CN102532240A

CN102532240A - 一种木栓酮的提纯方法

Info

Publication number: CN102532240A
Application number: CN2010106038911A
Authority: CN
Inventors: 李法庆; 刘东锋
Original assignee: Suzhou Baozetang Medical Technology Co Ltd
Current assignee: Suzhou Baozetang Medical Technology Co Ltd
Priority date: 2010-12-24
Filing date: 2010-12-24
Publication date: 2012-07-04

Abstract

本发明提供一种木栓酮的提纯方法，其特征在于采用超临界CO₂萃取和大孔树脂纯化木栓酮。该方法的步骤为：将原药材超临界CO₂萃取，萃取物溶于NaHCO₃溶液，滤出不溶物，混悬于水，用氯仿萃取，取氯仿层减压回收溶剂，乙醇溶解，加适量大孔树脂搅拌均匀，挥干溶剂，水和不同浓度乙醇溶液梯度洗脱，收集富含木栓酮的洗脱液，浓缩蒸干，乙酸乙酯回流溶解，静置结晶，滤出结晶干燥即得产品。本发明步骤简单、选择分离效果好、提取率高，可推广规模化生产。

Description

一种木栓酮的提纯方法

技术领域：

本发明属于天然药物提取技术领域，涉及一种应用超临界萃取法和大孔树脂法提取纯化木栓酮的方法。

背景技术：

竹茹为禾本科刚竹属、莿竹属和牡竹属中一些竹种的茎杆所刮下的外皮层或其次一层，具有清热凉血、化痰、止吐和胃、降逆除烦的功效，用于痰热咳嗽、胆火挟痰、烦热呕吐、惊悸失眠、中风痰迷、舌强不语、胃热呕吐、妊娠恶阻、胎动不安等症。

木栓酮，木栓烷型五环三萜类化合物，针状结晶，熔点263～263.5℃，溶于氯仿、石油醚和热乙醇，不溶于水。木栓酮存在许多植物中，如卫矛科植物卫矛的全草，大戟科植物重阳木的茎，石蕊科植物雀儿石蕊的枝状体等植物。

何兰等的“木栓酮化学结构修饰及其抗炎活性”，该研究通过对其化学结构进行修饰，观察抗炎活性强度，表明木栓酮母核具有抗炎活性及抑制真菌生长的作用。

目前关于木栓酮提取纯化工艺的相关研究很少。姚晓宝等“气相色谱法测定竹茹中三萜化合物木栓酮的含量”，该文献提供的方法是竹茹粉末用正己烷热回流提取，该方法只是粗提取，产品纯度低。

周应军等“巴东栎化学成分研究”，所公开的方法是巴东栎叶片用95％乙醇回流提取3次，回收乙醇后得到的浸膏混悬于水，用石油醚，回收溶媒，石油醚萃取物经硅胶柱层析，以石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，得到化合物木栓酮。该法只适合实验室研究分析，不易于大规模生产。

发明内容：

本发明要解决的技术问题是提供一种木栓酮的提纯方法，该方法步骤简单、选择分离效果好、提取率高，可推广至大规模生产。

本发明是通过以下技术方案实现的：

一种木栓酮的提纯方法，其特征在于包括以下步骤：将竹茹放入提取罐，加20-30ml/200mg药材的夹带剂，进行超临界CO₂萃取，萃取物溶于5％NaHCO₃溶液，滤出不溶物，混悬于水，用等体积氯仿萃取，取氯仿层减压回收溶剂，乙醇溶解，加适量大孔树脂拌样，挥干溶剂，装于大孔树脂柱顶端，水和不同浓度乙醇溶液梯度洗脱，收集富含木栓酮的洗脱液，浓缩蒸干，乙酸乙酯回流溶解，静置结晶，滤出结晶干燥即得产品。

所述超临界CO₂萃取温度为45-60℃，萃取压力为25-40MPa，CO₂流量为20-30L/h，萃取时间为1-3h，夹带剂为95％乙醇溶液，分离釜I温度为40-45℃，压力为6-8MPa，分离釜II温度为30-45℃，压力为4-6.5MPa。

所述的大孔树脂可选X-5、D101、AB-8、XAD-16中的一种，洗脱剂为30-100％乙醇溶液，洗脱流速控制在2-3BV/h。

所述拌样时大孔树脂用量为药材重量的3-5％。

本发明的优点在于：

(1)采用超临界萃取提取完全，杂质少，溶剂用量少，无污染，周期短。

(2)大孔树脂吸附纯化，可有效除去多种杂质，分离效果好，产品纯度高。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式：

实施例1：

将竹茹粉碎，取1kg置于提取罐，加100ml95％乙醇溶液，进行超临界CO₂萃取2h，萃取温度为45℃，萃取压力为40MPa，CO₂流量为20L/h，分离釜I温度为40℃，压力为6MPa，分离釜II温度为45℃，压力为6.5MPa，萃取物加入3L5％NaHCO₃溶液，滤出不溶物，混悬于水，用等体积氯仿萃取，氯仿层减压回收溶剂，加30g大孔树脂拌样，挥干溶剂，装于X-5型大孔树脂柱顶端，先用3L水洗脱，再依次用3L30％、3L50％、3L70％、2L99％乙醇溶液梯度洗脱，收集富含木栓酮的洗脱液，浓缩蒸干，用200ml乙酸乙酯回流溶解，静置结晶，滤出结晶干燥即得木栓酮3.9g，含量为90.1％。

实施例2：

将竹茹粉碎，取1kg置于提取罐，加150ml95％乙醇溶液，进行超临界CO₂萃取3h，萃取温度为60℃，萃取压力为35MPa，CO₂流量为25L/h，分离釜I温度为45℃，压力为8MPa，分离釜II温度为30℃，压力为5.5MPa，萃取物加入4L5％NaHCO₃溶液，滤出不溶物，混悬于水，用等体积氯仿萃取，氯仿层减压回收溶剂，加50g大孔树脂拌样，挥干溶剂，装于D101大孔树脂柱顶端，先用4L水洗脱，再依次用4L40％、4L55％、4L80％、3L95％乙醇溶液梯度洗脱，收集富含木栓酮的洗脱液，浓缩蒸干，180ml乙酸乙酯回流溶解，静置结晶，滤出结晶干燥即得木栓酮3.5g，含量为94.8％。

实施例3：

将竹茹粉碎，取2kg置于提取罐，加260ml95％乙醇溶液，进行超临界CO₂萃取1h，萃取温度为50℃，萃取压力为25MPa，CO₂流量为30L/h，分离釜I温度为45℃，压力为7MPa，分离釜II温度为35℃，压力为4MPa，萃取物加入10L5％NaHCO₃溶液，滤出不溶物，混悬于水，用等体积氯仿萃取，氯仿层减压回收溶剂，加80g大孔树脂拌样，挥干溶剂，装于AB-8大孔树脂柱顶端，先用10L水洗脱，再依次用6L40％、6L60％、6L80％、5L100％乙醇溶液梯度洗脱，收集富含木栓酮的洗脱液，浓缩蒸干，350ml乙酸乙酯回流溶解，静置结晶，滤出结晶干燥即得木栓酮7.0g，含量为91.9％。

实施例4：

将竹茹粉碎，取3kg置于提取罐，加300ml95％乙醇溶液，进行超临界CO₂萃取3h，萃取温度为50℃，萃取压力为40MPa，CO₂流量为25L/h，分离釜I温度为40℃，压力为6MPa，分离釜II温度为35℃，压力为5MPa，萃取物加入12L5％NaHCO₃溶液，滤出不溶物，混悬于水，用等体积氯仿萃取，氯仿层减压回收溶剂，加100g大孔树脂拌样，挥干溶剂，装于XAD-16大孔树脂柱顶端，先用12L水洗脱，再依次用10L30％、10L45％、9L70％、9L95％乙醇溶液梯度洗脱，收集富含木栓酮的洗脱液，浓缩蒸干，480ml乙酸乙酯回流溶解，静置结晶，滤出结晶干燥即得木栓酮9.1g，含量为92.5％。

实施例5：

将竹茹粉碎，取3kg置于提取罐，加280ml95％乙醇溶液，进行超临界CO₂萃取1h，萃取温度为45℃，萃取压力为35MPa，CO₂流量为25L/h，分离釜I温度为45℃，压力为6.5MPa，分离釜II温度为35℃，压力为5.5MPa，萃取物加入15L5％NaHCO₃溶液，滤出不溶物，混悬于水，用等体积氯仿萃取，氯仿层减压回收溶剂，加120g大孔树脂拌样，挥干溶剂，装于AB-8大孔树脂柱顶端，先用15L水洗脱，再依次用9L30％、9L50％、9L75％、8L90％乙醇溶液梯度洗脱，收集富含木栓酮的洗脱液，浓缩蒸干，500ml乙酸乙酯回流溶解，静置结晶，滤出结晶干燥即得木栓酮9.7g，含量为93.2％。

Claims

1.一种木栓酮的提纯方法，其特征在于包括以下步骤：将竹茹放入提取罐，加20-30ml/200mg药材的夹带剂，进行超临界CO₂萃取，萃取物溶于5％NaHCO₃溶液，滤出不溶物，混悬于水，用等体积氯仿萃取，取氯仿层减压回收溶剂，乙醇溶解，加适量大孔树脂拌样，挥干溶剂，水和不同浓度乙醇溶液梯度洗脱，收集富含木栓酮的洗脱液，浓缩蒸干，乙酸乙酯回流溶解，静置结晶，滤出结晶干燥即得产品。

2.如权利要求1所述的提纯方法，其特征在于所述超临界CO₂萃取温度为45-60℃，萃取压力为25-40MPa，CO₂流量为20-30L/h，萃取时间为1-3h，夹带剂为95％乙醇溶液，分离釜I温度为40-45℃，压力为6-8MPa，分离釜II温度为30-45℃，压力为4-6.5MPa。

3.如权利要求1所述的提纯方法，其特征在于所述的大孔树脂可选X-5、D101、AB-8、XAD-16中的一种，洗脱剂为30-100％乙醇溶液，洗脱流速控制在2-3BV/h。

4.如权利要求1所述的提纯方法，其特征在于所述拌样时大孔树脂用量为药材重量的3-5％。