CN105693714A - pH-区带精制逆流色谱分离功劳木中生物碱类化合物的方法 - Google Patents

pH-区带精制逆流色谱分离功劳木中生物碱类化合物的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN105693714A
CN105693714A CN201610133908.9A CN201610133908A CN105693714A CN 105693714 A CN105693714 A CN 105693714A CN 201610133908 A CN201610133908 A CN 201610133908A CN 105693714 A CN105693714 A CN 105693714A
Authority
CN
China
Prior art keywords
phase
caulis mahoniae
zone
alkaloid
sample
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201610133908.9A
Other languages
English (en)
Other versions
CN105693714B (zh
Inventor
王岱杰
耿岩玲
王晓
赵恒强
于金倩
段文娟
闫慧娇
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Shandong Analysis and Test Center
Original Assignee
Shandong Analysis and Test Center
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Shandong Analysis and Test Center filed Critical Shandong Analysis and Test Center
Priority to CN201610133908.9A priority Critical patent/CN105693714B/zh
Publication of CN105693714A publication Critical patent/CN105693714A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN105693714B publication Critical patent/CN105693714B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D455/00—Heterocyclic compounds containing quinolizine ring systems, e.g. emetine alkaloids, protoberberine; Alkylenedioxy derivatives of dibenzo [a, g] quinolizines, e.g. berberine
    • C07D455/03—Heterocyclic compounds containing quinolizine ring systems, e.g. emetine alkaloids, protoberberine; Alkylenedioxy derivatives of dibenzo [a, g] quinolizines, e.g. berberine containing quinolizine ring systems directly condensed with at least one six-membered carbocyclic ring, e.g. protoberberine; Alkylenedioxy derivatives of dibenzo [a, g] quinolizines, e.g. berberine

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)

Abstract

本发明公开了一种pH-区带精制逆流色谱分离功劳木中生物碱类化合物的方法，所述的分离中所用到的条件是：溶剂***为氯仿：甲醇：水=3.5-4.5:2.5-3.5:2.5-3.5，pH-区带精制逆流色谱仪柱体积为200-400，上样量2-5g，转速300-1000rpm，上相为固定相，下相为流动相，流速1.5-2.5mL/min，固定相保留率35.71%，检测波长250-260nm。本发明的方法制备成本低于现有技术，操作简便，效率高，可以较大批量从中药功劳木中，分离制备出纯度大于96%的药根碱、小檗碱、巴马汀、非洲防己碱单体化合物的分离制备方法，本发明首次从中药功劳木中分离出非洲防己碱。

