CN112592866A - 一种土壤修复用碳基微生物菌剂及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种土壤修复用碳基微生物菌剂及其制备方法和应用,涉及土壤修复生物菌剂技术领域,按重量份数计包括以下组分:复合微生物菌100‑150份、微生物菌剂培养基200‑300份、木本泥炭/草木灰400‑500份、生物质灰40‑60份、腐殖酸钠100‑150份、氨基酸营养液30‑40份;其中,所述复合微生物菌包括光合菌、芽孢杆菌、酵素菌和乳酸菌。本发明的有益效果是可以降解土壤中残留的农药、激素和无机养分,阻隔空气、水源中的污染物如农药、有毒重金属在土壤中的聚集,阻隔植物根系对于重金属物质的吸收;同时对土壤的酸化、板结、盐渍化、重金属污染等问题均有显著效果。
Description
技术领域
本发明涉及土壤修复生物菌剂技术领域,更具体涉及一种土壤修复用微生物碳基复合菌剂,同时还涉及一种土壤修复用碳基微生物复合菌剂的制备方法以及一种土壤修复用碳基微生物复合菌剂在土壤修复中的用途。
背景技术
土壤是地球生态***重要的组成部分。土壤生化物质含量影响着地表生物的生长,尤其是各种化学物质含量的超标不但影响植物正常生长而且通过食物链等途径进入人体及其他动物体内富集,影响人体健康。自进入工业社会后,工业发展以及城市化进程深入等方面都加重了土壤中重金属的累积,造成士壤重金属污染,并且污染面积逐年扩大据农业部进行的调查,我国农田土壤在140万hm2污水灌溉区,遭受重金属污染的土地面积占污灌区面积的64.8%;每年因重金属污染减产的粮食1000多万,被重金属污染的粮食每年达到1200万吨,合计损失至少200亿元。农田重金属的富集达到一定程度不仅降低农作物的产量和质量,并且严重威胁生态***和人类的安全。人为源是其主要的土壤重金属污染来源,主要包括施肥、动物粪便和生物固体应用、污水灌溉和大气沉降等。
我国农田土壤重金属污染点位超标率相对较高,但以轻度污染为主;污染土壤中主要以Cd、As、Hg、Pb和Cr这5种健康风险重金属元素为主,尤其以Cd风险最高,而以生态风险为主的Ni、Cu和Zn这3种重金属环境风险相对较小。
目前土壤修复主要有以下四种方法,具体优缺点如下:
(1)物理治理方法:包括膜分离法、物理吸附法、换土法、客土法、翻土法、电动力修复法、固化、稳定化方法等。这些物理措施的方法具有稳定、见效快的优点,但是存在工程量大、投资费用高和二次污染隐患等缺点,不适宜大面积污染的治理。
(2)化学治理方法:包括化学沉淀法、离子交换法、淋溶法、施用化学改良剂、增加土壤有机质等,这些方法虽然能够在短期内降低环境中重金属的毒性和提高生物有效性,但此方法因人为向环境中施加化学药剂,易造成二次污染,且该方法是一种原位修复方法,重金属仍存留在环境中,容易再度活化,其潜在威胁并未消除。此外,就修复效果的长期有效性和生态***的长期稳定性来说,还缺乏深入细致的研究。
(3)农业治理方法:因地制宜地改变一些耕作管理制度来减轻重金属的危害,在污染环境中种植不进入食物链的植物,利用植物对重金属的吸收富集作用来净化污染环境。植物修复的效益主要取决于植物的生长速率,但通常用于治理重金属污染的超积累植物都比较矮小、生物量低和生长周期长,所以其修复效率很低。
(4)微生物方法:利用土著微生物或人工驯化的具有特定功能的微生物,在适宜环境条件下,通过自身的代谢作用,降低土壤中有害污染物活性或降解成无害物质的修复技术,优点是修复技术应用成本低,对土壤肥力和代谢活性负面影响小,可以避免因污染物转移而对人类健康和环境产生影响,但微生物遗传稳定性差、易发生变异。中国专利CN110355196A公开了一种微生物土壤修复剂及其修复土壤方法,采用枯草芽孢杆菌、硫铁杆菌、蓝细菌、硫酸盐还原菌等来修复土壤,但该专利无物理吸附功能,有效镉降解效率低,仅为12%左右。中国专利CN110643369A公开了一种重金属生态溶出剂及其制备方法,包括以下重量份原料:5-15份丁聚木糖、10-20份葡聚糖、5-15份木糖醇、5~15份粘多糖、10-20份复合氨基酸、5-10份磷酸二氢钾、5-10份乳酸菌发酵产物、5-10份丁羧酸菌发酵产物、885-950份纯净水;但该专利使用量大,成本并不低,使用复杂。中国专利CN111363559A公开了一种土壤环保恢复剂及其制备方法,包括纳米二氧化硅溶胶20-30份、活性炭10-20份、褐藻15-20份、菠萝蛋白酶12-18份、泥炭藓8-16份、木霉素8-14份、乙基大蒜素8-16份、氨基多羟基酸10-15份、草木灰100-150份、小麦秸秆粉碎料200-300份、有机肥40-60份、包覆剂10-15份、微生物发酵菌液10-15份和水。但该专利未记载微生物菌剂的种类,主要起作用的是添加的化合物质,因此作用并没有持续性,此外,实际的降解重金属的效率没有体现,对于大气中沉降的重金属没有预防作用。中国专利CN109867577A公开了一种降低土壤重金属污染的液态有机肥及其生产方法,包括动物内脏40~50份、鸡粪20~30份、猪粪30~40份、葡萄皮20~30份、椰子壳粉20~30份、虾蟹壳粉20~30份、微生物菌剂5~10份、氨基酸5~10份、生物炭25~35份、大豆卵磷脂4~8份、琥珀酰海藻糖脂5~10份、双糖单脂鼠李糖脂5~10份和水2000~3500份,来修复土壤,但该专利中的鸡粪、猪粪等材料本身重金属元素的含量较高,葡萄皮不易收集,难以大量生产,并且所用微生物菌的具体菌种不明,且含量极低,难以真正做到持续性地对与土壤重金属的原位修复。
发明内容
本发明的目的在于至少解决现有技术中存在的技术问题之一,提供一种土壤修复用碳基微生物菌剂及其制备方法和应用。
本发明的技术解决方案如下:
本发明第一方面提供一种土壤修复用碳基微生物菌剂,按重量份数计包括以下组分:复合微生物菌100-150份、微生物菌剂培养基200-300份、木本泥炭/草木灰400-500份、生物质灰40-60份、腐殖酸钠100-150份、氨基酸营养液30-40份;其中,所述复合微生物菌按重量份数计包括:沼泽红假单胞菌1-20份、度光红螺菌1-20份、深红红螺菌1-25份、球形红假单胞菌1-15份、巨大芽孢杆菌1-18份、胶质芽孢杆菌1-12份、多粘类芽孢杆菌1-10份、地衣芽孢杆菌1-13份、解淀粉芽孢杆菌1-20份、热带假丝酵母1-15份,酵母菌1-25份、白地霉1-18份、泾阳链霉菌1-15份、固氮放线菌1-10份、保加利亚乳杆菌1-15份、嗜热链球菌1-20份、副干酪乳杆菌1-18份、干酪乳杆菌1-25份。
作为优选,所述复合微生物菌按重量份数计包括:沼泽红假单胞菌6-15份、度光红螺菌6-15份、深红红螺菌6-20份、球形红假单胞菌6-10份、巨大芽孢杆菌6-13份、胶质芽孢杆菌4-9份、多粘类芽孢杆菌4-7份、地衣芽孢杆菌5-9份、解淀粉芽孢杆菌6-15份、热带假丝酵母5-11份,酵母菌8-18份、白地霉6-13份、泾阳链霉菌5-11份、固氮放线菌4-7份、保加利亚乳杆菌6-10份、嗜热链球菌8-13份、副干酪乳杆菌6-13份、干酪乳杆菌8-18份。
作为优选,所述复合微生物菌按重量份数计包括:沼泽红假单胞菌10份、度光红螺菌10份、深红红螺菌13份、球形红假单胞菌8份、巨大芽孢杆菌9份、胶质芽孢杆菌6份、多粘类芽孢杆菌5份、地衣芽孢杆菌7份、解淀粉芽孢杆菌11份、热带假丝酵母8份,酵母菌13份、白地霉10份、泾阳链霉菌8份、固氮放线菌5份、保加利亚乳杆菌8份、嗜热链球菌10份、副干酪乳杆菌9份、干酪乳杆菌13份。
作为优选,还包括稀土元素氨基酸螯合物营养液40-60份,其中稀土元素为铕,铕与氨基酸的质量配比为1:9000~11000。
作为优选,所述稀土元素氨基酸螯合物营养液的制备方法包括:将酵素菌与含蛋、肉、羽和骨的厨余垃圾置于密封的反应罐中,加入地下水,控制反罐内温度为28-32℃,密闭发酵10-14小时后,加入乳酸菌继续发酵;10-14小时后,加入稀土元素继续发酵;4-8小时后,将混合物取出过滤,得到稀土元素氨基酸螯合物营养液;其中,酵素菌、厨余垃圾、地下水以及乳酸菌的质量比为1-3:40-60:1-3:2-4。
作为优选,还包括牡蛎壳粉40-60份。
作为优选,所述微生物菌剂培养基包括以下重量份的组分:蜂蜜100-150份,黑糖150-200份,蛋白胨45-80份,酵母膏60-80份,维生素营养液30-40份,氨基酸营养液30-40份,无机元素营养液40-60份,其中,维生素营养液包含Vb1-12;氨基酸营养液包括丝氨酸、赖氨酸、亮氨酸、天门冬氨酸、苏氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、颉氨酸、异亮氨酸和精氨酸;无机元素营养液包括磷、硫、镁、钙、钾、钠、铁、锌、钴、钼、铜、锰、镍和钨。
本发明第二方面提供一种土壤修复用碳基微生物菌剂的制备方法,包括以下步骤:
S1、扩菌:将复合微生物菌剂接种到复合微生物菌剂培养基中,置于25-35℃的温度中进行扩培;
S2、筛选:使用分光光度计选择数量增长最快的复合微生物菌,将其依次置于28-35℃、22-28℃、15-22℃环境中进行再次培育,然后再依次置于pH值为6.4-6.6、5.9-6.1、5.4-5.6的环境中进行再次培育,最后置于统一环境中进行二次培育,得到筛选后的复合微生物菌剂;在培养基中添加镉元素,镉元素的添加量为培养基质量的千分之一至千分之三;将复合微生物菌置于该培养基中继续培养,筛选出有效镉降解速度最快的复合微生物菌进行扩大培养;
S3、发酵:在搅拌桶内加入RO水,再加入蜂蜜、黑糖,同时将搅拌桶、水泵、发酵罐连接好,并且进行循环;再加筛选后的复合微生物菌剂和复合维生素营养液、蛋白胨、酵母膏充分混合均匀得到发酵液;将发酵液转至发酵罐内,加水至离罐口10-20cm,密封,开始发酵;在发酵液进入发酵罐后的第14小时与第22小时各打开排气阀泄气一次,第2-4天各排气一次,发酵完成后,得到复合微生物菌剂和培养基混合液;
S4、将复合微生物菌剂和培养基混合液、木本泥炭/草木灰、生物质灰、氨基酸营养液、稀土元素氨基酸螯合物营养液、腐殖酸钠与牡蛎壳粉进行搅拌、混匀,得到碳基微生物菌剂。
本发明第三方面提供上述的土壤修复用碳基微生物菌剂在土壤修复中的应用,可以直接将该土壤修复用碳基微生物菌剂撒施在土壤中,也可以将该土壤修复用碳基微生物菌剂和无机养分氮磷钾制成肥料撒施在土壤中,以对土壤进行修复。
