CN106619742A - 治疗糖尿病的乳酸菌组合物及其制备方法 - Google Patents

治疗糖尿病的乳酸菌组合物及其制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种治疗糖尿病的乳酸菌组合物，包括乳酸菌组合核，所述乳酸菌组合核外包裹有包被层；所述包被层包括重量份数的成份：阿卡波糖30～50、蛋白物质30～50、硝酸纤维素5～10；所述乳酸菌组合核由如下重量份数的菌株组成：长双歧杆菌20～30、唾液乳杆菌10～20、乳酸乳球菌20～30、鼠李糖乳杆菌10～20、嗜酸乳杆菌10～20。本发明还公开了其制备方法。本发明能显著治疗糖尿病且无任何毒副作用的优点。

Description

治疗糖尿病的乳酸菌组合物及其制备方法
技术领域
本发明涉及益生菌，尤其是涉及一种能显著的治疗糖尿病且无任何毒副作用的治疗糖尿病的乳酸菌组合物及其制备方法。
背景技术
糖尿病是一组以高血糖为特征的代谢性疾病。高血糖则是由于胰岛素分泌缺陷或其生物作用受损，或两者兼有引起。糖尿病时长期存在的高血糖，导致各种组织，特别是眼、肾、心脏、血管、神经的慢性损害、功能障碍。随着世界人口的老龄化，糖尿病已经成为一种常见病、多发病，在工业发达国家其发病率呈上升趋势。据统计，全世界约有1.5亿糖尿病患者。由糖尿病并发症引起的死亡人数在发达国家已是继心脑血管疾病、癌症之后列第三位，引起了世界各国的高度重视，纷纷对糖尿病的发病机制、药物防治等进行研究。目前医学界对其采取的是包括饮食疗法、药物预防和治疗与及其它辅助疗法的综合预防和治疗措施。西药虽然层出不穷，但不能从根本上解决问题，而且西药预防和治疗具有一定的副作用。
发明内容
为克服现有技术的缺点，本发明目的在于提供一种能显著的治疗糖尿病且无任何毒副作用的治疗糖尿病的乳酸菌组合物及其制备方法。
本发明通过以下技术措施实现的，一种治疗糖尿病的乳酸菌组合物，包括乳酸菌组合核，所述乳酸菌组合核外包裹有包被层；所述包被层包括重量份数的成份：阿卡波糖30～50、蛋白物质30～50、硝酸纤维素5～10；所述乳酸菌组合核由如下重量份数的菌株组成：长双歧杆菌20～30、唾液乳杆菌10～20、乳酸乳球菌20～30、鼠李糖乳杆菌10～20、嗜酸乳杆菌10～20。
作为一种优选方式，所述乳酸菌组合物中长双歧杆菌的含量为106～109cuf/g、唾液乳杆菌的含量为106～108cuf/g、乳酸乳球菌的含量为106～108cuf/g、鼠李糖乳杆菌的含量为106～107cuf/g、嗜酸乳杆菌的含量为106～107cuf/g。
作为一种优选方式，所述乳酸菌组合核中长双歧杆菌、唾液乳杆菌、乳酸乳球菌、鼠李糖乳杆菌和嗜酸乳杆菌分别经过耐猪胆盐、耐酸筛选的，能耐0.3％的猪胆盐及pH为2.5的酸性环境。
作为一种优选方式，所述蛋白物质为酪蛋白和乳铁蛋白层，其中酪蛋白和乳铁蛋白的重量比为1-5：1-5。
本发明还一种治疗糖尿病的乳酸菌组合物的制备方法，包括如下步骤：
(1)将长双歧杆菌、唾液乳杆菌、乳酸乳球菌、鼠李糖乳杆菌、嗜酸乳杆菌分别以1ml/100ml的接种量接种至培养基中，在35℃～45℃下，培养12～24h，得到活化的乳杆菌菌种；
(2)将活化的五种菌种以重量份数：长双歧杆菌20～30、唾液乳杆菌10～20、乳酸乳球菌20～30、鼠李糖乳杆菌10～20、嗜酸乳杆菌10～20混合后，再将混合菌种以1ml/100ml的接种量接种至培养液中，在35℃～45℃下，培养10～12h后，离心取沉淀，在4℃～10℃下保温6～10h后，均质，得到组合菌；
(3)将重量份数的：阿卡波糖30～50、蛋白物质30～50、硝酸纤维素5～10加水充分混合成包被液，将组合菌加入包被液混和均匀；
(4)将混和均匀的液体滴加到氯化钙溶液中固化，过滤后真空冻干12h得到乳酸菌组合物。
作为一种优选方式，所述乳酸菌组合物中长双歧杆菌的含量为106～109cuf/g、唾液乳杆菌的含量为106～108cuf/g、乳酸乳球菌的含量为106～108cuf/g、鼠李糖乳杆菌的含量为106～107cuf/g、嗜酸乳杆菌的含量为106～107cuf/g。
作为一种优选方式，所述长双歧杆菌、唾液乳杆菌、乳酸乳球菌、鼠李糖乳杆菌和嗜酸乳杆菌在活化前分别经过耐猪胆盐、耐酸筛选的，能耐0.3％的猪胆盐及pH为2.5的酸性环境。
作为一种优选方式，所述蛋白物质为酪蛋白和乳铁蛋白层，其中酪蛋白和乳铁蛋白的重量比为1-5：1-5。
本发明具有显著治疗糖尿病的效果，且因为是益生菌类产品，对人体没有任何毒副作用。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步详细说明。
实施例1
(1)菌种活化
筛选出耐0.3％猪胆盐、耐PH为2.5的酸性环境的长双歧杆菌、唾液乳杆菌、乳酸乳球菌、鼠李糖乳杆菌和嗜酸乳杆菌，将筛选出的五种菌分别以1ml/100ml的接种量接种至MRS培养基中，在45℃下，培养12h，得到活化的乳杆菌菌种；
其中，MRS培养基的配方为：在1000mL蒸馏水中加入10g蛋白胨、8g牛肉浸粉、20g葡萄糖、4g酵母浸膏、0.05g四水硫酸锰、1mL吐温80、2g磷酸氢二钾、5g乙酸钠、0.2g硫酸镁、2g柠檬酸二铵；
(2)制备组合菌
将活化的四种菌种以重量份数：长双歧杆菌20g、唾液乳杆菌10g、乳酸乳球菌20g、鼠李糖乳杆菌10g、嗜酸乳杆菌10g混合后，再将混合菌种以1ml/100ml的接种量接种至培养液中，在45℃下，培养10h后，以6000r/min，在5℃下，离心15min，取沉淀物，在4℃下保温6h后，均质，得到组合菌；
(3)制备包被组合菌
将以下重量的：阿卡波糖30g、酪蛋白15g、乳铁蛋白15g、硝酸纤维素5g加水1000ml充分混合成包被液，将组合菌加入包被液混和均匀；
(4)制备乳酸菌组合物
将混和均匀的液体滴加到氯化钙溶液中固化，过滤后真空冻干12h得到乳酸菌组合物。在乳酸菌组合物中长双歧杆菌的含量为106～109cuf/g、唾液乳杆菌的含量为106～108cuf/g、乳酸乳球菌的含量为106～108cuf/g、鼠李糖乳杆菌的含量为106～107cuf/g、嗜酸乳杆菌的含量为106～107cuf/g。
实施例2
筛选出耐0.3％猪胆盐、耐PH为2.5的酸性环境的长双歧杆菌、唾液乳杆菌、乳酸乳球菌、鼠李糖乳杆菌和嗜酸乳杆菌，将筛选出的五种菌分别以1ml/100ml的接种量接种至MRS培养基中，在35℃下，培养24h，得到活化的乳杆菌菌种；
其中，MRS培养基的配方为：在1000mL蒸馏水中加入10g蛋白胨、8g牛肉浸粉、20g葡萄糖、5g酵母浸膏、0.06g四水硫酸锰、1mL吐温80、2g磷酸氢二钾、5g乙酸钠、0.2g硫酸镁、2g柠檬酸二铵；
(2)制备组合菌
将活化的四种菌种以重量份数：长双歧杆菌30g、唾液乳杆菌20g、乳酸乳球菌30g、鼠李糖乳杆菌20g、嗜酸乳杆菌20g混合后，再将混合菌种以1ml/100ml的接种量接种至培养液中，在35℃下，培养12h后，以4500r/min，在10℃下，离心20min，取沉淀物，在10℃下保温10h后，均质，得到组合菌；
(3)制备包被组合菌
将以下重量的：阿卡波糖50g、酪蛋白35g、乳铁蛋白35g、硝酸纤维素10g加水1000ml充分混合成包被液，将组合菌加入包被液混和均匀；
(4)制备乳酸菌组合物
将混和均匀的液体滴加到氯化钙溶液中固化，过滤后真空冻干12h得到乳酸菌组合物。在乳酸菌组合物中长双歧杆菌的含量为106～109cuf/g、唾液乳杆菌的含量为106～108cuf/g、乳酸乳球菌的含量为106～108cuf/g、鼠李糖乳杆菌的含量为106～107cuf/g、嗜酸乳杆菌的含量为106～107cuf/g。
