CN102051399A

CN102051399A - 一种金枪鱼中降血压肽的提取方法

Info

Publication number: CN102051399A
Application number: CN2009101545160A
Authority: CN
Inventors: 郑斌; 王坚强; 钟明杰; 郝云彬
Original assignee: H&P FOODS Ltd; ZHOUSHAN FISHING INSPECTION DETECTION CENTER; Zhejiang Marine Development Research Institute
Current assignee: H&P FOODS Ltd; ZHOUSHAN FISHING INSPECTION DETECTION CENTER; Zhejiang Marine Development Research Institute
Priority date: 2009-11-10
Filing date: 2009-11-10
Publication date: 2011-05-11

Abstract

本发明涉及一种金枪鱼降血压肽的制备方法，将金枪鱼组织匀浆，在pH值2～5的条件下加入1000～13000U/g鱼浆的胃蛋白酶或者木瓜蛋白酶，升温至35-50℃水浴酶解1-4小时，再将酶解液沸水加热5～15min灭酶，冷却离心后，用大孔树脂或者葡聚糖凝胶树脂净化等步骤制得降血压多肽的提取物。本发明的优点在于制备方法科学合理，以纯天然的金枪鱼的下脚料为原料来提取降血压肽，不仅降压效果好而且原料易得、成本低廉，用水解方法制得的降血压肽可用于保健品或药剂的开发，本提取方法简单、经济、易于操作，可以在普通的生化实验室中进行。

Description

一种金枪鱼中降血压肽的提取方法

技术领域

本发明涉及降血压肽的提取方法，尤其是一种金枪鱼中降血压肽的提取方法。

背景技术

金枪鱼类是远洋渔业的重要经济鱼类，作为一种深海鱼，金枪鱼肉质鲜美，营养全面，蛋白质含量高且配合优越。我国金枪鱼总鱼类年捕获量在8万吨以上，产值达16亿元，目前金枪鱼除少部分冰鲜销售外，一般都经冷冻制成冷冻金枪鱼肉用来制成鱼生、寿司、调味品或罐装食品，金枪鱼加工过程中会出现大量的下脚料包括红肉、鱼头、内脏、鳃和鱼皮等，约占总质量的50％-70％，往往被废弃或作为饲料。而金枪鱼下脚料中含有丰富的蛋白质及多种生物活性物质，利用金枪鱼下脚料中丰富的蛋白质资源为实验材料，以水解制各生物降血压活性多肽为研究目标，用于保健品的开发。

另查专利申请号为CN200710071054.7的中国专利公开了一种酶解带鱼脊骨制备降血压肽的方法，包括如下步骤：将带鱼脊骨粉碎后加水搅匀，调节pH值为2.0-4.0，将温度升至40-50℃，保持10-20分钟后加入酸性蛋白酶，继续保温并不断搅拌进行酶解反应4-8小时，然后将酶解液迅速升温至90-100℃，保持10-15分钟后，迅速冷却至室温终止反应，离心后取上清液过滤、真空浓缩、冷冻干燥，得到粉状降血压肽。其缺陷在于带鱼和金枪鱼肉质结构有较大差异，从而导致此方法不合适于金枪鱼肉中降血压肽的制备。

还有专利申请号为CN200710071251.9的中国专利复合酶解带鱼脊骨制备降血压肽的方法和CN200710156367.2的中国专利一种发酵法利用带鱼脊骨制备降血压肽的方法，其缺陷在于方法复杂，效率低下。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种简便、易行的金枪鱼中降血压肽的提取方法。

本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：一种金枪鱼中降血压肽的提取方法，其特征在于包括以下步骤：

1)原料准备：将金枪鱼鱼肉或下脚料切小块，用组织匀浆捣碎机均匀搅碎成鱼浆，备用；

2)在容器中称取一定量鱼浆，加入胃蛋白酶或者木瓜蛋白酶，蛋白酶使用量为1000～13000U/g鱼浆，加入适量去离子水，料液比为1∶2～1∶10，控制反应pH值在2～5之间；

