CN101481658A - 一种新型的灵芝菌丝粉生产工艺 - Google Patents

Abstract

本发明公布一种新型的灵芝菌丝粉生产工艺，它结合了液体发酵和固体发酵的各自优点，具有安全卫生、成本低廉、高效环保的特点，能有效的提取灵芝菌丝粉，菌丝干基收率≥25％，菌丝多糖含量≥8％。本发明不但完整保留了灵芝菌丝粉的有效活性，与野生灵芝效果一致，而且生产工艺流程连续、简单。

Description

一种新型的灵芝菌丝粉生产工艺

技术领域

本专利涉及一种新型的灵芝菌丝粉生产工艺，特别涉及一种固液结合发酵法生产灵芝菌丝粉的工艺。

背景技术

灵芝(Ganoderma lucidum)又名灵芝草、菌灵芝、木灵芝，是担子菌纲多孔菌科灵芝属。自古以来，在东亚地区人们就将其作为药物或补品食用；现在，灵芝药食兼用，《中华人民共和国药典》(2000版，1部)收载了灵芝(赤芝和紫芝子实体)作为法定中药材；2003年10月份获***批准作为新资源食品；《美国草药药典与治疗概要》也收载了灵芝。

现代医学研究发现灵芝中主要有效成分为灵芝多糖，其保健功能主要集中在调节免疫、抗肿瘤、降血压、降血脂、护肝、抗病毒等方面。在灵芝药食价值被广泛认可的同时，灵芝或灵芝多糖产品的安全性、年产量、成本是限制灵芝市场应用的瓶颈。

目前，由于野生自然灵芝资源有限；同时人工栽培灵芝，获得灵芝子实体，虽然能将灵芝多糖提取出来，但是无法将灵芝培养基所带来的污染及农药残留物去除掉，而且多糖的收益率也非常低、只有8—15％。灵芝菌丝体的多糖含量要明显高于子实体的多糖含量，菌丝体的细胞壁较子实体细胞壁结构疏松，细胞中的灵芝多糖较容易被提取。发酵法可通过调节培养基组成、培养温度和时间等，在短时间内得到大量的灵芝菌丝体，这些菌丝体的化学组成或生理功能，经分析表明与农业栽培得到的灵芝子实体是很相似的。国内外主要采取发酵工艺，获取灵芝菌丝体，克服了污染和农药残留，有两种发酵方法：一种是采用菌种液体发酵技术获得灵芝菌丝体；另一种是采用固体发酵技术获得灵芝菌丝体。第一种液体发酵技术设备投资大、占地面积大，特别是用水量相当大，多糖的收益率也不高，最高的一般能达到45％左右，一般的只能达到20％左右，而引活性成分损失大，多糖的生产量低。第二种方法固体发酵技术虽然收益高，但是容易染菌，菌种纯化条件严格，而且发酵周期长、难以工业化。

发明内容

本发明的目的是提供一种灵芝菌丝粉的生产工艺，它结合了液体发酵和固体发酵的各自优点，利用粮作物残渣为原料，生产工艺流程连续、简单，重金属、细菌含量符合国家食品标准，且生产过程中无污染，是一种安全卫生、成本低廉、高效环保的方法，提取得灵芝菌丝粉，完整保留了其有效活性，与野生灵芝效果一致。其中菌丝干基收率≥25％，菌丝多糖含量≥8％，即100kg培养基(干重)，可25g以上的灵芝菌丝，菌丝中灵芝多糖含量≥8％。

本发明所提供的生产工艺是这样实施的：

1.培养基准备。

固体培养基制备：粮作物魔芋渣和木薯渣重量比为1：1粉碎混合，然后加水，加水量为粮作物干重的三分之二。接种量为粮作物干重的10％，25-30℃培养12-16天即成。灭菌条件为：121℃，1小时。

PDA斜面培养基：PDA固体(马铃薯提取液1.0L，蔗糖20.0g，KH₂PO₄3.0g，MgSO₄.7H₂O1.5g，蛋白胨1.0g，琼脂15.0g，pH7.0)灭菌条件均为：121℃，30min；

液体种子培养基：PDA液体(马铃薯提取液1.0L，蔗糖20.0g，KH₂PO₄ 3.0g，MgSO_4·7H₂O 1.5g，蛋白胨1.0g，pH7.0)，灭菌条件均为：121℃，30min。

2.菌种活化。

将灵芝属灵芝种Ganoderma lucidum菌种接种到PDA斜面培养基上，25-30℃培养3-4天，活化。活化好的菌种取1cm²大小的菌苔3-4块接种到液体种子培养基(500mL三角瓶，装液量为200mL)中，25-30℃，150转/分钟培养4-5天，获得一级种子。按10％接种量的一级种子接种到种子液培养基(500mL三角瓶，装液量为200mL)中，25-30℃，150转/分钟培养3—4天，得到二级种子。

3.发酵。

将二级种子再接种瓶装固体培养基，拌匀，25-30℃下培养12-16天左右，直至袋中长满白色的菌丝为止。

4.烘干。

发酵结束后，将菌丝和培养基一起在50℃的烘箱中烘干，水分要求在5％以下。

5.粉碎。

将烘干的菌丝粉碎，要求小于80目。

6.灭菌，装瓶。

附图说明：

生产工艺简要流程如下：如图1

以下结合具体实施方式，对本发明进行进一步的说明。

具体实施方式

实施例1：

1.培养基准备。

固体培养基制备：粮作物魔芋渣100kg和玉米渣100kg粉碎混合，然后加水134L混匀。高温灭菌，灭菌条件为：121℃，1h。

斜面培养基制备：PDA固体(马铃薯提取液1.0L，蔗糖20.0g，KH₂PO₄ 3.0g，MgSO_4·7H₂O 1.5g，蛋白胨1.0g，琼脂15.0g，pH7.0)。高温灭菌，灭菌条件均为：121℃，30min；

液体种子培养基：PDA液体(马铃薯提取液1.0L，蔗糖20.0g，KH₂PO₄ 3.0g，MgSO_4·7H₂O 1.5g，蛋白胨1.0个g，pH7.0)。高温灭菌，灭菌条件均为：121℃，30min；

2.菌种活化。

将灵芝属灵芝种Ganoderma lucidum菌种接种到PDA斜面培养基上，28℃培养4d。

活化好的菌种取约1cm2大小的菌苔4块接种到种子液培养基(500mL三角瓶，装液量为200mL)中，28℃，150r/min培养5d，得到一级种子。将20g一级种子接种到种子液培养基(500mL三角瓶，装液量为200mL)中，28℃，150r/min培养7d，得到二级种子。

3.取二级种子20g再接种袋装的200g固体培养基中，拌匀，28℃下培养12天，袋中长满白色的菌丝。

4.发酵结束后，将菌丝和培养基一起在50℃的烘箱中烘干，直到水分在5％以下。

5.将烘干的菌丝粉碎，粉碎颗粒指标小于80目。

6.灭菌，装袋。

实施例2：

1.培养基准备。

固体培养基制备：粮作物红薯渣100kg和玉米渣100kg粉碎混合，然后加水134L混匀。高温灭菌，灭菌条件为：121℃，1h。

斜面培养基制备：PDA固体(马铃薯提取液1.0L，蔗糖20.0g，KH₂PO₄ 3.0g，MgSO_4·7H₂O 1.5g，蛋白胨1.0g，琼脂15.0g，pH7.0)。高温灭菌，灭菌条件均为：121℃，30min；

液体种子培养基：PDA液体(马铃薯提取液1.0L，蔗糖20.0g，KH₂PO₄ 3.0g，MgSO_4·7H₂O 1.5g，蛋白胨1.0g，pH7.0)。高温灭菌，灭菌条件均为：121℃，30min；

2.菌种活化。

将灵芝属灵芝种Ganoderma lucidum菌种接种到PDA斜面培养基上，28℃培养3d。

活化好的菌种取约1cm²大小的菌苔3块接种到种子液培养基(500mL三角瓶，装液量为100mL)中，28℃，150r/min培养4d，得到一级种子。将10g一级种子接种到种子液培养基(500mL三角瓶，装液量为100mL)中，28℃，150r/min培养5d，得到二级种子。

3.取二级种子10g再接种袋装的100g固体培养基中，拌匀，28℃下培养13天，袋中长满白色的菌丝。

4.发酵结束后，将菌丝和培养基一起在50℃的烘箱中烘干，直到水分在5％以下。

5.将烘干的菌丝粉碎，粉碎颗粒指标小于80目。

6.灭菌，装袋。

Claims (5)

1、一种粮作物的固体培养基，其特征在于：粮作物魔芋渣和木薯渣重量比为1：1粉碎混合，然后加水，加水量为粮作物干重的三分之二。接种量为粮作物干重的10％，25-30℃培养12-16天即成。灭菌条件为：121℃，1小时。

2、一种新型的灵芝菌丝体生产工艺，其特征在于：该工艺步骤如下：

a.将灵芝菌种Ganoderma lucidum接种到PDA斜面培养基上，25-30℃培养3-4天，活化；

b.活化好的菌种取1cm²大小的菌苔3-4块接种到液体种子培养基(500mL三角瓶，装液量为200mL)中，25-30℃，150转/分钟培养4-5天，获得一级种子；

c.将600mL(3瓶)一级种子液接种到液体种子培养基(500L发酵罐，装液量为300L)中，25-30℃，150转/分钟培养3—4天，得到二级种子；

d.将二级种子再接种瓶装固体培养基，拌匀，25-30℃下培养12-16天左右，直至袋中长满白色的菌丝为止；

e.将菌丝体烘干，粉碎。

3、根据权利要求2中a步骤所述的PDA斜面培养基，其特征在于：PDA固体(马铃薯提取液1.0L，蔗糖20.0g，KH₂PO₄ 3.0g，MgSO₄.7H₂O 1.5g，蛋白胨1.0g，琼脂15.0g，pH7.0)灭菌条件均为：121℃，30min。

4、根据权利要求2中a步骤所述的灵芝菌种，是灵芝属灵芝种Ganoderma lucidum。

5、根据权利要求2中b步骤所述的液体种子培养基，其特征在于：PDA液体(马铃薯提取液1.0L，蔗糖20.0g，KH₂PO₄ 3.0g，MgSO₄.7H₂O 1.5g，蛋白胨1.0g，pH7.0)，灭菌条件均为：121℃，30min。

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