实施例3
筛选出耐0.3％猪胆盐、耐PH为2.5的酸性环境的长双歧杆菌、唾液乳杆菌、乳酸乳球菌、鼠李糖乳杆菌和嗜酸乳杆菌，将筛选出的五种菌分别以1ml/100ml的接种量接种至MRS培养基中，在42℃下，培养13h，得到活化的乳杆菌菌种；
其中，MRS培养基的配方为：在1000mL蒸馏水中加入10g蛋白胨、8g牛肉浸粉、20g葡萄糖、4g酵母浸膏、0.05g四水硫酸锰、1mL吐温80、2g磷酸氢二钾、5g乙酸钠、0.2g硫酸镁、2g柠檬酸二铵；
(2)制备组合菌
将活化的四种菌种以重量份数：长双歧杆菌35g、唾液乳杆菌15g、乳酸乳球菌23g、鼠李糖乳杆菌15g、嗜酸乳杆菌15g混合后，再将混合菌种以1ml/100ml的接种量接种至培养液中，在42℃下，培养11h后，以7000r/min，在5℃下，离心10min，取沉淀物，在4℃下保温10h后，均质，得到组合菌；
(3)制备包被组合菌
将重量份数的：阿卡波糖35g、酪蛋白20g、乳铁蛋白20g、硝酸纤维素6g加水1000ml充分混合成包被液，将组合菌加入包被液混和均匀；
(4)制备乳酸菌组合物冻干粉
将混和均匀的液体滴加到氯化钙溶液中固化，过滤后真空冻干12h得到乳酸菌组合物冻干粉。在乳酸菌组合物冻干粉中长双歧杆菌的含量为106～109cuf/g、唾液乳杆菌的含量为106～108cuf/g、乳酸乳球菌的含量为106～108cuf/g、鼠李糖乳杆菌的含量为106～107cuf/g、嗜酸乳杆菌的含量为106～107cuf/g。
下面通过临床试验用于进一步说明本发明。
本乳酸菌组合物冻干粉预防和治疗的100例Ⅱ型糖尿病患者的临床报告如下。
1、临床观察
本发明乳酸菌组合物冻干粉(按照实施例1方法制备)对治疗Ⅱ型糖尿病患者200例，其中男性100例，女性100例。
2、药物选择
治疗组选本发明乳酸菌组合物冻干粉(按照实施例1方法制备)，一个疗程(一个月为一疗程)，1.5g/袋，
一日三次，每次一袋，开水冲服。
3、诊断标准
经西医诊断,均符合2010年ADA(美国糖尿病协会)糖尿病诊断标准，其中男100例，女100例，年龄45～72岁，病程，2～10年。预防和治疗一个月后观察所有患者预防和治疗前后腰膝酸软，疲乏无力，口干咽燥，夜尿等临床症状改善情况。预防和治疗前、预防和治疗后空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹胰岛素(FINS)。
4、疗效标准
显效：临床症状改善明显，腰膝酸软、疲乏无力、口干咽燥、夜尿频多等消失或基本消失，血糖水平波动在正常范围内，血压≤128/80mmHg，24h尿蛋白＜30mg，血尿素氮及肌酐均降至正常水平。
有效：临床症状减轻，腰膝酸软、疲乏无力、口干咽燥、夜尿频多等得到明显改善，空腹血糖控制理想，血压波动在140/90mmHg左右，24h尿蛋白和血尿素氮肌酐均有下降，但未完全好转。
无效：临床症状改善不明显，血压及血糖无下降或有下降但不理想，24h尿蛋白定量及血尿素氮肌酐均未下降,或下降未达到有效标准。
5、治疗结果
疗效
治疗人数 显效 有效 无效 总有效率
200 124 68 8 96％
预防和治疗前后FBG、HbAlc和FINS比较
观察指标 治疗前 治疗后
FBG 9.66±2.52 5.37±1.58
HBALC 7.64±2.37 6.31±1.13
FINS 17.24±4.11 10.02±1.35
6、结论
结果表明，经1个疗程的预防和治疗后患者FBG、HBALC、FINS均较预防和治疗前下降，与预防和治疗前有极显著性差异(P＜0.01)，可见本发明药物能显著降低血糖、糖化血红蛋白和血胰岛素的水平，改善糖尿病患者胰岛素抵抗。经1个疗程的预防和治疗后，Ⅱ型糖尿病患者临床症状显著减轻，腰膝酸软、疲乏无力、口干咽燥、夜尿频多等症状消失。在200名Ⅱ型糖尿病患者中，显效有124例，占62％；有效有68例，占34％；无效有8例，占4％，总有效率为96％。在治疗过程中，200名Ⅱ型糖尿病患者未见不良反应。
以上是对本发明治疗糖尿病的乳酸菌组合物及其制备方法进行了阐述，用于帮助理解本发明，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，任何未背离本发明原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

Claims (8)

1.一种治疗糖尿病的乳酸菌组合物，其特征在于：包括乳酸菌组合核，所述乳酸菌组合核外包裹有包被层；所述包被层包括重量份数的成份：阿卡波糖30～50、蛋白物质30～50、硝酸纤维素5～10；所述乳酸菌组合核由如下重量份数的菌株组成：长双歧杆菌20～30、唾液乳杆菌10～20、乳酸乳球菌20～30、鼠李糖乳杆菌10～20、嗜酸乳杆菌10～20。
2.根据权利要求1所述的乳酸菌组合物，其特征在于：所述乳酸菌组合物中长双歧杆菌的含量为106～109cuf/g、唾液乳杆菌的含量为106～108cuf/g、乳酸乳球菌的含量为106～108cuf/g、鼠李糖乳杆菌的含量为106～107cuf/g、嗜酸乳杆菌的含量为106～107cuf/g。
3.根据权利要求1所述的乳酸菌组合物，其特征在于：所述乳酸菌组合核中长双歧杆菌、唾液乳杆菌、乳酸乳球菌、鼠李糖乳杆菌和嗜酸乳杆菌分别经过耐猪胆盐、耐酸筛选的，能耐0.3％的猪胆盐及pH为2.5的酸性环境。
4.根据权利要求1所述的乳酸菌组合物，其特征在于：所述蛋白物质为酪蛋白和乳铁蛋白层，其中酪蛋白和乳铁蛋白的重量比为1-5：1-5。
5.一种治疗糖尿病的乳酸菌组合物的制备方法，其特征在于包括如下步骤：
(1)将长双歧杆菌、唾液乳杆菌、乳酸乳球菌、鼠李糖乳杆菌、嗜酸乳杆菌分别以1ml/100ml的接种量接种至培养基中，在35℃～45℃下，培养12～24h，得到活化的乳杆菌菌种；
(2)将活化的五种菌种以重量份数：长双歧杆菌20～30、唾液乳杆菌10～20、乳酸乳球菌20～30、鼠李糖乳杆菌10～20、嗜酸乳杆菌10～20混合后，再将混合菌种以1ml/100ml的接种量接种至培养液中，在35℃～45℃下，培养10～12h后，离心取沉淀，在4℃～10℃下保温6～10h后，均质，得到组合菌；
(3)将重量份数的：阿卡波糖30～50、蛋白物质30～50、硝酸纤维素5～10加水充分混合成包被液，将组合菌加入包被液混和均匀；
(4)将混和均匀的液体滴加到氯化钙溶液中固化，过滤后真空冻干12h得到乳酸菌组合物。
6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于：所述乳酸菌组合物中长双歧杆菌的含量为106～109cuf/g、唾液乳杆菌的含量为106～108cuf/g、乳酸乳球菌的含量为106～108cuf/g、鼠李糖乳杆菌的含量为106～107cuf/g、嗜酸乳杆菌的含量为106～107cuf/g。
7.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于：所述长双歧杆菌、唾液乳杆菌、乳酸乳球菌、鼠李糖乳杆菌和嗜酸乳杆菌在活化前分别经过耐猪胆盐、耐酸筛选的，能耐0.3％的猪胆盐及pH为2.5的酸性环境。
8.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于：所述蛋白物质为酪蛋白和乳铁蛋白层，其中酪蛋白和乳铁蛋白的重量比为1-5：1-5。
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