CN107383019B - 吡唑并[4,3-h]喹唑啉类化合物及其用途 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一类如下通式I所示的吡唑并[4,3‑h]喹唑啉类衍生物及其用途,该类化合物具有抑制细胞周期蛋白依赖性酶家族(CDKs)中不同亚型例如CDK4/6的活性,为预防和治疗癌症、代谢与免疫疾病、心血管病以及神经性疾病提供新的手段。
Description
技术领域
本发明涉及一种吡唑并[4,3-h]喹唑啉类衍生物及其用途。
背景技术
细胞周期蛋白依赖性酶家族(cyclin dependent kinases,CDKs)是驱动细胞周期运行的引擎,是整个调控网络的核心。CDKs是一类丝氨酸(serine)/苏氨酸(threonine)激酶,在细胞周期调控、转录、分化和细胞死亡过程中发挥着重要作用。目前已经确认有13个CDK成员(CDK1-13)以及与其相对应的有12个细胞周期蛋白(cyclin)(A-L)。根据功能可将CDK家族分为两大类。一类CDK是与相应的cyclin结合形成复合体而被激活进而参与细胞周期各个时相的转化。根据经典的细胞周期模型,D类细胞周期蛋白和CDK4或CDK6结合调控着早期G1期,CDK2和cyclin E能触发细胞周期进入S期,而CDK2-cyclin A和CDK1-cyclin A调控着S期的完成,CDK1-cyclin B负责细胞的***。而另外一类CDK家族成员包括CDK7、CDK8、CDK9、CDK10和CDK11等则参与了细胞的转录调控并在转录调节中发挥着重要作用。此外,某些CDK还具有特殊的功能,如CDK5具有调节神经***的功能。目前认为,在细胞周期中起调节作用的主要是CDK1-4和CDK6-7。但近来许多遗传学证据揭示细胞***间期相的CDK如CDK2、CDK4和CDK6并不是正常细胞增殖所必需的,而是某些特定细胞增殖所依赖的。CDK1则是细胞***过程中所必需的。同时,越来越多的研究也表明,肿瘤细胞的增殖依赖某些特定的***间期相的CDK。这无疑为CDK抑制剂的研发提供了理论基础,即通过抑制肿瘤细胞增殖所依赖的某些特定相的CDK达到抗肿瘤作用而又不影响正常细胞的增殖。
细胞周期蛋白是一个非常多样化的蛋白家族,分为四个等级(A,B,D,E型细胞周期蛋白),其作用的CDK-周期全酶作为调节亚基。目前已经证实存在25种细胞周期蛋白(cyclin),主要包括CyclinB1、CyclinA、CyelinE、CyelinD1、CyclinD2和CyclinD3等。CDKs只有与其相应的周期蛋白结合,而且由CAK(CDK的激活因子)将其苏氨酸残基磷酸化才具有活性。CDKs主要通过与各自的特异性底物(周期蛋白)结合形成激活状态的蛋白激酶复合物,从而催化底物(RB蛋白)磷酸化,干扰并控制细胞周期进程,依次完成DNA的复制合成与有丝***,引起细胞的***增殖。
恶性肿瘤的发生、发展是一个复杂的过程,传统的治疗药物主要分烷化剂、抗代谢类药物、天然产物和抗生素等几类,这几类药物的缺点是疗效不明显,毒副作用大。目前小分子激酶抑制剂作为潜在的癌症疗法,它的发展是一个让人感兴趣的领域,突变和某些CDKs的异常表达以及它们控制的相对应的部位与不受控制的肿瘤发生和增殖有关。
正常细胞复制从G1(DNA合成前期)开始,经过S(DNA合成期)、G2(***前期)、M(细胞***期),有丝***的刺激是启动这个过程的开关,这些刺激调节CDK/细胞周期蛋白复合体的形成以及在G1期的诱导表达。细胞周期中主要有两个检验点,其中一个位于G1-S交界处,这是细胞内外信息传递、整合、汇集并对增殖过程进行调控的关键点。CDK4和CDK6具有71%的氨基酸同一性,具有很大的重叠功能,两者生化性质类似,经常共同发挥作用。在不同程度上,两者都可以与所有三种D型细胞周期蛋白(D1,D2和D3)配合使用。通过有丝***信号通路激活后,D型细胞周期蛋白与CDK4或CDK6结合。CDK活化激酶(CAK)促进cdk4/6-cyclinD复合物磷酸化激活,使肿瘤抑制蛋白失活,导致G1期至S期的基因转录和细胞周期进程,最终导致细胞***。Rb基因有三个不同相对分子质量的蛋白质产物,其中110是相对低磷酸化型,112、114是高磷酸化型,低磷酸化型是活性状态,在G0和G1期抑制细胞生长。
在许多类型的癌症中观察到,CyclinD-CDK4/6-INK4-Rb途径的失调导致增殖加速。可以通过各种机制激活途径,包括基因扩增或重排,负调节物的丧失,表观遗传改变和关键途径成分中的点突变。CyclinD-CDK4/6-INK4-Rb途径是G1-S转型的关键调节点。CDK4/6活性受INK4蛋白家族(p16INK4A,p15INK4B,p18INK4C和p19INK4D)以及Cip和Kip家族(特别是p21CIP1和p27KIP1)的调控。INK4蛋白通过直接与CDK结合来抑制cyclinD-CDK4/6活性。p21CIP1和p27KIP1可以稳定细胞周期蛋白D-CDK4/6复合物,并且在某些条件下都具有CDK4/6抑制活性。绝大多数癌症细胞中有Rb,这些Rb+癌症可以由CDK4/6-cyclinD过表达来激活CDK4/6-cyclinD阴性调节因子,或促进CDK4/6-cyclinD的致癌信号通路。促进CDK4/6-cyclinD活性的途径有磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/AKT/雷帕霉素(mTOR),丝裂原活化蛋白激酶(MAPK),wnt/b-catenin信号通路,janus激酶(JAK)-信号转导和转录激活因子(STAT),活化的B细胞(NF-jB)的核因子κ-轻链增强剂和类固醇激素信号通路(例如***,孕酮,和雄激素)。这些途径在CDK4/6-cyclinD信号转导点起作用。编码细胞周期蛋白D1(CCND1),CDK4或CDK6的基因的扩增或编码p16INK4A(细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂2A[CDKN2A])的位点的缺失是激活cyclinD-CDK4/6-INK4-Rb途径的主要机制。例如,有研究表明乳腺癌中的CCND1,CDK4和CDK6分别扩增17%、4%、3%,以及CDKN2A下降21%。乳腺癌的其他研究报道了CDK4扩增16%,CDK6扩增17%,p16INK4A损失49%。CCND1扩增在乳腺癌病例中高达35%,而cyclinD超过50%。CCND1的扩增比例分别是,头颈癌(26-39%),非小细胞肺癌(NSCLC;5-30%),子宫内膜癌(26%)和胰腺癌(25%)。
由于CDK4/6活性在调节细胞中的重要性以及已知该途径在癌症中被激活的机制,CDK4/6抑制剂成为一种有吸引力的治疗手段。一个主要的理论问题是,CDKs在正常细胞以及癌细胞的增殖中起关键作用,可能造成治疗窗口狭窄,其毒性将影响临床治疗水平。迄今为止,研究最全面的泛CDK抑制剂是flavopiridol,其临床效果有限,部分原因是其复杂的药代动力学和副作用。在正常细胞周期中,cyclinD1通过与CDK4协同作用,通过pRb途径和P53途径共同影响细胞周期进程,P53-P21-pRb途径和P16-pRb途径是两条已知的细胞衰老相关信号途径。然而,CCND1-基因的过度表达有可能导致细胞周期混乱与细胞生长失控,进而导致肿瘤发生。cyclinD1是CCND1-基因编码的重要蛋白。P16基因是细胞周期中的一种基本基因,表达的蛋白负调节细胞增殖,因此它是体内的一种抗癌基因。它编码的蛋白可与cyclinD1竞争性结合CDK4/6,抑制蛋白激酶活性,使pRb不能磷酸化而保持活化状态,对细胞周期起负调控作用,P16基因的变异或其他蛋白失活会导致cyclinD-CDK4/6-pRb-E2F调节途径的失控,导致肿瘤发生。CDK4/6抑制剂不同于以往研究的作用于信号传导上游分子的靶向抗肿瘤药物,没有从源头位置调控细胞周期,而是在G1期就阻止细胞增殖,从而达到抑制肿瘤增殖的目的。INK4属于CDK激酶抑制蛋白(CDIs)的一类,CDIs能负调控CDK-Cyclin复合物,INK4家族包括P16INK4a、P15INK4b、P18INK4c以及P19INK4d,它们的主要作用是抑制CDK4和CDK6的活性。大多数肿瘤中有Rb,而且cdk4/6-cyclinD-INK4-Rb通路的异常也普遍存在,表现形式为:(1)P16INK4a基因缺失,或DNA甲基化导致P16INK4a活性缺失;(2)CDK4基因扩增或者点突变,造成和P16INK4a的结合能力丧失;(3)cyclinD1由于基因重排或基因扩增而过度表达。由于在细胞增殖中的作用,研究发现它可以作为癌症治疗的天然靶标,并且其有两大优势:(1)大多数细胞增殖依靠cdk2或cdk4/6,但cdk4/6抑制剂又不会表现出“泛cdk4/6抑制剂”所带的细胞毒性。(2)研究表明,cyclinD水平升高,能够增加细胞对药物的敏感性。所以将cdk4/6作为靶标具有很好的前景。
许多N-杂环化合物表现出了不同的生物活性,也被成功地运用到以农药为主的药品行业。目前有大量杂环正在探索,这是基于如咪唑、噻唑、哌啶、吡啶、吡咯、吲哚、嘌呤、喹啉、异喹啉等杂环的化合物,比如吡唑并嘧啶、吲唑、吡唑并吡啶、吡唑并吡啶等。吡唑与喹唑啉稠合可能会提高选择性和敏感性。Li等人最新的报告仅编译了合成缩合吡唑啉衍生物包括吡唑并[1,5-c]喹唑啉,吡唑并[4,3-h]喹唑啉和吡唑并[4,3-f]喹唑啉的方法。1978年,Vogt等(US4112098,公开日:1978年9月5日)获得了关于“吡唑并[1,5-c]喹唑啉衍生物及相关化合物”的专利。2009年,Traquandi等(WO2004104007A1,公开日:2004年12月2日)提交了吡唑并喹唑啉衍生物及其作为激酶抑制剂的专利申请。他们合成了吡唑并[4,3-h]喹唑啉衍生物,并公开了其抗癌和使细胞的活性增殖紊乱的作用。2013年,Caruso等(WO2008074788A1,公开日:2008年6月26日)获得取代吡唑并喹唑啉衍生物及其用作激酶抑制剂的专利。
2009年,Brasca等(US7482354B2,2009年1月27日)证明了吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-甲酰胺的CDK抑制活性。该化合物显示出显著的抗A2780人卵巢癌细胞增殖活性,对CDKs有活性。SAR研究强调,化合物的羧酰胺(R1)部分表现出最大的抑制作用,而在R1引入较大基团则减少CDK2的活性。
发明内容
本发明的一个目的在于设计与合成一类新型吡唑并[4,3-h]喹唑啉类似物,该类新型小分子活性化合物具有抑制细胞周期蛋白依赖性酶家族(CDKs)的生物学功能,从而为寻找新的治疗癌症、代谢与免疫疾病、心血管病以及神经性疾病等开辟新途径。
因此,一方面,本发明提供一种如以下通式I所示的化合物或其药学上可接受的盐,
在通式I中,
R1选自H、未取代或卤素取代的C1-C8直链或支链烷基或者未取代或卤素取代的C3-C6环烷基;优选地,R1选自H、未取代或卤素取代的C1-C6直链或支链烷基或者未取代或卤素取代的C3-C5环烷基;更优选地,R1选自H、未取代或卤素取代的C1-C3直链或支链烷基或者未取代或卤素取代的C3-C5环烷基;其中,卤素表示氟、氯、溴或碘;
R2和R2’各自独立地选自H、C1-C8直链或支链烷基;优选地,R2和R2’各自独立地选自H、C1-C6直链或支链烷基;更优选地,R2和R2’各自独立地选自H、C1-C3直链或支链烷基;
R3选自-C(O)OR5或-CONR6R7,其中R5、R6、R7各自独立地为H、CN、C1-C8烷基或C1-C8烷氧基;优选地,R3选自-C(O)OR5或-CONR6R7,其中R5、R6、R7各自独立地为H、CN、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基;更优选地,R3选自-C(O)OR5或-CONR6R7,其中R5、R6、R7各自独立地为H、CN、甲基、乙基、丙基、丁基、甲氧基、乙氧基或丙氧基;
a为0或1;
X为直键、-CH2-、-CH2CH2-或-CH2CH2CH2-;
R4为H或C1-5烷基。
在具体实例中,R1选自H、甲基、乙基、异丙基、环戊基或三氟甲基;
在具体实例中,R2和R2’各自独立地为H或甲基;
在具体实例中,R3选自羧基、甲氧羰基、乙氧羰基、氨基甲酰基、甲氨基甲酰基、二甲氨基甲酰基、氰基氨基甲酰基或甲氧基氨基甲酰基;
在一个具体实例中,a为0;
在一个具体实例中,a为1;
在一个具体实例中,X为直键;
在一个具体实例中,X为-CH2-;
在具体实例中,R4为H、甲基或乙基。
具体地,通式I的化合物可以选自以下具体化合物:
另一方面,本发明提供一种制备通式I的化合物的方法,所述方法通过以下反应式进行:
其中,以上反应式中,R1、R2和R2’、R3、R4、a、X与上文定义相同。
另一方面,本发明提供了一种药物组合物,包含治疗有效量的通式I的化合物或其药学可接受的盐以及至少一种药学可接受的赋形剂、载体和/或稀释剂。
另一方面,本发明提供了上述通式I的化合物或其药学可接受的盐在制备用作CDK4/6抑制剂的药物中的用途。
另一方面,本发明提供了上述通式I的化合物或其药学可接受的盐在制备用于治疗癌症的药物中的用途。
