CN105754994A - 一种基于改良磁珠法快速提取全血中基因组dna的方法 - Google Patents

一种基于改良磁珠法快速提取全血中基因组dna的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN105754994A
CN105754994A CN201610244890.XA CN201610244890A CN105754994A CN 105754994 A CN105754994 A CN 105754994A CN 201610244890 A CN201610244890 A CN 201610244890A CN 105754994 A CN105754994 A CN 105754994A
Authority
CN
China
Prior art keywords
centrifuge tube
dna
mixing
whole blood
improvement
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201610244890.XA
Other languages
English (en)
Inventor
李王霞
沈钢
李刚
姚立
马严
仇丰武
江梦天
刘光箭
邹洁
朱远雁
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
WUHAN BLOOD CENTER
Original Assignee
WUHAN BLOOD CENTER
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by WUHAN BLOOD CENTER filed Critical WUHAN BLOOD CENTER
Priority to CN201610244890.XA priority Critical patent/CN105754994A/zh
Publication of CN105754994A publication Critical patent/CN105754994A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/10—Processes for the isolation, preparation or purification of DNA or RNA
    • C12N15/1003—Extracting or separating nucleic acids from biological samples, e.g. pure separation or isolation methods; Conditions, buffers or apparatuses therefor
    • C12N15/1006—Extracting or separating nucleic acids from biological samples, e.g. pure separation or isolation methods; Conditions, buffers or apparatuses therefor by means of a solid support carrier, e.g. particles, polymers
    • C12N15/1013—Extracting or separating nucleic acids from biological samples, e.g. pure separation or isolation methods; Conditions, buffers or apparatuses therefor by means of a solid support carrier, e.g. particles, polymers by using magnetic beads

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明涉及一种基于改良磁珠法快速提取全血中基因组DNA的方法。该方法包括以下步骤：红细胞裂解、白细胞裂解及DNA吸附、DNA纯化和DNA洗脱。利用DNA定量仪测定DNA浓度与纯度，利用测序仪对PCR扩增产物进行测序，相关的分析软件进行HLA分型结果分析。本发明具有DNA浓度均一性强、纯度高、HLA分型结果成功率大幅度提高和信噪比合格率高的特点。因此，可广泛地应用于全血样本中基因组DNA的提取中。

Description

一种基于改良磁珠法快速提取全血中基因组DNA的方法
技术领域
本发明属于生物技术领域，具体涉及一种基于改良磁珠法快速提取全血中基因组DNA的方法。
背景技术
DNA的提取方法很多，传统的酚氯法、盐析法、过柱法都只能是手工提取，无法自动化，磁珠法利用包裹磁珠的纤维素对DNA的特异性吸附，在磁场和洗脱液的作用下分离并获取DNA，易于自动化，DNA磁珠提取法优点很多，但此方法提取的DNA浓度和纯度易受磁珠的残留量、裂解时间、全血量及酶量的影响，这些因素通过交互作用产生影响，导致DNA浓度不稳定、纯度不高进而影响HLA分型结果信噪比（N/S）合格率低、分型结果成功率低，同时，试剂用量大，测试成本高，测试时间长。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的不足而提供一种基于改良磁珠法快速提取全血中基因组DNA的方法，本发明使用磁珠法自动提取***从全血中提取基因组DNA，利用DNA定量仪测定DNA浓度与纯度，利用测序仪对PCR扩增产物进行测序，相关的分析软件进行HLA分型结果分析，本发明具有DNA浓度均一性强、纯度高、HLA分型结果成功率大幅度提高和信噪比合格率高的特点。
本发明公开了一种基于改良磁珠法快速提取全血中基因组DNA的方法，其特征在于，该方法具体包括步骤如下：
（1）红细胞裂解
在容积为2ml离心管中加入450-500μl红细胞裂解液，将120-150μl完全解冻后的全血样本加入上述离心管中，充分振荡，混匀至细胞碎片均匀悬浮，未见成团聚集，将裂解液×10,000rmp离心1-3min，除去上清液。
（2）白细胞裂解及DNA吸附
将蛋白酶K原液倍比稀释，吸取20μl蛋白酶K及120-150μlLysisBuffer加入以上离心管中，并反复吹打混匀3次后65℃孵育，振荡2-3min静止5-8min，振荡与静止交替进行3个循环；加入250-300μl的BindingBuffer和20-30μl的MagneticBeads置离心管中，抽打混匀或振荡混匀3min；室温离心管架放置3min；将离心管放置磁力架上静置20秒，待磁珠完全吸附时去除液体。
（3）DNA纯化
将上述离心管从磁力架上取下，加入600-800μl的Wash1Buffer，抽打混匀或振荡混匀至磁珠悬浮，未见成团成片；将离心管放置磁力架上静置20秒，待磁珠完全吸附时去除液体；将离心管从磁力架上取下，加入600-800μl的Wash2Buffer，抽打混匀或振荡混匀至磁珠悬浮，未见成团成片；将离心管放置磁力架上静置20秒，待磁珠完全吸附时去除液体；将离心管从磁力架上取下，加入500-600μl的ddH2O，抽打混匀或振荡混匀至磁珠悬浮，未见成团成片；将离心管放置磁力架上静置20秒，待磁珠完全吸附时去除液体；将离心管放置磁力架上，室温晾干10～15min。
（4）DNA洗脱
将上述室温晾干后的离心管从磁力架上取下，加入80～100μl的ElutionBuffer，抽打混匀或振荡混匀，置于65℃，孵育8min；将离心管放置磁力架上静置20秒，待磁珠完全吸附时得到DNA溶液，并将DNA溶液转移至收集管中，并-20℃或-80℃保存。
优选地，所述的红细胞裂解液加入量为480μl。
优选地，所述的完全解冻后的全血样本加入量为130μl。
优选地，所述的Wash1Buffer加入量为700μl。
优选地，所述的Wash2Buffer加入量为700μl。
优选地，所述的ddH2O加入量为550μl。
本发明与现有技术相比具有如下优点和有益效果：
（1）本发明所得DNA浓度的均一性、纯度均优于改良前；HLA分型结果中HLA-A、B位点成功率高于改良前；
（2）本发明得到的HLA信噪比（N/S）合格率均高于改良前、分型胶图反应格局均优于改良前；
（3）本发明提取DNA法用于HLA测序分型具有稳定、可靠强，同时具有快速、高通量化的特点；
（4）测试的时间短，试剂的用量小，测试成本大幅度降低。
附图说明
附图1为方法改良前后标本A1的DNA参数散点三维图；
附图2为方法改良前后标本B1的DNA参数散点三维图；
附图3为方法改良前后标本C1的DNA参数散点三维图。