Description

pH-区带精制逆流色谱分离功劳木中生物碱类化合物的方法
技术领域
本发明涉及一种中药有效成分的分离纯化方法，具体为应用pH-区带精制逆流色谱分离功劳木中生物碱类化合物(药根碱、小檗碱、非洲防己碱、巴马汀单体)的方法。
背景技术
功劳木为小檗科植物阔叶十大功劳Mahoniabealei(Fort.)Carr或细叶十大功劳Mahoniafortunei(Lindl.)Fedde的干燥茎，其性味苦，寒，具有清热燥湿、泻火解毒之功效。主治湿热泻痢、黄疸尿赤、目赤肿痛、胃火牙痛，疮疖痈肿。功劳木中生物碱类化合物主要为异喹啉类生物碱，包括药根碱、巴马汀和小檗碱，研究结果表明异喹啉类生物碱可以抑制自由基和脂氧合酶活性从而达到抗炎的作用。此外，生物碱的抗氧化能力还与其抗病性、抗逆性及延缓衰老有关。现代药理研究表明，功劳木还具有一定的逆转肿瘤细胞耐药的作用。
现有关于功劳木中生物碱类单体化合物分离制备的文献方法主要采用反复硅胶柱层析和SephadexLH-20凝胶柱色谱，其局限性是费时费力、污染环境、样品纯度低，而且反复柱层析对样品有不可逆性吸附作用，分离得到生物碱单体制备效率低、成本较高，难以发展成为制备量大的分离技术。
高速逆流色谱(High-speedCounter-currentChromatography，HSCCC)是近30年发展起来的一种连续的无需任何固体支持物的高效、快速的液液分配色谱分离技术，它避免了固态支持体或载体带来的样品易被死吸附、损耗和变性等各种问题。pH-区带精制逆流色谱(pH-Zone-RefiningCountercurrentChromatography)则是在普通的高速逆流色谱仪器的基础上，通过对分离样品所用的溶剂***的组成的调配，采用化学的手段，使样品组分的色谱分离过程增添了按pH区带聚集的特征，同时，使组分的洗脱过程表现为类似置换(顶替)色谱(DisplacementChromatography)的洗脱过程，因此，它的色谱图不再是高斯分布的色谱峰形系列，而成为按pH值的大小排列的边界陡削的矩形区带系列，其结果是能把相同容积的逆流色谱仪器的分离制备量提高数倍乃至十倍。
虽然现有技术中有利用pH-区带精制逆流色谱分离中药中生物碱的报道，本领域公知，pH-区带精制逆流色谱分离中所用到的溶剂***是影响分离结果的关键因素之一，常用到的溶剂有甲醇、石油醚、乙酸乙酯、正己烷、丙酮、氯仿、乙腈等，每一溶剂***中所使用的溶剂至少为两种，不同中药成分所具有的成分，以及生物碱的种类和数量不一样，中药经过提取得到的生物碱总样的成分不同，所以针对不同的中药如何选择溶剂***的溶剂种类、各溶剂之间的用量比例以及配合该溶剂***选择怎样的流速、上样量、转速等等才能得到纯度较高的生物碱单体是没有参考价值的。
非洲防己碱具有兴奋子宫的作用，目前已知的来源为小檗科植物日本小檗BerberisthunbergiiDC根茎、毛茛科植物黄连CoptischinensisFranch根茎、防己科植物黄藤FibraureatinetoriaLour根、非洲掌叶防己Jatrorrhizapalmata(DC.)Miers(J.columba.Miers)、罂粟科植物博克尼木BocconiafrutescesLinn叶、番荔枝科植物依南木EnantiachloranthaOliver根。目前，还没有从功劳木中分离出非洲防己碱的有关报道，也没有利用pH-区带精制逆流色谱分离功劳木中生物碱的记载。
发明内容
本发明的目的就是为了解决上述问题，提供一种pH-区带精制逆流色谱分离功劳木中生物碱类化合物的方法。
为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
一种分离功劳木中生物碱类化合物的方法，应用pH-区带精制逆流色谱分离，所述的分离中所用到的条件是：溶剂***为氯仿：甲醇：水＝3.5-4.5:2.5-3.5:2.5-3.5(优选4:3:3)，pH-区带精制逆流色谱仪柱体积为200-400(优选300mL)，上样量2-5g(优选3g)，转速300-1000rpm(优选800rpm)，上相为固定相，下相为流动相，流速1.5-2.5mL/min(优选2.0mL/min)，固定相保留率35.71％，检测波长250-260nm(优选254nm)。
