CN106928352B - 一种抗psg3蛋白的单克隆抗体及其杂交瘤细胞株与应用 - Google Patents
一种抗psg3蛋白的单克隆抗体及其杂交瘤细胞株与应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN106928352B CN106928352B CN201511017748.3A CN201511017748A CN106928352B CN 106928352 B CN106928352 B CN 106928352B CN 201511017748 A CN201511017748 A CN 201511017748A CN 106928352 B CN106928352 B CN 106928352B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- protein
- kit
- psg3
- monoclonal antibody
- hybridoma cell
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 title claims abstract description 31
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 title claims abstract description 31
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 title claims abstract description 30
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 claims abstract description 36
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 35
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims abstract description 34
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 claims abstract description 24
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 claims abstract description 23
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 claims description 18
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 claims description 15
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 claims description 14
- 238000004321 preservation Methods 0.000 claims description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 4
- 230000028327 secretion Effects 0.000 claims description 4
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 102100022020 Pregnancy-specific beta-1-glycoprotein 3 Human genes 0.000 abstract description 67
- 101000617726 Homo sapiens Pregnancy-specific beta-1-glycoprotein 3 Proteins 0.000 abstract description 66
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 abstract description 33
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 abstract description 7
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 abstract description 2
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 15
- 102100023635 Alpha-fetoprotein Human genes 0.000 description 14
- 108010026331 alpha-Fetoproteins Proteins 0.000 description 14
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 14
- 238000000034 method Methods 0.000 description 14
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 13
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 13
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 11
- 206010073071 hepatocellular carcinoma Diseases 0.000 description 11
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 9
- 101000617720 Homo sapiens Pregnancy-specific beta-1-glycoprotein 5 Proteins 0.000 description 8
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 8
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 8
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 8
- 102100022025 Pregnancy-specific beta-1-glycoprotein 5 Human genes 0.000 description 7
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 7
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 7
- 231100000844 hepatocellular carcinoma Toxicity 0.000 description 7
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 7
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 description 6
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 6
- 238000011161 development Methods 0.000 description 5
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 5
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 5
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 description 4
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 4
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 4
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 4
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 4
- 230000034994 death Effects 0.000 description 4
- 231100000517 death Toxicity 0.000 description 4
- UQLDLKMNUJERMK-UHFFFAOYSA-L di(octadecanoyloxy)lead Chemical compound [Pb+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O UQLDLKMNUJERMK-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N hypoxanthine Chemical compound O=C1NC=NC2=C1NC=N2 FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 210000005229 liver cell Anatomy 0.000 description 4
- XOJVVFBFDXDTEG-UHFFFAOYSA-N pristane Chemical compound CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C XOJVVFBFDXDTEG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 4
- UZOVYGYOLBIAJR-UHFFFAOYSA-N 4-isocyanato-4'-methyldiphenylmethane Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1CC1=CC=C(N=C=O)C=C1 UZOVYGYOLBIAJR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010022366 Carcinoembryonic Antigen Proteins 0.000 description 3
- 102100025475 Carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 5 Human genes 0.000 description 3
- 238000008157 ELISA kit Methods 0.000 description 3
- 101000617725 Homo sapiens Pregnancy-specific beta-1-glycoprotein 2 Proteins 0.000 description 3
- 101000617728 Homo sapiens Pregnancy-specific beta-1-glycoprotein 9 Proteins 0.000 description 3
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 3
- 206010054107 Nodule Diseases 0.000 description 3
- 102100022019 Pregnancy-specific beta-1-glycoprotein 2 Human genes 0.000 description 3
- 102100021983 Pregnancy-specific beta-1-glycoprotein 9 Human genes 0.000 description 3
- 210000000683 abdominal cavity Anatomy 0.000 description 3
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 230000007910 cell fusion Effects 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 3
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 3
- 230000000984 immunochemical effect Effects 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 3
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 3
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 3
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 3
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 3
- 239000000439 tumor marker Substances 0.000 description 3
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 description 2
- DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N Beta-D-1-Arabinofuranosylthymine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 101000617708 Homo sapiens Pregnancy-specific beta-1-glycoprotein 1 Proteins 0.000 description 2
- UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N Hypoxanthine nucleoside Natural products OC1C(O)C(CO)OC1N1C(NC=NC2=O)=C2N=C1 UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 239000002033 PVDF binder Substances 0.000 description 2
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N beta-L-thymidine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1OC(CO)C(O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 2
- 239000012295 chemical reaction liquid Substances 0.000 description 2
