CN106424125B - 一种处理土壤重金属污染的菌剂及其制备方法与应用 - Google Patents

一种处理土壤重金属污染的菌剂及其制备方法与应用 Download PDF

Info

Publication number
CN106424125B
CN106424125B CN201610570018.4A CN201610570018A CN106424125B CN 106424125 B CN106424125 B CN 106424125B CN 201610570018 A CN201610570018 A CN 201610570018A CN 106424125 B CN106424125 B CN 106424125B
Authority
CN
China
Prior art keywords
soil
heavy metal
trichoderma asperellum
mortierella alpina
culture
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201610570018.4A
Other languages
English (en)
Other versions
CN106424125A (zh
Inventor
张旭
杨欢欢
崔兆杰
孙立群
张萌萌
魏绍山
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Shandong University
Original Assignee
Shandong University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Shandong University filed Critical Shandong University
Priority to CN201610570018.4A priority Critical patent/CN106424125B/zh
Publication of CN106424125A publication Critical patent/CN106424125A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN106424125B publication Critical patent/CN106424125B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B09—DISPOSAL OF SOLID WASTE; RECLAMATION OF CONTAMINATED SOIL
    • B09C—RECLAMATION OF CONTAMINATED SOIL
    • B09C1/00—Reclamation of contaminated soil
    • B09C1/10—Reclamation of contaminated soil microbiologically, biologically or by using enzymes
    • B09C1/105—Reclamation of contaminated soil microbiologically, biologically or by using enzymes using fungi or plants
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/14—Fungi; Culture media therefor

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Environmental & Geological Engineering (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Soil Sciences (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明涉及一种处理土壤重金属污染的微生物菌剂及其制备方法与应用。处理土壤重金属污染的微生物菌剂，由如下原料组成：稻壳、猪粪、鸡粪，大豆粉、单细胞蛋白，高山被孢霉发酵液，棘孢木霉发酵液，卷枝毛霉发酵液。本发明首次采用高山被孢霉、棘孢木霉与卷枝毛霉按比例混合制得的处理土壤重金属污染的微生物菌剂，该菌剂可以应用在复杂多变的环境之中，面对较差的土壤环境，依旧可以发挥作用，功能微生物对重金属的耐受能力高，在重金属重度污染的土壤中仍能保持活性并进行高效修复。