本发明至少具有以下有益效果之一:
1、本发明通过选取多种微生物菌进行复合,并对复合微生物菌进行混合培育、筛选、扩培和发酵等技术手段,使得本发明中的复合微生物菌能够长期保持优良的活性与繁殖能力,然后通过将发酵后的复合微生物菌与木本泥炭/草木灰、生物质灰、腐殖酸钠、稀土元素氨基酸螯合物营养液等复合形成微生物菌剂,形成的微生物菌剂可以起到修复土壤的作用,能够对土壤中的重金属元素进行生物转化如氧化还原、络合和富集,木本泥炭/草木灰、生物质灰和蛎壳粉能够对重金属元素进行物理吸收,减少土壤中重金属的含量;本发明还能通过与植物根系地共生作用,将游离在空气中、土壤中的重金属原子包裹,起到阻断作用,具体地本发明中的微生物菌能够逐渐聚集在植物的根系周围并包裹住植物的根系,形成稳定的共生关系,对于植物根系营养吸收起到一定的过滤作用,从而吸附游离的金属离子进行植物端阻隔,因此本发明可以降解土壤中残留的农药、激素和无机养分,阻隔空气、水源中的污染物如农药、有毒重金属在土壤中的聚集,阻隔植物根系对于重金属物质的吸收;同时本发明对土壤的酸化、板结、盐渍化、重金属污染等问题均有显著效果。
2、本发明采用的腐殖酸钠是极其优质的有机物质,易被植物吸收和利用,在产品生产过程中,腐殖酸钠也会和游离的稀土元素结合,从而被植物充分吸收,不浪费;本发明采用的稀土元素氨基酸螯合物营养液是采用微生物酶解厨余垃圾获得氨基酸,从而可以有效地利于厨余垃圾,环保和节约;本阀门复合微生物菌群中菌种含量多,菌群在使用过程中可以培养土壤中的有益菌。
3、本发明的碳基微生物菌剂使用简单,撒施后拌匀即可,也可与肥料混合后施肥,不用遮阳、不用调节温度,节省人工和成本
4、本发明的碳基微生物菌剂对于已经出现重金属污染等土壤问题的耕地或果园,可在果实收获前三个月使用本产品,能够减少果实对土壤中重金属的吸收,在轻度污染的条件下,可保证得到的果实收获时通过国家合格标准,甚至达到绿色标准。
具体实施方式
下面用具体实施例对本发明做进一步详细说明,但本发明不仅局限于以下具体实施例。
实施例1
一种土壤修复用碳基微生物菌剂,按重量份数计,包括:复合微生物菌100份、微生物菌剂培养基200份、木本泥炭400份、生物质灰40份、腐殖酸钠100份、氨基酸营养液30份。
其中,所述复合微生物菌按重量份数计包括:沼泽红假单胞菌1份、度光红螺菌1份、深红红螺菌1份、球形红假单胞菌1份、巨大芽孢杆菌1份、胶质芽孢杆菌1份、多粘类芽孢杆菌1份、地衣芽孢杆菌1份、解淀粉芽孢杆菌1份、热带假丝酵母1份,酵母菌1份、白地霉1份、泾阳链霉菌1份、固氮放线菌1份、保加利亚乳杆菌1份、嗜热链球菌1份、副干酪乳杆菌1份、干酪乳杆菌1份。
其中,所述微生物菌剂培养基包括以下重量份的组分:蜂蜜100份,黑糖150份,蛋白胨45份,酵母膏60份,维生素营养液30份,氨基酸营养液30份,无机元素营养液40份,其中,维生素营养液包含Vb1-12;氨基酸营养液包括丝氨酸、赖氨酸、亮氨酸、天门冬氨酸、苏氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、颉氨酸、异亮氨酸和精氨酸;无机元素营养液包括磷、硫、镁、钙、钾、钠、铁、锌、钴、钼、铜、锰、镍和钨。
其中,氨基酸营养液包括丝氨酸、赖氨酸、亮氨酸、天门冬氨酸、苏氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、颉氨酸、异亮氨酸和精氨酸。
一种土壤修复用碳基微生物菌剂的制备方法,包括
S1、扩菌:将复合微生物菌剂接种到复合微生物菌剂培养基中,置于25℃的温度中进行扩培;
S2、筛选:使用分光光度计选择数量增长最快的复合微生物菌,将其依次置于28℃、22℃、15℃环境中进行再次培育,然后再依次置于pH值为6.4、5.9、5.4的环境中进行再次培育,最后置于统一环境中进行二次培育,得到筛选后的复合微生物菌剂;在培养基中添加镉元素,镉元素的添加量为培养基质量的千分之一;将复合微生物菌置于该培养基中继续培养,筛选出有效镉降解速度最快的复合微生物菌进行扩大培养;
S3、发酵:在搅拌桶内加入RO水,再加入蜂蜜、黑糖,同时将搅拌桶、水泵、发酵罐连接好,并且进行循环;再加筛选后的复合微生物菌剂和复合维生素营养液、蛋白胨、酵母膏充分混合均匀得到发酵液;将发酵液转至发酵罐内,加水至离罐口10cm,密封,开始发酵;在发酵液进入发酵罐后的第14小时与第22小时各打开排气阀泄气一次,第2-4天各排气一次,发酵完成后,得到复合微生物菌剂和培养基混合液;
S4、将复合微生物菌剂和培养基混合液、木本泥炭、生物质灰、氨基酸营养液、稀土元素氨基酸螯合物营养液、腐殖酸钠与牡蛎壳粉进行搅拌、混匀,得到碳基微生物菌剂。
实施例2
一种土壤修复用碳基微生物菌剂,按重量份数计,包括:复合微生物菌110份、微生物菌剂培养基220份、草木灰420份、生物质灰45份、腐殖酸钠110份、氨基酸营养液32份、稀土元素氨基酸螯合物营养液45份。
其中,所述复合微生物菌按重量份数计包括:沼泽红假单胞菌6份、度光红螺菌6份、深红红螺菌6份、球形红假单胞菌6份、巨大芽孢杆菌6份、胶质芽孢杆菌4份、多粘类芽孢杆菌4份、地衣芽孢杆菌5份、解淀粉芽孢杆菌6份、热带假丝酵母5份,酵母菌8份、白地霉6份、泾阳链霉菌5份、固氮放线菌4份、保加利亚乳杆菌6份、嗜热链球菌8份、副干酪乳杆菌6份、干酪乳杆菌8份。
