CN102370921A - 强力枇杷露中药制剂的检测方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及口服镇咳祛痰中药制剂的检测方法，特别涉及一种强力枇杷露中药制剂的检测方法。所述检测方法包括枇杷叶的鉴别及罂粟壳的含量的测定。

Description

强力枇杷露中药制剂的检测方法

技术领域

本发明涉及口服镇咳祛痰中药制剂的检测方法，特别涉及一种强力枇杷露中药制剂的检测方法。

背景技术

强力枇杷露收载于部颁标准(WS3-B-0442-90)，由枇杷叶、罂粟壳、百部、桑白皮等七味中药材组成，有养阴敛肺，镇咳祛痰之功效，用于久咳劳嗽，支气管炎等。现有的检测强力枇杷露的鉴别是采用化学反应对生物碱和黄酮进行鉴别以控制其质量。而未对其处方中之要药-枇杷叶及罂粟壳进行鉴别和含量方面的质量控制，而其处方中枇杷叶泻肺热、治肺热火嗽，是清肺治火止嗽的重要成分；罂粟壳主治久咳、久泻、脱离肛、便血、滑精，对肺虚久咳、痨病久痢、久痢久泻有明显收敛作用。因此有必要对枇杷叶的鉴别和罂粟壳的含量进行控制来监测强力枇杷露的质量。

发明内容

本发明的目的在于提供一种检测口服镇咳祛痰中药制剂的检测方法。

本发明目的是提供一种强力枇杷露口服中药制剂的检测方法，包括枇杷叶鉴别及罂粟壳的含量测定。

其中，所述枇杷叶鉴别的方法，包括以下步骤：

取本品20ml，加水饱和的正丁醇或乙醇或丙酮振摇提取3次，每次15ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加水5ml使溶解，放冷，通过D101型大孔吸附树脂柱(内径1.5cm，长8cm)以水50ml洗脱，弃去水液，再用稀乙醇洗脱至无色，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取枇杷叶对照药材2g，加水100ml，煎煮1小时，滤过，滤液同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，使呈条状，以环己烷-乙酸乙酯-冰醋酸(8∶4∶0.1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点。

含量的测定：照高效液相色谱法测定。

色谱条件与***适用性试验以辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.01mol/L磷酸氢二钾溶液-0.005mol/L庚烷磺酸钠水溶液(20∶40∶40)为流动相；检测波长为220nm。理论板数按***峰计算应不低于1000。

对照品溶液的制备：精密称取经105℃干燥恒重的***对照品适量，置棕色量瓶中，加含5％醋酸的20％甲醇溶液制成每1ml含24μg的溶液，即得。

供试品溶液的制备：取本品约5ml，精密量取，置50ml量瓶中，精密加入含5％醋酸的10～40％甲醇溶液25ml，密塞，称定重量，超声或回流处理(功率250W，频率20kHz)10～40分钟，取出，放冷，再称定重量，用含5％醋酸的10～40％甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，静置，取上清液，即得。

测定方法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品含***(C17H1903N)应为0.06％～0.40％。

本发明的强力枇杷露中药制剂的检测方法，既增加了定性鉴别方法又增加了有效成份的含量测定方法，提高了强力枇杷露中药制剂质量的专属性和质量稳定性，确保了人们用药的安全性和有效性。本发明的检测方法，检测速度快，准确性高，有效地保证了药品的质量。

具体实施方式

通过以下具体实施例对本发明作进一步说明，但不起到限制作用。

实验例1：强力枇杷露中的枇杷叶鉴别的研究

岛津簿层铺板仪，硅胶G(青岛裕民源硅胶试剂厂)。枇杷叶对照药材(中国药品生物制品检定所)；水为双蒸水；其余试剂均为分析纯。样品生产批号为：090701，江西济民可信药业有限公司提供。

预处理溶剂的选择：取本品20ml，加水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次15ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加水5ml使溶解，放冷，通过D101型大孔吸附树脂柱(内径1.5cm，长8cm)以水50ml洗脱，弃去水液，再用稀乙醇洗脱至无色，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。

另用丙酮、乙醇分别替代饱和正丁醇对样品同法处理，因饱和正丁醇处理后样品较其它二种试剂处理得样品显色后更明显清晰。

所以选择饱和的正丁醇作为溶剂。

按以上技术方案操作，检测强力枇杷露(批号090701)，其供试品斑点与对照药材的主斑点相符，且显色清晰，重现性良好，能较好控制强力枇杷露中枇杷叶的质量。

实验例2：罂粟壳中***含量测定方法的研究

1、材料与试药

岛津高效液相色谱仪，***对照品由中国药品生物制品检定所麻醉品实验室提供，批号：1201-0117，乙腈和甲醇为天津福晨试剂厂的色谱纯，水为超纯水，其它试剂均为分析纯。待测样品为强力枇杷露(批号：090701，江西济民可信药业有限公司)色谱条件与波长选择：Phenomenex Lunna C8，4.6mm×150mm，5um；柱温：30℃流动相：乙腈-0.01mol/L磷酸氢二钾溶液-0.005mol/L庚烷磺酸钠水溶液(20∶40∶40)；检测波长为220nm；流速：0.8ml/min；

对照品溶液的制备精密称取经105℃干燥恒重的***对照品适量，置棕色量瓶中，加含5％醋酸的20％甲醇溶液制成每1ml含24μg的溶液，即得。

供试品溶液的制备：，精密量取本品5ml，置50ml量瓶中，精密加入含5％醋酸的20％甲醇溶液25ml，密塞，称定重量，超声处理(功率250W，频率20kHz)30分钟，取出，放冷，再称定重量，用含5％醋酸的20％甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，静置，取上清液，即得。

检测波长的选择：取***对照品溶液，在200nm～400nm范围内扫描，结果在220nm处有最大吸收，故选择220nm作为检测波长。

1、溶剂的选择：分别以含5％醋酸的10％甲醇溶液、含5％醋酸的20％甲醇，含5％醋酸的40％甲醇溶液作为溶剂，照含量测定项下操作，对样品(批号：090701)中***的的含量进行测定，结果见表1。

表1  溶剂对测定结果的影响

因此，选用5％醋酸的20％甲醇溶液作为溶剂

2、提取条件的的选择：分别称取待测样品进行超声处理、回流处理，测定样品(批号：090701)中的***含量，结果见表2

表2-1  提取时间对测定结果的影响

表2-2  提取方法对测定结果的影响

因此，选用超声处理(功率250W，频率20kHz)30分作为提取条件。

3、空白试验：按处方中药材的比例，自配不含罂粟壳的空白制剂，按上述方法制成空白溶液，依法测定，结果空白溶液在与***对照品相同保留时间处未见显色谱峰，故认为无干拢。

4、线性关系考察：精密吸取上述对照品溶液(0.02401mg/ml)4、6、8、10、12ul，注入液相色谱仪，测定峰面积，以对照品的进样(ug)为横纵标，以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。结果见表4

表4  线性关系实验数据(n＝5)

Y＝45477X+179996  R＝0.9970

结果表明：在0.08737～0.18341ug范围内呈良好的线性关系。

5、稳定性试验考察：精密吸取对照品溶液10ul，间隔2分进样，测定***的峰面积，RSD为：0.45％，结果表明24小时内测定结果稳定，结果见表5。

表5  稳定性试验数据(n＝5)

6、精密度试验：精密吸取供试品溶液10ul，注入液相色谱仪，测定***的峰面积，重复进样5次，结果RSD为1.43％，见表6

表6  精密度试验数据(n＝5)

7、重现性试验：照含量测定项下操作，对同一批号(批号：090701)样品5份进行测定，求得相对标准偏差RSD为0.75％，结果见表7

表7  重现性试验数据

8、回收率试验：精密量取已知含量***的供试品(批号：0907010.034mg/ml)，分别精密加***对照品溶液(0.0241mg/ml)一定量，照含量测定项下操作，计算回收率，结果回收率分别为98.3％，102.5％，102.7％，平均为101.2％，RSD＝2.46％。

实施例2：强力枇杷露中罂粟壳的含量测定

按上述含量测定的方法操作，测定10批强力枇杷露中***的含量见下表8：

表8、强力枇杷露中***含量的测定

测得强力枇杷露口服制剂中***的含量均在0.0340mg/ml以上，考虑到工业放大中的损耗误差，因此在最低含量的基础上，下浮20％，因此得到检测标准为强力枇杷露制剂每ml中含***含量应不低于0.03mg/ml。

实施例3  强力枇杷露口服制剂的检测方法

所述枇杷叶鉴别方法，包括以下步骤：

取本品20ml，加水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次15ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加水5ml使溶解，放冷，通过D101型大孔吸附树脂柱(内径1.5cm，长8cm)以水50ml洗脱，弃去水液，再用稀乙醇洗脱至无色，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取枇杷叶对照药材2g，加水100ml，煎煮1小时，滤过，滤液同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，使呈条状，以环己烷-乙酸乙酯-冰醋酸(8∶4∶0.1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点。

含量的测定：照高效液相色谱法测定。

色谱条件与***适用性试验以辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.01mol/L磷酸氢二钾溶液-0.005mol/L庚烷磺酸钠水溶液(20∶40∶40)为流动相；检测波长为220nm。理论板数按***峰计算应不低于1000。

对照品溶液的制备精密称取经105℃干燥恒重的***对照品适量，置棕色量瓶中，加含5％醋酸的20％甲醇溶液制成每1ml含24μg的溶液，即得。

供试品溶液的制备：取本品约5ml，精密量取，置50ml量瓶中，精密加入含5％醋酸的20％甲醇溶液25ml，密塞，称定重量，超声处理(功率250W，频率20kHz)30分钟，取出，放冷，再称定重量，用含5％醋酸的20％甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，静置，取上清液，即得。

测定方法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品含***(C17H1903N)应为0.06％～0.40％。

Claims (4)

1.一种强力枇杷露中药制剂的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括枇杷叶鉴别及罂粟壳的含量的测定。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述枇杷叶的鉴别方法，包括以下步骤：

取本品20ml，加水饱和的正丁醇或乙醇或丙酮振摇提取3次，每次15ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加水5ml使溶解，放冷，通过D101型大孔吸附树脂柱，以水50ml洗脱，弃去水液，再用稀乙醇洗脱至无色，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取枇杷叶对照药材2g，加水100ml，煎煮1小时，滤过，滤液同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，使呈条状，以体积比8∶4∶0.1的环己烷-乙酸乙酯-冰醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点。

3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述含量测定方法包括以下步骤：

照高效液相色谱法测定

色谱条件与***适用性试验以辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积比20∶40∶40乙腈-0.01mol/L磷酸氢二钾溶液-0.005mol/L庚烷磺酸钠水溶液为流动相；检测波长为220nm，理论板数按***峰计算应不低于1000；

对照品溶液的制备：精密称取经105℃干燥恒重的***对照品适量，置棕色量瓶中，加含5％醋酸的20％甲醇溶液制成每1ml含24μg的溶液，即得；

供试品溶液的制备：取本品5ml，精密量取，置50ml量瓶中，精密加入含5％醋酸的10～40％甲醇溶液25ml，密塞，称定重量，超声或回流处理10～40分钟，取出，放冷，再称定重量，用含5％醋酸的10～40％甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，静置，取上清液，即得。分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本品含***为0.06％～0.40％。

4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述枇杷叶鉴别方法，包括以下步骤：

取本品20ml，加水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次15ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加水5ml使溶解，放冷，通过内径1.5cm，长8cm的D101型大孔吸附树脂柱，以水50ml洗脱，弃去水液，再用稀乙醇洗脱至无色，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取枇杷叶对照药材2g，加水100ml，煎煮1小时，滤过，滤液同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，使呈条状，以体积比为8∶4∶0.1环己烷-乙酸乙酯-冰醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点；

所述含量的测定，包括以下步骤：

照高效液相色谱法测定

色谱条件与***适用性试验：以辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积比20∶40∶40乙腈-0.01mol/L磷酸氢二钾溶液-0.005mol/L庚烷磺酸钠水溶液为流动相；检测波长为220nm。理论板数按***峰计算应不低于1000；

对照品溶液的制备：精密称取经105℃干燥恒重的***对照品适量，置棕色量瓶中，加含5％醋酸的20％甲醇溶液制成每1ml含24μg的溶液，即得；

供试品溶液的制备：取本品5ml，精密量取，置50ml量瓶中，精密加入含5％醋酸的20％甲醇溶液25ml，密塞，称定重量，功率250W，频率20kHz，超声处理30分钟，取出，放冷，再称定重量，用含5％醋酸的20％甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，静置，取上清液，即得；

测定方法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本品含***为0.06％～0.40％。