Description

一种处理土壤重金属污染的菌剂及其制备方法与应用
技术领域
本发明涉及一种处理土壤重金属污染的菌剂及其制备方法与应用，属于土壤治理技术领域。
背景技术
生态破坏问题已成为制约人类发展的关键问题。矿业活动所形成的排土场、尾矿库及周围污染场地往往污染物成分复杂，含有重金属及多种有机污染物，这些重金属的污染浓度高、污染程度重，造成动植物很难在其中生长，严重影响生态环境。土壤中的重金属，可以通过地表水体径流、大气飘尘，污染周围的土地、水域和大气，其影响面将远远超过废弃物堆置场的地域和空间，污染影响要花费大量人力、物力、财力经过很长时间才能恢复，而且难于恢复到原有的水平。
现代技术应对重金属污染的土壤修复技术相对匮乏，主要集中在超积累植物对特定重金属的富集，该方法只能应对较为单一的重金属污染，而且植物对土壤环境的要求较高，限制了其应用范围。
中国专利文献CN104070062A(申请号201310108243.2)公开了一种重金属污染土壤的微生物原位修复方法，其步骤为：⑴菌群培养：⑵菌群激活；⑶微生物生长剂配制；⑷营养液配制；(5)初投；⑹修复。该发明提供的重金属污染土壤的微生物原位修复方法中由重金属微生物降解菌群、微生物生长加速剂作为主要成分，又补充了一定的微生物营养素，在向土壤中投入优选重金属微生物转化菌群的同时，增加微生物生长加速剂促使其高速繁殖，从而极大提高了土壤中重金属元素的转化与降解效率，解决了重金属污染土壤微生物原位修复方法中的时间长、见效慢的问题，使微生物原位修复技术成为可靠、高效、可操作的重金属污染土壤治理手段。
如何寻找可以快速有效降低受污染土壤中的重金属的毒性，成为目前的研究热点。
发明内容
本发明针对现有技术的不足，提供一种处理土壤重金属污染的微生物菌剂及其制备方法与应用。
本发明技术方案如下：
一种处理土壤重金属污染的微生物菌剂，由如下重量份的原料组成：
稻壳50～80份、猪粪20～50份、鸡粪20～50份，大豆粉30～60份、单细胞蛋白4～6份，高山被孢霉(Mortierella alpina)发酵液2.5-3.5份，棘孢木霉(Trichodermaasperellum)发酵液1.5～2.5份，卷枝毛霉(Mucor circinelloides)发酵液0.5～1.5份；
所述高山被孢霉(Mortierella alpina)发酵液中的菌体浓度为0.4×108cfu/ml；棘孢木霉(Trichoderma asperellum)发酵液中的菌体浓度为1.0×108cfu/ml；卷枝毛霉(Mucor circinelloides)发酵液中的菌体浓度为3.6×108cfu/ml；微生物菌剂中菌体总含量为6.8×108cfu/g。
根据本发明优选的，所述的高山被孢霉(Mortierella alpina)、棘孢木霉(Trichoderma asperellum)与卷枝毛霉(Mucor circinelloides)活菌体数量之比为1：(1.0～2.5):(1.8～3.6)。
根据本发明进一步优选的，所述的高山被孢霉(Mortierella alpina)、棘孢木霉(Trichoderma asperellum)与卷枝毛霉(Mucor circinelloides)活菌体数量之比为1：1.5：3。
根据本发明优选的，所述菌体总含量为6.8×108cfu/g。
根据本发明优选的，所述高山被孢霉(Mortierella alpina)为高山被孢霉(Mortierella alpina)ME-AA01，来源于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，菌种编号CCTCCNO:M207067。
根据本发明优选的，所述棘孢木霉(Trichoderma asperellum)为棘孢木霉(Trichoderma asperellum)PD-19，来源于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，菌种编号CCTCC NO:M2013113。
根据本发明优选的，所述卷枝毛霉(Mucor circinelloides)来源于荷兰微生物菌种保藏中心(CBS)，菌种编号CBS131818。
上述处理土壤重金属污染的微生物菌剂的制备方法，步骤如下：
(1)将高山被孢霉(Mortierella alpina)经一级种子培养、二级种子培养和扩大培养，制得1.2×107～1.6×107cfu/ml的高山被孢霉(Mortierella alpina)发酵液；