其中,所述微生物菌剂培养基包括以下重量份的组分:蜂蜜110份,黑糖160份,蛋白胨55份,酵母膏65份,维生素营养液32份,氨基酸营养液32份,无机元素营养液45份,其中,维生素营养液包含Vb1-12;氨基酸营养液包括丝氨酸、赖氨酸、亮氨酸、天门冬氨酸、苏氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、颉氨酸、异亮氨酸和精氨酸;无机元素营养液包括磷、硫、镁、钙、钾、钠、铁、锌、钴、钼、铜、锰、镍和钨。
其中,氨基酸营养液包括丝氨酸、赖氨酸、亮氨酸、天门冬氨酸、苏氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、颉氨酸、异亮氨酸和精氨酸。
其中,稀土元素为铕,铕与氨基酸的质量配比为1:9000。稀土元素氨基酸螯合物营养液的制备方法包括:将酵素菌与含蛋、肉、羽和骨的厨余垃圾置于密封的反应罐中,加入地下水,控制反罐内温度为28℃,密闭发酵10小时后,加入乳酸菌继续发酵;10小时后,加入稀土元素继续发酵;4小时后,将混合物取出过滤,得到稀土元素氨基酸螯合物营养液;其中,酵素菌、厨余垃圾、地下水以及乳酸菌的质量比为1:40:1:2。
一种土壤修复用碳基微生物菌剂的制备方法,包括
S1、扩菌:将复合微生物菌剂接种到复合微生物菌剂培养基中,置于28℃的温度中进行扩培;
S2、筛选:使用分光光度计选择数量增长最快的复合微生物菌,将其依次置于30℃、24℃、17℃环境中进行再次培育,然后再依次置于pH值为6.5、6.0、5.5的环境中进行再次培育,最后置于统一环境中进行二次培育,得到筛选后的复合微生物菌剂;在培养基中添加镉元素,镉元素的添加量为培养基质量的千分之二;将复合微生物菌置于该培养基中继续培养,筛选出有效镉降解速度最快的复合微生物菌进行扩大培养;
S3、发酵:在搅拌桶内加入RO水,再加入蜂蜜、黑糖,同时将搅拌桶、水泵、发酵罐连接好,并且进行循环;再加筛选后的复合微生物菌剂和复合维生素营养液、蛋白胨、酵母膏充分混合均匀得到发酵液;将发酵液转至发酵罐内,加水至离罐口12m,密封,开始发酵;在发酵液进入发酵罐后的第14小时与第22小时各打开排气阀泄气一次,第2-4天各排气一次,发酵完成后,得到复合微生物菌剂和培养基混合液;
S4、将复合微生物菌剂和培养基混合液、草木灰、生物质灰、氨基酸营养液、稀土元素氨基酸螯合物营养液、腐殖酸钠与牡蛎壳粉进行搅拌、混匀,得到碳基微生物菌剂。
实施例3
一种土壤修复用碳基微生物菌剂,按重量份数计,包括:复合微生物菌125份、微生物菌剂培养基250份、木本泥炭450份、生物质灰50份、腐殖酸钠125份、氨基酸营养液35份、稀土元素氨基酸螯合物营养液50份。
其中,所述复合微生物菌按重量份数计包括:沼泽红假单胞菌10份、度光红螺菌10份、深红红螺菌13份、球形红假单胞菌8份、巨大芽孢杆菌9份、胶质芽孢杆菌6份、多粘类芽孢杆菌5份、地衣芽孢杆菌7份、解淀粉芽孢杆菌11份、热带假丝酵母8份,酵母菌13份、白地霉10份、泾阳链霉菌8份、固氮放线菌5份、保加利亚乳杆菌8份、嗜热链球菌10份、副干酪乳杆菌9份、干酪乳杆菌13份。
其中,所述微生物菌剂培养基包括以下重量份的组分:蜂蜜125份,黑糖175份,蛋白胨60份,酵母膏70份,维生素营养液35份,氨基酸营养液35份,无机元素营养液50份,其中,维生素营养液包含Vb1-12;氨基酸营养液包括丝氨酸、赖氨酸、亮氨酸、天门冬氨酸、苏氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、颉氨酸、异亮氨酸和精氨酸;无机元素营养液包括磷、硫、镁、钙、钾、钠、铁、锌、钴、钼、铜、锰、镍和钨。
其中,氨基酸营养液包括丝氨酸、赖氨酸、亮氨酸、天门冬氨酸、苏氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、颉氨酸、异亮氨酸和精氨酸。
其中,稀土元素为铕,铕与氨基酸的质量配比为1:9500。稀土元素氨基酸螯合物营养液的制备方法包括:将酵素菌与含蛋、肉、羽和骨的厨余垃圾置于密封的反应罐中,加入地下水,控制反罐内温度为30℃,密闭发酵12小时后,加入乳酸菌继续发酵;12小时后,加入稀土元素继续发酵;6小时后,将混合物取出过滤,得到稀土元素氨基酸螯合物营养液;其中,酵素菌、厨余垃圾、地下水以及乳酸菌的质量比为22:50:2:3。
一种土壤修复用碳基微生物菌剂的制备方法,包括
S1、扩菌:将复合微生物菌剂接种到复合微生物菌剂培养基中,置于30℃的温度中进行扩培;
S2、筛选:使用分光光度计选择数量增长最快的复合微生物菌,将其依次置于31℃、25℃、18℃环境中进行再次培育,然后再依次置于pH值为6.6、6.1、5.6的环境中进行再次培育,最后置于统一环境中进行二次培育,得到筛选后的复合微生物菌剂;在培养基中添加镉元素,镉元素的添加量为培养基质量的千分之二;将复合微生物菌置于该培养基中继续培养,筛选出有效镉降解速度最快的复合微生物菌进行扩大培养;
S3、发酵:在搅拌桶内加入RO水,再加入蜂蜜、黑糖,同时将搅拌桶、水泵、发酵罐连接好,并且进行循环;再加筛选后的复合微生物菌剂和复合维生素营养液、蛋白胨、酵母膏充分混合均匀得到发酵液;将发酵液转至发酵罐内,加水至离罐口15cm,密封,开始发酵;在发酵液进入发酵罐后的第14小时与第22小时各打开排气阀泄气一次,第2-4天各排气一次,发酵完成后,得到复合微生物菌剂和培养基混合液;
S4、将复合微生物菌剂和培养基混合液、木本泥炭、生物质灰、氨基酸营养液、稀土元素氨基酸螯合物营养液、腐殖酸钠与牡蛎壳粉进行搅拌、混匀,得到碳基微生物菌剂。
实施例4
一种土壤修复用碳基微生物菌剂,按重量份数计,包括:复合微生物菌140份、微生物菌剂培养基280份、木本泥炭480份、生物质灰55份、腐殖酸钠140份、氨基酸营养液38份、稀土元素氨基酸螯合物营养液55份、牡蛎壳粉50份。
其中,所述复合微生物菌按重量份数计包括:沼泽红假单胞菌15份、度光红螺菌15份、深红红螺菌20份、球形红假单胞菌10份、巨大芽孢杆菌13份、胶质芽孢杆菌9份、多粘类芽孢杆菌7份、地衣芽孢杆菌9份、解淀粉芽孢杆菌15份、热带假丝酵母11份,酵母菌18份、白地霉13份、泾阳链霉菌11份、固氮放线菌7份、保加利亚乳杆菌10份、嗜热链球菌13份、副干酪乳杆菌13份、干酪乳杆菌18份。
其中,所述微生物菌剂培养基包括以下重量份的组分:蜂蜜140份,黑糖190份,蛋白胨70份,酵母膏75份,维生素营养液38份,氨基酸营养液38份,无机元素营养液55份,其中,维生素营养液包含Vb1-12;氨基酸营养液包括丝氨酸、赖氨酸、亮氨酸、天门冬氨酸、苏氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、颉氨酸、异亮氨酸和精氨酸;无机元素营养液包括磷、硫、镁、钙、钾、钠、铁、锌、钴、钼、铜、锰、镍和钨。
其中,氨基酸营养液包括丝氨酸、赖氨酸、亮氨酸、天门冬氨酸、苏氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、颉氨酸、异亮氨酸和精氨酸。
其中,稀土元素为铕,铕与氨基酸的质量配比为1:10000。所述稀土元素氨基酸螯合物营养液的制备方法包括:将酵素菌与含蛋、肉、羽和骨的厨余垃圾置于密封的反应罐中,加入地下水,控制反罐内温度为31℃,密闭发酵13小时后,加入乳酸菌继续发酵;13小时后,加入稀土元素继续发酵;7小时后,将混合物取出过滤,得到稀土元素氨基酸螯合物营养液;其中,酵素菌、厨余垃圾、地下水以及乳酸菌的质量比为3:50:2:3。
一种土壤修复用碳基微生物菌剂的制备方法,包括
S1、扩菌:将复合微生物菌剂接种到复合微生物菌剂培养基中,置于32℃的温度中进行扩培;
S2、筛选:使用分光光度计选择数量增长最快的复合微生物菌,将其依次置于35℃、22℃、15℃环境中进行再次培育,然后再依次置于pH值为6.4、6.1、5.6的环境中进行再次培育,最后置于统一环境中进行二次培育,得到筛选后的复合微生物菌剂;在培养基中添加镉元素,镉元素的添加量为培养基质量的千分之二;将复合微生物菌置于该培养基中继续培养,筛选出有效镉降解速度最快的复合微生物菌进行扩大培养;
S3、发酵:在搅拌桶内加入RO水,再加入蜂蜜、黑糖,同时将搅拌桶、水泵、发酵罐连接好,并且进行循环;再加筛选后的复合微生物菌剂和复合维生素营养液、蛋白胨、酵母膏充分混合均匀得到发酵液;将发酵液转至发酵罐内,加水至离罐口18cm,密封,开始发酵;在发酵液进入发酵罐后的第14小时与第22小时各打开排气阀泄气一次,第2-4天各排气一次,发酵完成后,得到复合微生物菌剂和培养基混合液;
S4、将复合微生物菌剂和培养基混合液、木本泥炭、生物质灰、氨基酸营养液、稀土元素氨基酸螯合物营养液、腐殖酸钠与牡蛎壳粉进行搅拌、混匀,得到碳基微生物菌剂。
实施例5
一种土壤修复用碳基微生物菌剂,按重量份数计,包括:复合微生物菌150份、微生物菌剂培养基300份、木本泥炭500份、生物质灰60份、腐殖酸钠150份、氨基酸营养液40份、稀土元素氨基酸螯合物营养液60份、牡蛎壳粉60份。
其中,所述复合微生物菌按重量份数计包括:沼泽红假单胞菌20份、度光红螺菌20份、深红红螺菌25份、球形红假单胞菌15份、巨大芽孢杆菌18份、胶质芽孢杆菌12份、多粘类芽孢杆菌10份、地衣芽孢杆菌13份、解淀粉芽孢杆菌20份、热带假丝酵母15份,酵母菌25份、白地霉18份、泾阳链霉菌15份、固氮放线菌10份、保加利亚乳杆菌15份、嗜热链球菌20份、副干酪乳杆菌18份、干酪乳杆菌25份。
其中,所述微生物菌剂培养基包括以下重量份的组分:蜂蜜150份,黑糖200份,蛋白胨80份,酵母膏80份,维生素营养液40份,氨基酸营养液40份,无机元素营养液60份,其中,维生素营养液包含Vb1-12;氨基酸营养液包括丝氨酸、赖氨酸、亮氨酸、天门冬氨酸、苏氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、颉氨酸、异亮氨酸和精氨酸;无机元素营养液包括磷、硫、镁、钙、钾、钠、铁、锌、钴、钼、铜、锰、镍和钨。
