CN106047825A - 一种三七果蔬酶及其制备方法 - Google Patents

Abstract

一种三七果蔬酶的制备方法，属于保健食品领域，包括以下步骤：制备混合菌液步骤、混料步骤、发酵步骤和过滤步骤。混料步骤包括固体曲、果蔬和混合菌液的混合；发酵步骤包括发酵材料和糖液的混合、密封、发酵。该方法操作简便、实用性强，能将三七中的有效成分成功融入到果蔬酶之中。本发明还涉及一种由上述方法制得的三七果蔬酶，该三七果蔬酶中的三七总皂苷含量高，营养丰富，易于消化吸收，可有效提高和发挥三七的医疗保健功效。

Description

一种三七果蔬酶及其制备方法

技术领域

本发明涉及保健食品领域，且特别涉及一种三七果蔬酶及其制备方法。

背景技术

三七又名田七，是一种药用价值极高的中药材。三七含有人参皂苷、三七皂苷和黄酮类等数十种功能性物质成分，现代药理学研究表明三七，具有止血、保护心肌细胞、保护脑组织、降血脂、降血糖、抗血栓、增强免疫力、消肿抗炎、抗纤维化、抗肿瘤、抗疲劳、消除氧自由基抗氧化等作用。

三七作为保健品的食用方法最多的是将三七粉碎成粉状直接食用，或者再将粉末制成丸粒再食用，由于三七所含的有效成分在消化道难于完全的被消化吸收，导致三七的药用保健效果下降，造成极大的浪费。

果蔬酶是借由发酵作用，使蔬果分解成较小分子的营养素，可直接被人体迅速吸收、参与调节新陈代谢过程。在现有技术中，果蔬酶被广泛作为人体酶的补充剂，应用于医疗、保健、美容等领域，但是在果蔬酶中引入三七有效成分的做法还未见报道。

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种三七果蔬酶的制备方法，该方法操作简单，效果稳定，能高效地提取三七中的有效成分并融入到果蔬酶中。

本发明的第二目的在于提供一种三七果蔬酶，该三七果蔬酶中三七有效成分含量高，易于消化吸收，能有效提高和发挥三七的医疗保健功效。

本发明解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的。

本发明提出一种三七果蔬酶的制备方法，其包括以下步骤：

制备混合菌液步骤：将酵母菌液和乳酸菌液按重量比1:0.5～2混合均匀得到混合菌液；

混料步骤：取占第一发酵材料重量的2～5％的混合菌液接种到第一发酵材料中并混合均匀，得到第二发酵材料；

第一发酵材料为固体曲发酵材料或者复合酶发酵材料；

固体曲发酵材料由黑曲霉固体曲、枯草芽孢杆菌固体曲和果蔬捣碎混匀后得到，其中按重量计：黑曲霉固体曲：枯草芽孢杆菌固体曲：果蔬＝1～3:1:10～30；黑曲霉固体曲由黑曲霉菌液与三七粉按重量比1:1～20混合培养得到；枯草芽孢杆菌固体曲由枯草芽孢杆菌液与三七粉按重量比1:1～20混合培养得到；

复合酶发酵材料由果胶酶、纤维素酶和三七粉混合制成，其中，按三七粉重量计使用果胶酶100～300U/g，纤维素酶10～30U/g，三七粉与果蔬的重量比为1:10～30；

发酵步骤：将第二发酵材料与食用糖液混合均匀后得到发酵液，将发酵液密封发酵60～120天；

过滤步骤：对经发酵后的发酵液进行过滤除去发酵液中的发酵残渣得到三七果蔬酶。

本发明提出一种三七果蔬酶，其采用上述的制备方法制得。

本发明实施例的一种三七果蔬酶及其制备方法的有益效果是：三七含有人参皂苷、三七皂苷和黄酮类等数十种功能性物质成分，具有止血、保护心肌细胞、保护脑组织、降血脂、降血糖、抗血栓、增强免疫力、消肿抗炎、抗纤维化、抗肿瘤、抗疲劳、消除氧自由基抗氧化等作用。传统的直接食用的方式会造成三七药效的极大浪费，本发明通过混合菌发酵技术，将三七与果蔬共同发酵，该方法操作简便，效果稳定，得到的三七果蔬酶含有高浓度的人参皂苷、三七皂苷和其他三七有效成分，营养丰富，易于消化吸收，可有效提高和发挥三七的医疗保健功效。而且该产品不需添加任何食品添加剂、防腐剂就可长期低温保存。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。