(2)将棘孢木霉(Trichoderma asperellum)经一级种子培养、二级种子培养和扩大培养，制得0.6～0.8×108cfu/ml的棘孢木霉(Trichoderma asperellum)发酵液；
(3)将卷枝毛霉(Mucor circinelloides)经一级种子培养、二级种子培养和扩大培养，制得1.4×108～1.8×108cfu/ml的卷枝毛霉(Mucor circinelloides)发酵液；
(4)将步骤(1)制得的高山被孢霉(Mortierella alpina)发酵液、步骤(2)制得的棘孢木霉(Trichoderma asperellum)发酵液、步骤(3)制得的卷枝毛霉(Mucorcircinelloides)发酵液与稻壳、猪粪、鸡粪，大豆粉和单细胞蛋白混合均匀，室温条件下放置4～6周，每周翻动2～4次，干燥至含水率低于20％，制得微生物菌剂。
根据本发明优选的，所述步骤(1)、(2)和步骤(3)中，一级种子培养条件为：光照1000～3000LX、培养温度25～30℃、厌氧培养3～4天；
所述一级种子培养基每升组分如下：
葡萄糖15～20g，蛋白胨6～10g，酵母浸膏1～3g，磷酸氢二钾0.2～0.8g，硫酸镁0.01～0.03g，氯化钙0.1～0.29g。
根据本发明优选的，所述步骤(1)、(2)和步骤(3)中，二级种子培养条件为：光照1000～3000LX、培养温度25～30℃、厌氧培养3～4天；
所述二级种子培养基每升组分如下：
葡萄糖15～20g，蛋白胨6～10g,酵母浸膏1～3g，磷酸氢二钾0.2～0.8g，硫酸镁0.01～0.03g，氯化钙0.1～0.29g。
根据本发明优选的，所述步骤(1)、(2)和步骤(3)中，扩大培养条件为：培养温度28～30℃、黑暗好氧培养6～8天，每小时通气比例为液体与气体体积比1:0.5，搅拌转速200～300r/min；
所述扩大培养的培养基每升组分如下：
葡萄糖15～20g，蛋白胨6～10g,酵母浸膏1～3g，磷酸氢二钾0.2～0.8g，硫酸镁0.01～0.03g，氯化钙0.1～0.29g。
上述处理土壤重金属污染的微生物菌剂的应用，步骤如下：
将处理土壤重金属污染的微生物菌剂作为基肥直接施用于重金属污染的土壤中，翻耕混匀，施用量为8～12g/平方米，在温度29～31℃、pH7.5～8.5的条件下处理33～38天。
上述稻壳、猪粪、鸡粪、大豆粉和单细胞蛋白等均为本领域普通市售产品。
有益效果
1、本发明首次采用高山被孢霉(Mortierella alpina)、棘孢木霉(Trichodermaasperellum)与卷枝毛霉(Mucor circinelloides)按比例混合制得的处理土壤重金属污染的微生物菌剂，该菌剂可以应用在复杂多变的环境之中，面对较差的土壤环境，依旧可以发挥作用，功能微生物对重金属的耐受能力高，在重金属重度污染的土壤中仍能保持活性并进行高效修复；
2、本发明所述处理土壤重金属污染的微生物菌剂制备工艺简单，适用范围广，成本低，可操作性强。功能微生物对重金属的修复机理多样,不仅能对重金属吸附积累，还能够把重金属转化为稳定态，在不对环境造成二次破坏的基础上最大限度的治理重金属污染，复合菌剂中的功能微生物对环境的适应性强，从而大大增加了复合菌剂的应用范围。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明的技术方案做进一步说明，但本发明所保护范围不限于此。
生物材料来源：
高山被孢霉(Mortierella alpina)为高山被孢霉(Mortierella alpina)ME-AA01，来源于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，菌种编号CCTCC NO:M207067；
棘孢木霉(Trichoderma asperellum)为棘孢木霉(Trichoderma asperellum)PD-19，来源于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，菌种编号CCTCC NO:M2013113；
卷枝毛霉(Mucor circinelloides)来源于荷兰微生物菌种保藏中心(CBS)，菌种编号CBS131818。
实施例中所述稻壳、猪粪、鸡粪、大豆粉和单细胞蛋白均为本领域普通市售产品。
