CN104188961A - 一种皮肤胶原蛋白增强剂及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种皮肤胶原蛋白增强剂及其应用。所述皮肤胶原蛋白增强剂包含甲基萘醌-7和维生素C作为活性成分，比单纯的甲基萘醌-7具有更强的改善皮肤的能力，可作为药物、化妆品或补剂的活性成分。

Description

一种皮肤胶原蛋白增强剂及其应用

技术领域

本发明涉及药物技术领域，尤其涉及一种皮肤胶原蛋白增强剂及其在药物、化妆品和补剂中的应用。

背景技术

皮肤主要由表皮、真皮和皮下组织组成。真皮位于表皮下方用于支撑皮肤结构并且由被称为细胞外基质的生物学结构填充，该细胞外基质由胶原蛋白和透明质酸构成。细胞外基质组分由成纤维细胞产生。在健康年轻的皮肤中，细胞外基质组分如胶原蛋白的产生对于防止细菌或病毒感染、皮肤疾病以及外来物质如变应原的进入以及保持皮肤的弹性和水分是充分的。然而，随着细胞外基质组分如胶原蛋白的减少而产生一些症状，如斑点、皱纹、下垂和粗糙皮肤等皮肤老化现象。

已经报道了许多关于增加皮肤胶原蛋白的材料。然而，这些材料中的大多数，效果不充分，生产成本非常高，并且由于食用它们的经验不足导致它们具有安全性的问题。

维生素K依赖性蛋白质中的特定谷氨酸残基转化为γ羧基谷氨酸(Gla)必需的一种维生素是维生素K。维生素K依赖性蛋白质的实例包括在肝中产生的与血液凝固相关的一些因子，在骨组织中产生的骨钙素，以及在软组织如血管中产生的基质Gla蛋白质。

预防和治疗由抗-EGFR疗法和皮疹所致的炎症相关的皮肤病症可以基于维生素K类对皮肤的作用。此外，维生素K类可以治疗与皮肤色素沉着相关的皮肤疾病，如黑色素；并且显示针对瘀伤或眼下黑圈具有显著效果。

中国发明专利申请CN103347505A公开了一种皮肤胶原蛋白增强剂，包含甲基萘醌-7作为活性成分。该皮肤胶原蛋白增强剂经皮或经口施用并且作为药物、化妆品或补剂提供。然而，所述皮肤胶原蛋白增强剂的效果还需要提高。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明人深入研究发现将甲基萘醌-7和维生素C组合作为活性成分皮肤胶原蛋白增强剂比单纯的甲基萘醌-7具有更强的改善皮肤的能力。

本发明的技术方案包括：

在第一方面，本发明提供一种皮肤胶原蛋白增强剂，所述皮肤胶原蛋白增强剂包含甲基萘醌-7和维生素C作为活性成分。

优选地，所述甲基萘醌-7和维生素C的质量比为1：10～10：1，优选为1：5～5：1，更优选为1：2～2：1，特别优选为1：1。

优选地，所述甲基萘醌-7的含量为0.01-90重量％，优选0.1-10重量％，更优选0.5-5重量％；所述维生素C的含量为0.01-90重量％，优选0.1-10重量％，更优选0.5-5重量％。

优选地，所述皮肤胶原蛋白增强剂还包含胶原蛋白、胶原蛋白降解产物或氨基酸中的一种或多种。

在第二方面，本发明提供一种第一方面所述的皮肤胶原蛋白增强剂在制备改善皮肤的药物中的应用。

优选地，所述药物为经口施用剂；优选地，所述经口施用剂为固体制剂或液体制剂；优选地，所述固体制剂为粉剂、粒剂、胶囊剂、丸剂、片剂、咀嚼片剂或滴剂，所述液体制剂为可饮用制剂、液体剂、混悬剂、乳剂、糖浆或干糖浆。

优选地，所述药物为经皮施用剂；优选地，所述经皮施用剂为溶液剂、液体剂、乳剂或霜剂。

在第二方面，本发明还提供一种第一方面所述的皮肤胶原蛋白增强剂在制备化妆品中的应用。

在第二方面，本发明还提供一种第一方面所述的皮肤胶原蛋白增强剂在制备补剂中的应用。

本发明的有益效果为：

本发明的皮肤胶原蛋白增强剂以甲基萘醌-7和维生素C组合作为活性成分，二者具有显著的协同作用，研究发现以甲基萘醌-7和维生素C组合作为活性成分的皮肤胶原蛋白增强剂比单纯的以甲基萘醌-7作为活性成分的皮肤胶原蛋白增强剂，具有更强的改善皮肤的能力。

附图说明

图1示出了甲基萘醌-7(MK-7)、维生素C和二者的组合对正常人皮肤成纤维细胞的胶原蛋白增强活性的评价结果。产生的胶原蛋白的量被显示为相对于当不添加样品时每单位量的蛋白质产生的、被定义为100的胶原蛋白的量的相对值，可见甲基萘醌-7和维生素C组合显著增加胶原蛋白的产生量。

具体实施方式

现在将详细描述本发明的胶原蛋白增强剂的实施方案。可以用于本发明的皮肤胶原蛋白增强剂的甲基萘醌-7是维生素K2中的一种。根据类异戊二烯侧链的长度的差异，维生素K2被分类为甲基萘醌-4到MK-15。本发明的皮肤胶原蛋白增强剂包含类异戊二烯侧链长度为7的维生素K2作为必须组分。

大量作为营养素包含在食物中的甲基萘醌-7可以获自被称为纳豆的发酵大豆。它还获自细菌如枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)或乳酸菌的发酵。此外，甲基萘醌-7可以化学合成。

本发明的皮肤胶原蛋白增强剂中甲基萘醌-7的含量取决于组合物的配方和施用量而变化，但是通常的范围为0.01至90重量％，优选0.1-10重量％，并且更优选为0.5-5重量％。0.01重量％以下的甲基萘醌-7的含量对于施用以获得皮肤胶原蛋白增加效果所需的量可能是不足够的，因为协同效果较低。

本发明的皮肤胶原蛋白增强剂中维生素C的含量取决于组合物的配方和施用量而变化，但是通常的范围为0.01至90重量％，优选0.1-10重量％，并且更优选为0.5-5重量％。0.01重量％以下的维生素C的含量对于施用以获得皮肤胶原蛋白增加效果所需的量可能是不足够的，因为协同效果较低。

除了作为必须组分的甲基萘醌-7和维生素C之外，本发明的皮肤胶原蛋白增强剂还可以包含一种或多种通常已知的具有皮肤胶原蛋白增强效果的食品成分。备选地，所述皮肤胶原蛋白增强剂还可以包含组分如胶原蛋白，胶原蛋白降解产物，或胶原蛋白的源，例如氨基酸。

在使用本发明的皮肤胶原蛋白增强剂作为药物的情况下，除了作为必须组分的甲基萘醌-7和维生素C及任选的胶原蛋白产生材料、胶原蛋白、胶原蛋白降解产物和氨基酸之外，所述药物还可以包含通常用作用于药物的助剂的那些。例如，根据配方和施用途径，所述药物可以含有通用的添加剂，如赋形剂、崩解剂、粘合剂、润滑剂、维生素、黄嘌呤衍生物、pH调节剂、冷却剂、混悬剂、增稠剂、增溶剂、抗氧化剂、包衣剂、增塑剂、表面活性剂、水、醇类、水溶性聚合物、增甜剂、矫味剂、酸化剂、香料和着色剂，所述添加剂在不损害本发明效果的定性和定量范围内。

为了被用作药物，本发明的皮肤胶原蛋白增强剂被配制成经口施用剂，例如，固体制剂如粉剂、粒剂、胶囊剂、丸剂、片剂、咀嚼片剂或滴剂，或液体制剂如可饮用制剂、液体剂、混悬剂、乳剂、糖浆或干糖浆；或经皮施用剂如溶液剂、液体剂、乳剂或霜剂。

在使用本发明的皮肤胶原蛋白增强剂作为药物的情况下，给药(施用)途径不受特别限制。例如，采用经口给药、经皮给药、输液或注射(肌肉内、腹膜内、皮下或静脉)。经口给药，如片剂和胶囊剂，对患者施加较小的负担并且因此是优选的。

在药物中使用本发明的皮肤胶原蛋白增强剂的情况下，施用量可以根据症状来适当地确定。通常，在用作预防性药物的情况下，甲基萘醌-7和维生素C每天的施用量可以为10μg至100mg，优选20μg至100mg，并且更优选5至50mg；而在用作治疗性药物的情况下，每天的量可以是1至150mg。

在使用本发明的皮肤胶原蛋白增强剂作为化妆品的情况下，除了作为必须组分的甲基萘醌-7和维生素C及任选的皮肤胶原蛋白产生材料、充当胶原蛋白的源的氨基酸、胶原蛋白降解产物、胶原蛋白和明胶以外，所述化妆品还可以包含通常用作用于化妆品的助剂的那些。所述助剂的实例包括多元醇类如乙二醇、聚乙二醇、丙二醇、1，3-丁二醇、1，4-丁二醇、二丙二醇、甘油、二甘油、聚甘油、戊二醇、异戊二醇、葡萄糖、麦芽糖、果糖、木糖醇、山梨糖醇、麦芽三糖和赤藓醇；低级醇类如甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、丁醇和异丁醇；高级脂肪酸类如油酸、异硬脂酸、月桂酸、肉豆蔻酸、棕榈酸、硬脂酸、山萮酸和十一碳烯酸；油类和脂肪类如橄榄油、玉米油、山茶油、澳洲坚果油、鳄梨油、菜子油、芝麻油、蓖麻油、红花油、棉子油、希蒙得木油、椰子油和棕榈油；蜡类如加拿巴蜡、小烛树蜡、蜂蜡和羊毛脂；糖类如山梨糖醇、甘露糖醇、葡萄糖、蔗糖、乳糖和海藻糖；增稠剂类如角叉菜胶、黄原胶、明胶、果胶、琼脂糖、藻酸盐、糊精、甲基纤维素、乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟乙基纤维素、羧甲基纤维素、羧基乙烯基聚合物、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、***树胶、剌梧桐树胶、黄菁胶和罗望子胶；防腐剂类如苯氧乙醇、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯、对羟基苯甲酸酯、苯甲酸、水杨酸及其盐、山梨酸及其盐、脱氢乙酸及其盐、氯甲酚和六氯酚；非离子表面活性剂类如十二烷基硫酸钠和聚氧乙烯山梨糖醇酐单油酸酯；阴离子表面活性剂类如烷基硫酸盐和正十二烷基苯磺酸钠；阳离子表面活性剂类如聚氧乙烯十二烷基一甲基氯化铵；甾族和非甾族抗炎药；维生素类如维生素A、维生素D、维生素E、维生素F、维生素K类(不同于甲基萘醌-7)；维生素衍生物类如二辛酸吡哆醇酯、二棕榈酸吡哆醇酯、二棕榈酸抗坏血酸酯、单棕榈酸抗坏血酸酯和单硬脂酸抗坏血酸酯；抗氧化剂类如类黄酮和类胡萝卜素；高级脂肪烃如角鲨烷、角鲨烯和液体石蜡；鞘脂类如神经酰胺、脑苷脂和鞘磷脂；甾醇类如胆固醇和植物甾醇；(聚)硅氧烷类如甲基聚硅氧烷、甲基苯基聚硅氧烷、甲基环聚硅氧烷、八甲基环四硅氧烷、八甲基环五硅氧烷、十甲基环五硅氧烷和甲基氢聚硅氧烷；紫外线吸收剂类如对氨基苯甲酸、对氨基苯甲酸单甘油酯、邻氨基苯甲酸甲酯、N-乙酰邻氨基苯甲酸三甲环己酯、对甲氧基肉桂酸辛酯和乙基-4-异丙基肉桂酸酯；矿物质类如膨润土、蒙脱土、贝得石、绿脱石、皂石、锂蒙脱石、锌蒙脱石和硅镁石；无机颜料类如红氧化铁、黄氧化铁、黑氧化铁、氧化钴、群青颜料、铁蓝颜料、氧化钛和氧化锌；着色剂类如红202号、黄4号、蓝404号；调味剂类；和香油类。

为了用作化妆品，本发明的皮肤胶原蛋白增强剂被配制成经皮施用剂如溶液剂、液体剂、乳剂、乳状洗剂、霜剂或粉剂；或经口施用剂，例如，固体制剂如粉剂、粒剂、胶囊剂、丸剂、片剂、咀嚼片或滴剂，或液体制剂如可饮用制剂、液体剂、混悬剂、乳剂、糖浆或干糖浆。

在使用本发明的皮肤胶原蛋白增强剂作为化妆品的情况下，施用途径是经口施用或经皮施用。从作为化妆品的即时效果的角度，液体剂、乳剂、乳状洗剂或霜剂形式的经皮施用是优选的。

在使用本发明的皮肤胶原蛋白增强剂作为补剂的情况下，除了作为必须组分的甲基萘醌-7和维生素C及任选的其他胶原蛋白增加材料以外，所述补剂还可以含有通常用作用于补剂的添加剂的那些。例如，根据用于经口施用的配方，所述补剂可以含有通用添加剂，如赋形剂、崩解剂、粘合剂、润滑剂、维生素、黄嘌呤衍生物、氨基酸、pH调节剂、冷却剂、混悬剂、增稠剂、增溶剂、抗氧化剂、包衣剂、增塑剂、表面活性剂、水、醇、水溶性聚合物、增甜剂、矫味剂、酸化剂、香料和着色剂，所述添加剂在不损害本发明效果的定性和定量范围内。

为了将本发明的皮肤胶原蛋白增强剂用作补剂，所述剂被加工成不同于普通食物的经口施用剂如粉剂、粒剂、胶囊剂、丸剂、片剂、咀嚼片或滴剂。

为了在功能食品如补剂中使用本发明的皮肤胶原蛋白增强剂，鉴于安全性，甲基萘醌-7和维生素C每天的施用量优选为0.01至50mg，更优选为0.01至1mg。

本发明的皮肤胶原蛋白增强剂的组合物实例显示在以下，但是本发明不限于以下组合物实例。

组合物实例1：片剂

组成	添加量(重量份)
		玉米淀粉	30
结晶纤维素	20
		羧甲基纤维素	15

甲基萘醌-7	0.01
		维生素C	0.1
乳糖	余量
		总计	100

组合物实例2：胶囊剂

组成	添加量(重量份)
		橄榄油	80
蜂蜡	2
		甘油	3
甲基萘醌-7	0.1
		维生素C	0.2
乳糖	余量
		总计	100

组合物实例2：洗剂

组成	添加量(重量份)
		乙醇	10
甘油	3
		丙二醇	3
甲基萘醌-7	1
		维生素C	10
净化水	余量
		总计	100

下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述。本领域技术人员将会理解，以下实施例仅为本发明的优选实施例，以便于更好地理解本发明，因而不应视为限定本发明的范围。

试验例

使用正常人成纤维细胞，将甲基萘醌-7(MK-7)和维生素C的组合的皮肤胶原蛋白增强活性与单纯的甲基萘醌-7(MK-7)、维生素C的皮肤胶原蛋白增强活性进行比较。

以2.0×10⁴细胞/孔的细胞密度将正常人皮肤成纤维细胞接种到96孔微板上，使用含有0.5重量％的胎牛血清(FBS)的达尔伯克改良伊格尔培养基(DMEM)(Sigma)。在接种48小时后，将所述培养基替换为含有0.5重量％的FBS和浓度为1×10^-6M的甲基萘醌-7的DMEM，1×10^-6M的维生素C的DMEM，0.1×10^-6M的甲基萘醌-7和0.9×10^-6M的维生素C的DMEM，0.9×10^-6M的甲基萘醌-7和0.1×10^-6M的维生素C的DMEM，将含样品的培养基培养50小时，并且收集培养基上清并对其进行ELISA以测量I型胶原蛋白的量。在0.5％TritonX-100溶液中裂解细胞，并测量蛋白质的量。

将培养基和用于标准曲线的I型胶原蛋白溶液置于高吸附ELISA板的每个孔上，并且在37℃进行2小时的涂覆，之后用1％牛血清清蛋白(BSA)溶液在37℃封闭1小时。初级抗体反应使用用0.3％BSA溶液稀释的抗-人胶原蛋白I型抗体(兔)在37℃进行1小时。次级抗体反应使用用磷酸盐缓冲液稀释的HistofineMAX-PO(R)(兔)在37℃进行1小时。向其中添加含0.3mg/mL的2，2’-连氮基二(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS)和0.03％过氧化氢的磷酸盐-柠檬酸盐缓冲液(0.1M，pH4.0)溶液，之后反应20分钟。利用微板读数计测量反应溶液在405nm处的吸光度。

由通过在相同ELISA板上的测量制得的标准曲线确定培养基中的I型胶原蛋白量，并且通过将培养基中的I型胶原蛋白量除以细胞的总蛋白量来计算I型胶原蛋白量/单位量的蛋白质。

图1示出了甲基萘醌-7(MK-7)、维生素C和二者的组合对正常人皮肤成纤维细胞的胶原蛋白增强活性的评价结果。产生的胶原蛋白的量被显示为相对于当不添加样品时每单位量的蛋白质产生的、被定义为100的胶原蛋白的量的相对值，可见甲基萘醌-7和维生素C组合显著增加胶原蛋白的产生量。对于包含样品的每个组，测试进行n＝6次，并且结果各自显示为平均值+标准偏差。相对于不含样品的对照组，通过t-检验进行统计处理，并且符号*表示低于1％的显著性水平。

如图1中所示，甲基萘醌-7和维生素C显著地增加胶原蛋白的产生量，增加量比单纯的甲基萘醌-7更大，而单纯的维生素C几乎未检测到对胶原蛋白的产生量的增加。

申请人声明，本发明通过上述实施例来说明本发明的详细特征以及详细方法，但本发明并不局限于上述详细特征以及详细方法，即不意味着本发明必须依赖上述详细特征以及详细方法才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明选用组分的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。

Claims (9)

1.一种皮肤胶原蛋白增强剂，所述皮肤胶原蛋白增强剂包含甲基萘醌-7和维生素C作为活性成分。

2.根据权利要求1所述的皮肤胶原蛋白增强剂，其特征在于，所述甲基萘醌-7和维生素C的质量比为1：10～10：1，优选为1：5～5：1，更优选为1：2～2：1，特别优选为1：1。

3.根据权利要求1或2所述的皮肤胶原蛋白增强剂，其特征在于，所述甲基萘醌-7的含量为0.01-90重量％，优选0.1-10重量％，更优选0.5-5重量％；所述维生素C的含量为0.01-90重量％，优选0.1-10重量％，更优选0.5-5重量％。

4.根据权利要求1-3任一项所述的皮肤胶原蛋白增强剂，其特征在于，所述皮肤胶原蛋白增强剂还包含胶原蛋白、胶原蛋白降解产物或氨基酸中的一种或多种。

5.权利要求1-4任一项所述的皮肤胶原蛋白增强剂在制备改善皮肤的药物中的应用。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述药物为经口施用剂；优选地，所述经口施用剂为固体制剂或液体制剂；优选地，所述固体制剂为粉剂、粒剂、胶囊剂、丸剂、片剂、咀嚼片剂或滴剂，所述液体制剂为可饮用制剂、液体剂、混悬剂、乳剂、糖浆或干糖浆。

7.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述药物为经皮施用剂；优选地，所述经皮施用剂为溶液剂、液体剂、乳剂或霜剂。

8.权利要求1-4任一项所述的皮肤胶原蛋白增强剂在制备化妆品中的应用。

9.权利要求1-4任一项所述的皮肤胶原蛋白增强剂在制备补剂中的应用。