- 208000019425 cirrhosis of liver Diseases 0.000 description 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 2
- 238000013399 early diagnosis Methods 0.000 description 2
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 2
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 2
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 2
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 2
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 2
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 210000002826 placenta Anatomy 0.000 description 2
- 229920002981 polyvinylidene fluoride Polymers 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- JQWHASGSAFIOCM-UHFFFAOYSA-M sodium periodate Chemical compound [Na+].[O-]I(=O)(=O)=O JQWHASGSAFIOCM-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 210000004988 splenocyte Anatomy 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 2
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000003200 Adenoma Diseases 0.000 description 1
- 238000011725 BALB/c mouse Methods 0.000 description 1
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 1
- 206010008909 Chronic Hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 208000035984 Colonic Polyps Diseases 0.000 description 1
- 238000009007 Diagnostic Kit Methods 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 108020004206 Gamma-glutamyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 1
- 102000009786 Immunoglobulin Constant Regions Human genes 0.000 description 1
- 108010009817 Immunoglobulin Constant Regions Proteins 0.000 description 1
- 102000017727 Immunoglobulin Variable Region Human genes 0.000 description 1
- 108010067060 Immunoglobulin Variable Region Proteins 0.000 description 1
- 108010044467 Isoenzymes Proteins 0.000 description 1
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 1
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 108010094028 Prothrombin Proteins 0.000 description 1
- 102100027378 Prothrombin Human genes 0.000 description 1
- MUUGCDGGIVCSDT-UHFFFAOYSA-N [NH4+].[NH4+].[O-]S([O-])(=O)=O.CCCCCCCC(O)=O Chemical compound [NH4+].[NH4+].[O-]S([O-])(=O)=O.CCCCCCCC(O)=O MUUGCDGGIVCSDT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000003453 ammonium sulfate precipitation method Methods 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 210000003850 cellular structure Anatomy 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 238000003759 clinical diagnosis Methods 0.000 description 1
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 1
- 201000010989 colorectal carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000002591 computed tomography Methods 0.000 description 1
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 230000009274 differential gene expression Effects 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 230000005611 electricity Effects 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 1
- GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N fluorescein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000799 fusogenic effect Effects 0.000 description 1
- 102000006640 gamma-Glutamyltransferase Human genes 0.000 description 1
- 238000011223 gene expression profiling Methods 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 208000019423 liver disease Diseases 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 238000002796 luminescence method Methods 0.000 description 1
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000001394 metastastic effect Effects 0.000 description 1
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 description 1
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 1
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 1
- 238000002264 polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 1
- 239000012474 protein marker Substances 0.000 description 1
- 229940039716 prothrombin Drugs 0.000 description 1
- 238000002271 resection Methods 0.000 description 1
- 238000009666 routine test Methods 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 210000002993 trophoblast Anatomy 0.000 description 1
- 208000025421 tumor of uterus Diseases 0.000 description 1
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 1
- 206010046766 uterine cancer Diseases 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
- G01N33/57407—Specifically defined cancers
- G01N33/57419—Specifically defined cancers of colon
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
- G01N33/57407—Specifically defined cancers
- G01N33/57438—Specifically defined cancers of liver, pancreas or kidney
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/577—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor involving monoclonal antibodies binding reaction mechanisms characterised by the use of monoclonal antibodies; monoclonal antibodies per se are classified with their corresponding antigens
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Hematology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
一种抗PSG3蛋白的单克隆抗体，由杂交瘤细胞株CGMCC NO.11597或CGMCC NO.11598制得，能与PSG3蛋白特异结合。上述两种抗PSG3蛋白单克隆抗体可用于PSG3蛋白的体外检测，并进一步实现癌症，尤其是肝癌和结肠癌的辅助诊断。
Description
技术领域
一种抗PSG3蛋白的单克隆抗体，由杂交瘤细胞株P201或P209分泌制备，其能与PSG3蛋白特异结合，其中所述的杂交瘤细胞株所对应的保藏编号分别为CGMCC NO.11597或CGMCC NO.11598。所述的抗PSG3蛋白单克隆抗体或对应的杂交瘤细胞株可用于制备免疫检测试剂盒，可用于PSG3蛋白的体外检测，并用于癌症，尤其是肝癌和消化道癌的辅助诊断，具有重要的商业价值。
背景技术
原发性肝癌是全球第6位、中国第3位最常见的癌症。据国际癌症研究中心(IARC)估计，2000年全球肝癌发病数为56.4万人，其中约55％发生在中国，即中国肝癌发病30.6万人，肝癌死亡30.0万，占我国居民肿瘤死亡的第二位。肝癌出现症状时多属中晚期，切除后复发、转移率高。因此，肝癌的早期诊断对延长患者的生存时间和降低肝癌死亡率具有重要意义。
目前，影像学诊断、细胞与组织学诊断及化学诊断是肿瘤诊断的三大主要方法。影像学诊断在肝癌诊断中起重要的作用，但是在诊断小肝癌及区分良恶性结节中均具有一定的局限。超声检查或CT阳性结果，结合血清甲胎蛋白(α-fetoprotein，AFP)水平高于400ng/ml的检测结果，可对肝癌做出确诊。但是，通常当这些条件都符合时，已经错过了治疗的最佳时机。无论是超声波检查、CT扫描还是核磁共振，对小病灶的鉴定都有一定的局限性，尤其是肝硬化结节在影象学上与小肝癌结节有许多的相似之处。因此，虽然影像学技术取得了巨大的进步，但临床上仍需结合肝癌的分子标志物，在较为复杂的病例中将良恶性肝病进行区分。此外，肿瘤的临床分期及肿瘤大小是肝癌治疗效果的决定因素，因此，肿瘤标志物还可用于肝癌危险人群(如HBV慢性携带者和肝硬化患者)的普查。
目前肝癌诊断最常用的标志物是甲胎蛋白(AFP)，在症状和影像学改变发生前数月即可出现异常。正常人血清中AFP含量一般小于10ng/ml。当AFP的诊断值定为20ng/ml时，其敏感性为50～60％，但在肿瘤较小的病例中， 敏感性显著降低，有报道仅为40％。单独使用AFP作为肝癌诊断标志物的另一个问题是缺乏特异性，在相当多的慢性肝炎患者尤其是肝硬化患者中，AFP含量也达20-200ng/ml。目前认为可与AFP互补诊断的标志物有AFP异质体、γ-谷氨酰转移酶同工酶II和异常凝血酶原等，但由于它们在敏感性和特异性上的不足，以及检测方法的繁琐复杂，使其始终停留在实验室研究水平，未能转化成临床常规检查项目。因此，探索新的肿瘤分子标志物，以及建立相应的易于推广的检测方法，仍是当今肝癌研究领域的重要课题之一。
同样，消化道肿瘤在我国也是导致死亡的主要病因之一。其中的结直肠癌起病隐匿，早期常无明显的临床症状，而且病情发展较慢，病人出现明显症状时大多已经到了中晚期。目前，结肠的治疗主要是以手术为主，但结肠癌转移后的化疗效果差，术后约有40％的患者出现复发，且晚期患者术后生存率较低。尽管有许多学者已经做了大量的关于结肠癌分子水平的研究，但是目前仍然缺乏有效地早期诊断结肠癌的分子标志物。肿瘤标志物可以有效地作为临床诊断依据，可以监测高危人群、早期诊断、指导治疗、判断治疗疗效、检测复发及转移，是肿瘤患者的重要检查指标、具有重要的临床意义。结肠癌的发生前期会有一段时间的癌前病变，如结肠息肉，因此在早期发现并阻断或延迟癌症的发展，有极其重要的意义。因此，寻找发现有价值的肿瘤标志物对于提高消化道肿瘤、尤其是结直肠癌的诊断和预测发生、发展及改善预后具有重要的临床指导意义。
人类血液中包含丰富的各种细胞成分和分子物质，能很好地反映机体不同组织和器官的生理、病理状态，且其标本容易获得，因此，是一种理想的肿瘤无创诊断手段。因此，仍有待开发敏感性和特异性良好的标志物。
妊娠特异蛋白3(Human pregnancy specific beta-1-glycoprotein 3，PSG3)，是一种分泌到细胞外的糖蛋白。PSG家族中共包含11个蛋白，包括PSG1、PSG2、PSG3等。PSG蛋白一般都包括N端同免疫球蛋白可变区类似的结构，随后是2-3个免疫球蛋白恒定区C2样结构域，以及一个短的疏水尾，位于C端。PSG根据其结构组成可分为4类，I型(N-A1-A2-B2-C)、IIa型(N-A1-B2-C)和IIb型(N-A2-B2-C)、III型(N-B2-C)、IV型(A1-B2-C)。目前PSG家族的作用机制尚不清楚，在正常情况下，胎盘的合胞体滋养层细胞中大量表达，在妊娠期女性外周血中PSG蛋白含量升高，可达200-400μg/ml。到目前为止，世界上仍没有抗PSG3的单克隆抗体出现。
PSG3蛋白长度428个氨基酸，分子量47,945Da，蛋白的氨基酸序列如下(SEQ IDNO：1)：
MGPLSAPPCT QRITWKGLLL TALLLNFWNL PTTAQVTIEA
EPTKVSKGKD VLLLVHNLPQ NLAGYIWYKG QMKDLYHYIT
SYVVDGQIII YGPAYSGRET VYSNASLLIQ NVTREDAGSY
TLHIVKRGDG TRGETGHFTF TLYLETPKPS ISSSNLYPRE
DMEAVSLTCD PETPDASYLW WMNGQSLPMT HSLQLSKNKR
TLFLFGVTKY TAGPYECEIR NPVSASRSDP VTLNLLPKLP
KPYITINNLN PRENKDVLAF TCEPKSENYT YIWWLNGQSL
PVSPRVKRPI ENRILILPSV TRNETGPYQC EIQDRYGGIR
SYPVTLNVLY GPDLPRIYPS FTYYHSGENL YLSCFADSNP
PAEYSWTING KFQLSGQKLF IPQITTKHSG LYACSVRNSA
TGMESSKSMT VKVSAPSGTG HLPGLNPL
Salahshor等应用差异基因表达谱分析发现结直肠癌、肝转移癌、子宫肿瘤组织中可检测到异常升高的PSG9转录本，与正常结直肠粘膜相比，PSG9在腺瘤中上调2倍，且结直肠癌PSG9表达异常上调呈APC突变依赖性(Salahshor et al,2005)。Kamarli ZP等的研究表明，PSG1在骨恶性肿瘤患者血清中蛋白浓度升高(Kamarli et al,2004)。而关于PSG3在肿瘤中的研究还未见报道，也未涉及抗PSG3单克隆抗体在肿瘤检测中的应用。
发明内容
本实验室制备了2株抗PSG3的单克隆抗体，分别由杂交瘤细胞株P201或P209分泌制备，其能与PSG3蛋白特异结合，其中所述的杂交瘤细胞株所对应的保藏编号分别为CGMCCNO.11597或CGMCC NO.11598。利用这两株单抗构建用于检测样本中PSG3表达量的试剂盒，为肝癌和结肠癌提供辅助诊断，具有重要的商业价值。
本发明第一方面涉及一种抗PSG3蛋白的单克隆抗体，其特征在于所述单克隆抗体与PSG3蛋白特异性结合。
本发明第一方面所涉及的单克隆抗体，其特征在于所述的单克隆抗体由杂交瘤细胞株P201或P209分泌制备，其中所述杂交瘤细胞株对应的保藏编 号分别为CGMCCNO.11597和CGMCC NO.11598。
本发明第二方面涉及一种命名为P201或P209的杂交瘤细胞，其各自对应的保藏编号为CGMCC NO.11597或CGMCC NO.11598。
本发明还涉及上述任一项所述的单克隆抗体或杂交瘤细胞在制备免疫诊断检测试剂盒中的应用。
本发明还涉及一种免疫检测诊断试剂盒，其中含有上述任一项所述的单克隆抗体或由杂交瘤细胞。
前面任一项所述的单克隆抗体或杂交瘤细胞在制备用于辅助诊断癌症，尤其是肝癌或消化道癌症患者的试剂盒中的应用。
本发明还涉及一种用于辅助诊断癌症，尤其是肝癌或消化道癌症患者的试剂盒，其中含有前面任一项所述的单克隆抗体或杂交瘤细胞。
前面任一项所述的应用或试剂盒，其中所述肝癌为肝细胞癌，所述的消化道癌症为结直肠癌。
前面所述的应用或试剂盒，其中所述试剂盒用于血浆样品的检测。
进一步而言地，前面所述的试剂盒为化学发光免疫试剂盒、酶联免疫检测试剂盒、胶体金免疫试剂盒、荧光免疫试剂盒。
本发明第三方面涉及检测PSG3蛋白的分子在制备用于辅助诊断肝癌或消化道癌症患者的试剂盒或检测试剂中的用途。
根据本发明第三方面的用途，其中所述检测PSG3蛋白的分子是指能够特异性检测PSG3蛋白表达的分子，例如可以为核酸、蛋白质或化合物。
根据本发明第三方面任一项的用途，其中所述蛋白质为抗体，其能够与PSG3蛋白特异性结合，优选为单克隆抗体，更优选分别由杂交瘤细胞株P201或P209分泌制备。
在本发明的具体实施方案中，采用免疫化学的分析方法检测PSG3蛋白。
根据本发明第三方面任一项的用途，其中所述的肝癌为肝细胞肝癌。
根据本发明第三方面任一项的用途，其中所述的消化道癌症为结直肠癌。
根据本发明第三方面任一项的用途，所述试剂盒或检测试剂用于血浆样品的检测。
根据本发明第三方面任一项的用途，其中所述辅助诊断的判断方法为，血浆中PSG3的含量高于551.65μg/ml，则待检者为候选的肝细胞肝癌或结直 肠癌患者。
根据本发明第三方面任一项的用途，其中所述检测PSG3蛋白的分子还带有可检测的标记。
根据本发明第三方面任一项的用途，其中所述试剂盒或检测试剂中还含有缓冲液及显色剂。
根据本发明第四方面涉及一种用于辅助诊断肝癌或消化道癌症的试剂盒或检测试剂，其含有检测标记物PSG3蛋白的产品。
根据本发明第四方面涉及一种用于辅助诊断肝癌或消化道癌症的试剂盒或检测试剂，所述检测标记物PSG3蛋白的产品是指能够特异性检测PSG3蛋白表达的分子，例如可以为核酸、蛋白质或化合物。
根据本发明第四方面的试剂盒或检测试剂，其中所述蛋白质为抗体，其能够与PSG3蛋白特异性结合，优选为单克隆抗体，更优选分别由杂交瘤细胞株P201或P209分泌制备。
在本发明的具体实施方案中，采用免疫化学的方法检测PSG3蛋白。
根据本发明第四方面任一项的试剂盒或检测试剂，其中所述的肝癌为肝细胞癌，所述的消化道癌症为结直肠癌。
根据本发明第四方面任一项的试剂盒或检测试剂，所述试剂盒或检测试剂用于血浆样品的检测，优选地，所述检测方法为免疫化学方法。
根据本发明第四方面任一项的试剂盒或检测试剂，其中所述辅助诊断的判断方法为，血浆PSG3蛋白表达高于551.65μg/ml，则待检者为候选的肝细胞肝癌或结直肠癌患者。
根据本发明第四方面任一项的试剂盒或检测试剂，其中所述检测PSG3蛋白的分子还带有可检测的标记。
根据本发明第四方面任一项的试剂盒或检测试剂，其中所述试剂盒或检测试剂中还含有缓冲液及显色剂。
在本发明中，其中所述检测PSG3蛋白的分子是指能够检测PSG3蛋白是否过表达的分子，例如可以为核酸、蛋白质或化合物。
可以使用免疫测定的方法定量或定性检测蛋白标志物的存在。所述免疫测定通常包括将生物样品与抗体一起孵育，并通过多种熟知技术检测结合抗体。
在本发明中，所述化合物具有本领域公知的含义，其可以和PSG3蛋白特 异性结合，进而用于检测PSG3蛋白的表达。
在本发明中，所述检测PSG3蛋白的分子上可以连接有可检测的标记分子。
在本发明中，所述试剂盒或检测试剂中还可以包含能够与检测PSG3蛋白的分子结合的分子，例如抗体，例如第二抗体，该分子也可以连接有可检测的标记分子。
在本发明中，所述可检测的标记分子例如可以为酶、荧光素、金属离子或同位素等。
附图说明
图1包被抗体201与酶标的捕获抗体209的标准蛋白线性关系。
图2为PSG3区分正常人和肝细胞肝癌患者(HCC)的ROC曲线。
图3为PSG3区分正常人和结肠癌患者(CC)的ROC曲线。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。
实施例1制备PSG3检测的ELISA试剂盒
采用大肠杆菌原核表达PSG3蛋白，表达载体为pET30a。取5-6周龄BALB/c小鼠，利用PSG3全长蛋白作为抗原添加弗氏佐剂免疫制备PSG3抗体。每只小鼠免疫4次，每次间隔2周，每次利用15-30μg抗原蛋白，第一次免疫注射时利用完全佐剂，后三次利用不完全佐剂。细胞融合前三天，从三只脾细胞供体小鼠挑选一只进行静脉注射PSG3抗原做进一步免疫。细胞融合、杂交瘤筛选均依据J.M.Davis的方法(Davis et al 1982)。简略过程如下：加强免疫后的小鼠脾细胞和SP2/0骨髓瘤细胞混合，慢慢加入促融合剂50％聚乙二醇0.7ml。37℃培养1min，10ml IMDM培养基稀释，低速离心。然后用40ml含1.25％甲基纤维素、25％胎牛血清、2％HAT(含次黄嘌呤、甲氨蝶呤和胸腺嘧啶核苷)的IMDM培养基重悬。上下颠倒混合，转移到35mm平 板中，每板约2ml，于37℃、5％CO2环境中培养。7天后克隆转移入96孔板，加入含15％胎牛血清和2％HT(含次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷)的IMDM培养基再次培养。当细胞融合度达到50％～70％，收集培养基上清，利用ELISA和Western blot检测是否存在抗体。具体步骤如下：将PSG3标准蛋白冷冻干燥为干粉4℃保存，临用时用50mM Tris-Hcl PH8.5-9.0的缓冲液稀释。PSG3标准蛋白包被ELISA板，加入100l培养基上清反应1小时；甩去反应液体，0.5％PBST洗板5次，300μl/孔；加入TMB显色液，200μl/孔，避光反应15分钟；加入2M硫酸终止反应，100μl/孔，用酶标仪OD450nm处检测吸光度，OD值大于0.5的孔为阳性反应抗体。ELISA检测为阳性的抗体再进一步用western blot方法确定，具体步骤如下：胎盘总蛋白40μg，用10％SDS的聚丙烯酰胺凝胶电泳分离，电转至PVDF膜上，5％牛奶封闭，PSG3单克隆细胞株培养上清1:5稀释后与PVDF膜4℃反应过夜，加鼠二抗反应1小时，ELC发光法检测发光信号，识别48KDa分子量的信号为阳性抗体。将表达阳性抗体的单克隆细胞株进行下一步的抗体制备。
检测PSG3抗原的酶标双抗体夹心法的建立：首先利用小鼠腹腔生产单克隆抗体，将得到的阳性杂交瘤细胞分别注入小鼠腹腔，使其产生腹水，注射降植烷，每只小鼠0.5ml；注射降植烷1周后，注射杂交瘤细胞，每只小鼠注射106个细胞。7-10天后分别收集腹水，用正辛酸-硫酸铵沉淀法分别提纯抗体，再用过碘酸钠法将抗体分别进行辣根过氧化物酶标记(酶标抗体)。用纯化的单克隆抗体分别包被酶标板，并分别与酶标抗体配对检测PSG3标准蛋白和血浆(200倍稀释)。具体加样顺序和ELISA反应结果(OD450nm吸光度)请见表1。
表1.筛选配对抗体ELISA分布表及ELISA反应结果(OD450nm吸光度)
***为跳出酶标仪检测限，OD值大于3.500。
进一步优化ELISA反应，包被抗体201包被ELISA板，酶标的捕获抗体209(1:1000)，由此获得的标准蛋白线性关系很好，R2＝0.9976，具体参见表2，图1。
表2.包被抗体201与酶标的捕获抗体209的标准蛋白线性关系
由此我们获得最佳配对的包被抗体P201以及酶标的捕获抗体P209。其中包被抗体P201和酶标的捕获抗体P209分别由杂交瘤细胞株P201和P209制备产生。杂交瘤细胞系P201和P209(分类命名为：单克隆细胞株)已于2015年11月27日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏号分别为CGMCC NO.11597和CGMCCNO.11598，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路一号院3号。
进一步地，利用获得的最佳配对抗体建立检测PSG3抗原的酶标双抗体夹心法试剂盒，具体步骤如下：将PSG3包被抗体P201包被96孔酶标板，100μl/ 孔，4℃过夜；甩去包被抗体P201，0.5％PBST洗板3次，300μl/孔；加入2％BSA封闭液，300μl/孔，室温4小时；甩去封闭液，0.5％PBST洗板3次，300μl/孔；酶标板中每孔分别加入PSG3标准蛋白和待测样本，100μl/孔；再加入PSG3酶标检测抗体P209，100μl/孔，混匀后4℃过夜；甩去反应液体，0.5％PBST洗板5次，300μl/孔；加入TMB显色液，200μl/孔，避光反应15分钟；加入2M硫酸终止反应，100μl/孔，用酶标仪OD450nm处检测吸光度；利用标准蛋白吸光度的值绘制标准曲线，并计算待测样本中PSG3的蛋白浓度。
实施例2在大规模的肿瘤患者和正常人群血浆样本中检测PSG3的蛋白浓度
利用制备的ELISA试剂盒在怀孕妇女血浆中检测PSG3蛋白的浓度。检测的样本包括：11例怀孕早期妇女(11-12周)，17例怀孕晚期妇女(28-38周)。ELISA的结果如表3显示，PSG3在怀孕早期妇女血浆中的蛋白浓度显著高于怀孕晚期(P<0.001)。
表3.PSG3在怀孕妇女血浆中的蛋白浓度(μg/ml)
利用制备的ELISA试剂盒在大规模的肿瘤患者和正常人群血浆样本中检测PSG3的蛋白浓度。检测的样本包括：178例肝细胞肝癌(Hepatocarcinoma,HCC)，121例肺癌(Lungcancer,LC)，159例卵巢癌(Ovarian Cancer，OC)，88例结直肠癌(Colorectal Cancer，CC)，以及115例年龄与性别比例匹配的健康正常人(Health Control)。ELISA的结果显示，PSG3在肝细胞肝癌、结直肠癌患者和肺癌患者的血浆蛋白水平显著高于正常对照组(P<0.001，表4)。
表4.PSG3在各组肿瘤患者和正常人群血浆中的蛋白浓度(μg/ml)
实施例3PSG3血浆蛋白浓度在辅助诊断肝细胞癌或结直肠癌症中的作用
当PSG3血浆蛋白浓度值为551.65μg/ml时，检测肝细胞肝癌的敏感性为64.2％，特异性为74.8％，ROC曲线下面积为0.774，95％CI＝0.719-0.828，P<0.001(图2)。同一组肝癌病人血浆中也检测了肝细胞肝癌标志物甲胎蛋白(alpha-fetal protein，AFP)的水平。当使用临床常规检测限值为25ng/ml时，肝细胞肝癌AFP阴性的病人为107例，占标本总数的60.1％(107/178)。而在此107例AFP阴性的肝癌病人中，PSG3阳性(血浆中PSG3蛋白浓度>551.65μg/ml)的病例数为66例，提高了肝癌病人的检出率，临床上可以提高肝细胞肝癌病人的诊断率。
当PSG3血浆蛋白浓度值为551.65μg/ml时，检测结直肠癌(n＝88)的敏感性为92.0％，特异性为74.8％，ROC曲线下面积为0.873，95％CI＝0.819-0.828，P<0.001(图3)。这88例病人血浆也检测了结直肠癌标志物癌胚抗原(carcinoembryonic antigen，CEA)的蛋白水平。当使用临床常规检测限值为5ng/ml时，结直肠癌患者中CEA阴性的病人为67例，占标本总数的76.1％(67/88)。而在此67例CEA阴性的结直肠癌病人中，PSG3阳性(血浆中PSG3蛋白浓度>551.65μg/ml)的病例数为60例，显著的提高了结直肠癌患者的检出率，临床上有较好的应用前景。
参考文献
1.Bebo,B.F.,Jr.and G.S.Dveksler(2005)."Evidence that pregnancyspecific glycoproteins regulate T-Cell function and inflammatory autoimmunedisease during pregnancy."Curr Drug Targets Inflamm Allergy 4(2):231-237.
2.Blois,S.M.,et al.(2013)."Pregnancy-specific glycoprotein 1(PSG1)activates TGF-[beta]and prevents dextran sodium sulfate(DSS)-induced colitisin mice."Mucosal Immunol.
3.Camolotto,S.,et al.(2010)."Expression and transcriptionalregulation of individual pregnancy-specific glycoprotein genes indifferentiating trophoblast cells."Placenta 31(4):312-319.
4.Fialova,L.,et al.(1991)."[Serum levels of trophoblast-specificbeta-1-globulin(SP1)and alpha-1-fetoprotein(AFP)in pregnant women withrheumatoid arthritis]."Cesk Gynekol 56(3):166-170.
5.Ha,C.T.,et al.(2005)."Binding of pregnancy-specific glycoprotein 17to CD9 on macrophages induces secretion of IL-10,IL-6,PGE2,and TGF-β1."Journal of Leukocyte Biology 77(6):948-957.
6.Ha,C.T.,et al.(2008)."N-glycosylation is required for binding ofmurine pregnancy-specific glycoproteins 17 and 19 to the receptor CD9."Am JReprod Immunol 59(3):251-258.
7.Kamarli Z.P.,et al.(2004)."Use of immunoglobulin E and pregnancy-specific beta-1-glycoprotein in differential diagnosis of bone malignancies".Vopr Onkol.50(3):316-319.
8.Lisboa,F.A.,et al.(2011)."Pregnancy-specific Glycoprotein 1 InducesEndothelial Tubulogenesis through Interaction with Cell SurfaceProteoglycans."Journal of Biological Chemistry 286(9):7577-7586.
9.Martinez,F.F.,et al.(2012)."Pregnancy-specific glycoprotein 1aactivates dendritic cells to provide signals for Th17-,Th2-,and Treg-cellpolarization."Eur J Immunol 42(6):1573-1584.
10.McLellan,A.S.,et al.(2005)."Structure and evolution of the mousepregnancy-specific glycoprotein(Psg)gene locus."Bmc Genomics 6:4.
11.Motrán,C.C.,et al.(2003)."In vivo expression of recombinantpregnancy-specific glycoprotein induces alternative activation of monocytesand enhances Th2-type immune response."Eur J Immunol 33(11):3007-3016.
12.Pihl,K.,et al.(2009)."First trimester maternal serum pregnancy-specific beta-1-glycoprotein(SP1)as a marker of adverse pregnancy outcome."Prenat Diagn 29(13):1256-1261.
13.Rutherfurd,K.J.,et al.(1995)."A motif in PSG11s mediates bindingto a receptor on the surface of the promonocyte cell line THP-1."MolEndocrinol 9(10):1297-1305.
14.Snyder,S.K.,et al.(2001)."Pregnancy-specific glycoproteinsfunction as immunomodulators by inducing secretion of IL-10,IL-6 and TGF-beta1 by human monocytes."Am J Reprod Immunol 45(4):205-216.
15.Salahshor,S.,et al.(2005)."Differential gene expression profilereveals deregulation of pregnancy specific beta1 glycoprotein 9 early duringcolorectal carcinogenesis."Bmc Cancer 5:66.
16.Thompson,J.A.,et al.(1991)."Carcinoembryonic antigen gene family:molecular biology and clinical perspectives."J Clin Lab Anal 5(5):344-366.
Claims (10)
1.一种抗PSG3蛋白的单克隆抗体，其特征在于所述的单克隆抗体由杂交瘤细胞株P201或P209分泌制备，其中所述杂交瘤细胞株对应的保藏编号分别为CGMCC NO.11597和CGMCCNO.11598。
2.一种命名为P201或P209的杂交瘤细胞，其各自对应的保藏编号为CGMCC NO.11597或CGMCC NO.11598。
3.权利要求1所述的单克隆抗体或权利要求2所述的杂交瘤细胞在制备免疫检测试剂盒中的应用。
4.一种免疫检测试剂盒，其含有权利要求1所述的单克隆抗体或由权利要求2所述杂交瘤细胞所分泌制备的单克隆抗体。
5.权利要求1所述的单克隆抗体或权利要求2所述的杂交瘤细胞在制备用于辅助诊断肝癌或结直肠癌症的试剂盒中的应用。
6.一种用于辅助诊断肝癌或结直肠癌症的试剂盒，其中含有权利要求1所述的单克隆抗体或由权利要求2所述杂交瘤细胞分泌制备的单克隆抗体。
7.权利要求3或5所述的应用，其中所述试剂盒用于血浆样品的检测。
8.权利要求4或6所述的试剂盒，其中所述试剂盒用于血浆样品的检测。
9.权利要求3或5所述的应用，其中所述试剂盒为化学发光免疫试剂盒、酶联免疫检测试剂盒、胶体金免疫试剂盒、或荧光免疫试剂盒。
10.权利要求4或6所述的试剂盒，其中所述试剂盒为化学发光免疫试剂盒、酶联免疫检测试剂盒、胶体金免疫试剂盒、或荧光免疫试剂盒。
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201511017748.3A CN106928352B (zh) | 2015-12-29 | 2015-12-29 | 一种抗psg3蛋白的单克隆抗体及其杂交瘤细胞株与应用 |
| PCT/CN2016/081858 WO2017113565A1 (zh) | 2015-12-29 | 2016-05-12 | 基于蛋白标志物psg3辅助诊断肝癌或消化道癌症患者的试剂盒 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201511017748.3A CN106928352B (zh) | 2015-12-29 | 2015-12-29 | 一种抗psg3蛋白的单克隆抗体及其杂交瘤细胞株与应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN106928352A CN106928352A (zh) | 2017-07-07 |
| CN106928352B true CN106928352B (zh) | 2020-01-14 |
Family
ID=59442386
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201511017748.3A Active CN106928352B (zh) | 2015-12-29 | 2015-12-29 | 一种抗psg3蛋白的单克隆抗体及其杂交瘤细胞株与应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN106928352B (zh) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110763845B (zh) * | 2018-07-27 | 2022-10-28 | 成都市第三人民医院 | 一种检测蛋白标志物的配体在制备用于诊断结肠癌的产品中的用途和试剂盒 |
| CN116535512B (zh) * | 2022-12-09 | 2024-03-15 | 中国医学科学院肿瘤医院 | 针对肝细胞癌患者的异常凝血酶原单克隆抗体的制备及应用 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103907022A (zh) * | 2011-08-31 | 2014-07-02 | 昂科赛特公司 | 用于治疗和诊断结直肠癌的方法和组合物 |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20070160601A1 (en) * | 2005-12-09 | 2007-07-12 | Angela Widom | Neutralizing antibodies against primate psgl-1 and uses therefor |
| US20090275633A1 (en) * | 2006-04-13 | 2009-11-05 | Oncomethylome Sciences Sa | Novel Tumour Suppressor |
-
2015
- 2015-12-29 CN CN201511017748.3A patent/CN106928352B/zh active Active
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103907022A (zh) * | 2011-08-31 | 2014-07-02 | 昂科赛特公司 | 用于治疗和诊断结直肠癌的方法和组合物 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN106928352A (zh) | 2017-07-07 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP5711196B2 (ja) | 卵巣癌を判定するためのｈｅ４及び他の生化学マーカーの使用 | |
| KR101051435B1 (ko) | 대장암 관련 마커를 이용한 대장암 진단 키트 및 이를 이용한 대장암 진단 방법 | |
| CN109765378B (zh) | 一种新的肝硬化或肝纤维化标志物 | |
| CN104136630A (zh) | 诊断和预示乳腺癌的标志物 | |
| WO2016037460A1 (zh) | N-乙酰氨基葡萄糖在制备检测肿瘤的试剂盒中的应用 | |
| JP5670422B2 (ja) | 胃癌検出用マーカー及び胃癌検出方法 | |
| CN110187111B (zh) | 一种用于早期贲门癌筛查elisa试剂盒 | |
| JP2008502891A (ja) | 乳癌のマーカーとしてのタンパク質ｐｄｘ１の使用 | |
| CN106928352B (zh) | 一种抗psg3蛋白的单克隆抗体及其杂交瘤细胞株与应用 | |
| KR20140067047A (ko) | 대장암 또는 식도암의 검출용 마커 및 검사 방법 | |
| KR102441107B1 (ko) | 데옥시하이푸신·신타제 유전자를 지표로서 사용하는 동맥 경화 및 암의 검출 방법 | |
| JP5773979B2 (ja) | 胃癌検出用マーカー及び胃癌検出方法 | |
| KR101058753B1 (ko) | 대장암 마커로서의 ｅｓｍ－１ 유전자 및 이를 이용한대장암의 진단 및 치료에의 용도 | |
| AU2005290997B2 (en) | Novel cancer associated antibodies and antigens and their use in cancer diagnosis | |
| CN106932587B (zh) | 基于蛋白标志物psg3辅助诊断肝癌或消化道癌症患者的试剂盒 | |
| KR20110076830A (ko) | 소세포폐암 및 비소세포폐암 진단 마커로서의 보체 ｃ９ | |
| WO2017113565A1 (zh) | 基于蛋白标志物psg3辅助诊断肝癌或消化道癌症患者的试剂盒 | |
| JP2021117117A (ja) | 前立腺癌のバイオマーカー及び該バイオマーカーを用いた前立腺癌を検出するための方法並びに診断キット | |
| CN111303289A (zh) | 抗人Tn型糖基化MUC1抗体及其用途 | |
| WO2020077532A1 (zh) | 一种基于胎盘样硫酸软骨素a的癌症筛查和早期诊断的试剂方法 | |
| KR101582416B1 (ko) | 프로합토글로빈을 이용한 간암 진단방법 | |
| CN110865184B (zh) | Srsp蛋白和srsp抗原表位肽的应用及诊断和***的产品 | |
| JP2004198313A (ja) | 甲状腺腫瘍の診断用キット | |
| JPH02501746A (ja) | 種々の病理的状態に於いてｐｓ２遺伝子から特異的に発現される蛋白質及びその断片、該蛋白質及び／又はその断片から得られる抗体、並びに病理的状態に対する検出、診断及び治療への該蛋白質、その断片及び抗体の適用 | |
| EP2769225A2 (en) | Predictive biomarkers for breast cancer |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |