CN106083697A - 药桑中1‑脱氧野尻霉素的提取方法 - Google Patents
药桑中1‑脱氧野尻霉素的提取方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN106083697A CN106083697A CN201610491943.8A CN201610491943A CN106083697A CN 106083697 A CN106083697 A CN 106083697A CN 201610491943 A CN201610491943 A CN 201610491943A CN 106083697 A CN106083697 A CN 106083697A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- dnj
- medicine
- mulberry
- medicine mulberry
- extraction
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
- C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
- C07D211/06—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D211/36—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
- C07D211/40—Oxygen atoms
- C07D211/44—Oxygen atoms attached in position 4
- C07D211/46—Oxygen atoms attached in position 4 having a hydrogen atom as the second substituent in position 4
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
- G01N30/06—Preparation
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/88—Integrated analysis systems specially adapted therefor, not covered by a single one of the groups G01N30/04 - G01N30/86
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N2030/022—Column chromatography characterised by the kind of separation mechanism
- G01N2030/027—Liquid chromatography
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
- G01N30/06—Preparation
- G01N2030/062—Preparation extracting sample from raw material
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
- G01N30/06—Preparation
- G01N2030/067—Preparation by reaction, e.g. derivatising the sample
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/88—Integrated analysis systems specially adapted therefor, not covered by a single one of the groups G01N30/04 - G01N30/86
- G01N2030/8809—Integrated analysis systems specially adapted therefor, not covered by a single one of the groups G01N30/04 - G01N30/86 analysis specially adapted for the sample
- G01N2030/884—Integrated analysis systems specially adapted therefor, not covered by a single one of the groups G01N30/04 - G01N30/86 analysis specially adapted for the sample organic compounds
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
