CN103524535A

CN103524535A - 具有刺猬通路拮抗剂活性的胺基噻唑-吡啶杂环化合物

Info

Publication number: CN103524535A
Application number: CN201310485380.8A
Authority: CN
Inventors: 张小虎
Original assignee: SUZHOU YUNXUAN PHARMACEUTICAL Co Ltd
Current assignee: Suzhou pharmaceutical Limited by Share Ltd
Priority date: 2013-10-16
Filing date: 2013-10-16
Publication date: 2014-01-22
Anticipated expiration: 2033-10-16
Also published as: CN103524535B

Abstract

本发明揭示了一种具有刺猬通路拮抗剂活性的胺基噻唑-吡啶杂环化合物，包括该化合物及其药学上可接受的盐、各种同位素、各种异构体和各种晶型结构，具有通式I所示的结构：

本发明的一种具有刺猬通路拮抗剂活性的胺基噻唑-吡啶杂环化合物，能够通过刺猬通路拮抗阻断肿瘤细胞转移再生，具有明显的抗肿瘤作用。

Description

具有刺猬通路拮抗剂活性的胺基噻唑-吡啶杂环化合物

技术领域

本发明涉及医药合成技术领域，尤其涉及一种具有刺猬通路拮抗剂活性的胺基噻唑-吡啶杂环化合物。

背景技术

恶性肿瘤是危害人类健康的最主要疾病之一，全球每年恶性肿瘤新发病例约1090万，而每年因恶性肿瘤而死亡的患者约670万。抗肿瘤药物研发近些年经历了巨大变化，以前临床治疗上常用的抗肿瘤药物主要是细胞毒类药物，这类抗癌药具有难以避免的选择性差、毒副作用强、易产生耐药等缺点。近年来随着生命科学研究的飞速进展，恶性肿瘤细胞内的信号转导、细胞周期的调控、细胞凋亡的诱导、血管生成以及细胞与胞外基质的相互作用等各种基本过程正逐步被阐明。以一些与肿瘤细胞分化增殖相关的细胞信号转导通路的关键酶作为药物筛选靶点，发现选择性作用于特定靶点，同时具备高效、低毒性质的新型先导化合物已成为当今抗肿瘤药物研究开发的重要方向。曲妥珠单抗（trastuzumab）、伊马替尼（imatinib）、吉非替尼（gefitinib）以及埃罗替尼（erlotinib）等靶向药物的成功上市就是典型的例子。

转移与再生是恶性肿瘤的特点，也是治疗恶性肿瘤的难题。即使是新一代的靶向药物也对肿瘤的转移与再生疗效甚微。基于此，近年来Hedgehog(Hh)信号通路-刺猬通路的研究受到了科学界越来越多的重视，这不仅是因为Hh信号通路异常活化在许多肿瘤包括基底细胞癌、脑肿瘤、乳腺癌、***癌和一些消化***恶性肿瘤的发生发展过程都起了举足轻重作用，更重要的是，Hh信号通路是胚胎发育通路，对调控肿瘤干细胞，因而控制肿瘤转移与再生有重要作用。

Hedgehog信号通路是一个高度保守的细胞间信号转导***，1980年在果蝇中发现，由于果蝇的该通路基因突变可导致幼虫体表现出许多形似刺猬的刺突,故命名为刺猬通路Hedgehog(Hh)。Hh信号通路由Hh配体、两个跨膜蛋白受体patched membranereceptor(PTCH)和smoothened transmembrane protein(SMO)及下游转录因子Gli蛋白等组成。PTCH和SMO是位于靶细胞膜上的两种跨膜蛋白，其中PTCH是由抑癌基因PTCH编码的12次跨膜蛋白，是一种细胞表面受体，具有隔离和转导Hh的双重作用。SMO是一个7次跨膜蛋白,结构上与G蛋白偶联受体家族高度相似，具有转导Hh信号的作用。PTCH和SMO在Hh信号传递过程中起到受体的作用，其中PTCH为Hh的受体。当不存在Hh时，PTCH阻止SMO转位到细胞膜，从而抑制SMO的活性，进而抑制下游基因的转录表达；当存在Hh信号时，Hh与PTCH结合，诱导SMO羧基端的多个丝/苏氨酸残基发生磷酸化，导致SMO在细胞表面聚集并激活，激活的SMO与驱动蛋白样分子Costal2(Cos2)及丝/苏氨酸激酶fused(Fus)、Suppressor offused(Sufu)形成复合物并从微管上解离出来，以全长的形式发挥转录激活作用，最终引起锌指样转录因子Gli活化，而后者进入细胞核内引起靶基因的转录。因此，在Hh信号通路中，Hh是该信号通路的起点，而Gli作为转录因子是该信号通路的终点，Hh与SMO作为激动因子，PTCH作为抑制因子，调控着信号通路的活性。

跨膜蛋白受体SMO作为Hh信号通路的关键成员，是Hh信号通路中的信息转换器，它能够把细胞外的Hh信号转换成细胞内的Gli1信号，从而启动细胞核内基因的转录，对Hh信号通路具有激活作用。绝大多数与Hh细胞通路激活相关的肿瘤细胞的发生、发展过程中均存在着SMO的功能性突变。小分子SMO蛋白拮抗剂通过对抗SMO而特异性阻断Hh信号通路，而Hh信号通路在正常成体处于失活状态，所以拮抗剂对机体的其他部位不会产生副作用，这是肿瘤的靶向性治疗可行性的理论基础。因此，SMO蛋白已经成为当前抗肿瘤药物研发中最令人关注的靶点之一，靶向SMO蛋白的小分子拮抗剂的合成也成为国际上各大制药公司的研发热点。

现今至少有5个靶向SMO蛋白的小分子拮抗剂在进行临床测试，美国Genentech公司和Curis公司共同研发的小分子SMO拮抗剂GDC-0449，于2012年1月被美国食品药品监督管理局FDA批准用于晚期基底细胞癌病人的治疗。这证明小分子SMO拮抗剂作为抗肿瘤新药的研发有着良好的应用价值和市场前景。

临床测试中的小分子SMO拮抗剂代表包括以下几种：

尽管vismodegib和其他临床化合物有较好的药效，它们也都有各自的问题。比如vismodegib理化性质较差，溶解度低，有较强的副作用并且已产生耐药性等等。因此，就需要提出一种全新的刺猬通路拮抗剂，回避掉现有技术中药物出现的耐药性和副作用，更好地阻断肿瘤细胞转移再生，来***。

发明内容

鉴于上述现有技术存在的缺陷，本发明的目的是提出一种具有刺猬通路拮抗剂活性的胺基噻唑-吡啶杂环化合物，能够阻断肿瘤细胞转移再生，***疾病。

本发明的目的将通过以下技术方案得以实现：

一种具有刺猬通路拮抗剂活性的胺基噻唑-吡啶杂环化合物，包括该化合物及其药学上可接受的盐、各种同位素、各种异构体和各种晶型结构，具有通式I所示的结构：

其中，A为氮原子、氧原子、硫原子或C-R9；

R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R10、R11分别独立选自氢原子，卤素，烷代卤素，氰基，烷代氰基，三氟甲基，烷基，烯基，炔基，氨基，羟基，巯基，烷氧基，脂基，酰胺基，脲基，氧代脲基，硫脲基，砜基，亚砜基，磺胺基，叠氮基，烷代烯基，烷代炔基，烷代氨基，烷代羟基，烷代脂基，烷代砜基，烷代亚砜基，烷代磺胺基，烷代叠氮基，环状烷基，环状烯基，3-12元杂环，芳香环或5-12元杂芳环，或者R10、R11为羰基，硫羰基，相邻R基团或同碳R基团所连接到一起形成的3-7元碳环或杂环；

R9选自氢原子，卤素，烷代卤素，氰基，烷代氰基，三氟甲基，烷基，烯基，炔基，氨基，羟基，巯基，烷氧基，脂基，酰胺基，脲基，氧代脲基，硫脲基，砜基，亚砜基，磺胺基，叠氮基，烷代烯基，烷代炔基，烷代氨基，烷代羟基，烷代脂基，烷代砜基，烷代亚砜基，烷代磺胺基，烷代叠氮基，环状烷基，环状烯基，3-12元杂环，芳香环或5-12元杂芳环；

n为0、1、2、3、4、5或6。

优选的，上述的具有刺猬通路拮抗剂活性的胺基噻唑-吡啶杂环化合物，其中：所述R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11分别独立选自：氢原子被卤素、氰基、氨基、羟基、巯基、烷氧基、酯基、砜基、亚砜基、磺胺基或叠氮基取代的氢原子、烷基、烯基、炔基、芳香环基或杂环基，以及环状烷基、环状烯基、3-12元杂环或5-12元芳香杂环；所述氢原子被卤素取代的烷基优选为三氟甲基。

优选的，上述的具有刺猬通路拮抗剂活性的胺基噻唑-吡啶杂环化合物，其中：烷基和烷代基为1-10个碳原子组成的直链、支链、环状、双环状或螺环状的碳氢烷基；烯基和烯代基为1-10个碳原子组成的含有至少一个碳碳双键的直链、支链、环状、双环状或螺环状的碳氢化合物；炔基和炔代基为1-10个碳原子组成的含有至少一个碳碳三键的直链、支链、环状、双环状或螺环状的碳氢化合物；卤素为氟、氯、溴或碘；杂原子为氮、氧、硫或磷，及其各种氧化态或氮的季铵盐；杂环为含有包括氮、氧或硫中一个或多个原子的组合的非芳香性的单环、双环、三环或螺环，及其各种氧化态形式的环状取代基；芳香环为苯环、萘环及它们的取代衍生物，或者为饱和环与芳香环的衍生环状取代基；芳香杂环为含有包括氮、氧或硫中一个或多个原子的组合的环，及其各种氧化态形式的环状取代基，或者为饱和环与芳香杂环的衍生环状取代基。

优选的，上述的具有刺猬通路拮抗剂活性的胺基噻唑-吡啶杂环化合物，其中：所述同位素包括2H，3H，11C，13C，14C，15N，17O，18O，18F，32P，35S或36Cl，所述异构体包括立体异构体，顺反异构体或互变异构体。

优选的，上述的具有刺猬通路拮抗剂活性的胺基噻唑-吡啶杂环化合物，其中：所述式（Ⅰ）选自：

其中，R9选自氢原子，卤素，烷代卤素，氰基，烷代氰基，三氟甲基，烷基，烯基，炔基，氨基，羟基，巯基，烷氧基，脂基，酰胺基，脲基，氧代脲基，硫脲基，砜基，亚砜基，磺胺基，叠氮基，烷代烯基，烷代炔基，烷代氨基，烷代羟基，烷代脂基，烷代砜基，烷代亚砜基，烷代磺胺基，烷代叠氮基，环状烷基，环状烯基，3-12元杂环，芳香环或5-12元杂芳环。

优选的，上述的具有刺猬通路拮抗剂活性的胺基噻唑-吡啶杂环化合物，其包括下列化合物，及其药学上可接受的盐、各种同位素、各种异构体和各种晶型结构：

其中，R9选自下列基团中的任意一种：

本发明还提出一种抗肿瘤的药物组合物，包含具有式（Ⅰ）结构的具有刺猬通路拮抗剂活性的胺基噻唑-吡啶杂环化合物、其药学上可接受的盐、各种同位素、各种异构体和各种晶型结构中的至少两种化合物组成的组合。

本发明还提出一种抗肿瘤药物的联合应用组合物，该联合应用组合物是具有刺猬通路拮抗剂活性的胺基噻唑-吡啶杂环化合物及其药物组合物分别与顺铂、紫杉醇、喜树碱、曲妥珠单抗、格列卫、伊马替尼、吉非替尼、埃罗替尼、拉帕替尼中的一种或几种的组合进行联合应用得到的组合物。

本发明还提出一种具有刺猬通路拮抗剂活性的胺基噻唑-吡啶杂环化合物、抗肿瘤的药物组合物或抗肿瘤药物的联合应用组合物在制备***的药物中的应用。

本发明的突出效果为：本发明提供了一种新的具有刺猬通路拮抗剂活性的胺基噻唑-吡啶杂环化合物，能够阻断肿瘤细胞转移再生，从而***疾病。

以下便结合实施例附图，对本发明的具体实施方式作进一步的详述，以使本发明技术方案更易于理解、掌握。

附图说明

图1是化合物C3的检测结果曲线图；

图2是化合物C4的检测结果曲线图；

图3是化合物C5的检测结果曲线图；

图4是化合物C7的检测结果曲线图；

图5是化合物C9的检测结果曲线图；

图6是化合物C10的检测结果曲线图；

图7是化合物C11的检测结果曲线图；

图8是化合物C21的检测结果曲线图；

图9是化合物C22的检测结果曲线图。

具体实施方式

下面通过具体实施例对本发明的方法进行说明，但本发明并不局限于此。下述实施例中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法；所述试剂和材料，如无特殊说明，均可从商业途径获得。所用溶剂和药品均为分析纯或化学纯；溶剂在使用前均经过重新蒸馏；无水溶剂均按照标准方法或文献方法进行处理。柱层析硅胶(100-200目)和薄层层析硅胶(GF254)为青岛海洋化工厂和烟台化工厂产品；如未特别说明，均采用石油醚(60-90℃)/乙酸乙酯(v/v)作为洗脱剂；显色剂用碘或磷钼酸的乙醇溶液；所有萃取溶剂未经说明均用无水Na₂SO₄干燥。¹H NMR用美国Varian unity INOVA400NB和Vnmrs高分辨核磁共振仪记录，TMS为内标。LC-MS用美国Agilent公司1100型高效液相色谱-离子阱质谱联用仪(LC-MSDTrap)记录，二极管阵列检测器(DAD)，检测波长214nm和254nm，离子阱质谱(ESI源)。HPLC柱为Agela Durashell C18(4.6×50mm，3.5μm)；流动相为0.1%TFA水溶液：乙腈(6分钟内从5∶95到95∶5)；流速为1.2ml/min。

实施例1

本实施例提供一种胺基噻唑-吡啶杂环化合物C1，其是由如下方法合成的：

1)中间体C1-1的合成：

将N-叔丁氧羰基哌啶酮（20g,100.5mmol）、氰胺（8.7g,200.9mmol）、升华硫（6.4g,200mmol）加入到100mL的吡啶中，在130℃下反应90分钟，冷却至室温析出晶体，过滤，所得固体用***（100mL）洗两次，得一浅黄色固体（19g,74.2%）。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ6.83(s,2H),4.29(s,2H),3.56(s,2H),2.43(s,2H),1.41(s,9H)。

2)中间体C1-2的合成：

将C1-1（200mg,0.78mmol）加入到3M氯化氢的乙酸乙酯溶液（3mL），常温搅拌3小时，减压旋去溶剂，浓缩物加入到饱和碳酸氢钠水溶液（5mL）和二氯甲烷（20mL）中，有机相用无水硫酸钠干燥过滤﹑浓缩后得一白色固体（155mg,87%）。

3)产物C1的合成：

C1-2（55mg,0.35mmol）、氟化铯（152mg,1mmol）和A1-9（180mg,0.7mmol）分别在搅拌条件下溶于二甲亚砜（1mL）中，加热至120℃，反应36小时。冷却至室温，加入乙酸乙酯（10mL）和水（5mL），有机相用饱和食盐水（5mL）洗，无水硫酸钠干燥过滤后，旋去溶剂，溶质经柱层析精制（流动相为甲醇:二氯甲烷=1:100）得一黄色油状物C1(50mg,37.8%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.35(s,1H),8.21(s,1H),7.44(s,1H),6.65(s,1H),4.56(s,2H),3.86(s,2H),2.75(s,2H),2.38(s,3H),2.17(s,3H)；ESI-MS(m/z):371.8[M+1]⁺。经过图谱解析所得的物质为

实施例2

本实施例提供一种胺基噻唑-吡啶杂环化合物C2，其是由如下方法合成的：

按照实施例1中的方法合成得到中间体C1，再制备产物C2。

C1(40mg,0.11mmol)、乙酸（9mg,0.14mmol）、N,N`-二异丙基乙胺（28mg,0.22mmol）溶于N,N`-二甲基甲酰胺（1.5mL）。HATU（53mg,0.14mmol）加至溶液中，室温下搅拌24小时。反应液加入乙酸乙酯（40mL）中，用饱和食盐水（15mL×3）洗涤。有机相在无水硫酸钠干燥后过滤，滤液减压浓缩，经硅胶柱（二氯甲烷:甲醇=70:1）纯化得到黄色固体C2(20mg,45%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.55(s,1H),8.35(s,1H),8.22(s,1H),7.43(s,1H),6.66(s,1H),4.68(s,2H),3.96(t,J=5.6Hz,2H),2.83(t,J=5.4Hz,2H),2.38(s,3H),2.23(s,3H),2.17(s,3H)；ESI-MS(m/z):413.8[M+1]⁺。经过图谱解析所得的物质为

实施例3

本实施例提供一种胺基噻唑-吡啶杂环化合物C3，其是由如下方法合成的：

按照实施例1中的方法合成得到中间体C1，再制备产物C3。

C1(35mg,0.094mmol)、异丁酸（11mg,0.125mmol）、N,N`-二异丙基乙胺（20mg,0.155mmol）溶于N,N`-二甲基甲酰胺（1.5mL）。HATU（49mg,0.129mmol）加至溶液中，室温下搅拌24小时。反应液加入乙酸乙酯（40mL）中，用饱和食盐水（15mL×3）洗涤。有机相在无水硫酸钠干燥后过滤，滤液减压浓缩，经硅胶柱（二氯甲烷:甲醇=80:1到50:1）纯化得到白色固体C3（13.3mg,32%）。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.89(s,1H),8.36(s,1H),8.22(s,1H),7.43(s,1H),6.67(s,1H),4.67(s,2H),3.96(t,J=5.6Hz,2H),2.82(t,J=5.4Hz,2H),2.59(m,1H),2.38(s,3H),2.17(s,3H),1.24(d,J=6.8Hz,6H)；ESI-MS(m/z):441.8[M+1]⁺。经过图谱解析所得的物质为

实施例4

本实施例提供一种胺基噻唑-吡啶杂环化合物C4，其是由如下方法合成的：

按照实施例1中的方法合成得到中间体C1，再制备产物C4。

C1(35mg,0.094mmol)、丙酸（9mg,0.122mmol）、N,N`-二异丙基乙胺（20mg,0.155mmol）溶于N,N`-二甲基甲酰胺（1.5mL）。HATU（49mg,0.129mmol）加至溶液中，室温下搅拌24小时。反应液加入乙酸乙酯（40mL）中，用饱和食盐水（15mL×3）洗涤。有机相在无水硫酸钠干燥后过滤，滤液减压浓缩，经硅胶柱（二氯甲烷:甲醇=80:1到50:1）纯化得到白色固体C4(9.6mg,23.8%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ10.11(s,1H),8.36(s,1H),8.23(s,1H),7.43(s,1H),6.67(s,1H),4.67(s,2H),3.96(t,J=5.6Hz,2H),2.82(t,J=5.0Hz,2H),2.45(q,J=7.5Hz,2H),2.38(s,3H),2.17(s,3H),1.24(t,J=7.4Hz,3H)；ESI-MS(m/z):427.8[M+1]⁺。经过图谱解析所得的物质为

实施例5

本实施例提供一种胺基噻唑-吡啶杂环化合物C5，其是由如下方法合成的：

按照实施例1中的方法合成得到中间体C1，再制备产物C5。

C1(35mg，0.094mmol)、环丙基甲酸（11mg,0.128mmol）、N,N`-二异丙基乙胺（20mg,0.155mmol）溶于N,N`-二甲基甲酰胺（1.5mL）。HATU（49mg,0.129mmol）加至溶液中，室温下搅拌24小时。反应液加入乙酸乙酯（40mL）中，用饱和食盐水（15mL×3）洗涤。有机相在无水硫酸钠干燥后过滤，滤液减压浓缩，经硅胶柱（二氯甲烷:甲醇=80:1到50:1）纯化得到白色固体C5（7.1mg,17.1%）。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ10.25(s,1H),8.36(s,1H),8.23(s,1H),7.43(s,1H),6.67(s,1H),4.66(s,2H),3.96(t,J=5.6Hz,2H),2.83(t,J=5.2Hz,2H),2.38(s,3H),2.17(s,3H),1.60(m,1H),1.19-1.16(m,2H),0.98-0.94(m,2H)；ESI-MS(m/z):439.7[M+1]⁺。经过图谱解析所得的物质为

实施例6

本实施例提供一种胺基噻唑-吡啶杂环化合物C6，其是由如下方法合成的：

按照实施例1中的方法合成得到中间体C1，再制备产物C6。

C1(35mg,0.094mmol)、2-甲氧基乙酸（11mg,0.122mmol）、N,N`-二异丙基乙胺（20mg,0.155mmol）溶于N,N`-二甲基甲酰胺（1.5mL）。HATU（49mg,0.129mmol）加至溶液中，室温下搅拌24小时。反应液加入乙酸乙酯（40mL）中，用饱和食盐水（15mL×3）洗涤。有机相在无水硫酸钠干燥后过滤，滤液减压浓缩，经硅胶柱（二氯甲烷:甲醇=80:1到50:1）纯化得到黄色油状物C6(24mg,50%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.65(s,1H),8.35(s,1H),8.22(s,1H),7.43(s,1H),6.67(s,1H),4.71(s,2H),4.11(s,2H),3.96(s,2H),3.49(s,3H),2.85(s,2H),2.37(s,3H),2.16(s,3H)；ESI-MS(m/z):443.8[M+1]⁺。经过图谱解析所得的物质为

实施例7

本实施例提供一种胺基噻唑-吡啶杂环化合物C7，其是由如下方法合成的：

按照实施例1中的方法合成得到中间体C1，再制备产物C7。

C1(35mg,0.094mmol)、N,N`-二异丙基乙胺（20mg,0.155mmol）溶于二氯甲烷（3mL）。0℃下慢慢滴加2,2-二甲基丙酰氯（14mg，0.116mmol）的二氯甲烷（1mL）溶液，并保持0℃反应2小时，减压浓缩，经硅胶柱（二氯甲烷:甲醇=80:1到50:1）纯化得到黄色油状物C7（22.8mg，53%）。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.55(s,1H),8.36(s,1H),8.23(s,1H),7.43(s,1H),6.67(s,1H),4.69(s,2H),3.97(t,J=5.6Hz,2H),2.83(t,J=5.6Hz,2H),2.38(s,3H),2.17(s,3H),1.32(s,9H)；ESI-MS(m/z):455.8[M+1]⁺。经过图谱解析所得的物质为

实施例8

本实施例提供一种胺基噻唑-吡啶杂环化合物C8，其是由如下方法合成的：

1）中间体C8-1的合成：

0℃下将亚硝酸异戊酯（8.8mL,62.8mmol）与溴化铜（10.7g,48mmol）加入到N,N`-二甲基甲酰胺（100mL），C1-1(10g,39.2mmol)加到溶液中,40℃下搅拌30分钟。减压浓缩加入水（50mL），用二氯甲烷（100mL×2）萃取，有机相合并用饱和食盐水洗（30mL×2），无水硫酸钠干燥过滤后，旋去溶剂，溶质经柱层析精制（二氯甲烷）得黄色固体C8-1(5.3g,42.4%)。

2）中间体C8-2的合成：

C8-1（200mg,0.629mmol）、吗啉（231mg,2.656mmol）、N,N`-二异丙基乙胺（428mg,3.32mmol）溶于二甲亚砜（2mL），130℃下搅拌6小时。冷却至室温，反应液加入乙酸乙酯（40mL）中，用饱和食盐水（15mL×3）洗涤，有机相在无水硫酸钠干燥后过滤，滤液减压浓缩，经硅胶柱（石油醚:乙酸乙酯=4:1）纯化得到白色固体C8-2(130mg,63.7%)。

3）中间体C8-3的合成：

将C8-2(130mg,0.4mmol)加入到3M的氯化氢乙酸乙酯溶液（3mL），常温搅拌3小时，减压旋去溶剂，浓缩物加入到饱和碳酸氢钠水溶液（5mL）和二氯甲烷（20mL）中，有机相用无水硫酸钠干燥过滤﹑浓缩后得一白色固体C8-3(50mg,55.5%)。

4）产物C8的合成：

C8-3（50mg,0.22mmol）、氟化铯（100mg,0.66mmol）和A1-9（111mg,0.44mmol）分别在搅拌条件下溶于二甲亚砜（1mL）中，加热至120℃，反应36小时。冷却至室温，加入乙酸乙酯（10mL）和水（5mL），有机相用饱和食盐水（5mL）洗，无水硫酸钠干燥过滤后，旋去溶剂，溶质经柱层析精制（流动相为甲醇:二氯甲烷=1:70）得一白色固体C8(33mg,33.6%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.38(s,1H),8.24(s,1H),7.45(s,1H),6.68(s,1H),4.63(s,2H),3.93(t,J=5.7Hz,2H),3.82(t,J=4.8Hz,4H),3.44(t,J=4.8Hz,4H),2.80(t,J=5.4Hz,2H),2.40(s,3H),2.19(s,3H)；ESI-MS(m/z):441.8[M+1]⁺。经过图谱解析所得的物质为

实施例9

本实施例提供一种胺基噻唑-吡啶杂环化合物C9，其是由如下方法合成的：

1）中间体C9-1的合成：

C8-1（400mg,1.25mmol）、2,6-二甲基哌嗪（428mg,3.75mmol）、N,N`-二异丙基乙胺（650mg,5.04mmol）溶于二甲亚砜（2mL），130℃下搅拌6小时。冷却至室温，反应液加入乙酸乙酯（60mL）中，用饱和食盐水（20mL×3）洗涤，有机相在无水硫酸钠干燥后过滤，滤液减压浓缩，经硅胶柱（甲醇:二氯甲烷=1:50）纯化得到黄色固体C9-1（400mg,90.7%）。

2）中间体C9-2的合成：

将C9-1(400mg,1.136mmol)加入到3M氯化氢的乙酸乙酯溶液（6mL），常温搅拌3小时，减压旋去溶剂，浓缩物加入到饱和碳酸氢钠水溶液（10mL）和二氯甲烷（40mL）中，有机相用无水硫酸钠干燥过滤﹑浓缩后得一黄色固体C9-2(212mg,74%)。

3）产物C9的合成：

C9-2（50mg,0.198mmol）、氟化铯（76mg,0.5mmol）和A1-9（76mg,0.3mmol）分别在搅拌条件下溶于二甲亚砜（1mL）中，加热至120℃，反应36小时。冷却至室温，加入乙酸乙酯（10mL）和水（5mL），有机相用饱和食盐水（5mL）洗，无水硫酸钠干燥过滤后，旋去溶剂，溶质经柱层析精制（流动相为甲醇:二氯甲烷=1:50到1:20）得一黄色油状物C9(17.4mg,18.7%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.34(s,1H),8.20(s,1H),7.41(s,1H),6.64(s,1H),4.58(s,2H),3.90(t,J=5.6Hz,2H),3.77-3.73(m,2H),3.04-2.95(m,2H),2.76(t,J=5.6Hz,2H),2.63-2.57(m,2H),2.36(s,3H),2.16(s,3H),1.14(d,J=6.4Hz,6H)；ESI-MS(m/z):468.8[M+1]⁺。经过图谱解析所得的物质为

实施例10

本实施例提供一种胺基噻唑-吡啶杂环化合物C10，其是由如下方法合成的：

1）中间体C10-1的合成：

C8-1（400mg,1.25mmol）、环丙基甲基胺（267mg,3.76mmol）、N,N`-二异丙基乙胺（650mg,5.04mmol）溶于二甲亚砜（2mL），130℃下搅拌6小时。冷却至室温，反应液加入乙酸乙酯（60mL）中，用饱和食盐水（20mL×3）洗涤，有机相在无水硫酸钠干燥后过滤，滤液减压浓缩，经硅胶柱（石油醚:乙酸乙酯=4:1）纯化得到黄色固体C10-1（310mg,80.1%）。

2）中间体C10-2的合成：

将C10-1（310mg,1.003mmol）加入到3M氯化氢的乙酸乙酯溶液（6mL），常温搅拌3小时，减压旋去溶剂，浓缩物加入到饱和碳酸氢钠水溶液（10mL）和二氯甲烷（40mL）中，有机相用无水硫酸钠干燥过滤﹑浓缩后得一黄色固体C10-2（150mg,77%）。

3）产物C10的合成：

C10-2（50mg,0.24mmol）、氟化铯（91mg,0.6mmol）和A1-9（91mg,0.36mmol）分别在搅拌条件下溶于二甲亚砜（1mL）中，加热至120℃，反应36小时。冷却至室温，加入乙酸乙酯（10mL）和水（5mL），有机相用饱和食盐水（5mL）洗，无水硫酸钠干燥过滤后，旋去溶剂，溶质经柱层析精制（流动相为甲醇:二氯甲烷=1:100到1:50）得一白色固体C10(27mg,26.4%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.34(s,1H),8.20(s,1H),7.41(s,1H),6.63(s,1H),5.50(s,1H),4.56(s,2H),3.89(t,J=5.6Hz,2H),3.08(d,J=7.2Hz,2H),2.73(t,J=5.4Hz,2H),2.36(s,3H),2.15(s,3H),1.10(br s,1H),0.54(d,J=7.7Hz,2H),0.24(d,J=5.1Hz,2H)；ESI-MS(m/z):425.8[M+1]⁺。经过图谱解析所得的物质为

实施例11

本实施例提供一种胺基噻唑-吡啶杂环化合物C11，其是由如下方法合成的：

1）中间体C11-1的合成：

C8-1(400mg,1.25mmol)、4-哌啶醇（379mg,3.75mmol）、N,N`-二异丙基乙胺（650mg,5.04mmol）溶于二甲亚砜（2mL），130℃下搅拌6小时。冷却至室温，反应液加入乙酸乙酯（60mL）中，用饱和食盐水（20mL×3）洗涤，有机相在无水硫酸钠干燥后过滤，滤液减压浓缩，经硅胶柱（石油醚:乙酸乙酯=1:1）纯化得到黄色固体C11-1（370mg,87%）。

2）中间体C11-2的合成：

将C11-1（370mg,1.09mmol）加入到3M氯化氢的乙酸乙酯溶液（6mL），常温搅拌3小时，减压旋去溶剂，浓缩物加入到饱和碳酸氢钠水溶液（10mL）和二氯甲烷（40mL）中，有机相用无水硫酸钠干燥过滤﹑浓缩后得一黄色固体C11-2（150mg,57.7%）。

3）产物C11的合成：

C11-2（50mg,0.21mmol）、氟化铯（80mg,0.525mmol）和A1-9（80mg,0.315mmol）分别在搅拌条件下溶于二甲亚砜（1mL）中，加热至120℃，反应36小时。冷却至室温，加入乙酸乙酯（10mL）和水（5mL），有机相用饱和食盐水（5mL）洗，无水硫酸钠干燥过滤后，旋去溶剂，溶质经柱层析精制（流动相为甲醇:二氯甲烷=1:100到1:20）得一黄色油状物C11（9mg,9.4%）。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.33(s,1H),8.20(s,1H),7.42(s,1H),6.64(s,1H),4.58(s,2H),3.89(t,J=5.6Hz,2H),3.87-3.84(m,1H),3.78-3.73(m,2H),3.20-3.14(m,2H),2.75(t,J=5.6Hz,2H),2.36(s,3H),2.15(s,3H),1.95-1.89(m,2H),1.65-1.56(m,2H)；ESI-MS(m/z):455.8[M+1]⁺。经过图谱解析所得的物质为

实施例12

本实施例提供一种胺基噻唑-吡啶杂环化合物C12，其是由如下方法合成的：

1）中间体C12-1的合成：

C8-1（400mg,1.25mmol）、2,6-二甲基吗啉（431mg,3.75mmol）、N,N`-二异丙基乙胺（650mg,5.04mmol）溶于二甲亚砜（2mL），130℃下搅拌6小时。冷却至室温，反应液加入乙酸乙酯（60mL）中，用饱和食盐水（20mL×3）洗涤，有机相在无水硫酸钠干燥后过滤，滤液减压浓缩，经硅胶柱（石油醚:乙酸乙酯=2:1）纯化得到黄色固体C12-1（300mg,67.7%）。

2）中间体C12-2的合成：

将C12-1（300mg,0.848mmol）加入到3M氯化氢的乙酸乙酯溶液（6mL），常温搅拌3小时，减压旋去溶剂，浓缩物加入到饱和碳酸氢钠水溶液（10mL）和二氯甲烷（40mL）中，有机相用无水硫酸钠干燥过滤﹑浓缩后得一黄色固体C12-2（193mg,90%）。

3）产物C12的合成：

C12-2（50mg,0.2mmol）、氟化铯（76mg,0.5mmol）和A1-9（76mg,0.3mmol）分别在搅拌条件下溶于二甲亚砜（1mL）中，加热至120℃，反应36小时。冷却至室温，加入乙酸乙酯（10mL）和水（5mL），有机相用饱和食盐水（5mL）洗，无水硫酸钠干燥过滤后，旋去溶剂，溶质经柱层析精制（流动相为甲醇:二氯甲烷=1:80到1:40）得一白色固体C12(28mg,30.1%）。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.34(s,1H),8.21(s,1H),7.42(s,1H),6.65(s,1H),4.60(s,2H),3.91(t,J=5.8Hz,2H),3.78-3.71(m,2H),3.68(d,J=12.8Hz,2H),2.77(t,J=5.6Hz,2H),2.70(t,J=11.6Hz,2H),2.37(s,3H),2.16(s,3H),1.24(d,J=6.4Hz,6H)；ESI-MS(m/z):469.8[M+1]⁺。经过图谱解析所得的物质为

实施例13

本实施例提供一种胺基噻唑-吡啶杂环化合物C13，其是由如下方法合成的：

1）中间体C13-1的合成：

C8-1（400mg,1.25mmol）、四氢吡咯（266mg,3.75mmol）、N,N`-二异丙基乙胺（650mg,5.04mmol）溶于二甲亚砜（2mL），130℃下搅拌6小时。冷却至室温，反应液加入乙酸乙酯（60mL）中，用饱和食盐水（20mL×3）洗涤，有机相在无水硫酸钠干燥后过滤，滤液减压浓缩，经硅胶柱（石油醚:乙酸乙酯=4:1）纯化得到黄色固体C13（320mg,82.6%）。

2）中间体C13-2的合成：

将C13-1（320mg,1.04mmol）加入到3M氯化氢的乙酸乙酯溶液（6mL），常温搅拌3小时，减压旋去溶剂，浓缩物加入到饱和碳酸氢钠水溶液（10mL）和二氯甲烷（40mL）中，有机相用无水硫酸钠干燥过滤﹑浓缩后得一黄色固体C13-2(194mg,90%)。

3）产物C13的合成：

C13-2（50mg,0.24mmol）、氟化铯（92mg,0.6mmol）和A1-9（91mg,0.36mmol）分别在搅拌条件下溶于二甲亚砜（1mL）中，加热至120℃，反应36小时。冷却至室温，加入乙酸乙酯（10mL）和水（5mL），有机相用饱和食盐水（5mL）洗，无水硫酸钠干燥过滤后，旋去溶剂，溶质经柱层析精制（流动相为甲醇:二氯甲烷=1:80到1:40）得一白色固体C13(13.5mg,13.2%）。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.34(s,1H),8.20(s,1H),7.41(s,1H),6.64(s,1H),4.59(s,2H),3.91(t,J=5.6Hz,2H),3.43(t,J=6.4Hz,4H),2.79(t,J=5.4Hz,2H),2.36(s,3H),2.16(s,3H),2.03-2.00(m,4H)；ESI-MS(m/z):425.8[M+1]⁺。经过图谱解析所得的物质为

实施例14

本实施例提供一种胺基噻唑-吡啶杂环化合物C14，其是由如下方法合成的：

1）中间体C14-1的合成：

C8-1（400mg,1.25mmol）、乙胺盐酸盐（307mg,3.74mmol）、N,N`-二异丙基乙胺（1.13g,8.8mmol）溶于二甲亚砜（2mL），130℃下搅拌2天。冷却至室温，反应液加入乙酸乙酯（60mL）中，用饱和食盐水（20mL×3）洗涤，有机相在无水硫酸钠干燥后过滤，滤液减压浓缩，经硅胶柱（石油醚:乙酸乙酯=4:1）纯化得到黄色固体C14-1（100mg，28.1%）。

2）中间体C14-2的合成：

将C14-1（100mg,0.353mmol）加入到3M氯化氢的乙酸乙酯溶液（6mL），常温搅拌3小时，减压旋去溶剂，浓缩物加入到饱和碳酸氢钠水溶液（10mL）和二氯甲烷（40mL）中，有机相用无水硫酸钠干燥过滤﹑浓缩后得一棕色固体C14-2(53mg,82%)。

3）产物C14的合成：

C14-2(53mg,0.29mmol)，氟化铯（112mg,0.73mmol）和A1-9（112mg,0.44mmol）分别在搅拌条件下溶于二甲亚砜（1mL）中，加热至120℃，反应36小时。冷却至室温，加入乙酸乙酯（10mL）和水（5mL），有机相用饱和食盐水（5mL）洗，无水硫酸钠干燥过滤后，旋去溶剂，溶质经柱层析精制（流动相为甲醇:二氯甲烷=1:80到1:40）得一黄色油状物C14(34mg,29.3%）。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.36(s,1H),8.20(s,1H),7.42(s,1H),6.63(s,1H),4.55(s,2H),3.86(s,2H),3.24(s,2H),2.72(s,2H),2.37(s,3H),2.16(s,3H),1.31(t,J=6.6Hz,3H)；ESI-MS(m/z):399.8[M+1]⁺。经过图谱解析所得的物质为

实施例15

本实施例提供一种胺基噻唑-吡啶杂环化合物C15，其是由如下方法合成的：

1）中间体C15-1的合成：

吡唑（255mg,3.75mmol）溶于N,N-二甲基甲酰胺（5mL），在0℃下加入氢化钠（80%,135mg,4.5mmol）并反应15分钟。将C8-1（400mg,1.25mmol）加入到反应液中，在100℃下搅拌5小时，冷却至室温，反应液淬灭后加入乙酸乙酯（60mL）中，用饱和食盐水（20mL×3）洗涤，有机相在无水硫酸钠干燥后过滤，滤液减压浓缩，经硅胶柱（石油醚:乙酸乙酯=40:1到10:1）纯化得到白色固体C15-1（280mg,72.9%）。

2）中间体C15-2的合成：

将C15-1（280mg,0.915mmol）加入到3M的氯化氢乙酸乙酯溶液（6mL），常温搅拌3小时，减压旋去溶剂，浓缩物加入到饱和碳酸氢钠水溶液（10mL）和二氯甲烷（40mL）中，有机相用无水硫酸钠干燥过滤﹑浓缩后得一黄色固体C15-2(138mg,73.4%)。

3）产物C15的合成：

C15-2（50mg,0.243mmol）、氟化铯（94mg,0.618mmol）和A1-9（94mg,0.372mmol）分别在搅拌条件下溶于二甲亚砜（1mL）中，加热至120℃，反应36小时。冷却至室温，加入乙酸乙酯（10mL）和水（5mL），有机相用饱和食盐水（5mL）洗，无水硫酸钠干燥过滤后，旋去溶剂，溶质经柱层析精制（流动相为甲醇:二氯甲烷=1:80到1:40）得一黄色固体C15(35.8mg,34.9%）。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.36(s,1H),8.28(s,1H),8.24(s,1H),7.70(s,1H),7.44(s,1H),6.70(s,1H),6.46(s,1H),4.77(s,2H),3.99(s,2H),2.93(s,2H),2.38(s,3H),2.17(s,3H)；ESI-MS(m/z):422.7[M+1]⁺。经过图谱解析所得的物质为

实施例16

本实施例提供一种胺基噻唑-吡啶杂环化合物C16，其是由如下方法合成的：

按照实施例1中的方法合成得到中间体C1，再制备产物C16。

C1(50mg,0.134mmol)、N,N`-二异丙基乙胺（35mg,0.268mmol）溶于二氯甲烷（3mL）。0℃下慢慢滴加氯甲酸乙酯（17.5mg,0.161mmol）的二氯甲烷（2mL）溶液，并保持0℃反应5小时，减压浓缩，经硅胶柱（二氯甲烷:甲醇=80:1到50:1）纯化得到黄色固体C16（34mg,56.7%）。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.95(s,1H),8.35(s,1H),8.23(s,1H),7.43(s,1H),6.67(s,1H),4.67(s,2H),4.30(q,J=6.9Hz,2H),3.95(s,2H),2.86(s,2H),2.38(s,3H),2.17(s,3H),1.34(t,J=6.9Hz,3H)；ESI-MS(m/z):443.8[M+1]⁺。经过图谱解析所得的物质为

实施例17

本实施例提供一种胺基噻唑-吡啶杂环化合物C17，其是由如下方法合成的：

按照实施例1中的方法合成得到中间体C1，再制备产物C17。

C1(50mg,0.134mmol)、N,N`-二异丙基乙胺（60mg,0.465mmol）溶于二氯甲烷（3mL）。0℃下慢慢滴加三氟乙酸酐（62mg,0.296mmol）的二氯甲烷（2mL）溶液，常温下搅拌5小时，减压浓缩，经硅胶柱（二氯甲烷:甲醇=80:1到50:1）纯化得到黄色固体C17（15mg,23.8%）。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.42(s,1H),8.21(s,1H),7.47(s,1H),6.70(s,1H),4.67(s,2H),3.86(s,2H),2.66(s,2H),2.39(s,3H),2.17(s,3H)；ESI-MS(m/z):467.7[M+1]⁺。经过图谱解析所得的物质为

实施例18

本实施例提供一种胺基噻唑-吡啶杂环化合物C18，其是由如下方法合成的：

按照实施例1中的方法合成得到中间体C1，再制备产物C18。

1)中间体C18-1的合成：

C1（200mg,0.537mmol）、三乙胺（108mg,1.074mmol）溶于二氯甲烷（8mL）。0℃下慢慢滴加3-氯丙酰氯（82mg,0.645mmol）的二氯甲烷（3mL）溶液，0℃下搅拌2小时，减压浓缩，经硅胶柱（二氯甲烷:甲醇=80:1到60:1）纯化得到白色固体C18-1(88mg,35.4%)。

2)产物C18的合成：

C18-1（60mg,0.13mmol）、碘化钾（17mg,0.104mmol）、吗啉（45mg,0.517mmol）溶于无水乙醇（2mL），80℃下搅拌2小时，减压浓缩，经硅胶柱（二氯甲烷:甲醇=80:1到50:1）纯化得到黄色固体C18（60mg,90.9%）。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.35(s,1H),8.22(s,1H),7.43(s,1H),6.66(s,1H),4.68(s,2H),3.95(t,J=5.2Hz,2H),3.85(s,4H),2.84(s,2H),2.78(t,J=5.6Hz,2H),2.64(s,6H),2.37(s,3H),2.16(s,3H)；ESI-MS(m/z):512.7[M+1]⁺。经过图谱解析所得的物质为

实施例19

本实施例提供一种胺基噻唑-吡啶杂环化合物C19，其是由如下方法合成的：

按照实施例1和18中的方法合成得到中间体C18-1，再制备产物C19。

C18-1（50mg,0.108mmol）、碘化钾（15mg,0.09mmol）、哌啶（54mg,0.635mmol）溶于无水乙醇（2mL），80℃下搅拌2小时，减压浓缩，经硅胶柱（二氯甲烷:甲醇=50:1到25:1）纯化得到黄色油状物C19（44mg,79.7%）。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.36(s,1H),8.22(s,1H),7.43(s,1H),6.67(s,1H),4.68(s,2H),3.95(t,J=5.2Hz,2H),2.85(s,4H),2.73(t,J=5.8Hz,2H),2.68(s,4H),2.38(s,3H),2.17(s,3H),1.80(t,J=5Hz,4H),1.57(s,2H)；ESI-MS(m/z):510.7[M+1]⁺。经过图谱解析所得的物质为

实施例20

本实施例提供一种胺基噻唑-吡啶杂环化合物C20，其是由如下方法合成的：

按照实施例1和18中的方法合成得到中间体C18-1，再制备产物C20。

C18-1（50mg,0.108mmol）、碘化钾（15mg,0.09mmol）、二甲胺盐酸盐（34mg,0.42mmol）、N,N`-二异丙基乙胺（120mg,0.93mmol）溶于无水乙醇（2mL），80℃下搅拌2小时，减压浓缩，经硅胶柱（二氯甲烷:甲醇=80:1到25:1）纯化得到黄色固体C19(6.3mg,12.4%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.35(s,1H),8.22(s,1H),7.43(s,1H),6.66(s,1H),4.66(s,2H),3.94(t,J=5.2Hz,2H),3.02(s,2H),2.89-2.83(m,4H),2.61(s,6H),2.38(s,3H),2.17(s,3H)；ESI-MS(m/z):470.8[M+1]⁺。经过图谱解析所得的物质为

实施例21

本实施例提供一种胺基噻唑-吡啶杂环化合物C21，其是由如下方法合成的：

按照实施例1中的方法合成得到中间体C1，再制备产物C21。

C1(40mg,0.108mmol)、异氰酸乙酯（33mg,0.465mmol）溶于1,4-二氧六环中（1.5mL），80℃下搅拌过夜，减压浓缩，用正己烷（20mL）再减压浓缩两次，经硅胶柱（二氯甲烷:甲醇=80:1到50:1）纯化得到黄色油状物（24mg,50.5%）。¹H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.36(s,1H),8.22(s,1H),7.44(s,1H),6.67(s,1H),4.61(s,2H),3.95(s,2H),3.39-3.32(m,2H),2.82(s,2H),2.38(s,3H),2.17(s,3H),1.21(t,J=7.2Hz,3H)；ESI-MS(m/z):442.8[M+1]⁺。经过图谱解析所得的物质为

实施例22

本实施例提供一种胺基噻唑-吡啶杂环化合物C22，其是由如下方法合成的：

按照实施例1中的方法合成得到中间体C1，再制备产物C22。

C1(40mg,0.108mmol)、异氰酸异丙酯（40mg,0.471mmol）溶于1,4-二氧六环中（1.5mL），80℃下搅拌过夜，减压浓缩，用正己烷（20mL）再减压浓缩两次，经硅胶柱（二氯甲烷:甲醇=80:1到50:1）纯化得到黄色油状物（26mg,53.06%）。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.35(s,1H),8.23(s,1H),7.43(s,1H),6.67(s,1H),4.62(s,2H),4.01(m,1H),3.95(s,2H),2.82(s,2H),2.38(s,3H),2.17(s,3H),1.23(s,6H)；ESI-MS(m/z):456.8[M+1]⁺。经过图谱解析所得的物质为

实施例23

本实施例提供一种胺基噻唑-吡啶杂环化合物C23，其是由如下方法合成的：

按照实施例1中的方法合成得到中间体C1，再制备产物C23。

C1(56mg,0.151mmol)、三乙胺（30mg,0.297mmol）溶于二氯甲烷（3mL）中，0℃下慢慢滴加丙烯酰氯（17mg,0.189mmol）的二氯甲烷（1mL）溶液，0℃下搅拌4小时，减压浓缩，经硅胶柱（石油醚:乙酸乙酯=2:1到1:1）纯化得到白色固体（7.3mg,11.4%）。¹HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.24(s,1H),8.30(s,1H),8.23(s,1H),7.57(s,1H),6.90(s,1H),6.52-6.43(m,1H),6.35(d,J=17.4Hz,1H),5.86(d,J=9.3Hz,1H),4.71(s,2H),3.95(t,J=5.0Hz,2H),2.71(s,2H),2.31(s,3H),2.07(s,3H)；ESI-MS(m/z):425.8[M+1]⁺。经过图谱解析所得的物质为

实施例24

本实施例提供一种胺基噻唑-吡啶杂环化合物C24，其是由如下方法合成的：

按照实施例1中的方法合成得到中间体C1，再制备产物C24。

C1(42mg,0.113mmol）、三乙胺（34mg,0.337mmol）溶于二氯甲烷（3mL）中，0℃下慢慢滴加甲磺酰氯（26mg,0.227mmol）的二氯甲烷（1mL）溶液，0℃下搅拌4小时，减压浓缩，常温下在饱和碳酸氢钠水溶液（4mL）和乙腈（0.5mL）的混合溶液中搅拌3小时，用乙酸乙酯（10mL×2）萃取，有机相在无水硫酸钠干燥后过滤，滤液减压浓缩，经硅胶柱（石油醚:乙酸乙酯=2:1到1:1）纯化得到黄色固体（19mg,37.4%）。¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ8.35(s,1H),8.22(s,1H),7.44(s,1H),6.65(s,1H),4.53(s,2H),3.90(s,2H),2.99(s,3H),2.78(s,2H),2.38(s,3H),2.16(s,3H)；ESI-MS(m/z):449.7[M+1]+。经过图谱解析所得的物质为

实施例25

本实施例提供一种胺基噻唑-吡啶杂环化合物C25，其是由如下方法合成的：

按照实施例1和8中的方法合成得到中间体C8-1，再制备产物C25。

1）中间体C25-1的合成：

0℃下将氢化钠（80%,90mg,3mmol）加入到乙醇（3mL）中并反应30分钟，C8-1（320mg,1mmol）加到反应液中，80℃下反应过夜，减压浓缩，经硅胶柱（石油醚:乙酸乙酯=15:1）纯化得到绿色油状物（180mg,63.3%）。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ4.36(s,2H),4.34-4.31(m,2H),3.63(s,2H),2.60(s,2H),1.41(s,9H),1.34(t,J=7.0Hz,3H)。

2）中间体C25-2的合成：

C25-1(107mg,0.377mmol)溶于二氯甲烷（3mL）中，0℃下滴加三氟乙酸（0.37mL,4.9mmol）并搅拌4小时，将冰水（3mL）加到反应液中，用40%的氢氧化钠水溶液调节pH到10。用二氯甲烷（10mL×3）萃取，有机相在无水硫酸钠干燥后过滤，滤液减压浓缩得到黄色固体（62mg,88.6%）。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ4.40(q,J=7.2Hz,2H),3.86(t,J=1.8Hz,2H),3.16(t,J=5.8Hz,2H),2.65-2.60(m,2H),1.41(t,J=7.0Hz,3H)。

3)产物C25的合成：

C25-2(50mg,0.272mmol)、氟化铯（103mg,0.678mmol）和A1-9（103mg,0.407mmol）分别在搅拌条件下溶于二甲亚砜（1mL）中，加热至120℃，反应36小时。冷却至室温，加入乙酸乙酯（10mL）和水（5mL），有机相用饱和食盐水（5mL）洗，无水硫酸钠干燥过滤后，旋去溶剂，溶质经柱层析精制（流动相为乙酸乙酯:二氯甲烷=1:20）得一黄色固体(26mg,23.9%)。¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ8.35(s,1H),8.21(s,1H),7.42(s,1H),6.65(s,1H),4.59(s,2H),4.41(q,J=7.1Hz,2H),3.92(t,J=5.6Hz,2H),2.77(t,J=5.3Hz,2H),2.37(s,3H),2.16(s,3H),1.41(t,J=7.1Hz,3H)；ESI-MS(m/z):400.8[M+1]⁺。经过图谱解析所得的物质为

实施例26

本实施例提供一种胺基噻唑-吡啶杂环化合物C26，其是由如下方法合成的：

按照实施例1和8中的方法合成得到中间体C8-1，再制备产物C26。

1）中间体C26-1的合成：

0℃下将氢化钠（80%,283mg,9.43mmol）加入到环丙基甲醇（4mL）中并反应30分钟，C8-1（500mg,1.57mmol）加到反应液中，80℃下反应过夜，减压浓缩，经硅胶柱（石油醚:乙酸乙酯=15:1）纯化得到黄色油状物（250mg,51.4%）。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ4.43(s,2H),4.18(d,J=7.2Hz,2H),3.70(t,J=4.6Hz,2H),2.66(s,2H),1.48(s,9H),1.29(m,1H),0.66-0.61(m,2H),0.38-0.34(m,2H)。

2）中间体C26-2的合成：

C26-1(250mg,0.806mmol)溶于二氯甲烷（5mL）中，0℃下滴加三氟乙酸（0.8mL,10.8mmol）并搅拌4小时，将冰水（4mL）加到反应液中，用40%的氢氧化钠水溶液调节pH到10。用二氯甲烷（20mL×3）萃取，有机相在无水硫酸钠干燥后过滤，滤液减压浓缩得到黄色油状物（21mg,12.4％）。

3）产物C26的合成：

C26-2(21mg,0.1mmol)、氟化铯（38mg,0.25mmol）和A1-9（38mg,0.15mmol）分别在搅拌条件下溶于二甲亚砜（1mL）中，加热至120℃，反应36小时。冷却至室温，加入乙酸乙酯（10mL）和水（5mL），有机相用饱和食盐水（5mL）洗，无水硫酸钠干燥过滤后，旋去溶剂，溶质经柱层析精制（流动相为乙酸乙酯:二氯甲烷=1:20）得一黄色固体(6mg,14.08%)。¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ8.34(s,1H),8.21(s,1H),7.42(s,1H),6.64(s,1H),5.08(m,1H),4.59(s,2H),3.91(t,J=5.6Hz,2H),2.76(t,J=5.1Hz,2H),2.5-2.40(m,2H),2.37(s,3H),2.27-2.18(m,2H),2.16(s,3H),1.91-1.77(m,1H),1.71-1.64(m,1H)；ESI-MS(m/z):426.8[M+1]⁺。经过图谱解析所得的物质为

实施例27

本实施例提供一种胺基噻唑-吡啶杂环化合物C27，其是由如下方法合成的：

按照实施例1和8中的方法合成得到中间体C8-1，再制备产物C27。

1）中间体C27-1的合成：

将氢化钠（80%,188mg,6.25mmol）加入到苯胺（581mg,6.25mmol）的四氢呋喃（10mL）溶液中，在60℃下搅拌30分钟，冷却至室温，将C8-1加至反应液中，室温下搅拌4小时。将饱和食盐水（20mL）加至反应液中，用乙酸乙酯（30mL×3）萃取，有机相用无水硫酸钠干燥过滤后，旋去溶剂，溶质经柱层析精制（石油醚:乙酸乙酯=6:1）得一黄色固体（287mg,69.1%）。¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.32(s,3H),7.26(s,1H),7.06(s,1H),4.48(s,2H),3.72(s,2H),2.71(s,2H),1.48(s,9H)。

2）中间体C27-2的合成：

将C27-1（287mg,0.867mmol）加入到3M氯化氢的乙酸乙酯溶液（6mL），常温搅拌4小时，减压旋去溶剂，浓缩物加入到饱和碳酸氢钠水溶液（10mL）和二氯甲烷（40mL）中，有机相用无水硫酸钠干燥过滤﹑浓缩后得一黄色固体C27-2(174mg,87%)。

3）产物C27的合成：

C27-2（50mg,0.216mmol）、氟化铯（82mg,0.541mmol）和A1-9（82mg,0.324mmol）分别在搅拌条件下溶于二甲亚砜（1mL）中，加热至120℃，反应36小时。冷却至室温，加入乙酸乙酯（10mL）和水（5mL），有机相用饱和食盐水（5mL）洗，无水硫酸钠干燥过滤后，旋去溶剂，溶质经柱层析精制（流动相为甲醇:二氯甲烷=1:100到1:80）得一黄色油状物（9mg,9%）。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.36(s,1H),8.22(s,1H),7.43(s,1H),7.36-7.32(m,4H),7.06(t,J=6Hz,1H),6.66(s,1H),4.63(s,2H),3.93(s,2H),2.81(s,2H),2.38(s,3H),2.17(s,3H)；ESI-MS(m/z):447.8[M+1]⁺。经过图谱解析所得的物质为

实施例28

1）中间体C28-1的合成：

将丙二酸环异丙酯（5g,34.72mmol）、N-（叔丁氧羰基）-β-丙氨酸（5.96g,31.57mmol）和4-二甲氨基吡啶（5.8g,47.36mmol）溶于40毫升的二氯甲烷中，在0℃下慢慢滴加二环己基碳二亚胺（7.8g,37.88mmol）的二氯甲烷（20mL）溶液，室温搅拌过夜。过滤，滤液用柠檬酸（5g,26mmol）的水（100mL）溶液洗两次，再用水（100mL）洗一次，有机相用无水硫酸钠干燥过滤﹑浓缩后得一黄色固体粗品（11g），可直接用于下一反应。

2）中间体C28-2的合成：

将C28-1（11g）溶于200mL的甲苯中，在80℃下搅拌过夜，减压浓缩，溶质经柱层析精制（流动相为甲醇:二氯甲烷=1:100）得一白色固体（2.5g,33.7%）。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ4.13(t,J=6.0Hz,2H),3.54(s,2H),2.65(t,J=6.0Hz,2H),1.58(s,9H)。

3）中间体C28-3的合成：

将C28-2（213mg,1mmol）溶于4mL的四氢呋喃中，0℃下分批加入N-溴代丁二酰亚胺（178mg,1mmol），室温下搅拌2小时。往反应液中加入饱和食盐水（5mL），用乙酸乙酯（10mL）萃取，有机相用无水硫酸钠干燥过滤﹑浓缩后得一白色固体粗品（292mg），可直接用于下一反应。

4）中间体C28-4的合成：

将C28-3（292mg,1mmol）、硫脲（76mg,1mmol）和碳酸氢钠（84mg,1mmol）溶于4毫升的乙醇中，在80℃下搅拌2小时，冷却至室温，过滤，减压浓缩滤液，溶质经从乙醇中重结晶得一白色固体（200mg,74.3%）。¹H NMR(400MHz,DMSO)δ8.08(s,2H),3.89(t,J=6.4Hz,2H),2.75(t,J=6.4Hz,2H),1.44(s,9H)。

5）中间体C28-5的合成：

0℃下将亚硝酸异戊酯（176mg,1.5mmol）与溴化铜（268mg,1.2mmol）加入到N,N`-二甲基甲酰胺（2.5mL），C28-4(269mg,1mmol)加到溶液中,40℃下搅拌30分钟。将饱和食盐水（20mL）加至反应液中，用乙酸乙酯(30mL*2)萃取，有机相合并用饱和食盐水洗（10mL*2），无水硫酸钠干燥过滤后，旋去溶剂，溶质经柱层析精制（流动相为石油醚:乙酸乙酯=20:1）得白色固体C28-5(150mg,45%)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ4.12(t,J=6.4Hz,2H),3.10(t,J=6.4Hz,2H),1.56(s,9H)。

6）中间体C28-6的合成：

C28-5（111mg,0.333mmol）、四氢吡咯（71mg,1mmol）、N,N`-二异丙基乙胺（156mg,1.2mmol）溶于二甲亚砜（2mL），130℃下搅拌6小时。冷却至室温，反应液加入饱和食盐水（20mL）中，用二氯甲烷（20mL×3）萃取，有机相合并用饱和食盐水（15mL*2）洗涤，经无水硫酸钠干燥后过滤，滤液减压浓缩，经硅胶柱（二氯甲烷:甲醇=60:1）纯化得到一黄色固体（70mg,94%）。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ5.61(s,1H),3.59-3.55(m,2H),3.51(s,4H),2.89(t,J=7Hz,2H),2.09-2.06(m,4H)。

7）产物C28的合成：

将A1-9（20mg,0.079mmol）、C28-6(20mg,0.096mmol)、四(三苯基膦)钯(4mg,0.0034mmol)、4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(4mg,0.0068mmol)和碳酸铯（40mg,0.123mmol）加至4mL的二氧六环中，在氮气保护下110℃搅拌过夜。冷却至室温，减压浓缩，经硅胶柱（石油醚:乙酸乙酯=4:1）纯化得到一黄色固体（16mg,47.6%）。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.43(s,1H),8.33(s,1H),7.93(s,1H),7.42(s,1H),4.37(t,J=6.6Hz,2H),3.53(s,4H),3.01(t,J=6.6Hz,2H),2.36(s,3H),2.22(s,3H),2.10-2.07(m,4H)；ESI-MS(m/z):440.3[M+1]⁺。经过图谱解析所得的物质为

实施例29

本实施例对实施例1-28所得的化合物进行生物测试，以2012年成功上市的vismodegib为标准对照物：

NIH3T3-GRE-Luc荧光素酶报告基因检测实验

NIH3T3细胞是在含有10%FBS(Hyclone)的DMEM(11965,Gibico)中培养的。GRE-萤火虫荧光素质粒是经由放大八倍的细胞转录因子GLI-1响应元素植入MCS中获得。单克隆是经过重组苏尼克刺猬通路蛋白和结构式如下式所示的小分子激动剂SAG验证的。被验证的精选克隆用于检测刺猬通路信号。

表达GRE-萤火虫素的NIH3T3细胞是在完整的培养液中维持的。当需要做分析检测时，细胞被加到96孔板中，最终每孔含细胞约一万五千。96孔板在被培养48小时。被检测化合物由DMSO和检测缓冲液被序列稀释。10nMSAG作为刺猬通路激动剂。随后100微升包含有被测化合物和激动剂的分析缓冲液小心加入到含有细胞中96孔板中，并在37摄氏度培养48小时。

在培养48小时后，40微升萤火虫荧光素酶被加入到每一个孔中。96孔板在室温下轻摇5分钟。发光信号由读板器记录。化合物的活性通过其对发光信号的阻断计算而出，对所合成的化合物进行测试，结果如下表：

上述结果显示，28个化合物中已测的有23个，其中22个都有活性，其中9个（C3,C4,C5,C7,C9,C10,C11,C21,C22）如图1-9所示优于或与vismodegib的效力值相当，具有很好的刺猬通路拮抗效果。由此可见，本发明新的具有刺猬通路拮抗剂活性的胺基噻唑-吡啶杂环化合物，能够通过刺猬通路拮抗阻断肿瘤细胞转移再生，从而***疾病。

本发明尚有多种实施方式，凡采用等同变换或者等效变换而形成的所有技术方案，均落在本发明的保护范围之内。

Claims

1.一种具有刺猬通路拮抗剂活性的胺基噻唑-吡啶杂环化合物，包括该化合物及其药学上可接受的盐、各种同位素、各种异构体和各种晶型结构，具有通式I所示的结构：

其中，A为氮原子、氧原子、硫原子或C-R9；

n为0、1、2、3、4、5或6。

2.根据权利要求1所述的具有刺猬通路拮抗剂活性的胺基噻唑-吡啶杂环化合物，其特征在于：所述R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11分别独立选自：氢原子被卤素、氰基、氨基、羟基、巯基、烷氧基、酯基、砜基、亚砜基、磺胺基或叠氮基取代的氢原子、烷基、烯基、炔基、芳香环基或杂环基，以及环状烷基、环状烯基、3-12元杂环或5-12元芳香杂环；所述氢原子被卤素取代的烷基优选为三氟甲基。

3.根据权利要求1-2所述的任一具有刺猬通路拮抗剂活性的胺基噻唑-吡啶杂环化合物，其特征在于：

烷基和烷代基为1-10个碳原子组成的直链、支链、环状、双环状或螺环状的碳氢烷基；

烯基和烯代基为1-10个碳原子组成的含有至少一个碳碳双键的直链、支链、环状、双环状或螺环状的碳氢化合物；

炔基和炔代基为1-10个碳原子组成的含有至少一个碳碳三键的直链、支链、环状、双环状或螺环状的碳氢化合物；

卤素为氟、氯、溴或碘；

杂原子为氮、氧、硫或磷，及其各种氧化态或氮的季铵盐；

杂环为含有包括氮、氧或硫中一个或多个原子的组合的非芳香性的单环、双环、三环或螺环，及其各种氧化态形式的环状取代基；

芳香环为苯环、萘环及它们的取代衍生物，或者为饱和环与芳香环的衍生环状取代基；

芳香杂环为含有包括氮、氧或硫中一个或多个原子的组合的环，及其各种氧化态形式的环状取代基，或者为饱和环与芳香杂环的衍生环状取代基。

4.根据权利要求1所述的任一具有刺猬通路拮抗剂活性的胺基噻唑-吡啶杂环化合物，其特征在于：所述同位素包括²H，³H，¹¹C，¹³C，¹⁴C，¹⁵N，¹⁷O，¹⁸O，¹⁸F，³²P，³⁵S或³⁶Cl，所述异构体包括立体异构体，顺反异构体或互变异构体。

5.根据权利要求1所述的具有刺猬通路拮抗剂活性的胺基噻唑-吡啶杂环化合物，其特征在于：所述式（Ⅰ）选自：

6.根据权利要求5所述的具有刺猬通路拮抗剂活性的胺基噻唑-吡啶杂环化合物，其包括下列化合物，及其药学上可接受的盐、各种同位素、各种异构体和各种晶型结构：

其中，R9选自下列基团中的任意一种：

7.根据权利要求6所述的具有刺猬通路拮抗剂活性的胺基噻唑-吡啶杂环化合物，其包括下列化合物，及其药学上可接受的盐、各种同位素、各种异构体和各种晶型结构：

8.一种抗肿瘤的药物组合物，包含权利要求1-7所述的任一具有式（Ⅰ）结构的具有刺猬通路拮抗剂活性的胺基噻唑-吡啶杂环化合物、其药学上可接受的盐、各种同位素、各种异构体和各种晶型结构中的至少两种化合物组成的组合。

9.一种抗肿瘤药物的联合应用组合物，该联合应用组合物是权利要求1-8所述的任一具有刺猬通路拮抗剂活性的胺基噻唑-吡啶杂环化合物及其药物组合物分别与顺铂、紫杉醇、喜树碱、曲妥珠单抗、格列卫、伊马替尼、吉非替尼、埃罗替尼、拉帕替尼中的一种或几种的组合进行联合应用得到的组合物。

10.一种根据权利要求1-9所述的任一具有刺猬通路拮抗剂活性的胺基噻唑-吡啶杂环化合物、抗肿瘤的药物组合物或抗肿瘤药物的联合应用组合物在制备***的药物中的应用。