然后按料水1:20(g/mL)的质量体积比打浆,得到石斛浆置于-20℃冷藏备用。
S200:将保藏的药食同源真菌菌种猴头G2M5208菌株(保藏号GIM5.208)从母种斜面试管中用接种铲切取1cm2大小的菌丝块,接种于PDA斜面培养基的斜面底端上方1/3处,于28℃条件下培养5~10d至菌丝长满斜面即可;PDA斜面培养基成分按质量百分比包括:马铃薯20%、葡萄糖2%、琼脂1.5%、氯霉素0.01%及余量的水。
S300:将S200活化的药食同源真菌菌种用接种铲切取1cm2的菌块,接种于装有100mL PDA液体培养基的300mL三角瓶中,在28℃条件下以150r/min震荡培养7~10d,直到形成肉眼可见的菌丝体和菌球布满三角瓶结束发酵;PDA液体培养基成分按质量百分比包括:马铃薯20%,葡萄糖2%、氯霉素0.01%及余量的水。
S400:将S100制备得到的石斛浆与发酵营养液按5:5(mL/mL)的料液体积比将100mL混合液置入300mL三角瓶中,并于120℃保温灭菌20min,待冷却后将S300培养好的真菌液体种子30g(按混合液体积的30%)接种到100mL混合液中,于30℃恒温150r/min震荡发酵3~10d直到形成肉眼可见的菌丝体和菌球布满三角瓶结束发酵;发酵营养液成分按质量百分比包括:0.13%的蛋白胨,0.1%的MgSO4,0.2%的KH2PO4及余量的水。
S500:取S400发酵结束的石斛真菌发酵液,经1000r/min离心去除菌体和铁皮石斛渣,取发酵液经巴氏灭菌,然后依据个人口味添加一定比例的木糖醇,得到铁皮石斛真菌发酵制品。
对照例1:
S100:将新鲜铁皮石斛鲜条去除不可食用部分并洗净,自然晾干后切段,然后按料水1:5(g/mL)的质量体积比打浆,得到石斛浆置于-20℃冷藏备用。
S200:将S100制备得到的石斛浆与发酵营养液按2:8(mL/mL)的料液体积比将100mL混合液置入300mL三角瓶中,并于121℃保温灭菌20min,待冷却后将无菌水10g(按混合液体积的10%)接种到100mL混合液中,于28℃恒温150r/min震荡发酵3~10d;发酵营养液成分按质量百分比包括:0.13%的蛋白胨、0.1%的MgSO4、0.2%的KH2PO4及余量的水。
S300:取S200发酵10d的石斛真菌发酵液经1000r/min离心去除铁皮石斛渣,取发酵液经巴氏灭菌,得到铁皮石斛真菌发酵制品。
对照例2:
S100:将新鲜铁皮石斛鲜条去除不可食用部分并洗净,自然晾干后切段,然后按料水1:10(g/mL)的质量体积比打浆,得到石斛浆置于-20℃冷藏备用。
S200:将S100制备得到的石斛浆与发酵营养液按3:7(mL/mL)的料液体积比将100mL混合液置入300mL三角瓶中,并于121℃保温灭菌20min,待冷却后将无菌水20g(按混合液体积的20%)接种到100mL混合液中,于30℃恒温140r/min震荡发酵3~10d;发酵营养液成分按质量百分比包括:0.13%的蛋白胨、0.1%的MgSO4、0.2%的KH2PO4及余量的水。
S300:取S200发酵10d的石斛真菌发酵液经1000r/min离心去除铁皮石斛渣,取发酵液经巴氏灭菌,得到铁皮石斛真菌发酵制品。
取实施例1、2、3和4以及对照例1、2得到的铁皮石斛真菌发酵制品进行感官评定,以及进行抗氧化能力测定。铁皮石斛真菌发酵制品感官评定标准如表1,评定结果如表2,抗氧化能力测定结果如图1。
表1铁皮石斛真菌发酵制品感官评定标准
表2铁皮石斛真菌发酵制品感官评定得分
Claims (10)
1.一种铁皮石斛真菌发酵制品的制备方法,其特征在于包括石斛制备、菌种活化、液体种子培养、石斛真菌发酵、发酵制品处理步骤,具体步骤如下:
A、石斛制备:将铁皮石斛鲜条去除不可食用部位并洗净,自然晾干后切小段,打浆得到石斛浆备用;
B、菌种活化:将保藏的药食同源真菌菌种转接到斜面固体培养基上于28~30℃下培养5~10d;
C、液体种子培养:将上述经活化的药食同源真菌菌种切取一块接种于装有100mL液体培养基的300mL三角瓶中,在28~30℃条件下以140~150r/min震荡培养7~10d,直到形成肉眼可见的菌丝体和/或菌球布满三角瓶结束发酵;
D、石斛真菌发酵:将制备得到的石斛浆与发酵营养液按2:8~3:7的料液体积比混合置入100mL于300mL三角瓶中并灭菌,灭菌后将C步骤培养好的真菌液体种子按混合液10~20%的体积质量比接种到混合液中,恒温发酵直到形成肉眼可见的菌丝体和/或菌球布满三角瓶结束发酵;
E、发酵制品处理:将D步骤发酵结束的石斛真菌发酵液经1000r/min离心去除菌体和石斛渣,取发酵液经巴氏灭菌,得到铁皮石斛真菌发酵制品。
2.根据权利要求1所述铁皮石斛真菌发酵制品的制备方法,其特征在于所述药食同源真菌为灰树花、凸圆灵芝、茯苓、云芝、红灵芝、猴头。
3.根据权利要求2所述铁皮石斛真菌发酵制品的制备方法,其特征在于所述灰树花为G2M510菌株、G2M563菌株、G2M5164菌株,所述凸圆灵芝为G2M56菌株,所述茯苓为G2M5219菌株,所述云芝为G2M5178菌株,所述红灵芝为G2M5250菌株,所述猴头为G2M5208菌株,上述菌株均来自广东省微生物菌种保藏中心。
4.根据权利要求1所述铁皮石斛真菌发酵制品的制备方法,其特征在于所述A步骤是将新鲜铁皮石斛鲜条去除不可食用部分并洗净,自然晾干后切段,然后按料水1:5~1:10的质量体积比打浆,得到石斛浆经灭菌后置于-20℃冷藏备用。
5.根据权利要求1所述铁皮石斛真菌发酵制品的制备方法,其特征在于所述B步骤中的斜面固体培养基为PDA斜面培养基,所述PDA斜面培养基成分按质量百分比包括:马铃薯20%、葡萄糖2%、琼脂1.5~2%、氯霉素0.01%及余量的水。
6.根据权利要求1所述铁皮石斛真菌发酵制品的制备方法,其特征在于所述C步骤中的液体培养基为PDA液体培养基,所述PDA液体培养基成分按质量百分比包括:马铃薯20%,葡萄糖2%、氯霉素0.01%及余量的水。
7.根据权利要求1所述铁皮石斛真菌发酵制品的制备方法,其特征在于所述D步骤中的发酵营养液成分按质量百分比包括:0.13%的蛋白胨,0.1%的MgSO4,0.2%的KH2PO4及余量的水。
8.根据权利要求1或7所述铁皮石斛真菌发酵制品的制备方法,其特征在于所述D步骤中石斛恒温发酵的条件为:28~30℃恒温条件下以140~150r/min震荡培养3~10d。
9.一种权利要求1至8任意一项所述铁皮石斛真菌发酵制品的制备方法制备得到的铁皮石斛真菌发酵制品。
10.一种权利要求9所述铁皮石斛真菌发酵制品在制备食品、保健食品、化妆品和/或药品中的应用。
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