本发明公开了药桑中1‑脱氧野尻霉素的提取方法,包括以下步骤:1)将药桑干燥粉末加入乙醇,超声提取,提取后离心,得到残渣和上清液;2)重复步骤1)的提取离心过程;3)将两次上清液合并,得到药桑初提取物;4)将药桑初提取物置于离心机中再次离心,并以微孔滤膜过滤,提取得到1‑脱氧野尻霉素;5)将1‑脱氧野尻霉素,以6‑氨基喹啉基‑N‑羟基琥珀酰亚氨基甲酸酯试剂进行柱前衍生化,经过高效液相色谱荧光法对DNJ进行质量控制。本发明提供的药桑中DNJ的提取方法,以药桑果实为研究对象,采用单因素多水平正交试验确定药桑中DNJ的提取工艺,用高效液相色谱结合荧光检测法其中DNJ含量,为新疆药桑的药用资源开发提供理论依据。
Description
技术领域
本发明涉及生物碱提取技术领域,具体涉及药桑中1-脱氧野尻霉素的提取方法。
背景技术
药桑在植物分类学上属黑桑种 (Morus nigra Linn.),是自然界极为罕见的稀贵桑树半栽培半野生资源,也是我国唯一的黑桑种,栽培适应地只限于新疆。药桑中含有大量活性物质,这些活性物质包括黄酮类化合物、多糖类化合物和生物碱等。桑树中的生物碱成分主要是野尻霉素(nojiri-mycin)及其衍生物。野尻霉素最早于1965年从链霉菌R-468的发酵液中分离得到,1966年结构被鉴定。随后人工合成1-脱氧野尻霉素(1-de-oxynojirimyein,DNJ),化学名为(2R,3R,4R,5S)-2-(羟甲基)-3,4,5一三羟基哌啶,是一种天然糖的结构类似物。目前文献多从桑叶及桑枝中提取DNJ用于药理研究,多药桑果实中DNJ的提取及含量测定尚无相关报道。
发明内容
本发明的目的就是针对上述现有技术中的缺陷,提供了药桑中1-脱氧野尻霉素的提取方法。
为了实现上述目的,本发明提供的技术方案为:药桑中1-脱氧野尻霉素的提取方法,包括以下步骤:
1)将药桑干燥粉末置于具塞锥形瓶中,加入乙醇,超声提取,提取后置于离心机中进行离心,得到残渣和第一次上清液;
2)将步骤1)得到的残渣依照步骤1)的方法再次提取一次,得到第二次上清液;
3)将步骤1)的第一次上清液和步骤2)的第二次上清液合并,得到药桑初提取物;
4)将步骤3)得到的药桑初提取物置于离心机中再次离心,并以微孔滤膜过滤,提取得到1-脱氧野尻霉素;
5)将步骤4)得到的1-脱氧野尻霉素,以6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚氨基甲酸酯试剂进行柱前衍生化,经过高效液相色谱荧光法对1-脱氧野尻霉素进行质量控制。
进一步的,上述的药桑中1-脱氧野尻霉素的提取方法,所述步骤1)和步骤2)中,超声提取中,药桑干燥粉末或残渣与乙醇的料液比为1g:150ml,超声功率为150w,提取时间为10min;离心转速为10000r/min,离心时间为20min。
进一步的,上述的药桑中1-脱氧野尻霉素的提取方法,所述步骤4)中,药桑初提取物的离心转速为10000r/min,离心时间为20min;微孔滤膜的孔径为0.22μm。
进一步的,上述的药桑中1-脱氧野尻霉素的提取方法,所述步骤5)中,柱前衍生化的过程为:取步骤4)得到的1-脱氧野尻霉素提取液10μl于2ml的离心管中,加80μl k3BO3缓冲液,涡旋30s,使提取液充分混匀于Buffer中,再加入10μl 6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚氨基甲酸酯的乙腈溶液,混匀后于室温反应5min,用0.22μm的一次性针头过滤器过滤后,取10μl进样分析。
本发明的有益效果为:本发明提供的药桑中1-脱氧野尻霉素的提取方法,从新疆药桑优势资源入手,以药桑果实为研究对象,采用单因素多水平正交试验确定药桑中DNJ的提取工艺,进一步用高效液相色谱结合荧光检测法其中DNJ含量,为新疆药桑的药用资源开发提供理论依据,特别是为新疆药桑果实中DNJ含量测定填补空白。
附图说明
图1为对照品和供试品的色谱结果。
其中,A为对照品,B为供试品。
图2为不同提取溶剂对药桑DNJ提取的影响。
图3为不同料液比对药桑DNJ提取的影响。
图4为不同时间对药桑DNJ提取的影响。
图5为不同功率对药桑DNJ提取的影响。
图6为提取次数对药桑DNJ提取的影响。
具体实施方式
实施例1:
1、仪器与试剂:
1.1材料与试剂:
药桑在成熟期采自喀什市20120810-1,由新疆医科大学药学院帕丽达教授鉴定为药桑黑桑种。
试剂:1-脱氧野尻霉素(中国药品生物制品检定所,批号:MUST-11050502) ;盐酸;正丁醇;冰乙酸;乙酸铵(分析纯,天津市福晨化学试剂厂);6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚氨基甲酸酯(AQC)衍生试剂(Waters公司)甲醇;乙腈(Fisher);超纯水(艾科);
1.2仪器:
高效液相色谱仪LC-20AB(日本岛津,配有RF-20A荧光检测器,Lcsolution色谱工作站),岛津色谱柱Shimpack VP-ODS,(4.6mm×250mm,5μm,);高功率数控超声波清洗器(KQ-500PE型,昆山市超声仪器有限公司);PH计(雷磁PHSJ-3F);离心机(TΜL-5A,上海菲恰尔分析仪器有限公司);分析天平(BS110S );
2. DNJ对照品溶液的配制及衍生化:
2.1DNJ对照品溶液的配制:
精密称定DNJ标准品5.00mg于5ml容量瓶中,加入水定容至刻度,摇匀得1mg/mL的DNJ标准液,备用。
2.2 DNJ的衍生化:
取上述样品提取液10μl于2ml的离心管中,加80μl k3BO3缓冲液,涡旋30s,使样品充分混匀于Buffer中,再加入10μl AQC乙腈溶液,混匀后于室温反应5min,用0.22um的一次性针头过滤器过滤后,取10μl进样分析。
3供试品溶液的制备及衍生化:
3.1供试品溶液的制备:
精密称定药桑干燥粉末0.1g至具塞锥形瓶中,精密加入乙醇15ml,超声(150w),10min,冷却,置离心机转速10000r/min离心20min,取上清液。残渣按上述方法再提取一次, 合并上清液, 备用。药桑提取液转移至离心管中,置离心机转速10000r/min离心20min,用0.22μm微孔滤膜过滤,取续滤液作为供试品溶液。
4方法与结果:
4.1吸收波长的选择:
取对照品衍生后的反应液,用K3BO3扩大10倍体积于微量比色皿中在200-700nm波长范围内扫描,结果在250nm波长处有最大吸收。
4.2色谱条件:
采用岛津HPLC荧光法测定,色谱柱:岛津Shimpack ODS c18(4.6*250mm,5um);流动相:0.02mmol/L乙酸铵(Ph6.5):乙腈(体积比为90 :10);最大激发波长为 250 nm;最大发射波长为 395 nm。流速为1. 0 mL/ min,进样量为10μl。结果如图1所示。
4.3 DNJ提取的单因素考察:
4.3.1提取溶剂的考察:
称取药桑粉末9份,每份0.1g,置于具塞锥形瓶,分为A、B、C三组,每组3份。A组每份加20ml水,B组每份加20ml 65%乙醇,C组每份加20ml 0.05的盐酸溶液,密塞,称重,置超声波清洗仪中超声提取20min,功率200W,离心(5000 r/min,离心10min),将滤渣进行二次提取,条件同第一次,合并两次滤液,冷却至室温,再称定重量,补足减失的重量,摇匀,过0.22um微孔滤膜。
按 3.3.2色谱条件项下色谱条件进行测定,比较不同溶剂对DNJ提取的影响。结果如图2和表1所示,65%乙醇的提取率最高。
。
4.3.2溶剂量的考察:
称取药桑粉末15份,每份0.1g,分为5组,每组3份,每组依次加65%乙醇5ml、10ml、15ml、20ml、25ml,将提取次数固定为1次,提取时间固定为20min,密塞,称重,置超声波清洗仪中超声提取20min,冷却至室温,再称定重量,用乙醇补足减失的重量,摇匀,过0.22um微孔滤膜,按 3.3.2色谱条件项下色谱条件进行测定,考察不同料液比对DNJ提取的影响。如表2和图3所示,料液比对DNJ的提取率有一定影响,乙醇的用量太小会影响DNJ的提取, 乙醇的用量太大会造成浪费,当加15ml乙醇提取后DNJ含量反而减少。
。
4.3.3提取时间的考察:
称取药桑粉末15份,每份0.1 g,分为5组,每组3份,每组按10、20、30、40、50min提取,将乙醇量固定为20ml,提取次数固定为1次,提取液冷却至室温,再称定重量,用乙醇补足减失的重量,摇匀,过0.22um微孔滤膜,按 3.3.2色谱条件项下色谱条件进行测定,考察不同提取时间对DNJ提取的影响。如表3和图4所示,DNJ的提取率随提取时间的增加而增加,但提取时间增加到30min以后,DNJ提取含量变化不大。
。
4.3.4提取功率的考察
称取药桑粉末9份,每份0.1 g,分3组,将乙醇量固定为20ml,提取时间固定为10min,提取次数固定为1次,在实验室条件下,选择了60W、105W、150W、200W和250W 5个功率进行超声提取, 提取液冷却至室温,再称定重量,用乙醇补足减失的重量,摇匀,过0.22um微孔滤膜,按3.3.2色谱条件项下色谱条件进行测定,考察不同提取功率对DNJ提取的影响,结果如表4和图5所示。当超声仪的工作频率为150W时,提取率最高。
。
4.3.5提取次数的考察
称取药桑粉末3份,每份0.1 g,提取时间固定为20min,第一次提取加乙醇10ml,第二次提取加乙醇10ml,第三次提取加乙醇10ml,每次提取液单独测量,提取液冷却至室温,再称定重量,用乙醇补足减失的重量,摇匀,置离心机5000r/min离心10min,过0.22um微孔滤膜,按 3.3.2色谱条件项下色谱条件进行测定,考察不同提取次数对DNJ提取的影响。如表5和图6所示,DNJ的提取率随提取次数的增加而增加,但提取次数增加到2次以后,DNJ含量变化不明显。
。
4.4正交试验
根据单因素试验的结果,选择影响DNJ提取效果各因素中有意义的水平做正交试验,对结果进行极差分析,以确定最佳提取条件。以提取时间(A)、提取次数(B) 、料液比(C) 、功率(D) 4个因素,每个因素选用3个水平,用L9(34)正交表进行试验。因素水平见表6,正交设计及数据处理如表7所示。
。
。
。
由表7可看出,影响DNJ得率的因素主次顺序为:料液比、超声功率、提取次数和超声时间。较佳的工艺条件为A3C2D2B1,即料液比1:150,超声功率150W, 提取次数2次,超声时间10min。
4.5最佳提取工艺条件的验证:
按上述最佳提取工艺条件A3C2D2B1进行3次验证试验,其结果如表8所示。
。
由验证结果可知,按最佳工艺条件提取得到的DNJ含量均高于其它各正交试验值,同时其RSD=1.46%(n=3),说明此工艺条件稳定、可行。
最后应说明的是:以上所述仅为本发明的优选实施例而已,并不用于限制本发明,尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明,对于本领域的技术人员来说,其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改,或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (4)