3)将容器移到预先升温至35～50℃的水浴锅中进行酶解，时间为1～4小时；

4)将容器移到沸水中，加热5～15min，灭酶；

5)冷却后，进行离心处理，取上清液进行大孔树脂或者葡聚糖凝胶柱层析；

6)取分子量小于2000道尔顿的多肽提取物；进行低温真空干燥，即得。

所述的胃蛋白酶或木瓜蛋白酶是单独或者以任何比例混合。

所述的离心为高速离心，速度为8000-11000r/min。

所述的多肽提取物，分子量优选小于2000道尔顿。

所述的下脚料包括红肉、鱼头、内脏、鳃或者鱼皮。

降血压肽是指一类具有血管紧张素转化酶(ACE)抑制活性的多肽物质，这些多肽的氨基酸序列和肽链长度各有不同，但都具有类似的降压功能。本发明制得的多肽为血压调节生物制品，能够在动物实验中降低高血压模型大鼠的的血压至正常状态。

本发明的优点在于：制备方法科学合理，以纯天然的金枪鱼的下脚料为原料来提取降血压肽，不仅降压效果好而且原料成本低廉易得，用水解方法制得的降血压肽可用于保健品或药剂的开发，本提取方法简单、经济、易于操作，可以在普通的生化实验室中进行。

具体实施方式

以下结合实施例对本发明作进一步详细描述。

实施例1

1)将金枪鱼下脚料用组织匀浆捣碎机均匀搅碎，冷冻储藏备用；

2)称取50克搅匀的原料放入锥形瓶中，按5000U/g鱼浆的量加入胃蛋白酶，加入适量去离子水使料液比为1∶5，调节溶液的pH值为4；

3)将锥形瓶移到预先升温至40℃的水浴锅中进行酶解，时间为2小时；

4)将锥形瓶移到沸水中，加热10min，灭酶；

5)冷却后进行高速离心，速度为10000r/min，取上清液进行大孔树脂或者葡聚糖凝胶柱层析；

6)取分子量小于2000道尔顿的多肽提取物；进行除菌过滤，即得。

实施例2

2)称取50克搅匀的原料放入锥形瓶中，按12000U/g鱼浆的量加入胃蛋白酶和木瓜蛋白酶(两者比例为1∶2)，加入适量去离子水使料液比为1∶8，调节溶液的pH值为5；

3)将锥形瓶移到预先升温至50℃的水浴锅中进行酶解，时间2小时；

4)将锥形瓶移到沸水中，加热15min，灭酶；

实施例3

2)称取50克搅匀的原料放入锥形瓶中，按2000U/g鱼浆的量加入胃蛋白酶，加入适量去离子水使料液比为1∶3，调节溶液的pH值为3；

3)将锥形瓶移到预先升温至35℃的水浴锅中进行酶解，时间4小时；

4)将锥形瓶移到沸水中，加热5min，灭酶；

Claims

1.一种金枪鱼中降血压肽的提取方法，其特征在于包括以下步骤：

1)原料准备：将金枪鱼鱼肉或下脚料切小块，用组织匀浆捣碎机均匀搅碎，备用；

2)称取一定量鱼浆倒入容器中，加入胃蛋白酶或者木瓜蛋白酶，蛋白酶使用量为1000～13000U/g鱼浆，加入适量去离子水，使料液质量比为1∶2～1∶10，控制反应pH值在2～5之间；

3)将容器移到预先升温至35-50℃的水浴锅中进行酶解，时间为1～4小时；

4)将容器移到沸水中，加热5～15min，灭酶；

6)取分子量小于25000～35000道尔顿的多肽提取物，进行除菌过滤，即得。

2.根据权利要求1所述的一种金枪鱼中降血压肽的提取方法，其特征在于所述的胃蛋白酶或木瓜蛋白酶是单独或者以任何比例混合。

3.根据权利要求1所述的一种金枪鱼中降血压肽的提取方法，其特征在于所述的离心为高速离心，速度为8000-11000r/min。

4.根据权利要求1所述的一种金枪鱼中降血压肽的提取方法，其特征在于所述的蛋白酶使用量5000～10000U/g。

5.根据权利要求1所述的一种金枪鱼中降血压肽的提取方法，其特征在于所述的料液比1∶3～1∶8。

6.根据权利要求1所述的一种金枪鱼中降血压肽的提取方法，其特征在于所述的多肽提取物分子量优选小于2000道尔顿。

7.根据权利要求1所述的一种金枪鱼中降血压肽的提取方法，其特征在于所述的下脚料包括红肉、鱼头、内脏、鳃或者鱼皮。