CN103211102A - 饲用生物酸的加工制造方法 - Google Patents

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本发明的饲用生物酸加工制造方法，涉及饲料生产、畜禽养殖技术领域，本发明旨在解决饲用无机酸腐蚀性以及有机酸稳定性和复合酸生产成本高等诸多技术问题。本发明的饲用生物酸的加工制造方法，包含如下步骤：1）分别配制乳酸杆菌、丁酸梭菌培养基；2）对上述培养基进行灭菌处理；3）冷却至一定温度后分别接种乳酸杆菌、丁酸梭菌菌到各自培养基中，得到初级培养液；4）将乳酸杆菌、丁酸梭菌菌分别扩大培养；5）将两种菌液与水分别按4～15：40～100稀释，之后将两种稀释液与载体混合接种，接种比例料菌比10：1±0.5；6）接种后，20-40℃发酵10±2天；7）发酵完成后密闭，室温保存。

Description

饲用生物酸的加工制造方法
技术领域
本发明涉及饲料生产、畜牧养殖，特别是一种饲用生物酸的加工生产方法。
背景技术
随着国家经济的快速发展，科技的日益进步，人们生活水平的不断提高，食品安全问题已日益成为社会关注的焦点，对养殖业而言，饲料安全即食品安全，已将饲料视为人类的间接食品。在医疗行业抗生素的大量使用而产生的耐药性以及饲料中抗生素大量使用所引起的抗药性和药物残留问题则是一个很大的安全隐患。抗生素作为饲料添加剂应用已有半个多世纪的历史，在动物饲养中一度发挥了巨大的作用，但大量广泛的使用其副作用日益突出。尤其表现以下几个方面：一是病菌产生耐药性问题，尤其是大肠杆菌的耐药菌株大量存在．使用抗生素治疗大肠杆菌感染的效果并不理想．二是滥用抗生素不但加大饲料成本，而且引起动物免疫机能下降，体内菌群失调而发生内源感染或二重感染，死亡增多；三是畜产品中的药物残留问题，造成畜产品食用安全及生态环境毒性。因此，抗生素被逐步替代的呼声越来越高，寻求饲用抗生素替代物已成为世界各国专家研究的热点。研究表明：酸化剂可调控胃肠道微生物菌群平衡，特别是可以减少大肠杆菌的感染。酸化剂在动物生产中的促生长作用和抗菌方面已得到普遍认可，目前国内外的饲用酸化剂总的来说可以分为单一酸化剂和复合酸化剂两大类。复合酸化剂为几种有机与无机复合，也有全无机酸复合，这些复合酸化剂克服了单一酸化剂功能单一等缺点，但其添加量大、腐蚀性强，在饲料中添加后成本增加，另载体一般营养价值不高，利用率也非常低。 
发明内容
本发明旨在解决饲用无机酸腐蚀性以及有机酸稳定性和复合酸生产成本高等诸多技术问题。以提供一种高稳定性，生产成本低、高产出、利用率高，易于保存的生物酸加工制造方法。
本发明的饲用生物酸的加工制造方法，包含如下步骤： 
     a)  分别配制乳酸乳杆菌、丁酸梭菌培养基；
     b)  对上述培养基在120℃±20℃的温度条件下，灭菌处理10～30分钟；
     c)  冷却后分别接种乳酸乳杆菌、丁酸梭菌菌到各自培养基中，得到初级培养液；
     d)  将乳酸乳杆菌、丁酸梭菌分别扩大培养；
     e)  将两种菌液与水分别按4～15：40～100稀释，之后将两种稀释液与载体混合接种，接种比例料菌比10：1±0.5；
   f)  接种后，20-40℃发酵10±2天；
   g)   发酵完成后密闭室温保存；
2. 本发明的饲用生物酸的加工制造方法，其中所述步骤a）中的两种培养基分别含有如下重量份计的组分：
乳酸乳杆菌培养基：
牛肉膏              10.0 
酵母膏              5.0 
葡萄糖              20.0 
乙酸钠              5.0 
柠檬酸二胺          2.0
七水硫酸镁          0.5
七水硫酸锰          0.2
吐温80              1
蒸馏水              1000
培养基pH值为6.5
丁酸梭菌培养基：
葡萄糖                        20  
 蛋白胨                        10 
酵母浸膏              10
氯化钠                          2 
硫酸铵                 1
无水氯化钙              0.5
七水硫酸镁             0.2
七水硫酸锰             0.2
蒸馏水                1000
培养基pH值为6.0
本发明的饲用生物酸的加工制造方法，其所述步骤c）中分别接种乳酸乳杆菌、丁酸梭菌到各自培养基和初级培养液中，其中乳酸乳杆菌放置培养箱中静置，37℃±5℃培养24h±8h；丁酸梭菌放置培养箱中静置40℃±5℃培养24h±8h；
3.   本发明的饲用生物酸的加工制造方法，其所述步骤d）乳酸乳杆菌和丁酸梭菌的扩大培养包含如下步骤：在1t反应器中分别接种乳酸乳杆菌、丁酸梭菌100L±50L，静置培养24h±6h，使活菌数达到：乳酸乳杆菌≥2±1.5×108CFU/ml；丁酸梭菌≥2±1.5×108CFU/ml；
4.   本发明的饲用生物酸的加工制造方法，其所述步骤e）中所述载体含有如下重量份计的组分：玉米30±10,麦麸20±10，洗米糠20±10，水30±15。
本发明饲用生物酸的加工制造方法的有益效果：
1）低成本、高产出；
2）有机酸如L-乳酸、丁酸含量丰富，ph＜4.5且酸稳定性高；
3）利用率高；
4）载体可作为有益原料，营养丰富吸收率高；
5）储存时间长。   
具体实施方式
本发明的应用原理、作用与功效，通过如下实施方式予以说明：
1.    菌种的初级培养
1)  分别配制按重量份计的1L以下培养基
乳酸乳杆菌培养基：
牛肉膏              10.0 
酵母膏              5.0 
葡萄糖              20.0 
乙酸钠              5.0 
柠檬酸二胺          2.0
七水硫酸镁          0.5
七水硫酸锰          0.2
吐温80              1
蒸馏水              1000
培养基pH值为6.0
丁酸梭菌培养基：
葡萄糖                        20  
 蛋白胨                        10 
酵母浸膏                  10
氯化钠                          2 
硫酸铵                      1
无水氯化钙                0.5
七水硫酸镁                0.2
七水硫酸锰                0.2
蒸馏水                     1000
培养基pH值为6.0
2)   灭菌
    配制好以上培养基后，用三角烧瓶分装，标记，120℃-140℃，灭菌10-30分钟；
3)   接种与培养
   培养基冷却至35-40℃后，无菌操作分别接种乳酸乳杆菌、丁酸梭菌到各自培养基中，其中乳酸乳杆菌放置培养箱中静置，37℃±5℃培养24h±4h；丁酸梭菌放置培养箱中静置40℃±5℃培养24h±6h；
2．二级种子培养基的准备与培养
   分别配制10-100L以上培养基。将各种培养基分别倒入培养罐，100℃±20℃，灭菌10-30分钟。冷却至40℃±5℃后分别接种对应培养好的初级培养液。乳酸乳杆菌静置培养，37℃±5℃培养24h±8h；丁酸梭菌40℃±5℃培养24h±8h；
3. 活细胞计数（血细胞计数平板计数法）
   乳酸乳杆菌≥1×108CFU/ml；
   丁酸梭菌≥1×108CFU/ml；
二、菌种扩大培养生产工艺操作流程
（1）、1t培养罐：
  ①、 在培养罐中注入自来水，待水位为罐体1/2—2/3处时启动搅拌按钮并向罐体中加入培养基等；
②、 开启蒸汽，升温灭菌，80-100℃60-30分钟，之后冷却至30-40℃接入对应的菌种；
③、 接种。在两个1t培养器中接菌种100±50L，启动搅拌***按钮进行搅拌均匀后静   置，培养24h±6h，培养达到生产需要活菌数即乳酸乳杆菌≥2±1.5×108CFU/ml；丁酸梭菌≥2±1.5×108CFU/ml；
（2）培养罐→混合罐→接种：
 ①、调节流量控制仪，设定好从每个培养器里面流出的菌液的量；
 ②、将两种菌液与水分别按4～15：40～100稀释；
③、之后将两种稀释液与载体混合接种，接种比例料菌比10：1±0.5；
④、接种后， 20-40℃发酵10±2天；
⑤、 发酵完后密闭室温保存。 
从上所述，本发明的饲用生物酸的加工制造方法生产成本低、产量高；有机酸如L-乳酸、丁酸含量丰富稳定，利用率高；载体可作为有益原料，营养丰富吸收率高，保存时间长等诸多优点。 

Claims (5)

1.一种饲用生物酸的加工制造方法，其特征在于包含如下步骤： 
1）分别配制乳酸乳杆菌、丁酸梭菌培养基；
2）对上述培养基在120℃±20℃的温度条件下，灭菌处理10～30分钟；
3）冷却后分别接种乳酸乳杆菌、丁酸梭菌菌到各自培养基中，得到初级培养液；
4）将乳酸乳杆菌、丁酸梭菌菌分别扩大培养；
5）将两种菌液与水分别按4～15：40～100稀释，之后将两种稀释液与载体混合接种，接种比例料菌比10：1±0.5；
6）接种后，20-40℃发酵10±2天；
7）发酵完成后密闭室温保存。
2.根据权利要求1所述一种饲用生物酸的加工制造方法，其特征在于：所述步骤a）中的两种培养基分别含有如下重量份计的组分：
乳酸乳杆菌培养基：
牛肉膏                10.0 
酵母膏                5.0 
葡萄糖                20.0 
乙酸钠                5.0 
柠檬酸二胺          2.0
七水硫酸镁          0.5
七水硫酸锰          0.2
吐温80                1
蒸馏水                1000
培养基pH值为6.0
丁酸梭菌培养基：
葡萄糖                       20  
 蛋白胨                       10 
酵母浸膏                 10
氯化钠                        2 
硫酸铵                     1
无水氯化钙               0.5
七水硫酸镁              0.2
七水硫酸锰             0.2
蒸馏水                  1000
培养基pH值为6.0。
3.如权利要求1所述饲用生物酸的加工制造方法，其特征在于：所述步骤c）中分别接种乳酸乳杆菌、丁酸梭菌到各自培养基和初级培养液中，其中乳酸乳杆菌放置培养箱中静置，37℃±5℃培养24h±8h；丁酸梭菌放置培养箱中静置40℃±5℃培养24h±8h。
4.如权利要求1所述饲用生物酸的加工制造方法，其特征在于：所述步骤d)中乳酸乳杆菌和丁酸梭菌的扩大培养包含如下步骤：在两个1t反应釜中加入1/2T—2/3T水，并分别加入乳酸乳杆菌培养基和丁酸梭菌培养基灭菌，之后分别对应接种乳酸乳杆菌、丁酸梭菌100L±50L，静置培养24h±6h，使活菌数达到：乳酸乳杆菌≥2±1.5×108CFU/ml；丁酸梭菌≥2±1.5×108CFU/ml。
5.如权利要求1所述饲用生物酸的加工制造方法，其特征在于：所述步骤e) 中所述载体含有如下重量份计的组分：玉米30±10,麦麸20±10，洗米糠20±10，水30±15。
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