CN106770719A - 低糖型强力枇杷露的指纹图谱检测方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种低糖型强力枇杷露的指纹图谱检测方法，涉及药品检测技术领域，包括如下步骤：第一步，建立低糖型强力枇杷露中成分标准特征图谱；第二步，以上述相同的方法测定待测低糖型强力枇杷露样品特征图谱；第三步，将待测低糖型强力枇杷露样品特征图谱与标准的低糖型强力枇杷露特征图谱比对，判断待测低糖型强力枇杷露的质量及真伪。本发明的有益效果是：整体性、宏观性和模糊性，本发明克服了单一成分含量测定难以反映产品真实投料情况。本发明为完整、准确评价低糖型强力枇杷露的质量提供了新的方法和手段。用视觉直观辨识图谱的异同；用半定量指标量化样品的真伪、优劣。

Description

低糖型强力枇杷露的指纹图谱检测方法

技术领域

本发明涉及药品检测技术领域，尤其涉及一种低糖型强力枇杷露的指纹图谱检测方法。

背景技术

低糖型强力枇杷露为枇杷叶、罂粟壳、百部、白前、桑白皮、桔梗、薄荷脑等药材经一定工艺加工而成。具有养阴敛肺，镇咳祛痰的功效。用于久咳劳嗽，支气管炎等。

众所周知，中成药的药效不是来自任何单一的活性成分，而是多种有效部位群共同作用的结果，目前，低糖型强力枇杷露质量标准中仅有生物碱类成分的化学反应鉴别，但这无法表征低糖型强力枇杷露的质量，存在很大风险。而指纹图谱能比较全面的表征低糖型强力枇杷露成分，更加严格的控制低糖型强力枇杷露的质量。

发明内容

本发明的目的在于提供一种低糖型强力枇杷露的指纹图谱检测方法，以解决上述技术问题。

本发明所要解决的技术问题采用以下技术方案来实现：

一种低糖型强力枇杷露的指纹图谱检测方法，其特征在于，包括如下步骤：

第一步，建立低糖型强力枇杷露中成分标准特征图谱，方法如下：

(1)供试品溶液的制备：精密移取本品5ml，置25ml量瓶中，加含5％醋酸的20％甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液；

(2)参照物溶液的制备：取***对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加含5％醋酸的20％甲醇制成每1ml含20μg的溶液，作为参照物溶液；

(3)色谱条件：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈-0.01mol/L庚烷磺酸钠溶液与0.02mol/L磷酸二氢钾溶液的等量混合液为流动相，并用10％磷酸溶液调节pH值至2.8；检测波长300nm，理论板数按***计算不低于2000；

(4)测定：分别精密吸取参照物溶液与供试品溶液20μl，注入液相色谱仪，用液相色谱法测定，制定低糖型强力枇杷露特征图谱；

所述低糖型强力枇杷露特征图谱中，确定为6个特征峰，以参照物***的色谱峰(S)的相对保留时间为1，先确定其特征色谱峰的相对保留时间，上述6个特征峰分别是：1号峰的平均相对保留时间RRT为1.24，2号峰的平均相对保留时间RRT为1.60，3号峰平均相对保留时间RRT为1.77，4号峰平均相对保留时间RRT为1.95，5号峰平均相对保留时间RRT为2.14，6号峰平均相对保留时间RRT为2.50，所述1号峰、2号峰、3号峰、4号峰、5号峰、6号峰的相对保留时间的差值均小于10％；

以5号峰峰面积为1，确定6个特征色谱峰的相对峰面积：1号峰的平均相对峰面积0.34，2号峰的平均相对峰面积为0.19，3号峰平均相对峰面积为0.22，4号峰平均相对峰面积为0.72，5号峰平均相对峰面积为1，6号峰平均相对峰面积为0.30，所述1号峰、2号峰、3号峰、4号峰、5号峰、6号峰的相对峰面积的差值均小于10％；

第二步，以上述相同的方法测定待测低糖型强力枇杷露样品特征图谱；

第三步，将待测低糖型强力枇杷露样品特征图谱与标准的低糖型强力枇杷露特征图谱比对，判断待测低糖型强力枇杷露的质量及真伪。

本发明是结合试验研究工作，建立了低糖型强力枇杷露的标准特征图谱，能较好地保证低糖型强力枇杷露中药材投料的准确性与正确性。到目前为止，尚无关于上述低糖型强力枇杷露指纹图谱控制方法的公开报道。

本发明的有益效果是：

1、整体性、宏观性和模糊性，本发明克服了单一成分含量测定难以反映产品真实投料情况。本发明为完整、准确评价低糖型强力枇杷露的质量提供了新的方法和手段。

2、用视觉直观辨识图谱的异同；用半定量指标量化样品的真伪、优劣。

附图说明

图1为低糖型强力枇杷露标准特征图谱。

具体实施方式

为了使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面结合具体实施例，进一步阐述本发明，但下述实施例仅仅为本发明的优选实施例，并非全部。基于实施方式中的实施例，本领域技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得其它实施例，都属于本发明的保护范围。

实施例1：低糖型强力枇杷露特征图谱的建立

1、仪器与试药

1.1仪器

岛津高效液相色谱仪及Shimadzu LCsolution工作站。

1.2试药

***对照品由中国药品生物制品检定所提供；乙腈为色谱纯，庚烷磺酸钠、磷酸二氢钾为分析纯；低糖型强力枇杷露由合肥今越制药有限公司提供，批号为150301、150302、150303、151201、151202、151203、151204、160101、160102、160103。

