CN102318745A - 一种从枇杷叶中提取熊果酸制备饲料添加剂的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种从枇杷叶中提取熊果酸制备饲料添加剂的方法，从枇杷叶中提取熊果酸制备饲料添加剂，以枇杷叶为原料，经过干燥，粉碎，过筛，水煮，真空干燥，醇提，减压蒸馏浓缩，集成膜分离，乙醇重结晶得到高纯度熊果酸纯品制备饲料添加剂。优点：一是采用的集成膜分离工艺进行脱色、除杂和浓缩，优化了提取的工艺效率，缩短了生产周期，提高了有效成分的含量和纯度，节约了大量的溶剂消耗，提高了产品质量，并且在整个处理过程中除乙醇外，无其他有毒有害试剂的加入；二是熊果酸不是抗生素，它来源于植物提取物，其具有多种生物学功能，使其成为一种具有广谱生物学活性的天然物质，可以提高机体的免疫功能，在畜牧兽药上具有广泛的应用前景。
Description
技术领域
本发明涉及一种从枇杷叶中提取熊果酸制备饲料添加剂的方法，属动物科学领域和天然产物分离提取技术领域。
背景技术
抗生素在饲料中的应用创造了养殖业和饲料工业的革命。规模养殖在全世界范围内得到了迅速发展，动物的生产数量和饲料转化率得到大幅度提高。但是，正如所有工业文明的成果都有它的负面影响一样，饲料中抗生素的长期、大量的滥用也产生严重的负面效应。现代科学研究表明，动物食品中抗生素残留，可能导致人体DNA结构发生突变，从而造成致残、致畸、致癌等严重后果，对人类健康构成极大危害。随着人们对抗生素残留量所造成的危害越来越深刻的认识，开发无污染、无残留、无副作用的绿色饲料添加剂已成为当前畜牧业发展的战略方向。其中，最简便可行的方法就是在饲粮中添加天然物质或天然物质提取物，不仅资源丰富，而且价格低廉，一经研制成功则有广阔的市场。
熊果酸不是抗生素，它来源于植物提取物，其具有多种生物学功能，使其成为一种具有广谱生物学活性的天然物质，可以提高机体的免疫功能，在畜牧兽药上具有广泛的应用前景。这对真正意义上减少抗生素等药物添加剂在饲料中的使用，推进动物饲料“无抗生素化”或尽量少用抗生素的进程，保证畜产品的安全和我国畜牧业可持续发展具有重大意义。因此，植物提取物熊果酸作为防病促生长的绿色环保饲料添加剂应用于畜牧业将具有广阔的前景。
在熊果酸分离纯化技术中，多采用方法有溶剂提取法，超声辅助提取法，以及超临界萃取工艺，在熊果酸的分离纯化方面，大多通过用石油醚结合活性炭脱色工艺，在经过重结晶能到熊果酸晶体，另外李丽等人通过碱性乙醇除杂、活性炭脱色以及大孔吸附树脂富集结合乙醇重结晶作用得到熊果酸晶体。相廷英等人则是通过用石油醚结合活性炭脱色工艺，在经过重结晶能到熊果酸晶体，另外李丽等人通过碱性乙醇除杂、活性炭脱色以及大孔吸附树脂富集结合乙醇重结晶作用得到熊果酸晶体。本发明采用的集成膜分离工艺进行脱色、除杂和浓缩，优化了提取的工艺效率，缩短了生产周期，提高了有效成分的含量和纯度，节约了大量的溶剂消耗，提高了产品质量，并且在整个处理过程中除乙醇外，无其他有毒有害试剂的加入。
发明内容
设计目的：本发明以枇杷叶为原料，经过干燥，粉碎，过筛，水煮，真空干燥，醇提，减压蒸馏浓缩，集成膜分离，乙醇重结晶得到高纯度熊果酸纯品制备新型饲料添加剂，减少抗生素等药物添加剂在饲料中的使用。
设计方案：为了实现上述设计目的。本发明的目的是从枇杷叶中提取熊果酸制备饲料添加剂。以枇杷叶为原料，经过干燥，粉碎，过筛，水煮，真空干燥，醇提，减压蒸馏浓缩，集成膜分离，乙醇重结晶得到高纯度熊果酸纯品制备饲料添加剂。本发明的技术方案如图1：（1）枇杷叶的干燥处理：将枇杷叶洗净，去除灰尘等杂质，沥干水分，于40-60℃真空干燥，干燥至恒重；（2）粉碎与过筛：将真空干燥过后的枇杷叶用中药粉碎机粉碎，并过20-60目筛；（3）水煮：枇杷叶粉末中加入5-10倍体积水，煮沸0.5-3h后过滤；（4）醇提：将粉碎后过筛的枇杷叶粉用90%乙醇水提取，温度为70℃，提取时间为1.5h，重复提取3次；（5）减压蒸馏：将醇提溶液于20-80℃减压蒸馏，制的浸膏，干燥至恒重后研碎并过筛（40目）制得熊果酸粗品，其组分图如图1（a）所示；（6）集成膜处理：往枇杷叶粉末中加入10-20倍体积水，进行超滤和纳滤进行脱色、除杂、脱盐和浓缩，超滤所用的膜是分子质量截留为１000－５0000道尔顿，纳滤所用的膜是分子质量截留为150－1000； （6）重结晶：将（5）所得粉末进行重结晶处理，结晶溶剂为浓度为60-100%乙醇，结晶温度为2-20℃，该过程重复3-10次；（7）干燥：对上述结晶晶体真空干燥后即得到熊果酸纯品，其组分图如图2（b）所示；（8）熊果酸（质量分数5%-60%）与白炭黑混合制备针对不同的家禽、家畜、水产养殖制备成含熊果酸的新型饲料添加剂。
技术方案：一种从枇杷叶中提取熊果酸制备饲料添加剂的方法，
（1）枇杷叶的干燥处理：将枇杷叶洗净，去除灰尘等杂质，沥干水分，于40-60℃真空干燥，干燥至恒重；
（2）粉碎与过筛：将真空干燥过后的枇杷叶用中药粉碎机粉碎，并过20-60目筛；
（3）水煮：枇杷叶粉末中加入5-10倍体积水，煮沸0.5-3h后过滤；
（4）醇提：将粉碎后过筛的枇杷叶粉用90%乙醇水提取，温度为65-75℃，提取时间为1-2h，重复提取2-4次；
（5）减压蒸馏：将醇提溶液于20-80℃减压蒸馏，制的浸膏，干燥至恒重后研碎并过筛（40目）制得熊果酸粗品，其组分图如图1（a）所示；
（6）集成膜处理：往枇杷叶粉末中加入10-20倍体积水，进行超滤和纳滤进行脱色、除杂、脱盐和浓缩，超滤所用的膜是分子质量截留为１000－５0000道尔顿，操作压力设为5-30bar，温度为20-60℃, 膜通量为10-30L/hm2, 纳滤所用的膜是分子质量截留为150－1000；
变体积和恒定体积操作模式，操作压力设为8-25bar，温度为25-50℃, 膜通量为8-25L/hm2；
（7）重结晶：将（5）所得粉末进行重结晶处理，结晶溶剂为浓度为60-100%乙醇，结晶温度为2-20℃，该过程重复3-10次；
（8）干燥：对上述结晶晶体真空干燥后即得到熊果酸纯品，其组分图如图2（b）所示；
（9）熊果酸（质量分数5%-60%）与白炭黑混合制备针对不同的家禽、家畜、水产养殖制备成含熊果酸的新型饲料添加剂。
本发明与背景技术相比，一是采用的集成膜分离工艺进行脱色、除杂和浓缩，优化了提取的工艺效率，缩短了生产周期，提高了有效成分的含量和纯度，节约了大量的溶剂消耗，提高了产品质量，并且在整个处理过程中除乙醇外，无其他有毒有害试剂的加入；二是熊果酸不是抗生素，它来源于植物提取物，其具有多种生物学功能，使其成为一种具有广谱生物学活性的天然物质，可以提高机体的免疫功能，在畜牧兽药上具有广泛的应用前景。
附图说明
图1集成膜分离提取结合重结晶技术制得熊果酸的工艺流程图。
图2是枇杷叶中熊果酸提取物的粗品及最终产品的液相色谱图一。
图3是枇杷叶中熊果酸提取物的粗品及最终产品的液相色谱图一。
图2和3中，液相条件：C18柱，甲醇：水=9:1，检测波长210nm，柱温30℃，图中峰1为熊果酸。
具体实施方式
实施例1：一种从枇杷叶中提取熊果酸制备饲料添加剂的方法，（1）枇杷叶的干燥处理：将枇杷叶洗净，去除灰尘等杂质，沥干水分，于40-60℃真空干燥，干燥至恒重；（2）粉碎与过筛：将真空干燥过后的枇杷叶用中药粉碎机粉碎，并过20-60目筛；（3）水煮：枇杷叶粉末中加入5-10倍体积水，煮沸0.5-3h后过滤；（4）醇提：将粉碎后过筛的枇杷叶粉用90%乙醇水提取，温度为65-75℃，提取时间为1-2h，重复提取2-4次；（5）减压蒸馏：将醇提溶液于20-80℃减压蒸馏，制的浸膏，干燥至恒重后研碎并过筛（40目）制得熊果酸粗品，其组分图如图1（a）所示；（6）集成膜处理：往枇杷叶粉末中加入10-20倍体积水，进行超滤和纳滤进行脱色、除杂、脱盐和浓缩，超滤所用的膜是分子质量截留为１000－５0000道尔顿，操作压力设为5-30bar，温度为20-60℃, 膜通量为10-30L/hm2, 纳滤所用的膜是分子质量截留为150－1000；变体积和恒定体积操作模式，操作压力设为8-25bar，温度为25-50℃, 膜通量为8-25L/hm2；（7）重结晶：将（5）所得粉末进行重结晶处理，结晶溶剂为浓度为60-100%乙醇，结晶温度为2-20℃，该过程重复3-10次；（8）干燥：对上述结晶晶体真空干燥后即得到熊果酸纯品，其组分图如图2（b）所示；（9）熊果酸（质量分数5%-60%）与白炭黑混合制备针对不同的家禽、家畜、水产养殖制备成含熊果酸的新型饲料添加剂。
实施例2：在实施例1的基础上，（1）枇杷叶的干燥处理：将枇杷叶洗净，去除灰尘等杂质，沥干水分，于40℃真空干燥，干燥至恒重；（2）粉碎与过筛：将真空干燥过后的枇杷叶用中药粉碎机粉碎，并过20目筛；（3）水煮：枇杷叶粉末中加入5倍体积水，煮沸0.5h后过滤；（4）醇提：将粉碎后过筛的枇杷叶粉用90%乙醇水提取，温度为65℃，提取时间为1h，重复提取2次；（5）减压蒸馏：将醇提溶液于20℃减压蒸馏，制的浸膏，干燥至恒重后研碎并过筛（40目）制得熊果酸粗品，其组分图如图1（a）所示；（6）集成膜处理：往枇杷叶粉末中加入10倍体积水，进行超滤和纳滤进行脱色、除杂、脱盐和浓缩，超滤所用的膜是分子质量截留为１000道尔顿，操作压力设为5bar，温度为20℃, 膜通量为10L/hm2, 纳滤所用的膜是分子质量截留为150；变体积和恒定体积操作模式，操作压力设为8bar，温度为25℃, 膜通量为8L/hm2；（7）重结晶：将（5）所得粉末进行重结晶处理，结晶溶剂为浓度为60%乙醇，结晶温度为2℃，该过程重复3次；（8）干燥：对上述结晶晶体真空干燥后即得到熊果酸纯品，其组分图如图2（b）所示。（9）熊果酸（质量分数5%%）与白炭黑混合制备针对不同的家禽、家畜、水产养殖制备成含熊果酸的新型饲料添加剂。
实施例3：在实施例1的基础上，（1）枇杷叶的干燥处理：将枇杷叶洗净，去除灰尘等杂质，沥干水分，于60℃真空干燥，干燥至恒重；（2）粉碎与过筛：将真空干燥过后的枇杷叶用中药粉碎机粉碎，并过60目筛；（3）水煮：枇杷叶粉末中加入10倍体积水，煮沸3h后过滤；（4）醇提：将粉碎后过筛的枇杷叶粉用90%乙醇水提取，温度为75℃，提取时间为2h，重复提取4次；（5）减压蒸馏：将醇提溶液于80℃减压蒸馏，制的浸膏，干燥至恒重后研碎并过筛（40目）制得熊果酸粗品，其组分图如图1（a）所示；（6）集成膜处理：往枇杷叶粉末中加入20倍体积水，进行超滤和纳滤进行脱色、除杂、脱盐和浓缩，超滤所用的膜是分子质量截留为５0000道尔顿，操作压力设为30bar，温度为60℃, 膜通量为30L/hm2, 纳滤所用的膜是分子质量截留为1000；变体积和恒定体积操作模式，操作压力设为25bar，温度为50℃, 膜通量为25L/hm2；（7）重结晶：将（5）所得粉末进行重结晶处理，结晶溶剂为浓度为100%乙醇，结晶温度为20℃，该过程重复10次；（8）干燥：对上述结晶晶体真空干燥后即得到熊果酸纯品，其组分图如图2（b）所示；（9）熊果酸（质量分数60%）与白炭黑混合制备针对不同的家禽、家畜、水产养殖制备成含熊果酸的新型饲料添加剂。
实施例4：在实施例1的基础上，（1）枇杷叶的干燥处理：将枇杷叶洗净，去除灰尘等杂质，沥干水分，于50℃真空干燥，干燥至恒重；（2）粉碎与过筛：将真空干燥过后的枇杷叶用中药粉碎机粉碎，并过30目筛；（3）水煮：枇杷叶粉末中加入7或8倍体积水，煮沸2h后过滤；（4）醇提：将粉碎后过筛的枇杷叶粉用90%乙醇水提取，温度为70℃，提取时间为1.5h，重复提取3次；（5）减压蒸馏：将醇提溶液于50℃减压蒸馏，制的浸膏，干燥至恒重后研碎并过筛（40目）制得熊果酸粗品，其组分图如图1（a）所示；（6）集成膜处理：往枇杷叶粉末中加入15倍体积水，进行超滤和纳滤进行脱色、除杂、脱盐和浓缩，超滤所用的膜是分子质量截留为30000道尔顿，操作压力设为18bar，温度为40℃, 膜通量为20L/hm2, 纳滤所用的膜是分子质量截留为450；变体积和恒定体积操作模式，操作压力设为17bar，温度为37℃, 膜通量为16L/hm2；（7）重结晶：将（5）所得粉末进行重结晶处理，结晶溶剂为浓度为80%乙醇，结晶温度为12℃，该过程重复7次；（8）干燥：对上述结晶晶体真空干燥后即得到熊果酸纯品，其组分图如图2（b）所示；（9）熊果酸（质量分数33%）与白炭黑混合制备针对不同的家禽、家畜、水产养殖制备成含熊果酸的新型饲料添加剂。
实施例5：在实施例1-4的基础上，所述醇提，将粉碎后过筛的枇杷叶粉用90%乙醇水提取，温度为70℃，提取时间为1.5h，重复提取3次。
实施例6：在实施例1-5的基础上，新鲜枇杷叶经清洗烘干至恒重，粉碎后得到粉末1kg，加入水1L，混合均匀，调成浆状，100水煮20min，过滤充分收集物料，烘干至恒重后经粉碎得到枇杷叶粉末750g。往得到的粉末中加入乙醇水（乙醇：水=9:1）7.5L，混合后水浴70℃搅拌提取，提取时间为1.5h，提取次数为3次。收集3次提取液，离心分离后取上清液，于45℃减压蒸馏，经真空干燥后粉碎的得到粉末（40目）95g，加入15倍水经超滤（截留分子量3000D），操作压力设为15bar，温度为40℃, 膜通量为15L/hm2, 超滤液经纳滤（截留分子量150D），采用变体积操作模式，操作压力设为17bar，温度为40℃, 膜通量为18L/hm2，收集滤液采用乙醇结晶，用煮沸95%乙醇溶液溶解至过饱和，趁热过滤，取滤液至于4℃环境结晶，时间为48h，得到的晶体按上述过程重复结晶5次，得到熊果酸晶体（纯度>95%）7.3g。
需要理解到的是：上述实施例虽然对本发明的设计思路作了比较详细的文字描述，但是这些文字描述，只是对本发明设计思路的简单文字描述，而不是对本发明设计思路的限制，任何不超出本发明设计思路的组合、增加或修改，均落入本发明的保护范围内。
Claims (2)
1.一种从枇杷叶中提取熊果酸制备饲料添加剂的方法，其特征是：
（1）枇杷叶的干燥处理：将枇杷叶洗净，去除灰尘等杂质，沥干水分，于40-60℃真空干燥，干燥至恒重；
（2）粉碎与过筛：将真空干燥过后的枇杷叶用中药粉碎机粉碎，并过20-60目筛；
（3）水煮：枇杷叶粉末中加入5-10倍体积水，煮沸0.5-3h后过滤；
（4）醇提：将粉碎后过筛的枇杷叶粉用90%乙醇水提取，温度为65-75℃，提取时间为1-2h，重复提取2-4次；
（5）减压蒸馏：将醇提溶液于20-80℃减压蒸馏，制的浸膏，干燥至恒重后研碎并过筛（40目）制得熊果酸粗品，其组分图如图1（a）所示；
（6）集成膜处理：往枇杷叶粉末中加入10-20倍体积水，进行超滤和纳滤进行脱色、除杂、脱盐和浓缩，超滤所用的膜是分子质量截留为１000－５0000道尔顿，操作压力设为5-30bar，温度为20-60℃, 膜通量为10-30L/hm2, 纳滤所用的膜是分子质量截留为150－1000；
变体积和恒定体积操作模式，操作压力设为8-25bar，温度为25-50℃, 膜通量为8-25L/hm2；
（7）重结晶：将（5）所得粉末进行重结晶处理，结晶溶剂为浓度为60-100%乙醇，结晶温度为2-20℃，该过程重复3-10次；
（8）干燥：对上述结晶晶体真空干燥后即得到熊果酸纯品，其组分图如图2（b）所示；
（9）熊果酸（质量分数5%-60%）与白炭黑混合制备针对不同的家禽、家畜、水产养殖制备成含熊果酸的新型饲料添加剂。
2.根据权利要求1所述的从枇杷叶中提取熊果酸制备饲料添加剂的方法，其特征是：所述醇提，将粉碎后过筛的枇杷叶粉用90%乙醇水提取，温度为70℃，提取时间为1.5h，重复提取3次。
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| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| ASS | Succession or assignment of patent right |
Owner name: HANGZHOU YINGUAN MARINE BIOLOGICAL TECHNOLOGY RESE Free format text: FORMER OWNER: HANGZHOU YINFENG BIO-TECHNOLOGY CO., LTD. Effective date: 20140514 |
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| C41 | Transfer of patent application or patent right or utility model | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20140514 Address after: 311100, No. 64 North Star Bridge Road, Star Bridge Street, Yuhang District, Zhejiang, Hangzhou Patentee after: Hangzhou silver crown Marine Biotechnology Research Institute Co Ltd Address before: 311100, No. 64 North Star Bridge Road, Star Bridge Street, Yuhang District, Zhejiang, Hangzhou Patentee before: Hangzhou Y-feed Biological Technology Co., Ltd. |
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| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20130619 Termination date: 20151010 |
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| EXPY | Termination of patent right or utility model |