图1为本发明实施例6所提供的制备方法的流程图；

图2为本发明实施例7所提供的制备方法的流程图。

具体实施方式

为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。

下面对本发明实施例的一种三七果蔬酶及其制备方法进行具体说明。

本发明提出一种三七果蔬酶的制备方法，其包括以下步骤：

制备混合菌液步骤：将酵母菌液和乳酸菌液按重量比1:0.5～2混合均匀得到混合菌液；

进一步地，酵母菌液由以下步骤制得：将酵母菌接入酵母菌一级培养基，于25～28℃下培养20小时得到第一种子液；将第一种子液加入到酵母菌二级培养基，第一种子液的体积为酵母菌二级培养基的2～4％，于25～28℃，培养20小时后，每隔4小时计数一次，当酵母菌数目达到10⁵CFU/mL时，停止培养，得到酵母菌液。具体地，上述乳酸菌为可直接从市面上购得的酿酒酵母菌和鲁氏酵母菌中的任一种。

进一步地，乳酸菌液由以下步骤制得：将乳酸菌接入乳酸菌一级培养基，于36～38℃下培养20小时得到第二种子液；将第二种子液加入到乳酸菌二级培养基，第二种子液的体积为乳酸菌二级培养基的2～4％，于36～38℃下培养20小时后，每隔4小时计数一次，当乳酸菌数目达到10⁵CFU/mL时，停止培养，得到乳酸菌液。具体地，上述乳酸菌为可直接从市面上购得的植物乳杆菌、保加利亚乳杆菌、双歧乳杆菌和嗜酸乳杆菌中的任一种。

上述一种三七果蔬酶的制备方法还包括混料步骤：取占第一发酵材料重量的2～5％的混合菌液接种到第一发酵材料中并混合均匀，得到第二发酵材料；

第一发酵材料为固体曲发酵材料或者复合酶发酵材料；

固体曲发酵材料由黑曲霉固体曲、枯草芽孢杆菌固体曲和果蔬捣碎混匀后得到，其中按重量计：黑曲霉固体曲：枯草芽孢杆菌固体曲：果蔬＝1～3:1:10～30；黑曲霉固体曲由黑曲霉菌液与三七粉按重量比1:1～20混合培养得到；枯草芽孢杆菌固体曲由枯草芽孢杆菌液与三七粉按重量比1:1～20混合培养得到；

进一步地，黑曲霉菌液由以下步骤制得：将黑曲霉接入黑曲霉一级培养基，于25～28℃下培养36小时得到第三种子液；将第三种子液加入到黑曲霉二级培养基，第三种子液的重量为黑曲霉二级培养基的0.5～1.5％，于25～28℃，培养30小时后，每隔4小时观察一次，当黑曲霉菌丝体完全覆盖黑曲霉二级培养基时，停止培养，得到黑曲霉菌液。进一步地，上述黑曲霉可以直接从市面上购得。

进一步地，枯草芽孢杆菌液由以下步骤制得：将枯草芽孢杆菌接入枯草芽孢杆菌一级培养基，于36～38℃下培养36小时得到第四种子液；将第四种子液加入到枯草芽孢杆菌二级培养基，第四种子液的重量为枯草芽孢杆菌二级培养基的0.5～1.5％，于36～38℃，培养30小时后，每隔4小时观察一次，当枯草芽孢杆菌丝体完全覆盖枯草芽孢杆菌二级培养基时，停止培养，得到枯草芽孢杆菌液。进一步地，上述枯草芽孢杆菌可以直接从市面上购得。

复合酶发酵材料由果胶酶、纤维素酶和三七粉混合制成，其中，按三七粉重量计使用果胶酶100～300U/g和纤维素酶10～30U/g，三七粉与果蔬的重量比为1:10～30。

进一步地，上述制备方法中所用三七粉由市售的优质三七粉碎成40～100目后制得，所用的果胶酶和纤维素酶均可从市面上购得。

进一步地，上述制备方法中所用到的所有培养基均根据各自菌种的常规培养方式选取配制，为现有技术，本发明将不再进行赘述。

具体地，果蔬包括仙人掌、山药、枇杷、梅子、凤梨、红龙果、青木瓜、地瓜、马铃薯、芋、南瓜、胡瓜、红萝卜、豆薯、莲藕、小黄瓜、冬瓜、秋葵、青花椰菜、桑椹、芥兰、嫩茎莴苣、球茎甘蓝、青椒、菱角、高丽菜、西红柿、红凤菜、甜柿、荞麦、胡麻、龙眼、红甘蔗、结球白菜、角菜、山芹菜、哈密瓜、柠檬、猕猴桃、梨、杨桃、葡萄、葡萄柚、火龙果、菠萝蜜、香蕉、苹果、奇异果、草莓、酪梨、樱桃、橙子和水蜜桃中的一种或多种。

上述一种三七果蔬酶的制备方法还包括发酵步骤：将第二发酵材料与食用糖液加入到发酵罐中，混合均匀后得到发酵液，将发酵液密封发酵60～120天。

进一步地，上述第二发酵材料的体积为发酵罐容积的1/2，混合菌液在与第一发酵材料混合前，可以加入适量无菌水进行稀释。

具体地，食用糖液由食用糖兑水后加热溶解得到的50～80wt％的溶液，其中，食用糖为红糖、白糖和冰糖中的至少一种。进一步地，第二发酵材料与食用糖的质量比为1：0.2～1。

进一步地，第二发酵材料和食用糖还可以按照以下方式装罐：按照一层发酵材料一层红糖的方式进行分层装罐，层与层之间压实，最上面一层(即与空气接触的一层)为食用糖。

进一步地，装罐完成后还可以喷洒少量食用醋于罐内物料表面，以防止杂菌生长。

进一步地，在发酵过程中始终做到厌氧、不晃动发酵罐体，务必杜绝杂菌污染。在装罐后开始发酵的48h内，密切关注罐体发酵情况，若有气泡产生，提前放气；若有液体随气泡溢出罐体外，及时清理干净。

上述一种三七果蔬酶的制备方法还包括过滤步骤：对经发酵后的发酵液进行过滤除去发酵液中的发酵残渣得到三七果蔬酶。

进一步地，上述三七果蔬酶的制备方法还包括在过滤步骤之后的浓缩步骤，浓缩的条件为：真空度≥0.09MPa，温度≤45℃。在上述浓缩条件下进行低温真空浓缩，能有效的保留三七中的热敏感成分，提高产品的药效。

进一步地，上述三七果蔬酶的制备方法在浓缩步骤之后还包括向浓缩后的发酵液添加辅料的步骤，辅料的质量为三七果蔬酶质量的0.1～1％，辅料为发酵残渣的固体提取物、低聚果糖或中药材。具体地，中药材可以和三七果蔬酶配合发挥各自的药效，优选地，中药材为当归、天麻、西洋参中的至少一种。

进一步地，上述固体提取物由以下步骤制得：用乙醇减压回馏发酵残渣得到回馏液，去除回馏液中的乙醇后得到固体提取物，具体地，上述乙醇为体积分数50～80％的乙醇溶液，其用量为发酵残渣重量的4～8倍。进一步地，减压回馏的条件为：真空度≥0.09MPa，温度≤45℃。优选地，在本发明其他较佳实施例中，上述固体提取物还可以用乙醇常温浸提发酵残渣得到。

本发明还提出一种三七果蔬酶，其采用上述的制备方法制得。进一步地，其糖度值不低于45％，三七总皂苷含量达到0.5％。

以下结合实施例对本发明的一种三七果蔬酶及其制备方法作进一步的详细描述。

实施例1

本实施例提供的一种三七果蔬酶，其原料包括：果蔬11kg、黑曲霉固体曲550g、枯草芽孢杆菌固体曲550g、酿酒酵母菌液150g、植物乳杆菌液100g和红糖7.5kg，其中，果蔬由仙人掌3kg、苹果2.5kg、猕猴桃2.5kg、火龙果1kg、香蕉1kg和凤梨1kg组成。其制备方法如下：

制备混合菌液步骤：将酿酒酵母菌液150g和植物乳杆菌液100g混合均匀得到混合菌液。

混料步骤：选取新鲜果蔬11kg，洗净后切块待用。将由黑曲霉固体曲550g和枯草芽孢杆菌固体曲550g组成的固体曲发酵材料与上述果蔬捣碎混匀后得到第一发酵材料，向第一发酵材料中加入混合菌液250g，得到第二发酵材料。

所用黑曲霉固体曲由黑曲霉菌液与三七粉按重量比1:5混合，于25℃下培养10小时得到；所用的枯草芽孢杆菌固体曲由枯草芽孢杆菌液与三七粉按重量比1:15混合，于36℃下培养20小时得到。

发酵步骤：将7.5kg红糖溶于热水配置成50wt％的糖液，将第二发酵材料与糖液加入到发酵罐中搅拌混合，混合均匀后得到发酵液，将发酵液密封发酵90天。

过滤步骤：过滤除去发酵液中的发酵残渣，将过滤后的发酵液在真空度为0.09MPa，温度为30℃的条件下浓缩，加入质量为三七果蔬酶质量的0.1％的低聚果糖作为辅料，得到三七果蔬酶。装瓶，置于低温下保存。

实施例2

本实施例提供的一种三七果蔬酶，其原料包括：果蔬10kg、黑曲霉固体曲3kg、枯草芽孢杆菌固体曲1kg、酿酒酵母菌液250g、保加利亚乳杆菌液450g和红糖3kg，其中，果蔬由仙人掌1kg、山药2kg、枇杷1kg、梅子1kg、凤梨1kg、红龙果1kg、青木瓜2kg和地瓜1kg组成。其制备方法如下：

制备混合菌液步骤：将酿酒酵母菌液250g和保加利亚乳杆菌液450g混合均匀得到混合菌液。

混料步骤：选取新鲜果蔬10kg，洗净后切块待用。将由黑曲霉固体曲3kg、枯草芽孢杆菌固体曲1kg组成的固体曲发酵材料与上述果蔬捣碎混匀后得到第一发酵材料，向第一发酵材料中加入混合菌液700g，得到第二发酵材料。所用的黑曲霉固体曲由黑曲霉菌液与三七粉按重量比1:1混合，于28℃下培养10小时得到；所用的枯草芽孢杆菌固体曲由枯草芽孢杆菌液与三七粉按重量比1:1混合，于38℃下培养20小时得到。

发酵步骤：将3kg红糖溶于热水配置成60wt％的糖液，将第二发酵材料与糖液加入到发酵罐中搅拌混合，混合均匀后得到发酵液，将发酵液密封发酵120天。

过滤步骤：过滤除去发酵液中的发酵残渣，将过滤后的发酵液在真空度为0.12MPa，温度为40℃的条件下浓缩，加入质量为三七果蔬酶质量的0.5％的低聚果糖和0.2％的天麻作为辅料，得到三七果蔬酶。装瓶，置于低温下保存。

实施例3

本实施例提供的一种三七果蔬酶，其原料包括：果蔬20kg、黑曲霉固体曲2kg、枯草芽孢杆菌固体曲1kg、酿酒酵母菌液250g、保加利亚乳杆菌液500g和红糖8kg，其中，果蔬由马铃薯2kg、芋2kg、南瓜1kg、胡瓜2kg、红萝卜2kg、豆薯1kg、莲藕2kg、小黄瓜1kg、冬瓜2kg、秋葵2kg、青花椰菜1kg和桑椹2kg组成。其制备方法如下：

制备混合菌液步骤：将酿酒酵母菌液250g和保加利亚乳杆菌液500g混合均匀得到混合菌液。

混料步骤：选取新鲜果蔬20kg，洗净后切块待用。将由黑曲霉固体曲2kg、枯草芽孢杆菌固体曲1kg组成的固体曲发酵材料与上述果蔬捣碎混匀后得到第一发酵材料，向第一发酵材料中加入混合菌液750g，得到第二发酵材料。所用的黑曲霉固体曲由黑曲霉菌液与三七粉按重量比1:20混合，于25℃下培养20小时得到；所用的枯草芽孢杆菌固体曲由枯草芽孢杆菌液与三七粉按重量比1:20混合，于36℃下培养15小时得到。

发酵步骤：将8kg红糖溶于热水配置成80wt％的糖液，将第二发酵材料与糖液加入到发酵罐中搅拌混合，混合均匀后得到发酵液，将发酵液密封发酵60天。

过滤步骤：过滤除去发酵液中的发酵残渣，将过滤后的发酵液在真空度为0.10MPa，温度为35℃的条件下浓缩，加入质量为三七果蔬酶质量的0.2％的低聚果糖和0.2％的当归作为辅料，得到三七果蔬酶。装瓶，置于低温下保存。

实施例4

本实施例提供的一种三七果蔬酶，其原料包括：果蔬15kg、黑曲霉固体曲500g、枯草芽孢杆菌固体曲500g、鲁氏酵母菌液500g、双歧乳杆菌液250g和白糖12kg，其中，果蔬由芥兰2kg、嫩茎莴苣1kg、球茎甘蓝1kg、青椒2kg、菱角1kg、高丽菜1kg、西红柿1kg、红凤菜1kg、甜柿1kg、荞麦1kg、胡麻1kg和龙眼2kg组成。其制备方法如下：

制备混合菌液步骤：将鲁氏酵母菌液500g和双歧乳杆菌液500g混合均匀得到混合菌液。

混料步骤：选取新鲜果蔬15kg，洗净后切块待用。将由黑曲霉固体曲500g、枯草芽孢杆菌固体曲500g组成的固体曲发酵材料与上述果蔬捣碎混匀后得到第一发酵材料，向第一发酵材料中加入混合菌液750g，得到第二发酵材料。所用的黑曲霉固体曲由黑曲霉菌液与三七粉按重量比1:10混合，于28℃下培养15小时得到；所用的枯草芽孢杆菌固体曲由枯草芽孢杆菌液与三七粉按重量比1:10混合，于38℃下培养10小时得到。

发酵步骤：将12kg白糖溶于热水配置成75wt％的糖液，将第二发酵材料与糖液加入到发酵罐中搅拌混合，混合均匀后得到发酵液，将发酵液密封发酵90天。

过滤步骤：过滤除去发酵液中的发酵残渣，将过滤后的发酵液在真空度为0.10MPa，温度为30℃的条件下浓缩，加入质量为三七果蔬酶质量的0.2％的西洋参和0.2％的当归作为辅料，得到三七果蔬酶。装瓶，置于低温下保存。

实施例5

本实施例提供的一种三七果蔬酶，其原料包括：果蔬15kg、黑曲霉固体曲1kg、枯草芽孢杆菌固体曲500g、鲁氏酵母菌液250g、嗜酸乳杆菌液350g和冰糖17kg，其中，果蔬由红甘蔗2kg、结球白菜1kg、角菜1kg、山芹菜1kg、哈密瓜1kg、柠檬2kg、猕猴桃2kg、梨1kg、杨桃1kg、葡萄2kg和葡萄柚1kg组成。其制备方法如下：

制备混合菌液步骤：将鲁氏酵母菌液250g和嗜酸乳杆菌液350g混合均匀得到混合菌液。

混料步骤：选取新鲜果蔬15kg，洗净后切块待用。将由黑曲霉固体曲1kg、枯草芽孢杆菌固体曲500g组成的固体曲发酵材料与上述果蔬捣碎混匀后得到第一发酵材料，向第一发酵材料中加入混合菌液，得到第二发酵材料。所用的黑曲霉固体曲由黑曲霉菌液与三七粉按重量比1:5混合，于26℃下培养15小时得到；所用的枯草芽孢杆菌固体曲由枯草芽孢杆菌液与三七粉按重量比1:10混合，于38℃下培养10小时得到。

发酵步骤：将17kg冰糖溶于热水配置成50wt％的糖液，将第二发酵材料与糖液加入到发酵罐中搅拌混合，混合均匀后得到发酵液，将发酵液密封发酵120天。

过滤步骤：过滤除去发酵液中的发酵残渣，将过滤后的发酵液在真空度为0.10MPa，温度为30℃的条件下浓缩，加入质量为三七果蔬酶质量的0.2％的西洋参作为辅料得到三七果蔬酶。装瓶，置于低温下保存。

实施例6

本实施例提供的一种三七果蔬酶，其原料包括：果蔬15kg、黑曲霉固体曲1kg、枯草芽孢杆菌固体曲1kg、鲁氏酵母菌液350g、嗜酸乳杆菌液350g和冰糖10kg，其中，果蔬由火龙果2kg、菠萝蜜1kg、香蕉2kg、苹果1kg、奇异果1kg、草莓2kg、酪梨1kg、樱桃2kg、橙子1kg和水蜜桃2kg组成。按照图1所示的流程图，其制备方法如下：

