CN103998052B - 用于治疗疾病和紊乱的肽类似物 - Google Patents
用于治疗疾病和紊乱的肽类似物 Download PDFInfo
- Publication number
- CN103998052B CN103998052B CN201280062729.0A CN201280062729A CN103998052B CN 103998052 B CN103998052 B CN 103998052B CN 201280062729 A CN201280062729 A CN 201280062729A CN 103998052 B CN103998052 B CN 103998052B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- seq
- per
- peptide
- glucose
- sct
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/585—Calcitonins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/22—Hormones
- A61K38/23—Calcitonins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
- A61P19/10—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
- A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2121/00—Preparations for use in therapy
Abstract
具有选自以下之序列的肽:SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:17和SEQ ID NO:18。所述肽用于治疗I型糖尿病、II型糖尿病、代谢综合征或肥胖,或者治疗食欲抑制,或者用于减轻胰岛素耐受,或者用于降低不期望的高空腹血清葡萄糖水平,或者用于降低不期望的高峰值血清葡萄糖水平,或者用于降低不期望的高峰值血清胰岛素水平,或者用于减少对葡萄糖耐受测试的不期望之巨大响应。
Description
相关申请
本申请要求2011年11月2日提交的美国临时申请序列号61/554,771和2011年12月21日提交的美国临时申请序列号61/578,620以及2012年11月2日提交的美国申请号13/667,578的权益和优先权,所有这些申请的全部内容在此通过引用并入本文。
技术领域
本文公开的实施方案涉及降钙素的模拟物,并且更特别地涉及其在治疗多种疾病和紊乱(包括但不限于糖尿病(I型和II型)、体重超标(excess bodyweight)、过量食物消耗(excessive food consumption)和代谢综合征)、调节血糖(blood glucose)水平、调节对葡萄糖耐受测试的响应、调节食物摄取、治疗骨质疏松和治疗骨关节炎中的用途。
背景技术
世界范围内存在大约2.5亿糖尿病患者,并且这个数字预计在下一个二十年中翻倍。该人群中超过90%患有2型糖尿病(type2diabetes mellitus,T2DM)。据估计,目前受T2DM影响或处于前述明显的T2DM阶段的人中仅50-60%被诊断。
T2DM是异质性疾病(heterogeneous disease),其特征在于碳水化合物和脂肪代谢的异常。T2DM的诱因是多因素的并且包括影响β细胞功能和组织(例如肌肉、肝、胰腺和脂肪组织)中胰岛素敏感性的遗传和环境要素二者。结果,观察到胰岛素分泌受损以及相应地β细胞功能持续下降和慢性胰岛素抗性。内分泌胰腺无力补偿外周胰岛素耐受导致高血糖和临床糖尿病的发作。现在认为胰岛素介导之葡萄糖摄取的组织耐受是T2DM的主要病理生理决定因素。
最优的T2DM干预的成功标准是血糖水平的降低,其可以是长期的血糖水平降低和食物摄取后对高葡萄糖水平耐受能力的增加二者,通过较低的峰值葡萄糖水平和更快的清除率描述。这两种情况下均对β细胞胰岛素输出和功能施加较少负担。
I型糖尿病特征在于失去响应食物摄取产生胰岛素的能力,并且因此不能将血糖调节至正常生理水平。
骨的物理结构可以受到多种因素(包括疾病和损伤)的危害。最常见的骨疾病之一是骨质疏松,其特征在于骨组织的低骨量和结构退化,导致特别是髋、脊柱和腕的骨脆性和骨折易感性增加。当存在不平衡使得骨吸收(bone resorption)的速率超过骨形成的速率时,骨质疏松发生。施用有效量的抗再吸收剂(anti-resorptive agent)(例如降钙素)已经示出防止骨的再吸收。
炎性或退行性疾病(包括关节的疾病,例如骨关节炎(osteoarthritis,OA)、类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)或幼年型类风湿性关节炎(juvenile rheumatoidarthritis,JRA)以及包括自身免疫应答导致的炎症,例如狼疮(lupus)、强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)或多发性硬化(multiple sclerosis,MS))可由于疼痛和关节破坏导致可动性的大幅丧失。关节内覆盖并缓冲骨的软骨可以随时间降解,因此不期望地允许两块骨的直接接触,这可在关节的运动期间限制一块骨相对于另一块的运动和/或引起一块对另一块的损害。紧挨软骨之下的软骨下骨也可以降解。施用有效量的抗再吸收剂(例如降钙素)可以防止骨的再吸收。
概述
本文公开了降钙素模拟物。
根据本文举例说明的一些方面,公开了具有选自以下序列的肽:SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:17和SEQ ID NO:18。
根据本文举例说明的一些方面,公开了方法,其包括向患者施用有效量的选自以下的肽:SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:15和SEQID NO:17,以影响所述患者的重量减轻。
根据本文举例说明的一些方面,公开了方法,其包括向患者施用有效量的选自以下的肽:SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:15和SEQID NO:17,以影响所述患者的餐后血糖控制。
根据本文举例说明的一些方面,公开了方法,其包括向患者施用有效量的选自以下的肽:SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:15和SEQID NO:17,以影响所述患者的血糖控制的改善。
根据本文举例说明的一些方面,公开了方法,其包括向患者施用有效量的具有序列CmSNLSTCVLGKLSQELHKLQTYPRTDVGANXaaXaaa之SEQ ID NO:18的肽,从而减少所述患者的骨吸收和软骨降解的至少一个。
附图说明
将参考附图进一步解释本文公开的实施方案,所述附图举例说明了本文公开的实施方案的原理。
图1A、图1B、图1C和图1D示出长期经口鲑鱼降钙素(salmon calcitonin,“sCT”)相对于经口UGP302施用对DIO大鼠的体重和食物摄取的作用,如在实施例1中测量的;
图2A和图2B示出经口sCT相对于经口UGP302对DIO大鼠中OGTT期间葡萄糖耐受的作用,如在实施例1中测量的;
图3示出经口sCT相对于经口UGP302对DIO大鼠空腹血糖的作用,如在实施例1中测量的;
图4A和图4B示出了经口sCT相对于经口UGP302对在实施例2中观察的DIO大鼠在第一剂量下之体重和食物摄取的作用;
图5A和图5B示出了经口sCT相对于经口UGP302对在实施例2中观察的DIO大鼠在第二剂量下之体重和食物摄取的作用;
图6A和图6B示出了经口sCT相对于经口UGP302对在实施例2中观察的DIO大鼠在第三剂量下之体重和食物摄取的作用;
图7A和图7B示出经口sCT相对于经口UGP302在第一剂量下对DIO大鼠中OGTT期间之葡萄糖耐受的作用,如在实施例2中测量的;
图8A和图8B示出经口sCT相对于经口UGP302在第二剂量下对DIO大鼠中OGTT期间之葡萄糖耐受的作用,如在实施例2中测量的;
图9A、图9B、图9C、图9D、图9E和图9F示出经口sCT相对于三种经口UGP对DIO大鼠之体重和食物摄取的作用,如在实施例3中测量的;
图10A、图10B、图10C、图10D、图10E和图10F示出经口sCT相对于三种经口UGP对在DIO大鼠之葡萄糖耐受测试中的葡萄糖水平的作用,如在实施例3中测量的;
图11示出6种UGP化合物与T47D细胞降钙素受体的结合结果,如在实施例4中测量的;以及
图12A和图12B示出对于UGP282的食物消耗(12A)和重量改变测量(12B),如在实施例5中测量的;
图13A和图13B示出对于UGP283的食物消耗(13A)和重量改变测量(13B),如在实施例5中测量的;
图14A和图14B示出对于UGP284的食物消耗(14A)和重量改变测量(14B),如在实施例5中测量的;
图15A和图15B示出对于UGP298的食物消耗(15A)和重量改变测量(15B),如在实施例5中测量的;
图16A和图16B示出对于UGP302的食物消耗(16A)和重量改变测量(16B),如在实施例5中测量的;
图17A和图17B示出对于UGP303的食物消耗(17A)和重量改变测量(17B),如在实施例5中测量的。
图18和图19分别示出在大鼠中通过用UGP302处理产生的骨吸收和软骨吸收的减少。
尽管以上鉴定的附图阐明了本公开的实施方案,其他实施方案也被考虑,如在讨论中注明的。该公开内容通过代表且非限制的方式呈现了示例性实施方案。本领域技术人员可以想到的多种其他修饰和实施方案落入本公开的实施方案原理的范围和精神内。
发明详述
降钙素在多个物种中高度保守。全长天然降钙素的长度为32个氨基酸。以下示出降钙素之实例的序列:
鲑鱼 CSNLSTCVLGKLSQELHKLQTYPRTNTGSGTP SEQ ID NO:1
小鼠 CGNLSTCMLGTYTQDLNKFHTFPQTSIGVEAP SEQ I D NO:2
鸡 CASLSTCVLGKLSQELHKLQTYPRTDVGAGTP SEQ ID NO:3
鳗鲡 CSNLSTCVLGKLSQELHKLQTYPRTDVGAGTP SEQ ID NO:4
大鼠 CGNLSTCMLGTYTQDLNKFHTFPQTSIGVGAP SEQ ID NO:5
马 CSNLSTCVLGTYTQDLNKFHTFPQTAIGVGAP SEQ I D NO:6
犬-1 CSNLSTCVLGTYSKDLNNFHTFSGIGFGAETP SEQ ID NO:7
犬-2 CSNLSTCVLGTYTQDLNKFHTFPQTAIGVGAP SEQ I D NO:8
猪 CSNLSTCVLSAYWRNLNNFHRFSGMGFGPETP SEQ ID NO:9
人 CGNLSTCMLGTYTQDFNKFHTFPQTAIGVGAP SEQ ID NO:10。
本公开内容的实施方案涉及降钙素模拟物。本公开内容的降钙素模拟物的氨基酸序列见于下表1。
表1
在一些实施方案中,之前讨论的降钙素模拟物的1位半胱氨酸被修饰(“Cm”)以减少第一个氨基酸的正电荷。例如,乙酰基基团(SEQ ID NO:11、12和15)、丙酰基基团(SEQ IDNO:13)或琥珀酰基基团(SEQ ID NOS:14和17)可以在半胱氨酸-1上取代。在一些实施方案中,在最后位置(“Xaaa”)(SEQ ID No:11、13-15和17-18中32位或SEQ ID NO:16中33位)的氨基酸可以包括酰胺化的基团“NH2”。减少正电荷的替代途径包括但不限于基于聚乙二醇的聚乙二醇化,或者在N末端添加另一个氨基酸(例如谷氨酸或天冬氨酸)。或者,可以向之前讨论的肽之N末端添加另外的氨基酸,包括但不限于赖氨酸、甘氨酸、甲酰基甘氨酸、亮氨酸、丙氨酸、乙酰基丙氨酸和二丙氨酸(dialanyl)。向肽的N末端添加氨基酸的一个实例包括SEQ ID NO:16,其中已经添加了赖氨酸。
表1中SEQ ID NO:18的“Xaa”可为任意天然存在的氨基酸。在一个实施方案中,31位的Xaa选自苏氨酸或丙氨酸之一。在一个实施方案中,32位的Xaa选自酪氨酸或脯氨酸之一。因此,SEQ ID NO:11、15、16和17被SEQ ID NO:18涵盖。
如本领域的技术人员将理解的,具有多个半胱氨酸残基的肽经常在两个这种半胱氨酸残基之间形成二硫桥。本文所示的所有这种肽定义为任选地包括一个或更多个这种二硫桥。虽然本公开内容的降钙素模拟物可以以游离酸形式存在,但是优选C末端氨基酸被酰胺化。申请人期望这种酰胺化可以有利于肽的效力和/或生物利用度。用于制造本公开内容的降钙素模拟物酰胺化形式的一种优选技术为在肽基甘氨酸α-酰胺化单加氧酶的存在下根据已知技术使前体(甘氨酸替代所期望酰胺化产物的C-末端氨基基团)反应,其中所述前体在所述反应中被转化为酰胺化产物,描述于例如美国专利号4,708,934和欧洲专利公开号0 308 067和0 382 403中。重组体生产对于前体和催化前体转化为鲑鱼降钙素的酶二者都是优选的。这种重组体生产在Biotechnology,11卷(1993)64-70页中讨论,其还描述了前体向酰胺化产物的转变。报道了重组体产物与天然鲑鱼降钙素,以及使用溶液相和固相化学肽合成生产的鲑鱼降钙素具有同一性。还可以使用下述的方法和酰胺化酶进行酰胺化产物的生产:Consalvo等,美国专利号7,445,911;Miller等,美国专利公开号2006/0292672;Ray等,2002,Protein Expression and Purification,26:249-259;以及Mehta,2004,Biopharm.International,6月,44-46页。
优选的酰胺化肽的生产可以例如通过在大肠杆菌(E.coli)中产生甘氨酸延伸前体作为具有谷胱甘肽-S-转移酶的可溶融合蛋白或者通过直接表达前体(根据美国专利号6103495描述的技术)进行。这样的甘氨酸延伸前体具有除了C末端外与所期望的酰胺化产物一致的结构(其中产物末端为--X--NH2,而前体末端为--X-gly,X是产物的C末端氨基酸残基)。在以上出版物中描述的α-酰胺化酶催化前体向产物的转变。该酶优选地重组产生,例如在中国仓鼠卵巢(Chinese Hamster Ovary,CHO)细胞中产生,如以上引用的Biotechnology and Biopharm.文章中描述的。
本公开内容之肽活性剂的游离酸形式可以以类似的方式产生,除了在“前体”上不包括C末端甘氨酸,该前体替代最终肽产物,并且不需要酰胺化步骤。
除非另有说明,否则本公开内容的降钙素模拟物的优选剂量对于治疗目的和预防目的二者来说是相同的。期望的剂量在下文中更详细的讨论,并且根据施用模式而不同。
除非另有注明或从上下文显而易见,否则本文的剂量指未受药物赋形剂、稀释剂、载体或其他成分影响的活性化合物的重量,尽管这样的其他成分是期望被包括的,如在本文的实施例中所示。在药物工业中常规使用的用于递送肽活性剂的任何剂型(胶囊、片剂、注射剂等)适用于本文,并且如在工业的这样的剂型中通常与活性成分一起被包括的,术语“赋形剂”、“稀释剂”或“载体”包括这样的非活性成分。在下文中更详细地讨论优选的经口剂型,但不认为是施用本公开内容之活性剂的唯一模式。
本公开内容的降钙素模拟物可施用于患者来治疗许多疾病或紊乱。如本文所用的术语“患者”意指属于动物界的任何生物。在一个实施方案中,术语“患者”指脊椎动物,更优选包括人的哺乳动物。
因此,本公开内容提供了治疗I型糖尿病、II型糖尿病或代谢综合征、肥胖,或者治疗食欲抑制(apetite suppression),或者用于减轻胰岛素耐受,或者用于降低不期望的高空腹血清葡萄糖水平,或者用于降低不期望的高峰值血清葡萄糖水平,或者用于降低不期望的高峰值血清胰岛素水平,或者减少对葡萄糖耐受测试的不期望的巨大响应,或者用于治疗骨质疏松,或者用于治疗骨关节炎的方法。
如本文所用的术语“血糖控制”指患有糖尿病的人中血液糖(葡萄糖)的通常水平。被糖基化的血红蛋白(测量为血红蛋白Alc)的百分比用作长期血糖控制的替代量度(proxymeasure)。如本文所用的术语“改善的血糖控制”指本公开内容之降钙素模拟物降低被糖基化之血红蛋白的百分比的能力。
鉴于许多因素例如性别、年龄和身高,存在许多领域公认的体重正常范围的量度。需要本文所示的治疗或预防方案的患者包括体重超过公认正常的患者,或者由于遗传、环境因素或其他公认的风险因素而处于具有比一般人群变得超重或肥胖之更大风险的人。根据本公开内容,设想降钙素模拟物可以用于治疗糖尿病,其中重量控制是治疗的一个方面。
在一个实施方案中,方法包括向有此需要的患者经肠施用药学有效量的任一本文所述的肽以治疗所述病症。
在一个实施方案中,方法包括向有此需要的患者肠胃外施用药学有效量的任一本文所述的肽以治疗所述病症。对于肠胃外施用(包括腹膜内、皮下、静脉内、皮内或肌内注射),例如可以采用本公开内容之肽在芝麻油或花生油或含水丙二醇中的溶液。如果需要的话,水溶液应该适当缓冲(优选pH大于8),并且液体稀释剂首先使其等渗。这些水溶液适于静脉注射目的。油性溶液适于关节内、肌内和皮下注射的目的。所有这些溶液在无菌条件下的制备很容易通过本领域技术人员公知的标准制药技术完成。对于肠胃外应用,合适的制剂实例包括溶液剂(优选油性或水性溶液剂)以及混悬剂、乳剂或植入物(包括栓剂)。肽可以多次剂量或单一剂量形式以无菌形式配制,例如分散在流体载体(例如注射剂通常使用的无菌生理盐水或5%盐水葡萄糖溶液)中。
所述方法可以包括测定患者是否患有所述病症的预备步骤,和/或测定所述治疗何种程度地有效减轻所述患者之病症的后续步骤,例如,在每种情况中,进行经口葡萄糖耐受测试或静息血糖水平(resting blood sugar level)。
为改善对患者重量的控制以产生体重减轻或避免重量增加,活性化合物优选地每天至少施用两次,例如每天2-4次。活性化合物的制剂可以含有适合用于此种施用时间表的单位剂量。可以施用活性化合物以控制经受糖尿病或代谢综合征治疗之患者的重量。
经口经肠制剂通过吞咽摄取以随后在胃以下的肠中释放,并且因此经门静脉递送至肝,与之相反,保持在口中的制剂允许经舌下或口腔途径转移到血流中。
适合在本公开内容中使用的剂型包括片剂、微片剂(mini-tablet)、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、散剂、泡腾固体和可咀嚼固体制剂。这样的制剂可以包含明胶,其优选为水解明胶或低分子量明胶。所述制剂可这样获得:对包含降钙素或其片段或缀合物和水解明胶或低分子量明胶的均质水溶液进行冷冻干燥,并进一步将所得的固体材料加工成所述经口药物制剂,并且其中所述明胶可具有1000至15000道尔顿的平均分子量。所述制剂可包含保护性载体化合物,例如5-CNAC或本文中公开的其他化合物。
虽然优选经口制剂(例如片剂和胶囊剂),但是用于本发明的组合物可以采用糖浆、酏剂等以及栓剂等的形式。经口递送是通常选择的递送途径,因为相对于其他递送模式,其方便、相对容易且一般无痛,导致更好的患者顺应性。然而,生物、化学和物理屏障(例如胃肠道中变化的pH、强消化酶和活性剂不能渗透的胃肠道膜)使向哺乳动物经口递送降钙素样肽存在问题,例如,经口递送降钙素(其为长链多肽激素,由哺乳动物的甲状腺滤泡旁细胞以及鸟和鱼的后腮腺分泌),起初被证明是困难的至少部分是由于降钙素在胃肠道中的稳定性不足以及降钙素不易通过肠壁转运入血流。
然而,下文描述了适合的经口制剂。
患者的治疗
在一个实施方案中,本公开内容的降钙素模拟物以适当剂量施用以将患者中模拟物的血清水平维持在5至500皮克/毫升,优选10至250皮克/毫升。可以通过本领域已知的放射免疫测定技术测量血清水平。主治医生可以监测患者响应,然后可以根据个体患者代谢和响应来一定程度改变剂量。通过将本公开内容的所有组分作为单一药丸或胶囊施用最佳地实现近乎同时释放。然而,本公开内容还包括例如,将所需的降钙素模拟物量分到两个或更多个片剂或胶囊剂中,其可以一起施用使得它们一起提供所有成分的必须量。本文使用的“药物组合物”包括但不限于适合特别施用至患者的完全剂量,无论一个或更多个片剂或胶囊剂(或其他剂型)是否以指定的施用推荐。
本公开内容的降钙素模拟物可以使用在Unigene产品中采用的方法配制成用于经口施用。这些可以包括如在美国专利号5,912,014、美国专利号6,086,918、美国专利号6,673,574、美国专利号7,316,819、美国专利号8,093,207和美国公开号2009/0317462中所述的方法。特别地,它可包括以下用途:将化合物与膜转位蛋白(例如HIV TAT蛋白的蛋白质转导结构域)缀合,与一种或更多种蛋白酶抑制剂和/或可被包衣的pH降低剂和/或酸抗性保护载剂和/或可以为表面活性剂的吸收增强剂共配制。
在一个实施方案中,本公开内容的降钙素模拟物优选地配制成用于以美国专利公开号2009/0317462中已知的方式经口递送。根据本公开内容的一个优选经口剂型在下表2中示出:
表2
在一个实施方案中,本公开内容的降钙素模拟物可以通过与合适的载体化合物混合配制成用于肠、尤其是经口施用。合适的载体化合物包括美国专利号5,773,647和美国专利号5866536中描述的那些,并且在这些中5(N-(5-氯水杨酰基)-8-氨基辛酸,通常作为其二钠盐)是特别有效的。另一些优选的载体或递送剂为SNAD(10-(2-羟基苯甲酰胺基)癸酸的钠盐)和SNAC(将N-(8-[2-羟基苯甲酰基]氨基)辛酸的钠盐)。在一个实施方案中,本公开内容的药物组合物包含递送有效量的载体(例如5-CNAC),即量足以递送化合物达到期望的效果。一般而言,载体(例如5-CNAC)以总组合物的按重量计2.5%至99.4%、更优选按重量计25%至50%的量存在。
此外,WO00/059863公开了式I
的二钠盐及其水合物和溶剂化物对于活性剂(例如降钙素,如鲑鱼降钙素)的经口递送特别有效,并且这些可以在本公开内容中使用,其中
R1、R2、R3和R4独立地为氢、-OH、-NR6R7、卤素、C1-C4烷基或C1-C4烷氧基;
R5是取代或未取代的C2-C16亚烷基、取代或未取代的C2-C16亚烯基、取代或未取代的C1-C12烷基(亚芳基)、或者取代或未取代的芳基(C1-C12亚烷基);并且R6和R7独立地为氢、氧或C1-C4烷基。
使用任选地微粉化5-CNAC的优选经肠制剂一般可以如WO2005/014031中描述的。
化合物可以使用在Bone Medical Limited的Capsitonin产品中采用之方法配制成用于经口施用。这些可以包括并入Axcess制剂的方法。更特别地,活性成分可以包封入能够经受通过胃运送的肠胶囊中。这可以含有活性成分和亲水性芳香醇吸收增强剂,例如如在WO02/028436中描述的。在已知的方式中,肠包衣可以以pH敏感的方式(例如在3至7的pH下)变成可透过的。WO2004/091584也描述了使用芳香醇吸收增强剂的合适配制方法。
可以使用参见在Oramed产品中的方法配制化合物,其可以包括与ω-3脂肪酸的配制,如在WO2007/029238见到的或在US5102666中描述的。
一般而言,可以使用这些载体或递送剂的可药用盐(尤其是单或二钠盐)、溶剂化物(例如醇溶剂化物)和水合物。
根据本公开内容的药物组合物的经口施用可以有规律地完成,例如基于每日或每周一次或更多次;间歇性地完成,例如在一天或一周期间不规律;或周期性地完成,例如几天或几周的时间内有规律,随后一段时间不施用。本公开实施方案之药物组合物的剂型可以是任何已知的形式,例如液体或固体剂型。液体剂型包括溶液乳剂、混悬剂、糖浆剂和酏剂。除了活性化合物和载体(例如5-CNAC)外,所述液体制剂还可以包括在本领域中常用的惰性赋形剂,例如增溶剂(例如乙醇);油(例如棉籽油、蓖麻油和芝麻油);润湿剂;乳化剂;助悬剂;甜味剂;调味剂和溶剂(例如水)。所述固体剂型包括胶囊剂、软凝胶胶囊剂、片剂、囊片剂(caplet)、散剂、颗粒剂或其他固体经口剂型,其都可通过本领域熟知的方法制备。药物组合物还可以包含习惯用量的添加剂,包括但不限于pH调节剂、防腐剂、食用香料(flavorant)、掩味剂、芳香剂(fragrance)、湿润剂、张力调节剂(tonicifier)、着色剂、表面活性剂、增塑剂、润滑剂(例如硬脂酸镁)、助流剂、压缩助剂(conpression aid)、增溶剂、赋形剂、稀释剂(例如微晶纤维素,例如由FMC公司提供的Avicel PH102)或其任何组合。其他添加剂可包括磷酸缓冲盐、柠檬酸、二醇和其他分散剂。所述组合物还可以包括一种或更多种酶抑制剂,如放线酰胺素或表放线酰胺素(epiactinonin)及其衍生物;抑肽酶、Trasylol和Bowman-Birk抑制剂。此外,转运抑制剂(即[ρ]-糖蛋白,例如Ketoprofin)可以存在于本公开内容的组合物中。可通过常规方法制备本公开内容的固体药物组合物,例如通过混合活性化合物、载体(例如5-CNAC)和任意其他成分的混合物,揉捏(kneading)并填充入胶囊,或者不填充到胶囊中,而是模制随后进一步压片或压缩模制以得到片剂。此外,可以通过已知方法形成固体分散体,随后进一步加工以形成片剂或胶囊剂。优选地,本公开内容的药物组合物中成分在整个固体剂型中是均质的或均一混合的。
或者,活性化合物可以配制成与所述载体的缀合物,其可以是如US2003/0069170中描述的寡聚体,例如
这样的缀合物可以与其中所述的脂肪酸和胆汁盐联合施用。
可以使用具有聚乙二醇(PEG)的缀合物,如在Mansoor等中举例描述的。
或者,活性化合物可以与亚硝基-N-乙酰基-D,L-青霉胺(SNAP)和卡波姆溶液混合或者与牛磺胆酸盐/酯和卡波姆溶液混合以形成粘膜粘附乳液(mucoadhesive emulsion)。
可以通过加载入如Prego等公开的壳聚糖纳米胶囊(任选地如Prego Prego C,Torres D,Fernandez-Megia E,Novoa-Carballal R,E,Alonso MJ.中PEG修饰的)或Garcia-Fuentes等公开的壳聚糖或PEG包衣的脂质纳米颗粒来配制活性化合物。用于这一目的的壳聚糖纳米颗粒可以如Guggi等描述被亚氨基四氢噻吩(iminothiolane)修饰。如Dogru等所述,它们可以在水/油/水型乳剂中配制。可以如Sinko等或Song等所述,通过使用牛磺脱氧胆酸盐/酯或月桂酰肉毒碱提高活性化合物的生物利用度。一般而言,de laFuente等讨论了适合作为载体的纳米颗粒并且其可用于本公开内容。
另一些合适的用于经口制剂的策略包括使用Chiasma Ltd的WO2005/094785中描述的瞬时透性增强剂(transient permeability enhancer,TPE)***。TPE利用固体亲水颗粒在疏水介质中的油性悬液来保护药物分子免受被不利的胃肠(GI)环境失活,并且同时作用于GI壁以诱导其所载药物分子的渗透。
还包括的是使用如US2008/0200563中描述的谷胱甘肽或含有多个巯基基团的化合物来抑制粘膜上流出泵的作用。这种技术的应用实例还描述于Caliceti,P.Salmaso,S.,Walker,G.和Bernkop-Schnürch,A.(2004)“Development and in vivo evaluation of anoral insulin-PEG delivery system.”Eur.J.Pharm.Sci.,22,315-323,Guggi,D.,Krauland,A.H.和Bernkop-Schnürch,A.(2003)“Systemic peptide delivery via thestomach:in vivo evaluation of an oral dosage form for salmon calcitonin.”J.Control.Rel.92,125-135,以及Bernkop-Schnürch,A.,Pinter,Y.,Guggi,D.,Kahlbacher,H.,G.,Schuh,M.,Schmerold,I.,Del Curto,M.D.,D′Antonio,M.,Esposito,P.和Huck,Ch.(2005)“The use of thiolated polymers ascarrier matrix in oral peptide delivery”-Proof of concept.J.Control.Release,106,26-33。
可在WO2004/084870所述的无缝微球中配制活性化合物,其中活性药物成分增溶成为乳剂、微乳剂或混悬剂,配制成为微球(mini-sphere);并用常规或新颖的包衣技术多样地包衣。得到的是“预先增溶”形式的包封药物,当经口施用时,其沿胃肠道向特定位置并以特定速率提供所述活性药物的预定的立即或持续释放。基本上,所述药物的预先增溶增强了其动力学谱的可预测性,同时增强了渗透性和药物稳定性。
可应用US2009/0074824所述的壳聚糖包衣的纳米胶囊。用该技术施用的活性分子在纳米胶囊中被保护,这是因为纳米胶囊对于胃液作用来说是稳定的。此外,该***的粘膜粘着性质延长了粘附到肠壁的时间(已证实,这些***在胃肠运送中存在延迟),有助于更有效地吸收活性分子。
可以使用由TSR1Inc.开发的方法。这些包括亲水增溶技术(HydrophilicSolubilization Technology,HST),其中明胶(带有正电荷和负电荷的天然来源的胶原提取物)包衣包含在卵磷脂胶束中的活性成分颗粒并阻止其聚集或结块。这通过极性相互作用导致了改善的疏水药物颗粒可湿性。此外,两亲性卵磷脂降低了溶解流体和颗粒表面之间的表面张力。
可用瓜环(cucurbiturils)作为赋形剂来配制活性成分。
或者,可以采用Merrion Pharmaceuticals的GIPET技术来生产肠溶包衣片,其包含活性成分和吸收增强剂,所述吸收增强剂可为US2007/0238707中描述的中链脂肪酸或中链脂肪酸衍生物或者US7268214中描述的膜转位肽。
可以采用GIRESTM技术,其由可膨胀袋中的控制释放剂型组成,所述可膨胀袋放置在用于经口施用的药物胶囊中。胶囊溶解后,产气***在胃中膨胀所述袋。在临床试验中,证明该袋在胃中存留16至24小时。
或者,活性物可缀合到使其抵抗胃中酶促降解并便于其吸收的保护性调节剂上。所述活性物可与单分散性短链甲氧基聚乙二醇糖脂衍生物共价缀合,其在纯化后结晶并冷冻干燥成为干的活性药物成分。US5438040和www.biocon.com描述了该方法。
还可采用肝靶向囊泡(hepatic-directed vesicle,HDV)用于活性物递送。HDV可由包封活性物的脂质体(直径≤150nm)组成,在其脂质双层中还包含肝细胞靶向分子。所述靶向分子引导包封的活性物递送到肝细胞,因此起效所需的活性物的量相对小。US2009/0087479描述了该技术,并在www.diasome.com进一步描述。
如与胰岛素相关的US2002/0115592所述,可以将活性物与中链偏甘油酯(任选地与长链PEG种类混合)并入另外包含基本无水的亲水介质(包含醇和共溶剂)的组合物中。
或者,可使用Shen Z,Mitragotri S,Pharm Res.2002Apr;19(4):391-5“Intestinal patches for oral drug delivery”中描述的肠贴片。
如美国专利号7189414所述,可将活性物并入易侵蚀基质,所述基质通过将水凝胶与疏水聚合物混合形成。
用于待治疗成人的合适经口剂量水平可在0.05至5mg的范围内,优选约0.1至2.5mg。
患者的剂量治疗频率可为每天1至6次,例如每天2至4次。理想地治疗将维持至少6周的长时间,优选至少6个月,优选至少1年,并任选地终生。
相关病症的联合治疗可使用根据本公开内容的组合物来进行,并独立施用一种或更多种其他治疗。或者,根据本公开内容的组合物可以包含一种或更多种其他治疗进行联合施用。
根据本公开内容的联合治疗包括将所述活性化合物与胰岛素、GLP-2、GLP-1、GIP或糊精联合,或一般地与其他抗糖尿病药联合。因此包括共制剂的联合治疗可以采用如下药物:胰岛素增敏剂,包括双胍类(例如,二甲双胍、丁双胍和苯乙双胍)、TZD(PPAR)(例如,巴格列酮、吡格列酮、来格列酮、罗格列酮和曲格列酮)、双PPAR激动剂(例如,阿格列扎、莫格他唑和替赛格列他),或者促分泌素(包括磺酰脲,例如氨磺丁脲、氯磺丙脲、格列齐特、甲苯磺丁脲、妥拉磺脲、格列吡嗪、格列本脲、优降糖、格列喹酮、格列吡脲和格列美脲)、美格列奈类/格列奈类(K+)(例如,那格列奈、瑞格列奈和米格列奈)、GLP-1类似物(例如,艾塞那肽、利拉鲁肽和阿必鲁泰)、DPP-4抑制剂(例如,阿格列汀、利拉利汀、沙格列汀、西他列汀和维格列汀)、胰岛素类似物或特殊制剂(例如,(快速起效的)赖脯胰岛素、门冬胰岛素、赖谷胰岛素,(长效的)甘精胰岛素、地特胰岛素,吸入性胰岛素-Exubra和NPH胰岛素),以及其他,包括α-葡萄糖苷酶抑制剂(例如,阿卡波糖、米格列醇和伏格列波糖)、糊精类似物(例如,普兰林肽)、SGLT2抑制剂(例如,达格列净、瑞格列净(Remogliflozin)和舍格列净)以及其他药物(miscellaneous ones)(包括苯氟雷司和托瑞司他)。
另一些组合包括与瘦素的共施用或共制剂。瘦素抵抗是2型糖尿病的得到确认的组成;然而,迄今为止,瘦素的注射未能改善这一病症。相反,有证据支持糊精(以及由此具有糊精样能力的分子,如鲑鱼降钙素模拟物)能够提高瘦素敏感性。糊精/瘦素组合已经显示对体重和食物摄取以及胰岛素抵抗的协同作用[Kusakabe T等]。因此,本公开内容提供了式Ac-CSNLSTCVLG KLSQELHKLQ TYPRTDVGAN AP-NH2(SEQ ID NO:15)的化合物,其将被称为“降钙素模拟物1”或“UGP302”。
因此,本公开内容包括用于经肠施用的这种肽的药物制剂,例如用于治疗I型糖尿病、II型糖尿病或代谢综合征,或者用于减轻胰岛素耐受,或者用于降低不期望的高空腹血清葡萄糖水平,或者用于降低不期望的高峰值血清葡萄糖水平,或者用于降低不期望的高峰值血清胰岛素水平,或者用于减少对葡萄糖耐受测试的不期望的高响应,或者用于治疗骨质疏松,或者用于治疗骨关节炎。该制剂还可以包含载体,其用来使得能够有效经肠施用所述活性化合物。
优选地,所述制剂被配制成用于经口施用至消化道。
优选地,所述载体包含5-CNAC、SNAD或SNAC。
此外,本公开内容包括作为新化合物的所述肽。
在以下实施例中描述了本文公开的实施方案,其被示出以帮助理解本公开内容并且不应解释为以任何方式限制随后的权利要求书中限定的公开内容的范围。阐述以下实施例以向本领域的普通技术人员提供全部公开内容以及如何制造和使用所述实施方案的描述,并且不旨在限制本公开内容的范围,它们也不旨在表示下面的实验是所进行的全部或仅有实验。已经做出努力以确保所用数字(例如量、温度等)的准确,但一些实验误差和偏差应予以考虑。除非另有说明,否则份数是重量份数,分子量是重均分子量,温度是摄氏度,压力是大气压或接近大气压。
实施例
实施例1
降钙素模拟物1(CM1)相比于sCT的长期作用
动物
在于6-7周龄获得的雄性Levin-DIO大鼠(饮食-敏感)以及Levin-DR(饮食-抗性)(TacLevin:CD(SD)DIO)(Taconic,Hudson,NY,U.S.A.)中进行研究。抵达时,给予DIO大鼠高脂肪饮食(60千卡%)(#D12495,Research Diets Inc.,New Brunswick,NJ.,USA)并且在实验之前和实验期间保持相同饮食16周。给予DR大鼠低脂肪饮食并且作为对照组。整个研究中动物成对圈养。在实验开始前控制大鼠并用MilliQ H2O预给药(每天一次,持续2至3周)以降低压力诱导的高血糖。在空腹(6小时)条件下记录基线参数。基于空腹体重(BW)和空腹血浆葡萄糖(FPG)将大鼠随机为处理组。在研究期间每周记录一次体重、食物和水摄取。
化合物
在给药当天,基于以下计算通过将载体与给定的化合物混合来制备经口sCT或降钙素模拟物1溶液:
5-CNAC(载剂):
用经口5-CNAC处理的动物接受溶解在milliQ H2O中150mg/kg的剂量。
5-CNAC的剂量水平: 150mg/kg
给药体积: 5ml/kg
化合物浓度: 30mg/ml
sCT/降钙素模拟物1:
用经口sCT或经口降钙素模拟物1处理的动物接受1.0mg/kg的剂量以及150mg/kg5-CNAC(全部溶解在milliQ H2O中)。
sCT/降钙素模拟物1的剂量水平: 1.0mg/kg
给药体积: 5ml/kg
化合物浓度: 0.2mg/ml
在研究期间通过经口(p.o.)填喂法(gavage)一天两次(上午7-8时和下午3-4时)施用药物并且在OGTT开始前在早上作为单一剂量。
在OGTT期间葡萄糖的经口填喂通过以下计算来准备:
D-葡萄糖:
给予动物溶解在milliQ H2O中的2g/kg单一剂量。
D-葡萄糖的剂量水平: 2g/kg
给药体积: 4ml/kg
化合物浓度: 500mg/ml
实验设计
基线 | 第一周 | 第二周 | 第三周 | 第四周 |
FPG | BW | BW | BW | BW |
BW | 食物 | 食物 | 食物 | 食物 |
B | FPG | FPG | ||
B | B | |||
OGTT |
FPG 空腹血浆葡萄糖
BW 体重
B 血液
OGTT 经口葡萄糖耐受测试
过夜禁食(16小时)后的OGTT
-30 | 0 | 15 | 30 | 60 | 120 | 240分钟 |
D | G | B | B | B | B | B |
B | B | BG | BG | BG | BG | BG |
BG | BG |
D=药物;BG=血糖;B=血液;G=葡萄糖
通过加热的尾静脉穿刺测量血液采样和血糖。
用Avia血糖计量仪(Roche Diagnostics,Rotkreuz,Switzerland)测定全血葡萄糖水平。在1ml MiniCollect K3EDTA血浆管(Greiner-Bio-OneGmbH,Frickenhausen,Germany)中收集血液(大约300μl),颠倒并储存在冰上。管在4℃、3000×g(台式离心机中5000rpm)离心10分钟并获得血浆。血浆样品在-20℃储存直至分析。在OGTT期间获得总计~2.5ml血液(~0.3%的体重)。
实验组
统计
通过单因素ANOVA随后通过Dunnett事后检验进行多重比较来进行统计分析。进行t检验以比较两个成对的组。所有的分析使用GRAPHPAD PRISM软件(GraphPad Prism,SanDiego,CA.U.S.A)进行。OGTT期间曲线下增加的面积(incremental area under curve,iAUC)通过梯形方法计算。认为P<0.05的值是显著的。所有数据表示为平均值±平均值标准误差(SEM)。
3.结果
基线特征
结果总结在图1(食物摄取和体重)、图2(OGTT)和图3(FPG)中。图1A、图1B、图1C和图1D示出了长期经口鲑鱼降钙素(“sCT”)相对于经口UGP302施用对DIO大鼠之体重和食物摄取的作用,如在实施例1中测量的。图2A和图2B示出了经口sCT相对于经口UGP302对DIO大鼠之OGTT期间葡萄糖耐受的作用,如在实施例1中测量的。图3示出了经口sCT相对于经口UGP302对DIO大鼠之空腹血糖的作用,如在实施例1中测量的;
通过填喂每日两次向四组大鼠施加含有1mg/kg化合物之经口sCT/降钙素模拟物1的一个剂量,持续四周。经口载剂组分别充当给药方案对照。相对于载剂,*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001。结果表示为平均值±SEM。
当与其饮食抗性(DR)同窝出生仔畜(littermate)比较体重时,16周自由采食高脂肪饮食在饮食敏感(DIO)大鼠中诱导了明显的肥胖表型,(P<0.001)(表1)。6小时空腹血糖在DIO和DR之间没有差别。相反,DIO大鼠中OGTT期间曲线下面积(AUC)计算与DR大鼠相比显著更高,表明高脂肪饮食诱导的葡萄糖不耐受(表1)。
表1.DIO和DR大鼠的代谢参数
AUC,曲线下面积;OGTT,经口葡萄糖耐受测试。数据为平均值±SEM(n=12/DR,n=24/DIO)。
体重和食物摄取
在处理的第一周中,相比于经口载剂处理的大鼠,经口sCT的施用显著减少食物摄取。此外,经口sCT保护免受如对经口载剂组观察到的体重进一步增加(图1)。因此,这些观察确认了通过经口sCT的施用在DIO大鼠中诱导的急性强厌食作用。有趣的是,由第2周的处理和整个研究期间,在经口sCT处理的大鼠中食物摄取正常化并且与经口载剂的摄取相似,导致关于在研究结束的累积食物摄取缺乏差异。这确认了之前报道提出的经口sCT对能量摄取的瞬时作用。然而,整个研究期间,经口sCT维持对体重增加的保护作用并且当在研究结束与经口载剂相比时,体重相对于基线显著降低(图1)。这与可能的经口sCT对用于长期调节能量平衡之能量支出的内源作用一致。
一般而言,与经口载剂组相比,降钙素模拟物1的经口施用与处理的起始周期间经口sCT的强厌食作用相似,并且显著降低食物摄取并且免受体重增加(图1)。
如对经口sCT观察到的,降钙素模拟物1对食物摄取发挥瞬时作用,尽管在研究期间与经口sCT相比时食物摄取倾向于减少。因此,四周处理后当与经口载剂相比时,降钙素模拟物1的累积食物摄取显著降低。此外,当与经口sCT相比时,观察到体重的更显著降低,表明关于对能量平衡作用的优越性。
葡萄糖耐受
结果在图2中示出。向四组大鼠通过填喂每日两次施加含有1mg/kg化合物之经口sCT/降钙素模拟物1的一个剂量,持续四周。经口载剂组充当给药方案对照。两周处理后,在过夜禁食后进行OGTT。相对于载剂,***P<0.001。结果表示为平均值±SEM。
两周的处理后,与经口载剂相比,经口sCT显著降低OGTT期间的葡萄糖iAUC(图2),从而证实了通过sCT的经口施用发挥的餐后血糖控制,如之前所证明的。通常,降钙素模拟物1表现出如对经口sCT观察到的iAUC的相似显著降低,尽管在这一方面对于经口sCT没有明显优越性。
空腹血糖
处理2周和4周后,经口sCT施用与经口载剂处理的大鼠没有显著不同,经口载剂处理的大鼠与在雄性DIO大鼠中的先前观察相反,其中通常在长期处理后观察到空腹血糖降低1mM-1.15mM。对于降钙素模拟物1,在整个研究阶段中当与经口载剂或经口sCT相比时,观察到对于空腹血糖的优越性倾向。
实施例2
经口sCT相对于经口降钙素模拟物1的急性和短期作用
动物
在于6-7周龄获得的雄性Levin-DIO大鼠(饮食-敏感)以及Levin-DR(饮食-抗性)(TacLevin:CD(SD)DIO)(Taconic,Hudson,NY,U.S.A.)中进行研究。抵达时,给予DIO大鼠高脂肪饮食(60千卡%)(#D12495,Research Diets Inc.,New Brunswick,NJ.,USA)并且在实验之前和实验期间保持相同饮食12周。给予DR大鼠低脂肪饮食并且作为对照组。整个研究中动物成对圈养。在实验开始前控制大鼠并用MilliQ H2O预给药(每天一次,持续2至3周)以降低压力诱导的高血糖。在研究开始前一天,给予动物单一剂量的载剂。在过夜禁食(16小时)条件下记录基线参数。基于空腹体重(BW)和空腹血浆葡萄糖(FPG)将大鼠随机分为处理组。在研究结束前以及在研究结束时记录体重、食物和水摄取。
化合物
在给药当天,基于以下计算通过将载体与给定的化合物混合来制备经口sCT/降钙素模拟物1溶液:
5-CNAC(载剂):
用经口5-CNAC处理的动物接受溶解在milliQ H2O中150mg/kg的剂量。
5-CNAC的剂量水平:150mg/kg
给药体积: 5ml/kg
化合物浓度: 30mg/ml
sCT/降钙素模拟物1:
用经口sCT或经口降钙素模拟物1处理的动物接受0.5mg/kg、1.0mg/kg或2.0mg/kg的剂量以及150mg/kg5-CNAC(全部溶解在milliQ H2O中)。
sCT/降钙素模拟物1的剂量水平:0.5mg/kg
给药体积: 5ml/kg
化合物浓度: 0.1mg/ml
sCT/降钙素模拟物1的剂量水平:1.0mg/kg
给药体积: 5ml/kg
化合物浓度: 0.2mg/ml
sCT/降钙素模拟物1的剂量水平:2.0mg/kg
给药体积: 5ml/kg
化合物浓度: 0.4mg/ml
在研究期间通过经口(p.o.)填喂法(一天两次)给予药物施用并且在OGTT开始前在早上作为单一剂量。
在OGTT期间葡萄糖的经口填喂通过以下计算来准备:
D-葡萄糖:
给予动物溶解在milliQ H2O中的2g/kg单一剂量。
D-葡萄糖的剂量水平: 2g/kg
给药体积: 4ml/kg
化合物浓度: 500mg/ml
实验设计
急性测试-0.5mg/kg、1.0mg/kg和2mg/kg的处理时期
第0天 | 第1-2天 | 第3天 | 第4天 | 第5天 | 第6天 | 第7天 |
第一次OGTT | 休息 | 预给药 | 处理 | 处理 | 处理 | 第二次OGTT |
全部载剂 | 无控制 | 全部载剂 | (一日两次) | (一日两次) | (一日两次) | 单一剂量 |
初次(第一次)OGTT后,基于FBG和BW将动物随机分为处理组。在第二次OGTT前动物将被预处理3天(一日两次)。将在早上(上午7-8时)和下午(下午3-4时)进行给药。
以交叉设计(x-over design)进行研究,各个动物作为其自身对照。
过夜禁食(16小时)后的OGTT:
-30 | 0 | 15 | 30 | 60 | 120 | 240分钟 |
D | G | B | B | B | B | B |
B | B | BG | BG | BG | BG | BG |
BG | BG |
D=药物;BG=血糖;B=血液;G=葡萄糖
通过加热的尾静脉穿刺测量血液采样和血糖。
用Avia血糖计量仪(Roche Diagnostics,Rotkreuz,Switzerland)测定全血葡萄糖水平。在1ml MiniCollect K3EDTA血浆管(Greincr-Bio-oneGmbH,Frickenhausen,Germanv)中收集血液(大约300μl),颠倒并储存在冰上。管在4℃、3000×g(台式离心机中5000rpm)离心10分钟并获得血浆。血浆样品在-20℃储存直至分析。在OGTT期间获得总计~2.5ml血液(~0.3%的体重)。
实验组
统计
通过单因素ANOVA随后通过Dunnett事后检验进行多重比较来进行统计分析。进行t检验以比较两个成对的组。所有的分析使用GRAPHPAD PRISM软件(GraphPad Prism,SanDiego,CA.U.S.A)进行。OGTT期间曲线下增加的面积(iAUC)通过梯形方法计算。认为P<0.05的值是显著的。所有数据表示为平均值±平均值标准误差(SEM)。
3.结果
基线特征
当与其饮食抗性(DR)同窝出生仔畜比较体重时,12周自由采食高脂肪饮食在饮食敏感(DIO)大鼠中诱导了明显的肥胖表型(P<0.001)(表1)。空腹血糖在DIO和DR之间没有差别。相反,DIO大鼠中OGTT期间曲线下面积(AUC)计算与DR大鼠相比显著更高,表明高脂肪饮食诱导的葡萄糖不耐受(表2)。
表2.DIO和DR大鼠的代谢参数
AUC,曲线下面积;OGTT,经口葡萄糖耐受测试。数据为平均值±SEM(n=12/DR,n=24/DIO)。
体重和食物摄取
每日两次通过填喂法向四组大鼠施加三种不同剂量的含有0.5、1和2mg/kg化合物之经口sCT/降钙素模拟物1,持续3天。相对于经口sCT,*P<0.05.**P<0.01。
结果在图4、图5和图6中作为平均值±SEM呈现。图4A和图4B示出了经口sCT相对于经口UGP302对在实施例2中观察到的在第一剂量下的DIO大鼠之体重和食物摄取的作用。图5A和图5B示出了经口sCT相对于经口UGP302对在实施例2中观察到的在第二剂量下的DIO大鼠之体重和食物摄取的作用。图6A和图6B示出了经口sCT相对于经口UGP302对在实施例2中观察到的在第三剂量下的DIO大鼠之体重和食物摄取的作用。
经口sCT短期处理时期后剂量依赖地减少体重和食物摄取,并且因此确认通过靶向糊精受体诱导的厌食作用,如之前观察到的。一般而言,模拟物表现出关于体重减少的相对经口sCT剂量依赖优越性,如在图4、图5和图6中举例说明的。降钙素模拟物1以0.5mg/kg的施用证明与经口sCT0.5mg/kg的显著差异。与经口sCT相比,模拟物的食物摄取倾向于剂量依赖地减少。
葡萄糖耐受
在OGTT前向四组大鼠通过填喂法每日两次施加三种不同剂量的含有0.5、1和2mg/kg化合物的经口sCT/降钙素模拟物1,持续三天。实验设计是交叉设计。相对于经口载剂,*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001。结果在图7和图8中呈现为平均值±SEM。图7A和图7B示出经口sCT相对于经口UGP302在第一剂量下对DIO大鼠中OGTT期间之葡萄糖耐受的作用,如在实施例2中测量的。图8A和图8B示出经口sCT相对于经口UGP302在第二剂量下对DIO大鼠中OGTT期间之葡萄糖耐受的作用,如在实施例2中测量的。
经口sCT的0.5、1和2mg/kg剂量与经口载剂相比,在OGTT期间显著降低葡萄糖iAUC,因此证实了如之前证明的通过sCT的经口施用发挥餐后血糖控制。如对经口sCT所观察到的,降钙素模拟物1表现出在iAUC中相似的显著降低,尽管在多种UGP中对于经口sCT没有明显优越性。
实施例3
经口sCT相对于UGP284、UGP298和UGP302的急性和短期作用
动物
在于6-7周龄获得的雄性Levin-DIO大鼠(饮食-敏感)以及Levin-DR(饮食-抗性)(TacLevin:CD(SD)DIO)(Taconic,Hudson,NY,U.S.A.)中进行研究。抵达时,给予DIO大鼠高脂肪饮食(60千卡%)(#D12495,Research Diets Inc.,New Brunswick,NJ.,USA)并且在实验之前和实验期间保持相同饮食12周。给予DR大鼠低脂肪饮食并且作为对照组。整个研究中动物成对圈养。在实验开始前控制大鼠并用MilliQ H2O预给药(每天一次,持续2至3周)以降低压力诱导的高血糖。在研究开始前一天,给予动物单一剂量的载剂。在过夜禁食(16小时)条件下记录基线参数。基于空腹体重(BW)和空腹血浆葡萄糖(FPG)将大鼠随机分为处理组。在研究结束前和在研究结束时记录体重、食物和水摄取。
化合物
在给药当天,基于以下计算通过将载体与给定的化合物混合来制备经口sCT/UGP溶液:
5-CNAC(载剂):
用经口5-CNAC处理的动物接受溶解在milliQ H2O中150mg/kg的剂量。
5-CNAC的剂量水平: 150mg/kg
给药体积: 5ml/kg
化合物浓度: 30mg/ml
(sCT/UGP284/UGP298/UGP302)
用经口sCT或经口UGP284/UGP298/UGP302处理的动物接受0.5mg/kg、1.0mg/kg或2.0mg/kg的剂量以及150mg/kg5-CNAC(全部溶解在milliQ H2O中)。
sCT/UGP284/UGP298/UGP302的剂量水平: 0.5mg/kg
给药体积: 5ml/kg
化合物浓度: 0.1mg/ml
sCT/UGP284/UGP298/UGP302的剂量水平: 1.0mg/kg
给药体积: 5ml/kg
化合物浓度: 0.2mg/ml
sCT/UGP284/UGP298/UGP302的剂量水平: 2.0mg/kg
给药体积: 5ml/kg
化合物浓度: 0.4mg/ml
在研究期间通过经口(p.o.)填喂法(一天两次)给予药物施用并且在OGTT开始前在早上作为单一剂量。
在OGTT期间葡萄糖的经口填喂法通过以下计算来准备:
D-葡萄糖:
给予动物溶解在milliQ H2O中的2g/kg单一剂量。
D-葡萄糖的剂量水平: 2g/kg
给药体积: 4ml/kg
化合物浓度: 500mg/ml
实验设计
急性测试-0.5mg/kg、1.0mg/kg和2.0mg/kg的处理时期:
第0天 | 第1-2天 | 第3天 | 第4天 | 第5天 | 第6天 | 第7天 |
第一次OGTT | 休息 | 预给药 | 处理 | 处理 | 处理 | 第二次OGTT |
全部载剂 | 无控制 | 全部载剂 | (一日两次) | (一日两次) | (一日两次) | 单一剂量 |
初次(第一次)OGTT后,基于FBG和BW将动物随机分为处理组。动物在第二次OGTT前预处理3天(一日两次)。以交叉设计进行研究,各个动物作为其自身对照。
过夜禁食(16小时)后的OGTT:
-30 | 0 | 15 | 30 | 60 | 120 | 240分钟 |
D | G | B | B | B | B | B |
B | B | BG | BG | BG | BG | BG |
BG | BG |
D=药物;BG=血糖;B=血液;G=葡萄糖
通过加热的尾静脉穿刺测量血液采样和血糖。用Avia血糖计量仪(Roche Diagnostics,Rotkreuz,Switzerland)测定全血葡萄糖水平。在1mlMiniCollect K3EDTA血浆管(Greiner-Bio-One GmbH,Frickenhausen,Germany)中收集血液(大约300μl),颠倒并在冰上储存。管在4℃、3000×g(台式离心机中5000rpm)离心10分钟并获得血浆。血浆样品在-20℃储存直至分析。在OGTT期间获得总计~2.5ml血液(~0.3%的体重)。
实验组
统计
通过单因素ANOVA随后通过Dunnett事后检验进行多重比较来进行统计分析。进行t检验以比较两个成对的组。所有的分析使用GRAPHPAD PRISM软件(GraphPad Prism,SanDiego,CA.U.S.A)进行。OGTT期间曲线下增加的面积(iAUC)通过梯形方法计算。认为P<0.05的值是显著的。所有数据表示为平均值±平均值标准误差(SEM)。
3.结果
基线特征
当与其饮食抗性(DR)同窝出生仔畜比较体重时,12周自由采食高脂肪饮食在饮食敏感(DIO)大鼠中诱导了明显的肥胖表型(P<0.001)(表3)。空腹血糖在DIO和DR之间没有差别。相反,DIO大鼠中OGTT期间曲线下面积(AUC)计算与DR大鼠相比显著更高,表明高脂肪饮食诱导的葡萄糖不耐受(表3)。
表3.DIO和DR大鼠的代谢参数
AUC,曲线下面积;OGTT,经口葡萄糖耐受测试。数据为平均值±SEM(n=12/DR,n=24/DIO)。
体重和食物摄取
在短期处理时期后经口sCT剂量依赖地减少体重和食物摄取,并且因此确认通过靶向糊精受体诱导的厌食作用,如之前观察到的。一般而言,所有UDP模拟物表现出关于体重减少的相对于经口sCT的剂量依赖优越性,如在图9中举例说明的。UGP302以0.5mg/kg的施用表现出与经口sCT0.5mg/kg的显著差异。对于UGP284,当与经口sCT2mg/kg相比时观察到在2mg/kg剂量的显著差异。最后,当与相似剂量的经口sCT相比时,在1mg/kg和2mg/kg二者剂量下UGP298都显著不同(图9)。图9A、图9B、图9C、图9D、图9E和图9F示出向4组大鼠通过填喂法施加(一日两次,持续3天)三种不同剂量的经口sCT/UGP284/UGP298/UGP302(含有0.5mg/kg、1mg/kg和2mg/kg化合物)的作用。相对于经口sCT,*P<0.05,**P<0.01。结果呈现为平均值±SEM。
葡萄糖耐受
图10A、图10B、图10C、图10D、图10E和图10F示出在DIO大鼠中经口sCT相对于经口UGP对OGTT期间葡萄糖耐受的作用。在OGTT之前,向4组大鼠通过填喂法施加(一日两次,持续3天)三种不同剂量的经口sCT/UGP284/UGP298/UGP302(含有0.5mg/kg、1mg/kg和2mg/kg化合物)的作用。实验设计为交叉设计。相对于经口载剂,*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001。结果呈现为平均值±SEM。
所有的UGP证明了如对经口sCT观察到的iAUC的相似显著下降(图10)。
总而言之,UGP284、UGP298和UGP302以0.5mg/kg、1mg/kg和2mg/kg剂量的施用证明对于同等剂量的经口sCT关于在雄性DIO大鼠之能量平衡的优越性。此外,UGP284、UGP298和UGP302在0.5mg/kg、1mg/kg和2mg/kg的剂量下在OGTT期间产生了葡萄糖耐受的改进。
实施例4
sCT类似物与T47D细胞降钙素受体的结合
在T47D(人乳腺上皮细胞系)生物测定中检测多种浓度的sCT类似物。已知该细胞系具有以下受体:降钙素、雄激素、孕酮、糖皮质激素、催乳素和***。结果在图11中呈现为相对于sCT的%cAMP结合,其被设定为在1000pg/mL的浓度下100%cAMP结合。可以看到UGP302提供了所有受试化合物的最高结合水平,并且其提供比sCT更高的结合水平。
实施例5
在喂养sCT类似物的大鼠中的食物消耗和重量改变
雄性Sprague-Dawley大鼠单个地图养在笼中,其中光/暗周期被反转。允许大鼠自由进食。在各个研究期间每天监控食物消耗和大鼠重量。对大鼠肌内注射盐水安慰剂或在盐水中特定剂量的指定肽。在下表中的数据总结为食物消耗相对于处理开始前当天(第-1天)的平均改变和重量相对于处理开始前当天(第-1天)的平均改变。
结果在图12、13、14、15、16和17中示出。图12A和图12B示出UGP282的食物消耗(图12A)和重量改变测量(图12B),如在实施例5中测量的。图13A和图13B示出UGP283的食物消耗(图13A)和重量改变测量(图13B),如在实施例5中测量的。图14A和图14B示出UGP284的食物消耗(图14A)和重量改变测量(图14B),如在实施例5中测量的。图15A和图15B示出UGP298的食物消耗(图15A)和重量改变测量(图15B),如在实施例5中测量的。图16A和图16B示出UGP302的食物消耗(图16A)和重量改变测量(图16B),如在实施例5中测量的。图17A和图17B示出UGP303的食物消耗(图17A)和重量改变测量(图17B),如在实施例5中测量的。
可以看出所有受试化合物诱导重量减轻并减少食物摄取。
实施例6
骨质疏松和骨关节炎的标志物
在DIO大鼠中研究了sCT/降钙素模拟物对骨和软骨损失的作用。按照下表中的描述向动物给药,并且处理后2小时通过加热的尾静脉穿刺完成血液采样。
血清CTX-I水平是骨吸收的一个指标,其使用RatLapsTM ELISA测量,且血清CTX-II水平是软骨降解的一个指标,其使用血清PC CartilapsTM ELISA测量。
实验组
结果见于图18和图19,其中SEQ ID NO:18的降钙素模拟物示出比sCT更大的对骨吸收和软骨降解二者之减少的作用。
在一些实施方案中,本公开内容的一种肽具有选自以下的序列:SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:17和SEQ ID NO:18。
在一些实施方案中,一种方法包括向患者施用有效量的选自以下的肽以影响患者的重量减轻:SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:15和SEQ ID NO:17。
在一些实施方案中,一种方法包括向患者施用有效量的选自以下的肽以影响患者的餐后血糖控制:SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:15和SEQ ID NO:17。
在一些实施方案中,一种方法包括向患者施用有效量的选自以下的肽以影响患者的血糖控制的改进:SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14、SEQ IDNO:15和SEQ ID NO:17。
在一些实施方案中,一种方法包括向患者施用有效量的具有序列CmSNLSTCVLGKLSQELHKLQTYPRTDVGANXaaXaaa之SEQ ID NO:18的肽,从而减少患者的骨吸收和软骨降解的至少一个。
所有的专利、专利申请和本文引用的公开参考通用参考以其整体并入本文。应当理解一些以上公开的以及其他特征和功能或其替代可以理想地组合到许多其他不同的***或应用中。本领域技术人员随后可以在其中进行多种目前未预见到的或未预料到的替代、修饰、变化或改进,其也旨在被以下权利要求书涵盖。
Claims (8)
1.以下肽:
。
2.根据权利要求1所述的肽,其配制成用于以有效量向患者施用,从而实现所述患者的重量减轻或者实现血糖控制的改善。
3.根据权利要求1所述的肽,其中所述肽配制成用于经肠施用。
4.根据权利要求1所述的肽,其中所述肽配制成用于肠胃外施用。
5.根据权利要求1所述的肽,其中所述肽与载体一起配制成用于经口施用,并且其中所述载体提高所述肽的经口生物利用度。
6.根据权利要求5所述的肽,其中所述载体包含5-CNAC、SNAD或SNAC。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的肽,其中所述肽配制成用于经口施用的药物组合物,其包含有包衣的柠檬酸颗粒,并且其中所述有包衣的柠檬酸颗粒提高所述肽的经口生物利用度。
8.根据权利要求2至5中任一项所述的肽,其中所述施用用于改善所述患者的餐后血糖控制。
Applications Claiming Priority (7)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201161554771P | 2011-11-02 | 2011-11-02 | |
US61/554,771 | 2011-11-02 | ||
US201161578620P | 2011-12-21 | 2011-12-21 | |
US61/578,620 | 2011-12-21 | ||
PCT/US2012/063332 WO2013067357A1 (en) | 2011-11-02 | 2012-11-02 | Peptide analogs for treating diseases and disorders |
US13/667,578 | 2012-11-02 | ||
US13/667,578 US9006172B2 (en) | 2011-11-02 | 2012-11-02 | Peptide analogs for treating diseases and disorders |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN103998052A CN103998052A (zh) | 2014-08-20 |
CN103998052B true CN103998052B (zh) | 2016-08-17 |
Family
ID=48192827
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201280062729.0A Expired - Fee Related CN103998052B (zh) | 2011-11-02 | 2012-11-02 | 用于治疗疾病和紊乱的肽类似物 |
Country Status (10)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US9006172B2 (zh) |
JP (3) | JP6170933B2 (zh) |
KR (1) | KR102019911B1 (zh) |
CN (1) | CN103998052B (zh) |
AU (2) | AU2012332265B2 (zh) |
BR (1) | BR112014010701A2 (zh) |
CA (1) | CA2854175A1 (zh) |
MX (1) | MX351092B (zh) |
RU (1) | RU2616511C2 (zh) |
WO (1) | WO2013067357A1 (zh) |
Families Citing this family (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US9533022B2 (en) * | 2011-11-02 | 2017-01-03 | KeyBioscience A/S | Peptide analogs for treating diseases and disorders |
NO3068796T3 (zh) | 2013-11-14 | 2018-06-30 | ||
GB201500263D0 (en) * | 2015-01-08 | 2015-02-25 | Keybioscience Ag | Calcitonin analogues for treating diseases and disorders |
GB201704429D0 (en) | 2017-03-21 | 2017-05-03 | Keybioscience Ag | Calcitonin mimetics for treating diseases and disorders |
GB201707955D0 (en) | 2017-05-18 | 2017-07-05 | Keybioscience Ag | Dual amylin and calcitonin receptor agonists for treating diseases and disorders |
GB201813678D0 (en) | 2018-08-22 | 2018-10-03 | Keybioscience Ag | Acylated calcitonin mimetics |
GB201813677D0 (en) | 2018-08-22 | 2018-10-03 | Keybioscience Ag | Calcitonin mimetics for treating diseases and disorders |
US11420525B2 (en) | 2020-04-21 | 2022-08-23 | Mac LTT, Inc. | Tractor trailer with included battery charging |
US11634095B2 (en) | 2020-04-21 | 2023-04-25 | Mac LTT, Inc. | Removable safety bar for creating a remote safety visual device |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1105726C (zh) * | 1998-05-15 | 2003-04-16 | 中国科学院上海生物化学研究所 | 人降钙素类似物 |
WO2010103045A1 (en) * | 2009-03-12 | 2010-09-16 | Nordic Bioscience A/S | Treatment of diabetes and metabolic syndrome |
Family Cites Families (47)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS6033478B2 (ja) * | 1980-06-20 | 1985-08-02 | 帝国臓器製薬株式会社 | ペプチドの製造方法 |
US4708934A (en) | 1984-09-27 | 1987-11-24 | Unigene Laboratories, Inc. | α-amidation enzyme |
US6319685B1 (en) | 1984-09-27 | 2001-11-20 | Unigene Laboratories, Inc. | Alpha-amidating enzyme compositions and processes for their production and use |
US4659804A (en) * | 1984-11-01 | 1987-04-21 | Armour Pharmaceutical Company | (Bis-1,7-S-acetamidomethyl-L-cysteine)salmon calcitonin |
US4764589A (en) * | 1987-05-26 | 1988-08-16 | Rorer Pharmaceutical Corporation | [N-alpha-acyl,8-glycine, des-19-leucine]-calcitonin |
US5789234A (en) | 1987-08-14 | 1998-08-04 | Unigene Laboratories, Inc. | Expression systems for amidating enzyme |
US5175146A (en) | 1989-12-05 | 1992-12-29 | Vical, Inc. | Synthetic calcitonin peptides |
US5102666A (en) | 1990-09-11 | 1992-04-07 | Oramed, Inc. | Calcium polycarbophil controlled release composition and method |
US5527790A (en) | 1991-09-30 | 1996-06-18 | The University Of British Columbia | Bis(maltolato)oxovanadium compositions for the treatment of elevated blood sugar |
US5359030A (en) | 1993-05-10 | 1994-10-25 | Protein Delivery, Inc. | Conjugation-stabilized polypeptide compositions, therapeutic delivery and diagnostic formulations comprising same, and method of making and using the same |
US6692766B1 (en) | 1994-06-15 | 2004-02-17 | Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem | Controlled release oral drug delivery system |
JPH083196A (ja) | 1994-06-21 | 1996-01-09 | Sanwa Kagaku Kenkyusho Co Ltd | カルシトニン誘導体及びその用途 |
DE726075T1 (de) | 1995-02-08 | 1996-12-12 | Therapicon Srl | Nicht-inorganische pharmazeutische salzige Lösungen zur endonasale Verabreichung |
US5866536A (en) | 1995-03-31 | 1999-02-02 | Emisphere Technologies, Inc. | Compounds and compositions for delivering active agents |
US5739106A (en) | 1995-06-07 | 1998-04-14 | Rink; Timothy J. | Appetite regulating compositions |
EP1304322A3 (en) | 1995-08-22 | 2003-11-19 | Japan Tobacco Inc. | Carboxylic acid compound and use thereof |
US5962270A (en) * | 1996-02-06 | 1999-10-05 | Bionebraska, Inc. | Recombinant preparation of calcitonin fragments and use thereof in the preparation of calcitonin and related analogs |
US5912014A (en) | 1996-03-15 | 1999-06-15 | Unigene Laboratories, Inc. | Oral salmon calcitonin pharmaceutical products |
US5773647A (en) | 1997-02-07 | 1998-06-30 | Emisphere Technologies, Inc. | Compounds and compositions for delivering active agents |
DE69841939D1 (de) | 1997-04-16 | 2010-11-25 | Unigene Lab Inc | Direkte expression von peptiden ins kulturmedium |
CN1329502A (zh) | 1998-12-04 | 2002-01-02 | 普罗瓦利斯英国有限公司 | 含有胰岛素的药物组合物 |
JP2000290295A (ja) | 1999-03-31 | 2000-10-17 | Asahi Chem Ind Co Ltd | N−アセチルグルコサミニルカルシトニン |
ATE288415T1 (de) | 1999-04-05 | 2005-02-15 | Emisphere Tech Inc | Dinatrium-salze, monohydrate und ethanol-solvate |
US6780846B1 (en) | 1999-09-27 | 2004-08-24 | Elan Corporation, Plc | Membrane translocating peptide drug delivery system |
GB2368792A (en) | 2000-10-06 | 2002-05-15 | Roger Randal Charles New | Absorption enhancers |
US6673574B2 (en) | 2000-11-30 | 2004-01-06 | Unigene Laboratories Inc. | Oral delivery of peptides using enzyme-cleavable membrane translocators |
US7316819B2 (en) | 2001-03-08 | 2008-01-08 | Unigene Laboratories, Inc. | Oral peptide pharmaceutical dosage form and method of production |
GB0109438D0 (en) * | 2001-04-17 | 2001-06-06 | Isis Innovation | Peptides |
US6770625B2 (en) | 2001-09-07 | 2004-08-03 | Nobex Corporation | Pharmaceutical compositions of calcitonin drug-oligomer conjugates and methods of treating diseases therewith |
ES2496102T3 (es) | 2003-03-28 | 2014-09-18 | Sigmoid Pharma Limited | Forma de dosificación oral sólida que contiene microcápsulas sin fisuras |
GB0308732D0 (en) | 2003-04-15 | 2003-05-21 | Axcess Ltd | Absorption enhancers |
CN1856321B (zh) | 2003-07-23 | 2012-10-03 | 诺瓦提斯公司 | 降钙素在骨关节炎中的用途 |
CA2539043A1 (en) | 2003-09-17 | 2005-10-13 | Shmuel A. Ben-Sasson | Compositions capable of facilitating penetration across a biological barrier |
US8114958B2 (en) | 2004-02-11 | 2012-02-14 | Amylin Pharmaceuticals, Inc. | Amylin family peptides |
US7399744B2 (en) | 2004-03-04 | 2008-07-15 | Amylin Pharmaceuticals, Inc. | Methods for affecting body composition |
CN101035547A (zh) | 2004-07-22 | 2007-09-12 | 蒂奥迈里克斯研究与指导有限公司 | 含巯基化合物作为流出泵抑制剂的用途 |
GB0422644D0 (en) | 2004-10-12 | 2004-11-10 | Novartis Ag | Organic compounds |
US8394765B2 (en) | 2004-11-01 | 2013-03-12 | Amylin Pharmaceuticals Llc | Methods of treating obesity with two different anti-obesity agents |
US7445911B2 (en) | 2004-11-24 | 2008-11-04 | Unigene Laboratories Inc. | Enzymatic reactions in the presence of keto acids |
CA2613471C (en) | 2005-06-24 | 2016-09-06 | Unigene Laboratories, Inc. | Cell lines for expressing enzyme useful in the preparation of amidated products |
AU2006288703B2 (en) | 2005-09-06 | 2011-09-22 | Oramed Pharmaceuticals, Inc. | Methods and compositions for oral administration of proteins |
US8093207B2 (en) | 2005-12-09 | 2012-01-10 | Unigene Laboratories, Inc. | Fast-acting oral peptide pharmaceutical products |
EP1834635B1 (en) | 2006-03-13 | 2011-07-06 | Advanced in Vitro Cell Technologies, S.L. | Stable nanocapsule systems for the administration of active molecules |
EP2526950A1 (en) | 2006-04-07 | 2012-11-28 | Merrion Research III Limited | Solid oral dosage form containing an enhancer |
US8377863B2 (en) | 2007-05-29 | 2013-02-19 | Unigene Laboratories Inc. | Peptide pharmaceutical for oral delivery |
US8962015B2 (en) | 2007-09-28 | 2015-02-24 | Sdg, Inc. | Orally bioavailable lipid-based constructs |
DK2389388T3 (en) * | 2009-01-22 | 2017-05-01 | Keybioscience Ag | TREATMENT FOR Obesity |
-
2012
- 2012-11-02 WO PCT/US2012/063332 patent/WO2013067357A1/en active Application Filing
- 2012-11-02 MX MX2014005265A patent/MX351092B/es active IP Right Grant
- 2012-11-02 RU RU2014122171A patent/RU2616511C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2012-11-02 CN CN201280062729.0A patent/CN103998052B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2012-11-02 JP JP2014540139A patent/JP6170933B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2012-11-02 CA CA2854175A patent/CA2854175A1/en not_active Abandoned
- 2012-11-02 BR BR112014010701-7A patent/BR112014010701A2/pt not_active IP Right Cessation
- 2012-11-02 AU AU2012332265A patent/AU2012332265B2/en not_active Ceased
- 2012-11-02 KR KR1020147014281A patent/KR102019911B1/ko active IP Right Grant
- 2012-11-02 US US13/667,578 patent/US9006172B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2016
- 2016-10-21 AU AU2016247189A patent/AU2016247189B2/en not_active Ceased
- 2016-11-04 JP JP2016216389A patent/JP6330013B2/ja not_active Expired - Fee Related
-
2018
- 2018-04-20 JP JP2018081153A patent/JP6547034B2/ja not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1105726C (zh) * | 1998-05-15 | 2003-04-16 | 中国科学院上海生物化学研究所 | 人降钙素类似物 |
WO2010103045A1 (en) * | 2009-03-12 | 2010-09-16 | Nordic Bioscience A/S | Treatment of diabetes and metabolic syndrome |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
重组降钙素研究进展;戴光荣;《医学研究生学报》;20051031;第18卷(第10期);953-955 * |
鲑降钙素类似物[Glu31, Pro32-N(C2H5)2]sCT的合成、二级结构及活性研究;杨彬;《军事医学科学院院刊》;19971231;第21卷(第4期);247-250 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
MX351092B (es) | 2017-10-02 |
JP2017061500A (ja) | 2017-03-30 |
AU2016247189A1 (en) | 2016-11-10 |
US9006172B2 (en) | 2015-04-14 |
KR102019911B1 (ko) | 2019-09-09 |
JP6330013B2 (ja) | 2018-05-23 |
US20130183385A1 (en) | 2013-07-18 |
AU2016247189B2 (en) | 2017-09-14 |
RU2616511C2 (ru) | 2017-04-17 |
JP2014532722A (ja) | 2014-12-08 |
MX2014005265A (es) | 2014-10-13 |
JP2018135360A (ja) | 2018-08-30 |
AU2012332265B2 (en) | 2016-11-10 |
KR20140093967A (ko) | 2014-07-29 |
WO2013067357A1 (en) | 2013-05-10 |
NZ625215A (en) | 2016-04-29 |
RU2014122171A (ru) | 2015-12-10 |
CN103998052A (zh) | 2014-08-20 |
BR112014010701A2 (pt) | 2020-06-23 |
JP6170933B2 (ja) | 2017-07-26 |
CA2854175A1 (en) | 2013-05-10 |
AU2012332265A1 (en) | 2014-06-05 |
JP6547034B2 (ja) | 2019-07-17 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN103998052B (zh) | 用于治疗疾病和紊乱的肽类似物 | |
US20190142903A1 (en) | Calcitonin Mimetics for Treating Diseases and Disorders | |
CN102369018B (zh) | 糖尿病和代谢综合征的治疗 | |
EP3601322A1 (en) | Calcitonin mimetics for treating diseases and disorders | |
EP3095484B1 (en) | Calcitonin mimetics for treating diseases and disorders | |
US10239929B2 (en) | Peptide analogs for treating diseases and disorders | |
WO2018211111A1 (en) | Dual amylin and calcitonin receptor agonists for treating diseases and disorders | |
WO2020039052A1 (en) | Calcitonin mimetics for treating diseases and disorders | |
NZ625215B2 (en) | Peptide analogs for treating diseases and disorders |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant | ||
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee | ||
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20160817 Termination date: 20191102 |