实施例1
一种处理土壤重金属污染的微生物菌剂，由如下重量份的原料组成：
稻壳80份、猪粪20份、鸡粪50份，大豆粉30份、单细胞蛋白6份，高山被孢霉(Mortierella alpina)发酵液2.5份，棘孢木霉(Trichoderma asperellum)发酵液2.5份，卷枝毛霉(Mucor circinelloides)发酵液0.5份；
微生物菌剂中菌体总含量为5.3×108cfu/g；所述的高山被孢霉(Mortierellaalpina)、棘孢木霉(Trichoderma asperellum)与卷枝毛霉(Mucor circinelloides)活菌体数量之比为1：1.8:2.5。
上述处理土壤重金属污染的微生物菌剂的制备方法，步骤如下：
(1)将高山被孢霉(Mortierella alpina)经一级种子培养、二级种子培养和扩大培养，制得0.4×108cfu/ml的高山被孢霉(Mortierella alpina)发酵液；
(2)将棘孢木霉(Trichoderma asperellum)经一级种子培养、二级种子培养和扩大培养，制得1.0×108cfu/ml的棘孢木霉(Trichoderma asperellum)发酵液；
(3)将卷枝毛霉(Mucor circinelloides)经一级种子培养、二级种子培养和扩大培养，制得3.6×108cfu/ml的卷枝毛霉(Mucor circinelloides)发酵液；
(4)将步骤(1)制得的高山被孢霉(Mortierella alpina)发酵液、步骤(2)制得的棘孢木霉(Trichoderma asperellum)发酵液、步骤(3)制得的卷枝毛霉(Mucorcircinelloides)发酵液与稻壳、猪粪、鸡粪，大豆粉和单细胞蛋白混合均匀，室温条件下放置4周，每周翻动4次，干燥至含水率低于20％，制得微生物菌剂。
所述步骤(1)、(2)和步骤(3)中，一级种子培养条件为：光照2000LX、培养温度27℃、厌氧培养3天；所述一级种子培养基每升组分如下：
葡萄糖15g，蛋白胨10g，酵母浸膏1g，磷酸氢二钾0.8g，硫酸镁0.01g，氯化钙0.29g。
所述步骤(1)、(2)和步骤(3)中，二级种子培养条件为：光照2000LX、培养温度27℃、厌氧培养3天；所述二级种子培养基每升组分如下：
葡萄糖15g，蛋白胨10g，酵母浸膏1g，磷酸氢二钾0.8g，硫酸镁0.01g，氯化钙0.29g。
所述步骤(1)、(2)和步骤(3)中，扩大培养条件为：培养温度28℃、黑暗好氧培养8天，每小时通气比例为液体与气体体积比1:0.5，搅拌转速300r/min；
所述扩大培养的培养基每升组分如下：
葡萄糖15g，蛋白胨10g，酵母浸膏1g，磷酸氢二钾0.8g，硫酸镁0.01g，氯化钙0.29g。
实施例2
一种处理土壤重金属污染的微生物菌剂，由如下重量份的原料组成：
稻壳50份、猪粪50份、鸡粪20份，大豆粉60份、单细胞蛋白4份，高山被孢霉(Mortierella alpina)发酵液3.5份，棘孢木霉(Trichoderma asperellum)发酵液1.5份，卷枝毛霉(Mucor circinelloides)发酵液1.5份；
微生物菌剂中菌体总含量为8.3×108cfu/g；所述的高山被孢霉(Mortierellaalpina)、棘孢木霉(Trichoderma asperellum)与卷枝毛霉(Mucor circinelloides)活菌体数量之比为1：1:3.6。
制备方法同实施例1。
实施例3
一种处理土壤重金属污染的微生物菌剂，由如下重量份的原料组成：
稻壳65份、猪粪35份、鸡粪35份，大豆粉45份、单细胞蛋白5份，高山被孢霉(Mortierella alpina)发酵液3份，棘孢木霉(Trichoderma asperellum)发酵液2份，卷枝毛霉(Mucor circinelloides)发酵液1份；
微生物菌剂中菌体总含量为6.8×108cfu/g；所述的高山被孢霉(Mortierellaalpina)、棘孢木霉(Trichoderma asperellum)与卷枝毛霉(Mucor circinelloides)活菌体数量之比为1:1.5:3。
制备方法同实施例1。
对比例1
如中国专利文献CN104070062A(申请号201310108243.2)所述的微生物菌剂的制备方法，步骤如下：
(i)菌群培养：选择可以转化重金属特性的微生物降解菌群体，采用固体培养的方式，以麦麸为载体进行培养驯化，取其中间细菌产物混合并干化后形成的粉末状物质；
(ii)菌群激活：将步骤(i)中的粉末状物质放入水中，浸泡0.5～2h，去除麦麸即得激活后的菌群液；
(iii)微生物生长剂配制：将复合氨基酸、复合微量元素、活化酶和腐植酸放入水中，搅拌均匀，得到微生物生长剂；
(iv)营养液配制：微生物生长剂中加入微生物营养素，加水予以稀释，即得微生物生长剂营养液；
对比例2
如实施例3所述的处理土壤重金属污染的微生物菌剂，不同之处在于，
将棘孢木霉替换为里氏木霉(Trichoderma reesei)，该菌株来源于中国普通微生物菌种保藏管理中心，菌种编号CGMCC No：9644。
对比例3
如实施例3所述的处理土壤重金属污染的微生物菌剂，不同之处在于，
将卷枝毛霉替换为总状毛霉(Mucor racemosus)，该菌株来源于中国典型培养物保藏中心，菌种编号CCTCC NO：M201026。
实验例1
将2/3的客土和1/3营养土混合后，分别添加重金属污染物背景值的10、100、500、1000倍后，模拟复合重金属污染土壤，平衡2-3天。分别施用实施例1-3及对比例1-3所述的复合菌剂，施用量为6kg/亩，翻耕混匀后间隔7天施加一次，连续施用5次。每隔七天观测土壤中重金属含量的变化和土壤的理化性质。施加复合菌剂后，土壤中重金属含量显著降低。结果如下表所示：
表1
土壤改良后，种植龙葵，地肤，碱蓬三种植物，定期监测植物的各项生理指标，植物长势良好。该复合菌剂不仅能够有效地治理重金属污染，而且能够促进植物的生长。
实验例2
黄三角拥有未利用土地约810万亩，其中盐碱地就占了270万亩，在东营利津北部,垦利东北部以及广绕东部还有河口区等地的土壤都被盐碱化。东营盐碱地不仅土壤环境恶劣，而且存在较为严重的重金属污染。通过地表水体径流、大气飘尘，污染周围的土地、水域和大气，对周围环境造成严重影响。分别施用实施例1-3及对比例1-3所述的复合菌剂，施用量为7kg/亩，翻耕混匀后间隔7天施加一次，连续施用5次。施加复合菌剂后，土壤的透气性显著增加，土壤容重从1.49g/m3下降到1.24g/m3，达到了正常土壤标准(1.1-1.4g/m3)。土壤的保水性显提高，土壤的含水量从15％提高到21％。在对比例中没有显著变化。土壤中重金属含量显著降低，第30天时检测重金属去除率，结果如表2所述：
表2
结果表明，施用该复合菌剂后，微生物能够适应碱性环境，保持良好的生存状况。施用复合菌剂后，尾矿土中重金属含量显著降低，土壤的理化参数均得到一定的提高。
实验例3
矿山开采过程中的废弃物(尾矿，剥离岩等)需要大面积的堆置场地，在鞍山市城市周边形成了占地791万m2的废弃排土场和252万m2的废弃尾矿库。导致对土地的过量占用和对堆置场原有生态***的破坏；其影响面将远远超过废弃物堆置场的地域和空间。尾矿区土壤呈碱性，土壤贫瘠，保水性差，重金属污染较为严重，难于修复。在尾矿区分别施用实施例1-3及对比例1-3所述的复合菌剂，施用量为8kg/亩，翻耕混匀后间隔7天施加一次,连续施用5次。第30天时检测重金属去除率。施加复合菌剂后，土壤的透气性显著增加，土壤容重从1.57g/m3下降到1.33g/m3，达到了正常土壤标准(1.1-1.4g/m3)。土壤的保水性显提高，土壤的含水量从9％提高到18％。该指标在对比例中没有显著变化。土壤中重金属含量显著降低，第30天时检测重金属去除率，结果如表3所述：
表3
结果表明，施用该复合菌剂后，微生物生存状况良好，能够适应恶劣的环境。施用复合菌剂后，尾矿土中重金属含量显著降低。该复合菌剂对重金属污染的土壤有较好的修复效果。
结果分析
通过实施例的对比发现，该复合菌剂对五种重金属具有较好的去除效果。高山被孢霉(Mortierella alpina)、棘孢木霉(Trichoderma asperellum)与卷枝毛霉(Mucorcircinelloides)最佳比例为1:1.5:3。
通过对比例可以发现，该专利中的高山被孢霉(Mortierella alpina)、棘孢木霉(Trichoderma asperellum)与卷枝毛霉(Mucor circinelloides)之间具有相互协同的作用，可以显著提高重金属的去除率。
所述仅为本发明的较佳实施例，不能以此限定本发明的实施条件和实施范围。依本发明申请专利范围及发明说明内容所作的修饰与变化，仍属本发明专利涵盖的范围。

Claims (11)

1.一种处理土壤重金属污染的微生物菌剂，其特征在于，由如下重量份的原料组成：
稻壳50～80份、猪粪20～50份、鸡粪20～50份，大豆粉30～60份、单细胞蛋白4～6份，高山被孢霉(Mortierella alpina)发酵液3～5份，棘孢木霉(Trichoderma asperellum)发酵液1～3份，卷枝毛霉(Mucor circinelloides)发酵液0.5～1.5份；
所述高山被孢霉(Mortierella alpina)发酵液中的菌体浓度为0.4×108cfu/ml；棘孢木霉(Trichoderma asperellum)发酵液中的菌体浓度为1.0×108cfu/ml；卷枝毛霉(Mucorcircinelloides)发酵液中的菌体浓度为3.6×108cfu/ml；微生物菌剂中菌体总含量为6.8×108cfu/g。
2.如权利要求1所述的处理土壤重金属污染的微生物菌剂，其特征在于，所述的高山被孢霉(Mortierella alpina)、棘孢木霉(Trichoderma asperellum)与卷枝毛霉(Mucorcircinelloides)活菌体数量之比为1：(1.0～2.5):(1.8～3.6)。
3.如权利要求2所述的处理土壤重金属污染的微生物菌剂，其特征在于，所述的高山被孢霉(Mortierella alpina)、棘孢木霉(Trichoderma asperellum)与卷枝毛霉(Mucorcircinelloides)活菌体数量之比为1:1.5:3。
4.如权利要求1所述的处理土壤重金属污染的微生物菌剂，其特征在于，所述高山被孢霉(Mortierella alpina)为高山被孢霉(Mortierella alpina)ME-AA01，来源于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，菌种编号CCTCC NO:M207067。
5.如权利要求1所述的处理土壤重金属污染的微生物菌剂，其特征在于，所述棘孢木霉(Trichoderma asperellum)为棘孢木霉(Trichoderma asperellum)PD-19，来源于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，菌种编号CCTCC NO:M2013113。
6.如权利要求1所述的处理土壤重金属污染的微生物菌剂，其特征在于，所述卷枝毛霉(Mucor circinelloides)来源于荷兰微生物菌种保藏中心(CBS)，菌种编号CBS131818。
7.权利要求1所述处理土壤重金属污染的微生物菌剂的制备方法，其特征在于，步骤如下：
(1)将高山被孢霉(Mortierella alpina)经一级种子培养、二级种子培养和扩大培养，制得0.4×108cfu/ml的高山被孢霉(Mortierella alpina)发酵液；
(2)将棘孢木霉(Trichoderma asperellum)经一级种子培养、二级种子培养和扩大培养，制得1.0×108cfu/ml的棘孢木霉(Trichoderma asperellum)发酵液；
(3)将卷枝毛霉(Mucor circinelloides)经一级种子培养、二级种子培养和扩大培养，制得3.6×108cfu/ml的卷枝毛霉(Mucor circinelloides)发酵液；
(4)将步骤(1)制得的高山被孢霉(Mortierella alpina)发酵液、步骤(2)制得的棘孢木霉(Trichoderma asperellum)发酵液、步骤(3)制得的卷枝毛霉(Mucorcircinelloides)发酵液与稻壳、猪粪、鸡粪，大豆粉和单细胞蛋白混合均匀，室温条件下放置4～6周，每周翻动2～4次，干燥至含水率低于20％，制得微生物菌剂。
8.如权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)、(2)和步骤(3)中，一级种子培养条件为：光照1000～3000LX、培养温度25～30℃、厌氧培养3～4天；
所述一级种子培养的培养基每升组分如下：
葡萄糖15～20g，蛋白胨6～10g，酵母浸膏1～3g，磷酸氢二钾0.2～0.8g，硫酸镁0.01～0.03g，氯化钙0.1～0.29g。
9.如权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)、(2)和步骤(3)中，二级种子培养条件为：光照1000～3000LX、培养温度25～30℃、厌氧培养3～4天；
所述二级种子培养的培养基每升组分如下：
葡萄糖15～20g，蛋白胨6～10g,酵母浸膏1～3g，磷酸氢二钾0.2～0.8g，硫酸镁0.01～0.03g，氯化钙0.1～0.29g。
10.如权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)、(2)和步骤(3)中，扩大培养条件为：培养温度28～30℃、黑暗好氧培养6～8天，每小时通气比例为液体与气体体积比1:0.5，搅拌转速200～300r/min；
所述扩大培养的培养基每升组分如下：
葡萄糖15～20g，蛋白胨6～10g,酵母浸膏1～3g，磷酸氢二钾0.2～0.8g，硫酸镁0.01～0.03g，氯化钙0.1～0.29g。
11.权利要求1所述处理土壤重金属污染的微生物菌剂的应用，其特征在于，步骤如下：将处理土壤重金属污染的微生物菌剂作为基肥直接施用于重金属污染的土壤中，翻耕混匀，施用量为8～12g/平方米，在温度29～31℃、pH7.5～8.5的条件下处理33～38天。
CN201610570018.4A 2016-07-19 2016-07-19 一种处理土壤重金属污染的菌剂及其制备方法与应用 Active CN106424125B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610570018.4A CN106424125B (zh) 2016-07-19 2016-07-19 一种处理土壤重金属污染的菌剂及其制备方法与应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610570018.4A CN106424125B (zh) 2016-07-19 2016-07-19 一种处理土壤重金属污染的菌剂及其制备方法与应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN106424125A CN106424125A (zh) 2017-02-22
CN106424125B true CN106424125B (zh) 2019-03-08

Family

ID=58184150

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201610570018.4A Active CN106424125B (zh) 2016-07-19 2016-07-19 一种处理土壤重金属污染的菌剂及其制备方法与应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN106424125B (zh)

Families Citing this family (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109022286A (zh) * 2017-06-12 2018-12-18 天津科技大学 一种用于降低粮果蔬重金属含量的发酵菌剂的制备方法
CN108277166B (zh) * 2018-03-27 2021-11-30 山东农业大学 一株棘孢木霉及其在铅污染土壤修复中的应用
CN110653251A (zh) * 2018-06-28 2020-01-07 山东大学 一种植物-微生物联合原位修复重金属污染土壤的方法
CN109258324A (zh) * 2018-09-20 2019-01-25 鞍钢集团矿业有限公司 一种用于矿山护坡绿化的喷播物料及其应用
CN109258323A (zh) * 2018-09-20 2019-01-25 鞍钢集团矿业有限公司 一种用于矿山排岩场裸露废石边坡的绿化喷播方法
CN109127722A (zh) * 2018-09-20 2019-01-04 鞍钢集团矿业有限公司 一种利用菌根化植物原位重金属污染修复方法
CN109168391A (zh) * 2018-09-20 2019-01-11 鞍钢集团矿业有限公司 一种铁尾矿土壤化的方法
CN109351770A (zh) * 2018-09-20 2019-02-19 鞍钢集团矿业有限公司 一种含尾矿和煤灰的陶粒及其制备方法与应用
CN109174935A (zh) * 2018-09-20 2019-01-11 鞍钢集团矿业有限公司 一种利用微生物菌剂与改良剂对尾矿种植绿化的方法
CN109136107A (zh) * 2018-09-20 2019-01-04 鞍钢集团矿业有限公司 一种微生物菌剂及其钝化土壤中重金属的应用
CN110064648B (zh) * 2019-03-27 2021-05-07 中国矿业大学 一种重金属污染土壤加药混合固化装置
CN110814003B (zh) * 2019-11-19 2020-07-28 江苏省地质调查研究院 一种重金属污染耕地发酵有机肥原位钝化方法
CN114700362A (zh) * 2022-03-08 2022-07-05 山东大学 一种利用微生物菌剂防治土壤重金属污染的方法

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101372688A (zh) * 2008-10-20 2009-02-25 浙江大学 用于污染土壤修复的微生物固定化材料的制备及使用方法
CN101402933A (zh) * 2008-10-30 2009-04-08 河南省龙腾高科实业有限公司 用多菌种混合发酵生产土壤修复菌剂及制备方法
CN105154334A (zh) * 2015-07-23 2015-12-16 新疆惠森生物技术有限公司 一种白地霉及其在温室大棚土壤修复中的应用
CN105441361A (zh) * 2015-12-29 2016-03-30 中国电建集团中南勘测设计研究院有限公司 一种用于重金属污染水体治理的菌种及微生物菌剂的制备方法

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9139458B2 (en) * 2013-03-15 2015-09-22 Janet Angel Compositions and methods of use

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101372688A (zh) * 2008-10-20 2009-02-25 浙江大学 用于污染土壤修复的微生物固定化材料的制备及使用方法
CN101402933A (zh) * 2008-10-30 2009-04-08 河南省龙腾高科实业有限公司 用多菌种混合发酵生产土壤修复菌剂及制备方法
CN105154334A (zh) * 2015-07-23 2015-12-16 新疆惠森生物技术有限公司 一种白地霉及其在温室大棚土壤修复中的应用
CN105441361A (zh) * 2015-12-29 2016-03-30 中国电建集团中南勘测设计研究院有限公司 一种用于重金属污染水体治理的菌种及微生物菌剂的制备方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN106424125A (zh) 2017-02-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN106424125B (zh) 一种处理土壤重金属污染的菌剂及其制备方法与应用
Kheirfam et al. Controlling rainfall-induced soil loss from small experimental plots through inoculation of bacteria and cyanobacteria
CN104450597B (zh) 一种石油降解菌固体菌剂的制备方法及由其制备的固体菌剂修复石油污染的土壤的方法
CN106906170A (zh) 复合微生物菌剂及其制备方法和应用
CN107287134B (zh) 一株假单胞菌及其双功能酶制剂的制备方法与应用
CN103602616B (zh) 一种解淀粉芽孢杆菌y10及其应用
CN105170627A (zh) 一种微生物-植物联合修复镉污染土壤的方法
CN102391876A (zh) 一种复合生物土壤改良剂及其应用
CN102409014B (zh) 一株冬枣根际促生枯草芽孢杆菌及其应用
KR101122766B1 (ko) 혼합미생물（ｂｍ－ｓ－1）을 포함한 미생물 제제, 이를 이용한 하천?호수의 생물학적 처리방법 및 슬러지 자가 소화공정
CN102277312A (zh) 一株低温降解多环芳烃菌株及其在石油烃污染场地地下水生物修复中的应用
CN109182178A (zh) 一株具有铬耐受和Cr(VI)去除能力的菌株及其在原位修复中轻度铬污染土壤中的应用
CN106011039B (zh) 一株降解土霉素的氨基杆菌及其应用
CN102477403A (zh) 一株邻苯二甲酸酯类化合物降解菌及其菌剂的生产方法
CN104673715A (zh) 对镉具有固定效应并能促进植物生长的肠杆菌及其应用
CN103736725A (zh) 一种土壤修复方法及用于该土壤修复方法的生物制剂、制备方法及用途
CN108949587B (zh) 微生物菌剂，有机垃圾沙化土壤修复剂及其制备方法与应用
CN102796671A (zh) 一种降解辛硫磷的淡紫拟青霉菌株及其应用
CN108893421A (zh) 一种纺锤形赖氨酸芽孢杆菌及其在矿区复垦生态重建中的应用
CN105316268A (zh) 一株产赤霉素的短小芽孢杆菌及其在降解石油中的应用
CN103045496A (zh) 邻苯二甲酸酯类环境激素高效降解菌剂的制备方法
CN110093292A (zh) 一种用于处理生活污泥的复合生物制剂及制备方法和处理方法
CN106834143B (zh) 微生物菌剂，绿化垃圾土壤修复剂及其应用
CN103305443A (zh) 一种修复含氨氮工业污水的制剂及方法
CN109337825A (zh) 一株北京拟青霉菌株lyz7及其应用

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant