CN102391876B

CN102391876B - 一种复合生物土壤改良剂及其应用

Info

Publication number: CN102391876B
Application number: CN201110292342.1A
Authority: CN
Inventors: 王立华; 耿小青; 董吉亮; 张彦秋; 陈靠山
Original assignee: KAOSHAN BIOLOGICAL SCIENCE AND TECHNOLOGY Co Ltd SHANDONG
Current assignee: KAOSHAN BIOLOGICAL SCIENCE AND TECHNOLOGY Co Ltd SHANDONG
Priority date: 2011-09-29
Filing date: 2011-09-29
Publication date: 2015-03-04
Anticipated expiration: 2031-09-29
Also published as: CN102391876A

Abstract

本发明公开了一种无公害绿色高效土壤改良剂，其原料组成为：拟康氏木霉发酵液、枯草芽孢杆菌发酵液、水溶性甲壳素、黄腐酸钾、腐熟有机质。其中，拟康氏木霉和枯草芽孢杆菌是经过筛选和诱变处理获得的高效菌株，并通过液体深层发酵技术获得拟康氏木霉和枯草芽孢杆菌发酵液，再组合制成无公害绿色高效土壤改良剂。本发明土壤改良剂可以达到改善土壤理化性质，打破土壤板结，降低土壤容重，提高土壤透气性，促进土壤微生物活性，促进植物根系生长，增强农作物抗病能力，提高农作物产量，改善品质，恢复农作物原生态等功能，是一种高效、环保、使用方便的新型土壤改良剂。

Description

一种复合生物土壤改良剂及其应用

技术领域

本发明是一种复合型土壤改良剂，具体地来说，以活性复合菌为中心并添加黄腐酸钾和腐熟有机质，既可改善土壤理化性质，提供农作物生长所必需的营养物质，又可抑制植物病害，是一种绿色高效的土壤改良剂。

背景技术

土壤是植物生长环境的重要载体，它给植物提供光合作用的原料和附着基质，土壤质量和作物产量息息相关。土壤质量是指在自然或者人工管理的生态***边界内，土壤具有动植物生产持续性，保持和提高水、气质量以及人类健康与生活的能力。土壤质量的基础是土壤肥力，土壤肥力是土壤为植物生长提供和协调营养条件和环境条件的能力，是土壤各种基本性质的综合表现。提高土壤肥力的措施包括：增施有机肥料、种植绿肥和合理施用化肥，这些措施不仅有利于当季作物的高产，而且有利于土壤肥力的恢复与提高。当前，由于各种不合理的人类活动（过度依赖和不合理的使用化学肥料、过度垦殖、单一的耕作制度等）及自然因素引起的土壤退化问题已严重威胁到农业的可持续性发展，造成土壤退化。土壤退化可以分为物理退化、化学退化和生物退化三种类型，主要表现为土壤侵蚀、土壤盐渍化及压实板结、土壤酸化、土壤有机质流失、土壤重金属污染毒化等。当前，我国土壤退化的主要表现形式是土壤侵蚀、土壤板结。据统计，1996年我国水土流失面积达到惊人的183万km²，占国土面积的19.00%，其中南方红黄壤地区土壤侵蚀面积为6.15×10⁵ km²，占该地区土地总面积的25.00%。南方红壤区现已约有2×10⁵ km²的土壤出现严重的酸化情况。土壤侵蚀、土壤板结严重影响了我国农业生产的发展。

土壤侵蚀也称为水土流失，指表层土壤或成土母质在水、风、重力等作用下，发生各种形式的剥蚀、搬运和再堆积的现象，造成表层土壤流失、土壤沙化、土壤板结压实，是影响土壤退化的最重要的因素。人为活动造成的植被破坏和土壤裸露是加剧土壤侵蚀的重要原因。

土壤板结是在降雨或灌水等外因作用下，土壤结构破坏，干燥后内聚压实的现象。土壤中施入过量的氮肥，导致微生物消耗过多的土壤有机物质，影响微生物活性，破坏土壤团聚体结构，是土壤板结的重要原因。

从19世纪末至今，为了解决土壤退化问题，不同国家的科学工作者门开发了多种土壤改良剂。根据其原材料来源可以将其分为天然改良剂、人工合成改良剂和生物改良剂。天然改良剂，如天然矿物、无机和有机固体废弃物、提取高分子聚合物。合成改良剂是模拟天然改良剂的结构和功能人工合成的高分子聚合物，如聚丙烯酰胺、聚乙烯醇树脂、聚乙烯醇、脲醛树脂等。在生产应用中，天然改良剂和合成改良剂存在着一些理论和实际问题及负面效应。如：粉煤灰对P有较强的吸附固定作用；有机废弃物含有各种病原菌、重金属、多氯联苯等有害物质；聚丙烯酰胺的生产成本较高且其降解的中间产物丙烯酰胺有毒等等。

当前我国的生物改良剂的种类繁多、杂乱，但多为粗放型常规技术，菌种和配方无针对性，产品的有效成分标准混乱，产品质量和实际应用效果不理想，且生产过程中污染严重，大规模推广应用范例较少。高效菌种的分离筛选、纯化培养问题、生产成本和污染控制及环境安全评估依然是制约生物改良剂发展的瓶颈。

发明内容

针对土壤退化和现有土壤改良剂作用不佳等问题，本发明的目的在于提供一种无污染、高效、实用的复合生物土壤改良剂，本发明还提供了该土壤改良剂的应用方法。

本发明所述的复合生物土壤改良剂的组分包括拟康氏木霉发酵液和枯草芽孢杆菌发酵液。

本发明所述的复合生物土壤改良剂，包括以下主要组分：

拟康氏木霉发酵液

枯草芽孢杆菌发酵液

水溶性甲壳素

黄腐酸钾

本发明所述复合生物土壤改良剂中所使用的拟康氏木霉发酵液，是由拟康氏木霉（Trichoderma pseudokiningii）TRIPI发酵制得的。

本发明所选用的拟康氏木霉（Trichoderma pseudokiningii）TRIPI是从秸秆中分离、然后经诱变、筛选的新型菌株，命名为拟康氏木霉（Trichoderma pseudokiningii）TRIPI。该菌株已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC进行保藏，保藏号为CGMCC NO.1443，保藏时间为2005年8月22日，保藏地址为北京市海淀区中关村北一条13号，中国科学院微生物研究所。

本发明人将从试验田秸秆中按常规方式分离出的拟康氏木霉原始菌株，经过紫外线二次复合诱变处理（1×10⁶个/ml的菌悬液放于直径9 cm的培养皿内，紫外灯预热20 min，将培养皿至于磁力搅拌器上并使培养皿在10W紫外灯垂直距离25 cm左右，照射90S），筛选出具有较高菌丝生长速率、纤维素酶活性和抑菌活性的菌株，即为本发明所提供的保藏号为CGMCC NO.1443的拟康氏木霉（Trichoderma pseudokiningii）TRIPI。

本发明拟康氏木霉（Trichoderma pseudokiningii）TRIPI的培养方法为：

① 用接种环将冷藏保存的拟康氏木霉TRIPI菌种接种于平板PDA培养基（马铃薯200g，蔗糖20g，琼脂20g，蒸馏水1000mL），转接2代；② 接种环挑取边缘菌丝转接于PDB培养基（马铃薯200g，蔗糖20g，蒸馏水1000mL）中，培养温度25℃～30℃，最适温度为28℃，150rpm，时间为7～10天，发酵液100μm筛过滤得到孢子悬浮液，活孢子浓度为3-9×10⁸个/ml。

将筛选出的该菌株连续转接10代，其优良性状遗传稳定。

表1 拟康氏木霉诱变结果

出发菌株和突变菌株摇瓶培养5天后菌丝干重和发酵液（1000r/min，离心10min）滤纸酶（FPA）、内切型-β-葡聚糖酶（C1酶）、外切型-β-葡聚糖酶（CBH酶）活性和盆栽实验中对黄瓜黄萎病菌（Fusarium oxysporum f.sp. cucumerinum）、西瓜枯萎病菌（Fusarium oxysporum f.sp. niveum）的防治效果。

。

本发明所述复合生物土壤改良剂中所使用的枯草芽孢杆菌发酵液，是由枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BACI发酵制得的。

本发明中枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BACI是从植株根际土壤中分离、然后经诱变、筛选的新型菌株，命名为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BACI。该菌株已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC进行保藏，保藏号为CGMCC NO.1442，保藏时间为2005年8月22日，保藏地址为北京市海淀区中关村北一条13号，中国科学院微生物研究所。

本发明人将从试验田植株根际土壤中按常规方式分离出的枯草芽孢杆菌原始菌株，经过紫外线二次复合诱变（1×10⁷个/ml的菌悬液放于直径9 cm的培养皿内，紫外灯预热20 min，将培养皿至于磁力搅拌器上并使培养皿在20 W紫外灯垂直距离30 cm左右，照射150S）筛选出具有较高生长速度、β-甘露聚糖酶、β葡聚糖酶、蛋白酶和抑菌活性的菌株，即为本发明所提供的保藏号为CGMCC NO.1442的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BACI。

本发明中枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BACI的培养方法为：采用液体深层发酵培养的方式进行发酵培养获得枯草芽孢杆菌芽孢

①将保藏的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BACI菌种，划线接种于牛肉膏蛋白胨培养基（牛肉膏0.3g、蛋白胨1g、氯化钠0.5g、琼脂2g、蒸馏水100ml、pH7.0～7.2）活化24h；②接种环挑取菌体接种于LB培养基（胰化蛋白胨 10g 、酵母提取物 5g、NaCl 10g、蒸馏水1000ml），扩大培养24h；③以1%接种量接种于PDB培养基中（马铃薯200g，葡萄糖20g，蒸馏水1000ml），发酵条件为：温度37℃，pH=7，溶解氧气浓度维持在20-30％饱和度，220rpm，培养时间为2～3天，有效菌体浓度为1-3×10⁹个/ml。

将筛选出的该菌株连续转接10代，其优良性状遗传稳定。

表2 枯草芽孢杆菌诱变结果

出发菌株和突变菌株摇瓶培养24h后，发酵液(8000r/min，离心20min)β-甘露聚糖酶、β-葡聚糖酶、蛋白酶活性和盆栽实验中对黄瓜黄萎病菌（Fusarium oxysporum f.sp. cucumerinum）、西瓜枯萎病菌（Fusarium oxysporum f.sp. niveum）的防治效果。

。

拟康氏木霉是一种非常具有土壤改善潜力的菌株，分布广泛，生长势旺盛。其土壤改善机制多种多样。拟康氏木霉具有丰富的菌丝，可以附着和交绕土壤微粒，提高土壤稳定性和通透性，打破土壤板结；拟康氏木霉还可高效表达β-1, 4- 葡聚糖水解酶、几丁质酶、纤维素酶、蛋白酶等高活性的特殊酶系，分泌丰富的胞外高分子多糖和糖蛋白，可以改善土壤理化性质，促进土壤养分的释放和植物根系对营养成分的吸收，促进植物根系生长；产生挥发性或非挥发性抑制病原菌生长的活性物质，如粘帚毒素、煤尼毒素及胜肽素等抑制有害微生物的生长，β- 1, 4- 葡聚糖水解酶和几丁质酶对植物病原真菌的细胞壁具有强烈的水解作用，引起病原体的崩解并抑制病原菌孢子和芽孢的萌发。另外，拟康氏木霉适应性极强，在4℃~42℃之间和多种土壤环境下均可快速生长，可以快速占领空间位点和营养资源。

枯草芽孢杆菌，其在芽孢状态下抗逆性极强，可以耐氧化、高温等各种逆性环境。枯草芽孢杆菌在生长过程中可产生丰富的具有高活力和植物病害防治功能的生理活性物质，包括蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶、葡聚糖酶、果胶酶、维生素、几丁质酶、氨基酸、促生长因子、脂肽类抗生素、伊枯草菌素、生物表面活性素等多种化合物，它们具有促进土壤有机质分解，提高土壤控肥能力和土壤酶活性，改善土壤中微生物菌群结构，促进植物根系生长，抑制有害真菌、细菌、病毒和菌原体等作用，其中表面活性素对多种植物病原菌有抑制活性。其代谢产物抗逆性强，可以长期发挥效用，降低用量，既可提高土壤肥力，促进植株生长，又可防止病害，提高作物产量。

拟康氏木霉和枯草芽孢杆菌在生长过程中均会分泌胞外多糖、有机酸、糖蛋白、维生素、特殊酶系等具有一定生理功能的活性物质，由于两种菌种的形态性质互不相同，因而，在改善土壤理化性质，促进植物根系的生长，增强根系对营养成分的吸收能力，调节根际土壤微生物菌群结构多方面，可以起到互补和增强作用。且大量的拟康氏木霉菌丝可以和土壤微粒牢固的附着和缠绕，提高土壤稳定性和孔隙度。

甲壳素具有“植物疫苗”，连续使用可诱导农作物自身产生对病害的抗性因子，降低病害发生率，显著减少农药使用量。此外它还有极强叶面附着性能，可促根壮苗，促进果实成熟。

黄腐酸钾具有高负载量及生理活性，其螯合常量及微量营养物质可以使其更好地为植物利用，激发植物微观生物活性，能够缓释肥料，提高植物对营养的吸收，促进植物发芽生长，加速沉淀分解，增强抗涝性。

甲壳素和黄腐酸钾以其不同的结构形态进行螯合，起到相互促进作用，更有利于土壤结构的改善。

为了综合和筛选拟康氏木霉、枯草芽孢杆菌、甲壳素、黄腐酸钾的特异功效和相互间的增效作用及最佳复合配比，本发明人采用正交设计实验，对所述复合生物土壤改良剂中各组分的质量配比份数进行优化。

供试作物为日本甜宝，种子由青岛日本甜宝种子生产基地生产，实验田址位于招远市，正交实验设计和实验结果见表3、表4。

表3 正交实验因子及水平 L₉（3⁴）

表4 正交实验结果L₉（3⁴）

实验号	A因素	B因素	C因素	D因素	土壤容重（g/cm³）	甜瓜产量(kg/亩)	土壤活性有机质(g/kg)
								1	1	1	1	1	1.55	3190	5.6
2	1	2	2	2	1.58	3005	6.3
								3	2	1	2	3	1.51	3299	6.4
4	2	2	3	1	1.49	3364	7.1
								5	2	3	1	2	1.50	3308	6.9
6	3	1	3	2	1.48	3469	7.5
								7	3	2	1	3	1.46	3371	8.2
8	1	3	3	3	1.50	3505	7.3
								9	3	3	2	1	1.43	3672	8.6
土壤容重K1	1.47	1.51	1.50	1.51
								K2	1.54	1.52	1.50	1.49
K3	1.49	1.46	1.50	1.50
								极差R	0.07	0.06	0.01	0.02
甜瓜产量k1	3483.00	3287.33	3370.67	3228.00
								k2	3233.33	3257.67	3343.33	3446.00
k3	3344.67	3516.00	3347.00	3387.00
								极差R	249.67	258.33	27.33	218.00
土壤活性有机质k1	7.67	6.53	6.87	7.13
								k2	6.40	6.73	7.10	7.30
k3	7.23	8.03	7.33	6.87
								极差R	1.27	1.50	0.47	0.43

由大田正交实验结果可以看出，四种组分对土壤性质和作物产量均产生影响。各因子对土壤容重影响作用顺序依次是：A＞B＞D＞C；而对甜瓜产量影响作用顺序依次是：B＞A＞D＞C；而对土壤活性有机质含量影响作用顺序依次是：A＞B＞C＞D。可见复配制剂中拟康氏木霉和枯草芽孢杆菌对土壤性质和作物产量起着决定性作用，拟康氏木霉含量对土壤容重和土壤活性有机质含量影响最为显著，而枯草芽孢杆菌则对甜瓜产量的影响最为显著。由结果可以发现以土壤容重为筛选目标或者以土壤活性有机质为筛选目标，还是以甜瓜产量为筛选目标，9号因素水平A₃B₃C₂D₁，为该实验条件下的最优配比。

依据正交试验的结果，并同时兼顾加工和使用中的多种因素，本发明人确定，本发明所述复合生物土壤改良剂中各主要组分的重量份数如下：

拟康氏木霉发酵液38-42份、枯草芽孢杆菌发酵液38-42份、水溶性甲壳素0.5-1.5份、黄腐酸钾0.5-1.5份；

其中，拟康氏木霉发酵液中有效孢子浓度≥3×10⁸个/ml；枯草芽孢杆菌发酵液芽孢数≥1×10⁹个/ml；水溶性甲壳素：分子量M约为（1-5）×10⁵，黏度100-200mPa，脱乙酯度DAC≥90%，纯度≥90%；黄腐酸钾规格为：细度＜120目，水可溶物＞99.7%，水溶性黄腐酸＞50%，氧化钾9.5-10%，氮2.5-3.0%，磷0.5-0.8%，有机质50-60%。（其中百分含量为重量%）

为提高本制剂在施用初期拟康氏木霉孢子和枯草芽孢杆菌的萌发率，可适当添加常用腐熟有机质，其添加重量为5～20份为宜。

在上述重量用量比例范围内，本发明复合生物土壤改良剂均能获得较理想的土壤改良和保护效果。

本发明所述的复合生物土壤改良剂的制备方法如下：

按所需重量份数将拟康氏木霉孢子和枯草芽孢杆菌发酵液混合均匀，然后将水溶性甲壳素均匀加入菌液中溶解，再将黄腐酸钾加入混合液中，搅拌混合均匀，加工为稳定的液体状复合生物土壤改良剂。同时还可加入海洋细菌代谢产物和从盐生植物中提取的绿原酸等活性物质。

本发明复合生物土壤改良剂用量为：新茬地500-1500ml/亩，老茬地1500-2500ml/亩。

具体应用方式为：将液体土壤改良剂稀释100-200倍，在定植前，均匀喷洒土壤表面后翻耕或灌根。

本发明复合生物土壤改良剂适用于水稻土、水成土、钙层土、淋溶土、盐碱土等多种土壤的改良。

本发明复合生物土壤改良剂以其高效的土壤改良能力和作物增产能力受到越来越多农业科技工作者的青睐，微生物菌群是其中重要的功能组分。土壤微生物在土壤形成、生态***的生化循环、外来污染物质的降解和植物抗逆等方面具有重要作用，可以改善土壤的理化性质，促进土壤团粒结构的形成和稳定，活化土壤中的矿质养分，有效改良土壤微环境，增强植物的营养吸收能力和其抗病性、抗逆性等。，

本发明复合生物土壤改良剂对甜瓜、小麦、脐橙等多种作物均有明显的增产作用。

本发明以分离、诱变、筛选的新型拟康氏木霉和枯草芽孢杆菌为中心组分，并添加甲壳素、黄腐酸钾和腐熟有机质，旨在通过改善土壤的理化性质，打破土壤板结和压实，促进土壤有机质的分解和营养成分的释放，提高土壤控肥能力，调节土壤pH，调节微生物菌群结构，抑制有害微生物的生长，增强植物根系对营养物质的吸收能力并促进其生长，达到改良土壤和增产目的。本发明中使用的两种菌株繁殖速度很快，具有极高的胞外分泌活性，利用液体深层发酵技术实现了大规模化生产，可以快速获得大量菌体和孢子，降低了生产成本，且产品为液体制剂，使用方便。

具体实施方式

一.本发明土壤改良剂液体制剂组分用量实施例如下：

制剂实施例1

组分及重量份数：

拟康氏木霉发酵液38份，枯草芽孢杆菌发酵液42份，水溶性甲壳素0.5份，黄腐酸钾1份，腐熟有机质10份，绿原酸等活性剂5份，质量稳定剂3.5份。

按前述制备方法加工为液体复合生物土壤改良剂。

制剂实施例2

组分及重量份数：

拟康氏木霉发酵液40份，枯草芽孢杆菌发酵液40份，水溶性甲壳素1.0份，黄腐酸钾1份，腐熟有机质10份，表面活性剂4.5份，质量稳定剂3.5份。

按前述制备方法加工为液体复合生物土壤改良剂。

制剂实施例3

组分及重量份数：

拟康氏木霉发酵液42份，枯草芽孢杆菌发酵液38份，水溶性甲壳素1.5份，黄腐酸钾0.5份，腐熟有机质10份，表面活性剂4.5份，质量稳定剂3.5份；

按前述制备方法加工为液体复合生物土壤改良剂。

二.本发明土壤改良剂应用对比试验实施例如下：

试验实施例1

应用本发明制剂实施例1，与单一木霉菌制剂相比较，对济麦22产量及土壤容重、pH的影响（山东招远）

试验组1为施用1000ml/亩的本产品制剂实施例1，试验组2为施用1000ml/亩的含相同有效孢子数量的单一木霉菌制剂，翻耕前均匀喷施于土壤表面，对照组喷洒等量清水，后续追肥处理相同，小区面积100㎡，小麦收获后测定计算土壤理化性质及小麦产量。结果如表5所示，施用本产品制剂实施例1和绿色木霉菌制剂后相对于对照组土壤容重下降，pH值接近中性，土壤酸化状况得到逆转，适于作物生长，小麦产量增加，且本产品制剂实施例1的效果优于单一木霉菌制剂。

表5 本发明制剂实施例1与木霉菌制剂相比较，对土壤理化性质的影响

试验实施例2

本发明制剂实施例2和现有绿色木霉菌、枯草芽孢杆菌复合制剂对甜瓜生长土壤养分的影响（山东招远）

土壤养分是土壤肥力的重要标志，是作物生长的基础。供试作物为日本甜宝，种子由青岛日本甜宝种子生产基地生产。试验组为定植前取1000ml/亩本发明制剂实施例2喷洒于土壤表面，对照组为施用1000ml/亩的相同有效菌体数量的绿色木霉菌和枯草芽孢杆菌复合制剂，翻耕。结果如表6所示，本发明制剂实施例2和对照组处理对土壤中养分含量均有提高，促进了土壤养分的释放，且本发明制剂实施例2的功效优于现有绿色木霉菌和枯草芽孢杆菌复合制剂。

表6 本产品制剂实施例2和现有绿色木霉、枯草芽孢杆菌复合制剂对甜瓜产量及土壤养分含量的影响

试验实施例3 本产品制剂实施例2和现有绿色木霉、枯草芽孢杆菌复合制剂对甜瓜根际微生物数量的影响（山东招远）

试验组1为定植前土壤表面喷洒1000ml/亩的本发明制剂实施例2，试验组2喷施等量具有相同有效菌体数量的现有绿色木霉菌和枯草芽孢杆菌复合制剂，对照组喷施等量清水。土壤中的微生物不仅可以调节植株生长，而且在土壤肥力的保持和提高以及能量转化和物质循环等方面具有重要作用，是土壤质量的重要指标。结果如表7所示，本产品制剂实施例2和相同有效菌体数量的绿色木霉菌和枯草芽孢杆菌复合制剂相比于对照组处理均提高了土壤中微生物数量，增加了微生物多样性，且本产品制剂实施例2对细菌和真菌的数量提升最为显著，明显高于试验组2。

表7 绿色木霉、枯草芽孢杆菌复合制剂和本产品制剂实施例2对甜瓜根际微生物数量的影响

试验实施例4

本产品制剂实施例2和市售微生物菌肥对20年种植年限赣南脐橙产量及果园地下根系生物量的影响（江西信丰）

试验组1：按照说明书要求在花前期、壮果期分别每株施用市售微生物菌肥（中心组分为微量元素和活性枯草芽孢杆菌）1kg，试验组2：每株施用本发明实施例2液体复合剂100ml，分别在植株抽芽前挖沟填埋或浇灌于脐橙植株主干半径50cm范围内，对照组为等量清水，后续管理方式相同。待果实收获后，在所选样地中，随机选取3棵标准脐橙树，收集0-45cm土层根系，依据根的直径、外形、颜色、弹性、根皮与中柱分离的难易程度等特征分别按粗活根（>2mm）、中活根（0.5-2mm）、细活根（<0.5mm）、死根四种情况分出，然后用蒸馏水反复洗净，在85℃下烘干至恒重，称其质量，最后换算为单位面积生物量（g·m^-2）。植物细根是根系中吸收营养物质的最重要的部分，他们的含量也是评价植株营养状况的重要指标。由表8可以看出施用市售微生物菌肥和本产品制剂实施例2均显著提高了脐橙根系中细根含量，死根含量亦显著下降，促进了植物新生根系的生长，作物产量提高。细活根作为根系中最重要的组分，更能反映出植株的营养吸收能力，本产品制剂实施例2促进脐橙细活根的生长和产量的提高作用优于市售微生物菌肥。

表8 本产品制剂实施例2和市售微生物菌肥对20年种植年限赣南脐橙果园地下根系生物量及脐橙产量的影响

试验实施例5

本产品制剂实施例3和市售微生物菌肥及农家肥对撂荒地土壤酶活性的影响（山东招远）

试验组1：施用市售微生物菌肥100kg/亩，试验组2：施用本产品1000ml/亩，对照组：施用农家肥（猪厩肥）500kg/亩，施用后翻耕耙平，6个月后测定土壤酶活性。土壤酶活性的高低与土壤理化性质（包括土壤结构、有机质含量和土壤养分含量等）和土壤中微生物量紧密相关，尤其与土壤肥力的关系十分密切。蔗糖酶、磷酸酶、脲酶三种酶活力分别表征了土壤动态变化过程中碳循环、土壤磷元素的转化和利用、土壤氮元素的转化和利用。由表9可以看出，施用市售微生物菌肥、农家肥（猪厩肥）和本产品后土壤中蔗糖酶、磷酸酶和脲酶三种酶的活力均有提升，显示土壤生物活性提高，土壤养分释放加快，肥力恢复。本产品制剂实施例3对蔗糖酶和脲酶活性的提高优于市售微生物菌肥和农家肥，对磷酸酶活性的影响和市售微生物菌肥相当，高于农家肥。

表9 本产品制剂实施例3和市售微生物菌肥及农家肥对撂荒地土壤酶活性的影响

Claims

1.一种复合生物土壤改良剂，其特征在于由以下组分组成：枯草芽孢杆菌发酵液、拟康氏木霉发酵液、水溶性甲壳素、黄腐酸钾；各组分的质量配比份数为：枯草芽孢杆菌发酵液38-42份、拟康氏木霉发酵液38-42份、水溶性甲壳素0.5-1.5份、黄腐酸钾0.5-1.5份；

所述枯草芽孢杆菌发酵液是由保藏号为CGMCC NO.1442的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BACI发酵制得，枯草芽孢杆菌发酵液活菌数≥1×10⁹个/ml；

所述拟康氏木霉发酵液是由保藏号为CGMCC NO.1443的拟康氏木霉（Trichoderma pseudokiningii）TRIPI发酵制得，拟康氏木霉发酵液中有效孢子浓度≥3×10⁸个/ml；

所述水溶性甲壳素分子量M为（1-5）×10⁵，黏度为100-200mPa，脱乙酯度DAC≥90%，纯度≥90%；

所述黄腐酸钾规格为：细度＜120目，水可溶物＞99.7%，水溶性黄腐酸＞50%，氧化钾9.5-10%，氮2.5-3.0%，磷0.5-0.8%，有机质50-60%，其中百分含量为重量%。

2.如权利要求1 所述的复合生物土壤改良剂，其特征在于所述各组分质量份数为：枯草芽孢杆菌发酵液40份、拟康氏木霉发酵液40份、水溶性甲壳素1份、黄腐酸钾1份。

3.如权利要求1或2所述复合生物土壤改良剂的应用，其特征在于用于改良和保护农田土壤质量——改善土壤理化性质，调节根际土壤微生物菌群结构，促进植物根系的生长，增强根系对营养成分的吸收能力，提高土壤稳定性和孔隙度，加速沉淀分解，改善土壤结构。