特别地,所述癌症选自膀胱癌、乳腺癌、结肠癌、直肠癌、肾癌、表皮癌、肝癌、肺癌、食道癌、胆囊癌、卵巢癌、胰腺癌、胃癌、***、甲状腺癌、鼻癌、头颈癌、***癌、皮肤癌、淋巴系的造血细胞肿瘤、髓系造血细胞肿瘤、甲状腺滤泡癌、源于***肿瘤、中枢或周围神经***肿瘤、黑素瘤、神经胶质瘤、***瘤、畸胎瘤、骨肉瘤、着色性干皮病、角化棘细胞瘤、甲状腺滤泡癌或卡波西肉瘤。
特别地,所述淋巴系的造血细胞肿瘤选自白血病、急性淋巴性白血病、慢性淋巴细胞白血病、B-细胞淋巴瘤、T-细胞淋巴瘤、多发性骨髓瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、毛细胞淋巴瘤或伯基特氏淋巴瘤。
有益效果
本发明的化合物特别有利地在于它们是较其他细胞周期蛋白依赖激酶而言对CDK4/6更具选择性的抑制剂。本发明要求保护的化合物具有很强的药效和对CDK4/6的选择性。这在开发适于用作CDK4/6抑制剂的药物方面是有利的。
具体实施方式
术语“药学上可接受的”是指当给入施用时生理上可耐受的并且一般不产生过敏或相似不适当的反应,例如肠胃不适、眩晕等的分子实体和组合物。优选地,本文所用的术语“药学上可接受的”是指联邦监管机构或国家政府批准的或美国药典或其他一般认可的药典上列举的在动物中、更特别在人体中使用的。
本文所用的“烷基”是指直链或支链饱和烃基基团。在一些实施方案中,烷基基团可具有1至10个碳原子(例如1至8个碳原子)。烷基基团的实例包括甲基(Me)、乙基(Et)、丙基(例如,正丙基和异丙基)、丁基(例如,正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基)、戊基基团(例如,正戊基、异戊基、新戊基)、己基(例如,正己基及其异构体)等。低级烷基基团一般最多有4个碳原子。低级烷基基团的实例包括甲基、乙基、丙基(例如正丙基和异丙基)和丁基基团(例如正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基)。在一个实施方案中一个烷基基团或两个或多个烷基基团可形成桥连的烷基基团。即其中烷基基团经另一个基团连接(特别显示于环状基团),通过烷基链桥连形成环,即,形成桥连的稠合环。
如本文所用,“环烷基”是指非芳香碳环基团,包括环状烷基、链烯基和炔基基团。环烷基基团可以是单环(例如环己基)或多环(例如,包含稠合、桥连和/或螺环体系),其中碳原子位于环体系内部或外部。环烷基基团作为整体可具有3至14个环原子(例如,3至8个碳原子用于单环环烷基基团和7至14个碳原子用于多环环烷基基团)。环烷基基团的任何适宜环上位置可与所定义的化学结构共价连接。环烷基基团的实例包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环戊烯基、环己烯基、环己二烯基、环庚三烯基、冰片基、norpinyl、norcaryl、金刚烷基和螺[4.5]癸基,及其同系物、异构体等。
本发明包括本发明的通式I化合物的全部药学上可接受的同位素标记化合物,其中一个或多个原子被有相同原子数的原子替换,但原子质量或质量数与通常见于自然中的原子质量或质量数不同。
适于包含在本发明化合物中的同位素实例包括氢的同位素,例如2H和3H,碳,例如11C、13C和14C氮例如13N和15N,氧例如15O、17O和18O。
用较重的同位素例如氘即2H取代可提供某些治疗优势,其有更好的代谢稳定性,例如,体内半衰期增加或降低了剂量需求,并因此在某些情况下优选。
以下将通过实施例详细描述本发明的以上化合物1-56的合成方法。
制备实施例
中间体的制备
1-乙基-7-氧代-4,5,6,7-四氢-1-H-吲唑-3-羧酸乙酯
向(3-甲氧基-6,6-二甲基-2-氧代环己-3-烯-1-基)(氧代)乙酸乙酯(10g,41.7mmol)的醋酸溶液(50ml)中逐滴加入乙基肼草酸盐(6.225g,41.7mmol)和醋酸钠(6.81g,83.4mmol)的醋酸溶液(50ml),室温下反应2h。加入水(18ml)和乙酸乙酯(15ml),分液,水层用乙酸乙酯(15×2ml)萃取,合并有机层,经饱和食盐水洗涤,无水硫酸钠干燥,滤液减压浓缩,剩余物经柱色谱(洗脱剂:二氯甲烷:无水甲醇=20:1)分离,得淡黄色固体(4.9g,49.8%)。MS(ESI)(m/z):237.4(M+H)+。1H-NMR(CDCl3,400MHz)δ:4.62(q,J=7.2Hz,2H),4.43(q,J=7.12Hz,2H),3.04(t,J=6.12Hz,2H),2.58(t,J=6.16Hz,2H),2.15(m,2H),1.43(q,J=7.32,5H)。
6-[(二甲氨基)亚甲基]-1-乙基-7-氧代-4,5,6,7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯(中间体B1)
将1-乙基-7-氧代-4,5,6,7-四氢-1-H-吲唑-3-羧酸乙酯(4g,16.94mmol)、二甲基甲酰胺(40ml)加入100ml反应瓶中,搅拌溶解后加入N,N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛(7.6ml,67.78mmol),80下反应8h。减压蒸除溶剂,剩余物经抽滤,滤饼用无水甲醇、石油醚洗涤,得淡黄色固体(4.4g,89%)。MS(ESI)(m/z):300.5(M+H)+。1H-NMR(CDCl3,400MHz)δ:7.59(s,1H),4.70(m,2H),4.42(q,J=7.08,2H),3.14(s,6H),2.95(t,J=3.24,4H),1.58(s,2H),1.42(m,6H)。
6-[(二甲氨基)亚甲基]-1-乙基-7-氧代-4,5,6,7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸甲酯(中间体B2)
除了使用(3-甲氧基-6,6-二甲基-2-氧代环己-3-烯-1-基)(氧代)乙酸甲酯代替(3-甲氧基-6,6-二甲基-2-氧代环己-3-烯-1-基)(氧代)乙酸乙酯以外,以与6-[(二甲氨基)亚甲基]-1-乙基-7-氧代-4,5,6,7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯的合成方法类似的方法合成中间体B2。
(3-甲氧基-2-氧代环己-3-烯-1-基)(氧代)乙酸乙酯
在250ml反应瓶中加入3-甲氧基-2-氧代环己-3-烯(8.4g,54.5mmol)、无水THF溶液(50ml),氮气保护,于-50℃加入1M LiHMDS的THF溶液(33ml),滴毕室温反应15min。滴加草酸二乙酯(11ml,81.8mmol)的无水THF(50ml)溶液,滴毕室温反应8h。将反应液缓慢加入冰水(100ml)中,控制温度不超过20℃,再滴加1M的稀盐酸(50ml)调至pH=5,用乙酸乙酯(100ml×2)萃取,分液。合并有机层,经无水硫酸镁干燥后抽滤,滤液减压浓缩得粗品。用乙酸乙酯:石油醚(1:1,50ml)对粗品进行重结晶,抽滤得到黄色固体(9.7g,80%)。MS-ESI(m/z):226.2(M+H)+。1H-NMR(CDCl3,400MHz)δ:7.58(s,1H),4.4(q,J=7.13Hz,2H),4.22(s,3H),3.12(s,6H),2.77(s,2H),1.40(t,3H)。
1-甲基-7-氧代-4,5,6,7-四氢-1-H-吲唑-3-羧酸乙酯
向(3-甲氧基-2-氧代环己-3-烯-1-基)(氧代)乙酸乙酯(10.3g,46.0mmol)的醋酸溶液(65ml)中逐滴加入硫酸甲基肼(2.44ml,46.0mmol)的醋酸溶液(20ml),室温反应2h。加入水(100ml)和乙酸乙酯(100ml),分液,水层用乙酸乙酯(100×2ml)萃取,合并有机层,经无水硫酸镁干燥后抽滤,滤液减压浓缩,剩余物经乙醇:水(1:1,50ml)重结晶,得黄色固体(6.85g,60.2%)。MS-ESI(m/z):250.3(M+H)+。1H-NMR(CDCl3,400MHz)δ:4.43(q,J=7.03Hz,2H),4.19(s,3H),2.61(t,J=6.45Hz,2H),1.98(t,J=6.45Hz,2H),1.42(t,J=7.18Hz,3H)。
6-[(二甲氨基)亚甲基]-1-甲基-7-氧代-4,5,6,7-四氢-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(中间体B3)
将1-甲基-7-氧代-4,5,6,7-四氢-1-H-吲唑-3-羧酸乙酯(6.85g,27.4mmol)、二氧六环((30ml)加入100ml反应瓶中,搅拌溶解后加入N,N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛(13.1ml,54.8mmol),室温下反应8h。减压蒸除溶剂,剩余物经柱色谱(洗脱剂:石油醚:乙酸乙酯=1:1)分离,得淡黄色固体(7.27g,90%)。MS-ESI(m/z):305.2(M+H)+。1H-NMR(CDCl3,400MHz)δ:7.60(s,1H),4.39-4.43(m,2H),4.24(s,3H),3.14(s,6H),2.96(s,1H),2.89(s,1H),2.78(s,2H),1.42(s,6H),1.40-1.44(m,3H)。
6-[(二甲氨基)亚甲基]-1-甲基-7-氧代-4,5,6,7-四氢-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(中间体B4)
除了使用(3-甲氧基-6,6-二甲基-2-氧代环己-3-烯-1-基)(氧代)乙酸甲酯代替(3-甲氧基-6,6-二甲基-2-氧代环己-3-烯-1-基)(氧代)乙酸乙酯以外,以与6-[(二甲氨基)亚甲基]-1-甲基-7-氧代-4,5,6,7-四氢-1H-吡唑-3-羧酸乙酯的合成方法类似的方法合成中间体B4。
1,3-二Boc-[5-(4-甲基-哌嗪-1-基)甲基]吡啶-2-胍(中间体A1)
将[5-(4-甲基-哌嗪-1-基)甲基]吡啶-2-胺(2g,10.41mmol)、二氯甲烷(30ml)、三乙胺(1.26g,12.50mmol)加入100ml反应瓶中,加入1,3-二-Boc-2-(三氟甲基磺酰基)胍(4.48g,11.45mmol)的二氯甲烷(10ml)溶液,搅拌溶解,室温反应3天。加入水(50ml)、二氯甲烷(50ml),分液,水层再用二氯甲烷(15ml)萃取,合并有机层,经饱和食盐水洗涤,无水硫酸镁干燥后,滤液减压浓缩,剩余物经柱色谱(洗脱剂:石油醚:乙酸乙酯=1:3)分离。得到中间体A1。
1,3-二Boc-[5-(哌嗪-1-基)甲基]吡啶-2-胍(中间体A2)
除了使用[5-(哌嗪-1-基)甲基]吡啶-2-胺代替[5-(4-甲基-哌嗪-1-基)甲基]吡啶-2-胺以外,以与中间体A1的合成方法类似的方法合成中间体A2。
1,3-二Boc-5-(4-乙基-哌嗪-1-基)吡啶-2-胍(中间体A3)
除了使用5-(4-乙基-哌嗪-1-基)吡啶-2-胺代替[5-(4-甲基-哌嗪-1-基)甲基]吡啶-2-胺以外,以与中间体A1的合成方法类似的方法合成中间体A3。
1,3-二Boc-5-(-哌嗪-1-基)吡啶-2-胍(中间体A4)
除了使用5-(-哌嗪-1-基)吡啶-2--胺代替[5-(4-甲基-哌嗪-1-基)甲基]吡啶-2-胺以外,以与中间体A1的合成方法类似的方法合成中间体A4。
1,3-二Boc-5-(4-甲基-哌嗪-1-基)吡啶-2-胍(中间体A5)
除了使用5-(4-甲基-哌嗪-1-基)吡啶-2-胺代替[5-(4-甲基-哌嗪-1-基)甲基]吡啶-2-胺以外,以与中间体A1的合成方法类似的方法合成中间体A5(3.6g,74.3%)。MS(ESI)(m/z):435.9(M+H)+。1H-NMR(CDCl3,400MHz)δ:8.91(s,1H),7.17(s,1H),6.79(d,J=7.50Hz,1H),6.65(d,J=7.10,1H),2.0(s,1H),3.15(t,J=7.1Hz,4H),2.35(t,J=7.1Hz,4H),2.21(s,3H),1.42(s,18H)。
实施例1
8-[[5-(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]吡啶-2-基氨基]-1-甲基-4,5-二氢-1H-吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-甲酸乙酯(化合物2)的合成
将中间体A1(0.25g,1.0mmol)、中间体B3(0.37g,1.0mmol)、碳酸钠(0.136g,1.0mmol)1,4-二氧六环(5ml)加入25ml反应瓶中,加热回流至90℃反应2h。冷却至室温,将反应液转移到100ml锥形瓶,缓慢滴加水(40ml),过滤收集所得沉淀,干燥,得淡黄色固体(0.41g,90%)。MS(ESI)m/z:463.9(M+H)+。
实施例2
8-[[5-(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]吡啶-2-基氨基]-1-甲基-4,5-二氢-1H-吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-甲酸甲酯(化合物1)的合成
除了使用中间体B4代替中间体B3以外,以与化合物2的合成方法相同的方法合成化合物1(3.90g,80%)(通过0-10%MeOH/二氯甲烷洗脱的SiO2色谱纯化)。MS(ESI)(m/z):449.0(M+H)+。
实施例3
8-[[5-(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]吡啶-2-基氨基]-1-甲基-4,5-二氢-1H-吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-甲酸钠盐的合成
将8-[[5-(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]吡啶-2-基氨基]-1-甲基-4,5-二氢-1H-吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-甲酸乙酯(化合物2)(1.5g,3.2mmol)、95%无水乙醇(40ml)加入100ml反应瓶中,搅拌溶解后加入氢氧化钠(0.4g,1mmol),90℃加热回流反应3h。冷却至室温,析出固体,抽滤,滤饼用无水乙醇(10ml)、石油醚(1ml)洗涤,干燥,得白色固体。
实施例4
8-[[5-(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]吡啶-2-基氨基]-1-甲基-4,5-二氢-1H-吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-甲酰胺(化合物3)的合成
将8-[[5-(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]吡啶-2-基氨基]-1-甲基-4,5-二氢-1H-吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-甲酸钠盐(0.02g,0.04mmol)、二甲基甲酰胺(1.6ml)加入10ml反应瓶中,向反应瓶中加入50%甲醇钠(0.024g,0.44mmol)的甲醇(0.4ml)溶液,搅拌混匀,最后加入甲酰胺(0.06g,1.33mmol),室温搅拌过夜。向反应液中缓慢滴加水(2ml),过滤收集所得沉淀,干燥,得淡黄色固体(3.90g,80%)(通过0-10%MeOH/二氯甲烷洗脱的SiO2色谱纯化)。MS(ESI)(m/z):434.0(M+H)+。
实施例5
8-[[5-(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]吡啶-2-基氨基]-1-甲基-4,5-二氢-1H-吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-(N-甲基甲酰胺)(化合物4)的合成
将8-[[5-(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]吡啶-2-基氨基]-1-甲基-4,5-二氢-1H-吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-甲酸(9.5g,19.561mmol)加入到无水四氢呋喃和二甲基甲酰胺(1:1,50ml)中;2M甲胺的THF溶液(21.12ml,42.24mmol),1-羟基苯并***(5.332g,39.458mmol)和二氯甲烷(7.567g,39.473mmol)依次加入到上述溶液中,反应混合物在室温下反应10h。反应混合物倒入水(100ml)中然后用二氯甲烷(250ml)萃取4次。有机层用饱和食盐水洗,用硫酸钠干燥后旋干。粗产物通过柱层析纯化(极性:二氯甲烷:甲醇=90:5)得到产物(3.90g,80%)(通过0-10%MeOH/二氯甲烷洗脱的SiO2色谱纯化)。MS(ESI)(m/z):448.0(M+H)+。
实施例6
8-[[5-(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]吡啶-2-基氨基]-1-甲基-4,5-二氢-1H-吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-(N,N-二甲基甲酰胺)(化合物5)的合成
将8-[[5-(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]吡啶-2-基氨基]-1-甲基-4,5-二氢-1H-吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-甲酸(0.2g,0.44mmol)、二甲基甲酰胺(5ml)加入50ml反应瓶,搅拌溶解后加入二氯乙烷(0.2mg,1mmol),1-羟基苯并***(HOBT)(0.2g,1.4mmol)。反应2h后,向瓶中加入二甲胺(3ml),继续反应3h。加入水(5ml)、二氯甲烷(2ml),分液,水层再用二氯甲烷(2ml)萃取,合并有机层,经饱和食盐水洗涤,无水硫酸钠干燥后粗产物通过柱层析纯化(极性:二氯甲烷:甲醇=90:5)得到产物,获得固体产物(3.90g,80%)(通过0-10%MeOH/二氯甲烷洗脱的SiO2色谱纯化)。MS(ESI)(m/z):462.0(M+H)+。
化合物6-47的合成
分别采用不同的中间体,按照与上述化合物1或2类似的合成方法,合成以下表1中的化合物。
表1
按照与上述化合物3-5类似的合成方法,对表1中的化合物进行氨基化得到其对应的甲酰胺以及甲基取代或二甲基取代的甲酰胺产物(化合物8-10,13-15,18-20,22-24,26-27,30-32,35-37,40-42以及45-47)。
实施例7
8-[5-(4-甲基哌嗪-1-基)-吡啶-2-基氨基]-1-乙基-4,5-二氢-1H-吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-氰酰胺(化合物48)的合成
将8-[5-(4-甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-2-基氨基]-1-乙基-4,5-二氢-1H-吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-羧酸钠盐(0.2g,0.44mmol)、N,N-二甲基甲酰胺(2ml)加入10ml反应瓶,搅拌溶解后加入二氯甲烷(0.2mg,0.10mmol),HOBT(0.2g,0.14mmol).反应1.2h后,向瓶中加入氰胺(0.028mg,0.67mmol),继续反应3h。加入水(2ml)、二氯甲烷(2ml),分液,水层再用二氯甲烷(2ml)萃取,合并有机层,经饱和食盐水洗涤,无水硫酸钠干燥后粗产物通过柱层析纯化(极性:二氯甲烷:甲醇=90:5)得到产物。获得产物11(0.17g,0.84%产率)。MS(ESI)m/z:459.6(M+H)+。
实施例8
8-[5-(4-甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-2-基氨基]-1-乙基-4,5-二氢-1H-吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-甲酸甲氧酰胺(化合物49)的合成
将8-[5-(4-甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-2-基氨基]-1-乙基-4,5-二氢-1H-吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-羧酸钠盐(0.2g,0.44mmol)、二甲基甲酰胺(2ml)加入10ml反应瓶,搅拌溶解后加入二氯乙烷(0.2mg,1.0mmol),HOBT(0.2g,1.4mmol).反应1,2h后,向瓶中加入调碱后的甲氧胺盐酸盐(22mg,26mmol),继续反应3h。加入水(2ml)、二氯甲烷(2ml),分液,水层再用二氯甲烷(2ml)萃取,合并有机层,经饱和食盐水洗涤,无水硫酸钠干燥后粗产物通过柱层析纯化(极性:二氯甲烷:甲醇=90:5)得到产物获得产物(0.014g,69%)。MS(ESI)464.9m/z:(M+H)+。
实施例9
8-[5-(4-甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-2-基氨基]-1-乙基-4,5-二氢-1H-吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-乙酰胺(化合物50)的合成
将8-[5-(4-甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-2-基氨基]-1-乙基-4,5-二氢-1H-吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-羧酸钠盐(0.2g,0.44mmol)、二甲基甲酰胺(5ml)加入10ml反应瓶,搅拌溶解后加入二氯乙烷(0.2mg,0.10mmol),HOBT(0.2g,1.4mmol).反应1,2h后,向瓶中加入乙胺(3ml),继续反应3h。加入水(5ml)、二氯甲烷(5ml),分液,水层再用二氯甲烷(2ml)萃取,合并有机层,经饱和食盐水洗涤,无水硫酸钠干燥后粗产物通过柱析纯化(极性:二氯甲烷:甲醇=90:5)得到产物(0.015g,74%)。MS(ESI)464.9m/z:(M+H)+。
实施例10
8-[5-(4-甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-2-基氨基]-1,4-二甲基-4,5-二氢-1H-吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-甲酸乙酯(化合物54)的合成
3-甲氧基-5-甲基-环己-2-烯酮
将5-甲基-1,3-环己二酮(50g,0.36mol)、甲醇(400ml)加入1000ml三颈瓶中,搅拌溶解后滴加1M的四氯化钛(2.0g,0.01mol)的二氯甲烷溶液(10.75ml),滴毕,室温反应8h。缓慢加水(300ml)淬灭反应,再滴加5%的NaHCO3溶液(约80ml),用乙酸乙酯(200ml×3)萃取,分液。合并有机层,经无水硫酸镁干燥后抽滤,滤液减压浓缩,得淡黄色油状液体(49.8g,93%),直接用于下步反应。MS-ESI(m/z):140.2(M+H)+。1H-NMR(CDCl3,400MHz)δ:5.34(s,1H),3.67(s,3H),2.25(s,2H),2.18(s,2H),1.05(d,3H)。
5-甲基-环己-2-烯酮
将3-甲氧基-5-甲基-环己-2-烯酮(40g,0.26mol)、无水THF(135ml)加入500ml三颈瓶中,氮气保护,冰浴下缓慢滴加1M的LiAlH4(3.4g,0.09mol)的无水THF溶液(91ml),保持温度在0-5℃,滴毕升至室温反应2h。用乙酸乙酯(100ml)稀释,冰浴条件下缓慢滴加2M的稀盐酸(约150ml)淬灭反应,控制ph在8-9之间,加入乙酸乙酯(100ml)和水(100ml),分液,水层用乙酸乙酯(100×2ml)萃取,合并有机层,经无水硫酸镁干燥后抽滤,滤液减压浓缩,得淡黄色油状液体(27.1g,85%),直接用于下步反应。MS-ESI(m/z):111.2(M+H)+。1H-NMR(CDCl3,400MHz)δ:6.85(dt,J=9.96Hz,J=4.10Hz,1H),6.01(dt,J=9.96Hz,J=2.05Hz,1H),2.26(s,2H),2.22(dd,J=4.10Hz,J=2.05Hz,2H),1.05(d,3H)。
4-甲基-7-氧杂-二环[4.1.0]庚烷-2-酮
将5-甲基-环己-2-烯酮(25g,0.20mol)、甲醇(200ml)加入500ml三颈瓶中,冰浴下滴加30%的双氧水(100ml,1.0mol),搅拌30min。再缓慢滴加2%的NaOH溶液(55ml,0.027mol),滴毕于4℃下反应过夜。加入甲基叔丁基醚(100ml)和水(100ml)(100×2ml),分离有机层。减压蒸除溶剂,剩余物(约80ml)中加入5%的Na2S2O5溶液(250ml,0.80mol)于室温搅拌30min。加入甲基叔丁基醚(100ml)和水(100ml),分液,水层用甲基叔丁基醚(100×2ml)萃取,合并有机层。有机层经无水硫酸镁干燥后抽滤,滤液减压浓缩,得无色油状液体(22g,78.5%)。MS-ESI(m/z):126.1(M+H)+。1H-NMR(CDCl3,400MHz)δ:3.48(t,J=4.10Hz,1H),3.21(dt,J=3.74Hz,J=0.92Hz,1H),2.63(d,J=13.77Hz,1H),2.02(d,J=15.53Hz,1H),1.81(m,2H),1.11(s,3H),0.92(d,3H)。
2-甲氧基-5-甲基-环己-2-烯酮
将4-甲基-7-氧杂-二环[4.1.0]庚烷-2-酮(20g,0.14mol)溶于甲醇(65ml),滴加至85%的无水氢氧化钾(7.84g,0.14mol)的甲醇(10ml)溶液中,室温反应8h,再加热回流反应30min。冷却至室温,加入水(100ml)和甲基叔丁基醚(50ml),分液,水层用甲基叔丁基醚(100×2ml)萃取,合并有机层。经无水硫酸镁干燥后抽滤,滤液减压浓缩,得无色油状液体(15.8g,75%收率)。MS-ESI(m/z):141.2(M+H)+。1H-NMR(CDCl3,400MHz)δ:5.67(t,J=4.54Hz,1H),3.59(t,3H),2.35(s,2H),2.30(d,J=4.69Hz,2H),1.05(d,3H)。
(3-甲氧基-6-甲基-2-氧代环己-3-烯-1-基)(氧代)乙酸乙酯
在250ml反应瓶中加入2-甲氧基-5-甲基-环己-2-烯酮(8.4g,54.5mmol)、无水四氢呋喃(THF)溶液(50ml)氮气保护,于-50℃加入1M双三甲基硅基胺基锂的THF溶液(33ml),滴毕室温反应15min。滴加草酸二乙酯(11ml,81.8mmol)的无水THF(50ml)溶液,滴毕室温反应8h。将反应液缓慢加入冰水(100ml)中,控制温度不超过20℃,再滴加1M的稀盐酸(50ml)调至pH=5,用乙酸乙酯(100ml×2)萃取,分液。合并有机层,经无水硫酸镁干燥后抽滤,滤液减压浓缩得粗品。用乙酸乙酯:石油醚(1:1,50ml)对粗品进行重结晶,抽滤得到淡黄色固体(9.7g,80%)。MS-ESI(m/z):241.2(M+H)+。1H-NMR(CDCl3,400MHz)δ:7.58(s,1H),4.43(q,J=7.13Hz,2H),4.22(s,3H),3.12(s,6H),2.77(s,2H),1.40(t,3H)。
1,4-二甲基-7-氧代-4,5,6,7-四氢-1-H-吲唑-3-羧酸乙酯
向(3-甲氧基-6-甲基-2-氧代环己-3-烯-1-基)(氧代)乙酸乙酯(10.3g,46.0mmol)的醋酸溶液(65ml)中逐滴加入甲基肼(2.44ml,46.0mmol)的醋酸溶液(20ml),室温反应2h。加入水(100ml)和乙酸乙酯(100ml),分液,水层用乙酸乙酯(100×2ml)萃取,合并有机层,经无水硫酸镁干燥后抽滤,滤液减压浓缩,剩余物经乙醇:水(1:1,50ml)重结晶,得淡黄色固体(6.85g,60.2%)。MS-ESI(m/z):237.3(M+H)+。1H-NMR(CDCl3,400MHz)δ:4.43(q,J=7.03Hz,2H),4.19(s,3H),2.61(t,J=6.45Hz,2H),1.98(t,J=6.45Hz,2H),1.42(t,J=7.18Hz,3H)。
6-[(二甲氨基)亚甲基]-1,4-二甲基-7-氧代-4,5,6,7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯
将1,4-二甲基-7-氧代-4,5,6,7-四氢-1-H-吲唑-3-羧酸乙酯(6.85g,27.4mmol)、四氢呋喃(30ml)加入100ml反应瓶中,搅拌溶解后加入N,N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛(13.1ml,54.8mmol),室温下反应8h。减压蒸馏除去溶剂,剩余物经柱色谱(洗脱剂:石油醚:乙酸乙酯=1:1)分离,得淡黄色固体(7.27g,90%)。MS-ESI(m/z):292.2(M+H)+。1H-NMR(CDCl3,400MHz)δ:7.60(s,1H),4.39-4.43(m,2H),4.24(s,3H),3.14(s,6H),2.96(s,1H),2.89(s,1H),2.78(s,2H),1.42(d,3H),1.40-1.44(m,3H)。
终产物(化合物54)的合成
将6-[(二甲氨基)亚甲基]-1,4-二甲基-7-氧代-4,5,6,7-四氢-1H-吲唑-3-羧酸乙酯(5.01g,16.4mmol)、中间体A5(3.82g,16.4mmol)、二氧六环(40ml)加入100ml反应瓶中,加热至90℃反应4h。冷却至室温,向反应液中缓慢滴加水(50ml),过滤收集所得沉淀,干燥,得淡黄色固体(6.75g,90%)。MS(ESI)m/z:463.6(M+H)+。
实施例11
8-[5-(4-甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-2-基氨基]-1,4,4-三甲基-4,5-二氢-1H-吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-甲酸乙酯(化合物51)的合成
除了使用5,5-二甲基-1,3-环己二酮代替5-甲基-1,3-环己二酮以外,以与化合物54的合成方法相同的方法进行合成。
实施例12
8-[5-(4-甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-2-基氨基]-1-异丙基-4,4-二甲基-4,5-二氢-1H-吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-甲酸乙酯(化合物52)的合成
除了使用5,5-二甲基-1,3-环己二酮代替5-甲基-1,3-环己二酮以及使用异丙基肼代替甲基肼以外,以与化合物54的合成方法相同的方法进行合成。
实施例13
8-[5-(4-甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-2-基氨基]-1,4,4-三甲基-4,5-二氢-1H-吡唑并[4,3-h]喹唑啉-3-甲酸(化合物53)的合成
将化合物51(6.25g,13.2mmol)、无水乙醇(40ml)加入100ml反应瓶中,搅拌溶解后加入1.5M氢氧化钾的95%乙醇溶液(13.2ml),加热回流反应3h。冷却至室温,析出固体,抽滤,滤饼用冷95%乙醇(5ml×3)洗涤,将滤饼溶于50ml水中,滴加1M的盐酸,pH为3-4,搅拌1h有白色固体析出,抽滤,滤饼用水洗涤3次,烘干得到目标化合物(4.5.0g,85.3%)。MS(ESI)m/z:448.8(M+H)+。
实施例14
化合物55的合成
除了使用1,3-环戊二酮代替5-甲基-1,3-环己二酮,以及使用异丙基肼代替甲基肼以外,化合物55的合成参照前述化合物54的合成方法。
实施例15
化合物56的合成
除了使用环戊基肼代替异丙基肼以外,化合物56的合成参照前述化合物55的合成方法。最终得到淡黄色固体(6.75g,90%)。MS(ESI)m/z:489.26(M+H)+。
在以下表2中列出通过以上方法制备的化合物的氢谱数据。
表2
实验实施例
实验材料
CDK2/CycA2(Carna,Cat.No.04-103,Lot.No 06CBS-3024,GST-CDK2(1-298(end)))
CDK4/CycD3(Carna,Cat.No.04-103,Lot.No 06CBS-3024,GST-CDK2(1-298(end)))
CDK6/cycD3(eurofins,Cat.No.14-957M,Lot.No.D14SP004NB,GST-CDK4(1-303end)/GST-CycD3(1-292end))
Peptide FAM-P8(GL Biochem,Cat.No.112396,Lot.No.P100804-XZ112396)
Peptide FAM-P18(GL Biochem,Cat.No.114202,Lot.No.P080319-XY114202)
ATP(Sigma,Cat.No.A7699-1G,CAS No.987-65-5)
DMSO(Sigma,Cat.No.D2650,Lot.No.474382)
EDTA(Sigma,Cat.No.E5134,CAS No.60-00-4)
96孔板(Corning,Cat.No.3365,Lot.No.22008026)
384孔板(Corning,Cat.No.3573,Lot.No.12608008)
Staurosporine(MCE,Cat.No.HY-15141,Lot.No.19340)
实验操作
1.配制1x激酶碱基缓冲液以及终止缓冲液
1)用于CDK2、CDK6的1x激酶碱基缓冲液
用纯化水配制10ml溶液,包括50mM HEPES,pH 7.5,0.0015%Brij-35,10mM MgCl2以及2mM DTT。
2)用于CDK4的1x激酶碱基缓冲液
用纯化水配制10ml溶液,包括20mM HEPES,pH 7.5,0.01%Triton X-100,10mMMgCl2以及2mM DTT。
3)终止缓冲液
用纯化水配制10ml溶液,包括100mM HEPES,pH 7.5,0.015%Brij-35以及50mMEDTA。
2.激酶反应
1)配制2.5x酶溶液
将5ug的cdk激酶加入2.5ml的1x激酶碱基缓冲液中配制成酶溶液。
2)配制2.5x酶溶液
取50ug Rb和10mg ATP加至5.0ml 1x激酶碱基缓冲液中。
3)配制500nM的待测化合物的DMSO缓冲液溶液
先配制25uM化合物的DMSO溶液,取10ul的化合物的DMSO溶液,向其中加入90ul的1x激酶碱基缓冲液。混合10min得到化合物在10%DMSO中的溶液。在96孔板上加入5μl的化合物在10%DMSO中的溶液。
4)将2.5x酶溶液转移到测定板上
向96孔分析板的每个孔中加入10μl 2.5x酶溶液。
5)在室温下孵育10分钟。
6)将2.5x肽溶液转移到测定板。向96孔测定板的每个孔中加入10μl的2.5x肽溶液。
7)激酶反应终止
在28℃烘箱中孵育1h。加入25μl终止缓冲液终止反应。用Caliper仪器检测。
在以下表3中显示化合物1-56(浓度为500nM)对CDK2、CDK4以及CDK6的抑制率。
表3
从以上表3可以看出,本发明的多数化合物对CDK4/6的抑制活性达到90%以上,因此,本发明的化合物呈现很好的CDK4/6的抑制活性,可以被用作CDK4/6的抑制剂。
以上实施例仅为本发明的示例性实施例,不用于限制本发明,本发明的保护范围由权利要求书限定。本领域技术人员可以在本发明的实质和保护范围内,对本发明做出各种修改或等同替换,这种修改或等同替换也应视为落在本发明的保护范围内。
Claims (13)
1.一种如以下通式I所示的化合物或其药学上可接受的盐,
在通式I中,
R1选自H、未取代或卤素取代的C1-C8直链或支链烷基或者未取代或卤素取代的C3-C6环烷基;其中,卤素表示氟、氯、溴或碘;
R2和R2’各自独立地选自H、C1-C8直链或支链烷基;
R3选自-C(O)OR5或-CONR6R7,其中R5、R6、R7各自独立地为H、CN、C1-C8烷基或C1-C8烷氧基;
a为0或1;
X为直键、-CH2-、-CH2CH2-或-CH2CH2CH2-;
R4为H或C1-5烷基。
2.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐,其中,R1选自H、未取代或卤素取代的C1-C6直链或支链烷基或者未取代或卤素取代的C3-C5环烷基。
3.根据权利要求2所述的化合物或其药学上可接受的盐,其中,R1选自未取代或卤素取代的C1-C3直链或支链烷基。
4.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐,其中,R2和R2’各自独立地选自H、C1-C6直链或支链烷基;
R3选自-C(O)OR5或-CONR6R7,其中R5、R6、R7各自独立地为H、CN、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基。
5.根据权利要求4所述的化合物或其药学上可接受的盐,其中,R2和R2’各自独立地选自C1-C3直链或支链烷基;R3选自-C(O)OR5或-CONR6R7,其中R5、R6、R7各自独立地为甲基、乙基、丙基、丁基、甲氧基、乙氧基或丙氧基。
6.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐,其中,
R1选自H、甲基、乙基、异丙基、环戊基或三氟甲基;
R2和R2’各自独立地为H或甲基;
R3选自羧基、甲氧羰基、乙氧羰基、氨基甲酰基、甲氨基甲酰基、二甲氨基甲酰基、氰基氨基甲酰基或甲氧基氨基甲酰基;
a为0或1;
X为直键或-CH2-;
R4为H、甲基或乙基。
8.一种药物组合物,包含治疗有效量的根据权利要求1-7中任一项所述的化合物或其药学可接受的盐以及至少一种药学可接受的赋形剂、载体和/或稀释剂。
9.根据权利要求1-7中任一项所述的化合物或其药学可接受的盐在制备用作CDK4/6抑制剂的药物中的用途。
10.根据权利要求1-7中任一项所述的化合物或其药学可接受的盐在制备用于治疗癌症的药物中的用途。
11.根据权利要求10所述的用途,其中,所述癌症选自膀胱癌、乳腺癌、结肠癌、直肠癌、肾癌、表皮癌、肝癌、肺癌、食道癌、胆囊癌、卵巢癌、胰腺癌、胃癌、***、甲状腺癌、鼻癌、头颈癌、***癌、皮肤癌、淋巴系的造血细胞肿瘤、髓系造血细胞肿瘤、甲状腺滤泡癌、源于***肿瘤、中枢或周围神经***肿瘤、黑素瘤、神经胶质瘤、***瘤、畸胎瘤、骨肉瘤、着色性干皮病、角化棘细胞瘤或卡波西肉瘤。
12.根据权利要求11所述的用途,其中,所述淋巴系的造血细胞肿瘤选自白血病、B-细胞淋巴瘤、T-细胞淋巴瘤、多发性骨髓瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、毛细胞淋巴瘤或伯基特氏淋巴瘤。
13.根据权利要求12所述的用途,其中,所述白血病选自急性淋巴性白血病或慢性淋巴细胞白血病。
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