CN103386005B - 一种中药组合物在制备治疗学习记忆障碍的药物中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种中药组合物在制备治疗学习记忆障碍的药物中的应用。本发明中药组合物是由菟丝子、枸杞子、五味子等中药材制成的纯中药制剂,试验证明该中药组合物具有提高学习和记忆能力。
Description
技术领域
本发明涉及一种中药组合的新用途,具体的涉及该中药组合物在制备治疗学习记忆障碍的药物中的应用。
背景技术
学习记忆障碍是指机体在一定诱因下出现学习和记忆能力下降的一种病理状态,根据其诱因不同可以将其分为两类。一类属于衰老性学习记忆障碍,主要诱因为器官或功能的衰退造成的学习和记忆功能的下降,常见的有衰老、更年期、老年痴呆、脑供血不足等;另一类属于疲倦性学习记忆障碍,主要是由于长期或缓慢的应激损害造成的学习和记忆功能的下降,常见得有亚健康,慢性疲劳,长期用脑过度等。
目前,还没有常规的特效药物治疗学习和记忆障碍。
一般来说衰老、更年期、老年痴呆、脑供血不足等都会造成机体特别是脑部的功能衰退,引起学习和记忆力的下降,现代医学认为与脑部海马体的功能下降有关,在医学试验中常常采用东莨菪碱阻断其神经通络,或者D-半乳糖造成衰老的模型来进行药物筛选或干预研究。
对于长期或缓慢的应激损害造成的学习和记忆功能的下降,一般是由于随着现实社会中人们生活节奏的加快、激烈的竞争以及突发的生活事件,应激所致的各种心身疾病越来越引起人们重视。资料表明,适度应激对机体有利无害,但过强、持久的应激可使机体免疫功能低下,就影响和改变中枢神经***中与行为相关的神经元的形态和功能,造成学习和记忆力的下降,目前医学试验中常采用剥夺睡眠的方法来制造动物模型进行药物筛选和干预研究。
ZL 02146569.X公开了一种药物组合物,并公开了该该药物组合物具有治疗阳痿早泄,腰膝酸痛,体倦乏力的作用。
发明内容
本发明目的是提供一种中药组合物在制备治疗学习记忆障碍的药物中的应用,该中药组合物由如下重量份的原料药制成:
菟丝子150-350、枸杞子100-200、五味子30-60、蛇床子20-50、金樱子20-50、韭菜子20-50、巴戟天20-50、肉苁蓉20-50、生地黄30-60、川牛膝20-50、淫羊藿40-100、覆盆子20-50、人参15-35、鹿茸10-25、海马15-35、川楝子15-35。
该制备治疗学习记忆障碍的药物的该中药组合物原料药的重量份可优选为:
菟丝子150、枸杞子200、五味子30、蛇床子50、金樱子20、韭菜子20、巴戟天50、肉苁蓉20、生地黄30、川牛膝50、淫羊藿40、覆盆子50、人参15、鹿茸25、海马15、川楝子35。
还可以优选为:
菟丝子350、枸杞子100、五味子60、蛇床子20、金樱子50、韭菜子50、巴戟天20、肉苁蓉50、生地黄60、川牛膝20、淫羊藿100、覆盆子20、人参35、鹿茸10、海马35、川楝子15。
还可以优选为:
菟丝子250、枸杞子138、五味子46、蛇床子35、金樱子35、韭菜子35、巴戟天35、肉苁蓉35、生地黄46、川牛膝35、淫羊藿70、覆盆子35、人参25、鹿茸16、海马21、川楝子23。
还可以优选为:
菟丝子250、枸杞子150、五味子45、蛇床子30、金樱子30、韭菜子30、巴戟天30、肉苁蓉30、生地黄45、川牛膝30、淫羊藿70、覆盆子30、人参20、鹿茸19、海马20、川楝子20。
在动物实验中,本发明中药组合物对于各种学习和记忆障碍模型均有显著疗效,可以证实该中药组合物具有治疗学习记忆障碍的作用。
为了实现本发明的目的,将该中药组合物制成各种药物剂型,理论上本发明中药组合物可以按照制剂一般方法,例如,范碧亭《中药药剂学》(上海科学出版社1997年12月第1版)记载的制备工艺,制成任何剂型,根据其适用对象和适应症优选为为汤剂、胶囊剂、片剂、颗粒剂、散剂或丸剂。
为使上述剂型能够实现,需在制备这些剂型时加入药学可接受的辅料,例如:填充剂、崩解剂、润滑剂、助悬剂、粘合剂、甜味剂、矫味剂、防腐剂、基质等。填充剂包括:淀粉、预胶化淀粉、乳糖、甘露醇、甲壳素、微晶纤维素、蔗糖等;崩解剂包括:淀粉、预胶化淀粉、微晶纤维素、羧甲基淀粉钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、低取代羟丙纤维素、交联羧甲基纤维素钠等;润滑剂包括:硬脂酸镁、十二烷基硫酸钠、滑石粉、二氧化硅等;助悬剂包括:聚乙烯吡咯烷酮、微晶纤维素、蔗糖、琼脂、羟丙基甲基纤维素等;粘合剂包括,淀粉浆、聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基甲基纤维素等;甜味剂包括:糖精钠、阿斯帕坦、蔗糖、甜蜜素、甘草次酸等;矫味剂包括:甜味剂及各种香精;防腐剂包括:尼泊金类、苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸及其盐类、苯扎溴铵、醋酸氯乙定、桉叶油等;基质包括:PEG6000,PEG4000,虫蜡等。
为实现制成成药的目的,对该中药组合物中的部分或者全部药材进行必要的提取或者粉碎,但并不排除全部煎汤服用。
本发明胶囊剂优选为如下方法制备:
a、按比例称取蛇床子、菟丝子、五味子、淫羊藿,加6-10倍量70%乙醇,回流提取1-3次,每次1-3小时,滤过,合并滤液,减压回收乙醇至无醇味,得醇提浸膏;
b、将步骤a醇提后的药材残渣与比例量的枸杞子、生地黄、覆盆子、金樱子、韭菜子、巴戟天、川楝子合并,加7-12倍量水煎煮1-3次,每次1-3小时,滤过,合并滤液,与步骤a所得醇提浸膏混合,减压浓缩至在60℃测定相对密度为1.25-1.30,得浸膏;
c、按比例称取人参、鹿茸、海马、肉苁蓉、川牛膝,粉碎成细粉与步骤b所得浸膏混合均匀,60-70℃干燥,粉碎,过筛,填充胶囊。
进一步优选为如下方法制备:
a、按比例称取蛇床子、菟丝子、五味子、淫羊藿,加8倍量70%乙醇,回流提取2次,每次2小时,滤过,合并滤液,减压回收乙醇至无醇味,得醇提浸膏;
b、将步骤a醇提后的药材残渣与比例量的枸杞子、生地黄、覆盆子、金樱子、韭菜子、巴戟天、川楝子合并,加9倍量水煎煮2次,每次2小时,滤过,合并滤液,与步骤a所得醇提浸膏混合,减压浓缩至在60℃测定相对密度为1.25-1.30,得浸膏;
c、按比例称取人参、鹿茸、海马、肉苁蓉、川牛膝,粉碎成细粉与步骤b所得浸膏混合均匀,60-70℃干燥,粉碎,过筛,填充胶囊。
在该技术方案中所述提取溶剂的倍数是指药材(干重)与溶剂的重量体积比,即1g药材对应1ml提取溶剂。
本发明药物组合物的用量,折算成原料药材的重量,为每日5-30克,分2-4次服用,优选为每日6.87克,分3次服用。
为证实本发明中药组合物的疗效,进行如下试验:
实验一:本发明中药组合物对D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆功能的改善作用
1 资料与方法
1.1药物
受试药物:本发明中药组合物胶囊:按实施例1原料药配方及制备工艺制备,剂量:2.4、1.2、0.6g生药/kg体重。
对照药物:维生素EC颗粒,北京双鹤药业股份有限公司生产,剂量:0.11g/kg体重。
动物:CD-1(ICR)小鼠,18-22g,由北京维通利华实验动物技术有限公司提供。
1.2试验方法
取60只小鼠按体重随机分为6组,分别为正常对照组、模型对照组、阳性对照药维生素EC颗粒组和本发明药物设高、中、低三个剂量组(2.4、1.2、0.6g生药/kg体重),每组10只,雌雄各半。除正常对照组外,其余各组皮下注射5% D-半乳糖溶液,0.5ml/只,每日一次,连续6周。造模同时灌胃给药,每日一次,参照剂量分别配制,使其灌胃量均为20ml/kg,正常和模型对照组给予相同容积的蒸馏水。造模和给药结束时,将小鼠置于跳台仪中适应环境3min,然后底部铜栅通以36V交流电,记录动物受到电击后跳上跳台的反应时间(潜伏期)和5min内受电击的次数(错误次数),作为学***台的潜伏期和3min内受电击的次数(错误次数),作为记忆成绩。而后小鼠摘眼球取血,离心,分离血清,检测血清中过氧化脂质产物丙二醛(MDA)、B型单胺氧化酶(MAO-B)含量和白介素-1(IL-1)、白介素10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。以t检验进行组间比较。
2实验结果:
结果见表1-表3。
表1 本发明中药组合物对D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆能力变化的影响(±SD,n=10)
注:与模型对照组相比,*p<0.05、**p<0.01,以下均同
表2 本发明中药组合物对D-半乳糖致衰老小鼠血清MDA和MAO-B变化的影响(±SD)
表3 本发明中药组合物对D-半乳糖致衰老小鼠血清IL-1、IL-10和TNF-α变化的影响(± SD)
表1-3结果可见,本发明中药组合物三个剂量组均可以明显缩短学***;对D-半乳糖引起的小鼠血清MAO-B增高,高、中、低三个剂量组均呈现出抑制作用,高、中剂量组尚可抑制血清MDA含量的增高;高剂量明显抑制血清TNF-α增高。
3结论
由以上实验可以证实,本发明中药组合物对衰老性学习记忆功能障碍具有良好的对抗作用,同时对免疫抑制具有改善作用,还有一定的抗氧化作用,可以在一定程度上逆转衰老性学习记忆功能障碍产生的病因。
实验二:本发明中药组合物对东莨菪碱致小鼠学习记忆障碍的影响
1 资料与方法
1.1药物
受试药物:本发明中药组合物胶囊:按实施例1原料药配方及制备工艺制备,剂量:2.4、1.2、0.6g生药/kg体重。
动物:昆明种小鼠, 雄性, 体重20±2g,随机分组;由北京维通利华实验动物技术有限公司提供。
1.2试验方法
1.2.1实验装置为(40cm×12cm×12cm)反射箱,分明暗2室,2室之间有一直径约3cm的洞口。2室底部均铺以铜栅,暗室底部的铜栅通38V电流。将小鼠背向洞口放入明室,小鼠穿过洞口进入暗室即受到电击,会立即跑回明室。
学习能力测验:以第一次训练时小鼠遭受电击后至第2次进入暗间的潜伏期与5min内错误反应次数为指标。
记忆测验: 训练后24 h进行测验, 记录5 min内小鼠进入暗间的错误反应次数和错误潜伏期。
2 实验结果
2.1对正常小鼠学习能力的影响
小鼠80只,雄性,随机分为4组,除对照组外,均灌胃给药,每日一次,参照剂量分别配制,使其灌胃量均为20ml/kg,对照组给予相同容积的蒸馏水,连续5日,末次给药1小时后,进行实验,测定小鼠学习能力和记忆能力。
结果见表4,三个剂量组小鼠进入暗间错误次数与对照组相比明显减少,错误潜伏期明显延长,表明本发明中药组合物具有促进正常小鼠学习能力的作用;记忆力测试也具有相同的效果。
表4本发明中药组合物对正常小鼠学习能力的影响
注:*,与对照组相比P<0.05。
2.2对东莨菪碱致小鼠记忆获得障碍的影响
小鼠100只,雄性,随机分为5组,除正常对照组和模型组外,灌胃给药,每日一次,参照剂量分别配制,使其灌胃量均为20ml/kg,对照组和模型组给予相同容积的蒸馏水,连续5日,末次给药1小时后,除正常对照组外,其余各组给予腹腔注射东莨菪碱3.0mg/kg,正常对照组给予腹腔注射同体积生理盐水,注射10分钟后即开始进行试验,测定小鼠学习能力和记忆能力。
结果见表5,由表5可以看出,模型组与正常对照组小鼠进入暗间错误次数与对照组相比明显增多,错误潜伏期明显缩短,说明给小鼠腹腔注射东莨菪碱可以显著使小鼠的学习能力下降;同样模型组的记忆能力也显著下降;三个剂量组小鼠进入暗间错误次数与错误潜伏期与模型组相比明显延长,表明本发明中药组合物具有提高东莨菪碱致学习记忆障碍小鼠的学习能力的作用;记忆力测试也具有相同的效果。
表5本发明中药组合物对东莨菪碱致学习记忆获得障碍小鼠学习能力的影响
注:#,与正常对照组比较P<0.05;*,与模型组相比P<0.05。
3 结论
本发明中药组合物不仅可以提高正常小鼠的学习和记忆能力,还能提高东莨菪碱致学习记忆障碍小鼠的学习和记忆能力。
实验三:本发明中药组合物对剥夺睡眠小鼠学习记忆障碍的影响
1 资料与方法
1.1药物
受试药物:本发明中药组合物胶囊:按实施例1原料药配方及制备工艺制备,剂量:2.4、1.2、0.6g生药/kg体重。
动物:昆明种小鼠, 雄性, 体重20±2g,随机分组;由北京维通利华实验动物技术有限公司提供。
1.2试验方法
1.2.1实验装置为(40cm×12cm×12cm)反射箱,分明暗2室,2室之间有一直径约3cm的洞口。2室底部均铺以铜栅,暗室底部的铜栅通38V电流。将小鼠背向洞口放入明室,小鼠穿过洞口进入暗室即受到电击,会立即跑回明室。
学习能力测验:以第一次训练时小鼠遭受电击后至第2次进入暗间的潜伏期与5min内错误反应次数为指标。
记忆测验: 训练后24 h进行测验, 记录5 min内小鼠进入暗间的错误反应次数和错误潜伏期。
1.2.2动物模型制备
置动物于高出水平台上,当其困倦进入REM(快速眼动相)睡眠阶段时,因肌肉松弛坠入水中,动物只能重振精神爬上平台,反复多次,达到剥夺REM睡眠效果。本实验剥夺睡眠所用小站台直径1.6-1.3cm,符合造模要求。
1.3实验分组
将小鼠100只,雄性,随机分为5组,1、正常对照组;2、模型组;3、本发明药物低剂量组;4、本发明药物中剂量组;5、本发明药物高剂量组;除正常对照组和模型组外,均灌胃给药,每日一次,参照剂量分别配制,使其灌胃量均为20ml/kg,对照组和模型组给予相同容积的蒸馏水,连续5日;在末次给药后,第2-5组动物给予剥夺睡眠24小时,正常对照组自由睡眠,而后进行学习和记忆能力测试。
2 实验结果
结果见表6,由表6可以看出,模型组与正常对照组比较,小鼠进入暗间错误次数与对照组相比明显增多,错误潜伏期明显缩短,说明给小鼠剥夺睡眠以后可以显著使小鼠的学习能力下降;同样模型组的记忆能力也显著下降;三个剂量组小鼠进入暗间错误次数与错误潜伏期与模型组相比明显延长,表明本发明中药组合物具有提高睡眠剥夺致学习记忆障碍小鼠的学习能力的作用;记忆力测试也具有相同的效果。
表6本发明中药组合物对睡眠剥夺致学习记忆获得障碍小鼠学习记忆能力的影响
注:#,与正常对照组比较P<0.05;*,与模型组相比P<0.05。
3、结论
睡眠剥夺导致小鼠学习和记忆力障碍属于典型的疲倦性学习记忆障碍,而本发明药物可以显著提高睡眠剥夺致学习记忆获得障碍小鼠学习记忆能力,可以证实本发明药物具有治疗疲倦性学习记忆障碍的作用。
具体实施方式
实施例1:胶囊剂的制备
组方:
菟丝子250g、枸杞子138g、五味子46g、蛇床子35g、金樱子35g、韭菜子35g、巴戟天35g、肉苁蓉35g、生地黄46g、川牛膝35g、淫羊藿70g、覆盆子35g、人参25g、鹿茸16g、海马21g、川楝子23g;
制备方法:
a、按比例称取蛇床子、菟丝子、五味子、淫羊藿,加3208ml70%乙醇,回流提取3次,每次2小时,滤过,合并滤液,减压回收乙醇至无醇味,得醇提浸膏;
b、将步骤a醇提后的药材残渣与比例量的枸杞子、生地黄、覆盆子、金樱子、韭菜子、巴戟天、川楝子合并,加6732ml水煎煮2次,每次2小时,滤过,合并滤液,与步骤a所得醇提浸膏混合,减压浓缩至在60℃测定相对密度为1.28,得浸膏;
c、按比例称取人参、鹿茸、海马、肉苁蓉、川牛膝,粉碎成细粉与步骤b所得浸膏混合均匀,60-70℃干燥,粉碎,过筛,填充胶囊,得胶囊757粒。
实施例2:片剂的制备
组方:
菟丝子250g、枸杞子150g、五味子45g、蛇床子30g、金樱子30g、韭菜子30g、巴戟天30g、肉苁蓉30g、生地黄45g、川牛膝30g、淫羊藿70g、覆盆子30g、人参20g、鹿茸19g、海马20g、川楝子20g。
制备方法:
a、按比例称取蛇床子、菟丝子、五味子、淫羊藿,加2765ml70%乙醇,回流提取3次,每次1小时,滤过,合并滤液,减压回收乙醇至无醇味,得醇提浸膏;
b、将步骤a醇提后的药材残渣与比例量的枸杞子、生地黄、覆盆子、金樱子、韭菜子、巴戟天、川楝子合并,加5110ml水煎煮1次,3小时,滤过,合并滤液,与步骤a所得醇提浸膏混合,减压浓缩至在60℃测定相对密度为1.30,得浸膏;
c、按比例称取人参、鹿茸、海马、肉苁蓉、川牛膝,粉碎成细粉与步骤b所得浸膏混合均匀,60-70℃干燥,粉碎,过筛,加入1%硬脂酸镁,压片,得760片片剂。
实施例3:丸剂的制备
组方:
菟丝子350g、枸杞子100g、五味子60g、蛇床子20g、金樱子50g、韭菜子50g、巴戟天20g、肉苁蓉50g、生地黄60g、川牛膝20g、淫羊藿100g、覆盆子20g、人参35g、鹿茸10g、海马35g、川楝子15g。
制备方法:
a、按比例称取蛇床子、菟丝子、五味子、淫羊藿,加5300ml70%乙醇,回流提取1次,3小时,滤过,合并滤液,减压回收乙醇至无醇味,得醇提浸膏;
b、将步骤a醇提后的药材残渣与比例量的枸杞子、生地黄、覆盆子、金樱子、韭菜子、巴戟天、川楝子合并,加10140ml水煎煮3次,每次1小时,滤过,合并滤液,与步骤a所得醇提浸膏混合,减压浓缩至在60℃测定相对密度为1.25,得浸膏;
c、按比例称取人参、鹿茸、海马、肉苁蓉、川牛膝,粉碎成细粉与步骤b所得浸膏混合均匀,60-70℃干燥,粉碎,过筛,制成丸剂,得丸320g。
实施例4:颗粒剂的制备
组方:
菟丝子150g、枸杞子200g、五味子30g、蛇床子50g、金樱子20g、韭菜子20g、巴戟天50g、肉苁蓉20g、生地黄30g、川牛膝50g、淫羊藿40g、覆盆子50g、人参15g、鹿茸25g、海马15g、川楝子35g。
制备方法:
a、按比例称取蛇床子、菟丝子、五味子、淫羊藿,加2430ml70%乙醇,回流提取2次,每次1.5小时,滤过,合并滤液,减压回收乙醇至无醇味,得醇提浸膏;
b、将步骤a醇提后的药材残渣与比例量的其余药材合并,加8800ml水煎煮3次,每次1小时,滤过,合并滤液,与步骤a所得醇提浸膏混合,减压浓缩至在60℃测定相对密度为1.29,得浸膏;
c、将步骤b所得浸膏与300g糊精与200g蔗糖粉混合均匀,60-70℃干燥,粉碎,过筛,制粒,得700g颗粒剂。
实施例5:散剂的制备
组方:
菟丝子250g、枸杞子150g、五味子45g、蛇床子30g、金樱子30g、韭菜子30g、巴戟天30g、肉苁蓉30g、生地黄45g、川牛膝30g、淫羊藿70g、覆盆子30g、人参20g、鹿茸19g、海马20g、川楝子20g。
制备方法:
按比例称取组方中药材,混合粉碎成细粉,即得823g散剂。
实施例6:汤剂的制备
组方:
菟丝子250g、枸杞子150g、五味子45g、蛇床子30g、金樱子30g、韭菜子30g、巴戟天30g、肉苁蓉30g、生地黄45g、川牛膝30g、淫羊藿70g、覆盆子30g、人参20g、鹿茸19g、海马20g、川楝子20g。
制备方法:
按比例称取组方中药材,加水至没过药材,浸泡15分钟后,加热至水开,继续小火煎煮30分钟,过滤,药渣再次加水至没过药材,再次煎煮30分钟,滤过,合并滤液,即得4320g汤剂。
Claims (7)
1.一种中药组合物在制备提高睡眠剥夺致学习记忆障碍药物中的应用,该中药组合物由如下重量份的原料药制成:
菟丝子150-350、枸杞子100-200、五味子30-60、蛇床子20-50、金樱子20-50、韭菜子20-50、巴戟天20-50、肉苁蓉20-50、生地黄30-60、川牛膝20-50、淫羊藿40-100、覆盆子20-50、人参15-35、鹿茸10-25、海马15-35、川楝子15-35。
2.如权利要求1所述的应用,其特征在于该中药组合物由如下重量份的原料药制成:
菟丝子150、枸杞子200、五味子30、蛇床子50、金樱子20、韭菜子20、巴戟天50、肉苁蓉20、生地黄30、川牛膝50、淫羊藿40、覆盆子50、人参15、鹿茸25、海马15、川楝子35。
3.如权利要求1所述的应用,其特征在于该中药组合物由如下重量份的原料药制成:
菟丝子350、枸杞子100、五味子60、蛇床子20、金樱子50、韭菜子50、巴戟天20、肉苁蓉50、生地黄60、川牛膝20、淫羊藿100、覆盆子20、人参35、鹿茸10、海马35、川楝子15。
4.如权利要求1所述的应用,其特征在于该中药组合物由如下重量份的原料药制成:
菟丝子250、枸杞子138、五味子46、蛇床子35、金樱子35、韭菜子35、巴戟天35、肉苁蓉35、生地黄46、川牛膝35、淫羊藿70、覆盆子35、人参25、鹿茸16、海马21、川楝子23。
5.如权利要求1所述的应用,其特征在于该中药组合物由如下重量份的原料药制成:
菟丝子250、枸杞子150、五味子45、蛇床子30、金樱子30、韭菜子30、巴戟天30、肉苁蓉30、生地黄45、川牛膝30、淫羊藿70、覆盆子30、人参20、鹿茸19、海马20、川楝子20。
6.如权利要求1-5中任一项所述的应用,其特征在于所述治疗治疗学习记忆障碍的药物的剂型为汤剂、胶囊剂、片剂、颗粒剂、散剂或丸剂。
7.如权利要求6所述的应用,其特征在于所述胶囊剂的制备方法包含如下步骤:
a、按比例称取蛇床子、菟丝子、五味子、淫羊藿,加6-10倍量70%乙醇,回流提取1-3次,每次1-3小时,滤过,合并滤液,减压回收乙醇至无醇味,得醇提浸膏;
b、将步骤a醇提后的药材残渣与比例量的枸杞子、生地黄、覆盆子、金樱子、韭菜子、巴戟天、川楝子合并,加7-12倍量水煎煮1-3次,每次1-3小时,滤过,合并滤液,与步骤a所得醇提浸膏混合,减压浓缩至在60℃测定相对密度为1.25-1.30,得浸膏;
c、按比例称取人参、鹿茸、海马、肉苁蓉、川牛膝,粉碎成细粉与步骤b所得浸膏混合均匀,60-70℃干燥,粉碎,过筛,填充胶囊。
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八子补肾胶囊的质量标准研究;许红辉等;《中国药业》;20111231;第20卷(第7期);第24-25页 * |
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