CN103393094A - 灵芝菌丝片的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种灵芝菌丝片的制备方法，其解决了现有技术中存在的灵芝菌丝粉食用不便的技术问题，其包括制备培养基、活化菌种、接种及培养、烘干、膨化、粉碎、混合、制粒、压片步骤，制备培养基的步骤包括：A:谷物培养基的制备；B:斜面培养基的制备；C:摇瓶培养基的制备；D:发酵罐培养基的制备。本发明可广泛用于灵芝菌丝片的加工中。
Description
技术领域
本发明涉及一种保健品的制备方法，具体涉及一种灵芝菌丝片的制备方法。
背景技术
灵芝具有良好的药用和保健价值，在中国，它的药用历史已近2000多年，现代研究表明灵芝具有多种活性成分，如灵芝多糖、灵芝三萜、生物碱、氨基酸以及多种微量元素等，具有抗肿瘤、抗衰老、防辐射、提高免疫力等多种保健价值，随着灵芝选育和栽培技术的发展，灵芝制品也日趋多元化。现阶段常见的灵芝相关制品主要有灵芝子实体制品、灵芝孢子粉制品和灵芝菌丝粉制品三种。而灵芝菌丝粉因其加工方法具有操作要求较低、产量高、产品活性成分含量高于子实体、易实现产业化等的优点，产品的市场占有率最高。
灵芝菌丝粉是将优质灵芝菌种发酵培养得到的灵芝菌丝膨化和粉碎后得到的，活性成分含量高于灵芝子实体，在发酵过程中通过添加微量元素如无机硒和无机锗等，可得到富硒锗灵芝菌丝粉。
但是，灵芝菌丝粉中有三萜等不溶于的物质存在，不宜制作冲剂，而其他加工方法中提到的通过提取和分离进行深加工的方法，设备要求高，不易操作，而且易造成灵芝菌丝粉有效成分的流失。
发明内容
本发明就是为了解决现有技术中存在的灵芝菌丝粉食用不便的技术问题，提供一种食用方便、营养全面的灵芝菌丝片的制备方法，包括以下步骤：
A:谷物培养基的制备
将小麦、玉米、小米、黄豆按质量份数比1:1.5～2:0.6～1:1～1.2，加水至含水量质量百分比35～40%，分装至发酵瓶中，然后进行高温灭菌，灭菌条件：121～123℃，40～60min；灭菌结束后，待培养基温度降至27～35℃时，放入无菌接种室待接种用；
B:斜面培养基的制备
按照质量百分比葡萄糖15～20%、黄豆粉15～17%、玉米粉10～12%、小麦粉10～13%、磷酸二氢钾0.3～0.8%、硫酸镁0.2～1%、琼脂3～5%、蛋白胨3～7%、余为红薯提取液的比例配置，pH调至7.0，分装至试管中，混匀后高温灭菌，灭菌条件：121～123℃，40～60min；灭菌结束10～15min后取出试管，摆成斜面，将斜面培养基转移至28～36℃培养箱中恒温培养18～20h，无菌落长出方可取出备用；
C:摇瓶培养基的制备
按照质量百分比葡萄糖16～21%、黄豆粉15～17%、玉米粉10～12%、小麦粉10～13%、磷酸二氢钾0.3～0.8%、硫酸镁0.2～1%、蛋白胨3～7%、余为红薯提取液的比例配置，pH6.8～7.2，混匀后高温灭菌，灭菌条件：121～123℃，40～60min；
D:发酵罐培养基的制备
按照黄豆粉450～500g/kg、淀粉250～300g/kg、葡萄糖100～180g/kg、磷酸二氢钾5～10g/kg、硫酸镁2～8g/kg、蛋白胨30～70g/kg的配比进行制备；黄豆粉与蛋白粉混合后加水溶解稀释，加热至60～70℃后依次加入葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁和蛋白胨，将混合充分后的混合液加入到反应罐中，继续对混合液加水稀释至1000L，对反应罐进行加热，温度升至100～105℃时进行一次排气，继续升温至121～123℃时,关闭呼吸器进出口开关，使混合培养基在121～123℃、0.15～0.17MPa环境中灭菌30min，灭菌完毕，关闭加热***使混合培养基降温至25～28℃保温待用；
红薯提取液的制备步骤包括：将红薯洗净去皮，放到蒸煮锅中用水煮，红薯煮至糜烂，用纱布过滤，取其滤液，即为红薯提取液；
活化菌种步骤包括：
(1)选用多孔菌科真菌赤芝，接种到斜面培养基进行培养，培养条件为：26～30℃，2～3天，待斜面菌丝长满，即作为大量生产的母种a；
(2)选根霉，接种到斜面培养基进行培养，培养条件为：28～30℃，1～2天，待斜面菌丝长满，即作为大量生产的母种b；
(3)选用子囊菌科酵母菌，接种到斜面培养基进行培养，培养条件为：28～30℃，1～2天，待斜面菌丝长满，即作为大量生产的母种c；
(4)取上述母种a、b、c菌块按照质量比1:2:1.5的比例接种至摇瓶培养基，26～30℃培养至菌块长成圆形后置入摇床，恒温28～30℃培养60～70h，至有菌丝球形成后即得液体培养菌种；
接种及培养步骤中，将液体培养菌种接种到已制备好的谷物培养基中，在25～30℃下避光培养16～22天；
混合步骤中，按照混合物总质量1.5～2%的比例向灵芝菌丝粉中加入抗氧化剂，搅拌并混匀；
制粒步骤中，按照混合物总重量10～20%的比例分别加入质量浓度为70%的湿润剂溶液和质量分数为5～20%的粘合剂溶液，在混合机内搅拌10～25min，然后过8～20目筛，得到颗粒状灵芝菌丝粉制品；
压片步骤中，添加灵芝菌丝粉颗粒重2～5%的崩解剂并混匀；选用旋转式压片机对颗粒状灵芝粉制品进行压片，控制片重为0.2～0.35g，片厚度为0.13～0.2mm。
优选地，混合步骤中所使用抗氧剂为乳酸钙。
优选地，制粒步骤中所使用湿润剂为无水乙醇。
优选地，制粒步骤中所使用粘合剂为淀粉糊。
优选地，压片步骤中所用崩解剂为低取代羟丙基纤维素。
混合：按照混合物总质量0.5-2%的比例向灵芝菌丝粉中加入抗氧化剂，搅拌并混匀；
本发明的优点在于：
1、灵芝菌丝粉中有多种易被氧化分解的成分，制成片剂，可以有效保护这些易被氧化的成分，而且片剂食用和携带更加方便；
2、灵芝菌丝粉的水溶性好而且溶解后粘度小流动性强，不宜采用水做湿润剂，同时考虑到三萜类物质的水不溶性，在湿法制粒过程中选用无水乙醇作为湿润剂，这也有利于改善三萜类物质的溶解和吸收率；
3、使用淀粉浆做粘合剂的具有很多优势，原因有：①灵芝菌丝粉本身的粘度较小，宜选用粘度较高的粘合剂；②淀粉浆能均匀地润湿物料，不易出现局部过湿的现象，且有良好的粘合作用，是应用较广泛的粘合剂；③淀粉浆的来源广，成本低，方便操作；④淀粉浆的味道比较浅，不会掩盖灵芝菌丝粉原有的味道；
4、灵芝菌丝粉中有易被氧化的脂类物质和三萜类成分，加工和贮藏过程中极易被氧化不仅会引起酸败产生不良气味，也会造成营养成分的损失，在加工过程中加入乳酸钙加以保护，起到抗氧化作用的同时，可以缓解菌丝粉的酸涩感；
5、首次采用灵芝、根霉、酵母菌等菌种混合培养，菌种成活率高、菌丝品质高、抗杂菌能力强。
具体实施方式
以下实施例中的菌种来源如下：多孔菌科真菌赤芝（Ganodermaluncidum），山东省鱼台县微生物食用菌研究所制造；
选根霉（甜酒曲），（安琪酵母股份有限公司制造）；
子囊菌科酵母菌（啤酒酵母），（安琪酵母股份有限公司制造）。
实施例1
1、培养基的制备
（1）谷物培养基的制备
将100kg小麦、玉米、小米、黄豆按1:1.5：0.6：1的质量比进行挤压破碎和混合后，加水至含水量37%，分装至发酵瓶中，然后进行高温灭菌，灭菌条件：121℃，40min，灭菌结束后待培养基温度降至27℃时，放入无菌接种室待接种用；
（2）斜面培养基的制备
红薯提取液的制备：将红薯洗净去皮，按照红薯：水=1:0.8的比例加入到蒸煮锅中，煮开后小火保持微沸15分钟，红薯煮至糜烂，过4层纱布过滤，取其滤液，即为红薯提取液。以下同。
按照质量百分比葡萄糖15%、黄豆粉15%、玉米粉10%、小麦粉13%、磷酸二氢钾0.8%、硫酸镁1%、琼脂5%、蛋白胨7%、余为红薯提取液的比例配置，pH7.0，分装至试管中，混匀后高温灭菌，灭菌条件：121℃，40min；灭菌结束10min后取出试管，趁热摆成斜面，将斜面培养基转移至36℃培养箱中恒温培养18h，无菌落长出方可取出备用；
（3）摇瓶培养基的制备
按照质量百分比葡萄糖16%、黄豆粉36%、玉米粉10%、小麦粉10%、磷酸二氢钾0.5%、硫酸镁0.5%、蛋白胨7%、余为红薯提取液的比例配置，pH6.8，混匀后高温灭菌，灭菌条件：121℃，40min；
（4）发酵罐培养基的制备
按照黄豆粉475g/kg，淀粉300g/kg，葡萄糖150g/kg，磷酸二氢钾10g/kg，硫酸镁5g/kg，蛋白胨70g/kg的配比进行制备；黄豆粉与蛋白粉混合后加水溶解稀释，加热至60℃后依次加入葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁和蛋白胨，将混合充分后的混合液加入到反应罐中，继续对混合液加水稀释至1000L，对反应罐进行加热，温度升至100℃时进行一次排气，继续升温至121℃时关闭呼吸器进出口开关，使混合培养基在121℃、0.15MPa环境中灭菌30min，灭菌完毕，关闭加热***使混合培养基降温至26℃保温待用；
2、菌种的活化
(1)选用多孔菌科真菌赤芝，接种到斜面培养基进行培养，培养条件为：26～30℃，2～3天，待斜面菌丝长满，即作为大量生产的母种a；
(2)选根霉，接种到斜面培养基进行培养，培养条件为：28～30℃，1～2天，待斜面菌丝长满，即作为大量生产的母种b；
(3)选用子囊菌科酵母菌，接种到斜面培养基进行培养，培养条件为：28～30℃，1～2天，待斜面菌丝长满，即作为大量生产的母种c；
(4)取上述母种a、b、c菌块按照质量比1:2:1.5的比例接种至摇瓶培养基，26～30℃培养至菌块长成圆形后置入摇床，恒温28～30℃培养60～70h，至有菌丝球形成后即得液体培养菌种；
3、接种及培养
将液体培养菌种接种到已制备好的谷物培养基中，在27℃下避光培养16天；
4、烘干
将培养好的菌丝体从固体培养基中挖出，利用热风干燥机对其进行烘干处理，至水分含量低于2%止；
5、膨化
将烘干后的菌丝置入混合搅拌机中加水搅拌，当水含量达到16%时进行膨化，膨化温度为116℃；
6、粉碎
用超微粉碎机将膨化的复合菌丝粉进行粉碎，得到粒径为200目的灵芝菌丝超微粉；灵芝菌丝粉10kg，加入乳酸钙60g，搅拌并混匀后依次加入15kg质量浓度为70%的乙醇溶液和200g质量浓度为18%的淀粉糊溶液，在混合机内搅拌18min，然后过15目筛，得到颗粒状灵芝菌丝粉制品；向灵芝菌丝粉颗粒中加入5g低取代羟丙基纤维素后用ZP35A旋转式压片机对颗粒状灵芝粉制品进行压片，压片时控制片重为0.2g，片厚度为0.15mm。
实施例2
1、培养基的制备
（1）谷物培养基的制备
将100kg小麦、玉米、小米、黄豆按1:1.8：0.8：1.1的质量比进行挤压破碎和混合后，加水至含水量38%，分装至发酵瓶中，然后进行高温灭菌，灭菌条件：121℃，40min，灭菌结束后待培养基温度降至30℃时，放入无菌接种室待接种用；
（2）斜面培养基的制备
按质量百分比葡萄糖20%、黄豆粉40%、玉米粉11%、小麦粉12%、磷酸二氢钾0.3%、硫酸镁0.2%、琼脂3%、蛋白胨6.5%、余为红薯提取液的比例配置，pH7.0，分装至试管中，混匀后高温灭菌，灭菌条件：122℃，50min；灭菌结束13min后取出试管，趁热摆成斜面，将斜面培养基转移至32℃培养箱中恒温培养19h，无菌落长出方可取出备用；
（3）摇瓶培养基的制备
按照质量百分比葡萄糖21%、玉米粉11%、小麦粉12%、黄豆粉40%、磷酸二氢钾0.3%、硫酸镁0.7%、蛋白胨3%、余为红薯提取液的比例配置，pH7.0，混匀后高温灭菌，灭菌条件：122℃，50min；
（4）发酵罐培养基的制备
按照黄豆粉450g/kg，淀粉300g/kg，葡萄糖180g/kg，磷酸二氢钾6g/kg，硫酸镁4g/kg，蛋白胨70g/kg的配比进行制备；黄豆粉与蛋白粉混合后加水溶解稀释，加热至65℃后依次加入葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁和蛋白胨，将混合充分后的混合液加入到反应罐中，继续对混合液加水稀释至1000L，对反应罐进行加热，温度升至103℃时进行一次排气，继续升温至122℃时关闭呼吸器进出口开关，使混合培养基在122℃、0.16MPa环境中灭菌30min，灭菌完毕，关闭加热***使混合培养基降温至27℃保温待用；
2、菌种的活化
(1)选用多孔菌科真菌赤芝，接种到斜面培养基进行培养，培养条件为：26～30℃，2～3天，待斜面菌丝长满，即作为大量生产的母种a；
(2)选根霉，接种到斜面培养基进行培养，培养条件为：28～30℃，1～2天，待斜面菌丝长满，即作为大量生产的母种b；
(3)选用子囊菌科酵母菌，接种到斜面培养基进行培养，培养条件为：28～30℃，1～2天，待斜面菌丝长满，即作为大量生产的母种c；
(4)取上述母种a、b、c菌块按照质量比1:2:1.5的比例接种至摇瓶培养基，26～30℃培养至菌块长成圆形后置入摇床，恒温28～30℃培养60～70h，至有菌丝球形成后即得液体培养菌种；
3、接种及培养
将液体培养菌种接种到已制备好的谷物培养基中，在28℃下避光培养19天；
4、烘干
将培养好的菌丝体从固体培养基中挖出，利用热风干燥机对其进行烘干处理，至水分含量低于2%止；
5、膨化
将烘干后的菌丝置入混合搅拌机中加水搅拌，当水含量达到17%时进行膨化，膨化温度为115℃；
6、粉碎
用超微粉碎机将膨化的复合菌丝粉进行粉碎，得到粒径为200目的灵芝菌丝超微粉；
灵芝菌丝粉10kg，加入抗氧化剂80g，搅拌并混匀后依次加入10kg质量浓度为70%的乙醇溶液和200g质量浓度为15%的淀粉糊溶液，在混合机内搅拌25min，然后过20目筛，得到颗粒状灵芝菌丝粉制品；向灵芝菌丝粉颗粒中加入5g低取代羟丙基纤维素后用ZP35A旋转式压片机对颗粒状灵芝粉制品进行压片，压片时控制片重为0.25g，片厚度为0.18mm。
实施例3
1、培养基的制备
（1）谷物培养基的制备
将100kg小麦、玉米、小米、黄豆按1:2：1：1.2的质量比进行挤压破碎和混合后，加水至含水量40%，分装至发酵瓶中，然后进行高温灭菌，灭菌条件：123℃，60min，灭菌结束后待培养基温度降至35℃时，放入无菌接种室待接种用；
（2）斜面培养基的制备
按照质量百分比葡萄糖18%、玉米粉12%、小麦粉13%、黄豆粉38%、磷酸二氢钾0.8%、硫酸镁0.2%、琼脂4%、蛋白胨7%、余为红薯提取液的比例配置，pH7.0，分装至试管中，混匀后高温灭菌，灭菌条件：123℃，60min；灭菌结束15min后取出试管，趁热摆成斜面，将斜面培养基转移至36℃培养箱中恒温培养20h，无菌落长出方可取出备用；
（3）摇瓶培养基的制备
按照质量百分比葡萄糖20%、玉米粉12%、小麦粉13%、黄豆粉38%、磷酸二氢钾0.8%、硫酸镁0.2%、蛋白胨3%、余为红薯提取液的比例配制，pH7.2，混匀后高温灭菌，灭菌条件：123℃，60min；
（4）发酵罐培养基的制备
按照黄豆粉500g/kg，淀粉270g/kg，葡萄糖180g/kg，磷酸二氢钾10g/kg，硫酸镁5g/kg，蛋白胨35g/kg的配比进行制备；黄豆粉与蛋白粉混合后加水溶解稀释，加热至70℃后依次加入葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁和蛋白胨，将混合充分后的混合液加入到反应罐中，继续对混合液加水稀释至1000L，对反应罐进行加热，温度升至105℃时进行一次排气，继续升温至123℃时关闭呼吸器进出口开关，使混合培养基在123℃、0.17MPa环境中灭菌30min，灭菌完毕，关闭加热***使混合培养基降温至28℃保温待用；
2、菌种的活化
(1)选用多孔菌科真菌赤芝，接种到斜面培养基进行培养，培养条件为：26～30℃，2～3天，待斜面菌丝长满，即作为大量生产的母种a；
(2)选根霉，接种到斜面培养基进行培养，培养条件为：28～30℃，1～2天，待斜面菌丝长满，即作为大量生产的母种b；
(3)选用子囊菌科酵母菌，接种到斜面培养基进行培养，培养条件为：28～30℃，1～2天，待斜面菌丝长满，即作为大量生产的母种c；
(4)取上述母种a、b、c菌块按照质量比1:2:1.5的比例接种至摇瓶培养基，26～30℃培养至菌块长成圆形后置入摇床，恒温28～30℃培养60～70h，至有菌丝球形成后即得液体培养菌种；
3、接种及培养
将液体培养菌种接种到已制备好的谷物培养基中，在30℃下避光培养16-22天；
4、烘干
将培养好的菌丝体从固体培养基中挖出，利用热风干燥机对其进行烘干处理，至水分含量低于2%止；
5、膨化
将烘干后的菌丝置入混合搅拌机中加水搅拌，当水含量达到20%时进行膨化，膨化温度为125℃；
6、粉碎
用超微粉碎机将膨化的复合菌丝粉进行粉碎，得到粒径为200目的灵芝菌丝超微粉；
灵芝菌丝粉10kg，加入抗氧化剂200g，搅拌并混匀后依次加入10kg质量浓度为70%的乙醇溶液和200g质量浓度为20%的淀粉糊溶液，在混合机内搅拌10min，然后过8目筛，得到颗粒状灵芝菌丝粉制品；向灵芝菌丝粉颗粒中加入5g低取代羟丙基纤维素后用ZP35A旋转式压片机对颗粒状灵芝粉制品进行压片，压片时控制片重为0.35g，片厚度为0.2mm。
Claims (5)
1.一种灵芝菌丝片的生产方法，其包括以下步骤：制备培养基、活化菌种、接种及培养、烘干、膨化、粉碎、混合、制粒、压片，其特征在于，所述制备培养基的步骤包括：
A:谷物培养基的制备
将小麦、玉米、小米、黄豆按质量份数比1:1.5～2:0.6～1:1～1.2，加水至含水量质量百分比35～40%，分装至发酵瓶中，然后进行高温灭菌，灭菌条件：121～123℃，40～60min；灭菌结束后，待培养基温度降至27～35℃时，放入无菌接种室待接种用；
B:斜面培养基的制备
按照质量百分比葡萄糖15～20%、黄豆粉15～17%、玉米粉10～12%、小麦粉10～13%、磷酸二氢钾0.3～0.8%、硫酸镁0.2～1%、琼脂3～5%、蛋白胨3～7%、余为红薯提取液的比例配置，pH调至7.0，分装至试管中，混匀后高温灭菌，灭菌条件：121～123℃，40～60min；灭菌结束10～15min后取出试管，摆成斜面，将斜面培养基转移至28～36℃培养箱中恒温培养18～20h，无菌落长出方可取出备用；
C:摇瓶培养基的制备
按照质量百分比葡萄糖16～21%、黄豆粉15～17%、玉米粉10～12%、小麦粉10～13%、磷酸二氢钾0.3～0.8%、硫酸镁0.2～1%、蛋白胨3～7%、余为红薯提取液的比例配置，pH6.8～7.2，混匀后高温灭菌，灭菌条件：121～123℃，40～60min；
D:发酵罐培养基的制备
按照黄豆粉450～500g/kg、淀粉250～300g/kg、葡萄糖100～180g/kg、磷酸二氢钾5～10g/kg、硫酸镁2～8g/kg、蛋白胨30～70g/kg的配比进行制备；黄豆粉与蛋白粉混合后加水溶解稀释，加热至60～70℃后依次加入葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁和蛋白胨，将混合充分后的混合液加入到反应罐中，继续对混合液加水稀释至1000L，对反应罐进行加热，温度升至100～105℃时进行一次排气，继续升温至121～123℃时,关闭呼吸器进出口开关，使混合培养基在121～123℃、0.15～0.17MPa环境中灭菌30min，灭菌完毕，关闭加热***使混合培养基降温至25～28℃保温待用；
所述红薯提取液的制备步骤包括：将红薯洗净去皮，放到蒸煮锅中用水煮，红薯煮至糜烂，用纱布过滤，取其滤液，即为红薯提取液；
所述活化菌种步骤包括：
(1)选用多孔菌科真菌赤芝，接种到斜面培养基进行培养，培养条件为：26～30℃，2～3天，待斜面菌丝长满，即作为大量生产的母种a；
(2)选根霉，接种到斜面培养基进行培养，培养条件为：28～30℃，1～2天，待斜面菌丝长满，即作为大量生产的母种b；
(3)选用子囊菌科酵母菌，接种到斜面培养基进行培养，培养条件为：28～30℃，1～2天，待斜面菌丝长满，即作为大量生产的母种c；
(4)取上述母种a、b、c菌块按照质量比1:2:1.5的比例接种至摇瓶培养基，26～30℃培养至菌块长成圆形后置入摇床，恒温28～30℃培养60～70h，至有菌丝球形成后即得液体培养菌种；
所述接种及培养步骤中，将液体培养菌种接种到已制备好的谷物培养基中，在25～30℃下避光培养16～22天；
所述混合步骤中，向灵芝菌丝粉中加入抗氧化剂，搅拌并混匀；
所述制粒步骤中，分别加入湿润剂溶液和粘合剂溶液，在混合机内搅拌，然后过筛，得到颗粒状灵芝菌丝粉制品；
所述压片步骤中，添加崩解剂并混匀，选用旋转式压片机对颗粒状灵芝粉制品进行压片。
2.根据权利要求1所述的灵芝菌丝片的制备方法，其特征在于，所述混合步骤中所使用抗氧剂为乳酸钙。
3.根据权利要求1所述的灵芝菌丝片的制备方法，其特征在于，所述制粒步骤中所使用湿润剂为无水乙醇。
4.根据权利要求1所述的灵芝菌丝片的制备方法，其特征在于，所述制粒步骤中所使用粘合剂为淀粉糊。
5.根据权利要求1所述的灵芝菌丝片的制备方法，其特征在于，所述压片步骤中所用崩解剂为低取代羟丙基纤维素。
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