所述：功劳木中生物碱类化合物的提取方法：(1)采用乙醇对功劳木药材进行提取，将提取液真空浓缩至无醇味，得总提取物；(2)将总提取物调至酸性，石油醚萃取脱脂后，调整至碱性，搅拌沉淀，即为功劳木生物碱粗提物。
应用pH-区带精制逆流色谱分离的具体步骤如下：
(1)将溶剂***，置于分液漏斗中，摇匀后静置分层，待平衡一段时间后将上下两相分开，上相为固定相，下相为流动相，上相加入60mM盐酸，下相加入7.5mM三乙胺；
(2)取功劳木生物碱粗提物溶解于体积比为1:1的上相和下相的混合液中待用，所述功劳木生物碱粗提物与混合液的用量关系为3:10(g/mL)；
(3)首先使半制备型高速逆流色谱仪进样阀处于进样状态，将固定相用泵以20mL·min-1流速灌满色谱分离柱，停泵，开启速度控制器，使高速流色谱仪的色谱分离柱正转，达到设定转速时，将溶解好的样品用注射器注入逆流色谱仪进样阀的贮液管中，旋转进样阀为接柱状态，使样品进入色谱分离柱，设置流动相流速为1.5-2.5mL/min(优选2.0mL/min)，开始泵流动相，然后根据检测器紫外光谱图(图3)接收目标成分，，经旋转蒸发，冷冻干燥得固体粉末。
本发明的有益效果：
本发明的方法制备成本低于现有技术，操作简便，效率高，可以较大批量从中药功劳木中，分离制备出纯度大于96％的药根碱、小檗碱、巴马汀、非洲防己碱单体化合物的分离制备方法，本发明首次从中药功劳木中分离出非洲防己碱。
附图说明
图1为本发明的工艺流程图；
图2为功劳木生物碱总样分离的pH-区带精制逆流色谱图；
图3为生物碱总样的高效液相色谱图；
图4为药根碱单体的高效液相色谱图；
图5为小檗碱单体的高效液相色谱图；
图6为巴马汀单体的高效液相色谱图；
图7为非洲防己碱单体的高效液相色谱图；
图8为对比例1功劳木生物碱总样分离的pH-区带精制逆流色谱；
图9为对比例2功劳木生物碱总样分离的pH-区带精制逆流色谱。
具体实施方式
下面结合附图与实施例对本发明作进一步说明。
实施例1：
如图1功劳木中单体制备流程图所示。
取功劳木药材2kg粉碎后用95％乙醇回流提取3次(每次2h)，过滤，滤液减压浓缩至无醇味。
将上述浓缩后的提取液，加盐酸调节pH＝3，石油醚萃取3～5次除去脂溶性成分，萃取后的水层加氨水调节pH＝9，过滤得沉淀10.6g，即为所需生物碱总样。
应用pH-区带精制逆流色谱分离纯化功劳木生物碱总样
溶剂***为氯仿：氯仿：甲醇：水＝4:3:3，高速逆流色谱仪柱体积为300mL，上样量3g，转速800rpm，上相为固定相，下相为流动相，流速2.0mL/min，固定相保留率35.71％，检测波长254nm。
具体的操作步骤是：按上述溶剂比例配制溶剂***，置于分液漏斗中，摇匀后静置分层，待平衡一段时间后将上下两相分开，上相加入60mM盐酸，下相加入7.5mM三乙胺，以加酸上相作为固定相，加碱下相作为流动相。取3g功劳木生物碱粗提物溶解于5mL加酸上相和5mL不加碱下相的混合物中待用。采用上海同田公司研制的半制备型高速逆流色谱仪，它是由柱塞泵、进样阀、紫外检测仪、记录仪和色谱分离柱(由聚四氟乙烯管多层缠绕形成的螺旋管柱，容量为300mL)等组成，首先使进样阀处于进样状态，将固定相用泵以流速20mL·min-1灌满色谱分离柱，停泵。开启速度控制器，使高速流色谱仪的色谱分离柱正转，转速达800rpm时，将溶解好的样品用注射器注入逆流色谱仪进样阀的贮液管中，旋转进样阀为接柱状态，使样品进入色谱分离柱。设置流动相流速为2.0mL/min，开始泵流动相，然后根据检测器紫外光谱图(图3)接收目标成分。得小檗碱(157.2mg)，药根碱(160.6mg)，巴马汀(169.8mg)，非洲防己碱(28.1mg)和未知成分(53.7mg)，HPLC分析纯度均为96％以上。
利用高效液相色谱分析分离物，如图3-图7，液相条件：Kromasil100-5C18柱(4.6×250mmmm)，紫外检测波长265nm，柱温：25℃，流速：1.0mL/min，进样量：10μL，流动相采用乙腈：盐溶液(1％三乙胺溶液，用磷酸调pH＝3)＝25:75。
结构鉴定：对分离得到的生物碱应用Agilent5973N质谱仪和Varian600MHz核磁共振波谱仪分别进行MS，1HNMR谱的测定，所得数据如下：
药根碱：UV(λmax,MeOH):264,345nm.PositiveESI-MSm/z338[M+H]+.1HNMR(DMSO-d6,600MHz)δppm:9.86(1H,s,H-8),8.98(1H,s,H-13),8.19(1H,d,J＝9.0Hz,H-11),8.01(1H,d,J＝9.0Hz,H-12),7.69(1H,s,H-1),6.86(1H,s,H-4),4.91(2H,t,J＝6.0Hz,H-6),4.09(3H,s,10-OCH3),4.07(3H,s,9-OCH3),3.94(3H,s,2-OCH3),3.14(2H,t,J＝6.0Hz,H-5).
小檗碱：UV(λmax,MeOH):263and346nm.PositiveESI-MSm/z336[M+H]+.1HNMR(DMSO-d6,600MHz)δppm:9.90(1H,s,H-8),8.96(1H,s,H-13),8.21(1H,d,J＝9.0Hz,H-11),8.01(1H,d,J＝9.0Hz,H-12),7.80(1H,s,H-1),7.09(1H,s,H-4),6.18(2H,s,2,3-OCH2O),4.94(2H,t,J＝6.0Hz,H-6),4.10(3H,s,10-OCH3),4.07(3H,s,9-OCH3),3.21(2H,t,J＝6.0Hz,H-5).
非洲防己碱：UV(λmax,MeOH):263,345nm.PositiveESI-MSm/z338[M+H]+.1HNMR(DMSO-d6,600MHz)δppm:9.88(1H,s,H-8),8.82(1H,s,H-13),8.20(1H,d,J＝9.0Hz,H-11),8.06(1H,d,J＝9.0Hz,H-12),7.57(1H,s,H-1),7.06(1H,s,H-4),4.93(2H,t,J＝6.0Hz,H-6),4.09(3H,s,10-OCH3),4.07(3H,s,9-OCH3),3.90(3H,s,3-OCH3),3.19(2H,t,J＝6.0Hz,H-5).
巴马汀：UV(λmax,MeOH):272,345nm.PositiveESI-MSm/z352[M+H]+.1HNMR(DMSO-d6,600MHz)δppm:9.90(1H,s,H-8),9.08(1H,s,H-13),8.20(1H,d,J＝9.0Hz,H-11),8.04(1H,d,J＝9.0Hz,H-12),7.73(1H,s,H-1),7.10(1H,s,H-4),4.96(2H,t,J＝6.0Hz,H-6),4.10(3H,s,10-OCH3),4.08(3H,s,9-OCH3),3.94(3H,s,2-OCH3),3.88(3H,s,3-OCH3),3.23(2H,t,J＝6.0Hz,H-5).
对比例1
条件：氯仿：甲醇：水＝4:3:3，上相加10mMHCl，下相加20mM三乙胺，流速：2.0mL/min，温度：25℃，进样量3g，保留率：25％，其他的条件和操作同实施例1。如图8所示：分离结果：只分出小檗碱和非洲防己碱。其他的操作荣实施例1。
对比例2
条件：正己烷：乙酸乙酯：甲醇：水＝5:5:3:7，上相加10mMHCl，下相加20mM三乙胺，流速：2.0mL/min，温度：25℃，进样量3g，保留率：58％，其他的条件和操作同实施例1。如图9所示：分离结果：未分离出单一化合物。
上述虽然结合附图对本发明的具体实施方式进行了描述，但并非对本发明保护范围的限制，所属领域技术人员应该明白，在本发明的技术方案的基础上，本领域技术人员不需要付出创造性劳动即可做出的各种修改或变形仍在本发明的保护范围以内。

Claims (10)

1.一种分离功劳木中生物碱类化合物的方法，应用pH-区带精制逆流色谱分离，所述的分离中所用到的条件是：溶剂***为氯仿：甲醇：水=3.5-4.5:2.5-3.5:2.5-3.5，pH-区带精制逆流色谱仪柱体积为200-400，上样量2-5g，转速300-1000rpm，上相为固定相，下相为流动相，流速1.5-2.5mL/min，固定相保留率35.71%，检测波长250-260nm。
2.如权利要求1所述的方法，其特征是：所述溶剂***为氯仿：甲醇：水=4:3:3。
3.如权利要求1所述的方法，其特征是：所述pH-区带精制逆流色谱仪柱体积为300mL。
4.如权利要求1所述的方法，其特征是：所述上样量3g。
5.如权利要求1所述的方法，其特征是：所述转速800rpm。
6.如权利要求1所述的方法，其特征是：所述流速2.0mL/min。
7.如权利要求1所述的方法，其特征是：所述检测波长254nm。
8.如权利要求1所述的方法，其特征是：所述功劳木中生物碱类化合物的提取方法：（1）采用乙醇对功劳木药材进行提取，将提取液真空浓缩至无醇味，得总提取物；（2）将总提取物调至酸性，石油醚萃取脱脂后，调整至碱性，搅拌沉淀，即为功劳木生物碱粗提物。
9.如权利要求1所述的方法，其特征是：所述应用pH-区带精制逆流色谱分离的具体步骤如下：
（1）将溶剂***，置于分液漏斗中，摇匀后静置分层，待平衡一段时间后将上下两相分开，上相为固定相，下相为流动相，上相加入60mM盐酸，下相加入7.5mM三乙胺；
（2）取功劳木生物碱粗提物溶解于体积比为1:1的上相和下相的混合液中待用，所述功劳木生物碱粗提物与混合液的用量关系为3:10（g/mL）；
（3）首先使半制备型高速逆流色谱仪进样阀处于进样状态，将固定相用泵以20mL·min-1流速灌满色谱分离柱，停泵，开启速度控制器，使高速流色谱仪的色谱分离柱正转，达到设定转速时，将溶解好的样品用注射器注入逆流色谱仪进样阀的贮液管中，旋转进样阀为接柱状态，使样品进入色谱分离柱，设置流动相流速为1.5-2.5mL/min，开始泵流动相，然后根据检测器紫外光谱图接收目标成分，经旋转蒸发，冷冻干燥得固体粉末。
10.如权利要求1所述的方法，其特征是：所述步骤（3）中设置流动相流速为2mL/min。
CN201610133908.9A 2016-03-09 2016-03-09 pH‑区带精制逆流色谱分离功劳木中生物碱类化合物的方法 Active CN105693714B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610133908.9A CN105693714B (zh) 2016-03-09 2016-03-09 pH‑区带精制逆流色谱分离功劳木中生物碱类化合物的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610133908.9A CN105693714B (zh) 2016-03-09 2016-03-09 pH‑区带精制逆流色谱分离功劳木中生物碱类化合物的方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN105693714A true CN105693714A (zh) 2016-06-22
CN105693714B CN105693714B (zh) 2017-08-25

Family

ID=56220344

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201610133908.9A Active CN105693714B (zh) 2016-03-09 2016-03-09 pH‑区带精制逆流色谱分离功劳木中生物碱类化合物的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN105693714B (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110384697A (zh) * 2019-08-22 2019-10-29 深圳市药品检验研究院（深圳市医疗器械检测中心） 功劳木中抗乙酰胆碱酯酶活性组合物及其筛选方法和应用

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1994020850A1 (en) * 1993-03-05 1994-09-15 The Government Of The United States Of America, As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services pH-ZONE-REFINING COUNTERCURRENT CHROMATOGRAPHY
CN101973990A (zh) * 2010-10-20 2011-02-16 浙江工业大学 一种应用pH-区带精制逆流色谱分离去氢紫堇碱的方法
CN102060853A (zh) * 2010-12-13 2011-05-18 中国药科大学 逆转双向洗脱pH-区带精制逆流色谱法分离生物碱的方法
CN103933100A (zh) * 2013-01-17 2014-07-23 何欣 功劳木总生物碱的制备及其在预防和治疗胃溃疡药物中的应用

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1994020850A1 (en) * 1993-03-05 1994-09-15 The Government Of The United States Of America, As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services pH-ZONE-REFINING COUNTERCURRENT CHROMATOGRAPHY
CN101973990A (zh) * 2010-10-20 2011-02-16 浙江工业大学 一种应用pH-区带精制逆流色谱分离去氢紫堇碱的方法
CN102060853A (zh) * 2010-12-13 2011-05-18 中国药科大学 逆转双向洗脱pH-区带精制逆流色谱法分离生物碱的方法
CN103933100A (zh) * 2013-01-17 2014-07-23 何欣 功劳木总生物碱的制备及其在预防和治疗胃溃疡药物中的应用

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
CHANGLEI SUN等: "Preparative separation of quaternary ammonium alkaloids from Coptis chinensis Franch by pH-zone-refining counter-current chromatography", 《JOURNAL OF CHROMATOGRAPHY A》 *
缪维芳等: "pH-取代精制逆流色谱的研究与应用", 《消费导刊》 *
黄娟等: "pH区带精制逆流色谱在中药中的研究进展", 《中草药》 *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110384697A (zh) * 2019-08-22 2019-10-29 深圳市药品检验研究院（深圳市医疗器械检测中心） 功劳木中抗乙酰胆碱酯酶活性组合物及其筛选方法和应用
WO2021031579A1 (zh) * 2019-08-22 2021-02-25 深圳市药品检验研究院（深圳市医疗器械检测中心） 功劳木中抗乙酰胆碱酯酶活性组合物及其筛选方法和应用
CN110384697B (zh) * 2019-08-22 2021-07-27 深圳市药品检验研究院（深圳市医疗器械检测中心） 功劳木中抗乙酰胆碱酯酶活性组合物及其筛选方法和应用

Also Published As

Publication number Publication date
CN105693714B (zh) 2017-08-25

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101709059A (zh) 五味子单体成分的分离制备方法
CN110294673A (zh) 咖啡酰奎宁酸丁酯类同分异构体及其制备方法和应用
CN105541601B (zh) 一种松萝中有机酸单体的分离制备方法及应用
CN1289470C (zh) 白花败酱草中几种高纯度药用物质的快速制备方法
CN1307191C (zh) 用栀子果实制备栀子苷、京尼平－1－β－D－龙胆双糖苷的方法
CN106957310B (zh) 一种山楂叶中黄酮类单体的高效制备方法
CN111560024B (zh) 一种高速逆流色谱结合制备液相色谱从钩吻生物碱中分离钩吻生物碱单体的方法
CN105732611B (zh) 应用高速逆流色谱分离功劳木中生物碱类化合物的方法
CN102532147B (zh) 高***鲜碱单体的制备方法
Yan et al. Preparative isolation and purification of syringin and edgeworoside C from Edgeworthia chrysantha Lindl by high-speed counter-current chromatography
CN105693714A (zh) pH-区带精制逆流色谱分离功劳木中生物碱类化合物的方法
CN106831892B (zh) 一种山楂叶中黄酮单体的制备方法
CN1307193C (zh) 一种用栀子果实制备总环烯醚萜苷的方法
CN109912582A (zh) 从芒果叶中提取芒果苷的方法
CN114989152A (zh) 铁皮石斛叶中分离制备两种芹菜素糖苷的方法
CN102617656B (zh) 从对萼猕猴桃叶中分离制备高***酮苷类化合物的方法
Jian et al. Isolation and Purification of Triptolide from the Leaves of Tripterygium wilfordii Hook F
CN102924545A (zh) 一种木通皂苷d的富集和纯化方法
CN113105421A (zh) 一种高速逆流色谱分离纯化秦皮中秦皮素和秦皮乙素的方法
CN105985351B (zh) 高纯度芝麻素单体和芝麻林素单体的制备方法
CN112552150B (zh) 一种基于配位效应制备细辛醚单体的方法
CN109369382A (zh) 一种银杏酸类成分的制备方法
CN109485682B (zh) 提取山奈酚乙酰基半乳糖苷类化合物的方法
CN109232674B (zh) 从南山茶中提取白杨素-8-C-β-D-葡萄糖苷的方法
CN114085258B (zh) 一种逆流色谱连续进样从油橄榄叶中分离橄榄苦苷的方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant
EE01 Entry into force of recordation of patent licensing contract

Application publication date: 20160622

Assignee: Beijing Emilion Technology Co., Ltd.

Assignor: Shandong Analysis Test Center

Contract record no.: X2019370000028

Denomination of invention: Method for separating alkaloidal compounds from Chinese mahonia stems with pH-zone-refining countercurrent chromatography

Granted publication date: 20170825

License type: Exclusive License

Record date: 20191213

EE01 Entry into force of recordation of patent licensing contract