CN103707376A - 木杆快速培养食用菌原种的方法 - Google Patents

Abstract

本发明特别涉及一种木杆快速培养食用菌原种的方法。该方法流程为：木杆预处理—按配方比例配制培养料—木杆与培养料混合—装袋或装瓶—灭菌—接种—养菌—使用或暂时储藏。所述的木杆预处理是先制作木杆浸泡液，将清洗干净的木杆放入木杆浸泡液中浸泡；将玉米粉碎成玉米粉，按照水1000ml：玉米粉300-500g的比例混合均匀，加热煮沸熬制成糊状物得玉米糊，向玉米糊中加入相当于玉米粉质量1/5-1/3的活性炭粉，搅拌均匀得玉米活性炭糊；再将浸泡后的木杆放入玉米活性炭糊中，将木杆周围均匀裹上一层玉米活性炭糊，得预处理木杆。本发明的方法原种制作快捷，缩短制作菌种周期，菌种质量好，菌种连续培养时间延长而不老化，保存期延长。

Description

木杆快速培养食用菌原种的方法

技术领域

本发明属于食用菌技术领域，涉及食用菌原种的培养方法。 

背景技术

食用菌菌种是指从来源于自然界大量的食用菌中分离并筛选出有用菌种，再加以改良，贮存待用于生产，原意是指孢子，但在实际生产中，常将经过人工培养的纯菌丝体连同培养基质一同叫做菌种。在生产中根据菌种的来源，繁殖代数及生产目的，把菌种分为母种，原种和栽培种，又分别叫一级种，二级种和三级种。母种：将纯菌丝体或孢子在试管培养基中繁殖而成，可以繁殖原种，也适宜菌种保藏。原种：母种菌丝在固体培养基上繁殖而成，这一过程增强菌丝对培养环境的适应性，又起到扩繁的作用，原种可以直接出菇。栽培种：由原种扩繁而成，主要是为了扩繁，为生产提供足够的菌种。 

食用菌生产具有投入少、效益高、可充分利用农闲时间等优点，近几年发展较快。但在制作菌种过程中经常会遇到一些问题有时忽略一个很小的环节往往就会造成很大的损失。食用菌的菌种原种制作是食用菌栽培的前提，纯度高、生命力强的原种是食用菌栽培取得丰产优质的先决条件。食用菌原种质量的好坏不仅关系到一个种菌场的经济效益高低和信誉好坏，而且关系到广大菇农的栽培效益。随着食用菌产业的大发展，菌种的生产量不断扩大，食用菌菌种原种的质量及发菌时间已成为食用菌发展不可忽视的问题。在食用菌生产中，原种的培养普遍采用木屑加麦麸的做法，此法费工、费时，发菌慢，时间长，一般需30d左右才可使用，种植户为了赶季节、抢时间，特别需要切实可行的在短时间内即可育成原种的技术。 

现有的文献中已报道了多种食用菌原种快速育成的技术，如黑龙江省农垦 科学院生物技术中心在《现代化农业》期刊上发表了一篇《食用菌原种快速育成技术》（《现代化农业》，2002年第2期(总第271期)第016页）文章，其中介绍了一种以玉米为培养料制作食用菌原种的方法：选用新鲜、干净、无霉变的玉米粒，用清水浸泡12h（冬季最好用热水浸泡，浸泡时间稍长些），再用锅煮至无白硬芯，即熟而不烂，然后用凉水反复冲洗，洗掉粘稠液体，使其呈散粒状，摊开晾2～3h，除去表面水分，装入葡萄糖瓶（或酒瓶）中，玉米粒装至瓶高的2/3。高压灭菌，压力为127.4～1137.2kPa，灭菌50min；常压蒸煮灭菌，100℃蒸6～8h。灭菌后将料瓶温度降到30℃以下即可接菌。此食用菌原种制做技术，取材容易，制做简单，发菌时间较常规方法缩短20d左右（菇类、木耳、猴头缩短15d左右）。培养基营养充分，菌丝生长旺盛。转入栽培种后，萌发快，成活率高，用种量少。申请号为200910244881.0的中国专利报道了一种食用菌二级种（原种）培养基配方及制作方法，以陶粒为主要原材料，制作食用菌二级种（原种）培养基，培养基配方为：粒径为0.5-1cm的陶粒75-85斤，麸皮14-24斤，稻壳14-24斤，石膏1-2斤；陶粒需用陶粒浸泡液进行浸泡，陶粒浸泡液是马铃薯、葡萄糖和水按照200g:20g:1000ml的比例配制而成；使用该方法菌种制作快捷、菌种质量较好，还具有节粮、高效等优点。申请号为201210011797.6的发明专利公开了一种食用菌原种培养基的制作方法，选取小麦、石膏粉和碳酸钙作为原料，首先将小麦用2％的澄清石灰水浸泡24小时后，捞起小麦用清水冲洗干净，再放在水中煮沸，煮沸时间为15～20分钟，再加入石膏粉和碳酸钙，搅拌均匀，自然冷却，即可得到所需的培养基；所述的小麦、石膏粉和碳酸钙所用的质量比为小麦96％、石膏粉2％和碳酸钙2％；该方法实用，制作成本低，制作方法简单，便于普及推广应用，作为培养基，能提高食用菌的产量。 

上述的方法中，以木屑、棉籽壳等为培养料制作的原种，在接种使用时需要成块使用，否则菌种菌丝体断裂，菌种萌发较慢，直接影响三级种的质量。因此，还需要另辟蹊径，寻找更有利于菌种萌发并且保护菌种菌丝体在使用分种时不被破坏，达到降低制种成本提高菌种质量和产量的目的。 

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种利用木杆快速培养食用菌原种的方法，该方法降低了制种成本，缩短了菌种制作周期。 

为实现上述技术目的，本发明的技术方案为： 

木杆预处理方法，包括如下进行的步骤： 

（1）将树木或竹片制成粗0.5-0.6cm，长10-15cm的木杆，将所述木杆放入清水中，超声波清洗干净，备用； 

（2）将步骤（1）中清洗干净的木杆放入木杆浸泡液中浸泡不少于60分钟，浸泡完毕后捞起木杆沥干待用；所述木杆浸泡液是按照水1000ml：蔗糖25-40g：生石灰5-10g：磷酸二氢钾2-5g：硫酸镁1-5g的比例进行配制； 

（3）选择新鲜、干净、无霉变的玉米进行粉碎得玉米粉，将所述玉米粉与水按照水1000ml：玉米粉300-500g的比例混合均匀，加热煮沸熬制成糊状物得玉米糊，向所得玉米糊中加入相当于玉米粉质量1/5-1/3的活性炭粉，搅拌均匀得玉米活性炭糊； 

（4）将步骤（2）中沥干的木杆放入步骤（3）所得的玉米活性炭糊中，将木杆周围均匀裹上一层玉米活性炭糊，得预处理木杆。 

进一步，所述的木杆预处理方法，所述步骤（1）中，所述树木为1-2年生阔叶树木。 

进一步，所述的木杆预处理方法，所述步骤（1）中，所述树木为进入休眠期的树木。 

进一步，所述的木杆预处理方法，所述步骤（2）中，将步骤（1）中清洗干净的木杆放入木杆浸泡液中，40-60kHZ的超声波处理并加热煮沸浸泡不少于60分钟。 

进一步，所述的木杆预处理方法，所述步骤（2）中，将步骤（1）中清洗干净的木杆放入木杆浸泡液中，40-60kHZ的超声波处理并加热煮沸浸泡80分钟。 

进一步，所述的木杆预处理方法，所述步骤（2）中，所述木杆浸泡液还含有相当于蔗糖质量1/5-2/5的壳聚糖。 

进一步，所述的木杆预处理方法，所述步骤（3）中，所述玉米是连同玉米轴一起粉碎。 

进一步，所述的木杆预处理方法，所述步骤（3）中，所述玉米粉的粒径为100-200目。 

木杆快速培养食用菌原种的方法，包括如下进行的步骤： 

1）木杆预处理 

将树木或竹片制成粗0.5-0.6cm，长10-15cm的木杆，按照权利要求1-8任一项所述的方法进行处理得预处理木杆； 

2）灭菌接种 

根据选择培养的木腐菌来选择合适的培养料配方，根据配方按照常规要求配制好培养料，将步骤1）中得到的预处理木杆在所述培养料中滚动，待木杆上沾满培养料后逐一装入塑料袋或玻璃瓶中，装满后将塑料袋或玻璃瓶进行常规灭菌和接种，接种后将塑料袋或玻璃瓶放在20-25℃温度环境下避光养菌，经15-20天即可长满塑料袋或全瓶，成为原种。 

灭菌要彻底，灭菌是否彻底关系到制作菌种的成败，可以说食用菌菌种的制作的核心就是灭菌彻底；灭菌后，菌袋温度高于28℃不能接种，有的菇农仅仅靠手摸菌袋表面，感到温度不高就开始接种，当菌种接入后，菌袋中心的余热渐渐放出，使菌种受热过高而死，所以在接种时，菌袋一定要冷却彻底。 

经15-20天，菌种长满塑料袋或全瓶，可再继续培养20-30天，这样制作的菌种质量会更好，用于制作栽培种的效果更理想。 

将培养好的菌种放于4℃左右，干燥、避光处保存，不可使其处在有较大变温的环境中，一般制好的菌种最好在15d内使用，保存时间不要超过30d。 

本发明的方法制作的菌种，因为连续培养时间可达45天左右而菌种不老化，相当于比普通方法如利用木屑制作的菌种保存期要长20-30天。 

本发明的有益效果：本发明的主要优点有：（1）木杆来源广泛，数量巨大， 目前大部分都废弃或仅作柴火，造成极大浪费，将其用于培养食用菌原种，可降低原种的制作成本。（2）本发明将木杆进行了预处理，预处理后的木杆用于培养食用菌原种，培养基通透性好，在20-25℃下培养，菌丝生长迅速，15-20天左右便长满全培养瓶，培养时间比常规原种缩短10-15天，从而缩短了菌龄，十分适合于赶制食用菌菌种。（3）本发明的方法制作的菌种，连续培养时间可达45天左右而不老化，原种培养时间延长，相当于比普通方法如利用木屑制作的菌种保存期要长20-30天。 

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面对本发明的优选实施例进行详细的描述。 

木腐菌具有分解木材中木质素、纤维素的能力，能将其分解转化为葡萄糖、氨基酸等，作为菌丝细胞直接吸收和利用的营养物质。 

实施例1 

1.木杆预处理 

（1）选取进入休眠期的1-2年生、粗约10毫米的杨树枝条，将枝条去表皮，制成粗0.5-0.6cm，长10-15cm的木杆，将所述木杆放入清水中，超声波清洗干净，备用； 

（2）将步骤（1）中清洗干净的木杆放入木杆浸泡液中浸泡120分钟，浸泡完毕后捞起木杆沥干待用；所述木杆浸泡液是按照水1000ml：蔗糖30g：生石灰6g：磷酸二氢钾3g：硫酸镁3g的比例进行配制； 

（3）选择新鲜、干净、无霉变的玉米进行粉碎得玉米粉，将所述玉米粉与水按照水1000ml：玉米粉300g的比例混合均匀，加热煮沸熬制成糊状物得玉米糊，向所得玉米糊中加入相当于玉米粉质量1/3的活性炭粉，搅拌均匀得玉米活性炭糊； 

（4）将步骤（2）中沥干的木杆放入步骤（3）所得的玉米活性炭糊中，将木杆周围均匀裹上一层玉米活性炭糊，得预处理木杆。 

2.灭菌接种 

本实施例选择的木腐菌为香菇菌种；培养料配方为：木屑78%、麦麸20%、蔗糖1%、石膏1%，根据配方按照常规要求配制好培养料，将步骤1）中得到的预处理木杆在所述培养料中滚动，待木杆上沾满培养料后逐一装入玻璃瓶中，装满后将玻璃瓶瓶口用干净牛皮纸包好，进行常压灭菌8小时，灭菌后待玻璃瓶温度降至28℃以下，打开牛皮纸进行常规接种，接种后玻璃瓶瓶口仍然包上牛皮纸，将玻璃瓶放在20-25℃温度环境下避光养菌，经20天即长满全瓶，成为原种。此时的原种即可用于栽培种的制作，若在菌种长满全瓶后，再继续培养20-30天，这样制作的菌种质量会更好，用于制作栽培种的效果更理想。将培养好的菌种放于4℃左右，干燥、避光处保存，不可使其处在有较大变温的环境中，一般制好的菌种最好在15d内使用，保存时间不要超过30d；而用本发明的方法制作的菌种，因为连续培养时间可达45天左右，相当于比普通方法如利用木屑制作的菌种保存期要长20-30天。 

实施例2 

1.木杆预处理 

（1）选取1-2年生、粗约10毫米的柳树枝条，将枝条去表皮，制成粗0.5-0.6cm，长10-15cm的木杆，将所述木杆放入清水中，超声波清洗干净，备用； 

（2）将步骤（1）中清洗干净的木杆放入木杆浸泡液中，40-60kHZ的超声波处理并加热煮沸浸泡80分钟，浸泡完毕后捞起木杆沥干待用；所述木杆浸泡液是按照水1000ml：蔗糖35g：生石灰8g：磷酸二氢钾4g：硫酸镁4g的比例进行配制； 

（3）选择新鲜、干净、无霉变的玉米进行粉碎得玉米粉，将所述玉米粉与水按照水1000ml：玉米粉450g的比例混合均匀，加热煮沸熬制成糊状物得玉米糊，向所得玉米糊中加入相当于玉米粉质量1/4的活性炭粉，搅拌均匀得玉米活性炭糊； 

（4）将步骤（2）中沥干的木杆放入步骤（3）所得的玉米活性炭糊中，将 木杆周围均匀裹上一层玉米活性炭糊，得预处理木杆。 

2.灭菌接种 

本实施例选择的木腐菌为黑木耳菌种；培养料配方为：麦麸78%、米糠20%、蔗糖1%、石膏1%，根据配方按照常规要求配制好培养料，将步骤1）中得到的预处理木杆在所述培养料中滚动，待木杆上沾满培养料后逐一装入玻璃瓶中，装满后将玻璃瓶瓶口用干净牛皮纸包好，进行高压灭菌2小时，压力为130kPa，灭菌后待玻璃瓶温度降至28℃以下，打开牛皮纸进行常规接种，接种后玻璃瓶瓶口仍然包上牛皮纸，将玻璃瓶放在20-25℃温度环境下避光养菌，经20天即长满全瓶，成为原种。此时的原种即可用于栽培种的制作，若在菌种长满全瓶后，再继续培养20-30天，这样制作的菌种质量会更好，用于制作栽培种的效果更理想。将培养好的菌种放于4℃左右，干燥、避光处保存，不可使其处在有较大变温的环境中，一般制好的菌种最好在15d内使用，保存时间不要超过30d；而用本发明的方法制作的菌种，因为连续培养时间可达45天左右，相当于比普通方法如利用木屑制作的菌种保存期要长20-30天。 

实施例3 

1.木杆预处理 

（1）选取1-2年生、粗约10毫米的柳树枝条，将枝条去表皮，制成粗0.5-0.6cm，长10-15cm的木杆，将所述木杆放入清水中，超声波清洗干净，备用； 

（2）将步骤（1）中清洗干净的木杆放入木杆浸泡液中，40-60kHZ的超声波处理并加热煮沸浸泡80分钟，浸泡完毕后捞起木杆沥干待用；所述木杆浸泡液是按照水1000ml：蔗糖35g：生石灰8g：磷酸二氢钾4g：硫酸镁4g的比例进行配制；木杆浸泡液中还加入相当于蔗糖质量2/5的壳聚糖。 

（3）选择新鲜、干净、无霉变的玉米，所述的玉米是包含玉米轴的，将玉米粉碎至粒径为100目，得玉米粉，将所述玉米粉与水按照水1000ml：玉米粉450g的比例混合均匀，加热煮沸熬制成糊状物得玉米糊，向所得玉米糊中加入相当于玉米粉质量1/4的活性炭粉，搅拌均匀得玉米活性炭糊； 

（4）将步骤（2）中沥干的木杆放入步骤（3）所得的玉米活性炭糊中，将木杆周围均匀裹上一层玉米活性炭糊，得预处理木杆。 

2.灭菌接种 

本实施例选择的木腐菌为黑木耳菌种；培养料配方为：麦麸78%、米糠20%、蔗糖1%、石膏1%，根据配方按照常规要求配制好培养料，将步骤1）中得到的预处理木杆在所述培养料中滚动，待木杆上沾满培养料后逐一装入玻璃瓶中，装满后将玻璃瓶瓶口用干净牛皮纸包好，进行高压灭菌2小时，压力为130kPa，灭菌后待玻璃瓶温度降至28℃以下，打开牛皮纸进行常规接种，接种后玻璃瓶瓶口仍然包上牛皮纸，将玻璃瓶放在20-25℃温度环境下避光养菌，经15天即长满全瓶，成为原种。此时的原种即可用于栽培种的制作，若在菌种长满全瓶后，再继续培养20-30天，这样制作的菌种质量会更好，用于制作栽培种的效果更理想。将培养好的菌种放于4℃左右，干燥、避光处保存，不可使其处在有较大变温的环境中，一般制好的菌种最好在15天内使用，保存时间不要超过30天；而用本发明的方法制作的菌种，因为连续培养时间可达45天左右，相当于比普通方法如利用木屑制作的菌种保存期要长20-30天。 

用木杆培养食用菌原种，培养基的通透性好，在20-25℃下培养，菌丝生长迅速，15-20天左右便长满全培养瓶，培养时间比常规原种缩短10-15天，从而缩短了菌龄，十分适合于赶制木腐菌菌种。 

因为木杆表面积大，菌丝除了生长在枝条表面外，还可长入木杆内，携带的菌丝量大，在转接栽培种时无疑就是增大了接种量。在转接木屑、谷壳类栽培种时，只需用无菌镊子夹起一根木杆***培养基中间即可，接种操作方便简单，有利于减轻污染，增加接种成功率。接种后，菌种从上、中、下多点萌发，菌丝从里向外蔓延，满瓶满袋时间一般可提早10-15天。此外，一瓶原种可接110-120袋(瓶)的栽培种，接种袋(瓶)数多，节约原种，较为经济。 

最后说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的宗旨和范 围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。 

Claims (9)

1.木杆预处理方法，其特征在于，包括如下进行的步骤： 

（1）将树木或竹片制成粗0.5-0.6cm，长10-15cm的木杆，将所述木杆放入清水中，超声波清洗干净，备用； 

（2）将步骤（1）中清洗干净的木杆放入木杆浸泡液中浸泡不少于60分钟，浸泡完毕后捞起木杆沥干待用；所述木杆浸泡液是按照水1000ml：蔗糖25-40g：生石灰5-10g：磷酸二氢钾2-5g：硫酸镁1-5g的比例进行配制； 

（3）选择新鲜、干净、无霉变的玉米进行粉碎得玉米粉，将所述玉米粉与水按照水1000ml：玉米粉300-500g的比例混合均匀，加热煮沸熬制成糊状物得玉米糊，向所得玉米糊中加入相当于玉米粉质量1/5-1/3的活性炭粉，搅拌均匀得玉米活性炭糊； 

（4）将步骤（2）中沥干的木杆放入步骤（3）所得的玉米活性炭糊中，将木杆周围均匀裹上一层玉米活性炭糊，得预处理木杆。 

2.根据权利要求1所述的木杆预处理方法，其特征在于，所述步骤（1）中，所述树木为1-2年生阔叶树木。 

3.根据权利要求2所述的木杆预处理方法，其特征在于，所述步骤（1）中，所述树木为进入休眠期的树木。 

4.根据权利要求1所述的木杆预处理方法，其特征在于，所述步骤（2）中，将步骤（1）中清洗干净的木杆放入木杆浸泡液中，40-60kHZ的超声波处理并加热煮沸浸泡不少于60分钟。 

5.根据权利要求4所述的木杆预处理方法，其特征在于，所述步骤（2）中，将步骤（1）中清洗干净的木杆放入木杆浸泡液中，40-60kHZ的超声波处理并加热煮沸浸泡80分钟。 

6.根据权利要求1所述的木杆预处理方法，其特征在于，所述步骤（2）中，所述木杆浸泡液还含有相当于蔗糖质量1/5-2/5的壳聚糖。 

7.根据权利要求1所述的木杆预处理方法，其特征在于，所述步骤（3）中， 所述玉米是连同玉米轴一起粉碎。 

8.根据权利要求1所述的木杆预处理方法，其特征在于，所述步骤（3）中，所述玉米粉的粒径为100-200目。 

9.木杆快速培养食用菌原种的方法，其特征在于，包括如下进行的步骤： 

1）木杆预处理 

将树木或竹片制成粗0.5-0.6cm，长10-15cm的木杆，按照权利要求1-8任一项所述的方法进行处理得预处理木杆； 

2）灭菌接种 

根据选择培养的木腐菌来选择合适的培养料配方，然后根据配方按照常规要求配制好培养料，将步骤1）中得到的预处理木杆在所述培养料中滚动，待木杆上沾满培养料后逐一装入塑料袋或玻璃瓶中，装满后将塑料袋或玻璃瓶进行常规灭菌和接种，接种后将塑料袋或玻璃瓶放在20-25℃温度环境下避光养菌，经15-20天即可长满塑料袋或全瓶，成为原种。