其中,氨基酸营养液包括丝氨酸、赖氨酸、亮氨酸、天门冬氨酸、苏氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、颉氨酸、异亮氨酸和精氨酸。
其中,稀土元素为铕,铕与氨基酸的质量配比为1:11000。所述稀土元素氨基酸螯合物营养液的制备方法包括:将酵素菌与含蛋、肉、羽和骨的厨余垃圾置于密封的反应罐中,加入地下水,控制反罐内温度为32℃,密闭发酵14小时后,加入乳酸菌继续发酵;14小时后,加入稀土元素继续发酵;8小时后,将混合物取出过滤,得到稀土元素氨基酸螯合物营养液;其中,酵素菌、厨余垃圾、地下水以及乳酸菌的质量比为3:60:3:4。
一种土壤修复用碳基微生物菌剂的制备方法,包括
S1、扩菌:将复合微生物菌剂接种到复合微生物菌剂培养基中,置于35℃的温度中进行扩培;
S2、筛选:使用分光光度计选择数量增长最快的复合微生物菌,将其依次置于35℃、28℃、15℃环境中进行再次培育,然后再依次置于pH值为6.6、5.9、5.5的环境中进行再次培育,最后置于统一环境中进行二次培育,得到筛选后的复合微生物菌剂;在培养基中添加镉元素,镉元素的添加量为培养基质量的千分之二;将复合微生物菌置于该培养基中继续培养,筛选出有效镉降解速度最快的复合微生物菌进行扩大培养;
S3、发酵:在搅拌桶内加入RO水,再加入蜂蜜、黑糖,同时将搅拌桶、水泵、发酵罐连接好,并且进行循环;再加筛选后的复合微生物菌剂和复合维生素营养液、蛋白胨、酵母膏充分混合均匀得到发酵液;将发酵液转至发酵罐内,加水至离罐口20cm,密封,开始发酵;在发酵液进入发酵罐后的第14小时与第22小时各打开排气阀泄气一次,第2-4天各排气一次,发酵完成后,得到复合微生物菌剂和培养基混合液;
S4、将复合微生物菌剂和培养基混合液、木本泥炭、生物质灰、氨基酸营养液、稀土元素氨基酸螯合物营养液、腐殖酸钠与牡蛎壳粉进行搅拌、混匀,得到碳基微生物菌剂。
对比例
不加草木灰和生物质灰;复合微生物菌不包括沼泽红假单胞菌、度光红螺菌、多粘类芽孢杆菌、热带假丝酵母、白地霉、泾阳链霉菌和副干酪乳杆菌;其他同实施例2。
效果试验:
一、花生试验:
(1)试验时间和地点:于2019年3-8月在江西省抚州市崇仁县石庄镇七里亭村甘龙根家花生地进行。
(2)供试土壤:红壤土,丘陵旱地肥力中等,试验前按常规法化验土壤养分含量,结果如表1所示:
表1试验前土壤养分含量
(3)试验方法:
将花生地分为16个小区,随机排列,每个小区长55.58m,宽1.2m,面积66.7m2,试验田四周设保护行;将实施例2~4制得的土壤修复用碳基微生物菌剂作为三个试验组,对比例作为对照组,试验组和对照组各重复4次。
2019年3月20日,将4kg实施例2~4和4kg对比例制得的土壤修复用碳基微生物菌剂分别均匀撒施在不同的小区上,3月25日先翻地,然后施撒有机肥8kg和花生配方肥4kg,撒施好底肥后,再整平地,直播。
2019年8月16日对小区采用五点取样法,对土壤和花生进行取样,对土壤中的pH和有效态镉含量以及花生果仁中的有效态镉含量进行检测,结果如表2~4所示:
表2不同处理对土壤pH的影响
表3不同处理对土壤中有效镉含量的影响
表4不同处理对花生果仁中有效镉含量的影响
由表2可以看出,采用实施例2~4中的土壤修复用碳基微生物菌剂处理比采用对比例中的土壤修复用碳基微生物菌剂处理土壤中的平均pH分别提高了0.59、0.43和0.22,说明采用实施例2~4中的土壤修复用碳基微生物菌剂处理能够调节土壤的pH值,促进作物的生长。
由表3可以看出,采用实施例2~4中的土壤修复用碳基微生物菌剂处理后的土壤中有效镉含量显著低于对比例,分别比对比例下降了0.055mg/kg、0.052mg/kg和0.031mg/kg,由此说明采用实施例2~4中的土壤修复用碳基微生物菌剂处理能够显著降低土壤中有效镉含量。
由表4可以看出,采用实施例2~4中的土壤修复用碳基微生物菌剂处理的花生果仁中有效镉含量符合国家标准GB2762-2017,并显著低于对比例,分别比对比例下降了0.020mg/kg、0.017mg/kg和0.011mg/kg,由此说明采用实施例2~4中的土壤修复用碳基微生物菌剂处理能够显著降低花生果仁中有效镉含量。
二、早稻试验:
(1)供试水稻品种:早籼稻中早39。
(2)供试土壤:在浏阳市永安镇水山村千秋组河边屋蒋冬的承包田中进行,试验前按常规法化验土壤养分含量,结果如表5所示:
表5试验前土壤养分含量
(3)试验方法:
采用田间小区实验法,分为试验组和对照组,试验组和对照组重复处理3次,小区随机排列,面积0.045亩(长6m,宽5米),试验组施实施例5制得的土壤修复用碳基微生物菌剂100kg/亩+常规施化肥(40%复合肥35kg/亩+追肥8kg/亩尿素),对照组施常规施化肥施对比例制得的土壤修复用碳基微生物菌剂100kg/亩+常规施化肥(40%复合肥35kg/亩+追肥8kg/亩尿素)。
(4)栽培管理措施:
供试水稻于2019年3月19日播种,4月14日整田,4月16日-17日做小区田埂并包膜,4月18日施基肥和调理肥,4月20日移栽,移栽密度为20cm*20cm,4月20日追施分蘖肥,两组其他处理相同,7月17日分小区分别取土样和稻谷取样,对精米中的有效态镉含量、植株中的有效态镉含量以及土壤中的有效态镉含量进行检测,结果如表6~8所示:
表6不同处理下精米有效镉含量
表7不同处理下植株中有效镉含量
表8不同处理下土壤中有效镉含量
由表6可以看出,采用实施例5中的土壤修复用碳基微生物菌剂处理精米有效镉含量平均为0.186mg/kg,对比例精米有效镉含量平均为0.29mg/kg,降低比率为36%,由此说明采用实施例5中的土壤修复用碳基微生物菌剂处理能够显著降低精米中有效镉含量。
由表7可以看出,分蘖盛期和成熟期植株中有效镉含量的高低和镉降低率变化趋势一致,分蘖盛期采用实施例5中的土壤修复用碳基微生物菌剂处理植株有效镉含量平均为0.731mg/kg,比对比例降低了0.269mg/kg,降低比率为26.9%;成熟期采用实施例5中的土壤修复用碳基微生物菌剂处理植株有效镉含量平均为0.532mg/kg,比对比例降低了0.371mg/kg,降低比率为41.1%,均显著降低了植株中的有效镉含量;随着水稻生长发育的进行,植株中有效镉含量呈现逐渐降低的趋势,成熟期比分蘖盛期含量平均低0.199mg/kg,且在成熟期镉降低率大于分蘖盛期的镉降低率。由此说明采用实施例5中的土壤修复用碳基微生物菌剂处理具有良好的降镉效果,成熟期降镉效果优于分蘖盛期,土壤修复用碳基微生物菌剂的降镉效果能够维持到成熟期,持续阻止植株对镉额吸收,从而降低稻米中镉含量。
由表8可以看出,分蘖盛期和成熟期土壤中有效镉含量的高低和镉降低率变化趋势一致,分蘖盛期采用实施例5中的土壤修复用碳基微生物菌剂处理的土壤有效镉含量平均为0.283mg/kg,比对比例降低了0.024mg/kg,降低比率为7.8%;成熟期采用实施例5中的土壤修复用碳基微生物菌剂处理植株有效镉含量平均为0.344mg/kg,比对比例降低了0.039mg/kg,降低比率为10.2%,均显著降低了植株中的有效镉含量,成熟期比分蘖盛期降镉效果更为明显和稳定,随着水稻生长发育的进行,土壤中成熟期比分蘖盛期有效镉含量高。土壤修复用碳基微生物菌剂的降镉效果能够维持到成熟期,持续阻止植株对镉额吸收,从而降低稻米中镉含量。由此说明采用实施例5中的土壤修复用碳基微生物菌剂处理对于降低土壤中有效镉含量有一定作用,可钝化土壤中有效镉含量。
三、南丰蜜桔试验:
(1)试验时间和地点:于2018年11月-2019年10月,在江西省抚州市南丰县白舍镇白舍存李应财加南丰蜜桔果园进行。
(2)供试土壤:红砂土壤,排灌方便,肥力中上。试验前按常规法化验土壤养分含量,结果如表9所示:
表9试验前土壤养分含量
(3)供试作物品种:南丰蜜桔
(4)试验方法:
将果园分为16个小区,随机排列,每个小区5棵果树,面积90㎡,试验田四周设保护行,种植密度为4m*4.5m,37棵/亩。
分为三个试验组和一个对照组,试验组和对照组分别重复处理4次,三个试验组分别每棵施实施例2~4制得的土壤修复用碳基微生物菌剂1kg+45%硫基复合肥1.5kg和生物有机肥5kg;对照组施对比例制得的土壤修复用碳基微生物菌剂1kg+45%硫基复合肥1.5kg和生物有机肥5kg。
(5)栽培管理措施:
2018年11月1日将实施例2~4和对比例制得的土壤修复用碳基微生物菌剂1kg/棵,分别均匀撒施在各种小区的树冠下,11月16日,沿树冠滴水线外侧15cm处,开好南北侧方向的沟,沟长2.4m,沟深0.35m,11月24日在沟内外每棵树撒施45%硫基复合肥0.75kg和生物有机肥5kg,坑施1次;2019年3月12日,沿树冠滴水线外侧15cm处,开好东西侧方向的沟,沟长2.4m,沟深0.3m,3月15日在沟内外每棵树45%硫基复合肥0.75kg,回土。
2019年5月10日使用48%硫酸钾复合肥每棵0.25kg,6月15日使用48%硫酸钾复合肥每棵0.3kg,7月20日使用45%硫酸钾复合肥每棵0.2kg。试验组和对照组其他管理一致。
于10月28日对各小区单收计产,采集土样分析,检测土壤pH值和有效态镉含量,同时采集果实样品检测镉含量。结果如表10~12所示:
表10不同处理对土壤pH的影响
表11不同处理对土壤中有效镉含量的影响
表12不同处理对南丰蜜桔果肉中有效镉含量的影响
由表10可以看出,采用实施例2~4中的土壤修复用碳基微生物菌剂处理比对比例土壤中的平均pH分别提高了0.57、0.44和0.23,说明采用实施例2~4中的土壤修复用碳基微生物菌剂处理能够调节土壤的pH值,促进作物的生长。
由表11可以看出,采用实施例2~4中的土壤修复用碳基微生物菌剂处理后的土壤中有效镉含量显著低于对比例,分别比对比例下降了0.067mg/kg、0.056mg/kg和0.034mg/kg,由此说明采用实施例2~4中的土壤修复用碳基微生物菌剂处理能够显著降低土壤中有效镉含量。
由表12可以看出,采用实施例2~4中的土壤修复用碳基微生物菌剂处理的花生果仁中有效镉含量符合国家标准GB2762-2017,并显著低于对比例,分别比对比例下降了0.010mg/kg、0.008mg/kg和0.005mg/kg,由此说明采用实施例2~4中的土壤修复用碳基微生物菌剂处理能够显著降低南丰蜜桔果肉有效镉含量。
以上仅是本发明的特征实施范例,对本发明保护范围不构成任何限制。凡采用同等交换或者等效替换而形成的技术方案,均落在本发明权利保护范围之内。
Claims (9)
1.一种土壤修复用碳基微生物菌剂,其特征在于,按重量份数计包括以下组分:复合微生物菌100-150份、微生物菌剂培养基200-300份、木本泥炭/草木灰400-500份、生物质灰40-60份、腐殖酸钠100-150份、氨基酸营养液30-40份;其中,所述复合微生物菌按重量份数计包括:沼泽红假单胞菌1-20份、度光红螺菌1-20份、深红红螺菌1-25份、球形红假单胞菌1-15份、巨大芽孢杆菌1-18份、胶质芽孢杆菌1-12份、多粘类芽孢杆菌1-10份、地衣芽孢杆菌1-13份、解淀粉芽孢杆菌1-20份、热带假丝酵母1-15份,酵母菌1-25份、白地霉1-18份、泾阳链霉菌1-15份、固氮放线菌1-10份、保加利亚乳杆菌1-15份、嗜热链球菌1-20份、副干酪乳杆菌1-18份、干酪乳杆菌1-25份。
2.根据权利要求1所述的一种土壤修复用碳基微生物菌剂,其特征在于,所述复合微生物菌按重量份数计包括:沼泽红假单胞菌6-15份、度光红螺菌6-15份、深红红螺菌6-20份、球形红假单胞菌6-10份、巨大芽孢杆菌6-13份、胶质芽孢杆菌4-9份、多粘类芽孢杆菌4-7份、地衣芽孢杆菌5-9份、解淀粉芽孢杆菌6-15份、热带假丝酵母5-11份,酵母菌8-18份、白地霉6-13份、泾阳链霉菌5-11份、固氮放线菌4-7份、保加利亚乳杆菌6-10份、嗜热链球菌8-13份、副干酪乳杆菌6-13份、干酪乳杆菌8-18份。
3.根据权利要求2所述的一种土壤修复用碳基微生物菌剂,其特征在于,所述复合微生物菌按重量份数计包括:沼泽红假单胞菌10份、度光红螺菌10份、深红红螺菌13份、球形红假单胞菌8份、巨大芽孢杆菌9份、胶质芽孢杆菌6份、多粘类芽孢杆菌5份、地衣芽孢杆菌7份、解淀粉芽孢杆菌11份、热带假丝酵母8份,酵母菌13份、白地霉10份、泾阳链霉菌8份、固氮放线菌5份、保加利亚乳杆菌8份、嗜热链球菌10份、副干酪乳杆菌9份、干酪乳杆菌13份。
4.根据权利要求1所述的一种土壤修复用碳基微生物菌剂,其特征在于,还包括稀土元素氨基酸螯合物营养液40-60份,其中稀土元素为铕,铕与氨基酸的质量配比为1:9000~11000。
5.根据权利要求4所述的一种土壤修复用碳基微生物菌剂,其特征在于,所述稀土元素氨基酸螯合物营养液的制备方法包括:将酵素菌与含蛋、肉、羽和骨的厨余垃圾置于密封的反应罐中,加入地下水,控制反罐内温度为28-32℃,密闭发酵10-14小时后,加入乳酸菌继续发酵;10-14小时后,加入稀土元素继续发酵;4-8小时后,将混合物取出过滤,得到稀土元素氨基酸螯合物营养液;其中,酵素菌、厨余垃圾、地下水以及乳酸菌的质量比为1-3:40-60:1-3:2-4。
6.根据权利要求1所述的一种土壤修复用碳基微生物菌剂,其特征在于,还包括牡蛎壳粉40-60份。
7.根据权利要求1所述的一种土壤修复用碳基微生物菌剂,其特征在于,所述微生物菌剂培养基包括以下重量份的组分:蜂蜜100-150份,黑糖150-200份,蛋白胨45-80份,酵母膏60-80份,维生素营养液30-40份,氨基酸营养液30-40份,无机元素营养液40-60份,其中,维生素营养液包含Vb1-12;氨基酸营养液包括丝氨酸、赖氨酸、亮氨酸、天门冬氨酸、苏氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、颉氨酸、异亮氨酸和精氨酸;无机元素营养液包括磷、硫、镁、钙、钾、钠、铁、锌、钴、钼、铜、锰、镍和钨。
8.一种土壤修复用碳基微生物菌剂的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1、扩菌:将复合微生物菌剂接种到复合微生物菌剂培养基中,置于25-35℃的温度中进行扩培;
S2、筛选:使用分光光度计选择数量增长最快的复合微生物菌,将其依次置于28-35℃、22-28℃、15-22℃环境中进行再次培育,然后再依次置于pH值为6.4-6.6、5.9-6.1、5.4-5.6的环境中进行再次培育,最后置于统一环境中进行二次培育,得到筛选后的复合微生物菌剂;在培养基中添加镉元素,镉元素的添加量为培养基质量的千分之一至千分之三;将复合微生物菌置于该培养基中继续培养,筛选出有效镉降解速度最快的复合微生物菌进行扩大培养;
S3、发酵:在搅拌桶内加入RO水,再加入蜂蜜、黑糖,同时将搅拌桶、水泵、发酵罐连接好,并且进行循环;再加筛选后的复合微生物菌剂和复合维生素营养液、蛋白胨、酵母膏充分混合均匀得到发酵液;将发酵液转至发酵罐内,加水至离罐口10-20cm,密封,开始发酵;在发酵液进入发酵罐后的第14小时与第22小时各打开排气阀泄气一次,第2-4天各排气一次,发酵完成后,得到复合微生物菌剂和培养基混合液;
S4、将复合微生物菌剂和培养基混合液、木本泥炭/草木灰、生物质灰、氨基酸营养液、稀土元素氨基酸螯合物营养液、腐殖酸钠与牡蛎壳粉进行搅拌、混匀,得到碳基微生物菌剂。
9.权利要求1-7任一所述的土壤修复用碳基微生物菌剂在土壤修复中的应用。
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