CN103142601A - Pci-32765在制备抗血管生成类药物中的应用 - Google Patents
Pci-32765在制备抗血管生成类药物中的应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN103142601A CN103142601A CN2013100792612A CN201310079261A CN103142601A CN 103142601 A CN103142601 A CN 103142601A CN 2013100792612 A CN2013100792612 A CN 2013100792612A CN 201310079261 A CN201310079261 A CN 201310079261A CN 103142601 A CN103142601 A CN 103142601A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- pci
- blood vessel
- angiogenic
- application
- medicine
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Images
Abstract
本发明涉及PCI-32765在制备抗血管生成类药物中的应用。至今尚未见有关于PCI-32765抗血管生成活性的相关报道。本发明提供PCI-32765在制备抗血管生成类药物、抗肿瘤药物及抗湿性老年视黄斑变性药物中的应用。利用斑马鱼血管生成模型进行体内药效学实验证实,PCI-32765能够显著抑制斑马鱼血管生成、显著抑制移植的人类癌细胞的生长及对湿性老年视黄斑变性具有治疗作用。因此,PCI-32765可以用于抗血管生成类、抗肿瘤作用或湿性老年视黄斑变性药物的制备。
Description
技术领域
本发明涉及医药技术领域,具体地说是PCI-32765在制备抗血管生成类药物中的应用。
背景技术
血管生成(angiogenesis)与人类多种重大疾病高度相关,如恶性肿瘤,老年视黄斑变性(Age-related macular degeneration,AMD),动脉粥样硬化(Atherosclerosis),风湿性关节炎(Rheumatoid arthritis),糖尿病视网膜变性(Diabetic retinopathy)以及肿瘤转移(Tumor metastasis)等[1]。随着中国人口老龄化逐渐加剧,目前这些重大疾病已严重危害我国人民群众的生命健康。
1971年,哈佛大学Judah Folkman教授首次提出抗肿瘤血管疗法,他认为实体肿瘤的生长和扩散依赖于肿瘤内新血管的形成,并通过新生血管获取养分;新血管的形成和生长,促进了肿瘤细胞的转移[2–4]。经过40年大量的基础理论研究,目前基于这一疗法,已有多个重磅专利新药上市,如罗氏的Bevacizumab (商品名Avastin,2010年全球销售额67亿美元) ,拜耳的Sorafenib (商品名Nexavar,2010年全球销售额9.94亿美元) ,辉瑞的Sunitinib (商品名Sutent,2010年全球销售额10.7亿美元)[5–6] 。但这些药物价格十分昂贵,均为外企医药巨头垄断。国内目前只有1支真正意义的抗肿瘤血管生成药物通过SFDA批准上市(恩度,先声药业,2005年上市) [7],但年销售额很少(2010年销售额仅2.5亿人民币),尚无法参与全球竞争。其次,由于恩度(重组人血管内皮抑制素注射液,Recombinant Human Endostatin Injection)为大分子蛋白质类药物,生产这类高纯度安全制剂需要很高的技术门槛,而且此类型的药物在体内的半衰期较短,从而限制了这些活性蛋白的临床应用[7]。
老年视黄斑变性(Age-related macular degeneration,简称AMD)是一种累及眼底视网膜黄斑区的变性眼疾。它因年龄增长而产生黄斑区变性,可引起中心视力急剧下降。据统计,全世界超过3000万人罹患此病。黄斑变性分为干性和湿性两种。湿性老年视黄斑变性主要因为脉络膜血管异常生成,新生的无效微血管出现渗漏,血管渗漏的液体进而破坏黄斑,导致中心视力显著下降,影响生活质量,甚至变盲。湿性老年视黄斑变性(AMD)已经成为65岁以上老年人失明的罪魁祸首[8-9]。
治疗湿性AMD的方法主要有光动力疗法和抗血管药物疗法[8-9]。光动力疗法主要通过静脉注入光敏药物,继而采用特定波长的非热能激光照射脉络膜新生血管病灶,将光敏药物活化。用光动力疗法治疗湿性AMD,只能稳定或降低湿性AMD视力下降的风险,并非对因治疗,不能阻止复发的可能。一般需要多次治疗。而且治疗后要避光48小时,以免发生光敏反应,造成皮肤灼伤,因此,给患者带来很多痛苦。目前治疗湿性AMD,已上市的药物主要有:辉瑞的哌加他尼钠(Pegaptanib,商品名Macugen),诺华的兰尼单抗(Ranibizumab,商品名Lucentis),拜耳的艾力亚(VEGF-Trap-eye,商品名Eylea),这些药物的价格非常昂贵,一般需要每月经玻璃体内注射给药,这种冗长的给药过程很难被患者接受。因此,开发新型廉价的滴眼液来治疗老年黄斑变性是未来的发展趋势。
综上所述,在小分子化合物中寻求新的血管生成抑制剂来有效治疗上述疾病已成为研发热点,开发具有自主知识产权的专利靶向抗血管生成小分子药物迫在眉睫。
PCI-32765,英文通用名:PCI-32765(Ibrutinib);英文名称:1-[(3R)-3-[4-Amino- 3-(4-phenoxyphenyl)-1H-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl]-1-piperidinyl]-2-propen-1-one;中文名称:1-[(3R)-3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基]-1-哌啶基]-2-丙烯-1-酮;分子量:440.5;Cas号:936563-96-1。PCI-32765是美国生物制药公司Pharmacyclics研发的新型小分子Btk非可逆抑制剂。PCI-32765治疗慢性淋巴细胞白血病/小淋巴细胞淋巴瘤(CLL/SLL)疗效明显且耐受性良好;此外,PCI-32765也有可能对自体免疫性疾病和骨髓产生细胞(B-cell)相关包括非霍奇金淋巴癌等疾病具有一定的疗效[10-17]。PCI-32765的化学结构式如下:
尚未见有关PCI-32765抗血管生成(anti-angiogenesis)活性的相关报道。
发明内容
本申请的发明人意外发现,PCI-32765具有抗血管生成的作用。
因此,本发明提供PCI-32765在制备抗血管生成类药物中的应用。
本发明还提供PCI-32765在制备抗肿瘤药物中的应用,所述的PCI-32765通过抑制肿瘤内新血管的生成来预防或***。
本发明还提供PCI-32765在制备抗湿性老年视黄斑变性药物中的应用,所述的PCI-32765通过抑制脉络膜血管异常增生来预防或治疗湿性老年视黄斑变性。
上述药物为口服给药剂型、注射给药剂型、粘膜给药剂型或经皮给药剂型,更具体地讲,如片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液、注射液、贴剂或凝胶剂形式。可以通过本领域已知的方法制备药物制剂。
本发明利用斑马鱼血管生成模型进行PCI-32765抗血管药效学实验。和传统的血管研究模型(啮齿类的老鼠和鸡胚尿囊模)相比,目前大量的研究证实,斑马鱼是最理想的血管生物学以及抗血管生成药物评价模型[18-27]。啮齿类的老鼠和鸡胚尿囊模存在各自的缺点[21–22]。通过利用斑马鱼血管生成模型进行药效学评价和药物新靶点验证,已有多支抗癌药物进入临床前实验(Pre-clinical Trial)或者临床试验 (Clinical Trial)阶段(包括已获得FDA批准上市的药物),如Vatalanib (Novartis) [23]、Compound 6 (TargeGen) [24]、Rosuvastatin[25]、Solenopsin (Eli Lilly) [26]等;主要基于斑马鱼抗血管生成模型发现的一种治疗恶性肿瘤的老药新用药物——反应停(Thalidomide)已获FDA批准上市[27]。
经斑马鱼体内血管模型证实,PCI-32765对斑马鱼体节间血管(intersegm- ental vessel, ISV)和肠下血管(Subintestinal vessel,SIV)有显著抑制的功能,并呈现一定的剂量依耐性,因此,可用于制备抗血管生成抑制剂。
国内外在研究斑马鱼作为癌症移植模型和湿性视黄斑变性模型方面也有大量研究[28-33]。经斑马鱼人类卵巢癌(A2780)移植模型证实,PCI-32765能够显著抑制卵巢癌(A2780)的生长;经斑马鱼视黄斑变性模型证实,PCI-32765对湿性老年视黄斑变性具有显著的治疗效果。因此,PCI-32765可用于抗肿瘤及治疗湿性老年视黄斑变性。
本发明PCI-32765安全性高、原料来源广泛,辅以药学上可接受的辅料,采用常规制剂技术即可制成各种口服、注射、外用制剂,具有良好的开发前景。
附图说明
图1为本发明受精后48h(48hpf)血管转基因荧光斑马鱼体节间血管(ISV)模型。框定区域为斑马鱼体节血管网络局部放大观察的部位。箭头指示体节间血管(ISV, intersegmental vessel)。
图2为本发明定性观察PCI-32765对斑马鱼体节间血管生成(angiogenesis)的抑制效果。图a-c,受精后23hpf的斑马鱼经过药物处理24h,观察时相为48hpf。图a为阴性对照(0.1%DMSO),图b为PCI-32765处理组,图c为阳性对照(10μM洛伐他汀)。与阴性对照相比,10μM PCI-32765能够完全抑制斑马鱼体节间血管(ISV)的生成。
图3为本发明PCI-32765对斑马鱼体节间血管(ISV)生成的抑制率。PCI-32765对斑马鱼体节间血管(ISV)生成的抑制率随着浓度的上升而呈现梯度增加,各浓度PCI-32765组对斑马鱼体节间血管(ISV)生成的抑制率分别为:1μM(0.1%),2.5μM(19%),5μM(43%),10μM(67%),25μM(100%),IC50为5.91μM。
图4为本发明受精后72小时(72hpf)血管转基因荧光斑马鱼肠下血管(SIV)模型。框定区域为肠下血管(SIV)网络局部放大观察的部位。箭头指示肠下血管(SIV, subintestinal vessel)。
图5为本发明定量观察PCI-32765对斑马鱼肠下血管(SIV)的抑制效果。图a-c,受精后48hpf的斑马鱼经过药物处理24h,观察时相为72hpf。图a为阴性对照(0.1%DMSO),图b为PCI-32765处理组,图c为阳性对照(10μM洛伐他汀)。虚线所示区域为肠下血管(SIV)面积放大观察的部位。与阴性对照相比,10μM PCI-32765能够显著抑制斑马鱼肠下血管(SIV)的生成,表现为肠下血管面积减小。
图6为本发明PCI-32765对斑马鱼肠下血管(SIV)生成的抑制率。PCI-32765对斑马鱼肠下血管(SIV)生成的抑制率随着浓度的上升而呈现梯度增加,各浓度PCI-32765组对斑马鱼肠下血管(SIV)生成的抑制率分别为:1μM(11%),2.5μM(25%),5μM(43%),10μM(62%),25μM(98%),IC50为7.64μM。
图7为本发明斑马鱼人类卵巢癌(A2780)移植模型评价PCI-32765的抗肿瘤药效。图a-f,移植人类卵巢癌(A2780)后2dpf的斑马鱼经过药物处理4d,观察时相为6dpf。图a为空白对照,图b为阴性对照(0.1%DMSO),图d-f为不同浓度的PCI-32765处理组,图c为阳性对照(1000μM5-FU)。
图8为本发明PCI-32765对移植癌细胞的生长抑制率。PCI-32765对人类移植癌细胞生长的抑制率随着浓度的上升而呈现梯度增加,三个浓度PCI-32765组抑制率分别为:1μM(7.9%),2.5μM(26.6%),10μM(34.9%)。
图9为本发明定量评价PCI-32765对视黄斑变性的治疗作用。图a-e,受精后1dpf的斑马鱼经过药物处理4d,观察时相为5dpf。虚线所示圆形区域内为脉络膜血管。图a为阴性对照(0.1%DMSO),图b为模型组(1mg/ml氯化钴),图c-e为不同剂量的PCI-32765处理组。
图10为本发明PCI-32765对脉络膜血管异常增生的抑制率。PCI-32765对脉络膜血管异常增生的抑制率随着注射剂量的上升而呈现梯度增加,三个PCI-32765剂量组抑制率分别为:0.44μg(8.3%),1.47μg(23.8%),4.41μg(36.4%)。
具体实施方式
下面结合说明书附图和实施例对本发明作进一步阐述,但本发明的保护范围并不限于此。
斑马鱼相关缩略词
受精后小时数:hpf-hours postfertilization
背长轴血管:DLAV-dorsal longitudinal anastomotic vessel
体节间血管:ISV-intersegmental vessel
背主动脉:DA-dorsal aorta
后主静脉:PCV- posterior cardinal vessel
肠下静脉血管:SIV-subintestinal vessel
绿色荧光蛋白:GFP-green fluorescent protein
实施例1 定性观察PCI-32765对斑马鱼体节间血管(ISV)生成模型的抑制效果
斑马鱼:
本实施例使用的斑马鱼为血管转基因绿色荧光斑马鱼(一种由斑马鱼内皮细胞特异表达的基因作为驱动子驱动绿色荧光蛋白在斑马鱼血管内皮细胞特异表达)(图1),饲养和使用标准严格参照美国实验动物管理和使用委员会(IACUC)的要求进行。
养鱼水(Fish water):
配制方法:1L反渗透水(reverse osmosis (RO) water)加入0.3g海盐(Instant Ocean salts)。
二甲基亚砜(DMSO,分析纯):
购买于阿拉丁。0.1% DMSO溶液(阴性对照) 配制:使用时,用养鱼水配制成浓度为0.1%的工作液,现配现用。
洛伐他汀(阳性对照):
购买于大连美仑,纯度大于98%。使用时,用0.1% DMSO溶液配制成实验所需的浓度,本实验中阳性对照药的使用浓度为10μM。
PCI-32765(Closantel):
购买于上海瀚香生物科技有限公司(Cas号:936563-96-1) ,使用时用0.1% DMSO溶液配制成不同浓度的PCI-32765溶液,使用浓度为10μM。
实验方法:
(1)实验分组及胚胎处理:取45只发育良好的斑马鱼胚胎,胚胎发育时相为受精后23hpf (hour-postfertilization,hpf) ,随机分为3组(阴性对照组,药物处理组,阳性对照组),每组胚胎数量为15只。操作时将胚胎均匀分配至48孔细胞培养平板(Greiner,德国)中,每孔15只胚胎,每孔胚胎饲养用水1ml。
(2)药物处理:用移液器(量程100~1000μl,Eppendorf)迅速将预先配制好的药液加入48孔细胞培养平板对应的孔中,每孔1ml。加药液之前,用移液器(量程10~1000μl,Eppendorf)将48孔板中孵育胚胎的饲养用水尽力移出,此操作需在短时间内预先完成,以防止胚胎干燥。实验环境温度控制在28.5℃左右,相对湿度40~70%。然后用锡箔纸将48孔板包裹好,做好实验标记,迅速放置于斑马鱼培养箱中继续培养24h(培养箱温度控制在28.5±0.5℃)。
(3)表型观察及统计:在体式显微镜下观察各孔胚胎的表型,观察指标:观察药物对胚胎发育、血液循环,心脏跳动等方面的影响。然后,将血液循环受到影响的胚胎置于体式荧光显微镜(Nikon AZ100体式荧光显微镜)下进一步观察拍照,拍照时相为48hpf,以确认血管生成抑制表型。
实验结果见图2:10μM PCI-32765显著抑制斑马鱼节间血管(ISV)的生成 ,表现为节间血管缺失。
实施例2 定量评价PCI-32765对斑马鱼体节间血管(ISV)生成模型的抑制效果
斑马鱼血管内皮细胞出芽从受精后20hpf开始,30-31hpf左右形成主要的体节间血管网络,如背长轴血管(DLAV)和体节间血管(ISV),48hpf基本上形成完整的体轴血管网络[34],此时清晰可见完整的体节间血管(ISV)。完整的体节间血管主要指连接背主动脉(DA)和背长轴血管之间(DLAV)之间的那一段血管,见图1(48hpf血管转基因荧光斑马鱼体节间血管模型)。48hpf的斑马鱼一共有28对完整的体节间血管(ISVs)。实验方法如下:
(1)实验分组及胚胎处理:取210只发育良好的斑马鱼胚胎,胚胎发育时相为受精后23hpf (hour-postfertilization,hpf) ,随机分为7组,见下表:
每组斑马鱼胚胎数量30只。操作时将胚胎均匀分配至48孔细胞培养平板(Greiner,德国)中,每孔15只胚胎,每个药物浓度处理30只胚胎,每孔胚胎饲养用水1ml。
(2)药物处理:见实施例1中的实验方法操作步骤(2)。
(3)表型观察及定量统计:将各药物浓度处理后的胚胎在体式荧光显微镜(Nikon AZ100体式荧光显微镜)下进行观察拍照,拍照时相为48hpf,以分析各药物浓度对斑马鱼体节间血管(ISV)生成的影响。从各实验组随机取10只胚胎进行定量统计,统计指标如下:
①完整的体节间血管(ISVs)数量:连接背主动脉(DA)和背长轴血管之间(DLAV)
之间的血管
利用GraphPad Prism软件进行统计作图,并计算PCI-32765抑制斑马鱼体节间血管(ISV)生成的IC50 。实验结果见图3:PCI-32765对斑马鱼体节间血管(ISV)生成的抑制率随着浓度的上升而呈现梯度增加,各浓度PCI-32765组对斑马鱼体节间血管(ISV)生成的抑制率分别为:1μM(0.1%),2.5μM(19%),5μM(43%),10μM(67%),25μM(100%),IC50为5.91μM。
实施例3 定性观察PCI-32765对斑马鱼肠下血管(SIV)生成模型的抑制效果
斑马鱼肠下血管(SIV, subintestinal vessel)生长在卵黄囊两侧,其形状似一个篮子,肠下血管(SIV)由体节腹侧向下延伸的长度约为50~100μm[22-23]。见图4(72hpf血管转基因荧光斑马鱼肠下血管模型)。实验方法如下:
(1)实验分组及胚胎处理:取45只发育良好的斑马鱼胚胎,胚胎发育时相为受精后48hpf (hour-postfertilization,hpf) ,随机分为3组(阴性对照组,药物组,阳性对照组),每组胚胎数量为15只。操作时将胚胎均匀分配至48孔细胞培养平板(Greiner,德国)中,每孔15只胚胎,每孔胚胎饲养用水1ml。
(2)药物处理:见实施例1中的实验方法操作步骤(2)。
(3)表型观察及统计:在体式显微镜下观察各孔胚胎的表型,观察指标:观察药物对胚胎发育、血液循环,心脏跳动等方面的影响。然后,将血液循环受到影响的胚胎置于体式荧光显微镜(Nikon AZ100体式荧光显微镜)下进一步观察拍照,拍照时相为72hpf,以确认血管生成抑制表型。
实验结果见图5:10μM PCI-32765显著抑制斑马鱼肠下血管(SIV)的生成 ,表现为肠下血管面积减小。
实施例4 定量评价PCI-32765对斑马鱼肠下血管(SIV)生成模型的抑制效果
(1)实验分组及胚胎处理:取210只发育良好的斑马鱼胚胎,胚胎发育时相为受精后48hpf (hour-postfertilization,hpf) ,随机分为7组,见下表:
每组斑马鱼胚胎数量30只。操作时将胚胎均匀分配至48孔细胞培养平板(Greiner,德国)中,每孔15只胚胎,每个药物浓度处理30只胚胎,每孔胚胎饲养用水1ml。
(2)药物处理:见实施例1中的实验方法操作步骤(2)。
(3)表型观察及定量统计:将各药物浓度处理后的胚胎在体式荧光显微镜(Nikon AZ100体式荧光显微镜)下进行观察拍照,拍照时相为72hpf,以分析各药物浓度对斑马鱼肠下血管(SIV)生成的影响。从各实验组随机取10只胚胎进行定量统计,统计指标如下:
①肠下血管面积(SIV area):利用Nikon AZ100体式荧光显微镜配置的
NIS-Elements 3.1软件进行计算
利用GraphPad Prism软件进行统计作图,实验结果见图6:PCI-32765对斑马鱼肠下血管(SIV)生成的抑制率随着浓度的上升而呈现梯度增加,各浓度PCI-32765组对斑马鱼肠下血管(SIV)生成的抑制率分别为:1μM(11%),2.5μM(25%),5μM(43%),10μM(62%),25μM(98%),IC50为7.64μM。
实施例5 斑马鱼人类卵巢癌(A2780)移植模型评价PCI-32765的抗肿瘤药效
实体肿瘤的生长和扩散依赖于肿瘤内新血管的形成,并通过新生血管获取养分;新血管的形成和生长,促进了肿瘤细胞的转移。本实施例用于说明PCI-32765能够抑制肿瘤的生长和迁移。实验方法如下:
(1)实验分组及胚胎处理:取150只移植有人类卵巢癌(A2780)细胞的斑马鱼胚胎,胚胎发育时相为受精后2dpf (day-postfertilization,dpf) ,随机分为5组,见下表:
每组斑马鱼胚胎数量30只。操作时将胚胎均匀分配至6孔细胞培养平板(Greiner,德国)中,每孔30只胚胎,每个药物浓度处理30只胚胎,每孔胚胎饲养用水3ml。
(2)药物处理:用移液器迅速将预先配制好的药液加入6孔细胞培养平板对应的孔中,每孔3ml。然后用锡箔纸将6孔板包裹好,做好实验标记,放置于斑马鱼培养箱中继续培养4d(培养箱温度控制在35.5±0.5℃)。
(3)表型观察及定量统计:将各浓度药物处理后的胚胎在体式荧光显微镜(Nikon AZ100体式荧光显微镜)下进行观察拍照,拍照时相为6dpf,以分析各药物浓度对斑马鱼人类卵巢癌(A2780)移植模型的抑制作用。从各实验组随机取10只胚胎进行定量统计,统计指标如下:
① 定性评价PCI-32765对肿瘤转移的抑制作用;
② 定量评价PCI-32765对肿瘤生长的抑制作用:利用尼康NIS-Elements 3.1软件计算肿瘤细胞荧光强度(S),统计学处理结果以mean±SE表示;PCI-32765对肿瘤生长的抑制效果计算公式如下:
利用GraphPad Prism软件进行统计作图,实验结果见图7~图8:PCI-32765对人类移植癌细胞生长的抑制率随着浓度的上升而呈现梯度增加,三个浓度PCI-32765组抑制率分别为:1μM(7.9%),2.5μM(26.6%),10μM(34.9%)。
实施例6 定量评价PCI-32765对湿性老年视黄斑变性的治疗作用
湿性老年视黄斑变性主要因为脉络膜血管异常生成,新生的无效微血管出现渗漏,血管渗漏的液体进而破坏黄斑。氯化钴能够诱导斑马鱼视网膜脉络丛血管增生、视细胞变性,类似于人类湿性老年视黄斑变性的改变[35-37]。本实施例用于说明PCI-32765对湿性老年视黄斑变性具有治疗效果。实验方法如下:
(1)实验分组及胚胎处理:取150只发育良好的斑马鱼胚胎,胚胎发育时相为受精后1dpf (day-postfertilization,dpf) ,随机分为5组,见下表:
每组斑马鱼胚胎数量30只。操作时将胚胎均匀分配至6孔细胞培养平板(Greiner,德国)中,每孔30只胚胎,每孔胚胎饲养用水3ml。
(2)药物处理:阴性对照组中加入DMSO,使其终浓度为0.1%;模型组中加入氯化钴,使其终浓度为1 mg/ml;PCI-32765通过显微注射方式给药,每组均注射30只胚胎,注射后将胚胎按组分别放入3ml含有1 mg/ml氯化钴的饲养用水中。
(3)表型观察及定量统计:将各剂量药物处理后的胚胎在体式荧光显微镜(Nikon AZ100体式荧光显微镜)下进行观察拍照,拍照时相为5dpf,以分析各药物剂量对斑马鱼眼部脉络膜异常增生血管的抑制作用。从各实验组随机取10只胚胎进行定量统计,统计指标如下:
①定性评价PCI-32765对眼部脉络膜异常增生血管的抑制作用;
②定量评价PCI-32765对脉络膜异常增生血管的抑制作用:利用NIS-Elements 3.1软件计算脉络膜异常增生血管荧光强度(S),统计学处理结果以mean±SE表示;PCI-32765对脉络膜异常增生血管的抑制效果计算公式如下:
利用GraphPad Prism软件进行统计作图,实验结果见图9~图10:PCI-32765对脉络膜血管异常增生的抑制率随着剂量的上升而呈现梯度增加,三个PCI-32765剂量组抑制率分别为:0.44μg(8.3%),1.47μg(23.8%),4.41μg(36.4%)。
参考文献
[1] Folkman J. Angiogenesis: an organizing principle for drug discovery? Nat Rev Drug Discov.2007 Apr;6(4):273-86.
[2] Hanahan D, Folkman J. Patterns and emerging mechanisms of the angiogenic switch during tumorigenesis. Cell.1996 Aug 9;86(3):353-64.
[3] Li CY, Shan S, Cao Y, et al. Role of incipient angiogenesis in cancer metastasis.
Cancer Metastasis Rev. 2000;19(1-2):7-11.
[4] Carmeliet P, Jain RK. Angiogenesis in cancer and other diseases. Nature.2000
Sep 14;407(6801):249-57.
[5] Ma WW, Adjei AA. Novel agents on the horizon for cancer therapy. CA Cancer J Clin.2009 Mar-Apr;59(2):111-37.
[6] Cook KM, Figg WD. Angiogenesis inhibitors: current strategies and future prospects. CA Cancer J Clin. 2010 Jul-Aug;60(4):222-43.
[7] 关大刚.重组人血管内皮抑素联合化疗临床应用进展[J].现代肿瘤医学,2011,19(2):400-403.
[8] 房玉新,常静.老年黄斑变性患者的新希望抗血管内皮生长因子治疗[J].中华医学信息导报,2007,22(24):16-17.
[9] 李海蓉,李建华.Anti-VEGF治疗湿性老年黄斑变性的临床评估及应用.中国医药指南,2010,8(25):32-35.
[10] Lee A. Honigberg 等《PNAS》2010年107卷13075页。
[11] Dasmahapatra G, Patel H, Dent P, et al. The Bruton tyrosine kinase (BTK) inhibitor PCI-32765 synergistically increases proteasome inhibitor activity in diffuse large-B cell lymphoma (DLBCL) and mantle cell lymphoma (MCL) cells sensitive or resistant to bortezomib. Br J Haematol. 2013 Jan 30.
[12] Brown JR. Ibrutinib (PCI-32765), the First BTK (Bruton's Tyrosine Kinase) Inhibitor in Clinical Trials. Curr Hematol Malig Rep. 2013 Jan 8.
[13] Advani RH, Buggy JJ, Sharman JP, et al. Bruton tyrosine kinase inhibitor ibrutinib (PCI-32765) has significant activity in patients with relapsed/refractory B-cell malignancies. J Clin Oncol. 2013 Jan 1;31(1):88-94.
[14] Winer ES, Ingham RR, Castillo JJ. PCI-32765: a novel Bruton's tyrosine kinase inhibitor for the treatment of lymphoid malignancies. Expert Opin Investig Drugs.2012 Mar;21(3):355-61.
[15] Ponader S, Chen SS, Buggy JJ, et al. The Bruton tyrosine kinase inhibitor PCI-32765 thwarts chronic lymphocytic leukemia cell survival and tissue homing in vitro and in vivo. Blood. 2012 Feb 2;119(5):1182-9.
[16] de Rooij MF, Kuil A, Geest CR,et al. The clinically active BTK inhibitor PCI-32765 targets B-cell receptor- and chemokine-controlled adhesion and migration in chronic lymphocytic leukemia. Blood.2012 Mar 15;119(11):2590-4.
[17] Chang BY, Huang MM, Francesco M, et al. The Bruton tyrosine kinase inhibitor PCI-32765 ameliorates autoimmune arthritis by inhibition of multiple effector cells. Arthritis Res Ther.2011 Jul 13;13(4):R115.
[18] Adeghate E, Adem A, Hasan MY, et al. Medicinal Chemistry and Actions of Dual and Pan PPAR Modulators. Open Med Chem J. 2011;5(Suppl 2):93-8.
[19]De Filippis B, Giancristofaro A, Ammazzalorso A, et al. Discovery of gemfibrozil analogues that activate PPARα and enhance the expression of gene CPT1A involved in fatty acids catabolism. Eur J Med Chem. 2011 Oct;46(10): 5218-24.
[20] Ogata M, Tsujita M, Hossain MA, et al. On the mechanism for PPAR agonists to enhance ABCA1 gene expression. Atherosclerosis. 2009 Aug;205(2):413-9.
[21] Cheng J, Gu YJ, Wang Y, et al. Nanotherapeutics in angiogenesis: synthesis and in vivo assessment of drug efficacy and biocompatibility in zebrafish embryos. Int J Nanomedicine. 2011;6:2007-21.
[22] Serbedzija GN, Flynn E, Willett CE. Zebrafish angiogenesis: a new model for drug screening. Angiogenesis. 1999;3(4):353-9.
[23] Hasan J, Shnyder SD, Bibby M, et al. Quantitative angiogenesis assays in vivo--a review. Angiogenesis.2004; 7: 1-16.
[24] Nicoli S, Presta M. The zebrafish/tumor xenograft angiogenesis assay. Nat Protoc. 2007;2(11):2918-23.
[25] Chan J, Bayliss PE, Wood JM,et al. Dissection of angiogenic signaling in zebrafish using a chemical genetic approach. Cancer Cell.2002 Apr;1(3): 257-67.
[26] Murphy EA, Shields DJ, Stoletov K, et al. Disruption of angiogenesis and tumor growth with an orally active drug that stabilizes the inactive state of PDGFRbeta/B-RAF. Proc Natl Acad Sci U S A. 2010 Mar 2;107(9):4299-304.
[27] Wang C, Tao W, Wang Y, et al. Rosuvastatin, identified from a zebrafish chemical genetic screen for antiangiogenic compounds, suppresses the growth of prostate cancer. Eur Urol. 2010 Sep;58(3):418-26.
[28] Arbiser JL, Kau T, Konar M, et al. Solenopsin, the alkaloidal component of the fire ant (Solenopsis invicta), is a naturally occurring inhibitor of phosphatidylinositol-3-kinase signaling and angiogenesis. Blood.2007 Jan 15;109(2):560-5.
[29] Yabu T, Tomimoto H, Taguchi Y, et al. Thalidomide-induced antiangiogenic action is mediated by ceramide through depletion of VEGF receptors, and is antagonized by sphingosine-1-phosphate.Blood. 2005 Jul 1;106(1):125-34.
[30] Herpers R, van de Kamp E, Duckers HJ, et al. Redundant Roles for Sox7 and Sox18 in Arteriovenous Specification in Zebrafish. Circ Res. 2008 Jan 4;102(1):12-5.
[31] Marques IJ, Weiss FU, Vlecken DH, et al. Metastatic behaviour of primary human tumours in a zebrafish xenotransplantation model. BMC Cancer.2009
Apr 28;9(1):128.
[32] Konantz M, Balci TB, Hartwig UF, et al. Zebrafish xenografts as a tool for in vivo studies on human cancer[J]. Ann. N.Y. Acad. Sci. 2012, (1266): 124-137.
[33] Chu DLH, Li VWT, Yu RMK. Leptin: Clue to poor appetite in oxygen-starved fish[J]. Molecular and Cellular Endocrinology, 2010, (319): 143-146.
[34] Rooijen E, Voest EE, Logister I, et al. Von Hippel-Lindau tumor suppressor mutants faithfully model pathological hypoxia-driven angiogenesis and vascular retinopathied in zebrafish[J]. Disease Models & Mechanisms, 2010, (3): 343-353.
[35] Bibliowicz J, Tittle RK, Gross JM. Towards a better understanding of human eye disease: insights from the zebrafish, Danio rerio[J]. Prog Mol Biol Transl Sci, 2011, (100): 287-330.
[36] Siekmann AF, Lawson ND. Notch signalling limits angiogenic cell behaviour in developing zebrafish arteries[J]. Nature.2007 Feb 15;445(7129):781-4.
[37] Yu RM, Chu DL, Tan TF, et al. Leptin-mediated modulation of steroidogenic gene expression in hypoxic zebrafish embryos: implications for the disruption of sex steroids[J]. Environ Sci Technol, 2012, 46(16): 9112-9119.
Claims (9)
1.PCI-32765在制备抗血管生成类药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述药物为口服给药剂型、注射给药剂型、粘膜给药剂型或经皮给药剂型。
3.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述药物为片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液、注射液、贴剂或凝胶剂形式。
4.PCI-32765在制备抗肿瘤药物中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述的PCI-32765通过抑制肿瘤内新血管的生成来预防或***。
6.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述药物为片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液、注射液、贴剂或凝胶剂形式。
7.PCI-32765在制备抗湿性老年视黄斑变性药物中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述的PCI-32765通过抑制脉络膜血管异常增生来预防或治疗湿性老年视黄斑变性。
9.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述药物为片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液、注射液、贴剂或凝胶剂形式。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN2013100792612A CN103142601A (zh) | 2013-03-13 | 2013-03-13 | Pci-32765在制备抗血管生成类药物中的应用 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN2013100792612A CN103142601A (zh) | 2013-03-13 | 2013-03-13 | Pci-32765在制备抗血管生成类药物中的应用 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN103142601A true CN103142601A (zh) | 2013-06-12 |
Family
ID=48541111
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN2013100792612A Pending CN103142601A (zh) | 2013-03-13 | 2013-03-13 | Pci-32765在制备抗血管生成类药物中的应用 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN103142601A (zh) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN104327085A (zh) * | 2013-11-27 | 2015-02-04 | 苏州晶云药物科技有限公司 | Pci-32765的晶型a及其制备方法 |
CN106866684A (zh) * | 2015-12-10 | 2017-06-20 | 杭州雷索药业有限公司 | 用于***的大环衍生物 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101610676A (zh) * | 2006-09-22 | 2009-12-23 | 药品循环公司 | 布鲁顿酪氨酸激酶的抑制剂 |
US20120071497A1 (en) * | 2010-06-03 | 2012-03-22 | Pharmacyclics, Inc. | Methods of treating abc-dlbcl using inhibitors of bruton's tyrosine kinase |
-
2013
- 2013-03-13 CN CN2013100792612A patent/CN103142601A/zh active Pending
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101610676A (zh) * | 2006-09-22 | 2009-12-23 | 药品循环公司 | 布鲁顿酪氨酸激酶的抑制剂 |
US20120071497A1 (en) * | 2010-06-03 | 2012-03-22 | Pharmacyclics, Inc. | Methods of treating abc-dlbcl using inhibitors of bruton's tyrosine kinase |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
SAMIR PAREKH,ET AL.: "New molecular targets in mantle cell lymphoma", 《SEMINARS IN CANCER BIOLOGY》 * |
樊代明: "《肿瘤研究前沿(第10卷)》", 31 December 2010 * |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN104327085A (zh) * | 2013-11-27 | 2015-02-04 | 苏州晶云药物科技有限公司 | Pci-32765的晶型a及其制备方法 |
CN104327085B (zh) * | 2013-11-27 | 2016-08-24 | 苏州晶云药物科技有限公司 | Pci-32765的晶型a及其制备方法 |
CN106866684A (zh) * | 2015-12-10 | 2017-06-20 | 杭州雷索药业有限公司 | 用于***的大环衍生物 |
CN106866684B (zh) * | 2015-12-10 | 2020-06-09 | 吴耀东 | 用于***的大环衍生物 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Lis et al. | Circadian timing in cancer treatment: the biological foundation for an integrative approach | |
CN1837169A (zh) | 一类能够抑制锌离子金属蛋白酶的化合物 | |
CN103479662A (zh) | 金诺芬在制备抗血管生成类药物中的应用 | |
CN105418769B (zh) | 一种具有抗肿瘤、抗炎症和治疗眼科疾病功能的融合蛋白及其制备方法和应用 | |
Kaczmarek et al. | Intravitreal HDAC inhibitor belinostat effectively eradicates vitreous seeds without retinal toxicity in vivo in a rabbit retinoblastoma model | |
CN103142601A (zh) | Pci-32765在制备抗血管生成类药物中的应用 | |
US10709757B2 (en) | Pharmaceutical composition for anti-angiogenesis containing cyclic pentadepsipeptide as an effective ingredient | |
CN102441168B (zh) | 含芹菜素及芹菜素类衍生物和Bcl-2抑制剂的药物组合物及其在制备治疗癌症的药物中的应用 | |
CN103054866A (zh) | 氯喔星在制备抗血管生成类药物中的应用 | |
CN103040823A (zh) | 长春西汀在制备抗血管生成类药物中的应用 | |
CN105063196B (zh) | 蛋白酶体抑制剂与细胞自噬激活剂联合在胆管癌治疗中的应用 | |
CN103054846B (zh) | 一种能抗血管生成的化合物及其用途 | |
CN103054858A (zh) | 奥苯达唑在制备抗血管生成类药物中的应用 | |
CN103251588A (zh) | 苯妥英钠在制备抗血管生成类药物中的应用 | |
CN103110614B (zh) | 舒洛地尔在制备抗血管生成类药物中的应用 | |
CN103040800A (zh) | 吉非罗齐在制备抗血管生成类药物中的应用 | |
CN103054840B (zh) | 左旋沙丁胺醇在制备抗血管生成类药物中的应用 | |
CN103271897A (zh) | 美司那在制备抗血管生成类药物中的应用 | |
CN103251633A (zh) | 非那吡啶在制备抗血管生成类药物中的应用 | |
CN113577066B (zh) | 芳基胍化合物或其药学上可接受的盐的用途 | |
Ramsden et al. | Stemming the tide of age-related macular degeneration: new therapies for old retinas | |
CN105560302B (zh) | 老鹳草水提物在制备抗血管生成类药物中的应用 | |
CN106727603A (zh) | 去甲泽拉木醛在制备治疗胰腺癌的药物中的应用 | |
CN109985049A (zh) | 5α-雄甾-3β,5,6β-三醇在制备治疗脑小血管病的药物中的应用 | |
RU2538243C1 (ru) | Способ получения метастазов печени в эксперименте |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20130612 |