制备混合菌液步骤：将鲁氏酵母菌液350g和嗜酸乳杆菌液350g混合均匀得到混合菌液。

混料步骤：选取新鲜果蔬15kg，洗净后切块待用。将由黑曲霉固体曲1kg、枯草芽孢杆菌固体曲1kg组成的固体曲发酵材料与上述果蔬捣碎混匀后得到第一发酵材料，向第一发酵材料中加入混合菌液，得到第二发酵材料。所用的黑曲霉固体曲由黑曲霉菌液与三七粉按重量比1:5混合，于26℃下培养15小时得到；所用的枯草芽孢杆菌固体曲由枯草芽孢杆菌液与三七粉按重量比1:10混合，于38℃下培养10小时，得到。

发酵步骤：将10kg冰糖溶于热水配置成50wt％的糖液，将第二发酵材料与糖液加入到发酵罐中搅拌混合，混合均匀后得到发酵液，将发酵液密封发酵90天。

过滤步骤：过滤除去发酵液中的发酵残渣，将过滤后的发酵液在真空度为0.10MPa，温度为30℃的条件下浓缩。将发酵残渣的固体提取物作为辅料加入到浓缩后的发酵液中，得到三七果蔬酶，上述固体提取物的质量为三七果蔬酶质量的0.5％。装瓶，置于低温下保存。

实施例7

本实施例提供的一种三七果蔬酶，其原料包括：果蔬20kg、三七粉1kg、果胶酶(40U/mg)5g、纤维素酶(35U/mg)0.5g、酿酒酵母菌液250g、保加利亚乳杆菌液500g和红糖10kg，其中，果蔬由芥兰2kg、嫩茎莴苣1kg、球茎甘蓝2kg、青椒2kg、菱角1kg、苹果2kg、奇异果2kg、草莓2kg、酪梨1kg、樱桃2kg、橙子1kg和水蜜桃2kg组成。按照图2所示的流程图，其制备方法如下：

制备混合菌液步骤：将鲁酿酒酵母菌液250g和保加利亚乳杆菌液500g混合均匀得到混合菌液。

混料步骤：选取新鲜果蔬20kg，洗净后切块待用。将由三七粉1kg、果胶酶(40U/mg)5g和纤维素酶(35U/mg)0.5g组成的复合酶发酵材料与上述果蔬捣碎混匀后得到第一发酵材料，向第一发酵材料中加入混合菌液，得到第二发酵材料。

发酵步骤：将10kg红糖溶于热水配置成60wt％的糖液，将第二发酵材料与糖液加入到发酵罐中搅拌混合，混合均匀后得到发酵液，将发酵液密封发酵120天。

过滤步骤：过滤除去发酵液中的发酵残渣，将过滤后的发酵液在真空度为0.10MPa，温度为30℃的条件下浓缩，得到三七果蔬酶。装瓶，置于低温下保存。

将三七果蔬酶置于低温下保存，是为了在不添加防腐剂的情况下，延长三七果蔬酶的保存期，通常在1-5℃下保存较佳。

实验例

采用实施例1-7的方法制得的三七果蔬酶，对其糖度值和三七总皂苷含量进行测试，测试方法如下：

1、三七果蔬酶的糖度值的测定：使用旋光仪对糖度值为0％、20％、40％、60％、80％、100％的糖液的旋光值进行测定，并以此绘制标准曲线，在对实施例1-7的三七果蔬酶的旋光值进行测定，和标准曲线比对后得到糖度值，测试结果见表1；

2、三七果蔬酶中三七总皂苷含量的测定：通过高效液相色谱对不同浓度的三七皂苷标准溶液进行测定，确定吸收波长并绘制标准曲线。通过高效液相色谱对实施例1-7的三七果蔬酶于波长544nm处的吸光度进行测定，对照标准曲线，得出三七果蔬酶中的三七总皂苷含量，测试结果见表1。

表1 三七果蔬酶糖度值及三七总皂苷含量测试结果

	糖度值/％	三七总皂苷含量/％
			实施例1	50	0.50
实施例2	58	0.68
			实施例3	54	0.94
实施例4	45	0.59
			实施例5	49	0.75
实施例6	55	0.86
			实施例7	51	0.77

从表1可以看出，本发明实施例1-7所提供的三七果蔬酶，糖度值≥45％以上，产品中三七总皂苷含量≥0.5％。综上所述，本发明实施例的一种三七果蔬酶，将三七中的有效成分成功融入到果蔬酶之中，其三七总皂苷含量高，营养丰富，易于消化吸收。用以制备该三七果蔬酶的方法操作简便、实用性强，该制备方法通过低温发酵、低温真空浓缩和低温回馏，有效的保留了三七热敏感成分，可有效提高和发挥三七的医疗保健功效。

以上所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。本发明的实施例的详细描述并非旨在限制要求保护的本发明的范围，而是仅仅表示本发明的选定实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

Claims (10)

1.一种三七果蔬酶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

制备混合菌液步骤：将酵母菌液和乳酸菌液按重量比1:0.5～2混合均匀得到混合菌液；

混料步骤：取占第一发酵材料重量的2～5％的所述混合菌液接种到所述第一发酵材料中并混合均匀，得到第二发酵材料；

所述第一发酵材料为固体曲发酵材料或者复合酶发酵材料；

所述固体曲发酵材料由黑曲霉固体曲、枯草芽孢杆菌固体曲和果蔬捣碎混匀后得到，其中按重量计：所述黑曲霉固体曲：所述枯草芽孢杆菌固体曲：所述果蔬＝1～3:1:10～30；所述黑曲霉固体曲由黑曲霉菌液与三七粉按重量比1:1～20混合培养得到；所述枯草芽孢杆菌固体曲由枯草芽孢杆菌液与三七粉按重量比1:1～20混合培养得到；

所述复合酶发酵材料由果胶酶、纤维素酶和三七粉混合制成，其中，按三七粉重量计使用果胶酶100～300U/g，纤维素酶10～30U/g，三七粉与果蔬的重量比为1:10～30；

发酵步骤：将所述第二发酵材料与食用糖液混合均匀后得到发酵液，将所述发酵液密封发酵60～120天；

过滤步骤：对经发酵后的所述发酵液进行过滤除去发酵液中的发酵残渣得到三七果蔬酶。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，还包括在所述过滤步骤之后的浓缩步骤，所述浓缩的条件为：真空度≥0.09MPa，温度≤45℃。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，还包括在所述浓缩步骤之后的向浓缩后的所述发酵液添加辅料的步骤，所述辅料的质量为所述三七果蔬酶质量的0.1～1％，所述辅料为所述发酵残渣的固体提取物、低聚果糖和中药材中的至少一种。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述固体提取物由以下步骤制得：用乙醇减压回馏所述发酵残渣并得到回馏液，去除所述回馏液中的乙醇后得到所述固体提取物，所述减压回馏的条件为：真空度≥0.09MPa，温度≤45℃。

5.根据权利要求1～4任一项所述的制备方法，其特征在于，所述酵母菌液由以下步骤制得：将酵母菌接入酵母菌一级培养基，培养得到第一种子液；将所述第一种子液加入到酵母菌二级培养基，所述第一种子液的体积为所述酵母菌二级培养基的2～4％，培养得到所述酵母菌液；

所述乳酸菌液由以下步骤制得：将乳酸菌接入乳酸菌一级培养基，培养得到第二种子液；将所述第二种子液加入到乳酸菌二级培养基，所述第二种子液的体积为所述乳酸菌二级培养基的2～4％，培养得到所述乳酸菌液。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述酵母菌为酿酒酵母菌和鲁氏酵母菌中的任一种；所述乳酸菌为植物乳杆菌、保加利亚乳杆菌、双歧乳杆菌和嗜酸乳杆菌中的任一种。

7.根据权利要求1～4任一项所述的制备方法，其特征在于，所述黑曲霉菌液由以下步骤制得：将黑曲霉接入黑曲霉一级培养基，培养得到第三种子液；将所述第三种子液加入到黑曲霉二级培养基，所述第三种子液的重量为所述黑曲霉二级培养基的0.5～1.5％，培养得到所述黑曲霉菌液；

所述枯草芽孢杆菌液由以下步骤制得：将枯草芽孢杆菌接入枯草芽孢杆菌一级培养基，培养得到第四种子液；将所述第四种子液加入到枯草芽孢杆菌二级培养基，所述第四种子液的重量为所述枯草芽孢杆菌二级培养基的0.5～1.5％，培养得到所述枯草芽孢杆菌液。

8.根据权利要求1～4任一项所述的制备方法，其特征在于，所述酵母菌液和所述乳酸菌液中的细菌数目大于10⁵CFU/mL。

9.根据权利要求1～4任一项所述的制备方法，其特征在于，所述食用糖液中食用糖的含量为50～80wt％，所述第二发酵材料与所述食用糖的质量比为1：0.2～1。

10.一种三七果蔬酶，其特征在于，采用权利要求1～9任一项所述的方法制得。