CN101481658A - 一种新型的灵芝菌丝粉生产工艺 - Google Patents
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Abstract
本发明公布一种新型的灵芝菌丝粉生产工艺,它结合了液体发酵和固体发酵的各自优点,具有安全卫生、成本低廉、高效环保的特点,能有效的提取灵芝菌丝粉,菌丝干基收率≥25%,菌丝多糖含量≥8%。本发明不但完整保留了灵芝菌丝粉的有效活性,与野生灵芝效果一致,而且生产工艺流程连续、简单。
Description
技术领域
本专利涉及一种新型的灵芝菌丝粉生产工艺,特别涉及一种固液结合发酵法生产灵芝菌丝粉的工艺。
背景技术
灵芝(Ganoderma lucidum)又名灵芝草、菌灵芝、木灵芝,是担子菌纲多孔菌科灵芝属。自古以来,在东亚地区人们就将其作为药物或补品食用;现在,灵芝药食兼用,《中华人民共和国药典》(2000版,1部)收载了灵芝(赤芝和紫芝子实体)作为法定中药材;2003年10月份获***批准作为新资源食品;《美国草药药典与治疗概要》也收载了灵芝。
现代医学研究发现灵芝中主要有效成分为灵芝多糖,其保健功能主要集中在调节免疫、抗肿瘤、降血压、降血脂、护肝、抗病毒等方面。在灵芝药食价值被广泛认可的同时,灵芝或灵芝多糖产品的安全性、年产量、成本是限制灵芝市场应用的瓶颈。
目前,由于野生自然灵芝资源有限;同时人工栽培灵芝,获得灵芝子实体,虽然能将灵芝多糖提取出来,但是无法将灵芝培养基所带来的污染及农药残留物去除掉,而且多糖的收益率也非常低、只有8—15%。灵芝菌丝体的多糖含量要明显高于子实体的多糖含量,菌丝体的细胞壁较子实体细胞壁结构疏松,细胞中的灵芝多糖较容易被提取。发酵法可通过调节培养基组成、培养温度和时间等,在短时间内得到大量的灵芝菌丝体,这些菌丝体的化学组成或生理功能,经分析表明与农业栽培得到的灵芝子实体是很相似的。国内外主要采取发酵工艺,获取灵芝菌丝体,克服了污染和农药残留,有两种发酵方法:一种是采用菌种液体发酵技术获得灵芝菌丝体;另一种是采用固体发酵技术获得灵芝菌丝体。第一种液体发酵技术设备投资大、占地面积大,特别是用水量相当大,多糖的收益率也不高,最高的一般能达到45%左右,一般的只能达到20%左右,而引活性成分损失大,多糖的生产量低。第二种方法固体发酵技术虽然收益高,但是容易染菌,菌种纯化条件严格,而且发酵周期长、难以工业化。
发明内容
本发明的目的是提供一种灵芝菌丝粉的生产工艺,它结合了液体发酵和固体发酵的各自优点,利用粮作物残渣为原料,生产工艺流程连续、简单,重金属、细菌含量符合国家食品标准,且生产过程中无污染,是一种安全卫生、成本低廉、高效环保的方法,提取得灵芝菌丝粉,完整保留了其有效活性,与野生灵芝效果一致。其中菌丝干基收率≥25%,菌丝多糖含量≥8%,即100kg培养基(干重),可25g以上的灵芝菌丝,菌丝中灵芝多糖含量≥8%。
本发明所提供的生产工艺是这样实施的:
1.培养基准备。
固体培养基制备:粮作物魔芋渣和木薯渣重量比为1:1粉碎混合,然后加水,加水量为粮作物干重的三分之二。接种量为粮作物干重的10%,25-30℃培养12-16天即成。灭菌条件为:121℃,1小时。
PDA斜面培养基:PDA固体(马铃薯提取液1.0L,蔗糖20.0g,KH2PO43.0g,MgSO4.7H2O1.5g,蛋白胨1.0g,琼脂15.0g,pH7.0)灭菌条件均为:121℃,30min;
液体种子培养基:PDA液体(马铃薯提取液1.0L,蔗糖20.0g,KH2PO4 3.0g,MgSO4·7H2O 1.5g,蛋白胨1.0g,pH7.0),灭菌条件均为:121℃,30min。
2.菌种活化。
将灵芝属灵芝种Ganoderma lucidum菌种接种到PDA斜面培养基上,25-30℃培养3-4天,活化。活化好的菌种取1cm2大小的菌苔3-4块接种到液体种子培养基(500mL三角瓶,装液量为200mL)中,25-30℃,150转/分钟培养4-5天,获得一级种子。按10%接种量的一级种子接种到种子液培养基(500mL三角瓶,装液量为200mL)中,25-30℃,150转/分钟培养3—4天,得到二级种子。
3.发酵。
将二级种子再接种瓶装固体培养基,拌匀,25-30℃下培养12-16天左右,直至袋中长满白色的菌丝为止。
4.烘干。
发酵结束后,将菌丝和培养基一起在50℃的烘箱中烘干,水分要求在5%以下。
5.粉碎。
将烘干的菌丝粉碎,要求小于80目。
6.灭菌,装瓶。
附图说明:
生产工艺简要流程如下:如图1
以下结合具体实施方式,对本发明进行进一步的说明。
具体实施方式
实施例1:
1.培养基准备。
固体培养基制备:粮作物魔芋渣100kg和玉米渣100kg粉碎混合,然后加水134L混匀。高温灭菌,灭菌条件为:121℃,1h。
斜面培养基制备:PDA固体(马铃薯提取液1.0L,蔗糖20.0g,KH2PO4 3.0g,MgSO4·7H2O 1.5g,蛋白胨1.0g,琼脂15.0g,pH7.0)。高温灭菌,灭菌条件均为:121℃,30min;
液体种子培养基:PDA液体(马铃薯提取液1.0L,蔗糖20.0g,KH2PO4 3.0g,MgSO4·7H2O 1.5g,蛋白胨1.0个g,pH7.0)。高温灭菌,灭菌条件均为:121℃,30min;
2.菌种活化。
将灵芝属灵芝种Ganoderma lucidum菌种接种到PDA斜面培养基上,28℃培养4d。
活化好的菌种取约1cm2大小的菌苔4块接种到种子液培养基(500mL三角瓶,装液量为200mL)中,28℃,150r/min培养5d,得到一级种子。将20g一级种子接种到种子液培养基(500mL三角瓶,装液量为200mL)中,28℃,150r/min培养7d,得到二级种子。
3.取二级种子20g再接种袋装的200g固体培养基中,拌匀,28℃下培养12天,袋中长满白色的菌丝。
4.发酵结束后,将菌丝和培养基一起在50℃的烘箱中烘干,直到水分在5%以下。
5.将烘干的菌丝粉碎,粉碎颗粒指标小于80目。
6.灭菌,装袋。
实施例2:
1.培养基准备。
固体培养基制备:粮作物红薯渣100kg和玉米渣100kg粉碎混合,然后加水134L混匀。高温灭菌,灭菌条件为:121℃,1h。
斜面培养基制备:PDA固体(马铃薯提取液1.0L,蔗糖20.0g,KH2PO4 3.0g,MgSO4·7H2O 1.5g,蛋白胨1.0g,琼脂15.0g,pH7.0)。高温灭菌,灭菌条件均为:121℃,30min;
液体种子培养基:PDA液体(马铃薯提取液1.0L,蔗糖20.0g,KH2PO4 3.0g,MgSO4·7H2O 1.5g,蛋白胨1.0g,pH7.0)。高温灭菌,灭菌条件均为:121℃,30min;
2.菌种活化。
将灵芝属灵芝种Ganoderma lucidum菌种接种到PDA斜面培养基上,28℃培养3d。
活化好的菌种取约1cm2大小的菌苔3块接种到种子液培养基(500mL三角瓶,装液量为100mL)中,28℃,150r/min培养4d,得到一级种子。将10g一级种子接种到种子液培养基(500mL三角瓶,装液量为100mL)中,28℃,150r/min培养5d,得到二级种子。
3.取二级种子10g再接种袋装的100g固体培养基中,拌匀,28℃下培养13天,袋中长满白色的菌丝。
4.发酵结束后,将菌丝和培养基一起在50℃的烘箱中烘干,直到水分在5%以下。
5.将烘干的菌丝粉碎,粉碎颗粒指标小于80目。
6.灭菌,装袋。
Claims (5)
1、一种粮作物的固体培养基,其特征在于:粮作物魔芋渣和木薯渣重量比为1:1粉碎混合,然后加水,加水量为粮作物干重的三分之二。接种量为粮作物干重的10%,25-30℃培养12-16天即成。灭菌条件为:121℃,1小时。
2、一种新型的灵芝菌丝体生产工艺,其特征在于:该工艺步骤如下:
a.将灵芝菌种Ganoderma lucidum接种到PDA斜面培养基上,25-30℃培养3-4天,活化;
b.活化好的菌种取1cm2大小的菌苔3-4块接种到液体种子培养基(500mL三角瓶,装液量为200mL)中,25-30℃,150转/分钟培养4-5天,获得一级种子;
c.将600mL(3瓶)一级种子液接种到液体种子培养基(500L发酵罐,装液量为300L)中,25-30℃,150转/分钟培养3—4天,得到二级种子;
d.将二级种子再接种瓶装固体培养基,拌匀,25-30℃下培养12-16天左右,直至袋中长满白色的菌丝为止;
e.将菌丝体烘干,粉碎。
3、根据权利要求2中a步骤所述的PDA斜面培养基,其特征在于:PDA固体(马铃薯提取液1.0L,蔗糖20.0g,KH2PO4 3.0g,MgSO4.7H2O 1.5g,蛋白胨1.0g,琼脂15.0g,pH7.0)灭菌条件均为:121℃,30min。
4、根据权利要求2中a步骤所述的灵芝菌种,是灵芝属灵芝种Ganoderma lucidum。
5、根据权利要求2中b步骤所述的液体种子培养基,其特征在于:PDA液体(马铃薯提取液1.0L,蔗糖20.0g,KH2PO4 3.0g,MgSO4.7H2O 1.5g,蛋白胨1.0g,pH7.0),灭菌条件均为:121℃,30min。
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