CN102921002A - 乙型脑炎减毒活疫苗冻干保护剂 - Google Patents

乙型脑炎减毒活疫苗冻干保护剂 Download PDF

Info

Publication number
CN102921002A
CN102921002A CN2012104912233A CN201210491223A CN102921002A CN 102921002 A CN102921002 A CN 102921002A CN 2012104912233 A CN2012104912233 A CN 2012104912233A CN 201210491223 A CN201210491223 A CN 201210491223A CN 102921002 A CN102921002 A CN 102921002A
Authority
CN
China
Prior art keywords
japanese encephalitis
encephalitis vaccine
live
freeze drying
drying protectant
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN2012104912233A
Other languages
English (en)
Other versions
CN102921002B (zh
Inventor
李黎
段凯
吕文利
祁春华
包春雷
李毅
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
WUHAN INSTITUTE OF BIOLOGICAL PRODUCTS Co Ltd
Original Assignee
WUHAN INSTITUTE OF BIOLOGICAL PRODUCTS Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by WUHAN INSTITUTE OF BIOLOGICAL PRODUCTS Co Ltd filed Critical WUHAN INSTITUTE OF BIOLOGICAL PRODUCTS Co Ltd
Priority to CN201210491223.3A priority Critical patent/CN102921002B/zh
Publication of CN102921002A publication Critical patent/CN102921002A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN102921002B publication Critical patent/CN102921002B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

本发明公开了一种乙型脑炎减毒活疫苗冻干保护剂，该冻干保护剂以Earl’s液为溶剂，各成分的浓度为：蔗糖6～28g/100ml、海藻糖3～12g/100ml、右旋糖酐5～24g/100ml。本发明还公开了一种由上述冻干保护剂制成的乙型脑炎减毒活疫苗冻干剂。本发明利用糖、醇等成份替代了乙脑减毒活疫苗冻干保护剂中存在的明胶、人血白蛋白等动物蛋白等成份，能在37℃和2～8℃条件下长效保护乙型脑炎减毒活疫苗，并且本发明的冻干保护剂配制方法及成份简单，能有效降低疫苗的生产成本。

Description

乙型脑炎减毒活疫苗冻干保护剂
技术领域
本发明属于疫苗生产工艺技术领域，尤其涉及乙型脑炎减毒活疫苗的冻干保护剂及其制备方法，本发明还涉及一种乙型脑炎减毒活疫苗冻干剂。
背景技术
目前市场上的乙型脑炎减毒活疫苗皆为冻干产品。2001年，Sakaguchi M等研究发现，接种乙型脑炎疫苗致全身性皮肤过敏反应的接种者体内存在抗明胶的IgG和IgE抗体。1987年Swanson MC等研究者在接种灭活狂犬病疫苗者体内检测到抗人血白蛋白和β-丙内脂的抗IgG和IgE抗体。上述研究结果说明，疫苗接种后过敏反应与疫苗冻干保护剂配方中动物源性成份密切相关。因此，生产无动物源性成份的冻干乙型脑炎减毒活疫苗势在必行。
发明内容
本发明的目的是提供一种乙型脑炎减毒活疫苗冻干保护剂，该冻干保护剂可以在保持乙型脑炎减毒活疫苗冻干剂稳定性的同时，减少乙型脑炎减毒活疫苗冻干剂的副反应发生率。本发明的另一目的是提供一种乙型脑炎减毒活疫苗冻干剂。
上述目的是通过以下技术方案实现的：
一种乙型脑炎减毒活疫苗冻干保护剂，该冻干保护剂以Earl’s液为溶剂，各成分的浓度为：蔗糖6~28g/100ml、海藻糖3~12g/100ml、右旋糖酐5~24g/100ml。
所述右旋糖酐为右旋糖酐40。
所述的乙型脑炎减毒活疫苗冻干保护剂的制备方法是：将蔗糖、海藻糖、右旋糖酐溶解于Earl’s液后除菌过滤。
优选的，所述的除菌过滤是采用0.22um的微孔滤膜除菌过滤。
一种乙型脑炎减毒活疫苗冻干剂，由乙型脑炎减毒活疫苗和冻干保护剂组成，所述冻干保护剂以Earl’s液为溶剂，各成分的浓度为：蔗糖6~28g/100ml、海藻糖3~12g/100ml、右旋糖酐5~24g/100ml。
所述乙型脑炎减毒活疫苗与冻干保护剂的体积比为1~3：1。
所述的乙型脑炎减毒活疫苗冻干剂的制备方法是，将所述乙型脑炎减毒活疫苗与冻干保护剂混合后，快速降温至-60~-40℃，在此温度下维持2~5小时后，抽真空至10Pa以下，然后升温至-20~0℃，14~16小时之后以2~5℃/小时的速度升温至15~25℃，维持6~8小时后即得。
微生物因素和冻干保护剂配方因素决定了冻干保护剂的保护功能。本发明涉及的新型乙型脑炎减毒活疫苗冻干保护剂配方成份搭配合理，并经过反复验证，冻干曲线设计合理。产品冻干后，根据样品放置于不同温度和不同保存期条件下的病毒效价测定等结果，冻干曲线不断优化，已达到理想的保护效果。
本发明的最大优点是利用糖、醇等成份替代了原有乙脑减毒活疫苗冻干保护剂中存在的明胶、人血白蛋白等动物蛋白等成份。此配方成份能在37℃和2~8℃条件下长效保护乙型脑炎减毒活疫苗，并且本发明配方配制方法及成份简单，从而有效节约疫苗生产成本。
具体实施方式
实施例1
（1）冻干保护剂的配方及配制方法：
称取各成份：蔗糖12.5g、海藻糖5g、右旋糖苷40 5g，加入Earl’s液至100ml；将以上溶液用孔径0.22um滤器除菌过滤即得本发现的冻干保护剂。
（2）乙型脑炎减毒活疫苗毒株经过培养后，进行无菌检测和病毒滴度测定，将合格的疫苗和已配制完成的冻干保护剂1.5:1混合，充分摇匀，按既定容量分装后立即进行冷冻干燥。
（3）将分装好的疫苗装入冻干机箱体内，在2小时内缓慢降温至-55℃，在此温度下维持3小时，抽真空至10Pa以下开始升温，10小时内升至-25℃，之后每小时2℃的速度升温至10℃，维持8小时加塞出箱，冻干全程在23小时以内。
实施例2
称取各成份：蔗糖6g、海藻糖3g、右旋糖苷9g，加入Earl’s液至100ml；将以上溶液用孔径0.22um滤器除菌过滤即得本发现的冻干保护剂。
乙型脑炎减毒活疫苗毒株经过培养后，进行无菌检测和病毒滴度测定，将合格的疫苗和已配制完成的冻干保护剂2:1混合，充分摇匀，按既定容量分装后立即进行冷冻干燥。
将分装好的疫苗装入冻干机内，在2小时内缓慢降温至-45℃，在此温度下维持4小时，抽真空至10Pa以下开始升温，10小时内升至-20℃，之后每小时2℃的速度升温至15℃，维持8小时加塞出箱，冻干全程在24小时以内。
实施例3
称取各成份：蔗糖28g、海藻糖12g、右旋糖苷24g、加入Earl’s液至100ml；将以上溶液用孔径0.22um滤器除菌过滤即得本发现的冻干保护剂。
乙型脑炎减毒活疫苗毒株经过培养后，进行无菌检测和病毒滴度测定，将合格的疫苗原液和已配制完成的冻干保护剂3:1混合，充分摇匀，按既定容量分装后立即进行冷冻干燥。
将分装好的疫苗装入冻干机箱体内，在2小时内缓慢降温至-45℃，在此温度下维持3小时，抽真空至10Pa以下开始升温，8小时内升至-25℃，之后每小时2℃的速度升温至15℃，维持6小时加塞出箱，冻干全程在19小时以内。
冻干产品的测试：
将实施例1~3的乙型脑炎减毒活疫苗冻干剂，置于37℃、2~8℃条件下保存，不同时间抽样，测定病毒滴度及观察物理性状，结果见表1、2、3。
表1 冻干后产品物理性状及病毒滴度
组别 物理性状 冻干后病毒滴度（LogPFU/ml）
实施例1 乳黄色疏松海绵状 7.0
实施例2 乳黄色疏松海绵状 6.9
实施例3 乳黄色疏松海绵状 6.8
含明胶、人血白蛋白的冻干产品 乳黄色疏松海绵状 6.9
表2 冻干疫苗产品在37℃保存不同时间病毒滴度（LogPFU/ml）
Figure BDA0000248055131
表3 冻干疫苗产品在2~8℃保存不同时间病毒滴度（LogPFU/ml）
Figure BDA0000248055132
从以上试验结果可以看出，在不同温度条件下，本发明的无动物源性成份的冻干保护剂对乙型脑炎减毒活疫苗的保护效果与原有的含明胶、人血白蛋白的冻干保护剂相当。采用本发明的无动物源性冻干保护剂所制备的乙型脑炎减毒活疫苗冻干剂在不同温度条件下稳定性良好，本发明的冻干保护剂对乙型脑炎减毒活疫苗具有良好的保护效果。

Claims (7)

1.乙型脑炎减毒活疫苗冻干保护剂，其特征在于：以Earl’s液为溶剂，各成分及其浓度为：蔗糖6~28g/100ml、海藻糖3~12g/100ml、右旋糖酐5~24g/100ml。
2.根据权利要求1所述的乙型脑炎减毒活疫苗冻干保护剂，其特征在于：所述右旋糖酐为右旋糖酐40。
3.根据权利要求1或2所述的乙型脑炎减毒活疫苗冻干保护剂的制备方法，其特征在于：将蔗糖、海藻糖、右旋糖酐溶解于Earl’s液后除菌过滤。
4.根据权利要求3所述的乙型脑炎减毒活疫苗冻干保护剂的制备方法，其特征在于：所述的除菌过滤是采用0.22um的微孔滤膜除菌过滤。
5.乙型脑炎减毒活疫苗冻干剂，由乙型脑炎减毒活疫苗和冻干保护剂组成，其特征在于：所述冻干保护剂以Earl’s液为溶剂，各成分及其浓度为：蔗糖6~28g/100ml、海藻糖3~12g/100ml、右旋糖酐5~24g/100ml。
6.根据权利要求5所述的乙型脑炎减毒活疫苗冻干剂，其特征在于：所述乙型脑炎减毒活疫苗与冻干保护剂的体积比为1~3：1。
7.根据权利要求5或6所述的乙型脑炎减毒活疫苗冻干剂的制备方法，其特征在于：将所述乙型脑炎减毒活疫苗与冻干保护剂混合后，快速降温至-60~-40℃，在此温度下维持2~5小时后，抽真空至10Pa以下，然后升温至-20~0℃，14~16小时之后以2~5℃/小时的速度升温至15~25℃，维持6~8小时后即得。
CN201210491223.3A 2012-11-28 2012-11-28 乙型脑炎减毒活疫苗冻干保护剂 Active CN102921002B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201210491223.3A CN102921002B (zh) 2012-11-28 2012-11-28 乙型脑炎减毒活疫苗冻干保护剂

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201210491223.3A CN102921002B (zh) 2012-11-28 2012-11-28 乙型脑炎减毒活疫苗冻干保护剂

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN102921002A true CN102921002A (zh) 2013-02-13
CN102921002B CN102921002B (zh) 2014-06-11

Family

ID=47636026

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201210491223.3A Active CN102921002B (zh) 2012-11-28 2012-11-28 乙型脑炎减毒活疫苗冻干保护剂

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN102921002B (zh)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105106964A (zh) * 2015-03-30 2015-12-02 武汉生物制品研究所有限责任公司 人用乙型脑炎减毒活疫苗无明胶冻干稳定剂
CN109395074A (zh) * 2018-12-21 2019-03-01 辽宁成大生物股份有限公司 一种乙型脑炎灭活疫苗冻干制剂及其制备方法
CN115105604A (zh) * 2022-07-05 2022-09-27 吉林惠康生物药业有限公司 疫苗冻干保护剂及其冻干方法

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101095950A (zh) * 2006-06-30 2008-01-02 辽宁成大生物股份有限公司 一种稳定的人用狂犬病疫苗冻干制剂及其制备
CN101537186A (zh) * 2009-04-30 2009-09-23 长春百克生物科技有限公司 一种不含明胶的疫苗冻干保护剂

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101095950A (zh) * 2006-06-30 2008-01-02 辽宁成大生物股份有限公司 一种稳定的人用狂犬病疫苗冻干制剂及其制备
CN101537186A (zh) * 2009-04-30 2009-09-23 长春百克生物科技有限公司 一种不含明胶的疫苗冻干保护剂

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
《中国生化药物杂志》 20061231 张玉华等 糖类在生物活性物质冷冻干燥中的保护作用及其作用机制 247-249 1-7 第27卷, 第4期 *
张玉华等: "糖类在生物活性物质冷冻干燥中的保护作用及其作用机制", 《中国生化药物杂志》, vol. 27, no. 4, 31 December 2006 (2006-12-31), pages 247 - 249 *
段凯等: "冻干乙型脑炎减毒活疫苗非动物源性稳定剂的配方及其缓冲液的筛选", 《中国生物制品学杂志》, vol. 25, no. 11, 20 November 2012 (2012-11-20), pages 1431 - 1434 *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105106964A (zh) * 2015-03-30 2015-12-02 武汉生物制品研究所有限责任公司 人用乙型脑炎减毒活疫苗无明胶冻干稳定剂
CN109395074A (zh) * 2018-12-21 2019-03-01 辽宁成大生物股份有限公司 一种乙型脑炎灭活疫苗冻干制剂及其制备方法
CN115105604A (zh) * 2022-07-05 2022-09-27 吉林惠康生物药业有限公司 疫苗冻干保护剂及其冻干方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN102921002B (zh) 2014-06-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN103563888B (zh) 细胞冻存液
CN102657870B (zh) 一种无明胶及人血蛋白成分的疫苗冻干保护剂
CN106063933B (zh) 通用疫苗冻干保护剂及其应用
CN102727903B (zh) 一种高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗jxa1-r株耐热冻干保护剂及制备方法
CN102921002B (zh) 乙型脑炎减毒活疫苗冻干保护剂
CN104026118A (zh) 一种免疫细胞冻存液、其制备方法及应用
CN105941389A (zh) 一种无动物源血清的细胞冻存液
Mendel et al. Studies on cholinesterase: 2. A method for the purification of a pseudo-cholinesterase from dog pancreas
CN105497904B (zh) 一种伪狂犬病病毒疫苗耐热冻干保护剂及其制备方法
CN105233296A (zh) 用于鸭病毒性肝炎活疫苗的耐热冻干保护剂及其制备方法和应用
CN102526751B (zh) 一种猪瘟脾淋源活疫苗耐热冻干保护剂及制备方法
CN102754848A (zh) 一种酒饮冻干保鲜鹿血的生产方法
CN105561317A (zh) 重组伪狂犬病病毒疫苗耐热冻干保护剂及其制备方法
CN102626520B (zh) 一种水貂犬瘟热活疫苗耐热冻干保护剂的应用
Asim et al. Effect of various stabilizers on titre of lyophilized live-attenuated Peste des petits ruminants (PPR) vaccine.
CN103585633A (zh) 一种用作重组猪干扰素α1的冻干保护剂及其制备方法
CN103055309B (zh) 一种用于鸡传染性支气管炎病毒hi抗原的冻干保护剂及其在制备hi抗原中的应用
Murray et al. Evidence for conformational stabilization of β-lactoglobulin when dried with trehalose
CN103893776B (zh) 羊传染性脓疱病毒细胞弱毒疫苗耐热冻干保护剂及其制备方法和应用
CN103316355A (zh) 一种伪狂犬病活疫苗及制备方法
CN104906053B (zh) 注射用重组人粒细胞刺激因子冻干粉针剂
CN103169964A (zh) 猫泛白细胞减少症弱毒冻干疫苗的冻干保护剂
CN108434106B (zh) 一种狂犬病疫苗的冻干制剂
CN103301453A (zh) 一种猪繁殖与呼吸综合征冻干疫苗及其制备方法
CN104829709A (zh) 人体血清免疫球蛋白中的病毒灭活方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant