CN102352411B - 一种多重pcr扩增方法及试剂盒 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种多重PCR扩增方法以及用于多重PCR扩增的试剂盒；所述多重PCR扩增方法包括了设计公共引物以及带有公共引物的多重引物的步骤，所述公共引物设计应遵循两条原则：（1）任何优化的扩增条件下，公共引物与待测模板进行扩增时无特异性产物；（2）当带有公共引物的多重引物扩增得到特异性产物时，公共引物对具有扩增所述特异性产物的能力；然后配置多重PCR体系进行扩增。本发明由于公共引物的引入，使反应体系内的序列特异性引物对浓度下降4个以上对数级别，如此低浓度的多重引物在同一个反应体系中出现相互作用的几率将大大降低，不仅可解决不同引物对相互干扰这一多重PCR中的技术瓶颈，亦为加入新的引物对、增加检测基因数量创造前提条件。
Description
技术领域
本发明属于基因检测领域，具体涉及一种多重PCR扩增方法以及用于多重PCR扩增的试剂盒。
背景技术
多重PCR(multiplex PCR)，又称多重引物PCR或复合PCR，它是在同一PCR反应体系里加上二对以上引物，同时扩增出多个核酸片段的PCR反应，其反应原理，反应试剂和操作过程与一般PCR相同。
多重PCR反应中，一般包括以下试剂：两对以上引物对、dNTP、MgCl2、PCR缓冲液、模板DNA、Taq DNA聚合酶以及其他佐剂(DMSO、甘油、BSA)，通常为了获得比较好的扩增结果，会对试剂的使用量、PCR扩增的反应条件，例如延伸温度、延伸时间、退火时间、退火温度、PCR循环数等，进行优化。
现有技术中，通常引物的选择遵从简单的规则：引物长度为18-24bp或更长，GC含量为35％-60％，退火温度55℃-58℃或更高。长些的引物(如DMD基因的引物，28-30bp)使反应在更高的退火温度下进行并产生较少的非特异性产物。使用软件Primers来计算熔点并检测可能的引物间的相互作用。使用BLAST工具在NCBI序列数据库中对多对引物进行比对，以检测可能的重复序列。
作为PCR重要衍生技术之一，多重PCR有着诸多优势：(1)高效性，减少操作流程，可同时检测多个基因或片段；(2)经济简便性，可大大节约时间和试剂成本。目前该技术已广泛应用于生物技术、检疫和医学检测等领域。然而，由于多重PCR工作原理是在同一PCR反应体系里加入多对引物同时扩增多个DNA片段的PCR反应，因此同一反应体系中的多对引物易发生相互作用，如形成发卡结构，二聚体结构等。通常，多重PCR反应体系中多重引物浓度为5-12pmol，引物对和引物量越多，引物之间的相互作用越明显，从而影响PCR扩增效率。
例如，申请号为201010153921.3，公开号为101824489A的中国发明专利申请公布说明书公开了一种能同时鉴别内源性和外源性禽白血病病毒的三重PCR试剂盒，其组成包括：DNA聚合酶、dNTP、引物、PCR缓冲液、双蒸水，所述的引物由3对引物组成；具体地，所述三重PCR反应体系，在25μL的PCR反应体系中，含有rTaq DNA聚合酶2.0u；dNTP(2.5mmol/L)2μL；PCR缓冲液2.5μL；引物P-F和P-R各12pmol、引物A-R和A-F各5pmol、引物E-R和E-F各2.5pmol；模板100ng。反应程序为：95℃10min；94℃1min，50℃1min，72℃40s，30个循环；72℃10min。(1mol大概为6.02×1023个拷贝，1pmol大约为6.02×1011个拷贝)
另外，白血病患者的遗传学特征异常复杂多变，包括染色体的易位、缺失、突变、倒位和扩增等。多重RT-PCR技术可在一次实验中同时检测多种常见白血病融合基因，有力地弥补了染色体核型分析的不足，提高了隐匿性易位染色体的检出率。目前，临床常用白血病分子诊断方法主要以Poul Jorgensen为代表的逆转录多重PCR检测方法，此类方法可对临床常见29种融合基因进行检测，一般将反应体系分成八管，每管检测不同类型的融合基因且产物片段大小存在明显差异，依据扩增产物所在反应管位置及片段大小判断融合基因类型。由于在同一反应体系中多对引物易发生相互作用，如形成发卡结构、二聚体结构等，从而影响扩增效率，这是分为八管进行检测的主要原因，但这亦同时导致了该类检测方法复杂、繁琐，对操作人员相关专业要求较高，难以推广。
发明内容
本发明的发明目的是提供一种多重PCR扩增方法以及用于多重PCR扩增的试剂盒，降低多重PCR反应体系中多重引物的浓度，使引物间的相互作用降低，同时为更多引物对在同一反应体系内工作而不影响扩增效率创造条件。
为达到上述发明目的，本发明采用的技术方案是：一种多重PCR扩增方法，包括以下步骤：
(A)、以目的基因或目的基因的cDNA为模板，设计公共引物对；以目的基因或目的基因的cDNA为模板，根据所需扩增的片段设计多重引物，所述多重引物包括两对以上特异性引物对；在每一对特异性引物对中的正义引物的5′端连接公共引物对中的正义引物的3′端，在每一对特异性引物对中的反义引物的5′端连接公共引物对中的反义引物的3′端，得到带有公共引物的特异性引物对，所有带有公共引物对的特异性引物对构成带有公共引物的多重引物；
所述公共引物设计应遵循两条原则：(1)任何优化的扩增条件下，公共引物与待测模板进行扩增时无特异性产物；(2)当带有公共引物的多重引物扩增得到特异性产物时，公共引物对具有扩增所述特异性产物的能力；
(B)、配置多重PCR反应体系，所述多重PCR反应体系包括：dNTP、MgCl2、PCR缓冲液、模板DNA、Taq DNA聚合酶，所述多重PCR反应体系还包括：公共引物对、带有公共引物的多重引物，其中，公共引物对的浓度为0.25～0.6μmol/L，每一条带有公共引物的特异性引物的浓度5×10-8～5×10-10μmol/L；
(C)、按照现有技术，对多重PCR反应进行优化，按照优化后的条件进行PCR扩增。
进一步的技术方案中，对上述扩增产物进行鉴定。
本发明同时要求保护一种检测白血病融合基因的多重PCR试剂盒，所述多重PCR试剂盒包括：常规多重PCR组件，针对常见白血病融合基因的多重引物；还包括公共引物对，所述公共引物对包括以下核苷酸序列：SEQ ID NO.1：公共引物对中的正义引物5’-GCATGTATAGAACATAAGGTGTCTC-3’；SEQ ID NO.2：公共引物对中的反义引物5’-GAGACACCTTATGTTCTATACATGC-3’。
上述技术方案中，所述常规多重PCR组件包括：cDNA模板、DNA聚合酶、dNTP、MgCl2、PCR缓冲液、双蒸水。
上述技术方案中，所述针对常见白血病融合基因的多重引物为分别针对E2A/PBX1、TEL/AML1、SIL/TAL1、TLS/ERG、HOX11常规白血病融合基因的特异性引物对。优选的技术方案中，所述针对常见白血病融合基因的多重引物具体如以下核苷酸序列所示：
优选的技术方案中，使用上述检测白血病融合基因的多重PCR试剂盒检测白血病融合基因时，每20μL的PCR反应体系中公共引物的用量为5-12pmol。
优选的技术方案中，使用上述检测白血病融合基因的多重PCR试剂盒检测白血病融合基因时，每20μL的PCR反应体系中每一条带有公共引物的特异性引物的量为1×10-6～1×10-8pmol
由于上述技术方案运用，本发明与现有技术相比具有下列优点：
1.本发明由于公共引物的引入，使反应体系内的序列特异性引物对浓度下降4个以上对数级别，如此低浓度的多重引物在同一个反应体系中出现相互作用的几率将大大降低，不仅可解决不同引物对相互干扰这一多重PCR中的技术瓶颈，亦为加入新的引物对、增加检测基因数量创造前提条件。
2.由于多重引物对浓度下降约6个以上对数级别，不同引物对相互干扰几率大大降低，本发明可将多个独立反应管合并为一个反应管内进行扩展，从而大大减少试剂量，如将两个反应管合并为一个反应管即可减少40％以上的试剂量，具有良好的经济效益。
附图说明
图1是实施例中公共引物设计流程；
图2是实施例中公共引物的工作原理示意图；
图3是实施例中PCR扩增产物的电泳图。
具体实施方式
下面结合附图及实施例对本发明作进一步描述：
实施例一：
由公共引物介导的多重PCR应用技术体系，将20μL的多重PCR反应体系中多重引物量从1012拷贝降低至104拷贝以下，大大减少同一反应体系中多对引物间的相互作用；同时，由于多对引物间的相互作用大大降低，该反应体系可成为“开放式”的反应体系，使在同一反应体系中增加新的检测基因成为可能。
本实施例以临床确诊携带E2A/PBX1融合基因患者标本验证多重引物结合公共引物的工作原理的可行性及效率。公共引物由噬菌体基因组筛选出，与人基因组PCR扩增没有特异性产物。公共引物及带有公共引物的多重引物序列及相应检测的融合基因见表1。
表1公共引物及带有公共引物的多重引物序列
上述技术方案中，为了进一步说明公共引物设计的原则，以人类基因组或其cDNA为模板进行扩增为例，从噬菌体基因组中筛选公共引物序列：在NCBI数据库中查找噬菌体基因组序列，以其高度保守，且核酸序列为噬菌体特有的区域为模板，设计一段22-28bp大小的引物序列；通过BLAST软件比对该序列在人类基因组中的同源性，并通过不同人类基因组和其cDNA进行PCR验证，筛选出效率最优的引物对作为优选的公共引物对；设计思路参见附图1。
反应体系各组分：聚合酶预混液(包含Mg2+、dNTPs、反应缓冲液、以及DNA聚合酶)10μl；带有公共引物的多重引物，每一条带有公共引物的特异性引物1×104copy)；公共引物对中的正义引物5～12pmol(1012copy数量级)；公共引物对中的反义引物5～12pmol(1012copy数量级)；cDNA模板1μl；ddH2O 7μl；总体积20μl。其中，带有公共引物的多重引物浓度仅为104拷贝。反应条件为：95℃2min，94℃10s，56℃10s，72℃10s，72℃2min；35个循环。
上述多重PCR的主要原理为：在原有的多重引物两端加上公共引物序列，反应体系中公共引物与带有公共引物的多重引物浓度比为1∶10-8，由于带有公共引物的多重引物所需量极低，其扩增产物拷贝数只需满足PCR反应即可(102-105拷贝)，因此连有公共引物的多重引物浓度可降低至104拷贝，引物之间出现相互作用的概率亦大大降低，这为多对引物在同一反应体系中互不干扰创造前提条件。扩增早期，公共引物因没有互补序列而无法工作，而带有公共引物的多重引物扩增产物均带有公共引物的互补序列。随着反应的进行，带有公共引物的多重引物因浓度很低而很快耗尽，其扩增产物即可作为公共引物的模板，利用公共引物扩增所需的特异产物；上述原理参见附图2。
对上述PCR扩增产物进行鉴定，所得结果参见图3，图3中第2泳道为仅加入公共引物的阴性对照，第3泳道为加入表4中3-10多重引物(不包含检测E2A/PBX1融合基因引物)和公共引物，第4泳道为加入表4中1-10多重引物及公共引物。结果显示，第2和第3泳道未见产物，泳道4的扩增产物与预期大小相符，并经测序证实为E2A/PBX1融合基因。
综上所述，在此反应体系中，20μL的多重引物浓度成功的由通常所用的1012拷贝降低至104拷贝，证明公共引物在多重PCR及白血病融合基因诊断中应用研究的可行性。
SEQUENCE LISTING
<110> 苏州大学
<120> 一种多重PCR扩增方法及试剂盒
<160> 12
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 25
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 1
gcatgtatag aacataaggt gtctc 25
<210> 2
<211> 25
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 2
gagacacctt atgttctata catgc 25
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<212> DNA
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gcatgtatag aacataaggt gtctcctacg acgggggtct ccac 44
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<212> DNA
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gagacacctt atgttctata catgccatgt tgtccagccg catcag 46
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gcatgtatag aacataaggt gtctcctcat cgggaagacc tggcttac 48
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<212> DNA
<213> 人工合成
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gagacacctt atgttctata catgcagcac ggagcagagg aagttg 46
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gagacacctt atgttctata catgcagacc ggcccctctg aatag 45
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<400> 9
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gagacacctt atgttctata catgcggtgc cttcccaggt gatg 44
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<212> DNA
<213> 人工合成
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gagacacctt atgttctata catgcgcgca tcggtcattt tgag 44
Claims (3)
1.一种检测白血病融合基因的多重PCR试剂盒，所述多重PCR试剂盒包括：常规多重PCR组件，针对常见白血病融合基因的多重引物；其特征在于，还包括公共引物对，所述公共引物对包括以下核苷酸序列：
SEQ ID NO.1：公共引物对中的正义引物5’-GCATGTATAGAACATAAGG TGTCTC-3’；SEQ ID NO.2：公共引物对中的反义引物5’-GAGACACCTTA TGTTCTATACATGC-3’；
所述常规多重PCR组件包括：cDNA模板、DNA聚合酶、dNTP、MgCl2、PCR缓冲液、双蒸水；
所述针对常见白血病融合基因的多重引物为分别针对E2A/PBX1、TEL/AML1、SIL/TAL1、TLS/ERG、HOX11常规白血病融合基因的特异性引物对，所述针对常见白血病融合基因的多重引物具体如以下核苷酸序列所示：
。
2.根据权利要求1所述一种检测白血病融合基因的多重PCR试剂盒，其特征在于，每20μL的PCR反应体系中公共引物的量为5～12pmol。
3.根据权利要求2所述一种检测白血病融合基因的多重PCR试剂盒，其特征在于，每20μL的PCR反应体系中每一条带有公共引物的特异性引物的量为1×10-6～1×10-8 pmol。
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|---|---|---|---|---|
| CN103937891B (zh) * | 2014-04-16 | 2015-11-04 | 苏州大学 | 一种检测白血病融合基因的多重pcr试剂盒 |
| CN104178566B (zh) * | 2014-07-18 | 2016-01-20 | 中国水产科学研究院珠江水产研究所 | 一种可用于微卫星检测的多重荧光pcr通用接头及检测方法和应用 |
| CN104278093B (zh) * | 2014-09-28 | 2016-11-23 | 南京百捷生物科技有限公司 | 焦磷酸测序法检测sil-tal1融合基因的引物对及试剂盒 |
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| CN105734164B (zh) * | 2016-05-06 | 2019-05-17 | 苏州大学 | 一种检测细菌性脑膜炎病原体的多重pcr试剂盒 |
| CN106544437B (zh) * | 2016-11-25 | 2019-11-19 | 徐州医科大学 | 一种检测白血病融合基因的多重荧光pcr试剂盒 |
| CN106995841B (zh) * | 2017-03-20 | 2020-10-09 | 苏州大学 | 一种转基因大豆检测用多重pcr试剂盒及检测方法 |
| CN108823305B (zh) * | 2017-04-28 | 2021-08-13 | 青岛市中心医院 | 一种同步检测8种肿瘤相关长链非编码rna的多重pcr方法 |
| CN107299157A (zh) * | 2017-08-29 | 2017-10-27 | 济南市疾病预防控制中心 | 一种检测脑炎病毒的引物组合及应用、试剂盒 |
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Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1278009A (zh) * | 2000-04-30 | 2000-12-27 | 厦门大学 | 用于均相荧光pcr检测的孪生引物 |
| CN1401783A (zh) * | 2002-09-26 | 2003-03-12 | 四川大学 | 复合扩增str的引物设计方法 |
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Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1278009A (zh) * | 2000-04-30 | 2000-12-27 | 厦门大学 | 用于均相荧光pcr检测的孪生引物 |
| CN1401783A (zh) * | 2002-09-26 | 2003-03-12 | 四川大学 | 复合扩增str的引物设计方法 |
| CN1548545A (zh) * | 2003-05-14 | 2004-11-24 | 宇 王 | 一种用于多靶序列pcr检测的公共引物及其对多靶核酸序列进行pcr扩增的方法 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| Evaluation of RT-PCR to Detect Translocations in Children Diagnosed with Acute Lymphoblastic Leukemia;H Galehdari，et al;《Iranian J Publ Health》;20091231;第38卷(第4期);117-121页 * |
| 应用多重套式RT-PCR检测儿童急性淋巴细胞白血病的融合基因;何军等;《临床检验杂志》;20050430;第23卷(第2期);91-94页 * |
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