2、方法与结果

2.1色谱条件与***适用性

用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈-0.01mol/L庚烷磺酸钠溶液与0.02mol/L磷酸二氢钾溶液的等量混合液(用10％磷酸溶液调节pH值至2.8)(13∶87)为流动相；检测波长300nm，理论板数按***计算不低于2000。

3、特征图谱特征峰的测定

3.1低糖型强力枇杷露特征图谱特征峰的建立

(1)供试品溶液的制备：精密移取本品5ml，置25ml量瓶中，加含5％醋酸的20％甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液。

(2)参照物溶液的制备：取***对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加含5％醋酸的20％甲醇制成每1ml含20μg的溶液，作为参照物溶液。

分别精密吸取参照物溶液与供试品溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，照液相色谱法测定，即得。以参照物的色谱峰保留时间1，计算相对保留时间，5号色谱峰的峰面积，计算其他峰峰面积比值，即得低糖型强力枇杷露标准特征图谱。

3.2特征峰确定

通过10批低糖型强力枇杷露特征图谱的测定，比较其图谱，确定特征峰为6个，以参照物的色谱峰保留时间1，计算相对保留时间，5号色谱峰的峰面积，计算其他峰峰面积比值，统计10批样品共有峰相对保留时间以及相对峰面积。结果见下表1、表2。

表1：10批样品保留时间统计结果

表2：10批样品峰面积比值统计结果

3.3特征峰的描述

(1)特征峰共有6个，其中5号峰峰面积最大。

(2)1、2、3、4、5、6号峰的相对保留时间的平均值分别为：1.24、1.60、1.77、1.95、2.14、2.50。

(3)1、2、3、4、5、6号峰的峰面积比值的平均值分别为：0.34、0.19、0.22、0.72、1、0.30。

3.4特征特征图谱精密度试验

按照特征图谱精密度规定方法操作，以批号为150301的低糖型强力枇杷露为供试品，依法制备，连续进样6次，分别对共有特征峰时间以及峰面积比值进行统计，共有峰相对保留时间的RSD分别为：0.44％、0.57％、0.44％、0.79％、0.89％、0.91％，峰面积比值的RSD分别为：0.71％、0.80％、0.99％、0.73％、/、0.85％。

3.5特征图谱稳定性试验

按照特征图谱稳定性测定方法操作，以批号150301的低糖型强力枇杷露为供试品，依法制备，于不同时间(0、2、4、8、16、24h)检测，分别对特征峰时间以及峰面积比值进行统计，特征峰相对保留时间的RSD分别为：0.52％、0.45％、0.61％、0.70％、0.53％、0.42％，峰面积比值的RSD分别为：0.65％、0.49％、0.52％、0.52％、/、0.42％。

3.6特征特征图谱重复性试验

按照特征图谱重复性规定方法操作，以批号为150301的低糖型强力枇杷露为供试品，依法制备6份样品，进样检测，分别对共有特征峰时间以及峰面积比值进行统计，共有峰相对保留时间的RSD分别为：0.87％、0.56％、0.78％、0.52％、0.75％、0.87％，峰面积比值的RSD分别为：0.59％、0.49％、0.62％、0.72％、/、0.79％。

以上试验结果表明，应用此方法对低糖型强力枇杷露标准特征图谱进行测定方法可靠，能比较全面的反映本品中的化学信息，确保产品投料的准确性与正确性。

以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的仅为本发明的优选例，并不用来限制本发明，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。

Claims (1)

1.一种低糖型强力枇杷露的指纹图谱检测方法，其特征在于，包括如下步骤：

第一步，建立低糖型强力枇杷露中成分标准特征图谱，方法如下：

(1)供试品溶液的制备：精密移取本品5ml，置25ml量瓶中，加含5％醋酸的20％甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液；

(2)参照物溶液的制备：取***对照品适量，精密称定，置棕色量瓶中，加含5％醋酸的20％甲醇制成每1ml含20μg的溶液，作为参照物溶液；

(3)色谱条件：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈-0.01mol/L庚烷磺酸钠溶液与0.02mol/L磷酸二氢钾溶液的等量混合液为流动相，并用10％磷酸溶液调节pH值至2.8；检测波长300nm，理论板数按***计算不低于2000；

(4)测定：分别精密吸取参照物溶液与供试品溶液20μl，注入液相色谱仪，用液相色谱法测定，制定低糖型强力枇杷露特征图谱；

所述低糖型强力枇杷露特征图谱中，确定为6个特征峰，以参照物***的色谱峰(S)的相对保留时间为1，先确定其特征色谱峰的相对保留时间，上述6个特征峰分别是：1号峰的平均相对保留时间RRT为1.24，2号峰的平均相对保留时间RRT为1.60，3号峰平均相对保留时间RRT为1.77，4号峰平均相对保留时间RRT为1.95，5号峰平均相对保留时间RRT为2.14，6号峰平均相对保留时间RRT为2.50，所述1号峰、2号峰、3号峰、4号峰、5号峰、6号峰的相对保留时间的差值均小于10％；

以5号峰峰面积为1，确定6个特征色谱峰的相对峰面积：1号峰的平均相对峰面积0.34，2号峰的平均相对峰面积为0.19，3号峰平均相对峰面积为0.22，4号峰平均相对峰面积为0.72，5号峰平均相对峰面积为1，6号峰平均相对峰面积为0.30，所述1号峰、2号峰、3号峰、4号峰、5号峰、6号峰的相对峰面积的差值均小于10％；

第二步，以上述相同的方法测定待测低糖型强力枇杷露样品特征图谱；

第三步，将待测低糖型强力枇杷露样品特征图谱与标准的低糖型强力枇杷露特征图谱比对，判断待测低糖型强力枇杷露的质量及真伪。