CN104151311A - 一类稠环化合物或其药学上可接受的盐及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一类稠环化合物或其药学上可接受的盐的制备方法和应用，该稠环化合物具有式（I）所示结构，该稠环化合物对多种激酶活性具有很好的抑制作用，如其对c-kit、VEGFR-2和PDGFR-β等激酶有良好的抑制活性，而对c-Met激酶无抑制作用，显示出一定的选择性。同时，采用本发明的方法制备的具有式（I）所示结构的稠环化合物对多种肿瘤细胞的增殖具有抑制作用。
Description
技术领域
本发明涉及生物医药领域，特别涉及一类稠环化合物或其药学上可接受的盐及其制备方法，本发明还涉及该类稠环化合物或其药学上可接受的盐作为酪氨酸激酶抑制剂或丝氨酸-苏氨酸激酶抑制剂的应用。
背景技术
哺乳动物细胞之间具有相似的分子机制，在整个细胞周期内调节细胞的增殖、分化和死亡。其中，蛋白酪氨酸激酶和蛋白丝氨酸/苏氨酸激酶在正常细胞的信号转导机制中具有重要作用，它们的异常表达将导致许多疾病的产生，如肿瘤、动脉硬化、牛皮癣和炎症反应等，因而调控这些激酶的活性，恢复生理平衡可以作为一种新的治疗手段。
酪氨酸激酶家族以跨膜受体（受体酪氨酸激酶，RTKs）或胞质形式（非受体酪氨酸激酶，CTKs）广泛地参与细胞信号转导。人体基因组中，蛋白激酶组包括30种酪氨酸激酶家族，共含有90种不同的蛋白酪氨酸激酶，其中58种是受体酪氨酸激酶。
已知的受体酪氨酸激酶涵盖20个家族，并且许多是致癌基因（Blume-Jensen P,Nature,2001,411:355）。许多疾病与这种突变导致的受体酪氨酸激酶持续激活以及PTKs错误表达或过度表达相关。在恶性肿瘤的分子表征过程中发现近一半已知的PTKs，例如c-Met、EGFR、ErbB2、Ret、Kit、Src、Abl、PDGFR、VEGF1/2/3、FGFR1/2/3等，都存在突变或过度表达的情况。同时，临床研究显示酪氨酸激酶的过度表达或失调对肿瘤病人的以及病征的预测具有重要参考价值（Madhusudan S,et al,Clin Biochem,2004,37:618）。由上所述，酪氨酸激酶对生理自体调节十分重要，基因突变/重排会使PTKs异常或过度表达，从而导致疾病的发生，因此可以使用这些酶的激动剂或拮抗剂进行治疗。
非受体酪氨酸激酶（CTKs）：以src基因产物为代表，此外还有Yes、Fyn、Lck、Fgr、Lyn、Fps/Fes及Ab1等。除后两者外，其余非受体型蛋白酪氨酸激酶Src家族分子理约为60kDa的蛋白质，它们之间除了N末端80个氨基酸组成不同外，其他部分都非常相似。非受体酪氨酸激酶（CTKs）的调节机制差异较大，它们通过与跨膜受体（如荷尔蒙、细胞因子和生长因子受体）发生物理性作用，进而参与胞外信号响应。在细胞周期的特定阶段，当这些受体与细胞外的配体或细胞黏着成分相结合时即被活化。蛋白激酶的突变、信号蛋白的困扰是造成肿瘤的病理原因，同样也会导致其它疾病的发生。在一些免疫缺陷症中，可以观察到非受体酪氨酸的突变性失活，例如JAK3的失活引起严重的联合免疫缺陷（Leonard WJ,Nat Rev Immunol,2001,1:200；Leonard WJ,Int J Hematol,2001,73:271）。Bruton蛋白酪氨酸激酶（BTK or BPK、ATK）属于Src家族，是B细胞发育成熟所必须的一种酪氨酸激酶，而Btk基因突变会导致先天性无免疫球蛋白血症（Cheng G,et al,Proc Natl Acad Sci USA,1994,91:8152；Maas A,et al,J Immunol,1999,162:6526）。
酪氨酸蛋白激酶在中枢神经***中也具有重要的生理作用，其失常也会导致相应疾病的发生，例如在阿尔茨海默病（Alzheimer disease,AD）患者体内神经元斑与神经调节蛋白-1（neuregulin-1）和ErbB4的免疫反应性相关（Ferguson SS,Trends Neurosci,2003,26:119；Chaudhury AR,et al,J Neuropathol Exp Neurol,2003,62:42）。***（IGFs）及其调节蛋白是由心血管***分泌而来，这些因子调节异常会导致冠状动脉粥样硬化和再狭窄的发生发展，而IGFs的作用是由特异性膜受体所介导，其中IGF受体I型具有酪氨酸激酶活性，出现于动脉粥样硬化损伤处的平滑肌细胞,炎性细胞及动脉内皮细胞（Bayes-genis A,et al,Circ Res,2000,86:125；Bayes-genis A,et al,Artherio Thromb andVascu Biol,2001,21:335；Che WY,et al,Circ Res,2002,90:1222）。血管内皮生长因子及其受体在类风湿关节炎的多种细胞内表达，并且是类风湿性关节炎病理性血管新生过程中的关键因子（De Bandt M,et al,J Immunol,2003,1712:4853）。Jak2是胞浆非受体酪氨酸激酶，而JAK2基因突变至少引起三种疾病（Spivak JL,Blood,2002,100:4272；Thiele J,etal,Acta Haematol,2004,111:155）——真性红细胞增多症（PV）、特发性骨髓纤维化（IMF）、原发性血小板增多症（ET）以及一些其它不典型骨髓增殖性疾病（MPD）。成纤维细胞生长因子受体跨区域突变会导致最常见遗传性侏儒症——骨软骨发育不良（Shiang R,etal,Cell,1994,78:335）。此外，许多疾病与缺乏酪氨酸信号相关，例如非胰岛素依赖性糖尿病和外周神经疾病，而通过增强相应信号的传递可以有效地改善症状（Hunter T,Cell,2000,100:111）。针对其它一些与血管发生相关的疾病，例如某些心血管疾病，刺激血管生成比抑制更为有效。
有关酪氨酸激酶详细的讨论，参见Manning G,Science,2002,298:1912。
丝氨酸-苏氨酸激酶（STKs）是一大类特异性催化蛋白丝氨酸和苏氨酸残基磷酸化的激酶家族，编号：EC2.7.1.37。与非受体酪氨酸激酶一样，丝氨酸-苏氨酸激酶在细胞内占据主导地位，尽管仅具有几种丝氨酸-苏氨酸型受体激酶。丝氨酸-苏氨酸激酶是最常见的细胞溶胶激酶，即激酶在细胞质部分而不是在细胞质的细胞器和细胞骨架内发挥它们的功能，进而影响细胞的内部生物化学，经常作为对酪氨酸激酶事件的下行反应。同时丝氨酸-苏氨酸激酶可参与发信号过程，后者引发DNA合成和随后引起细胞增殖的有丝***。此外丝氨酸-苏氨酸激酶已涉及多种类型的癌症，如乳腺癌（Cance et al,Int.J.Cancer,1993,55,571）等。
综上，酪氨酸激酶和丝氨酸-苏氨酸激酶均与宿主的病理状况包括癌症有关。与蛋白激酶有关的其它病理状况还包括牛皮癣、肝硬化、糖尿病、血管发生、再狭窄、眼科疾病、类风湿关节炎和其它的炎症疾病、免疫疾病、心血管疾病如动脉硬化和多种肾病。
随着分子生物学的研究深入，在分子水平上针对细胞信号转导，调节生长因子的功能和调控致癌基因是抑制细胞增殖和***的有效途径。该途径可以减弱非正常信号通道的效应，阻止肿瘤的生长，同时也可促使肿瘤细胞死亡。迄今发现有一半原癌基因在蛋白编码上都具有酪氨酸结构，它们通过磷酸化和去磷酸化参与细胞信号转导，同时在肿瘤发生过程中，变异或过度表达的酪氨酸激酶可以将正常细胞转变为癌细胞，同时促进肿瘤细胞的生长和有丝***。由于酪氨酸激酶和丝氨酸-苏氨酸激酶在细胞的致癌性转化过程中具有重要的作用，并与肿瘤的产生和发展有着直接或间接联系，因此将酪氨酸激酶抑制剂或丝氨酸-苏氨酸激酶抑制剂应用于肿瘤的治疗尤为合适。
萘啶衍生物具有广泛的生物活性，在医药领域具有重要的应用。近年来，许多萘啶类小分子化合物已被作为蛋白激酶抑制剂，广泛用于治疗多种与异常激酶活性相关的疾病，如肿瘤、牛皮癣、肝硬化、糖尿病、血管发生、眼科疾病、类风湿关节炎和其它的炎症疾病、免疫疾病、心血管疾病如动脉硬化和多种肾病。其中，2,7-萘啶类化合物（WO2013033981、WO0192256、WO0242264）、1,5-萘啶类化合物（WO2006106046）、1,6-萘啶类化合物（WO2007060028、WO2010037249、WO2010088177）、2,6-萘啶类化合物（WO2008122614）、杂环稠合萘啶类化合物（WO2009148887、WO2009148916）、2,7-萘啶酮类化合物（WO2008109613、WO2009097287）、1,8-萘啶酮类化合物（WO2010002779）等均用于酪氨酸激酶和/或丝氨酸-苏氨酸激酶抑制剂。但2,7-萘啶-1（2H）-酮类化合物用于治疗酪氨酸激酶和/或丝氨酸-苏氨酸激酶抑制剂鲜见报道，仅WO2013033981专利中公开了一类作为c-Met激酶抑制剂的2,7-萘啶-1（2H）-酮类化合物，该类化合物同时对VEGFR-2和c-kit激酶具有一定的抑制活性。
2,7-萘啶-1（2H）-酮是一类重要的杂环结构，分子式为C8H6N2O，分子量为146.1，具有以下化学结构。
因此，需要开发结构类型更丰富，对不同激酶的抑制活性有一定差异的化合物，以应用于治疗各种类型的肿瘤。
发明内容
本发明的目的在于开发结构类型更丰富，对不同激酶的抑制活性有一定差异的稠环化合物或其药学上可接受的盐，以应用于治疗各种类型的肿瘤。
本发明的发明人通过大量的科学研究，制备出具有式（I）所示结构的稠环化合物或其药学上可接受的盐，并发现该稠环化合物或其药学上可接受的盐对VEGFR-2、c-kit和PDGFR-β表现出优异的抑制活性，明显优于阳性药OSI-930和WO2013033981专利中公开的典型化合物A，而对c-Met激酶无明显的抑制效果，与WO2013033981专利中公开的典型化合物A在激酶谱上也存在明显的差异，从而可能应用于不同类型肿瘤的治疗。
本发明提供一种稠环化合物或其药学上可接受的盐，其中，该稠环化合物的结构式如式（I）所示，
其中，
M为0或1；n为0、1、2、3或4；
R1选自氢、未取代的C1-C10烷基（可以是直链或支链的）以及被一个或多个选自C1-C10烷基、C1-C10烷氧基和卤素的取代基取代的C1-C10烷基中的一种；
R2选自氢、卤素、未取代的C1-C10烷基（可以是直链或支链的）、羟基、未取代的C1-C10烷氧基、被一个或多个选自C1-C10烷基、C1-C10烷氧基和卤素的取代基取代的C1-C10烷基、以及被一个或多个选自C1-C10烷基、C1-C10烷氧基和卤素的取代基取代的C1-C10烷氧基中的一种；
A选自六元杂芳基、五元并六元杂芳基、六元并六元杂芳基、六元芳环、六元并六元芳环基，以及被一个或多个选自氢、C1-C4烷基、卤素、卤代C1-C4烷基、羟基、C1-C4烷氧基、C6-C10芳氧基、氰基、硝基和氨基的取代基取代的六元杂芳基、五元并六元杂芳基、六元并六元杂芳基、六元芳环和六元并六元芳环基中的一种。
优选地，m为1；n为0、1或2；
R1选自氢和C1-C4烷基中的一种；
R2选自氢、卤素、C1-C4烷基、羟基、C1-C4烷氧基和被一个或多个卤素取代基取代的C1-C4烷氧基中的一种；
A选自呋喃基、吡啶基、嘧啶基、噻吩并吡啶基、喹唑啉基、喹啉基、萘基、苯基，以及被一个或多个选自氢、卤素和C1-C4烷基的取代基取代的呋喃基、吡啶基、嘧啶基、噻吩并吡啶基、喹唑啉基、喹啉基、萘基和苯基中的一种；
更优选地，A选自以下基团：
中的一种。
优选地，所述的稠环化合物选自：
中的一种。
本发明还提供了一种制备上述所述的具有式（I）所示结构的稠环化合物或其药学上可接受的盐的方法，该方法包括下列步骤：在反应溶剂S1、碱B、催化剂C以及配体L存在下，式（II）所示的2,7-萘啶酮类化合物与式（III）所示的氨基取代化合物发生偶联反应；
具体反应过程如下所示：
其中，m为0或1；n为0、1、2、3或4；
R1选自氢、未取代的C1-C10烷基（可以是直链或支链的）以及被一个或多个选自C1-C10烷基、C1-C10烷氧基和卤素的取代基取代的C1-C10烷基中的一种；
R2选自氢、卤素、未取代的C1-C10烷基（可以是直链或支链的）、羟基、未取代的C1-C10烷氧基、被一个或多个选自C1-C10烷基、C1-C10烷氧基和卤素的取代基取代的C1-C10烷基、以及被一个或多个选自C1-C10烷基、C1-C10烷氧基和卤素的取代基取代的C1-C10烷氧基中的一种；
A选自六元杂芳基、五元并六元杂芳基、六元并六元杂芳基、六元芳环、六元并六元芳环基，以及被一个或多个选自氢、C1-C4烷基、卤素、卤代C1-C4烷基、羟基、C1-C4烷氧基、C6-C10芳氧基、氰基、硝基和氨基的取代基取代的六元杂芳基、五元并六元杂芳基、六元并六元杂芳基、六元芳环和六元并六元芳环基中的一种。
优选地，m为1；n为0、1或2；
R1选自氢和C1-C4烷基中的一种；
R2选自氢、卤素、C1-C4烷基、羟基、C1-C4烷氧基和被一个或多个卤素取代基取代的C1-C4烷氧基中的一种；
A选自呋喃基、吡啶基、嘧啶基、噻吩并吡啶基、喹唑啉基、喹啉基、萘基、苯基，以及被一个或多个选自氢、卤素和C1-C4烷基的取代基取代的呋喃基、吡啶基、嘧啶基、噻吩并吡啶基、喹唑啉基、喹啉基、萘基和苯基中的一种；
更优选地，A选自以下基团：
中的一种。
根据本发明，反应溶剂S1可以选自4-二氧六环和/或乙二醇二甲醚，优选为1,4-二氧六环；
优选地，碱B选自氢氧化钠、氢化钠、叔丁醇钠和叔丁醇钾中的一种或多种，优选为叔丁醇钠；
优选地，催化剂C选自醋酸钯、四三苯基磷钯、二氯二三苯基磷钯和三(二亚苄基丙酮)二钯中的一种或多种，优选为三(二亚苄基丙酮)二钯；
优选地，配体L为膦配体，优选为1,2-双（二苯基膦）丙烷和/或4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽；
优选地，所述偶联反应的温度为90-115℃，优选为100-110℃。
根据本发明，本发明所涉及的化合物（II）可以参照本领域相似文献报道的方法进行制备，如WO2013033981以及他们所引用的相关文献。
本发明还提供了一种药物组合物，该药物组合物含有上述所述的具有式（I）所示结构的稠环化合物或其药学上可接受的盐作为的活性成分、药用载体物质和/或稀释剂。
根据本发明，所述活性成分、药用载体物质和/或稀释剂的用量没有具体限定，选用本领域技术人员所熟知的用量即可。
本发明还提供了一种药用组合物，该药物组合物含有采用本发明的方法制备的上述所述的具有式（I）所示结构的稠环化合物或其药学上可接受的盐作为的活性成分、药用载体物质和/或稀释剂。另外，该药物组合物还可以含有采用本发明的方法制备的上述所述的具有式（I）所示结构的稠环化合物和药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂。
本发明还涉及一种组合的药用组合物，包含有效量的游离形式或可药用盐形式的具有式（I）所示结构的稠环化合物或其药学上可接受的盐、一种或多种药用载体物质和/或稀释剂。
本发明还提供了具有式（I）所示结构的稠环化合物或其药学上可接受的盐、含有上述所述具有式（I）所示结构的稠环化合物或其药学上可接受的盐的药物组合物在制备治疗经蛋白激酶中介的疾病药物方面的应用。
根据本发明，所述经蛋白激酶中介的疾病可以选自与VEGFR-2、c-kit或PDGFR-β相关的疾病，也即所述蛋白激酶可以选自VEGFR-2、c-kit和PDGFR-β中的一种或多种。
优选地，所述经蛋白激酶中介的疾病选自结肠直肠癌、膀胱癌、乳腺癌、肝癌、肺癌、胰腺癌、胃肠癌、白血病、卵巢癌、头和颈癌、***癌、肾癌、鼻咽癌、成胶质细胞瘤、鳞状细胞癌、星形细胞癌、卡波济氏肉瘤、黑素瘤、神经胶质瘤、泌尿生殖道癌和骨髓增殖性疾患中的一种或多种。
根据本发明，优选地，所述蛋白激酶相关疾病选自受体酪氨酸激酶相关的疾病、非受体酪氨酸激酶相关的疾病或丝氨酸-苏氨酸激酶相关的疾病。
根据本发明，优选地，所述蛋白激酶相关疾病选自肝细胞生长因子、血管内皮生长因子受体相关的疾病、干细胞因子受体相关的疾病、表皮生长因子受体相关的疾病、血小板衍生生长因子受体相关的疾病、***受体相关的疾病或胎肝激酶相关的疾病。
根据本发明，优选地，所述蛋白激酶相关疾病选自糖尿病、过度增殖性疾病、血管发生、炎性疾病、免疫性疾病或心血管疾病。
根据本发明，优选地，所述蛋白激酶相关疾病（或增殖性疾病）选自结肠直肠癌、膀胱癌、乳腺癌、肝癌、肺癌、胰腺癌、胃肠癌、白血病、卵巢癌、头和颈癌、***癌、肾癌、鼻咽癌、成胶质细胞瘤、鳞状细胞癌、星形细胞癌、卡波济氏肉瘤、黑素瘤、神经胶质瘤、泌尿生殖道癌或骨髓增殖性疾患。
根据本发明，为了检验本发明提供的具有式（I）所示结构的稠环化合物对于蛋白激酶的作用水平，采用生化水平酶活性测试、细胞水平酶活性测试、抑制肿瘤细胞增殖活性测试来确定本发明的各种稠环化合物对一种或多种PK的活性和作用水平。使用工艺中熟知的方法，对于任何激酶均可按照同样的方式设计类似的实验。
根据本发明，在生化水平酶活性测试中，利用HTRF技术检测酪氨酸激酶的活性，HTRF是一种时间分辨荧光共振能力转移技术，可以按照已知的说明书或文献方法进行，参看Kolb等，“Tyrosine kinase assays adapted to homogenous time-resolved fluorescence”.Drug Discovery Today杂志.3卷：pp333-342。HTRF(均相时间分辨荧光)是用来检测均相体系中待测物的一种最常用的方法，这种技术结合了荧光共振能量转移(FRET)和时间分辨技术(TR)，已经被广泛应用于基于细胞实验和生化实验的药物研发的不同阶段。根据HTRF法的测定原理，将纯酶与生物素化的底物以及ATP一起孵育反应后，加入亲和素标记的XL-665和识别底物磷酸化的Eu标记的抗体，当底物被激酶磷酸化后，Eu标记的抗体即可以识别该磷酸化产物，与亲和素标记的XL665形成时间分辨的荧光共振能量转移（FRET），而未被磷酸化的底物由于不能倍抗体识别而无法形成FRET信号，通过测定665nm和620nm的荧光信号差值测定待测物在不同浓度下对VEGFR-2、c-Kit、PDGFR-β、c-Met等酪氨酸激酶的抑制活性。因而，采用此法可测定本发明的稠环化合物对上述酪氨酸激酶的生化水平的活性作用，同时利用本领域熟知的方法，可以对其它蛋白激酶使用相似的测定方法。
根据本发明，在细胞水平酶活性测试中，酶联免疫吸附测定（ELISA）可以用来检验和测定酪氨酸激酶活性的存在。ELISA可以按照已知的方法进行，例如Voller等，1980，“酶联免疫吸附测定”（Enzyme-Linkd Immunosorbent Assay），见Rose和Friedman编著的《临床免疫学手册》（Manual of Clinical Immunology），第2版，pp359-371,美国微生物学会出版，华盛顿特区。VEGFR-2、c-Kit、PDGFR-β、c-Met等酪氨酸激酶催化ATP与生物素标标记的底物肽的磷酸化反应，抑制酶活性将抑制这一反应。
根据本发明，在抑制肿瘤细胞增殖活性测试中，测定按常规采用溴化四氮唑蓝（MTT）法。活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性黄色的溴化3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑（MTT）还原为难溶性的蓝紫色结晶物甲臢（Formazan），并沉积在细胞中，而死细胞无此功能，二甲基亚砜（DMSO）能溶解细胞中的紫色结晶物甲臢，用酶联免疫检测仪在570nm波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。因而甲臢生成量在通常情况下与活细胞数成正比，可根据OD值推测出活细胞的数目，了解药物抑制或杀伤细胞的能力。该测定方法可以用于测定不同的本发明的稠环化合物或其药学上可接受的盐对一种或多种癌细胞增殖的抑制能力，利用本领域熟知的方法，可以对任意癌细胞使用相似的测定方法。
根据本发明，本发明制备的结构如式（I）所示的稠环化合物或其药学上可接受的盐对多种激酶活性具有很好的抑制作用，其对VEGFR-2和c-kit等激酶的半数抑制浓度（IC50）普遍在10-7mol/L以下。同时，本发明实施例中制备的具有式I结构的稠环化合物或其药学上可接受的盐对多种肿瘤细胞的增殖具有抑制作用，其中大部分的稠环化合物抑制肿瘤细胞增殖的效果显著，其IC50在10-5mol/L以下。有此推知，本发明具有式（I）结构的稠环化合物或其药学上可接受的盐可应用于制备治疗有机体中蛋白激酶相关疾病的药物。
发明的详细说明
根据本发明，除非有相反陈述，下列用在说明书和权利要求中的术语具有下述含义。
根据本发明，“烷基”指饱和的脂族烃基团。包括1至20个碳原子的直链或支链基团。优选含有1至10个碳原子的中等大小烷基，例如甲基、乙基、丙基、2-丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、戊基等。更优选的是含有1至4个碳原子的低级烷基，例如甲基、乙基、丙基、2-丙基、正丁基、异丁基或叔丁基等。烷基可以是取代的或未取代的，当被取代时，优选的基团为：卤素、C2-C6烯基、C6-C10芳基、C5-C10杂芳基、卤代C1-C10烷基、5至8元杂脂环基、羟基、C1-C10烷氧基、C6-C10芳氧基、-NR7R8、-NR7C(=O)R8、-C(=O)OR9或-OC(=O)R9。
根据本发明，“环烷基”指3至8元全碳单环、全碳5元/6元或6元/6元稠和环或多环稠和环（“稠和”环意味着***中的每个环与***中的其它环共享毗邻的一对碳原子）基团，其中一个或多个环具有完全连接的电子***，环烷基的实例（不局限于）为环丙烷、环丁烷、环戊烷、环戊烯、环己烷、金刚烷、环己二烯、环庚烷和环庚三烯。环烷基为可取代的和为取代的。当被取代时，取代基优选为一个或多个各自选自以下的基团，包括：C1-C10烷基、C6-C10芳基、C5-C10杂芳基、卤素、5至8元杂脂环基、羟基、巯基、C1-C10烷氧基、C6-C10芳氧基、C1-C10烷巯基、C6-C10芳巯基、氰基、硝基、-NR7R8、-NR7C(=O)R8、-C(=O)NR7R8、-C(=O)R9、-C(=O)OR9、-S(O)R10、-S(O)2R10、-S(O)2NR7R8或-OC(=O)R9。
根据本发明，“芳基”表示6至14个碳原子的全碳单环或稠合多环基团，具有完全共轭的π电子***。
“芳基”包括：
六元的碳芳香环，如，苯；
双环，其中至少有一个环是碳芳香环，如，萘，茚和1,2,3,4-四氢喹啉；以及
三环，其中至少有一个环是碳芳香环，如，芴。
例如，芳基包括含六元的碳芳香环并一个六元杂环，这个杂环包含一个或多个选自氮、氧和硫的杂原子，条件是连接点在碳芳香环上。但是，芳基不包含、也不通过任何方式与下面分别定义的杂环芳基重叠。因此，在此定义，如果一个或多个碳芳香环与一个杂芳香环并环，由此产生的环***是杂芳基，而不是芳基。芳基的非限制性实例有苯基、萘基。芳基可以是取代的或未取代的。当被取代时，优选的基团为：氢、C1-C10烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C6-C10芳基、C5-C10杂芳基、C6-C10芳基C1-C10烷基、C5-C10杂芳基C1-C10烷基、卤素、卤代C1-C10烷基、5至8元杂脂环基、羟基、C1-C10烷氧基、C6-C10芳氧基、氰基、硝基、-NR7R8、-NR7C(=O)R8、-C(=O)R9、-C(=O)OR9、-C(=O)NR7R8、-S(O)R10、-S(O)2R10、-S(O)2NR7R8、-O(CH2)nR11或-OC(=O)R9。
根据本发明，“杂芳基”表示5至14个环原子的单环或稠合环基团，含有一个、两个、三个或四个选自N、O或S的环杂原子，其余环原子是C，另外具有完全共轭的π电子***。
杂芳基指的是：
5-8元的单环芳烃，含一个或多个选自N、O和S的杂原子，如1-4个杂原子，在一些实施方案中，1-3个杂原子，环上其他原子是碳原子；
8-12元的双环芳烃，含一个或多个选自N、O和S的杂原子，如1-4个杂原子，在一些实施方案中，1-3个杂原子，环上其他原子是碳原子；其中至少有一个环是芳香环；以及
11-14元的三环芳烃，含一个或多个选自N、O和S的杂原子，如1-4个杂原子，在一些实施方案中，1-3个杂原子，环上其他原子是碳原子；其中至少有一个环是芳香环。
例如，杂芳基包括一个5-6元的杂芳香环并一个5-6元的环烷基。对于这样的双环并起来的杂芳基，其中只有一个环含有一个或多个杂原子，连接位点在杂芳香环上。
当杂芳基上的硫原子和氧原子总数超过1时，这些杂原子不会一一相邻。在一些实施方案中，硫原子和氧原子在杂芳基中的总数不超过2。在一些实施方案中，硫原子和氧原子在杂芳基中的总数不超过1。
杂芳基的例子，包括但不限于，吡咯、呋喃、噻吩、咪唑、噁唑、噻唑、吡唑、嘧啶、吡啶、吡啶酮、咪啶、吡嗪、哒嗪、吲哚、氮杂吲哚、苯并咪唑、吲哚啉、吲哚酮、喹啉、异喹啉、喹唑啉、噻吩并吡啶、噻吩并嘧啶等。此类基团的优选实施例为噻吩、吡啶、喹啉、喹唑啉、噻吩并嘧啶。杂芳基中的一个或全部氢原子可被下列基团取代：C1-C10烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C6-C10芳基、C5-C10杂芳基、C6-C10芳基C1-C10烷基、C5-C10杂芳基C1-C10烷基、卤素、卤代C1-C10烷基、5至8元杂脂环基、羟基、C1-C10烷氧基、C6-C10芳氧基、氰基、硝基、-NR7R8、-NR7C(=O)R8、-C(=O)R9、-C(=O)OR9、-C(=O)NR7R8、-S(O)R10、-S(O)2R10、-S(O)2NR7R8、-O(CH2)nR11或-OC(=O)R9。
根据本发明，“杂脂环基”表示单环或稠和环基团，在环中具有5到9个环原子，其中一个或两个环原子是选自N、O或S(O)p（其中p是0至2的整数）的杂原子，其余环原子是C。这些环可以具有一条或多条双键，但这些环不具有完全共轭的π电子***。未取代的杂脂环基的非限制性实例有吡咯烷基、哌啶子基、哌嗪子基、吗啉代基、硫代吗啉代基、高哌嗪子基等。杂脂环基可以是取代的或未取代的。当被取代时，取代基优选为一个或多个，更为优选为一个、两个或三个，进而更优选为一个或两个，独立地选自以下基团，包括：氢、羟基、C1-C10烷基、C6-C10芳基、C5-C10杂芳基、3至8元全碳单环环烷基、5至8元杂脂环基、-C(=O)R9或-S(O)2R10，其中C1-C10烷基、C6-C10芳基、C5-C10杂芳基、3至8元全碳单环环烷基、5至8元杂脂环基进一步被一个或多个选自C1-C10烷基、C2-C6烯基、C6-C10芳基、C5-C10杂芳基、-C(=O)R9、-C(=O)OR9、羟基、C1-C10烷氧基、C6-C10芳氧基、-O(CH2)nR11、-OC(=O)R10、-NR7R8或-NR7C(=O)R8的取代基所取代。
哌嗪子基指的是具有以下化学结构的基团。
吗啉代基指的是具有以下化学结构的基团。
哌啶子基指的是具有以下化学结构的基团。
吡咯烷基指的是具有以下化学结构的基团。
根据本发明，“烯基”表示具有1个或多个双键的直链或支链烃基。典型地为C2-C6烯基，例如乙烯基、烯丙基、丁烯基、丁二烯基、戊烯基或己烯基。
根据本发明，“炔基”表示具有1个或多个三键的直链或支链烃基。典型地为C2-C6炔基，例如乙炔基、丙炔基、丁炔基。
根据本发明，“烷氧基”表示-O-（未取代的烷基）和-O（未取代的环烷基）。代表性的实例包括但不限于甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、环丙氧基、环丁氧基、环戊氧基、环己氧基等。
根据本发明，“芳氧基”表示-O-芳基和-O-杂芳基。代表性实例包括但不限于苯氧基、吡啶氧基、呋喃氧基、噻吩氧基、嘧啶氧基、吡嗪氧基等及其衍生物。
根据本发明，“芳烷基”表示烷基，优选如上所定义的低级烷基，它被如上所述的芳基取代，例如-CH2苯基、-(CH2)2苯基、-(CH2)3苯基、CH3CH(CH3)CH2苯基及其衍生物。
根据本发明，“杂芳烷基”表示烷基，优选如上所定义的低级烷基，它被如上所述的杂芳基取代，例如-CH2吡啶基、-(CH2)2嘧啶基、-(CH2)3咪唑基等及其衍生物。
“羟基”表示-OH基团。
“巯基”表示-SH基团。
“卤素”表示氟、氯、溴或碘，优选为氟或氯。
“卤代烷基”表示烷基，优选如上所定义的低级烷基，它被一个或多个相同或不同的卤原子取代，例如-CH2Cl、-CF3、-CCl3、-CH2CF3、-CH2CCl3等。
“三卤甲基”表示-CX3基团，其中X是如上所定义的卤素。
“氰基”表示-CN基团。
“氨基”表示-NH2基团。
“硝基”表示-NO2基团。
根据本发明，所谓“任选地”的意思是指后续描述的事件或情形可能会也可能不会发生，并且该描述包括事物或情形可能会也可能不会发生，并且该描述包括事物或情形发生和不发生两种情况。
根据本发明，在一些实施方案中，“被一个或多个基团取代”是指在指定的原子或基团中的一个、两个、三个或四个氢原子分别被指定范围的基团中选出的相同或不同的基团替换。
根据本发明，“药学上可接受的盐”表示保留母体化合物的生物有效性和性质的那些盐。这类盐包括：
（1）与酸成盐，通过母体化合物的游离碱与无机酸或有机酸的反应而得，无机酸包括盐酸、氢溴酸、硝酸、磷酸、偏磷酸、硫酸、亚硫酸和高氯酸等，有机酸包括乙酸、丙酸、丙烯酸、草酸、（D）或（L）苹果酸、富马酸、马来酸、羟基苯甲酸、γ-羟基丁酸、甲氧基苯甲酸、邻苯二甲酸、甲磺酸、乙磺酸、萘-1-磺酸、萘-2-磺酸、对甲苯磺酸、水杨酸、酒石酸、柠檬酸、乳酸、扁桃酸、琥珀酸或丙二酸等。
（2）存在于母体化合物中的酸性质子被金属离子代替或者与有机碱配位化合所生成的盐，金属例子例如碱金属离子、碱土金属离子或铝离子，有机碱例如乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、氨丁三醇、N-甲基葡糖胺等。
“药物组合物”指将本发明中的稠环化合物中的一个或多个或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物或前药与别的化学成分，例如药学上可接受的载体，混合。药物组合物的目的是促进给药给动物的过程。
“药用载体”指的是对有机体不引起明显的刺激性和不干扰所给予化合物的生物活性和性质的药物组合物中的非活性成分，例如但不限于：碳酸钙、磷酸钙、各种糖（例如乳糖、甘露醇等）、淀粉、环糊精、硬脂酸镁、纤维素、碳酸镁、丙烯酸聚合物或甲基丙烯酸聚合物、凝胶、水、聚乙二醇、丙二醇、乙二醇、蓖麻油或氢化蓖麻油或多乙氧基氢化蓖麻油、芝麻油、玉米油、花生油等。
前述的药物组合物中，除了包括药学上可接受的载体外，还可以包括在药（剂）学上常用的辅剂，例如：抗细菌剂、抗真菌剂、抗微生物剂、保质剂、调色剂、增溶剂、增稠剂、表面活性剂、络合剂、蛋白质、氨基酸、脂肪、糖类、维生素、矿物质、微量元素、甜味剂、色素、香精或它们的结合等。
具体实施方式
本发明提供了一种稠环化合物或其药学上可接受的盐及其制备方法、该稠环化合物或其药学上可接受的盐的中间体及其制备方法，以及该稠环化合物或其药学上可接受的盐作为酪氨酸激酶和/或丝氨酸-苏氨酸激酶抑制剂的应用，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过优选的实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。
下面结合实施例，进一步阐述本发明。
实施例1
化合物1的制备：
8-氯-2-(4-氟苯基)-2,7-萘啶-1(2H)-酮的制备：
参照文献WO2013033981中报道的方法可制备8-氯-2-(4-氟苯基)-2,7-萘啶-1(2H)-酮（2.4g）。MS:[M+H]+=275.0。
2-(4-氟苯基)-8-苯基氨基-2,7-萘啶-1(2H)-酮的制备:
向反应瓶中加入苯胺（47mg,0.5mM），8-氯-2-(4-氟苯基)-2,7-萘啶-1(2H)-酮（137mg,0.5mM），三(二亚苄基丙酮)二钯（92mg,0.1mM），4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽（58mg,0.1mM），叔丁醇钠（58mg,0.12mM）和1,4-二氧六环（15mL），抽充氮气三次，于106℃反应4小时，点板反应完全，冷至室温，抽滤，浓缩，粗品硅胶柱层析（PE/EA10/1to3/1）得到2-(4-氟苯基)-8-苯基氨基-2,7-萘啶-1(2H)-酮（108mg）。
MS:[M+H]+=332.1。1H-NMR(400M,DMSO-d6)δ11.80(s,1H),8.30(d,J=5.2Hz,1H),7.81(d,J=8.4Hz,2H),7.69(d,J=7.2Hz,1H),7.58-7.61(m,2H),7.41(t,J=8.4Hz,2H),7.34(t,J=7.6Hz,2H),7.03(t,J=7.2Hz,1H),6.95(d,J=5.2Hz,1H),6.68(d,J=7.2Hz,1H)ppm。
实施例2
化合物2的制备:
采用与实施例1中制备2-(4-氟苯基)-8-苯基氨基-2,7-萘啶-1(2H)-酮相同的方法，不同之处在于，将苯胺改为2,6-二甲基苯胺。
MS:[M+H]+=360.1。1H-NMR(400M,CDCl3)δ10.57(s,1H),8.13(d,J=5.6Hz,1H),7.42-7.45(m,2H),7.10-7.24(m,3H),6.55(d,J=5.2Hz,1H),6.41(d,J=7.2Hz,1H),2.23(s,6H)ppm。
实施例3
化合物3的制备：
采用与实施例1中制备2-(4-氟苯基)-8-苯基氨基-2,7-萘啶-1(2H)-酮相同的方法，不同之处在于，将苯胺改为2,6-二氯苯胺。
MS:[M+H]+=400.0。1H-NMR(400M,CDCl3)δ10.85(s,1H),8.19(d,J=5.2Hz,1H),7.39-7.46(m,4H),7.20-7.28(m,2H),7.15(t,J=8.0Hz,1H),6.69(d,J=5.6Hz,1H),6.45(d,J=7.2Hz,1H)ppm。
实施例4
化合物4的制备：
采用与实施例1中制备2-(4-氟苯基)-8-苯基氨基-2,7-萘啶-1(2H)-酮相同的方法，不同之处在于，将苯胺改为3-氨基吡啶。
MS:[M+H]+=333.1。1H-NMR(400M,DMSO-d6)δ11.81(s,1H),8.90(s,1H),8.37(d,J=8.4Hz,1H),8.33(d,J=5.2Hz,1H),8.23(d,J=4.0Hz,1H),7.72(d,J=7.2Hz,1H),7.58-7.62(m,2H),7.35-7.44(m,3H),7.02(t,J=5.2Hz,1H),6.71(d,J=7.2Hz,1H)ppm。
实施例5
化合物5的制备：
采用与实施例1中制备2-(4-氟苯基)-8-苯基氨基-2,7-萘啶-1(2H)-酮相同的方法，不同之处在于，将苯胺改为7-氨基异喹啉。
MS:[M+H]+=383.1。1H-NMR(400M,CDCl3)δ12.00(s,1H),9.22(s,1H),8.85(s,1H),8.41(t,J=5.2Hz,2H),7.82(d,J=8.8Hz,1H),7.75(d,J=8.8Hz,1H),7.56(d,J=5.6Hz,1H),7.40-7.44(m,2H),7.23-7.30(m,3H),6.80(d,J=5.2Hz,1H),6.50(d,J=7.2Hz,1H)ppm。
实施例6
化合物6的制备：
采用与实施例1中制备2-(4-氟苯基)-8-苯基氨基-2,7-萘啶-1(2H)-酮相同的方法，不同之处在于，将苯胺改为苄胺。
MS:[M+H]+=346.1。1H-NMR(400M,DMSO-d6)δ9.60(b,1H),8.15(d,J=5.2Hz,1H),7.60(d,J=7.2Hz,1H),7.52-7.55(m,2H),7.25-7.38(m,7H),6.70(d,J=5.2Hz,1H),6.56(d,J=7.2Hz,1H),4.70(d,J=5.2Hz,2H)ppm。
实施例7
化合物7的制备：
采用与实施例1中制备2-(4-氟苯基)-8-苯基氨基-2,7-萘啶-1(2H)-酮相同的方法，不同之处在于，将苯胺改为4-氨甲基吡啶。
MS:[M+H]+=347.1。1H-NMR(400M,CDCl3)δ9.71(b,1H),8.50(d,J=5.2Hz,2H),8.16(d,J=5.2Hz,1H),7.36-7.39(m,2H),7.19-7.27(m,5H),6.56(d,J=5.6Hz,1H),6.40(d,J=7.2Hz,1H),4.78(d,J=5.6Hz,2H)ppm。
实施例8
化合物8的制备：
采用与实施例1中制备2-(4-氟苯基)-8-苯基氨基-2,7-萘啶-1(2H)-酮相同的方法，不同之处在于，将苯胺改为3-氨甲基吡啶。
MS:[M+H]+=347.1。1H-NMR(400M,DMSO-d6)δ9.71(t,J=5.6Hz,1H),8.63(s,1H),8.49(d,J=4.4Hz,1H),8.19(d,J=4.2Hz,1H),7.79(d,J=7.6Hz,1H),7.64(d,J=7.2Hz,1H),7.55-7.59(m,2H),7.37-7.41(m,3H),6.75(d,J=5.2Hz,1H),6.60(d,J=7.2Hz,1H),4.77(d,J=4.4Hz,2H)ppm。
实施例9
化合物9的制备：
采用与实施例1中制备2-(4-氟苯基)-8-苯基氨基-2,7-萘啶-1(2H)-酮相同的方法，不同之处在于，将苯胺改为2-氨甲基呋喃。
MS:[M+H]+=336.1。1H-NMR(400M,CDCl3)δ9.49(b,1H),8.22(d,J=5.2Hz,2H),7.32-7.37(m,3H),7.17-7.21(m,3H),6.53(d,J=5.6Hz,1H),6.37(d,J=7.2Hz,1H),6.27(d,J=8.4Hz,2H),4.74(d,J=5.2Hz,2H)ppm。
实施例10
化合物10的制备：
采用与实施例1中制备2-(4-氟苯基)-8-苯基氨基-2,7-萘啶-1(2H)-酮相同的方法，不同之处在于，将苯胺改为1-萘甲胺。
MS:[M+H]+=396.1。1H-NMR(400M,DMSO-d6)δ9.60(t,J=5.0Hz,1H),8.19(d,J=5.2Hz,1H),8.11(d,J=7.6Hz,1H),7.95(d,J=6.4Hz,1H),7.85(d,J=8.0Hz,1H),7.49-7.56(m,7H),7.31(t,J=8.8Hz,2H),6.71(d,J=5.6Hz,1H),6.55(d,J=7.2Hz,1H),5.16(d,J=5.2Hz,2H)ppm。
实施例11
化合物11的制备：
采用与实施例1中制备2-(4-氟苯基)-8-苯基氨基-2,7-萘啶-1(2H)-酮相同的方法，不同之处在于，将苯胺改为4-氨甲基喹啉。
MS:[M+H]+=397.1。1H-NMR(400M,CDCl3)δ9.80(b,1H),8.81(d,J=4.4Hz,1H),8.19(d,J=5.2Hz,1H),8.11(d,J=8.0Hz,2H),7.71(t,J=8.0Hz,1H),7.57(t,J=8.0Hz,1H),7.43(d,J=4.4Hz,1H),7.35-7.39(m,2H),7.17-7.24(m,3H),6.58(d,J=5.2Hz,1H),6.42(d,J=7.2Hz,1H),5.29(d,J=6.4Hz,2H)ppm。
实施例12
化合物12的制备：
8-氯-2-(4-氟苯基)-3-甲基-2,7-萘啶-1(2H)-酮的制备:
参照文献WO2013033981中报道的方法可制备8-氯-2-(4-氟苯基)-3-甲基-2,7-萘啶-1(2H)-酮（160mg）。MS:[M+H]+=289.1。
2-(4-氟苯基)-3-甲基-8-(吡啶-3-基氨基)-2,7-萘啶-1(2H)-酮的制备:
采用与实施例1中制备2-(4-氟苯基)-8-苯基氨基-2,7-萘啶-1(2H)-酮相同的方法，不同之处在于，将8-氯-2-(4-氟苯基)-2,7-萘啶-1(2H)-酮改为8-氯-2-（4-氟苯基）-3-甲基-2,7-萘啶-1(2H)-酮，将苯胺改为3-氨基吡啶。
MS:[M+H]+=347.1。1H-NMR(400M,DMSO-d6)δ11.73(s,1H),8.87(s,1H),8.36(d,J=8.4Hz,1H),8.27(d,J=5.6Hz,1H),8.19(d,J=4.4Hz,1H),7.32-7.50(m,5H),6.90(d,J=5.6Hz,1H),6.65(s,1H),1.98(s,3H)ppm。
实施例13
化合物13的制备：
采用与实施例1中制备2-(4-氟苯基)-8-苯基氨基-2,7-萘啶-1(2H)-酮相同的方法，不同之处在于，将8-氯-2-(4-氟苯基)-2,7-萘啶-1(2H)-酮改为8-氯-2-(4-氟苯基)-3-甲基-2,7-萘啶-1(2H)-酮，将苯胺改为4-氨甲基吡啶。
MS:[M+H]+=361.1。1H-NMR(400M,DMSO-d6)δ9.59(t,J=5.6Hz,1H),8.46(d,J=5.2Hz,2H),8.04(d,J=5.2Hz,1H),7.38-7.45(m,4H),7.28(d,J=5.2Hz,2H),6.59(d,J=5.6Hz,1H),6.49(s,1H),4.70(d,J=6.0Hz,2H),1.94(s,3H)ppm。
实施例14
化合物14的制备：
采用与实施例1中制备2-(4-氟苯基)-8-苯基氨基-2,7-萘啶-1(2H)-酮相同的方法，不同之处在于，将8-氯-2-(4-氟苯基)-2,7-萘啶-1(2H)-酮改为8-氯-2-(4-氟苯基)-3-甲基-2,7-萘啶-1(2H)-酮，将苯胺改为3-氨甲基吡啶。
MS:[M+H]+=361.1。1H-NMR(400M,DMSO-d6)δ9.53(t,J=5.6Hz,1H),8.55(s,1H),8.42(d,J=4.4Hz,1H),8.08(d,J=5.6Hz,1H),7.72(d,J=7.6Hz,1H),7.30-7.41(m,5H),6.58(d,J=5.6Hz,1H),6.48(s,1H),4.68(d,J=6.0Hz,2H),1.93(s,3H)ppm。
实施例15
化合物15的制备：
采用与实施例1中制备2-(4-氟苯基)-8-苯基氨基-2,7-萘啶-1(2H)-酮相同的方法，不同之处在于，将8-氯-2-(4-氟苯基)-2,7-萘啶-1(2H)-酮改为8-氯-2-(4-氟苯基)-3-甲基-2,7-萘啶-1(2H)-酮，将苯胺改为4-氨甲基喹啉。
MS:[M+H]+=411.2。1H-NMR(400M,DMSO-d6)δ9.65(t,J=5.6Hz,1H),8.79(d,J=4.0Hz,1H),8.21(d,J=8.0Hz,1H),8.05(d,J=6.0Hz,2H),7.78(t,J=7.6Hz,1H),7.64(t,J=8.0Hz,1H),7.34-7.45(m,5H),6.60(d,J=5.6Hz,1H),6.51(s,1H),5.21(d,J=6.0Hz,2H),1.95(s,3H)ppm。
实施例16
化合物16的制备：
8-氯-3-甲基-2苯基-2,7-萘啶-1(2H)-酮的制备：
参照文献WO2013033981中报道的方法可制备8-氯-3-甲基-2苯基-2,7-萘啶-1(2H)-酮，不同之处在于，将起始原料2-氰基-N-(4-氟苯基)乙酰胺改为2-氰基-N-苯基乙酰胺。
MS:[M+H]+=271.1。1H-NMR(400M,CDCl3)δ8.55(d,J=5.6Hz,1H),7.46-7.56(m,2H),7.20-7.24(m,4H),6.34(s,1H),2.03(s,3H)ppm。
3-甲基-2苯基-8-(吡啶-3-基氨基)-2,7-萘啶-1(2H)-酮的制备：
采用与实施例1中制备8-氯-2-(4-氟苯基)-3-甲基-2,7-萘啶-1(2H)-酮相同的方法，不同之处在于，将8-氯-2-(4-氟苯基)-2,7-萘啶-1(2H)-酮改为8-氯-3-甲基-2苯基-2,7-萘啶-1(2H)-酮，将苯胺改为3-氨基吡啶。
MS:[M+H]+=329.1。1H-NMR(400M,DMSO-d6)δ11.76(s,1H),8.87(s,1H),8.36(d,J=8.0Hz,1H),8.26(d,J=5.2Hz,1H),8.19(d,J=4.0Hz,1H),7.50-7.63(m,3H),7.31-7.41(m,2H),6.89(d,J=5.6Hz,1H),6.64(s,1H),1.97(s,3H)ppm。
实施例17
化合物17的制备：
采用与实施例1中制备8-氯-2-(4-氟苯基)-3-甲基-2,7-萘啶-1(2H)-酮相同的方法，不同之处在于，将8-氯-2-(4-氟苯基)-2,7-萘啶-1(2H)-酮改为8-氯-3-甲基-2苯基-2,7-萘啶-1(2H)-酮，将苯胺改为4-氨甲基吡啶。
MS:[M+H]+=343.2。1H-NMR(400M,DMSO-d6)δ9.61(t,J=6.0Hz,1H),8.46(d,J=4.0Hz,2H),8.04(d,J=5.2Hz,1H),7.47-7.57(m,3H),7.35(d,J=7.6Hz,2H),7.28(d,J=4.8Hz,2H),6.59(d,J=5.2Hz,1H),6.49(s,1H),4.70(d,J=6.0Hz,2H),1.93(s,3H)ppm。
实施例18
化合物18的制备：
采用与实施例1中制备8-氯-2-(4-氟苯基)-3-甲基-2,7-萘啶-1(2H)-酮相同的方法，不同之处在于，将8-氯-2-(4-氟苯基)-2,7-萘啶-1(2H)-酮改为8-氯-3-甲基-2苯基-2,7-萘啶-1(2H)-酮，将苯胺改为3-氨甲基吡啶。
MS:[M+H]+=343.2。1H-NMR(400M,DMSO-d6)δ9.55(t,J=5.6Hz,1H),8.55(s,1H),8.42(d,J=4.4Hz,1H),8.08(d,J=4.8Hz,1H),7.72(d,J=7.6Hz,1H),7.31-7.54(m,6H),6.59(d,J=5.6Hz,1H),6.48(s,1H),4.68(d,J=6.0Hz,2H),1.92(s,3H)ppm。
实施例19
化合物19的制备：
采用与实施例1中制备8-氯-2-(4-氟苯基)-3-甲基-2,7-萘啶-1(2H)-酮相同的方法，不同之处在于，将8-氯-2-(4-氟苯基)-2,7-萘啶-1(2H)-酮改为8-氯-3-甲基-2苯基-2,7-萘啶-1(2H)-酮，将苯胺改为4-氨甲基喹啉。
MS:[M+H]+=393.5。1H-NMR(400M,DMSO-d6)δ9.67(t,J=5.6Hz,1H),8.79(d,J=4.0Hz,1H),8.21(d,J=8.0Hz,1H),8.05(d,J=6.0Hz,2H),7.78(t,J=7.6Hz,1H),7.64(t,J=8.0Hz,1H),7.46-7.56(m,3H),7.33-7.38(m,3H),6.60(d,J=5.2Hz,1H),6.51(s,1H),5.21(d,J=5.6Hz,2H),1.94(s,3H)ppm。
实施例20
化合物20的制备：
8-氯-2-(4-氯苯基)-3-甲基-2,7-萘啶-1(2H)-酮的制备：
参照文献WO2013033981中报道的方法可制备8-氯-2-(4-氯苯基)-3-甲基-2,7-萘啶-1(2H)-酮，不同之处在于，将起始原料2-氰基-N-(4-氟苯基)乙酰胺改为2-氰基-N-(4-氯苯基)乙酰胺。
MS:[M+H]+=305.0。1H-NMR(400M,CDCl3)δ8.39(d,J=5.2Hz,1H),7.52(d,J=8.8Hz,2H),7.16-7.22(m,3H),6.37(s,1H),2.04(s,3H)ppm。
2-(4-氯苯基)-3-甲基-8-(吡啶-3-基氨基)-2,7-萘啶-1(2H)-酮的制备：
采用与实施例1中制备8-氯-2-(4-氟苯基)-3-甲基-2,7-萘啶-1(2H)-酮相同的方法，不同之处在于，将8-氯-2-(4-氟苯基)-2,7-萘啶-1(2H)-酮改为8-氯-2-(4-氯苯基)-2,7-萘啶-1(2H)-酮，将苯胺改为3-氨基吡啶。
MS:[M+H]+=363.1。1H-NMR(400M,DMSO-d6)δ11.58(s,1H),8.86(s,1H),8.40(d,J=8.4Hz,1H),8.25(d,J=5.6Hz,2H),7.22-7.30(m,5H),6.90(d,J=5.6Hz,1H),6.36(s,1H),2.03(s,3H)ppm。
实施例21
化合物21的制备：
采用与实施例1中制备8-氯-2-(4-氟苯基)-3-甲基-2,7-萘啶-1(2H)-酮相同的方法，不同之处在于，将8-氯-2-(4-氟苯基)-2,7-萘啶-1(2H)-酮改为8-氯-2-(4-氯苯基)-2,7-萘啶-1(2H)-酮，将苯胺改为4-氨甲基吡啶。
MS:[M+H]+=377.1。1H-NMR(400M,DMSO-d6)δ9.55(t,J=5.6Hz,1H),8.46(d,J=4.0Hz,2H),8.04(d,J=5.6Hz,1H),7.61(d,J=8.4Hz,2H),7.42(d,J=8.4Hz,2H),7.28(d,J=5.2Hz,2H),6.59(d,J=5.3Hz,1H),6.50(s,1H),4.70(d,J=6.0Hz,2H),1.94(s,3H)ppm。
实施例22
化合物22的制备：
采用与实施例1中制备8-氯-2-(4-氟苯基)-3-甲基-2,7-萘啶-1(2H)-酮相同的方法，不同之处在于，将8-氯-2-(4-氟苯基)-2,7-萘啶-1(2H)-酮改为8-氯-2-(4-氯苯基)-2,7-萘啶-1(2H)-酮，将苯胺改为3-氨甲基吡啶。
MS:[M+H]+=377.1。1H-NMR(400M,DMSO-d6)δ9.50(t,J=5.6Hz,1H),8.55(s,1H),8.43(d,J=4.4Hz,1H),8.09(d,J=5.6Hz,1H),7.72(d,J=8.0Hz,1H),7.60(d,J=8.4Hz,2H),7.39(d,J=8.4Hz,2H),7.32(t,J=4.8Hz,1H),6.59(d,J=5.2Hz,1H),6.49(s,1H),4.68(d,J=5.6Hz,2H),1.93(s,3H)ppm。
实施例23
化合物23的制备：
采用与实施例1中制备8-氯-2-(4-氟苯基)-3-甲基-2,7-萘啶-1(2H)-酮相同的方法，不同之处在于，将8-氯-2-(4-氟苯基)-2,7-萘啶-1(2H)-酮改为8-氯-2-(4-氯苯基)-2,7-萘啶-1(2H)-酮，将苯胺改为4-氨甲基喹啉。
MS:[M+H]+=427.1。1H-NMR(400M,DMSO-d6)δ9.62(t,J=5.6Hz,1H),8.79(d,J=4.4Hz,1H),8.21(d,J=8.4Hz,1H),8.03-8.06(m,2H),7.78(t,J=8.0Hz,1H),7.59-7.67(m,3H),7.42(d,J=8.4Hz,2H),7.37(d,J=4.0Hz,1H),6.61(d,J=5.2Hz,1H),6.51(s,1H),5.21(d,J=6.0Hz,2H),1.95(s,3H)ppm。
实施例24
化合物24的制备：
8-氯-2-(4-三氟甲氧基苯基)-3-甲基-2,7-萘啶-1(2H)-酮的制备：
参照文献WO2013033981中报道的方法可制备8-氯-2-(4-三氟甲氧基苯基)-3-甲基-2,7-萘啶-1(2H)-酮，不同之处在于，将起始原料2-氰基-N-(4-氟苯基)乙酰胺改为2-氰基-N-(4-三氟甲氧基苯基)乙酰胺。
MS:[M+H]+=355.0。1H-NMR(400M,CDCl3)δ8.41(d,J=5.2Hz,1H),7.38(d,J=8.8Hz,2H),7.21-7.29(m,3H),6.38(s,1H),2.05(s,3H)ppm。
2-(4-三氟甲氧基苯基)-3-甲基-8-(吡啶-3-基氨基)-2,7-萘啶-1(2H)-酮的制备：
采用与实施例1中制备8-氯-2-(4-氟苯基)-3-甲基-2,7-萘啶-1(2H)-酮相同的方法，不同之处在于，将8-氯-2-(4-氟苯基)-2,7-萘啶-1(2H)-酮改为8-氯-2-(4-三氟甲氧基苯基)-2,7-萘啶-1(2H)-酮，将苯胺改为3-氨基吡啶。
MS:[M+H]+=413.1。1H-NMR(400M,DMSO-d6)δ11.68(s,1H),8.87(s,1H),8.36(d,J=8.4Hz,1H),8.27(d,J=5.2Hz,1H),8.19(d,J=4.0Hz,1H),7.59(m,4H),7.34(d,J=8.4Hz,1H),6.89(d,J=5.6Hz,1H),6.66(s,1H),1.98(s,3H)ppm。
实施例25
化合物25的制备：
采用与实施例1中制备8-氯-2-(4-氟苯基)-3-甲基-2,7-萘啶-1(2H)-酮相同的方法，不同之处在于，将8-氯-2-(4-氟苯基)-2,7-萘啶-1(2H)-酮改为8-氯-2-(4-三氟甲氧基苯基)-2,7-萘啶-1(2H)-酮，将苯胺改为1-萘甲胺。
MS:[M+H]+=476.2。1H-NMR(400M,DMSO-d6)δ9.44(t,J=5.6Hz,1H),8.15(d,J=5.2Hz,1H),8.09(d,J=8.8Hz,1H),7.94(d,J=8.4Hz,1H),7.84(d,J=8.0Hz,1H),7.42-7.54(m,8H),6.60(d,J=5.2Hz,1H),6.51(s,1H),5.12(d,J=5.2Hz,2H),1.92(s,3H)ppm。
实施例26
化合物26的制备：
采用与实施例1中制备8-氯-2-(4-氟苯基)-3-甲基-2,7-萘啶-1(2H)-酮相同的方法，不同之处在于，将8-氯-2-(4-氟苯基)-2,7-萘啶-1(2H)-酮改为8-氯-2-(4-三氟甲氧基苯基)-2,7-萘啶-1(2H)-酮，将苯胺改为4-氨甲基吡啶。
MS:[M+H]+=427.1。1H-NMR(400M,DMSO-d6)δ9.57(t,J=6.0Hz,1H),8.46(d,J=5.2Hz,2H),8.05(d,J=7.6Hz,1H),7.54(b,4H),7.28(d,J=5.2Hz,2H),6.59(d,J=5.2Hz,1H),6.51(s,1H),4.70(d,J=6.0Hz,2H),1.95(s,3H)ppm。
实施例27
化合物27的制备：
采用与实施例1中制备8-氯-2-(4-氟苯基)-3-甲基-2,7-萘啶-1(2H)-酮相同的方法，不同之处在于，将8-氯-2-(4-氟苯基)-2,7-萘啶-1(2H)-酮改为8-氯-2-(4-三氟甲氧基苯基)-2,7-萘啶-1(2H)-酮，将苯胺改为2-氨甲基呋喃。
MS:[M+H]+=416.1。1H-NMR(400M,DMSO-d6)δ9.33(t,J=5.2Hz,1H),8.12(d,J=5.6Hz,1H),7.50-7.56(m,5H),6.60(d,J=5.2Hz,1H),6.51(s,1H),6.37(s,1H),6.28(s,1H),4.64(d,J=5.6Hz,2H),1.93(s,3H)ppm。
实施例28
化合物28的制备：
采用与实施例1中制备8-氯-2-(4-氟苯基)-3-甲基-2,7-萘啶-1(2H)-酮相同的方法，不同之处在于，将8-氯-2-(4-氟苯基)-2,7-萘啶-1(2H)-酮改为8-氯-2-(4-三氟甲氧基苯基)-2,7-萘啶-1(2H)-酮，将苯胺改为3-氨甲基吡啶。
MS:[M+H]+=427.1。1H-NMR(400M,DMSO-d6)δ9.51(t,J=5.2Hz,1H),8.55(s,1H),8.43(d,J=4.0Hz,1H),8.09(d,J=5.2Hz,1H),7.72(d,J=7.6Hz,1H),7.53-7.59(m,4H),7.32(d,J=5.2Hz,1H),6.59(d,J=5.2Hz,1H),6.50(s,1H),4.68(d,J=5.6Hz,2H),1.94(s,3H)ppm。
实施例29
化合物29的制备：
采用与实施例1中制备8-氯-2-(4-氟苯基)-3-甲基-2,7-萘啶-1(2H)-酮相同的方法，不同之处在于，将8-氯-2-(4-氟苯基)-2,7-萘啶-1(2H)-酮改为8-氯-2-(4-三氟甲氧基苯基)-2,7-萘啶-1(2H)-酮，将苯胺改为4-氨甲基喹啉。
MS:[M+H]+=477.2。1H-NMR(400M,DMSO-d6)δ9.63(t,J=6.0Hz,1H),8.81(d,J=4.4Hz,1H),8.22(d,J=8.0Hz,1H),8.06(d,J=8.8Hz,2H),7.79(t,J=7.2Hz,1H),7.67(t,J=7.6Hz,1H),7.55-7.58(m,4H),7.37(d,J=4.0Hz,2H),6.63(d,J=5.6Hz,1H),6.54(s,1H),5.23(d,J=5.6Hz,2H),1.97(s,3H)ppm。
实施例30
化合物30的制备：
8-氯-2-(2,4-二氟苯基)-3-甲基-2,7-萘啶-1(2H)-酮的制备：
参照文献WO2013033981中报道的方法可制备8-氯-2-(2,4-二氟苯基)-3-甲基-2,7-萘啶-1(2H)-酮，不同之处在于，将起始原料2-氰基-N-(4-氟苯基)乙酰胺改为2-氰基-N-(2,4-二氟苯基)乙酰胺。
MS:[M+H]+=307.0。1H-NMR(400M,CDCl3)δ8.42(d,J=5.6Hz,1H),7.23-7.29(m,2H),7.02-7.08(m,2H),6.39(s,1H),2.05(s,3H)ppm。
2-(2,4-二氟苯基)-3-甲基-8-(吡啶-3-基氨基)-2,7-萘啶-1(2H)-酮的制备：
采用与实施例1中制备8-氯-2-(4-氟苯基)-3-甲基-2,7-萘啶-1(2H)-酮相同的方法，不同之处在于，将8-氯-2-(4-氟苯基)-2,7-萘啶-1(2H)-酮改为8-氯-2-(2,4-二氟苯基)-2,7-萘啶-1(2H)-酮，将苯胺改为4-氨甲基吡啶。
MS:[M+H]+=378.4。1H-NMR(400M,DMSO-d6)δ9.52(b,1H),8.49(b,2H),8.13(d,J=4.2Hz,1H),7.40(m,2H),7.07(m,3H),6.50(d,J=4.2Hz,1H),6.31(s,1H),5.23(m,2H),2.03(s,3H)ppm。
实施例31
化合物31的制备：
采用与实施例1中制备8-氯-2-(4-氟苯基)-3-甲基-2,7-萘啶-1(2H)-酮相同的方法，不同之处在于，将8-氯-2-(4-氟苯基)-2,7-萘啶-1(2H)-酮改为8-氯-2-(2,4-二氟苯基)-2,7-萘啶-1(2H)-酮，将苯胺改为4-氨甲基喹啉。
MS:[M+H]+=429.1。1H-NMR(400M,DMSO-d6)δ9.54(t,J=6.0Hz,1H),8.79(d,J=4.4Hz,1H),8.21(d,J=8.4Hz,1H),8.09(d,J=5.6Hz,1H),7.78(t,J=8.0Hz,1H),7.61-7.66(m,2H),7.58(t,J=7.2Hz,1H),7.36(d,J=4.4Hz,1H),7.30(d,J=7.2Hz,2H),6.63(d,J=5.6Hz,1H),6.56(s,1H),5.23(d,J=5.6Hz,2H),1.99(s,3H)ppm。
实施例32
体外生化水平抑制蛋白激酶（PK）活性实验：
材料与方法：c-Kit、VEGFR-2、PDGFR-β和c-Met激酶，来源于Invitrogen；HTRFKinEASE；TK kit（Cisbio公司）；384孔板（Greiner公司）；ATP（sigma公司），MgCl2（sigma公司）；PHERAstar FS多功能酶标仪（BMG公司）；低速离心机（StaiteXiangyi公司）；恒温箱（Binder公司）。选取的阳性药为已在临床研究中的OSI-930和WO2013033981中报道的高活性化合物A，结构如下：
化合物溶解及保存：视溶解性用DMSO将受试化合物配置成0.5-10mmol/L的母液，分装后-20℃保存；
化合物工作液的配制：测试前将分装的化合物从冰箱取出，用纯DMSO稀释到50×所需浓度；然后用去离子水将化合物稀释至4×所需浓度；
1.33×Enzymatic buffer的配制：将5×Enzymatic buffer来源于HTRF kit）用去离子水稀释到1.33×，并且加入1.33×终浓度的相应成分：1.33mmol/L DTT和1.33mmol/LMgCl2；
激酶工作液的配制：用1.33×Enzymatic buffer将激酶稀释到2×所需终浓度0.2ng/μL；
底物工作液的配制：用1.33×Enzymatic buffer将substrate-biotin（来源于HTRF kit）和ATP（10mM）稀释为4×所需终浓度的混合液；
检测工作液的配制：用HTRF detection buffer将16.67μmol/L的Streptavidin-XL665稀释到4×所需终浓度，然后与等体积的Antibody-Cryptate混合（均来源于HTRF kit）。
酶反应步骤：向低体积384微孔板的每个孔中加入4μLμl的激酶工作液，同时加入4μL的1.33×Enzymatic buffer作为阴性对照（Negative）；向孔加入2μl的化合物工作液，同时加入2μL的8%DMSO水溶液作为零化合物浓度对照（即阳性对照，Positive）；于25℃（或30℃）孵育5-10min；向孔中加入2μL底物工作液启动酶反应，于25℃（或30℃）振荡反应15-60min。
HTRF试剂检测步骤：向孔加入8μL的检测工作液终止反应；25℃反应1h；
HTRF信号的读取：采用PHERAstar FS读数检测信号，仪器设置如下：
Optic moduleIntegration delay(lag time)50μs、Integration time400μs、Number of flashes200
对于每孔读出的原始数据，比值=665nm/620nm；
抑制率的计算：
IC50值的计算：以化合物浓度的对数为横坐标，抑制率为纵坐标，在GraphPad Prism5中，拟合非线性曲线：log(inhibitor)vs.response--Variable slope，求出酶活抑制率为50％时的待测化合物浓度即IC50。
实验结果：c-kit激酶活性半数抑制浓度（IC50nM）
本发明提供结构如式（Ⅰ）所示的稠环化合物对c-kit激酶活性的半数抑制浓度（IC50）见表1：
表1
++++表示IC50<50nM;+++表示IC50<范围为50-500nM;++表示IC50范围为500-5000nM;+表示IC50范围为>5000nM；-表示未测试
化合物对VEGFR-2激酶活性的半数抑制浓度（IC50）见表2。
表2
++++表示IC50<50nM;+++表示IC50<范围为50-500nM;++表示IC50范围为500-5000nM;+表示IC50范围为>5000nM；-表示未测试
化合物对PDGFR-β激酶活性的半数抑制浓度（IC50）见表3。
表3
++++表示IC50<50nM：+++表示IC50<范围为50-500nM;++表示IC50范围为500-5000nM;+表示IC50范围为>5000nM；-表示未测试
化合物对c-Met激酶活性的半数抑制浓度（IC50）见表4。
表4
++++表示IC50<50nM;+++表示IC50<范围为50-500nM;++表示IC50范围为500-5000nM;+表示IC50范围为>5000nM；-表示未测试
实验结果：本发明部分稠环化合物对c-kit、VEGFR-2和PDGFR-β激酶生化水平的抑制活性均优于阳性药OSI-930和化合物A，对c-Met无明显的抑制活性，显示出一定的激酶选择性，且与化合物A的激酶谱存在明显的差异，有可能应用于不同瘤种的治疗。
实施例33
本发明提供的化合物抑制肿瘤细胞增殖的测定方法（MTT法）：
试剂和仪器：
RPMI1640培养基（RPMI1640+12%小牛血清+HEPES3.5g/L+NaHCO32.2g/L+青霉素0.13g/L+链霉素0.15g/L）；
RPMI1640培养基（RPMI1640+12%胎牛血清+HEPES3.5g/L+NaHCOα32.2g/L+青霉素0.13g/L+链霉素0.15g/L）；
高糖DMEM培养基（DMEM+10%小牛血清+HEPES3.5g/L+NaHCO32.2g/L+青霉素0.13g/L+链霉素0.15g/L）；
高糖DMEM培养基（DMEM+12%胎牛血清+HEPES3.5g/L+NaHCO32.2g/L+青霉素0.13g/L+链霉素0.15g/L）；
MC COYS5-A培养基（DMEM+12%胎牛血清+HEPES3.5g/L+NaHCO32.2g/L+青霉素0.13g/L+链霉素0.15g/L）；
胰蛋白酶；MTT（美国Amresco公司产品）；酶标仪（TECAN infinite M200）
人胃腺癌细胞株（BGC）；人非小细胞肺癌（A549）；人白血病细胞株（K562）；人胰腺癌细胞株（PANC-1）；人小细胞肺癌（NCI-H446）；所列癌细胞株用含12%小牛血清的RPMI1640培养基，于37℃，5%CO2的培养箱中培养；
人胰腺癌细胞株（BXPC-3）；人膀胱癌细胞株（T24）；所列癌细胞株用12%胎牛血清的RPMI1640培养基，于37℃，5%CO2的培养箱中培养；
人肝癌细胞株（HEPG2）；人乳腺癌细胞株（MCF-7）；所列癌细胞株用12%小牛血清的高糖DMEM培养基，于37℃，5%CO2的培养箱中培养；
人结肠腺癌细胞株（CACO-2），用12%胎牛血清的高糖DMEM培养基，于37℃，5%CO2的培养箱中培养；
人结肠癌细胞株（HT29）；人结肠癌细胞株（HCT116）；人卵巢癌细胞株（SK-OV-3）；所列癌细胞株用12%胎牛血清的MC COYS5-A培养基，于37℃，5%CO2的培养箱中培养。
接种：取处于指数生长期，状态良好的细胞一瓶，加入适量胰蛋白酶消化液，消化使贴壁细胞脱落，用含12%小牛血清的RPMI1640（或DMEM或5A）培养液配成细胞悬液，计数，并将细胞密度调整稀释至1.67×104/mL取细胞悬液接种于96孔板上，180μL/孔（含肿瘤细胞3000/孔）。
培养：将培养板转入恒温CO2培养箱中，在37℃，5%CO2及饱和湿度条件下培养24小时。
初筛：待测化合物先用DMSO配制成0.1M浓度，再作3个稀释度，用于初筛，浓度依次为10-5mol/L、10-6mol/L和10-7mol/L。加入待测化合物，20μL/孔，培养72小时。每组设3个平行孔，并重复3次，测定96孔板每孔吸光值，记录结果计算细胞生长抑制率，取三次平均值。
染色：将MTT加入96孔板（贴壁细胞）中，20μL/孔，置于培养箱中孵育4小时，吸弃孔内上清液，加入DMSO100μL/孔，置平板摇床上震荡5分钟。将MTT加入96孔板中（悬浮细胞），20μL/孔，置于培养箱中孵育4小时，再加入20%SDS50μL/孔，置于培养箱中过夜。
测定：酶标仪设定波长为570nm，参考波长为630nm，测定96孔板每孔吸光值，记录结果并计算细胞生长抑制率，以判断受试药物的抗肿瘤活性。
复筛：在初筛浓度为10-5mol/L时，3次细胞抑制率≥50%的化合物用于复筛，将0.1mol/L再作10个稀释度，浓度依次为10-5mol/L、0.5×10-5mol/L、10-6mol/L、0.8×10-6mol/L、0.6×10-6mol/L、0.4×10-6mol/L、0.2×10-6mol/L、10-7mol/L、0.8×10-7mol/L和0.4×10-7mol/L。加入受试化合物，20μL/孔，培养48小时。同样每组设3个平行孔，并重复3次，并按照初筛方法，测定96孔板每孔吸光值，记录结果并计算细胞生长抑制率。
细胞生长抑制率以及IC50的计算：
同时根据各浓度的生长抑制率，采用该稠环化合物浓度的对数同Logit线性回归，求出抑制生长率为50％时的待测化合物浓度即IC50，取三次平均值。
试验结果：本发明实施例1至31中制备的具有式（I）结构的稠环化合物对多种肿瘤细胞的增殖具有抑制作用，经统计分析，效果显著（P<0.05），其IC50均在10-6mol/L以下。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (9)
1.一种稠环化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，该稠环化合物的结构式如式（I）所示，
其中，
m为0或1；n为0、1、2、3或4；
R1选自氢、未取代的C1-C10烷基以及被一个或多个选自C1-C10烷基、C1-C10烷氧基和卤素的取代基取代的C1-C10烷基中的一种；
R2选自氢、卤素、未取代的C1-C10烷基、羟基、未取代的C1-C10烷氧基、被一个或多个选自C1-C10烷基、C1-C10烷氧基和卤素的取代基取代的C1-C10烷基、以及被一个或多个选自C1-C10烷基、C1-C10烷氧基和卤素的取代基取代的C1-C10烷氧基中的一种；
A选自六元杂芳基、五元并六元杂芳基、六元并六元杂芳基、六元芳环、六元并六元芳环基，以及被一个或多个选自氢、C1-C4烷基、卤素、卤代C1-C4烷基、羟基、C1-C4烷氧基、C6-C10芳氧基、氰基、硝基和氨基的取代基取代的六元杂芳基、五元并六元杂芳基、六元并六元杂芳基、六元芳环和六元并六元芳环基中的一种。
2.根据权利要求1所述的稠环化合物或其药学上可接受的盐，
其中，
m为1；n为0、1或2；
R1选自氢和C1-C4烷基中的一种；
R2选自氢、卤素、C1-C4烷基、羟基、C1-C4烷氧基和被一个或多个卤素取代基取代的C1-C4烷氧基中的一种；
A选自呋喃基、吡啶基、嘧啶基、噻吩并吡啶基、喹唑啉基、喹啉基、萘基、苯基，以及被一个或多个选自氢、卤素和C1-C4烷基的取代基取代的呋喃基、吡啶基、嘧啶基、噻吩并吡啶基、喹唑啉基、喹啉基、萘基和苯基中的一种；
优选地，A选自以下基团：
中的一种。
3.根据权利要求1所述的稠环化合物或其药学上可接受的盐，其中，所述的稠环化合物选自：
中的一种。
4.一种制备权利要求1所述的稠环化合物或其药学上可接受的盐的方法，该方法包括下列步骤：在反应溶剂S1、碱B、催化剂C以及配体L存在下，式（II）所示的2,7-萘啶酮类化合物与式（III）所示的氨基取代化合物发生偶联反应；
其中，
m是0或1；n是0、1、2、3或4；
R1选自氢、未取代的C1-C10烷基以及被一个或多个选自C1-C10烷基、C1-C10烷氧基和卤素的取代基取代的C1-C10烷基中的一种；
R2选自氢、卤素、未取代的C1-C10烷基、羟基、未取代的C1-C10烷氧基、被一个或多个选自C1-C10烷基、C1-C10烷氧基和卤素的取代基取代的C1-C10烷基、以及被一个或多个选自C1-C10烷基、C1-C10烷氧基和卤素的取代基取代的C1-C10烷氧基中的一种；
A选自六元杂芳基、五元并六元杂芳基、六元并六元杂芳基、六元芳环、六元并六元芳环基，以及被一个或多个选自氢、C1-C4烷基、卤素、卤代C1-C4烷基、羟基、C1-C4烷氧基、C6-C10芳氧基、氰基、硝基和氨基的取代基取代的六元杂芳基、五元并六元杂芳基、六元并六元杂芳基、六元芳环和六元并六元芳环基中的一种。
5.根据权利要求4所述的方法，其中，反应溶剂S1选自4-二氧六环和/或乙二醇二甲醚，优选为1,4-二氧六环；
优选地，碱B选自氢氧化钠、氢化钠、叔丁醇钠和叔丁醇钾中的一种或多种，优选为叔丁醇钠；
优选地，催化剂C选自醋酸钯、四三苯基磷钯、二氯二三苯基磷钯和三(二亚苄基丙酮)二钯中的一种或多种，优选为三(二亚苄基丙酮)二钯；
优选地，配体L为膦配体，优选为1,2-双（二苯基膦）丙烷和/或4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽；
优选地，所述偶联反应的温度为90-115℃，优选为100-110℃。
6.一种药物组合物，该药物组合物含有权利要求1至3中任意一项所述的稠环化合物或其药学上可接受的盐作为的活性成分、药用载体物质和/或稀释剂。
7.权利要求1-3中任意一项所述的稠环化合物或其药学上可接受的盐、权利要求6所述的药物组合物在制备治疗经蛋白激酶中介的疾病的药物方面的应用。
8.根据权利要求7所述的应用，其中，所述经蛋白激酶中介的疾病选自与VEGFR-2、c-kit或PDGFR-β相关的疾病。
9.根据权利要求8所述的应用，其中，所述经蛋白激酶中介的疾病选自结肠直肠癌、膀胱癌、乳腺癌、肝癌、肺癌、胰腺癌、胃肠癌、白血病、卵巢癌、头和颈癌、***癌、肾癌、鼻咽癌、成胶质细胞瘤、鳞状细胞癌、星形细胞癌、卡波济氏肉瘤、黑素瘤、神经胶质瘤、泌尿生殖道癌和骨髓增殖性疾患中的一种或多种。
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Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2016204429A1 (ko) * | 2015-06-18 | 2016-12-22 | 한국화학연구원 | 헤테로아릴 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 포함하는 pi3 키나아제 관련 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물. |
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| WO2020063860A1 (en) * | 2018-09-28 | 2020-04-02 | Fochon Pharmaceuticals, Ltd. | Naphthyridinone and pyridopyrimidinone compounds useful as kinases inhibitors |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102317284A (zh) * | 2008-12-16 | 2012-01-11 | 西特里斯药业公司 | 作为沉默调节蛋白调节剂的酞嗪酮和相关的类似物 |
| CN102548992A (zh) * | 2009-07-30 | 2012-07-04 | Irm责任有限公司 | 作为syk激酶抑制剂的2,7-萘啶-1-酮衍生物 |
| CN102977125A (zh) * | 2011-09-06 | 2013-03-20 | 江苏先声药物研究有限公司 | 一类2,7-萘啶衍生物及其制备方法和应用 |
-
2014
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Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102317284A (zh) * | 2008-12-16 | 2012-01-11 | 西特里斯药业公司 | 作为沉默调节蛋白调节剂的酞嗪酮和相关的类似物 |
| CN102548992A (zh) * | 2009-07-30 | 2012-07-04 | Irm责任有限公司 | 作为syk激酶抑制剂的2,7-萘啶-1-酮衍生物 |
| CN102977125A (zh) * | 2011-09-06 | 2013-03-20 | 江苏先声药物研究有限公司 | 一类2,7-萘啶衍生物及其制备方法和应用 |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2016204429A1 (ko) * | 2015-06-18 | 2016-12-22 | 한국화학연구원 | 헤테로아릴 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 포함하는 pi3 키나아제 관련 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물. |
| US10526337B2 (en) | 2015-06-18 | 2020-01-07 | Korea Research Institute Of Chemical Technology | Heteroaryl derivative or pharmaceutically acceptable salt thereof, preparation method therefor, and pharmaceutical composition for preventing or treating diseases associated with PI3 kinases, containing same as active ingredient |
| RU2719367C2 (ru) * | 2015-06-18 | 2020-04-17 | Корея Рисерч Инститьют Оф Кемикал Текнолоджи | Гетероарильное производное или его фармацевтически приемлемая соль, способ их получения и фармацевтическая композиция для профилактики или лечения заболеваний, связанных с pi3 киназами, содержащая данное действующее вещество |
| WO2020063860A1 (en) * | 2018-09-28 | 2020-04-02 | Fochon Pharmaceuticals, Ltd. | Naphthyridinone and pyridopyrimidinone compounds useful as kinases inhibitors |
| CN112771042A (zh) * | 2018-09-28 | 2021-05-07 | 重庆复创医药研究有限公司 | 作为蛋白激酶抑制剂的萘啶酮和吡啶基嘧啶酮类化合物 |
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