CN102746941A - 一种从南极磷虾中富集磷脂酰肌醇的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种从南极磷虾中富集磷脂酰肌醇的方法,步骤如下:(1)取1公斤冰冻的南极磷虾,加入到1~1.3升的体积分数为90~100%的乙醇液中,自然条件下搅拌提取4~6次,每次1~3h,提取液过滤合并,得滤液;(2)将上述得到的滤液于60~65°C和-0.07~-0.09MPa条件下浓缩至滤液体积的8~10%,得浓缩提取液;(3)向上述得到的浓缩提取液中加入等体积的正己烷,混匀,静止分层后,取透明微红的最下层液;(4)将上述得到的最下层液于50~55°C和-0.07~-0.09MPa条件下蒸发除去正己烷,得油状液,即为富集了磷脂酰肌醇的产品,该产品中含磷脂2.70~2.76%,其中PI占磷脂的50.5~51.92%,可以在此基础上对磷脂酰肌醇进行进一步的再提取、分离、纯化等。
Description
技术领域
本发明涉及一种从南极磷虾中富集磷脂酰肌醇的方法。
背景技术
南极磷虾是一种生活在南冰洋的南极洲水域的磷虾,以群集方式生活,有时密度高达1万-3万只/M3,它们可能是地球上最成功的动物物种,据统计大约有5-50亿吨(因统计方法不一样有较大差异)。
目前南极磷虾渔业每年约10万吨,其中80%由日本捕获,由于南大洋以磷虾为主食物的须鲸也被歼捕殆尽。有关科学家曾根据旺盛时期鲸类对磷虾类的摄食量估计大约每年有1.5亿吨由于鲸类资源的衰退而剩余的磷虾可供捕获。世界上每年的全部的渔业产量为0.99亿吨,这标志着南极磷虾有较大的可利用空间。我国正在试探捕南极磷虾以完善南极磷虾的捕捞和相关海上技术。南极磷虾的大量捕捞标志着深加工技术的开始。在日本南极磷虾大多作为料理,而在其他国家则主要作为渔业的饲料和鱼的饵料。南极磷虾高附加值的研究是其深加工的研究核心。
南极磷虾含有较为丰富的油脂,含有不饱和脂肪酸、虾青素和磷脂。磷脂酰肌醇(phosphatidylinositol;PI)是细胞信号的通路成分,称为第三信使,信号通路的研究是当前生命科学研究的热点,也是生物制剂争相开发利用的重大课题。已知的信使如第一信使脂类激素和含氮激素,第二信使cAMP等均或为药物,或为保健成分。第三信使PI在人体、细胞代谢中起着极为重要的生理生化作用。是细胞快速应答和缓慢应答的启点、交叉点、关键点。PI就像通信网络中控制着信息传递方向的接线员,控制着人体生理生化、细胞生与死的进展方向。
PI的应用开发备受世界各国关注,2001年美国开发出了世界上第一个以PI作为中间体的抗艾滋病药物(US 6316424.B)。科学家在PI的肌醇环上接上磺酰基基团(-SO3),当这种药物***细胞膜后,暴露在膜外带有1-几个磺酰基团的肌醇环有极强的杀病菌、病毒作用,就像细胞全身穿上了盔甲。PI有望成为抗其他病毒药物的中间体。在流感病毒、SARS、霍乱等菌毒肆虐世界的今天,PI的应用具有极其广阔的前景。日本等国把PI也用于化妆品,作为药物脂质体和日常保健品的原料、食品和药物的乳化剂(JP 05097873 A2)海产品的保鲜剂;PI还是心、肝、肾等人体重要器官移植前保存液的主要成分,有抗细胞凋亡(WO 99/47101),也有很好的免疫效果(WO 03/013513 A1)。另外实验证明PI有抗动脉粥样硬化的作用,有利尿和治疗便秘的作用等。
PI因sn-1和sn-2位所联接的脂肪酸不一而分子结构和分子量有很大差异。不同动物体PI分子群中各种PI分子种类及其比例有很大差异,即PI是一个分子群。不同的动物体中磷脂中的卵磷脂(PC)、脑磷脂(PE)、PI和磷脂酸,磷酯酰丝氨酸(PS)等比例也有很大差异。南极磷虾中虾油(磷脂是油的伴随物)的磷脂中PC占80%以上,而PS、PE、PA以及溶血性磷脂的总含量低于20%,而PI量很少,因此制备南极磷虾中的PI,最重要的第一步是PI的富集,然后才能在此基础上进一步再提取,分离,纯化。至今,人们还尚未对南极磷虾中的PI进行过研究报道。
发明内容
针对上述现有技术,本发明提供了一种从南极磷虾中富集磷脂酰肌醇的方法,为南极磷虾中磷脂酰肌醇的深入研究奠定了基础。
本发明是通过以下技术方案实现的:
一种从南极磷虾中富集磷脂酰肌醇的方法,步骤如下:
(1)取1公斤冰冻的南极磷虾,加入到1~1.3升的体积分数为90~100%的乙醇液中,自然条件下搅拌提取4~6次,每次1~3h,提取液过滤合并,得滤液;
(2)将上述得到的滤液于60~65°C和-0.07~-0.09MPa条件下浓缩至滤液体积的8~10%,得浓缩提取液;
(3)向上述得到的浓缩提取液中加入等体积的正己烷,混匀,静止分层后,取透明微红的最下层液;
(4)将上述得到的最下层液于50~55°C和-0.07~-0.09MPa条件下蒸发除去正己烷,得油状液,即为富集了磷脂酰肌醇的产品,该产品中含磷脂2.70~2.76%(质量分数),其中PI占磷脂的50.5~51.92%(质量分数)。
本发明的从南极磷虾中富集磷脂酰肌醇的方法,在低温下进行,能够保证南极磷虾中的磷脂、DHA、EPA、虾红素、动物类黄酮素、不饱和脂肪酸、维生素A、维生素E和微量元素等成分不受到破坏,且富集过程中的上层溶液可以回收再利用,提取后的南极磷虾可以再用于生产其它产品。经本发明的方法得到的产品,磷脂酰肌醇的富集效率高,产品中含磷脂2.70~2.76%,其中磷脂酰肌醇占磷脂的50.5~51.92%,可以在此基础上对磷脂酰肌醇进行进一步的再提取、分离、纯化等。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步的说明。
实施例1
称冰冻的南极磷虾500g(含水80%,虾干物质占20%,下同),加入95%乙醇600mL,在室温下搅拌3h,倒出上清液并过滤。沉淀再反复提取4次,共提取5次,提取液过滤合并得滤液;将滤液在60℃,-0.07MPa条件下蒸发浓缩至合并滤液体积的10%,得到浓缩提取液;向浓缩提取液中加入同体积的正己烷,摇匀静置分层,取透明微红色的最下层液,在52°C,-0.08MPa条件下蒸发除去正己烷,得13g油状液。该液体中磷脂含量为2.72%,其中PI占磷脂的51.92%。
实施例2
称冰冻的南极磷虾500g,加入90%乙醇550mL。在室温下搅拌提取3h,倒出上清液并过滤。沉淀再重复提取3次,共提取4次,提取液过滤合并得滤液;将滤液在65°C,-0.09MPa条件下浓缩至合并滤液体积的8%,得到浓缩提取液;向浓缩液中加入同体积的正己烷,摇匀静置分层,取透明微红的最下层液,在55°C,-0.09MPa条件下蒸除溶剂,得11g油状液。该液体中磷脂含量为2.70%,其中PI占磷脂的50.5%。
实施例3
称冰冻的南极磷虾500g,加入无水乙醇650mL,在室温下搅拌提取1h,倒出上清液并过滤。沉淀再重复提取5次,共提取6次。提取液过滤合并得滤液;将滤液在60°C,-0.08MPa条件下浓缩至合并滤液体积的10%,得到浓缩提取液;向浓缩液中加入同体积的正己烷,摇匀静置分层,取透明微红的最下层液,在50°C,-0.07MPa下蒸除溶剂,得12g油状液。该液体中磷脂含量为2.76%,其中PI占磷脂的51.7%。
实施例4
称冰冻的南极磷虾500g,加入95%乙醇500mL,在室温条件下搅拌提取2h,倒出上清液并过滤。沉淀再重复提取4次,共提取5次,提取液过滤合并得滤液;将滤液在65°C,-0.09MPa条件下浓缩至合并滤液体积的9%,得到浓缩提取液;向该浓缩液中加入同体积的正己烷,摇匀静置分层,取透明微红的最下层液,在50°C,-0.09MPa条件下蒸发溶剂,得12g油状液,该液体中磷脂含量为2.74%,其中PI占磷脂的51.9%。
Claims (1)
1.一种从南极磷虾中富集磷脂酰肌醇的方法,步骤如下:
(1)取1公斤冰冻的南极磷虾,加入到1~1.3升的体积分数为90~100%的乙醇液中,自然条件下搅拌提取4~6次,每次1~3h,提取液过滤合并,得滤液;
(2)将上述得到的滤液于60~65°C和-0.07~-0.09MPa条件下浓缩至滤液体积的8~10%,得浓缩提取液;
(3)向上述得到的浓缩提取液中加入等体积的正己烷,混匀,静止分层后,取透明微红的最下层液;
(4)将上述得到的最下层液于50~55°C和-0.07~-0.09MPa条件下蒸发除去正己烷,得油状液,即为富集了磷脂酰肌醇的产品。
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