CN105267275B - 一种菊花中黄酮的提取方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于食品与医药技术领域,具体涉及一种菊花中黄酮的提取方法。本发明的提取黄酮的步骤如下:取干燥均匀的菊花粉碎过筛后得到菊花粉末,采用乙醇与水的混合物加热回流进行提取,加水浓缩后即为菊花的提取液;继续加入丙酮提取,超声波处理,回收溶剂,剩余溶液通过大孔吸附树脂后,收集洗脱液并进行浓缩干燥,得到菊花的黄酮提取物。本发明提取菊花中黄酮的方法结合回流、超声、大孔吸附树脂辅助手段,控制简单,方便操作,提高了提取效率,有效去除杂质成分,为开发品质优良的抗氧化、延衰老、防癌的食品和药品奠定基础。
Description
技术领域
本发明属于食品与医药技术领域,具体涉及一种菊花中黄酮的提取方法。
背景技术
菊花是菊科多年生草本植物的头状花序,多为茶用,也可用于药品或食品添加剂。菊花中含量最多、最主要的生物活性成分是黄酮类化合物,它是以2-苯基色原酮为基本成分的衍生物的总称。从菊花中分离出的黄酮类化合物包括木樨草素、洋芹素、槲皮素、橙皮素、杨梅黄素等。毒性试验表明,菊花及其提取物安全无毒,黄酮化合物具有广泛的生物活性和药理作用,比如抗氧化、抗衰老、防癌、降血脂、降胆固醇、保护心脑血管及镇痛、调节免疫等作用。
杭白菊(Chrysanthemum Morifolium Ramat.),又名杭菊或甘菊,花色玉白、淡香幽远、汤色澄清、味微苦,素有“西湖龙井,杭州贡菊”的美誉。现代科学研究证明,杭白菊在抗氧化、抗病毒、抑肿瘤等方面具有广泛生物活性。
随着社会进步和人们生活水平的提高,食物药品的安全性越来越受到关注。用从植物中提取的具有一定生物功能的天然有效活性成分代替有害的人工合成物质已经成为食品和医药界的研究热点,例如美国就大面积种植金盏花(主要成分有黄酮类化合物)代替抗生素。
中国专利CN201310025359.X采用水提法对菊花中的多种水溶性成分如绿原酸,黄酮类,挥发油,氨基酸,多糖类,微量元素等进行提取,虽然使用的提取溶剂成本低,不会造成有机溶剂残留,但所得提取物成分复杂,且得率较低。
目前国内对杭白菊花的黄酮提取工艺有了一定的研究基础,但仅限于一到两种常规提取工艺,如水浸提法所用提取溶剂常见,成本低,污染小,但黄酮的得率低;有机溶剂提取法所用溶剂如甲醇、乙腈、乙酸乙酯等成本高,且多数有机溶剂具有毒性,污染环境,所得产品中有溶剂残留,为其在食品和药品中的利用造成隐患。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是,针对现有技术的不足,提供一种工艺安全简单,得率高,成本低能够有效去除杂质成分的从菊花中提取黄酮的制备方法。
为解决上述技术问题,本发明所采用的技术方案是:
一种菊花中黄酮的提取方法,包括以下步骤:
1)粉碎:取干燥均匀的菊花粉碎过筛后得到菊花粉末;
2)溶剂提取:称取菊花粉末,加入提取剂Ⅰ,加热回流提取2次,每次各3h,合并2次提取液后过滤,所得滤液于75℃水浴中旋转蒸发浓缩,再加入蒸馏水继续浓缩,所得浓缩液即为菊花的提取液Ⅰ;
3)超声提取:向菊花提取液Ⅰ中加入提取剂Ⅱ,超声波处理10 min,提取3次,合并提取液,回收溶剂,剩余溶液即为菊花的提取液Ⅱ;
4)纯化:菊花的提取液Ⅱ以1~10mL/min的流速通过大孔吸附树脂后,采用洗脱液进行洗脱,收集洗脱液;
5)浓缩干燥:洗脱液通过旋转蒸发浓缩后,采用真空法进行干燥,得到菊花的黄酮提取物。
所述菊花为杭白菊。
所述步骤1中菊花粉末的粒度为20~300目。
所述步骤2中提取剂Ⅰ为乙醇与水的混合物。所述乙醇与水的混合物中乙醇体积为两者混合体积的50%~99%。
所述步骤3中提取剂Ⅱ为石油醚。所述石油醚的沸点为30~60℃。
所述步骤3中的超声处理的条件为超声功率为200~800W,超声频率为20~40kHz。
大孔吸附树脂是一类具有良好吸附性能的不含离子基团的有机高聚物吸附剂,具有很好的大孔网状结构和较大的比表面积,可以通过物理吸附从溶液中有选择性地吸附有机物,其吸附性能、吸附条件参数因化合物的理化性质不同而不同。大孔吸附树脂按其极性大小和所选用的单体分子结构不同,可分为非极性、中极性和极性三类。本发明所述步骤4中的大孔吸附树脂为球状非极性吸附剂,所述大孔吸附树脂为苯乙烯型大孔吸附树脂。
所述步骤4中的洗脱液为纯乙醇。
本发明与现有技术相比,其有益效果是:
1、本发明通过两次提取,结合回流、超声、大孔吸附树脂辅助手段,提取方式控制简单,方便操作。
2、本发明的提取方法黄酮得率在8%以上,解决了利用常规单一方法进行提取时黄酮得率低、试剂用量大,成本高,污染大等问题,提高了提取效率,有效去除杂质成分。
3、本发明从天然植物资源杭白菊入手为开发品质优良的抗氧化、延衰老、防癌的食品和药品奠定基础。
具体实施方式
为了更好地理解本发明,下面结合实施例进一步清楚阐述本发明的内容,但本发明的保护内容不仅仅局限于下面的实施例。
实施例1
一种菊花中黄酮的提取方法,包括以下步骤:
1)粉碎:取干燥均匀的杭白菊粉碎,过30~60目筛后得到杭白菊粉末;
2)溶剂提取:称取杭白菊粉末50g,加入500mL 95%乙醇,加热回流提取2次,每次3h,合并2次提取液后过滤,所得滤液于75℃水浴中旋转蒸发浓缩,再加入600mL水继续浓缩至300mL,所得浓缩液即为杭白菊提取液Ⅰ;
3)超声提取:向杭白菊提取液Ⅰ中加入300 mL石油醚,采用功率为800W,频率为40kHz的超声波处理10 min,提取3次,合并提取液,回收溶剂,剩余溶液即为杭白菊提取液Ⅱ;
4)纯化:杭白菊提取液Ⅱ以5mL/min的流速通过D101大孔吸附树脂后,采用乙醇进行洗脱,收集洗脱液;
5)浓缩干燥:洗脱液通过旋转蒸发浓缩后,采用真空法进行干燥即可。
实施例2
一种菊花中黄酮的提取方法,包括以下步骤:
1)粉碎:取干燥均匀的杭白菊粉碎,过30~60目筛后得到杭白菊粉末;
2)溶剂提取:称取杭白菊粉末50g,加入500mL 70%乙醇,加热回流提取2次,每次3h,合并2次提取液后过滤,所得滤液于75℃水浴中旋转蒸发浓缩,再加入600mL水继续浓缩至300mL,所得浓缩液即为杭白菊提取液Ⅰ;
3)超声提取:向杭白菊提取液Ⅰ中加入300 mL石油醚,采用功率为800W,频率为40kHz的超声波处理10 min,提取3次,合并提取液,回收溶剂,剩余溶液即为杭白菊提取液Ⅱ;
4)纯化:杭白菊提取液Ⅱ以5mL/min的流速通过D101大孔吸附树脂后,采用乙醇进行洗脱,收集洗脱液;
5)浓缩干燥:洗脱液通过旋转蒸发浓缩后,采用真空法进行干燥即可。
实施例3
一种菊花中黄酮的提取方法,包括以下步骤:
1)粉碎:取干燥均匀的杭白菊粉碎,过30~60目筛后得到杭白菊粉末;
2)溶剂提取:称取杭白菊粉末50g,加入500mL 50%乙醇,加热回流提取2次,每次3h,合并2次提取液后过滤,所得滤液于75℃水浴中旋转蒸发浓缩,再加入600mL水继续浓缩至300mL,所得浓缩液即为杭白菊提取液Ⅰ;
3)超声提取:向杭白菊提取液Ⅰ中加入300 mL石油醚,采用功率为800W,频率为40kHz的超声波处理10 min,提取3次,合并提取液,回收溶剂,剩余溶液即为杭白菊提取液Ⅱ;
4)纯化:杭白菊提取液Ⅱ以5mL/min的流速通过D101大孔吸附树脂后,采用乙醇进行洗脱,收集洗脱液;
5)浓缩干燥:洗脱液通过旋转蒸发浓缩后,采用真空法进行干燥即可。
实施例4
一种菊花中黄酮的提取方法,包括以下步骤:
1)粉碎:取干燥均匀的杭白菊粉碎,过30~60目筛后得到杭白菊粉末;
2)溶剂提取:称取杭白菊粉末50g,加入500mL 70%乙醇,加热回流提取2次,每次3h,合并2次提取液后过滤,所得滤液于75℃水浴中旋转蒸发浓缩,再加入600mL水继续浓缩至300mL,所得浓缩液即为杭白菊提取液Ⅰ;
3)超声提取:向杭白菊提取液Ⅰ中加入300 mL石油醚,采用功率为800W,频率为40kHz的超声波处理10 min,提取3次,合并提取液,回收溶剂,剩余溶液即为杭白菊提取液Ⅱ;
4)纯化:杭白菊提取液Ⅱ以1mL/min的流速通过D101大孔吸附树脂后,采用乙醇进行洗脱,收集洗脱液;
5)浓缩干燥:洗脱液通过旋转蒸发浓缩后,采用真空法进行干燥即可。
实施例5
一种菊花中黄酮的提取方法,包括以下步骤:
1)粉碎:取干燥均匀的杭白菊粉碎,过30~60目筛后得到杭白菊粉末;
2)溶剂提取:称取杭白菊粉末50g,加入500mL 70%乙醇,加热回流提取2次,每次3h,合并2次提取液后过滤,所得滤液于75℃水浴中旋转蒸发浓缩,再加入600mL水继续浓缩至300mL,所得浓缩液即为杭白菊提取液Ⅰ;
3)超声提取:向杭白菊提取液Ⅰ中加入300 mL石油醚,采用功率为800W,频率为40kHz的超声波处理10 min,提取3次,合并提取液,回收溶剂,剩余溶液即为杭白菊提取液Ⅱ;
4)纯化:杭白菊提取液Ⅱ以10mL/min的流速通过D101大孔吸附树脂后,采用乙醇进行洗脱,收集洗脱液;
5)浓缩干燥:洗脱液通过旋转蒸发浓缩后,采用真空法进行干燥即可。
实施例6
一种菊花中黄酮的提取方法,包括以下步骤:
1)粉碎:取干燥均匀的杭白菊粉碎,过30~60目筛后得到杭白菊粉末;
2)溶剂提取:称取杭白菊粉末50g,加入500mL 70%乙醇,加热回流提取2次,每次3h,合并2次提取液后过滤,所得滤液于75℃水浴中旋转蒸发浓缩,再加入600mL水继续浓缩至300mL,所得浓缩液即为杭白菊提取液Ⅰ;
3)超声提取:向杭白菊提取液Ⅰ中加入300 mL石油醚,采用功率为800W,频率为40kHz的超声波处理10 min,提取3次,合并提取液,回收溶剂,剩余溶液即为杭白菊提取液Ⅱ;
4)纯化:杭白菊提取液Ⅱ以5mL/min的流速通过AB-8大孔吸附树脂后,采用乙醇进行洗脱,收集洗脱液;
5)浓缩干燥:洗脱液通过旋转蒸发浓缩后,采用真空法进行干燥即可。
实施例7
一种菊花中黄酮的提取方法,包括以下步骤:
1)粉碎:取干燥均匀的杭白菊粉碎,过30~60目筛后得到杭白菊粉末;
2)溶剂提取:称取杭白菊粉末50g,加入500mL 70%乙醇,加热回流提取2次,每次3h,合并2次提取液后过滤,所得滤液于75℃水浴中旋转蒸发浓缩,再加入600mL水继续浓缩至300mL,所得浓缩液即为杭白菊提取液Ⅰ;
3)超声提取:向杭白菊提取液Ⅰ中加入300 mL石油醚,采用功率为800W,频率为40kHz的超声波处理10 min,提取3次,合并提取液,回收溶剂,剩余溶液即为杭白菊提取液Ⅱ;
4)纯化:杭白菊提取液Ⅱ以5mL/min的流速通过DM-130大孔吸附树脂后,采用乙醇进行洗脱,收集洗脱液;
5)浓缩干燥:洗脱液通过旋转蒸发浓缩后,采用真空法进行干燥即可。
实施例8
一种菊花中黄酮的提取方法,包括以下步骤:
1)粉碎:取干燥均匀的杭白菊粉碎,过30~60目筛后得到杭白菊粉末;
2)溶剂提取:称取杭白菊粉末50g,加入500mL 70%乙醇,加热回流提取2次,每次3h,合并2次提取液后过滤,所得滤液于75℃水浴中旋转蒸发浓缩,再加入600mL水继续浓缩至300mL,所得浓缩液即为杭白菊提取液Ⅰ;
3)超声提取:向杭白菊提取液Ⅰ中加入300 mL石油醚,采用功率为480W,频率为40kHz的超声波处理10 min,提取3次,合并提取液,回收溶剂,剩余溶液即为杭白菊提取液Ⅱ;
4)纯化:杭白菊提取液Ⅱ以5mL/min的流速通过DM-130大孔吸附树脂后,采用乙醇进行洗脱,收集洗脱液;
5)浓缩干燥:洗脱液通过旋转蒸发浓缩后,采用真空法进行干燥即可。
实施例9
一种菊花中黄酮的提取方法,包括以下步骤:
1)粉碎:取干燥均匀的杭白菊粉碎,过30~60目筛后得到杭白菊粉末;
2)溶剂提取:称取杭白菊粉末100g,加入1000mL 70%乙醇,加热回流提取2次,每次3h,合并2次提取液后过滤,所得滤液于75℃水浴中旋转蒸发浓缩,再加入1200mL水继续浓缩至600mL,所得浓缩液即为杭白菊提取液Ⅰ;
3)超声提取:向杭白菊提取液Ⅰ中加入600 mL石油醚,采用功率为800W,频率为40kHz的超声波处理10 min,提取3次,合并提取液,回收溶剂,剩余溶液即为杭白菊提取液Ⅱ;
4)纯化:杭白菊提取液Ⅱ以5mL/min的流速通过DM-130大孔吸附树脂后,采用乙醇进行洗脱,收集洗脱液;
5)浓缩干燥:洗脱液通过旋转蒸发浓缩后,采用真空法进行干燥即可。
对比例1
一种菊花中黄酮的提取方法,包括以下步骤:
1)粉碎:取干燥均匀的杭白菊粉碎,过30~60目筛后得到杭白菊粉末;
2)溶剂提取:称取杭白菊粉末50g,加入500mL丙酮,加热回流2次(各3h),合并2次提取液后过滤,所得滤液于75℃水浴中旋转蒸发浓缩,再加入600mL水继续浓缩至300mL,所得浓缩液即为杭白菊提取液Ⅰ;
3)超声提取:向杭白菊提取液Ⅰ中加入300 mL石油醚,采用功率为800W,频率为40kHz的超声波处理10 min,提取3次,合并提取液,回收溶剂,剩余溶液即为杭白菊提取液Ⅱ;
4)纯化:杭白菊提取液Ⅱ以5mL/min的流速通过D101大孔吸附树脂后,采用乙醇进行洗脱,收集洗脱液;
5)浓缩干燥:洗脱液通过旋转蒸发浓缩后,采用真空法进行干燥,得到杭白菊黄酮提取物。
对比例2
一种菊花中黄酮的提取方法,包括以下步骤:
1)粉碎:取干燥均匀的杭白菊粉碎,过30~60目筛后得到杭白菊粉末;
2)溶剂提取:称取杭白菊粉末50g,加入500mL甲醇,加热回流2次(各3h),合并2次提取液后过滤,所得滤液于75℃水浴中旋转蒸发浓缩,再加入600mL水继续浓缩至300mL,所得浓缩液即为杭白菊提取液Ⅰ;
3)超声提取:向杭白菊提取液Ⅰ中加入300 mL石油醚,采用功率为800W,频率为40kHz的超声波处理10 min,提取3次,合并提取液,回收溶剂,剩余溶液即为杭白菊提取液Ⅱ;
4)纯化:杭白菊提取液Ⅱ以5mL/min的流速通过D101大孔吸附树脂后,采用乙醇进行洗脱,收集洗脱液;
5)浓缩干燥:洗脱液通过旋转蒸发浓缩后,采用真空法进行干燥,得到杭白菊黄酮提取物。
为了观察实施例1~9及对比例1~2的杭白菊黄酮得率,可采用如下方法进行测试:
准确称取实施例及对比例中的杭白菊黄酮提取物各25mg,置于25ml容量瓶中,加甲醇2.5ml充分溶解,再用蒸馏水定容。取样品溶液各5ml,加入25ml容量瓶中,加蒸馏水至6ml,加5%亚硝酸钠溶液1ml,混匀,放置7min,加10%硝酸铝溶液1ml,混匀,静置7min,加入5%氢氧化钠溶液10ml,加蒸馏水定容,混匀,静置20min。依据硝酸铝-亚硝酸钠显色法,测定510nm波长下各样品的吸光度A,试验重复三次取平均值。杭白菊花各提取样品的黄酮浓度通过芦丁标准曲线得到,并以此计算出黄酮的得率。
Y=[(C*V*F/M*106)×100]%
公式中:C —杭白菊样品溶液黄酮浓度,μg/ml;
V —杭白菊样品溶液体积,ml;
F —稀释的倍数;
M—杭白菊样品质量,g;
Y —杭白菊黄酮得率,%。
实施例1~9及对比例1~2的黄酮得率如下表所示:
黄酮粉末质量(g) | 黄酮得率(%) | |
实施例1 | 6.335 | 12.67±0.12 |
实施例2 | 6.360 | 12.72±0.23 |
实施例3 | 4.010 | 8.02±0.24 |
实施例4 | 4.835 | 9.67±0.12 |
实施例5 | 6.080 | 12.16±0.31 |
实施例6 | 5.440 | 10.88±0.36 |
实施例7 | 5.970 | 11.94±0.25 |
实施例8 | 4.235 | 8.47±0.30 |
实施例9 | 12.590 | 12.59±0.14 |
对比例1 | 6.805 | 13.61±0.19 |
对比例2 | 6.225 | 12.45±0.24 |
综上可知,实施例1~2所得杭白菊黄酮的得率最高,各工艺参数值也均达到最优,所用试剂成本低、毒性小,操作简单,整个提取时间短,为从菊花天然植物资源入手开发品质优良的抗氧化、延衰老、防癌的食品和药品奠定基础。
Claims (1)
1.一种菊花中黄酮的提取方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)粉碎:取干燥均匀的杭白菊粉碎,过30~60目筛后得到杭白菊粉末;
2)溶剂提取:称取杭白菊粉末50g,加入500mL70%乙醇,加热回流提取2次,每次3h,合并2次提取液后过滤,所得滤液于75℃水浴中旋转蒸发浓缩,再加入600mL水继续浓缩至300mL,所得浓缩液即为杭白菊提取液Ⅰ;
3)超声提取:向杭白菊提取液Ⅰ中加入300mL石油醚,采用功率为800W,频率为40kHz的超声波处理10min,提取3次,合并提取液,回收溶剂,剩余溶液即为杭白菊提取液Ⅱ;
4)纯化:杭白菊提取液Ⅱ以5mL/min的流速通过D101大孔吸附树脂后,采用乙醇进行洗脱,收集洗脱液;
5)浓缩干燥:洗脱液通过旋转蒸发浓缩后,采用真空法进行干燥即可。
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---|---|---|---|
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PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
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