CN107361369A - 一种鹰嘴豆提取物及其制备方法和用途 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种鹰嘴豆提取物及其制备方法和用途。所述制备方法包括鹰嘴豆晾干后,粉碎、过筛,进行酶解提取,得到乳白色鹰嘴豆提取物。本发明制备的鹰嘴豆提取物具有较好的抗氧化活性,对体内巨噬细胞抑制具有明显的改善,促进巨噬细胞的吞噬功能;对PM 2.5引起的心血管毒性具有较强的改善功效,能够增强吞噬纳米活性炭(PM 2.5)巨噬细胞的功能。
Description
技术领域
本发明属于健康产品领域,涉及一种鹰嘴豆提取物的制备方法,及其在抗氧化、提高机体免疫力和减轻PM 2.5对机体伤害方面的应用。本发明的提取物可以作为食品、保健食品、或药品使用。
背景技术
鹰嘴豆(Cicer arietinum L)为蝶形花科草本植物,别名桃尔豆、鸡豆、鸡心豆等,是印度和巴基斯坦的重要的蔬菜之一,在欧洲食用鹰嘴豆也十分普遍,也是维吾尔医常用药材。鹰嘴豆所含的营养成分非常丰富,无论是从种类,还是数量上,都大大超过其他豆类。它含有18种以上的氨基酸(含人体必须但自身不能合成的全部8种氨基酸),多种营养元素和微量元素,如:钙、罗、锌、镁、磷等。特别是每百克鹰嘴豆所含的钙高达350毫克,磷320毫克,高于大部分豆类,铁的含量达47毫克,比其它豆类高出90%,维生素C、B1、B2含量高达12毫克,膳食纤维含量更高于其它。
维吾尔族用它治疗支气管炎、黏膜炎、霍乱、便秘痢疾、消化不良、肠胃气胀、毒蛇咬伤、糖尿病、***降低、皮肤瘙痒、高脂血症、中暑等疾病。在中医上,鹰嘴豆可以调节湿度,有止泻、解毒、壮身等作用。
本发明使用特殊工艺制备得到鹰嘴豆提取物,经体内生物活性实验证实其具有显著抗氧与及提高机体免疫力的功效,同时还研究发现此提取物对PM 2.5引起的心血管毒性具有较强的改善作用。
发明内容
本发明公开了一种鹰嘴豆提取物的制备方法及其用途,将鹰嘴豆晾干粉碎后,使用酶提取法获得具有生物活性的鹰嘴豆提取物,该提取物可以用作食品、保健食品以及药品。本发明中的制备工艺是经过长期的科学研究而总结出来的,其特点在于工艺简单、经济,绿色环保,同时用于大规模生产。
为达到上述目的,本发明是通过下述方法实现的:
一种鹰嘴豆提取物,其通过下述方法制备得到:将鹰嘴豆晾干粉碎并过筛,加入生物酶,进行酶提取,提取液浓缩至30℃时的相对密度为1.05~1.10g/mL,经干燥得到提取物。
鹰嘴豆提取物的提取原料可以为鹰嘴豆干燥的种子,或者其经过渣油后的豆饼,或者其经过有机溶剂或者水(不含生物酶)提取后的豆渣,或者豆饼或者豆渣经蛋白提取后的下脚料。
优选地,鹰嘴豆晾干后,粉碎、过筛,加水搅拌,调节温度和pH,加入生物蛋白酶进行酶解提取,提取完成后,煮沸,离心、过滤,上清液经浓缩干燥,得到乳白色鹰嘴豆提取物。
优选地,(1)将鹰嘴豆原料晾干并粉碎,至少过1号筛网从而获得鹰嘴豆豆粉。
(2)将一定量的鹰嘴豆豆粉与水按质量比为1∶10~1∶20混合,加入豆粉质量的0.1%~0.5%的生物蛋白酶,调节pH至5~9,恒温40~55℃搅拌3~6h;
(3)提取完成后,将步骤(2)中的药材提取液煮沸5~10min,待冷却至室温,离心过滤,滤液待用;
(4)将步骤(3)中的滤液在温度为50~60℃浓缩至30℃时的相对密度为1.05~1.10g/mL,经干燥得到乳白色鹰嘴豆提取物;所述鹰嘴豆提取物的收率不低于25wt%。
优选地,所述的生物蛋白酶选自食品级的中性蛋白酶(酶活力≥20万u/g)、木瓜蛋白酶(酶活力≥40万u/g)、菠萝蛋白酶(酶活力≥30万u/g)、碱性蛋白酶(酶活力≥20万u/g)、胰酶(酶活力≥3000u/g)中的一种或者它们的混合物,优选地使用中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶中的一种或者它们的混合物;
优选地,所述的浓缩方法可以为膜浓缩、减压浓缩、常压浓缩;
优选地,所述的干燥方法可以为喷雾干燥、真空干燥、加热干燥、冷冻干燥。
本发明还提供了一种鹰嘴豆提取物的提取方法,其包括下述步骤:将鹰嘴豆原料与水混合,进行酶提取,提取液浓缩至30℃时的相对密度为1.05~1.10g/mL,经干燥得到提取物。
优选地,所述提取方法包括下述步骤:
(1)将鹰嘴豆原料晾干并粉碎,至少过1号筛网从而获得鹰嘴豆豆粉。
(2)将一定量的鹰嘴豆豆粉与水按质量比为1∶10~1∶20混合,加入豆粉质量的0.1%~0.5%的生物蛋白酶,调节pH至5~9,恒温40~55℃搅拌3~6h;
(3)提取完成后,将步骤(2)中的药材提取液煮沸5~10min,待冷却至室温,离心过滤,滤液待用;
(4)将步骤(3)中的滤液在温度为50~60℃浓缩至30℃时的相对密度为1.05~1.10g/mL,经干燥得到乳白色鹰嘴豆提取物;所述鹰嘴豆提取物的收率不低于25wt%。
优选地,所述的生物蛋白酶选自食品级的中性蛋白酶(酶活力≥20万u/g)、木瓜蛋白酶(酶活力≥40万u/g)、菠萝蛋白酶(酶活力≥30万u/g)、碱性蛋白酶(酶活力≥20万u/g)、胰酶(酶活力≥3000u/g)中的一种或者它们的混合物,优选地使用中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶中的一种或者它们的混合物;
优选地,所述的浓缩方法可以为膜浓缩、减压浓缩、常压浓缩;
优选地,所述的干燥方法可以为喷雾干燥、真空干燥、加热干燥、冷冻干燥。
本发明还提供了一种组合物,其含有上述提取物,和可药用或食用辅料;可为任意剂型,优选其是片剂、分散片、胶囊剂、软胶囊剂、微囊剂、颗粒剂、注射剂、粉针剂、冻干粉针剂、微丸剂、滴丸剂、糖浆剂、散剂、浸膏剂、煎膏剂、口服液体制剂及其他药学上可以接受的剂型。
所述提取物和组合物可以明显清除自由基,具有显著的抗氧化功效;对体内巨噬细胞的抑制具有明显改善,促进巨噬细胞的吞噬功能,具有显著的免疫调节功效;对PM 2.5引起的心血管毒性具有较强的改善功效,能够增强吞噬纳米活性炭(PM 2.5)的巨噬细胞的功能。
所述的组合物可用于制备治疗或预防自由基过多引起的症状的药物、食品或保健品的应用;用于制备增强免疫力的药物、食品或保健品;用于制备预防、治疗或者减轻PM2.5颗粒物对机体造成伤害的药物、食品或保健品。
优选地,本发明的鹰嘴豆提取物的制备方法,其包括下述步骤:鹰嘴豆原料晾干后,粉碎、过筛,加水搅拌,将温度和pH调至生物蛋白酶酶提取的最佳条件后,加入一定量的生物蛋白酶进行酶解提取,提取完成后,煮沸灭活,离心、过滤,上清液经浓缩干燥,得到乳白色鹰嘴豆提取物,具体制备方法如下:
(1)将鹰嘴豆原料晾干并粉碎,至少过1号筛网从而获得鹰嘴豆豆粉。
(2)将一定量的鹰嘴豆豆粉与水按质量比为1∶10~1∶20混合,加入药粉质量的0.1%~0.5%的生物蛋白酶,调节pH至5~9,恒温40~55℃搅拌3~6h。
(3)提取完成后,将步骤(2)中的药材提取液煮沸5~10min,待冷却至室温,离心过滤,滤液待用。
(4)将步骤(3)中的滤液在温度为50~60℃浓缩至30℃时的相对密度为1.05~1.10g/mL,经干燥得到乳白色鹰嘴豆提取物。
所述的生物蛋白酶选自食品级的中性蛋白酶(酶活力≥20万u/g)、木瓜蛋白酶(酶活力≥40万u/g)、菠萝蛋白酶(酶活力≥30万u/g)、碱性蛋白酶(酶活力≥20万u/g)、胰酶(酶活力≥3000u/g)中的一种或者它们的混合物,优选地使用中性蛋白酶、碱性蛋白酶中的一种或者它们的混合物。
所述的浓缩方法可以为膜浓缩、减压浓缩、常压浓缩。
所述的干燥方法可以为喷雾干燥、真空干燥、加热干燥、冷冻干燥。
所述鹰嘴豆提取物的收率25~35wt%。
本发明还提供了一种组合物,其含有所述鹰嘴豆提取物,药物或食品上可接受的助剂。
所述该专利中制备所得鹰嘴豆提取物可以与常规预防或治疗疲劳、免疫力低下引起的相关疾病的药物如茯苓、人参、黄精、枸杞、天麻、肉苁蓉等复配组合。
所述该专利中制备所得鹰嘴豆提取物可以与药用辅料组合,其是片剂、分散片、胶囊剂、软胶囊剂、微囊剂、颗粒剂、注射剂、粉针剂、冻干粉针剂、微丸剂、滴丸剂、糖浆剂、散剂、浸膏剂、煎膏剂、口服液体制剂及其他药学上可以接受的剂型。
经研究表明,该专利中制备所得鹰嘴豆提取物可以明显清除自由基,具有抗氧化的功效;对体内巨噬细胞的抑制具有明显的改善,促进巨噬细胞的吞噬功能,具有显著的免疫调节功效;对PM 2.5引起的心血管毒性具有较强的改善功效,能够增强吞噬纳米活性炭(PM 2.5)的巨噬细胞的功能。因此,可以预期本发明的鹰嘴豆提取物或含有它的药物组合物可以用于治疗或预防自由基过多引起的症状的药物、食品或保健品的用途;用于制备增强免疫力的药物、食品或保健品方面的用途;用于制备预防、治疗或者减轻PM 2.5颗粒物对机体造成伤害的药物、食品或保健品方面的用途。
附图说明
图1:鹰嘴豆提取物对斑马鱼巨噬细胞的抑制改善作用的表型图;
图2:鹰嘴豆提取物对斑马鱼巨噬细胞吞噬功能促进作用的表型图;
图3:鹰嘴豆提取物对斑马鱼体内吞噬纳米活性炭(PM 2.5)的巨噬细胞吞噬功能促进作用的表型图。
实施例
下面通过实施例对本发明作进一步说明。应该理解的是,本发明实施例所述方法仅仅是用于说明本发明,而不是对本发明的限制,在本发明的构思前提下对本发明制备方法的简单改进都属于本发明要求保护的范围。如无特别说明,实施例中用到的所有原料和溶剂均购为市售产品。活性实施例2所用本发明产品和阳性对照药品的量,均按照试验受体的最大耐受剂量加入。
制备实施例1:
称取100kg鹰嘴豆豆粉(专利CN 105949290 A实施例1蛋白质提取完成后的豆渣)与水按质量比为1∶10混合,加入100g中性蛋白酶(酶活力为30万u/g),调节pH至7~8,恒温45~50℃搅拌提取;5小时后,提取液煮沸5分钟,冷却至室温后,离心过滤;将滤液浓缩至30℃时的相对密度为1.05g/mL时,经喷雾干燥机进行干燥,进风温度为160~170℃,出风温度为70~80℃,干燥完成后,得到31kg乳白色鹰嘴豆提取物(批号为Y-1)。
制备实施例2:
称取100kg鹰嘴豆豆粉(专利CN 105949290 A实施例1蛋白质提取完成后的豆渣)与水按质量比为1∶20混合,加入200g碱性蛋白酶(酶活力为40万u/g),调节pH至8~9,恒温40~45℃搅拌提取;3小时后,提取液煮沸10分钟,冷却至室温后,离心过滤;将滤液浓缩至30℃时的相对密度为1.10g/mL时,经真空干燥箱进行干燥,温度为60~65℃,负压为0.08~0.1MPa,干燥12h后,得到28kg乳白色鹰嘴豆提取物(批号为Y-2)。
制备实施例3:
将新鲜的鹰嘴豆晾干、粉碎后,过1号筛网,称取100kg与水按质量比为1∶20混合,加入200g木瓜蛋白酶(酶活力为50万u/g),调节pH至7~8,恒温50~55℃搅拌提取;4小时后,提取液煮沸5分钟,冷却至室温后,离心过滤;将滤液浓缩至30℃时的相对密度为1.08g/mL时,经喷雾干燥机进行干燥,进风温度为160~170℃,出风温度为70~80℃,干燥完成后,得到26kg乳白色鹰嘴豆提取物(批号为Y-3)。
生物活性实施例1:
ABTS+自由基清除实验:
1 PBS缓冲液的配制:称取氯化钠8g,氯化钾0.2g,磷酸二氢钾0.24g,十二水合磷酸氢二钠3.62g,置于1000mL烧杯中,加入800mL蒸馏水,搅怑使其溶解,用盐酸或氢氧化钠调节pH至7.4,转移至1000mL容量瓶中,加蒸馏水稀释至刻度,摇匀,待用。
2 ABTS+贮存溶液的配制:精密称取ABTS+78mg左右,置于20mL棕色容量瓶中,加入15mL蒸馏水,超声5min,用蒸馏水定容至刻度,摇匀。精密称取过硫酸钾76mg左右,置于2mL棕色容量瓶中,加入1mL蒸馏水,超声使其溶解,用蒸馏水定容至刻度,摇匀。精确吸取352μL过硫酸钾溶液加入至ABTS溶液中,摇匀,静置过夜。
3 ABTS+工作溶液的配制:精确吸取贮存溶液1mL,加入65mL左右PBS缓冲液,摇匀。
4 供试品溶液的配制:精密称取鹰嘴豆提取物100mg,置于25mL棕色容量瓶中,加入15mL PBS缓冲液,超声5min,用PBS缓冲液定容至刻度,摇匀。再用PBS缓冲液稀释成不同浓度的供试品溶液,摇匀,即得。
4 阳性对照溶液的配制:精密称取维生素C 20mg,置于20mL棕色容量瓶中,加入15mL PBS缓冲液,超声5min,用PBS缓冲液定容至刻度,摇匀,即为对照品母液。移取5mL母液至50mL棕色容量瓶中,再用PBS缓冲液定容至刻度,摇匀,即得。
5 操作步骤:准确吸取0.5mL供试品溶液和5mL ABTS工作溶液混合均匀;准确吸取0.5mL供试品溶液和5mL PBS缓冲液混合均匀;准确吸取5mL ABTS工作溶液和0.5mL PBS缓冲液混合均匀,立即在734nm处测定吸光度,并根据以下公式计算自由基清除率:
IR%=[1-(Ai-Aj)/A0]*100%;
其中,Ai表示待测溶液和ABTS混合后溶液的吸光度;
Aj表示待测溶液和溶剂混合后溶液的吸光度;
A0表示ABTS和溶剂混合后溶液的吸光度。
实验结果如表1所示。
表1 鹰嘴豆提取物对ABTS+自由基的清除实验
如表1所示,鹰嘴豆提取物对ABTS+自由基的清除EC50为0.79mg/mL。随浓度的增加,清除活性也随之提高,呈现浓度依赖性,可见鹰嘴豆提取物对ABTS+自由基具有较强的清除活性。
生物活性实施例2(免疫调节活性):
1 鹰嘴豆提取物对斑马鱼巨噬细胞抑制的改善作用
对受精后2天(2dpf)斑马鱼静脉注射长春瑞滨建立斑马鱼巨噬细胞抑制模型。分别溶于鱼水给予鹰嘴豆提取物和阳性对照药小檗胺,提取物的浓度为500μg/mL,小檗胺的浓度为1.9μg/mL;同时设置模型对照组以及正常对照组(不做任何处理),每个实验组为30尾斑马鱼,置于28℃培养箱中培养。处理至3dpf时,对各个实验组斑马鱼进行中性红染色,染色4h后,每个实验组随机选择10尾斑马鱼在显微镜下进行观察、拍照并保存图片;利用图像处理软件进行图像分析,斑马鱼巨噬细胞数量(N),分别定量评价肉苁蓉提取物对斑马鱼巨噬细胞抑制的改善作用。供试品对斑马鱼巨噬细胞抑制的改善作用计算公式为:改善作用(%)=(N供试品组/N模型对照组-1)×100%。计学分析采用方差分析和Dunnett’s T-检验,p<0.05为显著性差异。实验结果如表2所示。
表2 鹰嘴豆提取物对斑马鱼巨噬细胞的改善作用
与模型对照组比较:**p<0.01,***p<0.001
由表2可知,正常对照组斑马鱼平均的巨噬细胞数量为26个,与模型对照组(15个)比较,说明斑马鱼巨噬细胞抑制模型建立成功。阳性药物小檗胺浓度为1.9μg/mL时,平均的巨噬细胞数量为20个,与模型对照组(15个)比较,对斑马鱼巨噬细胞抑制的改善作用为45.45%,说明小檗胺浓度为1.9μg/mL时,对斑马鱼巨噬细胞抑制有显著的改善作用。而鹰嘴豆提取物在浓度为500μg/mL时,平均的巨噬细胞数量为23个,与模型对照组(15个)比较,对斑马鱼巨噬细胞抑制的改善作用为72.73%,说明本发明制备的鹰嘴豆提取物对斑马鱼巨噬细胞抑制有显著的改善作用。
2 鹰嘴豆提取物对斑马鱼巨噬细胞吞噬功能的促进作用
对受精后2天(2dpf)斑马鱼静脉注射墨汁建立斑马鱼巨噬细胞促进模型。分别溶于鱼水给予鹰嘴豆提取物和阳性药匹多莫德,鹰嘴豆提取物的浓度为2000μg/mL,匹多莫德的浓度为100μg/mL;同时设置模型对照组,每个实验组为30尾斑马鱼,置于28℃培养箱中培养。处理至3dpf时,对各个实验组斑马鱼进行中性红染色,染色4h后,每个实验组随机选择10尾斑马鱼在显微镜下进行观察、拍照并保存图片;利用图像处理软件进行图像分析斑马鱼巨噬细胞中的墨汁信号(N),定量评价供试品对斑马鱼巨噬细胞吞噬功能的促进作用。供试品对斑马鱼巨噬细胞吞噬功能的促进作用计算公式为:促进作用(%)=(N供试品组/N模型对照组-1)×100%。计学分析采用方差分析和Dunnett’s T-检验,p<0.05为显著性差异。实验结果如表3所示。
表3 鹰嘴豆提取物对斑马鱼头部吞噬墨汁的巨噬细胞的促进作用
与模型对照组比较:**p<0.01,***p<0.001
由表3可知,阳性药物匹多莫德浓度为100μg/mL时,平均的已吞噬墨汁的巨噬细胞数量为3.4个,与模型对照组(1.5个)比较,对斑马鱼巨噬细胞吞噬的促进作用为2.3倍,说明匹多莫德浓度为100μg/mL时对斑马鱼巨噬细胞的吞噬功能有显著的促进作用。提取物浓度为2000μg/mL时,平均的已吞噬墨汁的巨噬细胞数量为5.0个,与模型对照组(1.5个)比较,对斑马鱼巨噬细胞吞噬的促进作用为3.3倍,说明鹰嘴豆提取物对斑马鱼巨噬细胞的吞噬功能有显著的促进作用。
生物活性实施例3(抗PM2.5功效):
1 评价鹰嘴豆提取物对PM 2.5引起心血管毒性的改善作用
实验动物:野生型AB品系斑马鱼,以自然成对交配繁殖方式进行。年龄为受精后2天,共120尾,每实验组为30尾。
实验模型的建立:用PM 2.5处理2dpf野生型AB品系斑马鱼24h,建立PM 2.5诱发的心血管毒性模型。
实验步骤:随机选取150尾受精后2天(2dpf)野生型AB品系斑马鱼于六孔板中,每孔(实验组)均处理30尾斑马鱼,水溶给予PM 2.5诱发斑马鱼心血管毒性评价模型。分别水溶给予鹰嘴豆提取物,浓度为500μg/mL,同时设置正常对照组(养鱼用水处理斑马鱼)和模型对照组,每孔(实验组)容量为3mL。分别与PM 2.5共同处理24h后,每个实验组随机选取10尾斑马鱼在显微镜下统计斑马鱼心率(N);另随机选取10尾斑马鱼置于心跳血流分析***下录制斑马鱼血流视频,分析统计斑马鱼血流速度(V),根据心率和血流速度的统计学意义评价供试品对PM 2.5引起心血管毒性的改善作用。统计学处理结果用mean±SE表示,供试品对PM 2.5引起心血管毒性的改善作用计算公式为:1)对心率的增加作用:心率增加作用(%)=(N模型对照组-N供试品组)/(N模型对照组-N正常对照组)×100%;2)对血流速度的影响:血流速度增加作用(%)=(V供试品组-V模型对照组)/(V正常对照组-V模型对照组)×100%。用方差分析和Dunnett’s T-检验进行统计学分析,p<0.05表明具有显著性差异,结果如表4所示。
表4 鹰嘴豆提取物对PM2.5引起心血管毒性的改善作用
与模型对照组比较,***p<0.001
由表4可知,模型对照组斑马鱼心率(132次/分钟)与正常对照组(167次/分钟)比较p<0.001,表明模型建立成功。鹰嘴豆提取物在浓度为500μg/mL时斑马鱼心率为154次/分钟,心率增加作用为63%,与模型对照组比较,p<0.001,表明鹰嘴豆提取物在本实验浓度条件下对PM 2.5引起的心率减慢有改善作用。模型对照组斑马鱼血流速度(534μm/s)与正常对照组(1047μm/s)比较p<0.001,表明模型建立成功。鹰嘴豆提取物在浓度为500μg/mL时斑马鱼血流速度为1189μm/s,血流速度增加作用为128%,与模型对照组比较,p<0.001,表明鹰嘴豆提取物在本实验浓度条件下对PM 2.5引起的血流速度减慢有改善作用。
2 评价鹰嘴豆提取物对吞噬纳米活性炭(PM 2.5)的巨噬细胞吞噬功能的促进作用
模型制作:将62.5mg/mL纳米活性炭(PM 2.5)作为纳米颗粒,注射到2dpf斑马鱼血液循环中(相当于人静脉注射),每尾斑马鱼注射10nL,即以625ng/尾剂量建立斑马鱼PM2.5吞噬模型。
实验方法:随机选取150尾受精后2天(2dpf)黑色素等位基因突变型半透明Albino品系斑马鱼于六孔板中,每孔(实验组)均处理30尾斑马鱼,静脉注射给予纳米活性炭建立斑马鱼纳米活性炭吞噬模型。分别水溶给予鹰嘴豆提取物500μg/mL浓度,同时设置正常对照组(养鱼用水处理斑马鱼)和模型对照组,每孔(实验组)容量为3mL。供试品每天换液,处理2d后,加入中性红溶液对斑马鱼进行活体染色16h,染色结束,在解剖显微镜下统计吞噬了纳米活性炭的巨噬细胞数量(S),根据吞噬纳米活性炭的巨噬细胞数量的统计学意义来评价供试品对巨噬细胞吞噬作用的影响。统计学处理结果用mean±SE表示,巨噬细胞吞噬促进作用计算公式为:巨噬细胞吞噬促进作用(%)=(S供试品组-S模型对照组)/S模型对照组×100%。用方差分析和Dunnett’s T-检验进行统计学分析,p<0.05表明具有显著性差异,实验结果如表5所示。
表5 鹰嘴豆提取物对斑马鱼巨噬细胞吞噬功能的促进作用
与模型对照组比较,***p<0.001
由表5可知,模型对照组吞噬纳米活性炭的巨噬细胞数量为12个,而鹰嘴豆提取物浓度为500μg/mL时吞噬纳米活性炭的巨噬细胞数量为19个,巨噬细胞吞噬促进作用为52%,与模型对照组比较,p<0.001,由此可知鹰嘴豆提取物在本实验浓度条件下对斑马鱼巨噬细胞吞噬有促进作用。
Claims (9)
1.一种鹰嘴豆提取物,其特征在于通过下述方法制备得到:将鹰嘴豆粉碎后,再与一定比例的水混合,加入生物酶进行提取,提取液浓缩至30℃时的相对密度1.05~1.10g/mL,经干燥得到提取物。
2.根据权利要求1所述的鹰嘴豆提取物,其特征在于提取原料可以为鹰嘴豆干燥的种子,或者其经过渣油后的豆饼,或者其经过有机溶剂或者水(不含生物酶)提取后的豆渣,或者豆饼或者豆渣经蛋白提取后的下脚料。
3.根据权利要求1所述的鹰嘴豆提取物,其特征在于通过下述方法制备得到:处理后的鹰嘴豆原料,加入生物蛋白酶进行酶解提取得到乳白色的鹰嘴豆提取物。
4.根据权利要求1所述的鹰嘴豆提取物,其特征在于通过下述方法制备得到:
(1)将一定量的鹰嘴豆粉与水按质量比为1∶10~1∶20混合,加入豆粉质量的0.1%~0.5%的生物蛋白酶,调节pH至5~9,恒温40~55℃搅拌3~6h;
(2)提取完成后,将步骤(1)中的药材提取液煮沸5~10min,待冷却至室温,离心过滤,滤液待用;
(3)将步骤(2)中的滤液浓缩至30℃时的相对密度1.05~1.10g/mL,经干燥得到乳白色鹰嘴豆提取物;所述鹰嘴豆提取物的收率不低于25wt%。
优选地,所述的生物蛋白酶选自食品级的中性蛋白酶(酶活力≥20万u/g)、木瓜蛋白酶(酶活力≥40万u/g)、菠萝蛋白酶(酶活力≥30万u/g)、碱性蛋白酶(酶活力≥20万u/g)、胰酶(酶活力≥3000u/g)中的一种或者它们的混合物,优选地使用中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶中的一种或者它们的混合物;
优选地,所述的浓缩方法可以为膜浓缩、减压浓缩、常压浓缩;
优选地,所述的干燥方法可以为喷雾干燥、真空干燥、加热干燥、冷冻干燥。
5.一种鹰嘴豆提取物的提取方法,其特征在于包括下述步骤:将鹰嘴豆原料与水混合,进行酶提取,提取液浓缩至30℃时的相对密度为1.05~1.10g/mL,干燥得到提取物。
6.根据权利要求4所述的提取方法,其特征在于包括下述步骤:
(1)将一定量的鹰嘴豆豆粉与水按质量比为1∶10~1∶20混合,加入豆粉质量的0.1%~0.5%的生物蛋白酶,调节pH至5~9,恒温40~55℃搅拌3~6h;
(2)提取完成后,将步骤(1)中的药材提取液煮沸5~10min,待冷却至室温,离心过滤,滤液待用;
(3)将步骤(2)中的滤液浓缩至30℃时的相对密度为1.05~1.10g/mL,经干燥得到乳白色鹰嘴豆提取物;所述鹰嘴豆提取物的收率不低于25wt%。
优选地,所述的生物蛋白酶选自食品级的中性蛋白酶(酶活力≥20万u/g)、木瓜蛋白酶(酶活力≥40万u/g)、菠萝蛋白酶(酶活力≥30万u/g)、碱性蛋白酶(酶活力≥20万u/g)、胰酶(酶活力≥3000u/g)中的一种或者它们的混合物,优选地使用中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶中的一种或者它们的混合物;
优选地,所述的浓缩方法可以为膜浓缩、减压浓缩、常压浓缩;
优选地,所述的干燥方法可以为喷雾干燥、真空干燥、加热干燥、冷冻干燥。
7.一种组合物,其含有权利要求1-3任一所述的提取物,和可药用或食用辅料;可为任意剂型,优选其是片剂、分散片、胶囊剂、软胶囊剂、微囊剂、颗粒剂、注射剂、粉针剂、冻干粉针剂、微丸剂、滴丸剂、糖浆剂、散剂、浸膏剂、煎膏剂、口服液体制剂及其他药学上可以接受的剂型。
8.根据权利要求1-4任一的提取物在清除自由基;对体内巨噬细胞抑制,促进巨噬细胞的吞噬功能;在改善PM 2.5引起的心血管毒性;增强吞噬纳米活性炭(PM 2.5)的巨噬细胞方面的用途。
9.权利要求1-4任一的提取物或权利要求7所述的组合物可用于制备治疗或预防自由基过多引起的症状的药物、食品或保健品的应用;用于制备增强免疫力的药物、食品或保健品方面的应用;用于制备预防、治疗或者减轻有害物质对体内巨噬细胞的抑制,促进巨噬细胞的吞噬功能;在改善PM 2.5引起的心血管毒性;增强吞噬纳米活性炭(PM 2.5)的巨噬细胞的药物、食品或保健品方面的应用。
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