1.药桑中1-脱氧野尻霉素的提取方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)将药桑干燥粉末置于具塞锥形瓶中,加入乙醇,超声提取,提取后置于离心机中进行离心,得到残渣和第一次上清液;
2)将步骤1)得到的残渣依照步骤1)的方法再次提取一次,得到第二次上清液;
3)将步骤1)的第一次上清液和步骤2)的第二次上清液合并,得到药桑初提取物;
4)将步骤3)得到的药桑初提取物置于离心机中再次离心,并以微孔滤膜过滤,提取得到1-脱氧野尻霉素;
5)将步骤4)得到的1-脱氧野尻霉素,以6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚氨基甲酸酯试剂进行柱前衍生化,经过高效液相色谱荧光法对1-脱氧野尻霉素进行质量控制。
2.根据权利要求1所述的药桑中1-脱氧野尻霉素的提取方法,其特征在于,所述步骤1)和步骤2)中,超声提取中,药桑干燥粉末或残渣与乙醇的料液比为1g:150ml,超声功率为150w,提取时间为10min;离心转速为10000r/min,离心时间为20min。
3.根据权利要求1所述的药桑中1-脱氧野尻霉素的提取方法,其特征在于,所述步骤4)中,药桑初提取物的离心转速为10000r/min,离心时间为20min;微孔滤膜的孔径为0.22μm。
4.根据权利要求1所述的药桑中1-脱氧野尻霉素的提取方法,其特征在于,所述步骤5)中,柱前衍生化的过程为:取步骤4)得到的1-脱氧野尻霉素提取液10μl于2ml的离心管中,加80μl k3BO3缓冲液,涡旋30s,使提取液充分混匀于Buffer中,再加入10μl 6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚氨基甲酸酯的乙腈溶液,混匀后于室温反应5min,用0.22μm的一次性针头过滤器过滤后,取10μl进样分析。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201610491943.8A CN106083697A (zh) | 2016-06-29 | 2016-06-29 | 药桑中1‑脱氧野尻霉素的提取方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201610491943.8A CN106083697A (zh) | 2016-06-29 | 2016-06-29 | 药桑中1‑脱氧野尻霉素的提取方法 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN106083697A true CN106083697A (zh) | 2016-11-09 |
Family
ID=57214777
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201610491943.8A Pending CN106083697A (zh) | 2016-06-29 | 2016-06-29 | 药桑中1‑脱氧野尻霉素的提取方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN106083697A (zh) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN109100457A (zh) * | 2018-10-26 | 2018-12-28 | 劲牌生物医药有限公司 | 一种桑叶提取物中脱氧野尻霉素含量的检测方法 |
CN110632187A (zh) * | 2018-11-23 | 2019-12-31 | 西北农林科技大学 | 一种柱前衍生高效液相色谱-荧光检测器测定荞麦中d-荞麦碱的方法 |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN103274992A (zh) * | 2013-06-14 | 2013-09-04 | 扬州大学 | 一种联合膜分离和柱层析技术制备高纯度1-脱氧野尻霉素的方法 |
CN105153015A (zh) * | 2015-08-29 | 2015-12-16 | 合肥华方医药科技有限公司 | 一种从桑白皮生物总碱中分离微量生物碱单体的方法 |
CN105503700A (zh) * | 2015-12-30 | 2016-04-20 | 重庆骄王天然产物股份有限公司 | 桑叶中1-脱氧野尻霉素的提取方法 |
-
2016
- 2016-06-29 CN CN201610491943.8A patent/CN106083697A/zh active Pending
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN103274992A (zh) * | 2013-06-14 | 2013-09-04 | 扬州大学 | 一种联合膜分离和柱层析技术制备高纯度1-脱氧野尻霉素的方法 |
CN105153015A (zh) * | 2015-08-29 | 2015-12-16 | 合肥华方医药科技有限公司 | 一种从桑白皮生物总碱中分离微量生物碱单体的方法 |
CN105503700A (zh) * | 2015-12-30 | 2016-04-20 | 重庆骄王天然产物股份有限公司 | 桑叶中1-脱氧野尻霉素的提取方法 |
Non-Patent Citations (4)
Title |
---|
和田年鉴编委会: "《和田年鉴2007》", 31 December 2007, 新疆人民出版社 * |
李宇亮等: "1-脱氧野尻霉素提取分离方法研究", 《应用化工》 * |
王鹏等: "桑树DNJ 提取、纯化和检测的研究进展", 《实验室研究与探索》 * |
谢慧明等: "柱前衍生化高效液相色谱-荧光检测法测定桑叶中的1-脱氧野尻霉素", 《色谱》 * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN109100457A (zh) * | 2018-10-26 | 2018-12-28 | 劲牌生物医药有限公司 | 一种桑叶提取物中脱氧野尻霉素含量的检测方法 |
CN110632187A (zh) * | 2018-11-23 | 2019-12-31 | 西北农林科技大学 | 一种柱前衍生高效液相色谱-荧光检测器测定荞麦中d-荞麦碱的方法 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN106950327B (zh) | 复杂基质中贝类毒素的筛查与确证方法 | |
Yi et al. | Tissue-specific metabolite profiling of alkaloids in Sinomenii Caulis using laser microdissection and liquid chromatography–quadrupole/time of flight-mass spectrometry | |
CN104535677B (zh) | 一种基于活性筛选的牡丹皮药材及制剂检测方法 | |
CN104330489B (zh) | 一种疏风解毒胶囊的检测方法 | |
CN103197027A (zh) | 芪蛭通络胶囊的质量控制方法 | |
CN102091132A (zh) | 秦皮药材或其提取物中秦皮甲素、秦皮乙素、秦皮苷和秦皮素的检测方法 | |
Yang et al. | Screening vasoconstriction inhibitors from traditional Chinese medicines using a vascular smooth muscle/cell membrane chromatography‐offline‐liquid chromatography‐mass spectrometry | |
CN106770839B (zh) | 一种山豆根中黄酮类化合物的提取检测方法 | |
CN106083697A (zh) | 药桑中1‑脱氧野尻霉素的提取方法 | |
CN101703611A (zh) | 当归益血口服液的质量检测方法 | |
CN101852787B (zh) | 一种中药活性筛选方法 | |
CN108760945A (zh) | 一种芪胶升白胶囊的检测方法 | |
CN108037222A (zh) | 白芍对照提取物及其制备方法和应用 | |
CN103267818A (zh) | 知母药材hplc-elsd指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱 | |
CN107389821A (zh) | 一种测定藿香正气口服液中有效成分的方法 | |
CN102068627A (zh) | 一种中药制剂心脑静片的质量控制方法 | |
CN104931594B (zh) | 一种五味子中5-羟甲基糠醛的含量检测方法 | |
CN102879516A (zh) | 补阳还五汤的鉴别和含量测定方法 | |
CN109134583A (zh) | 利用离子液体从鹅掌柴叶中提取三萜类化合物的方法 | |
Chen et al. | Hollow‐fiber double‐solvent synergistic microextraction with high‐performance liquid chromatography for the determination of antitumor alkaloids in Coptis chinensis | |
CN110376291A (zh) | 一种黄连对照提取物及其制备方法和应用 | |
CN105004833A (zh) | 一种治疗急性痛风性关节炎、痛风的中药制剂的检测方法 | |
CN104849383B (zh) | 快速溶剂萃取-凝胶色谱净化-lc/ms/ms结合测定蜂花粉中硝基咪唑类药物的方法 | |
CN106093264A (zh) | 一种草莓叶黄素循环组分的测定方法 | |
CN102028760A (zh) | 一种杠板归药材的质量检测方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20161109 |
|
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |