CN102816641B

CN102816641B - 一种枇杷花联产精油和黄酮的方法

Info

Publication number: CN102816641B
Application number: CN201210277182.8A
Authority: CN
Inventors: 陈发河; 吴光斌; 王瑞芳; 谢田伟
Original assignee: Jimei University
Current assignee: Jimei University
Priority date: 2012-08-06
Filing date: 2012-08-06
Publication date: 2014-05-07
Anticipated expiration: 2032-08-06
Also published as: CN102816641A

Abstract

一种枇杷花联产精油和黄酮的方法，涉及一种天然农产品的加工方法。将枇杷花阴干、粉碎，得枇杷花粉；将枇杷花粉用溶剂萃取，过滤后得萃取液，滤渣用于黄酮的提取；将萃取液真空浓缩除去溶剂，加入无水硫酸钠脱水干燥，得精油产品；将滤渣待溶剂挥发完全后，用乙醇水溶液浸提，得黄酮提取液；将黄酮提取液吸附分离后，再用解吸剂进行解吸，得解吸液；将解吸液经浓缩、冷冻干燥，即得黄酮固体产品。可实现对枇杷花的综合利用，提高枇杷花的附加值，减轻环境压力，所得精油具有枇杷的特征香气，品质好，得率达11.56‰以上，所得黄酮产品纯度可达68%以上。

Description

一种枇杷花联产精油和黄酮的方法

技术领域

本发明涉及一种天然农产品的加工方法，尤其是涉及一种枇杷花联产精油和黄酮的方法。

背景技术

枇杷花生长量较大，每花穗少的可开30～40朵，一般正常花穗的花朵数为70～110朵，较多的可达到260多朵，但为了实现优质丰产，大约有30%～50%的花穗需要采取疏花保果措施而被浪费掉。枇杷花中富含黄酮类化合物、萜类化合物、植物挥发油等多种具有生理活性的成分。目前，枇杷花大量被用作枇杷花茶的开发，产品单一，加工层次低，附加值不高。近年来，研究发现天然黄酮类物质对机体及细胞具有许多的生理活性，包括清除自由基、抗氧化、抑制酶的活性、抗衰老、抗肿瘤、抗病毒、抗菌、抗过敏、防止血管舒张、抗发炎、抗糖尿病及其并发症等作用，因此，黄酮类化合物在食品、医药领域的应用前景相当广阔。精油具有抗过敏、酶抑制、抗炎、抗突变、抗癌、抑菌、抗氧化活性、抗病毒、驱虫、诱虫、解热镇痛、安神镇定等许多生理活性，因此广泛应用于医药领域、化妆品行业、食品添加和食品保藏等食品工业、饲料工业以及植物保护农业领域等众多方面。从枇杷花中联合提取精油和黄酮可显著提高资源利用率，变废为宝，具有重要的经济价值。

中国专利CN1977907公开一种枇杷花提取物、含有该提取物的组合物及用途，由枇杷Eriobotrya japonica Lindl的花、花蕾、花托为原料，加入水或有机溶剂提取制备而成，其中，含有总黄酮50～350mg/g。该发明还提供了该枇杷花提取物的制备方法和用途。该发明提取物用于镇咳、抑菌，药效明确。该发明提取物中首次发现含有黄酮类成分，并以该成分为主要质量控制指标，通过测定总黄酮的含量，可达到控制药物质量的目的。同时采用齐墩果酸、熊果酸进行测定，提高药物的可控性。在对该发明提取物进行量化控制的同时，采用指纹图谱，进一步保证了提取物的质量。且质量控制方法简便易行、准确灵敏、重现性好、使用范围广，可用于检验、评价枇杷花及其产品质量控制。

中国专利CN101366844公开一种枇杷花Eriobotrya japonica Lindl及其提取物在制备治疗咽炎的药物中的用途。该发明还提供了一种治疗咽炎的药物组合物及其制备方法。该发明枇杷花及其提取物用于治疗咽炎，尤其针对慢性咽炎，药效明确；采用该发明方法制备的药物组合物，药效明显优于已有制剂，且可控性强，为临床提供了一种新的选择。

发明内容

本发明的目的在于提供一种从枇杷花中联合提取精油和黄酮的方法。

本发明的具体步骤如下：

1）制备枇杷花粉：将枇杷花阴干、粉碎，得枇杷花粉；

2）萃取精油：将步骤1）所得的枇杷花粉用溶剂萃取，过滤后得萃取液，滤渣用于黄酮的提取；

3）制备精油：将萃取液真空浓缩除去溶剂，加入无水硫酸钠脱水干燥，得精油产品；

4）提取黄酮类化合物：将步骤2）得到的滤渣待溶剂挥发完全后，用乙醇水溶液浸提，得黄酮提取液；

5）黄酮的纯化：将步骤4）得到的黄酮提取液吸附分离后，再用解吸剂进行解吸，得解吸液；

6）冷冻干燥：将步骤5）得到的解吸液经浓缩、冷冻干燥，即得黄酮固体产品。

在步骤1）中，所述枇杷花粉的破碎度可为20目。

在步骤2）中，所述枇杷花粉与溶剂的配比可为1g∶(10～60)mL，其中枇杷花粉以质量计算，溶剂以体积计算；所述溶剂可采用石油醚、正己烷、***、乙酸乙酯等中的一种；所述萃取的条件可为：在温度（15～55）℃下采用频率为20～60kHz超声波萃取30～90min，共萃取3次，合并萃取液。

在步骤4）中，所述滤渣与乙醇水溶液的配比可为1g∶（15～75）mL，其中，其中滤渣以质量计算，乙醇水溶液以体积计算；所述乙醇水溶液的质量百分比浓度可为30%～80%；所述浸提的条件可采用超声辅助法浸提，所述浸提可在（25～85）℃下超声30～60min。

在步骤5）中，所述吸附分离可采用AB-8树脂进行吸附分离，上柱液浓度为2～5mg/mL，pH值为4.0，上样流速为3BV/h；所述AB-8树脂可采用弱极性大孔苯乙烯-二乙烯苯聚合物，平均孔径130～140nm，比表面积480~520m²/g，平均粒径0.30~0.60mm；所述解吸剂可采用pH值为6.0的30%～80%乙醇溶液，所述解吸的洗脱流速可为2.5BV/h。

本发明以枇杷花为原料，先用石油醚、正己烷、***、乙酸乙酯等超声辅助萃取，过滤，萃取液浓缩脱出溶剂和水分得精油产品；滤渣再用乙醇水溶液超声辅助提取，提取液经大孔吸附树脂吸附分离纯化，可得黄酮类产品。本发明可实现对枇杷花的综合利用，提高枇杷花的附加值，减轻环境压力，所得精油具有枇杷的特征香气，品质好，得率达11.56‰以上，所得黄酮产品纯度可达68%以上。

具体实施方式

实施例1

1）制备枇杷花粉：新鲜枇杷花阴干、粉碎得枇杷花粉，干粉的破碎度为20目，含水量10.10%；

2）萃取精油：称取枇杷花干粉20g置于磨口三角瓶中，按照枇杷花粉比溶剂为1g∶(10～60)mL的比例加入200mL的石油醚（或正己烷、***、乙酸乙酯等），温度（15～55）℃下超声波辅助萃取30～90min，过滤，得滤液162mL，滤渣再加石油醚200mL同样条件下继续萃取，得滤液185mL，滤渣同样条件下第三次萃取得滤液187mL。

3）制备精油：合并3次萃取液，置于旋转蒸发仪中真空浓缩（回收石油醚）后，用无水硫酸钠干燥18～30h，干燥后于（40～55）℃水浴上蒸馏继续回收石油醚，得黄色透明状特殊香味油状物23.25mg，计算精油得率为11.62‰。

4）提取黄酮类化合物：滤渣晾干（石油醚挥发完全）后，加30%～80%乙醇水溶液800mL温度（25～85）℃下超声辅助法浸提30～60min，得滤液710mL，黄酮提取量为108.7mg/g。

5）黄酮的纯化：750mL提取液旋转蒸发，加水500mL，回收乙醇溶液500mL，冷却后过滤，得澄清液720mL。常温常压下，将720mL的澄清液（pH值为4.0）泵入AB-8大孔树脂吸附柱中，树脂柱体积60mL（即1BV=60mL），吸附流速3BV/h。所选AB-8树脂为弱极性大孔苯乙烯-二乙烯苯聚合物，平均孔径130~140nm，比表面积480~520m2/g，平均粒径0.30~0.60mm。上柱过程中大量黄酮被树脂吸附，吸附完毕，加180mL（3BV）60%乙醇进行解，洗脱流速2.5BV/h，共收集解吸液175mL。

6）冷冻干燥：将解吸液脱乙醇溶剂、冷冻干燥得黄酮产品1459mg，产品纯度为69.68%，得率为7.30%。体外抗氧化实验结果表明，该产品对二苯代苦味酰基自由基（DPPH·）、超氧阴离子自由基（O₂ ^-·）和羟自由基（·OH）具有较强的清除能力，其IC50值分别为0.16mg/mL、4.54mg/mL和2.53mg/mL。

实施例2

1）制备枇杷花粉：新鲜枇杷花阴干、粉碎得枇杷花粉，干粉的破碎度为20目，含水量9.35%；

2）萃取精油：称取枇杷花干粉20g置于磨口三角瓶中，按照枇杷花粉比溶剂为1g∶(10～60)mL的比例加入200mL的石油醚（或正己烷、***、乙酸乙酯等），温度（15～55）℃下超声波辅助萃取30～90min，过滤，得滤液161mL，滤渣再加石油醚200mL同样条件下继续萃取，得滤液183mL，滤渣同样条件下第三次萃取得滤液186mL。

3）制备精油：合并3次萃取液，置于旋转蒸发仪中真空浓缩（回收石油醚）后，用无水硫酸钠干燥18～30h，干燥后于（40～55）℃水浴上蒸馏继续回收石油醚，得黄色透明状特殊香味油状物23.13mg，计算精油得率为11.56‰。

4）提取黄酮类化合物：滤渣晾干（石油醚挥发完全）后，加30%～80%乙醇水溶液1000mL温度（25～85）℃下超声辅助法浸提30～60min，得滤液910mL，黄酮提取量为106.8mg/g。

5）黄酮的纯化：910mL提取液旋转蒸发，加水500mL，回收乙醇溶液500mL，冷却后过滤，得澄清液890mL。常温常压下，将890mL的澄清液（pH值为4.0）泵入AB-8大孔树脂吸附柱中，树脂柱体积60mL（即1BV=60mL），吸附流速3BV/h。所选AB-8树脂为弱极性大孔苯乙烯-二乙烯苯聚合物，平均孔径130~140nm，比表面积480~520m2/g，平均粒径0.30~0.60mm。上柱过程中大量黄酮被树脂吸附，吸附完毕，加180mL（3BV）60%乙醇进行解，洗脱流速2.5BV/h，共收集解吸液175mL，

6）冷冻干燥：将解吸液脱乙醇溶剂、冷冻干燥得黄酮产品1448mg，产品纯度为68.57%，得率为7.24%。体外抗氧化实验结果表明，该产品对二苯代苦味酰基自由基（DPPH·）、超氧阴离子自由基（O₂ ^-·）和羟自由基（·OH）具有较强的清除能力，其IC50值分别为0.15mg/mL、4.49mg/mL和2.50mg/mL。

实施例3

1）制备枇杷花粉：新鲜枇杷花阴干、粉碎得枇杷花粉，干粉的破碎度为20目，含水量9.37%；

2）萃取精油：称取枇杷花干粉20g置于磨口三角瓶中，按照枇杷花粉比溶剂为1g∶(10～60)mL的比例加入200mL的石油醚（或正己烷、***、乙酸乙酯等），温度（15～55）℃下超声波辅助萃取30～90min，过滤，得滤液162mL，滤渣再加石油醚200mL同样条件下继续萃取，得滤液184mL，滤渣同样条件下第三次萃取得滤液188mL。

3）制备精油：合并3次萃取液，置于旋转蒸发仪中真空浓缩（回收石油醚）后，用无水硫酸钠干燥18～30h，干燥后于（40～55）℃水浴上蒸馏继续回收石油醚，得黄色透明状特殊香味油状物22.99mg，计算精油得率为11.59‰。

4）提取黄酮类化合物：滤渣晾干（石油醚挥发完全）后，加30%～80%乙醇水溶液900mL温度（25～85）℃下超声辅助法浸提30～60min，得滤液850mL，黄酮提取量为107.2mg/g。

5）黄酮的纯化：850mL提取液旋转蒸发，加水500mL，回收乙醇溶液500mL，冷却后过滤，得澄清液820mL。常温常压下，将820mL的澄清液（pH值为4.0）泵入AB-8大孔树脂吸附柱中，树脂柱体积60mL（即1BV=60mL），吸附流速3BV/h。所选AB-8树脂为弱极性大孔苯乙烯-二乙烯苯聚合物，平均孔径130~140nm，比表面积480~520m2/g，平均粒径0.30~0.60mm。上柱过程中大量黄酮被树脂吸附，吸附完毕，加180mL（3BV）60%乙醇进行解，洗脱流速2.5BV/h，共收集解吸液175mL，

6）冷冻干燥：将解吸液脱乙醇溶剂、冷冻干燥得黄酮产品1461mg，产品纯度为69.31%，得率为7.31%。体外抗氧化实验结果表明，该产品对二苯代苦味酰基自由基（DPPH·）、超氧阴离子自由基（O₂ ^-·）和羟自由基（·OH）具有较强的清除能力，其IC50值分别为0.16mg/mL、4.61mg/mL和2.58mg/mL。

Claims

1.一种枇杷花联产精油和黄酮的方法，其特征在于其具体步骤如下：

1）制备枇杷花粉：将枇杷花阴干、粉碎，得枇杷花粉；

2）萃取精油：将步骤1）所得的枇杷花粉用溶剂萃取，过滤后得萃取液，滤渣用于黄酮的提取；所述枇杷花粉与溶剂的配比为1g∶(10～60)mL，其中枇杷花粉以质量计算，溶剂以体积计算；

4）提取黄酮类化合物：将步骤2）得到的滤渣待溶剂挥发完全后，用乙醇水溶液浸提，得黄酮提取液；所述滤渣与乙醇水溶液的配比为1g∶（15～75）mL，其中，滤渣以质量计算，乙醇水溶液以体积计算；所述乙醇水溶液的质量百分比浓度为30%～80%；

5）黄酮的纯化：将步骤4）得到的黄酮提取液吸附分离后，再用解吸剂进行解吸，得解吸液；所述吸附分离采用AB-8树脂进行吸附分离，上柱液浓度为2～5mg/mL，pH值为4.0，上样流速为3BV/h；所述AB-8树脂采用弱极性大孔苯乙烯-二乙烯苯聚合物，平均孔径130～140nm，比表面积480～520m²/g，平均粒径0.30～0.60mm；

2.如权利要求1所述的一种枇杷花联产精油和黄酮的方法，其特征在于在步骤1）中，所述枇杷花粉的破碎度为20目。

3.如权利要求1所述的一种枇杷花联产精油和黄酮的方法，其特征在于在步骤2）中，所述溶剂采用石油醚、正己烷、***、乙酸乙酯中的一种。

4.如权利要求1所述的一种枇杷花联产精油和黄酮的方法，其特征在于在步骤2）中，所述萃取的条件为：在温度15～55℃下采用频率为20～60kHz超声波萃取30～90min，共萃取3次，合并萃取液。

5.如权利要求1所述的一种枇杷花联产精油和黄酮的方法，其特征在于在步骤4）中，所述浸提的条件采用超声辅助法浸提，所述浸提在25～85℃下超声30～60min。

6.如权利要求1所述的一种枇杷花联产精油和黄酮的方法，其特征在于在步骤5）中，所述解吸剂采用pH值为6.0的30%～80%乙醇溶液，所述解吸的洗脱流速为2.5BV/h。