具体实施方式
下面结合具体的实施例，并参照数据进一步详细描述本发明。应理解，这些实施例只是为了举例说明本发明，而非以任何方式限制本发明的范围。
实施例1
全血样标本A1来自中华骨髓库湖北分库干细胞捐献者血样。
利用本发明的方法对上述全血样标本A1的DNA进行检测，具体步骤如下：
（1）红细胞裂解
在容积为2ml离心管中加入500μl红细胞裂解液，将120μl完全解冻后的全血样本加入上述离心管中，充分振荡，混匀至细胞碎片均匀悬浮，未见成团聚集，将裂解液×10,000rmp离心1min，除去上清液。
（2）白细胞裂解及DNA吸附
将蛋白酶K原液倍比稀释，吸取20μl蛋白酶K及140μlLysisBuffer加入以上离心管中，并反复吹打混匀3次后65℃孵育，振荡2min静止8min，振荡与静止交替进行3个循环；加入250μl的BindingBuffer和25μl的MagneticBeads置离心管中，抽打混匀或振荡混匀3min；室温离心管架放置3min；将离心管放置磁力架上静置20秒，待磁珠完全吸附时去除液体。
（3）DNA纯化
将上述离心管从磁力架上取下，加入600μl的Wash1Buffer，抽打混匀或振荡混匀至磁珠悬浮，未见成团成片；将离心管放置磁力架上静置20秒，待磁珠完全吸附时去除液体；将离心管从磁力架上取下，加入800μl的Wash2Buffer，抽打混匀或振荡混匀至磁珠悬浮，未见成团成片；将离心管放置磁力架上静置20秒，待磁珠完全吸附时去除液体；将离心管从磁力架上取下，加入500μl的ddH2O，抽打混匀或振荡混匀至磁珠悬浮，未见成团成片；将离心管放置磁力架上静置20秒，待磁珠完全吸附时去除液体；将离心管放置磁力架上，室温晾干10min。
（4）DNA洗脱
将上述室温晾干后的离心管从磁力架上取下，加入80μl的ElutionBuffer，抽打混匀或振荡混匀，置于65℃，孵育8min；将离心管放置磁力架上静置20秒，待磁珠完全吸附时得到DNA溶液，并将DNA溶液转移至收集管中，并-20℃或-80℃保存。
方法改良前后标本A1的DNA参数散点三维图见附图1；方法改良前后标本A1的HLA-A、B、DRB1分型成功率见表1；方法改良前后标本A1的HLA-B第二外显子信噪比（N/S）合格率见表2。
表1方法改良前后标本A1的HLA-A、B、DRB1分型成功率
“*”p＜0.01有显著性差异
表2方法改良前后标本A1的HLA-B第二外显子信噪比（N/S）合格率
“*”p＜0.01有显著性差异
从附图1可以看出，改良后96份样本DNA浓度的均一性、纯度、合格率均优于改良前，改良后仅4例散点均位于三维空间外，合格率95.8%。
从表1和表2可以看出，96份HLA分型结果中HLA-A、B、DRB1位点成功率改良后高于改良前（P<0.01）；96份HLA-B第二外显子信噪比（N/S）合格率改良后高于改良前（P<0.01）。
实施例2
全血样标本B1来自中华骨髓库湖北分库干细胞捐献者血样。
利用本发明的方法对上述全血样标本B1的DNA进行检测，具体步骤如下：
（1）红细胞裂解
在容积为2ml离心管中加入480μl红细胞裂解液，将130μl完全解冻后的全血样本加入上述离心管中，充分振荡，混匀至细胞碎片均匀悬浮，未见成团聚集，将裂解液×10,000rmp离心2min，除去上清液。
（2）白细胞裂解及DNA吸附
将蛋白酶K原液倍比稀释，吸取20μl蛋白酶K及150μlLysisBuffer加入以上离心管中，并反复吹打混匀3次后65℃孵育，振荡2.5min静止6min，振荡与静止交替进行3个循环；加入270μl的BindingBuffer和30μl的MagneticBeads置离心管中，抽打混匀或振荡混匀3min；室温离心管架放置3min；将离心管放置磁力架上静置20秒，待磁珠完全吸附时去除液体。
（3）DNA纯化
将上述离心管从磁力架上取下，加入700μl的Wash1Buffer，抽打混匀或振荡混匀至磁珠悬浮，未见成团成片；将离心管放置磁力架上静置20秒，待磁珠完全吸附时去除液体；将离心管从磁力架上取下，加入700μl的Wash2Buffer，抽打混匀或振荡混匀至磁珠悬浮，未见成团成片；将离心管放置磁力架上静置20秒，待磁珠完全吸附时去除液体；将离心管从磁力架上取下，加入550μl的ddH2O，抽打混匀或振荡混匀至磁珠悬浮，未见成团成片；将离心管放置磁力架上静置20秒，待磁珠完全吸附时去除液体；将离心管放置磁力架上，室温晾干13min。
（4）DNA洗脱
将上述室温晾干后的离心管从磁力架上取下，加入90μl的ElutionBuffer，抽打混匀或振荡混匀，置于65℃，孵育8min；将离心管放置磁力架上静置20秒，待磁珠完全吸附时得到DNA溶液，并将DNA溶液转移至收集管中，并-20℃或-80℃保存。
方法改良前后标本B1的DNA参数散点三维图见附图2；方法改良前后标本B1的HLA-A、B、DRB1分型成功率见表3；方法改良前后标本B1的HLA-B第二外显子信噪比（N/S）合格率见表4。
表3方法改良前后标本B1的HLA-A、B、DRB1分型成功率
“*”p＜0.01有显著性差异
表4方法改良前后标本B1的HLA-B第二外显子信噪比（N/S）合格率
“*”p＜0.01有显著性差异
从附图2看出，改良后96份样本DNA浓度的均一性、纯度、合格率均优于改良前，改良后散点均位于三维空间内，合格率100%。、
从表3和表4可以看出，96份HLA分型结果中HLA-A、B、DRB1位点成功率改良后高于改良前（P<0.01）；96份HLA-B第二外显子信噪比（N/S）合格率改良后高于改良前（P<0.01）。
实施例3
全血样标本C1来自中华骨髓库湖北分库干细胞捐献者血样。
利用本发明的方法对上述全血样标本C1的DNA进行检测，具体步骤如下：
（1）红细胞裂解
在容积为2ml离心管中加入450μl红细胞裂解液，将150μl完全解冻后的全血样本加入上述离心管中，充分振荡，混匀至细胞碎片均匀悬浮，未见成团聚集，将裂解液×10,000rmp离心3min，除去上清液。
（2）白细胞裂解及DNA吸附
将蛋白酶K原液倍比稀释，吸取20μl蛋白酶K及120μlLysisBuffer加入以上离心管中，并反复吹打混匀3次后65℃孵育，振荡3min静止5min，振荡与静止交替进行3个循环；加入300μl的BindingBuffer和20μl的MagneticBeads置离心管中，抽打混匀或振荡混匀3min；室温离心管架放置3min；将离心管放置磁力架上静置20秒，待磁珠完全吸附时去除液体。
（3）DNA纯化
将上述离心管从磁力架上取下，加入800μl的Wash1Buffer，抽打混匀或振荡混匀至磁珠悬浮，未见成团成片；将离心管放置磁力架上静置20秒，待磁珠完全吸附时去除液体；将离心管从磁力架上取下，加入600μl的Wash2Buffer，抽打混匀或振荡混匀至磁珠悬浮，未见成团成片；将离心管放置磁力架上静置20秒，待磁珠完全吸附时去除液体；将离心管从磁力架上取下，加入600μl的ddH2O，抽打混匀或振荡混匀至磁珠悬浮，未见成团成片；将离心管放置磁力架上静置20秒，待磁珠完全吸附时去除液体；将离心管放置磁力架上，室温晾干15min。
（4）DNA洗脱
将上述室温晾干后的离心管从磁力架上取下，加入100μl的ElutionBuffer，抽打混匀或振荡混匀，置于65℃，孵育8min；将离心管放置磁力架上静置20秒，待磁珠完全吸附时得到DNA溶液，并将DNA溶液转移至收集管中，并-20℃或-80℃保存。
方法改良前后标本C1的DNA参数散点三维图见附图3；方法改良前后标本C1的HLA-A、B、DRB1分型成功率见表5；方法改良前后标本C1的HLA-B第二外显子信噪比（N/S）合格率见表6。
表5方法改良前后标本C1的HLA-A、B、DRB1分型成功率
“*”p＜0.01有显著性差异
表6方法改良前后标本C1的HLA-B第二外显子信噪比（N/S）合格率
“*”p＜0.01有显著性差异
从附图3看出，改良后96份样本DNA浓度的均一性、纯度、合格率均优于改良前，改良后仅3例散点均位于三维空间外，合格率96.9%。
从表5和表6可以看出，96份HLA分型结果中HLA-A、B、DRB1位点成功率改良后高于改良前（P<0.01）；96份HLA-B第二外显子信噪比（N/S）合格率改良后高于改良前（P<0.01）。

Claims (6)

1.一种基于改良磁珠法快速提取全血中基因组DNA的方法，其特征在于，该方法具体包括步骤如下：
（1）红细胞裂解
在容积为2ml离心管中加入450-500μl红细胞裂解液，将120-150μl完全解冻后的全血样本加入上述离心管中，充分振荡，混匀至细胞碎片均匀悬浮，未见成团聚集，将裂解液×10,000rmp离心1-3min，除去上清液；
（2）白细胞裂解及DNA吸附
将蛋白酶K原液倍比稀释，吸取20μl蛋白酶K及120-150μlLysisBuffer加入以上离心管中，并反复吹打混匀3次后65℃孵育，振荡2-3min静止5-8min，振荡与静止交替进行3个循环；加入250-300μl的BindingBuffer和20-30μl的MagneticBeads置离心管中，抽打混匀或振荡混匀3min；室温离心管架放置3min；将离心管放置磁力架上静置20秒，待磁珠完全吸附时去除液体；
（3）DNA纯化
将上述离心管从磁力架上取下，加入600-800μl的Wash1Buffer，抽打混匀或振荡混匀至磁珠悬浮，未见成团成片；将离心管放置磁力架上静置20秒，待磁珠完全吸附时去除液体；将离心管从磁力架上取下，加入600-800μl的Wash2Buffer，抽打混匀或振荡混匀至磁珠悬浮，未见成团成片；将离心管放置磁力架上静置20秒，待磁珠完全吸附时去除液体；将离心管从磁力架上取下，加入500-600μl的ddH2O，抽打混匀或振荡混匀至磁珠悬浮，未见成团成片；将离心管放置磁力架上静置20秒，待磁珠完全吸附时去除液体；将离心管放置磁力架上，室温晾干10～15min；
（4）DNA洗脱
将上述室温晾干后的离心管从磁力架上取下，加入80～100μl的ElutionBuffer，抽打混匀或振荡混匀，置于65℃，孵育8min；将离心管放置磁力架上静置20秒，待磁珠完全吸附时得到DNA溶液，并将DNA溶液转移至收集管中，并-20℃或-80℃保存。
2.根据权利要求1所述的基于改良磁珠法快速提取全血中基因组DNA的方法，其特征在于，所述的红细胞裂解液加入量为480μl。
3.根据权利要求1或2所述的基于改良磁珠法快速提取全血中基因组DNA的方法，其特征在于，所述的完全解冻后的全血样本加入量为130μl。
4.根据权利要求1或2所述的基于改良磁珠法快速提取全血中基因组DNA的方法，其特征在于，所述的Wash1Buffer加入量为700μl。
5.根据权利要求4所述的基于改良磁珠法快速提取全血中基因组DNA的方法，其特征在于，所述的Wash2Buffer加入量为700μl。
6.根据权利要求5所述的基于改良磁珠法快速提取全血中基因组DNA的方法，其特征在于，所述的ddH2O加入量为550μl。
CN201610244890.XA 2016-04-19 2016-04-19 一种基于改良磁珠法快速提取全血中基因组dna的方法 Pending CN105754994A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610244890.XA CN105754994A (zh) 2016-04-19 2016-04-19 一种基于改良磁珠法快速提取全血中基因组dna的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610244890.XA CN105754994A (zh) 2016-04-19 2016-04-19 一种基于改良磁珠法快速提取全血中基因组dna的方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN105754994A true CN105754994A (zh) 2016-07-13

Family

ID=56324605

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201610244890.XA Pending CN105754994A (zh) 2016-04-19 2016-04-19 一种基于改良磁珠法快速提取全血中基因组dna的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN105754994A (zh)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107058292A (zh) * 2017-05-18 2017-08-18 厦门美因生物科技有限公司 一种磁珠法分离纯化dna的方法
CN107436318A (zh) * 2017-08-17 2017-12-05 武汉璟泓万方堂医药科技股份有限公司 一种降低红细胞干扰的电化学血液检测方法及装置
CN108220285A (zh) * 2018-01-24 2018-06-29 安徽微分基因科技有限公司 一种基于试剂盒的针对人组织中高分子量基因组dna的提取方法

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101812444A (zh) * 2010-04-23 2010-08-25 北京博迈世纪生物技术有限公司 血液基因组磁珠小提试剂盒及其提取方法
CN102888397A (zh) * 2012-09-25 2013-01-23 杭州硕航生物科技有限公司 一种利用磁珠提取全血基因组dna的试剂盒及应用
CN103952397A (zh) * 2014-04-16 2014-07-30 天根生化科技（北京）有限公司 一种使用磁珠从血清或血浆样品中分离游离核酸的方法
CN105368820A (zh) * 2015-12-22 2016-03-02 南京先进激光技术研究院 一种基于磁珠法的全血dna提取试剂盒及其应用

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101812444A (zh) * 2010-04-23 2010-08-25 北京博迈世纪生物技术有限公司 血液基因组磁珠小提试剂盒及其提取方法
CN102888397A (zh) * 2012-09-25 2013-01-23 杭州硕航生物科技有限公司 一种利用磁珠提取全血基因组dna的试剂盒及应用
CN103952397A (zh) * 2014-04-16 2014-07-30 天根生化科技（北京）有限公司 一种使用磁珠从血清或血浆样品中分离游离核酸的方法
CN105368820A (zh) * 2015-12-22 2016-03-02 南京先进激光技术研究院 一种基于磁珠法的全血dna提取试剂盒及其应用

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
凌洁等: "磁珠法半自动提取全血基因组DNA条件的优化", 《浙江大学学报（医学版）》 *
夏家安等: "磁珠提取DNA改良法在HLA测序分型中的应用", 《临床血液学杂志》 *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107058292A (zh) * 2017-05-18 2017-08-18 厦门美因生物科技有限公司 一种磁珠法分离纯化dna的方法
CN107436318A (zh) * 2017-08-17 2017-12-05 武汉璟泓万方堂医药科技股份有限公司 一种降低红细胞干扰的电化学血液检测方法及装置
CN108220285A (zh) * 2018-01-24 2018-06-29 安徽微分基因科技有限公司 一种基于试剂盒的针对人组织中高分子量基因组dna的提取方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Niño et al. The challenges of ractopamine use in meat production for export to European Union and Russia
CN105754994A (zh) 一种基于改良磁珠法快速提取全血中基因组dna的方法
CN113151397B (zh) 一种基于磁珠法提取病毒样本的核酸提取试剂盒
CN106119242A (zh) 一种基于自动化工作站的疑难微量法医物证dna提取试剂盒及其方法
CN105861493A (zh) 游离dna提取试剂盒及其应用
CN108753767A (zh) 一种病毒核酸提取试剂盒及提取方法
CN107012229A (zh) 食品中猪源性成分快速检测方法及试剂盒
CN108070585A (zh) 一种基于磁珠技术提取血液基因组dna的试剂盒及其方法
CN106191311A (zh) 一种快速检测豚鼠LCMV、SV、PVM、Reo‑3病毒的多重液相基因芯片方法及试剂
CN104232742A (zh) 一种荧光实时pcr法检测食品中鸭源性成分的方法
CN105695624A (zh) 粗品肝素钠不同种属来源的快速鉴别方法
CN103184295B (zh) 一种乙型肝炎病毒核酸定量检测方法与试剂盒
CN103184214A (zh) 一种乙型肝炎病毒核酸快速提取试剂
CN108998445A (zh) 一种从石蜡切片样本中提取核酸的试剂盒及其方法
CN103451304B (zh) 实时荧光pcr检测貉子源性成分的引物探针及方法
CN102827933B (zh) 一种定性检测松材线虫的试剂盒及其检测方法
CN102229927B (zh) 提高案件微量检材脱落细胞dna提取效率的方法及试剂
CN105132541B (zh) 红木中交趾黄檀dna鉴定的方法及专用引物和探针
Nixon et al. Evaluation of immobilized metal-ion affinity chromatography and electrospray ionization tandem mass spectrometry for recovery and identification of copper (II)-binding ligands in seawater using the model ligand 8-hydroxyquinoline
CN106353499A (zh) 肺癌血清标志物适配体和基因同时检测试剂盒及应用
CN105671030A (zh) 基于磁珠法的高效血浆细胞游离dna提取方法
CN104845963A (zh) 一种高通量快速提取蔬菜单粒种子dna的方法
CN102807979A (zh) 一种生物活性炭上微生物dna提取预处理方法
CN112941157A (zh) 多重荧光定量pcr检测食品中肉类种源的引物组及方法
Tsukada et al. Influence of presumptive reagents on DNA typing

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Application publication date: 20160713